Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-06-27T04:21:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 346384.pdf: 3864845 bytes, checksum: a3c27ca50f37b9383133a7affea47a92 (MD5) Previous issue date: 2017 / As lesões centrais e periféricas de células gigantes são processos proliferativos não-neoplásicos caracterizados pela presença de numerosas células gigantes multinucleadas, que apresentam características histológicas similares, mas com comportamento clínico distinto. O ligante do receptor ativador kappa-B (RANKL) e a osteoprotegerina (OPG) são importantes proteínas correlacionadas a osteoclastogênese e sua expressão pode estar envolvida na patogênese dessas lesões. O objetivo deste trabalho foi avaliar a expressão de RANKL e OPG em lesões periféricas de células gigantes (LPCG) e lesões centrais de células gigantes (LCCG), e quantificar o número de células gigantes multinucleadas (CGM) bem como seus núcleos em cada grupo de lesões. Vinte casos de cada lesão foram selecionados do Laboratório de Patologia Bucal da Universidade Federal de Santa Catarina. A imunoexpressão de RANKL e OPG assim como a contagem de CGM e núcleos foi avaliada com o software Image J 1.45s. Não houve diferença estatística na quantificação de CGM por mm², no entanto, o número de núcleos por CGM foi maior em LCCG (P= 0,010). A expressão de RANKL foi notadamente maior nas LCCG que nas LPCG (P= 0,042). Entretanto, não houve diferença estatística entre as duas lesões na expressão de OPG. Nossos achados demonstraram maior expressão de RANKL e número de núcleos nas LCCG o que pode explicar a diferença de comportamento clínico entre as duas lesões e também a patogênese.<br> / Abstract : The central and peripheral giant cell granulomas are non-neoplastic proliferative processes characterized by the presence of numerous multinucleated giant cells having similar histologic features but distinct clinical behavior. The receptor activator of nuclear factor Kappa-B ligand (RANKL), and osteoprotegerin (OPG) are the important proteins correlated to osteoclastogenesis, whose expression may be involved with the pathogenesis of these lesions. The aim of this study was evaluate immunohistochemically the expression of RANKL and OPG in peripheral giant cell granulomas (PGCG) and central giant cell granulomas (CGCG) and quantify the number of multinucleated giant cell (MGC) and their nuclei. Twenty cases of each lesion were selected from the Oral Pathology Laboratory of the Federal University of Santa Catarina. The immunoexpression of RANKL and OPG as well as quantification of MGC and nuclei was performed with the software Image J 1.45s. No statistic difference were found in the quantification of the MGC for mm², however the number of nuclei of the MGC was higher in CGCG (P = 0.010). RANKL expression in CGCG was higher than PGCG (P = 0.042). In contrast, there was no statistic difference between two lesions for OPG expression. Our findings showed a higher expression of RANKL and number of nuclei in CGCG which may explain the difference in the clinical behavior between these lesions and their pathogenesis.

