Techn. Hochsch., Diss., 2000--Aachen.

Techn. Hochsch., Diss., 2003--Aachen.

Techn. Hochsch., Diss., 2002--Aachen.

?rea de concentra??o: Ci?ncias Fisiol?gicas. / Submitted by Jos? Henrique Henrique (jose.neves@ufvjm.edu.br) on 2017-01-09T16:47:50Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) lucas_abreu_costa.pdf: 2675995 bytes, checksum: b6686da3b0509ff9d2b21c38e1fdc5ce (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2017-01-10T13:46:07Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) lucas_abreu_costa.pdf: 2675995 bytes, checksum: b6686da3b0509ff9d2b21c38e1fdc5ce (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-10T13:46:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) lucas_abreu_costa.pdf: 2675995 bytes, checksum: b6686da3b0509ff9d2b21c38e1fdc5ce (MD5) Previous issue date: 2016 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / A planta Ageratum fastigiatum (Gardn.) R. M. King et H. Rob. ? comumente utilizada na medicina popular da regi?o do Vale do Jequitinhonha como anti-inflamat?rio e analg?sico. Em virtude do papel do sistema imune e de fatores inflamat?rios sol?veis na etiologia e no mecanismo fisiopatol?gico de diversas doen?as inflamat?rias, este trabalho teve como objetivo investigar par?metros relacionados ? atividade anti-inflamat?ria do extrato etan?lico de A. fastigiatum e de uma fra??o derivada desse extrato. A identifica??o dos constituintes qu?micos da fra??o do extrato etan?lico de A. fastigiatum foi realizada por meio da Cromatografia L?quida de Alta Efici?ncia com Detectores de Arranjo de Diodo acoplada ? espectrometria de massas (CLAE-DAD-MS) seguida pela Espectrometria de Massas em Tandem com ioniza??o por electrospray (ESI-MS/MS). A t?cnica de exclus?o com azul de tripan foi utilizada para determina??o da viabilidade das culturas de c?lulas mononucleares do sangue perif?rico (PBMC) incubadas por 8, 24 e 120 horas com o extrato etan?lico, a fra??o e o solvente Dimetilsulf?xido (DMSO). Na avalia??o do perfil proliferativo de linf?citos pela t?cnica de citometria de fluxo, PBMC estimuladas com o mit?geno Fitohemaglutinina (PHA) foram incubados por 120 horas na aus?ncia ou presen?a de diferentes concentra??es n?o t?xicas dos componentes citados. Para an?lise da produ??o das citocinas pr?-inflamat?rias, PBMC tratadas ou n?o com diferentes concentra??es n?o t?xicas do extrato etan?lico de A. fastigiatum, da fra??o e do solvente DMSO foram incubadas por 8 horas e estimulada nas ?ltimas 4 horas com Miristato Acetato de Forbol (PMA), utilizando a t?cnica de citometria de fluxo, linf?citos totais, c?lulas CD4+ e CD8+ foram avaliados quanto ? produ??o de IFN-?, TNF-? e IL-2. De acordo com nossos resultados, a concentra??o de DMSO, para todas as culturas celulares tratadas com o extrato etan?lico ou sua fra??o, foi definida como sendo 1% v/v para avalia??o da citotoxicidade e an?lise da produ??o de citocinas em linf?citos e de 0.5% v/v no ensaio de prolifera??o celular. Na an?lise fitoqu?mica da fra??o do extrato etan?lico foram identificados dois flavon?is nunca antes descrito na constitui??o qu?mica da planta, a 7-metil-quercetina e a Rhamnocitrina, tais compostos n?o alteraram os par?metros anti-inflamat?rios avaliados neste estudo. O extrato etan?lico, por sua vez, nas concentra??es de 6,25 e 12,5 ?g/mL reduziu significativamente a prolifera??o de linf?citos, ao mesmo tempo, nas concentra??es de 50 e 75 ?g/mL inibiu a produ??o das citocinas TNF-? e IL-2 em c?lulas CD8+, na maior concentra??o inibiu ainda a produ??o de IL-2 na popula??o de linf?citos totais. Sugere-se que o extrato etan?lico de A. fastigiatum possui componentes ativos agindo sinergicamente ou de forma isolada que contribuem para atividade anti-inflamat?ria atribu?da ? planta em seu uso na medicina popular. