Nas últimas décadas tem havido uma grande preocupação com os níveis de poluição ambiental, uma vez que esta tem causado problemas relativos à saúde humana e perdas significativas (de 5 a 30%) na produção agrícola. Poluentes atmosféricos como CO e SO2 são gerados pelas atividades humanas e industriais. A poluição por metais pesados, particularmente pelo cádmio (Cd), considerado um dos mais tóxicos é gerada principalmente pelas atividades de mineração e industriais, (manufatura de baterias, produção de fertilizantes, estabilização de plásticos), além de utilização de lodo de esgoto e fertilizantes fosfatados. Esses últimos contém o Cd em sua composição e sua utilização na agricultura tem aumentado a concentração desse metal no solo, plantas e reservas hídricas, o que pode aumentar a bioacumulação e biomagnificação via cadeia alimentar. Os estudos relativos aos poluentes atmosféricos estão mais evoluídos quando comparados aqueles com metais pesados, embora estes tenham sido bastante estudados nos últimos anos. Por exemplo, um estudo realizado pelo CENA determinou que o nível de Cd no Rio Piracicaba é cerca de 10 vezes mais alto que o nível máximo aceitável. Existe, porém, a necessidade de intensificar pesquisas e determinar respostas gerais e específicas em diferentes culturas, bem como concentrações toleráveis no solo e alimentos. Foi identificado um grupo de peptídeos denominados fitoquelatinas (PCs), capazes de se ligar aos íons de metais pesados, incluindo o Cd e assim desintoxicando as células pela diminuição dos íons livres no citoplasma. Entretanto, danos oxidativos freqüentemente ocorrem quando há exposição aos metais pesados, devido a intensificação na produção de espécies ativas de oxigênio (EAOs). Também uma classe de enzimas antioxidantes tem sido relatada no combate às EAOs e radicais livres decorrentes do estresse oxidativo. Plantas expostas aos metais pesados apresentam alterações nas atividades dessas enzimas. Portanto o estudo dessas alterações pode fornecer dados importantes relativos aos níveis de tolerância, especificidade da resposta em diferentes espécies e níveis de poluição no ambiente. Esses dados podem ser úteis em programas de melhoramento para obtenção de plantas mais tolerantes, além de estudos relacionados a bioacumulação e fitorremediação, uma vez que plantas tolerantes podem ajudar a diminuir a quantidade de metais nos solos contaminados. Neste trabalho, foram observadas alterações na atividade da CAT em plântulas e calos e na atividade da GR em plântulas, onde ocorreu um aumento expressivo. A atividade da SOD não apresentou alterações significativas em nenhum dos tecidos analisados. Estes resultados sugerem que o mecanismo principal para a defesa no estresse por Cd foi o aumento na síntese de GSH para uma conseqüente indução de fitoquelatinas, ou ação antioxidante direta da própria GSH. E ainda que a geração de radicais superóxido não foi significativamente aumentada ou que o nível basal de SOD tenha sido suficiente para combater os radicais eventualmente gerados. Em calos é provável que o principal mecanismo antioxidante mobilizado foi a indução do aumento na atividade da CAT. / ln the last for decades there has been a great deal of concern with environmental pollution levels, due to the suported problems to human healt and decrease ( 5 a 30%) in agricultural yield. .Atmospheric pollutants such as CO AND S02, are produced by human and industrial activities. Heavy metal pollution mainly by cadmium (Cd), which is considered one of the more toxic, is generated by mining and industrial activities, and sewage sludge and phosphated fertilizers used in agriculture. The latter contains Cd in its composition and with continuous agricultural utilization an increase in the heavy metals levels in soils, plants and water sources, has been observed which may contribute for the bioaccumulation and biomagnification in the food chain. The studies with atmospheric pollutants are more advanced when compared to the studies with heavy metals, although there has been a marked increase in the studies with heavy metals in the last few years. For example, a study carried out by CENA showed that the Cd level in the Piracicaba river is about ten-fold higher than the accepted level. However, research must be intensified in order to establish specific e general responses to the metals by different crops plants as well as a maximum acceptable concentration in the soil and food. A group of peptides termed phytochelatins (PCs) has been identified and are capable of binding heavy metal ions, includind Cd, detoxifying the cells by the reduction of free ions in the cytosol. However, oxidative damage often occurs due to the generation of oxygen reative species induced by heavy metals. A class of antioxidant enzymes has been reported for the scavenging of the oxigen reative species. Plants exposed to heavy metals may exhibit alteration the enzyme activity. The study of such a response may allow to evaluate levels of tolerance, specificity of response by distinct plant species and levels of pollution in the environment. These data may be useful in breeding o\programs to select tolerant plants. Moreover, tolerant plants may be used in phytorremediation, by reducing the amount of heavy metals in the contaminated soils. In this study, it was observed alterations in CAT activity in seedlings and callus and an expressive increase in GR activity in sugar cane seedlings. SOD activity was unaltered in all tissues analysed. The results suggest that in sugar cane the main defence system to the Cd stress is possibly the synthesis of GSH to be used in the synthesis of phytochelatins.