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As Células Gigantes Multinucleadas (CGMs) são consideradas uma característica marcante da inflamação granulomatosa, pois podem desempenhar um papel essencial na resposta do hospedeiro contra patógenos, particularmente o Paracoccidioides brasiliensis (Pb). Este estudo caracteriza as CGMs encontradas na Paracoccidioidomicose (PCM) oral crônica e avalia sua correlação com a quantidade de fungos presentes nos tecidos orais. Foram incluídos neste estudo 26 casos de pacientes portadores de PCM com lesões em mucosa oral. As lesões foram classificadas em granulomas densos e frouxos e avaliou-se o número total de células gigantes, incluindo as do tipo Langhans e corpo-estranho, além do número total de fungos e de fungos intracelulares. Realizou-se a reação imunoistoquímica com o anticorpo antiCD163; as CGMs CD163 positivas foram também quantificadas. Os resultados revelaram que, nos granulomas densos, houve um número maior de células gigantes totais e do tipo corpo-estranho comparado aos granulomas frouxos (p<0,05). O número total de células gigantes demonstrou uma correlação linear positiva com o número de CGMs CD163 positivas (p=0,003; r=0,56) e com a quantidade de fungos localizados no interior das CGMs (p=0,045; r=0,40). Com base nestes resultados, concluiu-se que as lesões orais da PCM crônica contêm principalmente CGMs com fenótipo CD163 positivo, incluindo ambas as células tipo Langhans e corpo-estranho; esse perfil CD163+/M2 pode contribuir para manutenção da forma crônica da doença e persistência das lesões orais. Além disso, quanto maior o número de CGMs, maior a quantidade de fungos no interior das células gigantes, evidenciando que este tipo de CGMs são, de fato, capazes de realizar a fagocitose. / Multinucleated giant cells (MGC) are considered to be a hallmark of granulomatous inflammation; thus they may play an essential role in the host response against pathogens, particularly Paracoccidioides brasiliensis. This study characterizes the MGC found in oral chronic paracoccidioidomycosis and assesses their correlation with the amount of fungi within oral tissues. Twenty-six cases were included. They were classified as loose or dense granulomas and the total MGC, including foreign-body and Langhans giant cells, besides the total and intracellular fungi were taken into consideration. CD163 immunoexpression was performed and CD163+ multinucleated giant cells were also quantified. Our results showed that dense granulomas revealed more foreign-body type and total giant cells than loose granulomas (P < 0.05). Total giant cells showed a positive linear correlation with the CD163+cells (P = 0.003; r = 0.56) and intracellular fungi quantification (P = 0.045; r = 0.40). Oral chronic paracoccidioidomycosis lesions contain MGC that mainly belong to a CD163+ phenotype, also showing both Langhans and foreign-body arrangements; such CD163+/M2 profile may sustain the chronic form and persistence of PCM oral lesions; additionally, the higher the presence of MGC, the higher the amount of phagocyted fungi, evidencing that such kind of giant cells are indeed able to perform phagocytosis.

TCC (graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências da Saúde. Odontologia. / Submitted by Mariana Réos Lopes null (mariana.lopes@grad.ufsc.br) on 2015-11-19T17:26:48Z No. of bitstreams: 1 TCC FINAL MARIANA.pdf: 1564387 bytes, checksum: e6020f0f2009a4f3224298d4557a23a2 (MD5) / Approved for entry into archive by Mariane Cardoso null (mariane.cardoso@ufsc.br) on 2015-12-01T13:30:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TCC FINAL MARIANA.pdf: 1564387 bytes, checksum: e6020f0f2009a4f3224298d4557a23a2 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-01T13:30:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TCC FINAL MARIANA.pdf: 1564387 bytes, checksum: e6020f0f2009a4f3224298d4557a23a2 (MD5) / Como as lesões periféricas (LPCG) e principalmente as lesões centrais de células gigantes (LCCG) podem mimetizar clínica e radiograficamente lesões malignas, a proposta deste estudo foi fazer um levantamento clínico-patológico dos casos de LCCG e LPCG diagnosticados pelo Laboratório de