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa Multic?ntrico de P?s-gradua??o em Ci?ncias Fisiol?gicas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2016. / Ageratum fastigiatum (Gardner.) R. M. King et H. Rob. is a plant commonly used in the folk medicine of the Jequitinhonha Valley as anti-inflammatory and analgesic. Because of the role of the immune system and soluble inflammatory factors in the etiology and pathophysiological mechanism of various inflammatory diseases, this study aimed to investigate parameters related to the anti-inflammatory activity of the ethanol extract of A. fastigiatum and a fraction derived from this extract. The identification of the chemical constituents of the fraction of ethanol extract of A. fastigiatum was performed by High Performance Liquid Chromatography with Efficiency Diode Arrangement detectors coupled to mass spectrometry (HPLC-DAD-MS) followed by Mass Spectrometry in Tandem with electrospray ionization (ESI-MS/MS). The exclusion technique with Trypan blue was used to determine the viability of peripheral blood mononuclear cell (PBMC) cultures, previously incubated for 8, 24 and 120 hours with the ethanol extract, the fraction and the solvent dimethylsulfoxide (DMSO). In the evaluation of the proliferative profile of lymphocytes using the flow cytometry technique, PBMC stimulated with the mitogen Phytohemagglutinin (PHA) were incubated for 120 hours in the absence or presence of different non-toxic concentrations of the mentioned components. In order to analyze the production of pro-inflammatory cytokines, PBMC treated or not with different non-toxic concentrations of the ethanolic extract of A. fastigiatum, of the fraction, and of the solvent DMSO was incubated for 8 hours and stimulated with phorbol myristate acetate (PMA) in the last 4 hours. Subsequently, total lymphocytes, CD4+ and CD8+ cells were assessed for production of IFN-?, TNF-? and IL-2, using flow cytometry. According to our results, the concentration of DMSO, for all cell cultures treated with ethanolic extract and its fraction was defined as 1% v/v for evaluation of cytotoxicity and analysis of cytokine production by lymphocytes, and 0.5% v/v to be used in the cell proliferation assay. In the phytochemical analysis of the fraction of ethanol extract, were identified two flavonols never before described in the chemical constitution of the plant, 7-methyl-quercetin and Rhamnocitrina. Such compounds did not modified the anti-inflammatory parameters evaluated in this study. The ethanol extract, on the other hand, in concentrations of 6.25 and 12.5 ?g/ml significantly reduced the proliferation of lymphocytes, while at concentrations of 50 and 75 ug/mL, it inhibited the production of TNF-? and IL-2 in CD8+, in addition, at the highest concentration it inhibited IL-2 production by total lymphocytes population. It is suggested that the ethanol extract of A.fastigiatum has active components acting synergistically or separately, resulting in the anti-inflammatory activity attributed to the plant by the folk medicine.