Estabeleceu-se um sistema rápido para regeneração de plantas a partir de protoplastos derivados de calos primários de dois cultivares de arroz brasileiros, IAC-165 e IAC-201. Após uma série de experimentos em indução de calos, foi possível produzir uma quantidade suficiente de calos embriogênicos derivados de semente nos meios B5 (GAMBORG et al, 1968) e N6 (CHU, 1978) suplementados com 2 e 4 mg/l de 2,4-D, acrescidos de 576 e 288 mg/l de L-prolina para os cultivares IAC-165 e IAC-201, respectivamente. Os calos embriogênicos primários derivados de sementes foram utilizados para isolamento direto de protoplastos ou para o início de suspensões celulares. Linhagens de células em suspensão foram estabelecidas para ambos cultivares sendo capazes de produzir uma grande quantidade de protoplastos em 4 a 6 meses. Os protoplastos derivados de calos induzidos a partir de sementes foram plaqueados em blocos de agarose e formaram colônias embriogênicas, visíveis ao olho nu, em 15 a 16 dias após o plaqueamento. Este tipo de colônia formou pequenos calos que foram plaqueados em meio de regeneração. Mais de 100 plantas foram regeneradas, sendo 22,2%. O presente sistema possibilitará fazer-se transformação genética em não mais do que 120 dias. Isto torna o sistema mais rápido do que o sistema tradicional de obtenção de protoplastos derivados de suspensões celulares e, devido a isto, torna-o competitivo com a biolística. Existem somente dois trabalhos que relatam a regeneração de plantas a partir de protoplastos derivados de calos primários, ambos usaram calos embriogênicos induzidos a partir de embriões imaturos. O presente trabalho relata, pela primeira vez, a regeneração de plantas de cultivares de arroz brasileiros utilizando sementes para a indução de calos. / not available

O objetivo deste trabalho foi estudar as condições biotecnológicas, para a indução de calos de Pfaffia glomerata e a produção de saponinas. Foram realizadas análises químicas (determinação de saponinas totais) em calos e culturas de suspensão de células derivados de explantes radiciais e caulinares, com a finalidade de verificar se compostos secundários são produzidos in vitro. Para avaliar o efeito de auxinas e citocininas no crescimento de calos e produção de saponinas, foram analisadas várias combinações de 2,4-D x CIN (mg/L), sendo que 1,0 x 0,5 apresentou os melhores resultados. A luz influenciou pouco a produção de saponinas pelos calos, sendo que no escuro a produção foi de 3,81% e no claro 3,49%. Alta concentração de sacarose (60 g/L) aumentou o conteúdo de saponinas totais (5,92%); também glicose foi efetiva para produzir compostos secundários (5,46%) / not available

O objetivo deste trabalho foi estudar as condições biotecnológicas, para a indução de calos de Pfaffia glomerata e a produção de saponinas. Foram realizadas análises químicas (determinação de saponinas totais) em calos e culturas de suspensão de células derivados de explantes radiciais e caulinares, com a finalidade de verificar se compostos secundários são produzidos in vitro. Para avaliar o efeito de auxinas e citocininas no crescimento de calos e produção de saponinas, foram analisadas várias combinações de 2,4-D x CIN (mg/L), sendo que 1,0 x 0,5 apresentou os melhores resultados. A luz influenciou pouco a produção de saponinas pelos calos, sendo que no escuro a produção foi de 3,81% e no claro 3,49%. Alta concentração de sacarose (60 g/L) aumentou o conteúdo de saponinas totais (5,92%); também glicose foi efetiva para produzir compostos secundários (5,46%) / not available