Patologia Bucal da Universidade Federal de Santa Catarina (LPB-UFSC) desde sua fundação até julho de 2015, através de um estudo observacional longitudinal descritivo. Foram avaliados os dados de 23 pacientes portadores de LPCG e 23 pacientes com LCCG. Os dados clínicos (idade, gênero, localização anatômica e tratamento) foram obtidos dos prontuários médicos e fichas de biópsias e os dados microscópicos das lesões (características do epitélio de superfície, tecido conjuntivo de suporte, proliferação vascular, tipo de infiltrado inflamatório) foram obtidos pelos laudos anátomo-patológicos e avaliação de lâminas histológicas coradas em hematoxilina e eosina. A análise da quantificação de células gigantes multinucleadas (CGM) e núcleos das CGM nos grupos estudados foi realizada com o auxílio do software Image J 1.45s. A média de idade foi de 34,04 ± 23,40 anos para LPCG e 28.3 ± 21.2 anos para os casos de LCCG. A relação homem:mulher dos pacientes afetados pela LPCG foi 14:9 e dos pacientes com LCCG 7:16. O sítio anatômico mais acometido tanto pela LPCG quanto pela LCCG foi a mandíbula. Houve um predomínio de tecido conjuntivo denso em LPCG com 82.6% dos casos e de tecido conjuntivo frouxo em LCCG com 65,2% dos casos. Observou-se uma maior incidência de infiltrado inflamatório crônico intenso associado à alta proliferação vascular, predomínio de áreas hemorrágicas e depósitos de hemossiderina tanto nas LPCG como nas LCCG. A presença de material mineralizado do tipo osteóide foi visualizada na maioria dos casos de LCCG, 65.2%, em contraste com os pacientes portadores de LPCG (39,1% dos casos). A quantidade de CGM por mm2 de tecido conjuntivo não apresentou uma diferença estatisticamente significativa entre os casos de LPCG e LCCG (p > 0,05), porém o número de núcleos das CGM foi evidentemente maior nos casos de LCCG (p = 0,013).

La etiología de la arteritis de células gigantes (ACG) es desconocida y sus aspectos etiopatogénicos están poco estudiados.Objetivos. 1. Estudiar la presencia de parvovirus B19 y los virus herpes en las arterias temporales positivas y negativas para la ACG. 2. Estudiar la asociación entre la expresión de metaloproteinasa-2 (MMP-2) y 9 (MMP-9) y el resultado de la biopsia de la arteria temporal (BAT), qué células las expresan y su localización. 3. Analizar si la presencia de estas MMP o los virus se relaciona con las alteraciones histológicas y con las variables clínico-epidemiológicas de los pacientes. 4. Conocer cuáles son los factores predictores del resultado de la BAT. Material y métodos. Se incluyeron todas las BAT valorables realizadas de forma consecutiva en el Hospital Universitari Vall d'Hebron por sospecha clínica de ACG entre Enero de 1997 y Marzo del 2002. Como criterios anatomopatológicos se utilizaron los del ACR. La presencia de ADN vírico se determinó mediante reacción en cadena de la polimerasa. Se realizaron nuevas tinciones de hematoxilina-eosina, de fibras elásticas y tricrómicro de Masson. Los macrófagos CD68, la MMP-2 y la MMP-9 se detectaron mediante inmunohistoquímica. De las historias clínicas se obtuvieron datos clínicos y epidemiológicos. Para el ajuste multivariable se utilizó la regresión logística múltiple.Resultados. En el período en estudio se encontraron 147 BAT válidas, 50 (35%) positivas para ACG y 97 (66%) negativas. Se recuperó la historia clínica de 125 pacientes, 46 (36,8%) con BAT (+) y 79 (63,2%) BAT (-). No se encontró presencia de ADN de los virus estudiados en ninguna de las BAT. La MMP-9 se expresaba con más frecuencia en BAT positivas que negativas para ACG (OR=2,93 p=0,005). Para la MMP-2 la diferencia no fue estadísticamente significativa (p=0,08). Ambas MMP se expresaban en macrófagos de la íntima y de la media cercanos a la lámina elástica interna, en células gigantes y en células con apariencia de músculo liso de la media y de la íntima. Le expresión de MMP-2 se relacionó de forma inversa con la afectación exclusiva de la adventicia (p=0,047) y de forma positiva con la fiebre (p=0,025). La MMP-9 se relacionó de forma positiva con: hiperplasia intimal (0,037), degeneración lámina elástica (0,0001), disminución de la luz (0,008), hipercolesterolemia (0,032), hiperestesia craneal (0,009). Ajustando por variables que podrían influir en el resultado de la biopsia, (edad, género, tiempo de evolución de los síntomas hasta la BAT, tratamiento previo con glucocorticoides y año de realización de la biopsia), se mantuvieron los resultados entre la expresión de MMP-2 y MMP-9. El engrosamiento de la arteria temporal, la disminución de su pulso y la pérdida de peso se asociaron de forma independiente con el resultado de la biopsia, ajustando por edad, género, días de evolución, tratamiento previo, año de realización, cefalea, hiperestesia craneal, claudicación mandibular, alteraciones visuales y VSG.Conclusiones. Ninguno de los virus estudiados parece estar implicado en la etiopatogenia de la ACG. La MMP-9, al contrario de la MMP-2, parece tener un papel en dicha etiopatogenia. La MMP-9 se asocia con hipercolesterolemia y la MMP-2 con la fiebre. El engrosamiento, la disminución de la luz de la arteria temporal y la pérdida de peso se han encontrado asociadas a una elevada probabilidad de resultado positivo de la biopsia en los enfermos estudiados. / The etiology of giant cell arteritis (GCA) is unknown and their etiopathogenic aspects have been little studied.Aims. 1. To study the presence of parvovirus B19 and herpes viruses in positive and negative temporal artery biopsies (TAB) for GCA. 2. To study the association between metalloproteinase-2 (MMP-2) and 9 (MMP-9) expression and TAB result, the type of cells expressing them and their location. 3. To analyse if the presence of these MMP or the viruses is related to histologic findings and to clinical-epidemiological variables of the patients. 4. To identify predictive factors of TAB result. Material and methods. All the valid TAB consecutively performed in Hospital Universitari Vall d'Hebron because of clinical suspicion of GCA between January 1997 and March 2002. ACR anatomopathological criteria were used. The presence of viral DNA was determined by means of polymerase chaín reaction. New hematoxilin-eosin, elastic fibers and Masson's trichromic stainings were performed. CD68 macrophages, MMP-2 and MMP-9 were detected by immunohistochemistry. Clinical and epidemiological data were obtained from clinical files. The multiple logistic regression was used for multivariable analysis. Results. During the study period, 147 valid TAB were found, 50 (35%) positive and 97 (66%) negative for GCA. Clinical files of 125 patients were retrieved, 46 (36.8%) with positive TAB and 79 (63.2%) with negative TAB. DNA of the viruses studied was not found in any of the TAB. MMP-9 was more frequently expressed in positive than in negative TAB for GCA (OR=2.93; p=0.005). The difference was not statistically significant for MMP-2 (p=0.08). Both MMP were expressed in macrophages of the intima and the media near internal elastic lamina, in giant cells and in cells of the media and the intima resembling smooth muscle cells. The expression of MMP-2 was inversely related to the isolated involvement of the adventitia (p=0.047) and positively to fever (p=0.025). MMP-9 was positively related to: intimal hyperplasia (0.037), elastic lamina degeneration (0.0001), luminal narrowing (0.008), hypercholesterolemia (0.032), scalp tenderness (0.009). Controlling for variables which could influence the biopsy result (age, gender, evolution of symptoms before TAB, previous glucocorticoids treatment and year of biopsy performance), the results between MMP-2 and MMP-9 expression remained unaltered. Temporal artery thickening, pulse decrease and weight loss were independently associated with biopsy result, controlling for age, gender, days of evolution of symptoms, previous treatment, year of biopsy performance, headache, scalp tenderness, jaw claudication, visual disturbances and erythrocyte sedimentation rate.Conclusions. None of the viruses studied seems to be involved in GCA etiopathogenesis. MMP-9, in contrast to MMP-2, seems to play an etiopathogenic role in GCA. MMP-9 is associated with hypercholesterolemia and MMP-2 with fever. Temporal artery thickening and luminal narrowing and weight loss are associated with a high probability of positive biopsy result in the patients studied.