Chlamydia abortus is the most common known infectious cause of ovine abortion worldwide but is rarely linked with bovine abortion. The reasons for this differential pathogenesis are unknown but may involve differences in innate immune recognition and immune responsiveness. This is supported by the observation that chlamydial abortion in sheep is associated with an inflammatory cytokine/chemokine cascade that is not commonly observed in cattle. Studies with other Chlamydia species have demonstrated that innate inflammatory pathways including inflammasome activation contribute to both pathogen clearance and pathology. Pattern recognition receptors (PRRs) activate these innate immune signalling pathways but are relatively poorly characterized in ruminants. We hypothesize that the ruminant hosts differ in their ability to innately sense C. abortus infection and activate the inflammasome. The main aims of this project were to: analyse PRR expression in innate immune cells; assess cytokine production from innate immune cells in response to C. abortus; investigate the role of PRRs in the induction of innate immune responses to C. abortus; and, conduct RNA-seq analysis on macrophages following infection with C. abortus to identify important immune signalling pathways. Ruminant oro-nasal turbinate cells, monocyte derived dendritic cells (MDDCs) and monocyte derived macrophages (MDMs) express the cell-surface PRRs TLR2 and TLR4 and also the intracellular PRRs NOD 1 and NLRP3. Oro-nasal turbinate cells produce CXCL8 late into the chlamydial developmental cycle independent of IL-1β. In contrast, ruminant MDMs and MDDCs secrete early IL-1β in response to C. abortus infection. In MDMs and MDDCs, live and UV-inactivated C. abortus induced TNF-α and CXCL8 but live infection was required for IL-1β secretion. Therefore, intracellular C. abortus multiplication is necessary to stimulate the IL-1β processing pathway within these cells. In order to determine PRR function, NOD1 and NLRP3 were knocked down in ruminant MDMs using siRNA. In both ovine and bovine MDMs, NOD1 was identified as a factor in C. abortus mediated IL-1β production. NLRP3 knockdown in bovine but not ovine MDMs also reduced IL-1β production, indicating species-specific differences in C. abortus recognition. The RNA-seq analysis of ruminant MDMs identified novel pathways of immune activation by C. abortus and potentially important species-specific differences. An improved understanding of the innate immune pathways activated in susceptible and resistant hosts following C. abortus infection will inform on disease pathogenesis and could contribute to novel chlamydial vaccine design.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-02-10T17:12:49Z No. of bitstreams: 1 Graciomar Conceição Costa. Aspectos clínicos... 2014.VersãoFinal.pdf: 3610942 bytes, checksum: 69bf866ea432ca7053132b77953673e0 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-02-10T17:13:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Graciomar Conceição Costa. Aspectos clínicos... 2014.VersãoFinal.pdf: 3610942 bytes, checksum: 69bf866ea432ca7053132b77953673e0 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-10T17:13:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Graciomar Conceição Costa. Aspectos clínicos... 2014.VersãoFinal.pdf: 3610942 bytes, checksum: 69bf866ea432ca7053132b77953673e0 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A hanseníase ou mal de Hansen (MH), causada pelo patógeno Mycobacterium leprae, ainda constitui um problema de saúde pública no Brasil, e em especial no Maranhão. A doença é hiperendêmica em 77 municípios do Estado. A resposta imune ao patógeno de indivíduos dessas regiões permanece obscuro podendo contribuir na manutenção da hiperendemia. Por isso, este estudo teve por objetivo caracterizar o perfil clínico-epidemiológico e imunológico de pacientes infectados por M. leprae, e de seus contatos, procedentes de área hiperendêmica. Para o desenvolvimento deste trabalho foi realizado um estudo transversal