Orientador: Delia Rodriguez-Amaya / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-19T15:27:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mercadante_AdrianaZerlotti_D.pdf: 5186908 bytes, checksum: 1f64f65714825edec82f10c0f2d95e66 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: Devido a várias funções ou ações atribuídas aos carotenóides, tem havido um amplo esforço mundial para se obter dados analíticos confiáveis sobre esses compostos. Como há um número muito grande de carotenóides, um dos maiores problemas analíticos é a sua identificação conclusiva. O uso criterioso de parâmetros clássicos de identificação (tempo de retenção, co-cromatografia, espectros de absorção e reações químicas), aplicados à cromatografia líquida de alta eficiência, permitiu a identificação dos seguintes carotenóides da manga cultivares, Keitt e Tommy Atkins: trans-p-caroteno, p-criptoxantina (cis e trans), trans-zeaxantina, luteoxantina (cis e trans), violaxantina (trans, 9-cis e 13-cis) e neoxantina (cis e trans). Sem especificação da forma geométrica (isomérica), estes carotenóides e adicionalmente luteína e epoxi-ß-caroteno tiveram suas identidades confirmadas por espectrometria de massas. Todos os espectros de massas dos carotenóides mostraram o pico do íon molecular e as esperadas fragmentações características. A composição quantitativa foi determinada por CLAE com padronização interna, empregando Sudan I. Uma coluna de ciano, com gradiente de acetona em n-hexano como fase móvel, foi utilizada porque proporcionou uma melhor separação das xantofilas em comparação com a coluna de C18, e possibilitou o uso de Sudan I como padrão interno. As mangas Keitt e Tommy Atkins apresentaram trans-violaxantina como o principal carotenóide, seguido de 9-cis-violaxantina e p-caroteno. Apesar de ter ocorrido uma variação razoável entre lotes da mesma cultivar, trans-violaxantina, 9-cis-violaxantina, neoxantina e cisneoxantina tenderam a teores maiores na cv. Tommy Atkins, enquanto o conteúdo de zeaxantina foi maior na cv. Keitt. Comparando a composição de carotenóides das mangas Keitt provenientes de dois Estados, verificou-se que o p-caroteno apresentou concentração duas vezes maior na manga procedente da Bahia, Estado com clima mais quente, do que na procedente de São Paulo. Os teores de trans- e 9-cis-violaxantina também foram maiores nas mangas da Bahia, aproximando-os dos níveis encontrados na cv. Tommy Atkins de São Paulo. Durante o amadurecimento das mangas Keitt e Tommy Atkins, os teores de p-caroteno e violaxantina praticamente triplicaram, 9-cisviolaxantina quadruplicou e a pequena quantidade de 13-cis-violaxantina desapareceu ou ficou reduzida-a traços. Houve um ligeiro aumento de ß-criptoxantina, luteoxantina e neoxantina durante o amadurecimento das frutas. Em termos de porcentagens, apenas pequenas transformações' foram notadas, sendo a mudança mais nítida a diminuição de neoxantina e 13-cis-violaxantina. Com o desaparecimento dia violaxantina, os sucos de manga de três marcas comerciais apresentaram p-caroteno como carotenóide predominante, seguido de auroxantina, carotenóide ausente na fruta fresca. Os teores de ß-caroteno se situaram dentro da faixa obtida para a manga "in natura". Com o auxílio do espectro de absorção no UV-visível, espectro de massas e, quando necessário, reações de isomerização e redução, foram identificados treze carotenóides em maracujá: fitoeno, fitoflueno, ?-caroteno (principal), neurosporeno, ß -caroteno, licopeno, prolicopeno, epoxi-ß-caroteno, ß-criptoxantina, ß-citraurina, anteraxantina, violaxantina e neoxantina. As duas colunas (C18 e ciano) com várias combinações de solventes como fase móvel, não se mostraram eficientes para separar os carotenóides do maracujá. Também utilizando espectrometria de massas, confirmou-se o carotenóide monoidroxilado, encontrado em verduras folhosas brasileiras, como sendo a a-criptoxantina. Este carotenóide, embora em pequena quantidade, foi detectado em todas as onze verduras analisadas, enquanto o acaroteno foi encontrado em apenas quatro dessas verduras / Abstract: Considering the many functions or actions attributed to carotenoids, there is a worldwide effort to obtain reliable analytical data on these compounds. Since there is a large number of natural carotenoids, one of the main analytical problems is conc1usive identification. With the combined use of c1assical parameters (retention time, spiking, visible absorption spectra and chemical reactions) applied to high performance liquid chromatography (HPLC), the folIowing carotenoids were identified in mango cultivars Keitt and Tommy Atkins: trans-ß-carotene, ßcryptoxanthin (cis and trans), trans-zeaxanthin, luteoxanthin (cis and trans), violaxanthin (trans, 9-cis and 13-cis) and neoxanthin (cis and trans). Mass spectrometry confinned the identity, but not the geometric (isomeric) form, of these carotenoids, additionalIy detecting lutein and epoxy-ß-carotene when a large amount of sample was utilized. AlI carotenoids showed the molecular ion peak and the expected characteristic fragmentations. The quantitative composition was determined by HPLC with internal