A lesão central de células gigantes (LCCG) é uma afecção benigna dos maxilares, de comportamento biológico incerto, variando de discreta tumefação assintomática e de crescimento lento à uma forma agressiva, associada a dor, reabsorção radicular e óssea, com destruição cortical. Sua etiologia permanece desconhecida, havendo controvérsias entre processo reacional, neoplásico ou genético. Mutações no gene SH3BP2 foram identificadas em pacientes com querubismo, condição que compartilha várias características clínicas, radiográficas e histopatológicas com a LCCG. Para testar a hipótese de que tais mutações seriam responsáveis por, ou estariam associadas a LCCG e na tentativa de melhor entender a diferenciação microscópica/morfométrica das lesões agressivas e não agressivas, vinte e cinco pacientes portadores de LCCG foram selecionados para o estudo. O DNA foi obtido através do sangue e de espécimes em blocos de parafina, oriundos de biópsias e tratamento cirúrgico. Um estudo microscópico morfométrico foi paralelamente realizado, para avaliar o número de células gigantes e densidade de volume das mesmas nas lesões agressivas e não agressivas. O sequenciamento genético dos treze exons do gene SH3BP2 nos vinte e cinco pacientes estudados evidenciou uma alteração no códon do exon 4 em 10 pacientes. A densidade de volume de células gigantes foi maior nas lesões agressivas quando comparadas às não agressivas (p=0,013). Não houve diferença significante quanto ao número de células gigantes/mm2 em lesões agressivas e não agressivas (p =0,245). / Central giant cell lesion (CGCL) is a benign disease of the jaws, with uncertain behavior, ranging from mild asymptomatic slow-growing swelling to an aggressive form, with pain, radicular and bone resorption and cortical destruction. Its aetiology is still unknown and there is discussion whether it is a reactive, neoplastic or genetic disease. Mutations on gene SH3BP3 were identified in patients with cherubism, which shares several clinical, radiographic and histopathological features with CGCL. In order to test the hypothesis that such mutations would be responsible for or would be related to CGCL and also in order to better understand microscopic morphometric differentiation of the aggressive and non-aggressive lesions, 25 patients with CGCL were selected to this study. DNA was extracted from blood samples and from tissue samples, obtained by biopsy or surgical treatment. Microscopic morphometric assessment was also performed, in order to evaluate the number and the volume density of the giant cells in aggressive and in non-aggressive lesions. Gene sequencing of all 13 exons in gene SH3BP3, performed on each of the 25 patients, showed an alteration in one codon from exon 4, in ten patients. Volume density of giant cells was greater in aggressive lesions than in non-aggressive ones (p=0,013). There was no significant difference on the number of giant cells per mm2 when comparing aggressive and non-aggressive lesions.

A expressão da conexina 32 e 43 nas células gigantes trofoblásticas foi analisada em condições de cultura celular com e sem influência de hormônios sexuais. Placentônios bovinos foram coletados de vacas prenhes em abatedouro nos diferentes períodos gestacionais e divididos em três grupos, primeiro terço (I), segundo terço (II), terceiro terço (III) e transportados ao laboratório em condições assépticas à temperatura de 4ºC em solução de PBS com antibiótico. No laboratório as células foram isoladas e cultivadas em meio D-MEM com 10% SFB por cinco dias. As detecções das conexinas 32 e 43 foram realizadas através de munofluorescencia, pelo método de amplificação da tiramida-fluoresceina, utilizando anticorpo primário policlonal a imunoglobulina de coelho, anti-conexina 32 e 43 de camundongo. Os resultados mostraram que as células gigantes trofoblásticas expressam conexinas 32 e 43 nos três períodos gestacionais com exceção da Cx32 no primeiro terço gestacional sem adição de hormônios, a qual passou a expressar fluorescência após a adição de hormônios. A distribuição da Cx43 evoluiu com a progressão da gestação, permanecendo limitada ao interior das células gigantes trofoblásticas, sem formar junções comunicantes. O terceiro terço gestacional mostra a Cx43 na CGTT localizada no interior do núcleo. A adição de