Estabeleceu-se um sistema rápido para regeneração de plantas a partir de protoplastos derivados de calos primários de dois cultivares de arroz brasileiros, IAC-165 e IAC-201. Após uma série de experimentos em indução de calos, foi possível produzir uma quantidade suficiente de calos embriogênicos derivados de semente nos meios B5 (GAMBORG et al, 1968) e N6 (CHU, 1978) suplementados com 2 e 4 mg/l de 2,4-D, acrescidos de 576 e 288 mg/l de L-prolina para os cultivares IAC-165 e IAC-201, respectivamente. Os calos embriogênicos primários derivados de sementes foram utilizados para isolamento direto de protoplastos ou para o início de suspensões celulares. Linhagens de células em suspensão foram estabelecidas para ambos cultivares sendo capazes de produzir uma grande quantidade de protoplastos em 4 a 6 meses. Os protoplastos derivados de calos induzidos a partir de sementes foram plaqueados em blocos de agarose e formaram colônias embriogênicas, visíveis ao olho nu, em 15 a 16 dias após o plaqueamento. Este tipo de colônia formou pequenos calos que foram plaqueados em meio de regeneração. Mais de 100 plantas foram regeneradas, sendo 22,2%. O presente sistema possibilitará fazer-se transformação genética em não mais do que 120 dias. Isto torna o sistema mais rápido do que o sistema tradicional de obtenção de protoplastos derivados de suspensões celulares e, devido a isto, torna-o competitivo com a biolística. Existem somente dois trabalhos que relatam a regeneração de plantas a partir de protoplastos derivados de calos primários, ambos usaram calos embriogênicos induzidos a partir de embriões imaturos. O presente trabalho relata, pela primeira vez, a regeneração de plantas de cultivares de arroz brasileiros utilizando sementes para a indução de calos. / not available

JEREISSATI, E. S. Indução, isolamento e caracterização de linhagens de calos de feijão-de-corda (Vigna unguiculata), 2008, 98 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2008. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2015-01-15T18:45:03Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_esjereissati.pdf: 1977738 bytes, checksum: 07766ffc1c0c530a367f7b10a522a973 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-01-15T20:12:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_esjereissati.pdf: 1977738 bytes, checksum: 07766ffc1c0c530a367f7b10a522a973 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-15T20:12:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_esjereissati.pdf: 1977738 bytes, checksum: 07766ffc1c0c530a367f7b10a522a973 (MD5) Previous issue date: 2008 / Somatic embryogenesis is the process by which somatic plant tissues gives rise to plant embryos under inductors conditions. Somatic embryogenesis represents the most commonly employed tool in commercial propagation of plants. In recent times, genes involved in the process have been identified, partucularly those involved in the maintenance of meristems and pattern formation. There are genes which, when ectopically expressed, can induce the formation of somatic embryos. In cowpea, there are few reports on somatic embryogenesis. In addition, the reports on the process recorded a very low frequency and a complicated system of regeneration involving several steps. This work attempted to isolate callus lines of cowpea and establish an ideal culture condition necessary for their maintenance. Histological analysis was conducted to characterize the isolated lines of callus anatomically. From the four lines obtained, 3 presented cells exhibiting the charactersitc embryogenic potential and of this, Line 2 actually gave rise to embryogenic structures when cultured in liquid media. The lines of callus were maintained in cultured condition for over a year without loss of their characteristics. Experiments that monitored the growth of cell suspension from the callus revealed that five days is the best period for subculture of the cells. Regeneration experiments in cowpea will find the different callus lines isolated in this work useful in the attempt to optimize the different strategies of regeneration of the crop in vitro. / Embriogênese Somática é o processo pelo qual, tecidos somáticos vegetais dão origem a embriões de plantas sob condições indutivas. A embriogênese somática é atualmente a ferramenta mais empregada para a propagação de plantas em escala comercial. Recentemente foram identificados alguns genes envolvidos no processo. Alguns desses genes estão envolvidos com a manutenção do meristema, outros estão envolvidos com a formação de padrão. Existem genes que quando expressos