foi realizado nos municípios de Açailândia, Imperatriz e São Luís, no período 2009 a 2012. Pacientes e contatos foram clinicamente avaliados e tiveram os dados epidemiológicos coletados. Uma amostra de sangue foi obtida para realização das sorologias para detecção de anticorpos IgM anti-PGL1 pelos testes de ELISA e ML-Flow, e dosagem de citocinas e quimiocinas. A análise descritiva demonstrou que a maioria dos pacientes eram adultos, do gênero masculino, diagnosticados principalmente com as formas intermediárias da doença (60%). Incapacidades físicas foram detectadas em 35% dos casos, a maioria da forma multibacilar (MB). Os contatos de pacientes MB, em idade adulta, do sexo feminino, de convívio intradomiciliar e com parentesco de primeiro grau com os pacientes foram maioria. Anticorpos anti-PGL1 foram encontrados em 42,6% dos casos e 12% dos contatos pelo ML-Flow. E ainda em 36,8% dos casos e 12,5 % dos contatos pela técnica do ELISA. A concordância dos testes foi moderada, porém significativa (K=0,423). A soropositividade ao PGL1 está associada às variáveis epidemiológicas de casos, principalmente. Observou-se que casos e contatos apresentam alta produção de IL-17A. Pacientes MB e contatos possuem altas concentrações séricas de IL-6. Os da forma virchowiana tem reduzida produção de TGF-β1. CXCL9 e CXCL10 foram evidentes nos MB, enquanto CXCL8 estava presente em contatos. Os aspectos avaliados confirmam o caráter hiperendêmico e a manutenção de fatores de riscos para o adoecimento de contatos. O perfil imunológico observado abre perspectivas para o conhecimento e elucidação da patogenia em regiões de grande circulação do M. leprae. / Leprosy, caused by the pathogen Mycobacterium leprae, it is a public health problem in Brazil yet, especially in Maranhão. The disease is hyperendemic in 77 counties of the State. Immune response to the pathogen of individuals in these regions remains unclear and may be contributing to maintenance of high endemicity. Therefore, this study aimed to characterize epidemiological and immunological profile of patients infected with M. leprae, and their contacts, from hyperendemic regions. Cross-sectional study was accomplished in Açailândia, Imperatriz and São Luís counties, 2009-2012. Patients and contacts were clinically evaluated and had their epidemiological data collected. A blood sample was obtained for performing serological tests IgM anti-PGL1 detection by ELISA and ML-Flow and measurement of cytokines and chemokines. Descriptive analysis showed that most patients were adults, male, diagnosed with intermediate forms mainly (60%). Physical disabilities were detected in 35% of cases, most of multibacillary form (MB). The contacts were MB patients in adult age, female, household and first-degree kinship. PGL1 antibodies were found in 42.6% of cases and 12% of contacts by ML-Flow, 36.8% of cases and 12.5% of contacts by the ELISA procedure. Concordance tests was moderate but significant (K = 0.423). PGL1 seropositivity is associated with epidemiologic features of cases, mostly. It was observed that patients and contacts present high IL-17A production. MB patients and contacts have high IL-6 serum concentration. Patients with lepromatous form had reduced TGF-β1 production. CXCL9 and CXCL10 were apparent in MB, while CXCL8 was present in contacts. The evaluated aspects confirm high endemicity and maintenance of risk factors for contact illness. Immune profile observed opens perspectives to understanding and elucidation of pathogenesis in regions where M. leprae has large circulation.