calibration, using Sudan I. A nitrile column, with a gradient of acetone in n-hexane as mobile phase, was utilized because it allowed better separation of the xanthophylls than the C18 column and Sudan I could be used as internal standard. The mango cultivars Keitt and Tommy Atkins presented trans-violaxanthin as the major carotenoid followed by 9-cis-violaxanthin and ß-carotene. Although some variation occurred between lots of the same cultivar, trans-violaxanthin, 9-cisviolaxanthin, neoxanthin and cis-neoxanthin tended to have higher levels in cv. Tommy Atkins. On the other hand, the zeaxanthin content was higher in cv. Keitt. Comparing the carotenoid composition of mangoes Keitt from two different states, the ß-carotene level in mangoes from Bahia State, a state with a hot c1imate, was twice that of São Paulo mangoes. The trans- and 9-cis-violaxanthin contents were also higher in the mangoes from Bahia, being c10ser to the levels found in Tommy Atkins, from São Paulo. During ripening of the mangoes cv. Keitt and Tommy Atkins, ßcarotene and violaxanthin increased three-fold and 13-cis-violaxanthin four-fold. The small amount of 13-cis-violaxanthin disappeared or was reduced to trace amount. ßCryptoxanthin, luteoxanthin and neoxanthin contents increased slightly with ripening. In terms of percentages, on1y small transformations could be observed, the most distinct change being the decrease of neoxanthin and 13-cis-violaxanthin. With the disappearance of violaxanthin, the mango juice of three commercial brands presented ß-carotene as the major carotenoid followed by auroxanthin, which was not detected in the fresh fruit. The ß-carotene contents fell within the range obtained for fresh mangoes. Using the data from chromatographic behavior, UV-visible spectra, mass spectra and, when necessary, specific chemical reactions, thirteen carotenoids were identified in passion fruit: phytoene, phytofluene, ?-carotene (principal), neurosporene, ß-carotene, lycopene, prolycopene, epoxi-ß-carotene, ß-cryptoxanthin, ß-citraurin, antheraxanthin, violaxanthin and neoxanthin. Many solvent systems and two columns (C18 and ciano) were tested but were found inefficient to separate all the passion fruit carotenoids. Mass spectrometry was also employed to confmn the monohydroxy carotenoid found in Brazilian leafy vegetables as a-cryptoxanthin. This carotenoid was detected in all of the eleven leaves analysed while a-carotene was found only in four / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Com o aumento do tráfego aéreo, as emissões de poluentes provenientes da queima do combustível das aeronaves nos aeroportos e regiões circunvizinhas conseqüentemente, também aumentam, desta forma agências governamentais e muitos pesquisadores têm demonstrado interesse no estudo dessa situação, que envolvem as populações vizinhas, os indivíduos que utilizam os aeroportos, como passageiros, e aqueles que, por força da atividade de trabalho, permanecem em suas áreas internas durante longos períodos de tempo. As emissões causadas pelos motores das aeronaves carregam diversas substâncias tóxicas entre outros compostos orgânicos voláteis, especificamente benzeno, etilbenzeno, tolueno e xilenos, conhecidos pela sigla BETX. Estes poluentes podem produzir vários efeitos nocivos à saúde. No presente trabalho foi estudada a exposição ocupacional dos fiscais de pátio do Aeroporto Internacional André Franco Montoro (Cumbica/Guarulhos/São Paulo). O método 1501 do Manual de Métodos Analíticos do NATIONAL INSTITUTE FOR OCCUPATIONAL SAFETY AND HEALTH (NIOSH, 2003), foi implementado como metodologia para a determinação dos compostos orgânicos voláteis. Os resultados mostraram teores máximos de até 1,37 mg/m3 de tolueno, 0,21 mg/m3 etilbenzeno, 0,15 mg/m3 de xileno, os quais estão abaixo do limite máximo de exposição no ser humano. O benzeno não foi detectado no ambiente aeroportuário em teores de até 3,3 mg/m3. / The increasing in air traffic, the emissions of pollutants from burning fuel aircraft at airports and surrounding regions increase, so government agencies and other researchers presented in the study of the situation, involving the neighbourhood, the people that use these airports, as passengers, and those that remain in their internal areas for long periods of time developing their job. Emissions caused by the engines of aircraft carry various toxic substances and other volatile organic compounds, specifically benzene, ethylbenzene, toluene and xylenes, known by the acronym BETX. These pollutants can produce several harmful effects on human health. In this work the occupational exposure of tax inspectors of the International Airport \"André Franco Montoro\" (Cumbica/Guarulhos/São Paulo). The method 1501 Manual of Analytical Methods of NATIONAL INSTITUTE FOR OCCUPATIONAL SAFETY AND HEALTH (NIOSH, 2003), was implemented as a methodology for the determination of volatile organic compounds. The results show maximum until 1,37 mg/m3 of toluene, 0,21 mg/m3 of ethylbenzene, 0,15 mg/m3 of xylene, which are below the limit of work exposure in humans. The benzene was not detected in the airport environment at levels up to 3,3 mg/m3.