ectopicamente podem induzir a formação de embriões somáticos. Existem poucos trabalhos na literatura sobre a embriogênese somática em feijão-de-corda. Além disso, esses trabalhos apresentam uma freqüência de regeneração pequena e um complicado sistema de regeneração que envolve muitas etapas. O objetivo deste trabalho foi isolar linhagens de calos embriogênicos de feijão-de-corda e estabelecer as condições de cultivo ideais para estes calos. Análises histológicas foram utilizadas para a caracterização anatômica das linhagens de calos isolados. Das 4 linhagens de calos isolados três apresentam células com características de células embriogênicas, sendo que apenas a linhagem 2 deu origem a estruturas embriogênicas em suspensão celular. Essas linhagens de calos foram subcultivadas por mais de um ano sem perder as suas características. Os experimentos de crescimento das suspensões celulares mostraram que as suspensões devem ser subcultivados em períodos de 5 dias. Os próximos trabalhos que envolvam a regeneração em feijão-de-corda devem trabalhar com essa linhagem de calo facilmente isolável e altamente estável em cultura.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:42:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1076965 bytes, checksum: 39f371186cedd4587ea0ad27b341a26b (MD5) Previous issue date: 2012-07-16 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The anther culture has been applied in tomato as an attempt to induce callogenesis followed by regeneration of haploid and doubled haploid plants. By this technique, homozygous lines can be obtained, which has been considered relevant to breeding programs and molecular techniques. The androgenetic response can be influenced by several factors, especially the development stage of microsporogenesis. In this perspective, this study adapted a protocol by associating of flow cytometry and cytogenetic techniques in order to relate the development stages of microsporogenesis in tomato anthers to their size, aiming to select anthers profiles to be inoculated into culture medium. After a flow cytometry protocol was adapted for calli obtained in vitro, in order to monitor the DNA ploidy level. The nuclear suspensions analyzed by flow cytometry were obtained from digestion of anther cells and further homogenization using a mini mixer. The histograms showed low CV s, being considered suitable for cytometric analysis. Thus, anthers small (0.5 0.7 mm), showing cells in interphase/prophase I, exhibited a histogram profile similar to that observed in diploid leaf, and anthers large (1.6 1.9 mm), containing tetrad and microspores, showed an haploid peak and a G2 peak enlarged due to the presence of tetrads. From these analyzes, anthers of flower buds 1 5 mm, with size corresponding to those analyzed by flow cytometry and cytogenetics (0.5 1.9 mm), were inoculated in the callogenesis induction medium, to identify the phases more responsive to the condition in vitro. The basal MS medium supplemented with 2 mg L-1 AIA and 1 mg L-1 2 ip, induced 21.7% of callogenesis, and the highest percentage of calli was obtained from anthers of flower buds 2.0 3.9 mm, corresponding to the phases prophase I to anaphase II. The calli were analyzed by flow cytometry to identify the DNA ploidy. The chopping performed on calli afforded the nuclei isolation, and histograms with CV s considered suitable were obtained. The cytometric analysis revealed that the all calli were multiploids, each of which presented one of five classes of DNA ploidy levels, namely: 2C-4C-8C-16C; 2C-4C-8C-16C-32C; 4C-8C; 4C-8C-16C; 8C-16C-32C. A total of 44.4% of calli analyzed showed five levels of DNA ploidy. A statistical test of interaction showed that the size of flower buds had no effect on polyploidization occurred in the calli. These data evidence the somaclonal variation occurrence, which, probably, results from the interaction of genotype with growth regulators added to the induction medium. / A cultura de anteras tem sido aplicada em tomate como tentativa à indução de calogênese seguida da regeneração de plantas