A doença periodontal é um processo inflamatório crônico local em resposta ao acúmulo de biofilme bacteriano; porém, nas últimas décadas tem-se observado uma atenção maior aos efeitos sistêmicos da mesma. Estes efeitos sistêmicos podem acarretar em um aumento no risco à doença cardiovascular. As citocinas, as quais são produzidas pela resposta imunológica do hospedeiro, podem ser importantes marcadores da doença periodontal e das doenças cardiovasculares. Este estudo objetivou avaliar a associação entre condição periodontal e citocinas sanguíneas em pacientes com doença arterial coronariana crônica. Foi realizado um estudo observacional transversal no qual foram incluídos 89 pacientes com doença arterial coronariana que estavam sob cuidados cardiovasculares por no mínimo 6 meses. Amostras sanguíneas foram coletadas para mensuração dos níveis sistêmicos das citocinas IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-γ e TNF-α através da plataforma Multiplex. Foram realizados exames periodontais (seis sítios por dente em toda a boca) para registro da profundidade de sondagem (PS) e perda de inserção (PI). Modelos de regressão linear múltipla ajustado para gênero, índice de massa corporal e fumo foram usados para associação entre diversos parâmetros clínicos periodontais e níveis sistêmicos das citocinas individualmente. Observamos associação entre PS e PI com IFN-γ, TNF-α e IL-10. Número de dentes com PI e PS ≥6mm foram significativamente associados com maiores concentrações de IFN-γ. Média de PI e PS foram significativamente relacionadas com IL-10. Concentrações mais elevadas de TNF-α foram associadas com a média de PI. Pode-se concluir que pior condição periodontal é associada com maiores níveis de inflamação sistêmica em pacientes cardiopatas. Estes achados provém adicional evidência para suportar a doença periodontal como um provável fator de prognóstico em pacientes cardiopatas crônicos. / Periodontal disease is a chronic inflammatory disease resulting from dental biofilm deposition. However, in recent decades it has been observed an increased attention to the systemic effects of periodontal inflammation and destruction. This systemic effect could be associated to increased risk for cardiovascular diseases. Cytokines, which are produced by the host response, could be important predictors in periodontal disease and cardiovascular disease. The aim of this study was to assess the association between periodontal disease and low-grade inflammatory blood markers in stable coronary artery disease (CAD) patients. 89 patients under cardiovascular care for at least 6 months were included in this cross-sectional study. Blood levels of cytokines IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-y and TNF-α were measured using the Multiplex technology. A full-mouth six sites per tooth periodontal examination was conducted to record probing depth (PD) and clinical attachment loss (CA loss). Multiple linear regression models adjusting for gender, body mass index and smoking were used to study the association between periodontal status and log levels of cytokines. Significant associations between periodontal parameters and IFN-γ, IL-10 and TNFα were observed. Higher numbers of teeth with CA loss and PD ≥6 mm were significantly associated with higher concentrations of IFN-γ. Mean CA loss and PD were significantly related to IL-10. Elevated concentrations of TNF-α were associated with higher mean CA loss. It can be concluded that periodontal disease is associated with increased systemic inflammation in cardiovascular patients. These findings provide additional evidence for supporting periodontal disease as a prognostic factor in cardiovascular patients.

Made available in DSpace on 2016-12-23T13:53:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mirleide Araujo Cao.pdf: 870646 bytes, checksum: 38058144332685f382d8fc1e54996244 (MD5) Previous issue date: 2013-07-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The autohemotherapy (AH), used for more than 30 years is an old procedure that in recent years, are among the studies that involve human and veterinary medicine. The AH stimulating the proposal of increasing macrophages in order to combat bacteria, viruses and cancer cells. For stimulation of the reticuloendothelial system, bone marrow produces more monocytes that will colonize the tissues and given the name macrophage. For this reason, the Tnf-alpha was quantumly tested to evaluate the defense system in rats that could be used