As copaíferas fazem parte de um importante gênero de plantas que produzem um exsudato denominado como oleorresina, que é constituído por uma mistura de sesquiterpenos e diterpenos ácidos. A medicina popular utiliza a oleorresina de diferentes espécies de Copaifera com diversas indicações, tais como: ação anti-inflamatória, antimicrobiana, cicatrizante, antitumoral, entre outras. Desta forma, numerosos pesquisadores têm investigado a composição química e as atividades biológicas e toxicológicas deste produto natural, a fim de reconhecer os benefícios e a segurança deste produto. Todavia, estudos da composição química e das atividades biológicas dos constituintes das folhas são escassos. Assim, neste projeto buscou-se investigar a composição química de diferentes extratos de folhas e de oleorresinas de copaíferas coletadas na flora brasileira, bem como produtos comerciais (óleo de copaíba) propondo e aplicando métodos analíticos em cromatografia para determinação dos principais constituintes das amostras. Dez amostras de folhas e oleorresinas autênticas de diferentes espécies foram coletadas no norte e sudeste do Brasil (C. langsdorffi Desf., C. duckei Dwyer, C. reticulata Ducke, C. multijuga Hayne, C. paupera (Herzog) Dwyer, C. pubiflora Benth, C. lucens Dwyer, C. oblogifolia Mart, C. trapezifolia Hayne, e Copaifera sp.) e mais seis amostras comerciais foram adquiridas. Os compostos voláteis foram separados da oleorresina bruta utilizando-se o aparelho de Clevenger. Os padrões cromatográficos foram isolados utilizando-se diferemntes modalidades cromatográficas. As oleorresinas de C. multijulga e C. langsdorffii apresentaram os maiores teores de óleo volátil das amostras com 92 e 72%, respectivamente. Três diterpenos foram isolados da oleorresina de C. duckei: os ácidos ent-poliáltico, ent-diidroagático e ent-agático-15-metil éster. Uma análise qualitativa foi otimizada usando microextração em fase sólida seguido de análise em CG-EM, a qual revelou a presença em comum do ?-copaeno, ?-elemeno, ?-cariofileno e ?-bergamoteno em todas as amostras de oleorresina analisadas. Dois métodos analíticos utilizando CLUE-EM/EM e CG-DIC foram desenvolvidos, otimizados e validados para análise de nove diterpenos ácidos e quatro sesquiterpenos, os quais apresentaram adequada seletividade/especificidade, faixa de trabalho, limite de detecção, limite de quantificação, precisão e exatidão. Todavia, em ambos os métodos há necessidade de controle rigoroso das condições analíticas dos sistemas cromatográficos. Os resultados obtidos aplicando os dois métodos indicaram a presença frequente do ?-cariofileno e dos ácidos ent-copálico e ent-caurenoico como as substâncias mais encontradas em oleorresinas de copaíferas autênticas e comerciais. A análise qualitativa empregando CLUE-EM indicou a presença dos ácidos di-O-metil-3,5-di-O-galoilquínico (AGQ-8), 5\',5\'\'-di-O-metil-4,5-di-O-galoilquínico (AGQ-9), 5\',5\'\',5\'\'\'-tri-O-metil-3,4,5-tri-O-galoilquínico (AGQ-16), afzelina e quercitrina nos extratos das folhas de nove amostras de copaíferas. Os métodos analíticos desenvolvidos são confiáveis para as análises dos componentes fixos e voláteis e os resultados obtidos neste trabalho confirmam a variabilidade da composição química das oleorresinas desse gênero vegetal. / Copaifera plants are part of an important genus that produces an exsudate called oleoresin, which consists of a mixture of sesquiterpenes and acid diterpenes. Folk medicine uses the oleoresin of different Copaifera species for different health problems, such as: anti-inflammatory, antimicrobial, wound healing and antitumor, among others. Thus, numerous researchers have investigated the chemical composition, biological and toxicological activities of this natural product in order to recognize its benefits and safety. However, investigation of chemical composition and biological activities of leaf contituents are scarce. In this project we aimed to investigate the chemical composition of different leaf extracts and Copaifera oleoresins collected in the Brazilian flora and acquired in the market (copaíba oil) by proposing and applying chromatographic analytical methods to determine their main constituents. Ten samples of leaves and authentic oleoresins of different species were collected in northern and southeastern parts of Brazil (C. langsdorffi Desf., C. duckei Dwyer, C. reticulata Ducke, C. multijuga Hayne, C. paupera (Herzog) Dwyer, C. pubiflora Benth, C. lucens Dwyer, C. oblogifolia Mart, C. trapezifolia Hayne, e Copaifera sp.) and six commercial samples were purchased. The volatile fraction of the crude oleoresin was obtained by using Clevenger apparatus, and the chromatographic standards were isolated by using different chromatographic techniques. The oleoresins of C. langsdorffii and C. multijuga displayed the highest volatile oil contents. Three diterpenes were isolated from C. duckei oleoresin: ent-polialthic, ent-dihydroagathic and ent-agathic-15-metil ester acids. A qualitative analysis was optimized using solid phase micro-extraction followed by GC-MS analysis, which revealed the presence of ?