hormônios ao meio de cultura vem confirmar que a progesterona e o estrógeno podem ter um papel no controle da Cx32. Para Cx43 onde se adicionou progesterona os níveis de expressão foram baixos no início aumentando no decorrer da gestação, o mesmo foi encontrado para o conjugado de progesterona/ estrógeno. Para o estrógeno no grupo I os níveis de expressão foram menores se comparados aos três grupos diminuindo no grupo II e voltando a aumentar no grupo III. / The trophoblast cells expression of connexins 32 and 43 was studied in cell culture conditions with or without influence of sexual hormones. Bovine placentomes were collected from pregnant cows in slaughterhouses in different gestational periods and so divided into three groups, first term (I), second term (II), and third term (III), and transported to the laboratory in aseptic conditions at a temperature of 40C in PBS solution with antibiotics. At the laboratory the cells were isolated and cultivated in D-MEM environment with 10% SFB for five days. The detections of connexins 32 and 43 were achieved through immunofluorescence, by the tyramide-fluorescein amplification method, using a rabbit polyclonal primary antibody anti-connexin 32 and 43 of mice. The results showed that the trophoblast cells expressed connexins 32 and 43 in the three gestational periods with an exception of the Cx32 at the first gestational period. However, after the addition of sexual hormones, they began to express the connexins in the cytoplasm in the first stage. The distribution of the Cx43 evolved with the progression of the gestation, remaining limited to the trophoblast`s cells interior, without formation of gap junctions. The third gestational term shows the Cx43 located inside the nuclei of the CGTT. Addition of hormones in the culture environment confirmed that estrogen and progesterone may have an important action controlling Cx32. For Cx43, the expression was low after prosterone was added to the culture medium, but increased as the gestation evolved, the same was found for a combined compost of estrogen\\ progesterone. For estrogen, in group I the expression levels were inferior when compared to the three groups decreasing in group II and increasing again in group III. We may conclude that the sexual hormes, specially estrogen, affect the expression of connexins in trophoblastic cells.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-08-07Bitstream added on 2014-06-13T18:53:15Z : No. of bitstreams: 1 carli_jp_me_araca.pdf: 984712 bytes, checksum: 494c40d3d3485fa6da5828cc7b444a82 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Propósito: É propósito deste trabalho estudar a agressividade da lesão de células gigantes periférica da cavidade bucal (LCGP) através de aspectos clínicos, radiográficos, histopatológicos, histoquímicos e imunohistoquímicos, objetivando melhor conhecer o perfil clínico do paciente e, sobretudo, avaliar o comportamento biológico dessa lesão. Material e Método: Foram estudados retrospectivamente 61 casos de LCGP, procedentes da Faculdade de Odontologia de Araçatuba - UNESP e da Faculdade de Odontologia da Universidade de Passo Fundo - FO-UPF. Primeiramente, realizou-se confirmação diagnóstica histopatológica e avaliação da presença de tecido ósseo imaturo nas lesões. Após, os casos selecionados foram agrupados com base em critérios clínico-radiográficos, em difererentes graus (agressividade nula, leve, moderada, severa e extrema) e seus dados clínico-demográficos e imaginológicos foram avaliados e correlacionados. Em seguida, utilizando-se 15 casos do total estudado (05 casos com agressividade clínico-radiográfica nula, 05 com agressividade moderada e 05 com agressividade severa), investigou-se a proliferação celular das LCGPs por meio da contagem e aferição da área de AgNORs (regiões de organização nucleolar marcadas pela prata) e avaliação da expressão de PCNA (antígeno de proliferação nuclear celular), Ki-67 (Kiel-67) e p53 (proteína p53). Resultados: Dentre os resultados clínico-radiográficos obtidos destacam-se os que dizem respeito à idade dos pacientes (prevalência entre 31 e 40 anos), sexo (prevalência em mulheres), raça (prevalência em brancos) e localização anatômica (prevalência na região mandibular anterior). A maioria das lesões se mostrou como nódulo indolor, de superfície