or not, as an alternative to contribute to immunogenicity and protection levels in pets. Among the important cintocinas is the tumoral necrosis factor-alpha (TNF-α), which is secreted by macrophages, T cells, B cells and fibroblasts, and can act on almost all nucleated cells. It is also a mediator of many inflammatory and immune functions, which regulates the growth of many cell types. For the evaluation were used 16 healthy rats, Wistar, with the same weights and ages. The animals were divided into two groups with eight animals each, being the G1 the control group (physiological saline) and G2 the AH group. All animals had their blood collected for laboratory analysis before any procedure. Blood was collected for laboratory analysis to determine the levels of TNF-α and CBC. For quantitation of TNF-α was used ELISA kit (-linked immunosorbent assay) b100784 Rat TNF-α and the color intensity was measured at 450 nm. When evaluating this work the values of Tumor Necrosis Factor (TNF-α) present, as well as WBC of rats submitted to two AH procedures. The results show that there is increased TNF-α after application of HA and the number of lymphocytes and monocytes in the moment M2 also increases with a reduction in the production of cell M3. Based on the data obtained in this work, there were changes in the levels of TNF-α, the increase is evident 8 hours 7 days after the procedure AH. In the WBC is increased number of cells, such as lymphocytes and monocytes 8 hours 7 days after application of HA / A auto-hemoterapia (AH), utilizada a mais de 30 anos é um procedimento antigo que nos últimos anos, está entre aos estudos que envolvem a medicina humana e veterinária. Ela tem a proposta de estimular o aumento dos macrófagos de modo a combater bactérias, vírus e células cancerosas. Pelo estimulo do sistema retículoendotelial, a medula óssea produz mais monócitos que vão colonizar os tecidos orgânicos e recebem então a denominação de macrófago. Por esta razão foi testado quatificamente o Tnf-α para avaliar o sistema de defesa em ratos que poderia ser empregado, como uma alternativa para contribuir com a imunogenicidade e niveis de proteção em animais de companhia. O TNF-α quando liberado em baixas concentrações age nas células endoteliais promovendo vasodilatação, estimulando a secretarem um grupo de citocinas que tem ação quimiotáxica em relação aos leucócitos, promovendo, um processo inflamatório local que possibilita o combate a quadros infecciosos. Foram serão utilizados 16 ratos hígidos, da linhagem Wistar, de peso médio e idades iguais. Os animais foram divididos em dois grupos experimentais, G1 o grupo controle e G2 o grupo AH. Foram retirados sague para realização do Leucograma, teste de Elisa e da Autohemoterapia, antes da aplicação (M1), 8 horas após aplicação (M2) e 7 dias após aplicação (M3). Para quatificação de TNF-α foi utilizado o kit de ELISA, e a intensidade da cor foi medido a 450 nm. Ao se avaliar nesse trabalho os valores de Fator de Necrose Tumoral (TNF-α) presente, bem como o leucograma de ratos submetidos a dois procedimentos de AH, os resultados revelaram que há um aumento na produção de TNF-α, após a aplicação da AH e que o número de linfócitos e monócitos também aumenta nos momento M2, com uma uma redução na produção de células em M3. Com base no conjunto de dados obtidos neste trabalho, houve alteração nos níveis de TNF-α, com aumento 8 horas e 7 dias após o procedimento de AH. Em relação ao leucograma há aumento do número de células, como os linfócitos e monócitos 8 horas e 7 dias após a aplicação da AH / A auto-hemoterapia (AH), utilizada a mais de 30 anos é um procedimento antigo que nos últimos anos, está entre aos estudos que envolvem a medicina humana e veterinária. Ela tem a proposta de estimular o aumento dos macrófagos de modo a combater bactérias, vírus e células cancerosas. Pelo estimulo do sistema retículoendotelial, a medula óssea produz mais monócitos que vão colonizar os tecidos orgânicos e recebem então a denominação de macrófago. Por esta