-copaene, ?-elemene, ?-caryophyllene and ?-bergamotene in all investigated oleoresins. Two analytical methods using UPLC-MS/MS and GC-FID were developed, optimized and validated for the analysis of nine acid diterpenes and four sesquiterpenes, which gave adequate selectivity/specificity, range, limit of detection, limit of quantification, precision and accuracy. However, in both methods there is a need for rigorous control of the analytical conditions. The results generated by the two methods indicated the frequent presence of ?-caryophyllene, ent-copalic and ent-kaurenoic acids as the compounds frequently found in authentic and commercial Copaifera oleoresins. Qualitative analysis of leaf extracts using UPLC-MS/MS indicated the presence of 5\',5\'\'-di-O-methyl-3,5-di-O-galloylquinic acid (GQA-8), 5\',5\'\'-di-O-methyl-4,5-di-O-galloylquinic acid (GQA-9), 5\',5\'\',5\'\'\'-tri-O-methyl-3,4,5-tri-O-galloylquinic acid (GQA-16), afzelin and quercetrin in all studied species. The analytical developed methods are reliable for the analyses of both fixed and volatile compounds of the oleoresins. The obtained results confirm the variability among the composition of the Copaifera oleoresins.

Orientador: Ricardo Andrade Rebelo. / Dissertação (Mestrado em Química) - Programa de Pós-Graduação em Química, Centro de Ciências Exatas e Naturais, Universidade Regional de Blumenau, Blumenau.

A combinação de técnicas analíticas cromatográficas e sensoriais é essencial para a elucidação das características do aroma de vinhos, dada a complexidade dos compostos voláteis e das coeluições cromatográficas que ocorrem tanto em colunas polares, como apolares em uma só dimensão. Dois vinhos finos elaborados com uvas Merlot e Cabernet Sauvignon da Campanha Gaúcha foram escolhidos como estudos de caso para demonstração das vantagens da conjugação de várias técnicas cromatográficas e sensoriais, tendo-se em vista também a busca de reconhecimento da qualidade destes vinhos através de sua caracterização, bem como o aumento de sua competitividade no mercado nacional e internancional. Os vinhos Merlot e Cabernet Sauvignon foram investigados através do emprego conjugado das seguintes técnicas analíticas: microextração em fase sólida no modo headspace (HS-SPME), cromatografia gasosa com detector de espectrometria de massas (GC/MS), GC-O (olfatométrica), análise descritiva quantitativa (QDA), cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjos de diodos e fluorescência (HPLC-DAD-FLD) e cromatografia gasosa bidimensional abrangente com detector de espectrometria de massas por tempo-de-voo (GC×GC/TOFMS) para avaliação dos manejos (carga de gemas, área foliar, organização do dossel, orientação solar, irrigação) dos vinhedos e tipos de solo da região que resultasse em vinho de melhor qualidade. A GC×GC foi essencial para apontar os principais compostos que contribuíram para o aroma dos vinhos, especialmente quando coeluídos em 1D-GC. Aroma de frutas vermelhas apontado por QDA e GC-O foi vinculado à maior concentração de acetato de 2-feniletila/β- damascenona, hexanoato de etila e octanoato de etila em um vinho Merlot e ao emprego de uma menor carga de gemas por planta (20 gemas) no vinhedo. Seis folhas por ramo (manejo com menor área foliar/ planta) indicou a contribuição negativa do ácido hexanoico e do 3-metiltio-1-propanol para o aroma do vinho. Para um dos vinhos Cabernet Sauvignon observou-se uma possível relação dos compostos voláteis com o aroma de frutas vermelhas (QDA e GC-O) e à maior exposição solar dos cachos de uva, resultante do vinhedo com maior organização do dossel, orientação solar adequada e solo acrisol. A HPLC-DAD-FLD apontou compostos fenólicos, como antocianinas e ácido p-cumárico, possivelmente responsáveis pelos atributos sensoriais de aparência e sabor/sensação bucal nos vinhos Cabernet Sauvignon. Embora tenham sido encontrados atributos sensoriais positivos nos vinhos dessa região, também foram verificados atributos negativos, evidenciando-se a necessidade de investigações científicas posteriores para melhoria da qualidade, que incluam a conjugação das técnicas analíticas citadas, bem como o aprimoramento das etapas de cultivo das uvas, produção e envelhecimento dos vinhos. / A combination of chromatographic and sensory analytical techniques is essential for the elucidation of the aroma characteristics of wines, given the complexity of the volatile mixture of compounds and the chromatographic coelutions that occur in both polar and non polar columns in a single dimension. Two fine wines elaborated with Merlot and Cabernet Sauvignon grapes from the Campanha Gaúcha were chosen as case studies to demonstrate the advantages of the conjugation of several chromatographic and sensory techniques. Results obtained also aimed to characterize their volatile compounds to provide recognition of their quality and increase their competitiveness in the national and international market. Merlot and Cabernet Sauvignon wines were investigated through the conjugated use of the following analytical techniques: headspace