lisa, dois meses de evolução, consistência fibrosa, formato arredondado ou ovóide, coloração púrpura e base séssil... / Purpose: To study the aggressiveness of peripheral giant cell lesion of buccal cavity (PGCL) by means of clinical, radiographic, histopathological, histochemical and immunohistochemical aspects in order to determine the patient's profile and to evaluate the biologic behavior of this lesion. Material and Method: 61 cases of PGCL of patients from Faculdade de Odontologia de Araçatuba - UNESP and Faculdade de Odontologia da Universidade de Passo Fundo - FOUPF were studied retrospectively. A corroborative diagnostic and the evaluation of immature bony tissue in the lesions were accomplished. These cases were divided into different groups according a classification based on grades of clinical-radiographic aggressiveness. The data of each group were evaluated and correlated and 15 cases were selected (5 cases with null clinical-radiographic aggressiveness, 5 with moderate aggressiveness and 5 with severe aggressiveness). An investigation of the cellular proliferation of PGCL was accomplished by count and measurement of the area of AgNORs (nucleolar organization regions marked by silver) and evaluation of PCNA (proliferating cell nuclear antigen), Ki-67 (Kiel-67) and p53 (protein p53). Results: The following conclusions were drawn by the clinical-radiographic results: in respect to the patient's age (prevalence between 31 and 40 years old), sex (prevalence in women), race (prevalence in white people), anatomical location (prevalence in the mandibular anterior region). Clinically the lesions were predominantly observed as painless tissue growths of smooth surface, two months of evolution, fibrous consistence, nodular form, purple coloration and sessile basis of implantation. In the greater number of cases the radiographic image of the subjacent bony tissue to the PGCL... (Complete abstract, click electronic address below)

A expressão da conexina 32 e 43 nas células gigantes trofoblásticas foi analisada em condições de cultura celular com e sem influência de hormônios sexuais. Placentônios bovinos foram coletados de vacas prenhes em abatedouro nos diferentes períodos gestacionais e divididos em três grupos, primeiro terço (I), segundo terço (II), terceiro terço (III) e transportados ao laboratório em condições assépticas à temperatura de 4ºC em solução de PBS com antibiótico. No laboratório as células foram isoladas e cultivadas em meio D-MEM com 10% SFB por cinco dias. As detecções das conexinas 32 e 43 foram realizadas através de munofluorescencia, pelo método de amplificação da tiramida-fluoresceina, utilizando anticorpo primário policlonal a imunoglobulina de coelho, anti-conexina 32 e 43 de camundongo. Os resultados mostraram que as células gigantes trofoblásticas expressam conexinas 32 e 43 nos três períodos gestacionais com exceção da Cx32 no primeiro terço gestacional sem adição de hormônios, a qual passou a expressar fluorescência após a adição de hormônios. A distribuição da Cx43 evoluiu com a progressão da gestação, permanecendo limitada ao interior das células gigantes trofoblásticas, sem formar junções comunicantes. O terceiro terço gestacional mostra a Cx43 na CGTT localizada no interior do núcleo. A adição de hormônios ao meio de cultura vem confirmar que a progesterona e o estrógeno podem ter um papel no controle da Cx32. Para Cx43 onde se adicionou progesterona os níveis de expressão foram baixos no início aumentando no decorrer da gestação, o mesmo foi encontrado para o conjugado de progesterona/ estrógeno. Para o estrógeno no grupo I os níveis de expressão foram menores se comparados aos três grupos diminuindo no grupo II e voltando a aumentar no grupo III. / The trophoblast cells expression of connexins 32 and 43 was studied in cell culture conditions with or without influence of sexual hormones. Bovine placentomes were collected from pregnant cows in slaughterhouses in different gestational periods and so divided into three groups, first term (I), second term (II), and third term (III), and transported to the laboratory in aseptic conditions at a temperature of 40C in PBS solution with antibiotics. At the laboratory the cells were isolated and cultivated in D-MEM environment with 10% SFB for five days. The detections