razão foi testado quatificamente o Tnf-α para avaliar o sistema de defesa em ratos que poderia ser empregado, como uma alternativa para contribuir com a imunogenicidade e niveis de proteção em animais de companhia. O TNF-α quando liberado em baixas concentrações age nas células endoteliais promovendo vasodilatação, estimulando a secretarem um grupo de citocinas que tem ação quimiotáxica em relação aos leucócitos, promovendo, um processo inflamatório local que possibilita o combate a quadros infecciosos. Foram serão utilizados 16 ratos hígidos, da linhagem Wistar, de peso médio e idades iguais. Os animais foram divididos em dois grupos experimentais, G1 o grupo controle e G2 o grupo AH. Foram retirados sague para realização do Leucograma, teste de Elisa e da Autohemoterapia, antes da aplicação (M1), 8 horas após aplicação (M2) e 7 dias após aplicação (M3). Para quatificação de TNF-α foi utilizado o kit de ELISA, e a intensidade da cor foi medido a 450 nm. Ao se avaliar nesse trabalho os valores de Fator de Necrose Tumoral (TNF-α) presente, bem como o leucograma de ratos submetidos a dois procedimentos de AH, os resultados revelaram que há um aumento na produção de TNF-α, após a aplicação da AH e que o número de linfócitos e monócitos também aumenta nos momento M2, com uma uma redução na produção de células em M3. Com base no conjunto de dados obtidos neste trabalho, houve alteração nos níveis de TNF-α, com aumento 8 horas e 7 dias após o procedimento de AH. Em relação ao leucograma há aumento do número de células, como os linfócitos e monócitos 8 horas e 7 dias após a aplicação da AH. Palavras-chave: Animais; Citocina; Sistema Imune. 9 ABSTRAT Araújo Cáo, Mirleide. Assessment of levels of tumor necrosis factor (TNF-α) and leucocyte count in rats (Rattus norvegicus) after procedure autohemotherapy. In 2013. 42p. Dissertation (Master in Veterinary Science) - Center for Agricultural Sciences, Federal University of Espírito Santo, Alegre, ES, 2013. A auto-hemoterapia (AH), utilizada a mais de 30 anos é um procedimento antigo que nos últimos anos, está entre aos estudos que envolvem a medicina humana e veterinária. Ela tem a proposta de estimular o aumento dos macrófagos de modo a combater bactérias, vírus e células cancerosas. Pelo estimulo do sistema retículoendotelial, a medula óssea produz mais monócitos que vão colonizar os tecidos orgânicos e recebem então a denominação de macrófago. Por esta razão foi testado quatificamente o Tnf-α para avaliar o sistema de defesa em ratos que poderia ser empregado, como uma alternativa para contribuir com a imunogenicidade e niveis de proteção em animais de companhia. O TNF-α quando liberado em baixas concentrações age nas células endoteliais promovendo vasodilatação, estimulando a secretarem um grupo de citocinas que tem ação quimiotáxica em relação aos leucócitos, promovendo, um processo inflamatório local que possibilita o combate a quadros infecciosos. Foram serão utilizados 16 ratos hígidos, da linhagem Wistar, de peso médio e idades iguais. Os animais foram divididos em dois grupos experimentais, G1 o grupo controle e G2 o grupo AH. Foram retirados sague para realização do Leucograma, teste de Elisa e da Autohemoterapia, antes da aplicação (M1), 8 horas após aplicação (M2) e 7 dias após aplicação (M3). Para quatificação de TNF-α foi utilizado o kit de ELISA, e a intensidade da cor foi medido a 450 nm. Ao se avaliar nesse trabalho os valores de Fator de Necrose Tumoral (TNF-α) presente, bem como o leucograma de ratos submetidos a dois procedimentos de AH, os resultados revelaram que há um aumento na produção de TNF-α, após a aplicação da AH e que o número de linfócitos e monócitos também aumenta nos momento M2, com uma uma redução na produção de células em M3. Com base no conjunto de dados obtidos neste trabalho, houve alteração nos níveis de TNF-α, com aumento 8 horas e 7 dias após o procedimento de AH. Em relação ao leucograma há aumento do número de células, como os linfócitos e monócitos 8 horas e 7 dias após a aplicação da AH.

Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2017-02-20T12:35:56Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2158020 bytes, checksum: 21163425bf778a5e7dcea450996ed689 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-20T12:35:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2158020 bytes, checksum: 21163425bf778a5e7dcea450996ed689 (MD5) Previous issue date: 2016-11-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic pathogen ubiquitous often associated with individuals with pathologies that cause immunodeficiency, such as cystic fibrosis. This pathogen synthetizes a typical greenish-blue pigment, the pyocyanin, which represents its major virulence factor, inducing the generation of reactive oxygen species by host cells, in addition to inflammation in several tissues and neutrophil apoptosis. However, the protocols used to study these effects are distinct from each other and the pyocyanin mechanism of action in acute inflammation processes is unknown. The aim of this work was to understand the interactions between pyocyanin and acute inflammatory processes, evaluating in vitro effect of pyocyanin on cell viability and nitric oxide, interleukin (IL)-1β, and tumor necrosis factor (TNF)-α production by lipopolysaccharide-activated mice peritoneal macrophages. In addition, the in vivo effect of pyocyanin on zymosan-induced peritonitis in mice was evaluated. Our results show that pyocyanin 50 or 100 μM induced cell death about 90 and 95 % (p < 0.0001), respectively, while pyocyanin 1, 5, or 10 μM was not able to affect cell viability. The pigment at 5 or 10 μM reduced nitric oxide production about 26 % (p < 0.05) and 51 % (p < 0.0001), respectively, in addition to reducing IL-1β (38 %, p < 0.001) and TNF-α (48 %, p < 0.001) levels in macrophages treated with pyocyanin 5 μM. In the in vivo model, pyocyanin 5 mg/kg has not affect leukocyte migration to the inflammation site. The pyocyanin-induced reduction of nitric oxide, IL-1β, and TNF-α levels may be a pathogen-friendly escape mechanism, reducing the host's immune response at the concentrations evaluated in this work. This effect seems to be independent of interference in cell migration. / A Pseudomonas aeruginosa é um bacilo ubíquo oportunista frequentemente associado à indivíduos portadores de patologias que causam imunodeficiência, como a fibrose cística. Essa bactéria produz um pigmento típico, a piocianina, que representa o seu fator de virulência majoritário, induzindo a geração de espécies reativas de oxigênio por células do hospedeiro, além de induzir a inflamação em vários tecidos e a apoptose em neutrófilos. No entanto, os protocolos utilizados para a observação desses efeitos são distintos entre si e não se conhece o mecanismo de ação da piocianina em processos de inflamação aguda. O objetivo desse trabalho foi compreender as interações entre a piocianina e os processos inflamatórios agudos, avaliando in vitro o efeito da piocianina na viabilidade celular e na produção de óxido nítrico, interleucina (IL)-1β e fator de necrose tumoral (TNF)-α por macrófagos peritoneais de camundongo ativados por lipopolissacarídeo. Em adição, foi avaliado in vivo o efeito da piocianina no modelo de peritonite induzida por zimosan em camundongo. A piocianina nas concentrações de 50 ou 100 μM induziu a morte celular em 90 e 95% (p < 0,0001), respectivamente, enquanto a piocianina nas concentrações de 1, 5 ou 10 μM não foi capaz de afetar a viabilidade celular. O pigmento nas concentrações de 5 ou 10 μM reduziu a produção do óxido nítrico em 26 % (p < 0.05) e 51 % (p < 0.0001), respectivamente, além de diminuir os níveis da IL-1β (38 %, p < 0,001) e do TNF-α (48 %, p < 0,001) em macrófagos tratados com a piocianina na concentração de 5 μM. No modelo in vivo, a piocianina na dose de 5 mg/kg não interferiu na migração dos leucócitos para o sítio da inflamação. A redução nos níveis do óxido nítrico, da IL-1β e do TNF-α induzida pela piocianina pode ser um mecanismo de fuga favorável ao patógeno, capaz de reduzir a resposta inflamatória do hospedeiro nas concentrações avaliadas nesse trabalho, e esse efeito parece ser independente da interferência na migração celular.

Interaction between mouse dendritic cells (DCs) and Borrelia afzelii spichochetes was studied on three different levels: phagocytosis of borrelia by DCs, production of cytokines by borrelia-activated DCs and the ablilty of DCs to activate CD4+ T cells. The effect of Ixodes ricinus saliva on each of these levels was examined. Tick saliva was shown to decrease the number of phagocosing DCs. The ability of borrelia-activated DCs to induce both proliferation and IL-2 production in specific CD4+ T cells was significantly reduced by tick saliva. And surprisingly, we have shown an inhibitory effect of I. ricinus saliva on the production of both Th1 (IL-6 and TNF-{$\alpha$}) and Th2 (IL-10) cytokines. Our data reveal a complex inhibitory effect of tick saliva on DC function.