solid phase microextraction (HS-SPME), gas chromatography with mass spectrometric detection (GC/MS), GC-O (O, olfatometry), quantitative descriptive analysis (QDA), high performance liquid chromatography with diode array and fluorescence (HPLC-DAD-FLD) and comprehensive two-dimensional gas chromatography with mass spectrometric detection (GC×GC/TOFMS) to evaluate the management (bud load, foliar area, canopy organization, solar orientation, irrigation) of the vineyards and soil types of the region that resulted in better wine quality. GC×GC was essential to show the compounds that mainly contributed to the aroma of wines, especially when coelutions occurred in 1D-GC. Red fruit aroma pointed by QDA and GC-O in a Merlot wine was related to 2-phenylethyl acetate/β-damascenone, ethyl hexanoate, and ethyl octanoate, and to the use of the lowest load of buds per plant (20 buds/plant) in the vineyard. Six leaves per branch (management with the lowest number of leaves/branch) have indicated a negative contribution of hexanoic acid and 3- methylthio-1-propanol to wine aroma. A possible relationship between the volatile compounds and the red fruit aroma (QDA and GC-O) of one of the Cabernet Sauvignon wines was observed. Grapes used to elaborate this wine were subjected to a greater sun exposure resulting from a better organized canopy vineyard, adequate solar orientation and acrisol soil. HPLC-DAD-FLD analyses of Cabernet Sauvignon wines showed phenolic compounds that may possibly be related to sensory attributes of appearance and taste/mouth-feel. Although positive sensory attributes were found in the wines of this region, negative attributes were also verified, which means that further scientific xviii investigations are necessary to improve quality, including the use of several analytical and sensory techniques, as well as the improvement of the stages encompassed in cultivation of grapes, production and aging of wines.

O esgotamento de reservas de petróleo e os problemas ambientais fomentados pela combustão de combustíveis fósseis gera interesse na utilização de biomassas na obtenção de combustíveis e produtos químicos. O bio-óleo, líquido viscoso de coloração escura, produzido mediante pirólise de biomassa, consiste em uma mistura complexa de compostos orgânicos. O tegumento do grão de café (silverskin), é subproduto oriundo da torra deste, sendo atualmente descartado, representando um grave problema ambiental. Logo, neste estudo foi otimizado a temperatura final e a vazão de gás inerte para a pirólise de silverskin em reator de leito fixo, utilizando um delineamento composto central aliado à superfície de resposta. Os valores ótimos calculados foram 560 °C, para a temperatura final de pirólise, e 49,4 mL.min-1, para a vazão de N2, sendo obtido um rendimento de fase orgânica de 15,2 ± 0,3% nessas condições. A composição química desse bio-óleo foi avaliada por cromatografia gasosa bidimensional abrangente acoplada à espectrometria de massas quadrupolar (GC×GC/qMS), aliado à utilização de padrões e de índices de retenção. Foram identificados 228 compostos (90,1% da amostra) nesse bio-óleo. A classe química majoritária, em termos de volume percentual, foi a dos fenóis (27%), seguida dos compostos nitrogenados (18,4%). Além disso, vale ressaltar a elevada representatividade da classe dos hidrocarbonetos saturados (8,3%), insaturados alifáticos (6,7%) e aromáticos (7,8%), que juntos somam 22,8% da amostra. Os resultados apontam que o bio-óleo de silverskin possui potencial para atuar como fonte de insumos químicos. / The depletion of oil reserves and environmental issues promoted by the combustion of fossil fuels generates interest in the use of biomass to obtain fuel and chemicals. The bio-oil, a dark colored viscous liquid produced by pyrolysis of biomass, is a complex mixture of organic compounds. The coffee bean tegument (silverskin), is a by-product derived from the coffee roasting. This residue has been discarded, which constitutes a serious environmental problem. Therefore, this study has optimized the final temperature and the flow of inert gas for the pyrolysis of silverskin in a fixed bed reactor, by using a central composite design and response surface. The optimal values calculated were 560 °C for the final pyrolysis temperature, and 49.4 mL min-1 for the N2 flow rate. The organic phase yield was 15.2 ± 0.3% under these conditions. The bio-oil chemical composition was evaluated by comprehensive two-dimensional gas chromatography coupled to quadrupole mass spectrometry (GC×GC/qMS), combined with the use of standards and retention indexes. 228 compounds were identified (90.1% of the sample) in this bio-oil. The major chemical class, in terms of volume percentage, were the phenols (27%), followed by nitrogen compounds (18.4%). In addition, it is worth mentioning the high representability of the saturated hydrocarbons (8.3%), unsaturated aliphatic (6.7%), and aromatics (7.8%), which together account for 22.8% of the sample. The results show that the silverskin bio-oil has the potential as a source of chemical inputs.