of connexins 32 and 43 were achieved through immunofluorescence, by the tyramide-fluorescein amplification method, using a rabbit polyclonal primary antibody anti-connexin 32 and 43 of mice. The results showed that the trophoblast cells expressed connexins 32 and 43 in the three gestational periods with an exception of the Cx32 at the first gestational period. However, after the addition of sexual hormones, they began to express the connexins in the cytoplasm in the first stage. The distribution of the Cx43 evolved with the progression of the gestation, remaining limited to the trophoblast`s cells interior, without formation of gap junctions. The third gestational term shows the Cx43 located inside the nuclei of the CGTT. Addition of hormones in the culture environment confirmed that estrogen and progesterone may have an important action controlling Cx32. For Cx43, the expression was low after prosterone was added to the culture medium, but increased as the gestation evolved, the same was found for a combined compost of estrogen\\ progesterone. For estrogen, in group I the expression levels were inferior when compared to the three groups decreasing in group II and increasing again in group III. We may conclude that the sexual hormes, specially estrogen, affect the expression of connexins in trophoblastic cells.

A lesão central de células gigantes (LCCG) é uma afecção benigna dos maxilares, de comportamento biológico incerto, variando de discreta tumefação assintomática e de crescimento lento à uma forma agressiva, associada a dor, reabsorção radicular e óssea, com destruição cortical. Sua etiologia permanece desconhecida, havendo controvérsias entre processo reacional, neoplásico ou genético. Mutações no gene SH3BP2 foram identificadas em pacientes com querubismo, condição que compartilha várias características clínicas, radiográficas e histopatológicas com a LCCG. Para testar a hipótese de que tais mutações seriam responsáveis por, ou estariam associadas a LCCG e na tentativa de melhor entender a diferenciação microscópica/morfométrica das lesões agressivas e não agressivas, vinte e cinco pacientes portadores de LCCG foram selecionados para o estudo. O DNA foi obtido através do sangue e de espécimes em blocos de parafina, oriundos de biópsias e tratamento cirúrgico. Um estudo microscópico morfométrico foi paralelamente realizado, para avaliar o número de células gigantes e densidade de volume das mesmas nas lesões agressivas e não agressivas. O sequenciamento genético dos treze exons do gene SH3BP2 nos vinte e cinco pacientes estudados evidenciou uma alteração no códon do exon 4 em 10 pacientes. A densidade de volume de células gigantes foi maior nas lesões agressivas quando comparadas às não agressivas (p=0,013). Não houve diferença significante quanto ao número de células gigantes/mm2 em lesões agressivas e não agressivas (p =0,245). / Central giant cell lesion (CGCL) is a benign disease of the jaws, with uncertain behavior, ranging from mild asymptomatic slow-growing swelling to an aggressive form, with pain, radicular and bone resorption and cortical destruction. Its aetiology is still unknown and there is discussion whether it is a reactive, neoplastic or genetic disease. Mutations on gene SH3BP3 were identified in patients with cherubism, which shares several clinical, radiographic and histopathological features with CGCL. In order to test the hypothesis that such mutations would be responsible for or would be related to CGCL and also in order to better understand microscopic morphometric differentiation of the aggressive and non-aggressive lesions, 25 patients with CGCL were selected to this study. DNA was extracted from blood samples and from tissue samples, obtained by biopsy or surgical treatment. Microscopic morphometric assessment was also performed, in order to evaluate the number and the volume density of the giant cells in aggressive and in non-aggressive lesions. Gene sequencing of all 13 exons in gene SH3BP3, performed on each of the 25 patients, showed an alteration in one codon from exon 4, in ten patients. Volume density of giant cells was greater in aggressive lesions than in non-aggressive ones (p=0,013). There was no significant difference on the number of giant cells per mm2 when comparing aggressive and non-aggressive lesions.