Orientador: Lourdes Campaner dos Santos / Coorientador: Taís Maria Bauab / Banca: Daniel Rinaldo / Banca: Rosemeire Cristina Linhari Rodrigues Pietro / Resumo: Este trabalho apresenta os resultados da pesquisa de metabólitos secundários ativos produzidos por fungos endofíticos associados às partes aéreas (folhas, escapos e capítulos) de Paepalanthus chiquitensis (Eriocaulaceae). Entre os 25 fungos isolados da espécie de Eriocaulaceae, o Fusarium sp. foi o fungo mais promissor quanto à atividade antimicrobiana para as cepas de bactérias Gram-negativa Escherichia coli e Salmonella setubal, da bactéria Gram-positiva Staphylococus aureus e para a levedura Candida albicans resistente ao fluconazol, e ainda exibiu a capacidade bactericida e fungicida. Outro fungo selecionado foi o Bipolaris sp. isolado das folhas de P. chiquitensis devido a sua diversidade química. O cultivo dos fungos em Potato Dextrose Broth (PDB) em escala ampliada resultou no extrato acetato de etila (EAcOEt) que foram purificados por métodos cromatográficos em escala preparativa. A identificação/elucidação por métodos espectrométricos e espectroscópicos (EM, IV, UV, RMN mono e bidimensionais) forneceu as substâncias: 3,4-Piridinadiamina, N4-1-metil-5-(3'-buten-1-il) (S1), ácido fusárico (S2), 2-(1H-indol-6-il)-acético (S3), 2-Piridinametilamina-N8-metil-5-hexanoato (S4) e o sesterterpeno terpestacina (S5), Etanoato de etila-2-(2-acetil-4,6-diidroxifenil) (B4) e um alcalóide inédito na literatura (B1). Com este trabalho, observamos que os fungos endofíticos estudados possuem sua química completamente distinta quando comparada com as classes de substâncias isoladas de espécies vegetais de Eriocaulaceae, sendo uma importante fonte de novos produtos naturais com potencial atividade biológica. Este trabalho contempla também o estudo dos efeitos de modificadores epigenéticos e íons metálicos na diversificação metabólica do fungo Pochonia chlamydosporia (ATCC)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work presents the results of the research of active secondary metabolites produced by endophytic fungi associated with the aerial parts (capitulae, scapes and leaves) of Paepalanthus chiquitensis (Eriocaulaceae). Among the 25 species of fungi isolated from the specie of Eriocaulaceae, the Fusarium sp. was the fungus that showed the best biological activity against the strains of Gram-negative bacteria Escherichia coli and Salmonella setubal, the Gram-positive bacterium Staphylococus aureus and Candida albicans yeast resistant to fluconazole. The Fusarium sp also displayed bactericidal and fungicidal effects. The research also presents the chemical studies of the fungus Bipolares sp., isolated from the leaves of P. chiquitensis which was selected due to its chemical profile. The large scale cultivation of both fungi afforded the respective ethyl acetate extracts which were purified by preparative chromatography methods. The chemical structures were elucidated by spectrometric and spectroscopic methods (MS, IR, UV, mono- and bidimensional NMR affording the following substances from the Fusarium sp.: 5-(but-3-en-1-yl)-N4-methylpyridine-3,4-diamine (S1), fusaric acid (S2), 2-(1H-indol-6-yl)-acid (S3), 5-Butil-2-pyridinecarboxamide (S4) and the sesterterpene fusaproliferin (S5), while for the Bipolaris sp.: Acetic acid, (2-acetyl-3,5-dihydroxyphenyl)-, ethyl ester (B4) and a new alkaloid (B1). Herein, we also showed the study of the effects of epigenetic modifiers and metal ions in metabolic diversity from the fungus Pochonia chlamydosporia (ATCC). The presence of anacardic acid in the liquid medium afforded 2.6 times more ethyl acetate extract compared with the PDB (Potato Dextrose Broth) control. Besides, the analysis by analytical HPLC... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Mestre -- Sao Paulo (Estado). Secretaria da Saude. Coordenacao dos Institutos de Pesquisa. Programa de Pos-Graduacao em Ciencias, Sao Paulo, 2004.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-09-15T11:20:25Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 723985 bytes, checksum: 0fc66dc545db97b1987bb1347300f315 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-15T11:20:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 723985 bytes, checksum: 0fc66dc545db97b1987bb1347300f315 (MD5) Previous issue date: 1998-09-11 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Este trabalho teve como objetivos estudar a percolação do triadimenol em amostras de dois solos, coletados em locais diferentes e cultivados com o cafeeiro na microrregião de Viçosa, bem como a sua quantificação por Cromatografia Gasosa (CG) e por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). A associação entre o triadimenol com o dissulfoton constitui uma mistura de um fungicida mais um inseticida utilizado na cafeicultura no combate da ferrugem e do bicho mineiro. Entretanto, são escassos os estudos envolvendo a percolação desses agroquímicos em solos cultivados com o cafeeiro. Foram coletadas amostras nas profundidades de 0 a 5 e de 5 a 20 cm para montagem das colunas de solo, utilizando-se tubos de PVC de 10 cm de diâmetro interno. No estudo da percolação foram montados sistemas de 0 a 5 e de 0 a 10 cm, onde foram aplicados 0,5 e 1,0 mL de solução-padrão de triadimenol 1.000 μg mL-1. As amostras foram submetidas a uma simulação de chuva de 60 mm. A água que percolou os sistemas foi coletada, o pesticida extraído e, em seguida, realizada a etapa de clean up. Os extratos obtidos foram então quantificados por CG e por CLAE. A fase móvel empregada na quantificação do triadimenol por CLAE realizou-se previamente por Cromatografia em Camada Delgada (CCD). Os melhores resultados foram obtidos com uma mistura de diclorometano:acetato de etila 3:7, com um fluxo de fase móvel de 0,6 mL min-1 e tempo de retenção de 10 min para o composto. O limite de detecção do triadimenol foi de 0,01 ng mL-1 para CLAE e de 0,1 ng mL-1 para CG. Testes para verificação do limite de detecção do composto foram realizados por meio de injeções sucessivas, em diferentes concentrações do padrão de triadimenol em acetato de etila, obtendo-se o limite de detecção de 0,01 ng mL-1 para CLAE e de 0,01 μg mL-1 para CG. Testes de recuperação, após extração de amostras de água deionizada fortificadas com 2 μg mL-1 de triadimenol, apresentaram rendimento de extração de 91,34%. Mediante aplicação de 0,5 e 1,0 mL de uma solução padrão 1.000 μg mL-1 de triadimenol, em colunas de solo de 5,0, cm encontraram-se valores inferiores a 1% de princípio ativo nos dois solos estudados, tanto por CLAE como por CG. Nas amostras de água que percolaram as colunas de solo de 10 cm não se detectou presença do princípio ativo triadimenol. Estes resultados mostram que dificilmente esse princípio ativo irá contaminar os lençóis freáticos. Quando comparadas as técnicas de quantificação, CLAE e CG, pode-se verificar que, para as amostras de água, a CLAE apresentou resultados muito próximos aos obtidos por CG na análise do triadimenol. / This work had the aim to study triadimenol percolation in samples from two soils, collected in different locations and cultivated with coffee, at the Micro Region of Viçosa and also the quantification by gas chromatography (GC) and high performance liquid chromatography (HPLC). The association between triadimenol and dissulfoton is a mixture of a fungicide plus an insecticide commonly used against coffee rust and leafminers. Therefore studies involving the percolation of those agrochemicals on cultivated soils are scarce. Soil samples were harvested from two different layers: 0 to 5 cm and 5 to 20 cm. The soil was used to pack PVC columns with 10 cm of internal diameter. On the percolation studies, a 0 to 5 cm and a 0 to 10 cm systems were built and 0.5 and 1.0 mL of a standard triadimenol solution (1000 μg mL-1) were applied. The samples were submitted to a 60 mm rain simulation. The drained water was collected, the pesticide extracted and a clean-up step was performed. The extracts obtained were quantified by GC and HPLC. The mobile phase used at the HPLC was previously determined by Thin Layer Chromatography (TLC). The best results were obtained using a mixture of dichloromethane: ethyl acetate 3:7, with a mobile phase with a flux of 0.6 mL min-1) with a retention time of 10 minutes for the compound. The detection limit for triadimenol was 0.01 ng mL-1 for HPLC and 0.1 ng mL-1 for GC. The analyses detection limits were performed through successive injections of the standard solution of triadimenol dissolved in ethyl acetate at different concentrations, obtaining the detection limits of 0.01 ng mL-1 for HPLC and 0.01 μg mL-1 for GC. Recovering tests, after sample extractions using de-ionized water with 2 μg mL-1 of triadimenol, showed a extraction efficiency of 91.34%. When 0.5 and 1.0 mL of a standard solution of 1000 μg mL-1 was applied into a 5 cm soil column, less than 1% of the active principle was detected, either by HPLC or GC. Within the water samples that drained from 10 cm columns, the presence of the active principle triadimenol was not detected. These results show that, the chances of occurring a contamination of the water table with this active principle are very small. When compared, the quantification techniques, HPLC and GC, one can verify that, for water samples, HPLC showed results similar to that obtained for GC on the triadimenol analysis.

Made available in DSpace on 2016-03-15T14:17:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 2.pdf: 2354876 bytes, checksum: b870b9f5322d8473f9ec787dd8eaf90b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Fármacos/Farmanguinhos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / As espécies do gênero Passiflora são ricas em flavonóides que apresentam atividade ansiolítica, dentre outras. P. incarnata L. é a espécie mais estudada tanto por sua composição química quanto por seus efeitos farmacológicos. Contudo, atividades biológicas semelhantes às de P. incarnata tem sido relatadas para espécies brasileiras deste gênero botânico, constituindo uma fonte alternativa para a formulação de fitoterápicos. Um estudo preliminar comparativo dos aspectos macroscópicos e microscópicos de quatro espécies nativas, P. pedata L., P. nitida Kunth e P. quadriglandulosa Rodschield, associado à morfologia da folha de P. edulis Sims descrita na Farmacopéia Brasileira, foi realizado para a avaliação de possíveis problemas na identificação da espécie de interesse, ou mesmo pela adulteração da droga vegetal proveniente de P. incarnata. Os resultados demonstraram grande diversidade morfológica entre P. pedata, P. nitida e P. quadriglandulosa, entretanto foi observada semelhança entre as folhas de P. edulis e P. incarnata, pois ambas apresentaram limbo trilobado. Não obstante, elas foram diferenciadas pela análise de suas principais características anatômicas. O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma formulação fitoterápica contendo como ingrediente ativo extrato de P. incarnata e identificar o marcador da espécie, vitexina, segundo a legislação vigente. Amostras de extratos desta espécie, obtidas de fornecedores comerciais, foram analisadas por espectrofotometria e cromatografia a fim de identificar e quantificar o marcador. Concomitantemente, foram preparadas formulações farmacêuticas isentas de sacarose a partir destes extratos. As amostras de extratos e formulações foram processadas e analisadas por cromatografia em camada delgada. O cromatograma, após a revelação com reagente químico característico, apresentou manchas relacionadas à vitexina e outras bandas características de flavonóides. As análises obtidas por cromatografia líquida de alta e ultra eficiência (CLAE e CLUE) mostraram diferenças significativas no que tange a quantidade de amostra, sensibilidade, rapidez, delineamento dos sinais e dos respectivos espectros UV. Por meio da CLUE foi possível verificar a presença do principal marcador (vitexina, M-1 de 431 daltons) no produto contendo extratos de Passiflora e uma amostra padrão deste flavonóide. / Species of Passiflora are rich in flavonoids which have anxiolytic activity, among other activities. P. incarnata L. is the most studied species by its chemical composition and its pharmacological effects. However, biological activities similar to those described for P. incarnata have been reported to other Brazilian species of the same genus, providing an alternative source for the formulation of herbal medicines. A comparative preliminary study on macroscopic and microscopic aspects about four native species, P. pedata L., P. nitida Kunth and P. quadriglandulosa Rodschield, associated to the leaf morphology of P. edulis Sims described in the Brazilian Pharmacopoeia, was performed to evaluate possible difficulties in the identification of the species of interest, or even adulteration of the vegetal drug P. incarnata. Results showed important morphological differences among P. pedata, P. nitida and P. quadriglandulosa, however there was similarity in the trilobed lamina of P. incarnata and P. edulis leaves. On the other hand, both species can be distinguished by the analysis of its main anatomical characteristics. The aim of this work was to develop an herbal formulation containing extract of P. incarnata as active ingredient, and to identify the marker of the species, vitexin, according to actual law of Brazil. Sample extracts of P. incarnata obtained from commercial suppliers were analyzed in order to identify and quantify the marker. Concomitantly, pharmaceutical formulations free of sucrose were prepared with these extracts. Extracts and formulations were processed and analyzed by thin layer chromatography. The chromatogram, revealed by characteristic chemical reagent, showed bands of vitexin and other flavonoids. The high and ultra performance liquid chromatography (HPLC and ULPC) analysis presented significative differences about the sample amount, sensibility, quickness, peaks delineation and respective UV spectra. Using UPLC, it was possible to verify the presence of the main marker (vitexin, M-1 of 431 daltons) in the product obtained with the extracts of P. incarnata and vitexin standard.