haplóides e duplo-haplóides. Por meio desta técnica, linhas homozigóticas podem ser obtidas, o que tem sido considerado relevante para programas de melhoramento e técnicas moleculares. A resposta androgenética pode ser influenciada por diversos fatores, destacando-se, dentre eles, o estádio de desenvolvimento da microsporogênese. Nesta perspectiva, este estudo adaptou um protocolo associando técnicas de citometria de fluxo e citogenética para relacionar as fases de desenvolvimento da microsporogênese em anteras de tomate com o tamanho das mesmas. O objetivo desta associação foi selecionar perfis de anteras a serem inoculadas em meio de cultura. Posteriormente, adaptou-se um protocolo de citometria de fluxo para os calos obtidos in vitro, a fim de monitorar o nível de ploidia de DNA. As suspensões nucleares analisadas pela citometria de fluxo foram obtidas com digestão das anteras e posterior homogeneização das células usando um mini mixer. Os histogramas obtidos mostraram baixos CV s, sendo considerados adequados para a análise citométrica. Dessa forma, anteras pequenas (0,5 0,7 mm), na fase de intérfase/prófase I, apresentaram um perfil de histograma semelhante ao observado em folha diplóide, e anteras grandes (1,6 1,9 mm) na fase de tétrades e micrósporos apresentaram um pico haplóide e um aumento em G2 em função da presença de tétrades. A partir destas análises, as anteras de botões florais de 1 5 mm, com tamanho correspondente aos daquelas analisadas por citometria de fluxo e citogenética (0,5 1,9 mm) foram inoculadas em meio de indução de calogênese, visando identificar as fases mais responsivas a esta condição in vitro. O meio MS basal, suplementado com 2 mg L-1 de AIA e 1 mg L-1 de 2 ip, induziu 21,7% de calogênese, e o maior percentual de calos foi obtido a partir de anteras de botões florais com 2,0 3,9 mm, correspondendo às fases prófase I a anáfase II. Os calos foram analisados pela citometria de fluxo a fim de identificar a ploidia de DNA. O chopping realizado nos calos proporcionou o isolamento dos núcleos, e histogramas com CV s considerados adequados foram obtidos. A análise citométrica evidenciou que todos os calos eram multiplóides, sendo que cada um apresentou uma das cinco classes de níveis de ploidia de DNA, a saber: 2C-4C-8C-16C; 2C-4C-8C-16C-32C; 4C-8C; 4C-8C-16C; 8C-16C-32C. Um total de 44,4% dos calos analisados apresentaram cinco níveis de ploidia de DNA. Um teste estatístico de interação mostrou que o tamanho dos botões florais não influenciou na poliploidização ocorrida nos calos. Estes dados evidenciam a ocorrência de variação somaclonal que, provavelmente, é resultado da interação do genótipo com os reguladores de crescimento acrescidos ao meio de indução.

Neste estudo concernente ao paricá (Schizolobium amazonicum), objetivou-se avaliar a interação entre diferentes fontes de explantes e a concentração de fitorreguladores sobre a indução de calos, por meio da abordagem de modelos de regressão linear generalizados. Os explantes foram extraídos de plântulas germinadas in vitro. Foram utilizados os segmentos apical, cotiledonar, nodal e de raiz para indução com 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) de 0,0 a 2,1 mg L-1 e, foi ainda testado o segmento hipocotiledonar para a indução com a combinação de ácido indol-3-butírico (AIB) e 6-benzilaminopurina (BAP), ambos de 0,0 a 1,0 mg L-1. Foi utilizado o meio Woody Plant Medium (WPM) acrescido de 0,3% de sacarose, 0,1% de polivinilpirrolidone (PVP) e 0,6% de ágar. Os parâmetros avaliados foram o percentual de calos, o percentual de cobertura do explante por calos e a razão da massa seca pela massa fresca. Como resultados, obteve-se 100% de calogênese nos explantes em contato com as menores concentrações aplicadas, exceto os segmentos de raiz. Também se reporta que as maiores chances de cobertura por calos foram observadas no explante nodal, tendo-se utilizado 2,4-D, e no explante cotiledonar, ao se empregar a combinação de AIB com BAP. Os modelos ajustados selecionados se mostraram uma boa alternativa de inferência por permitirem a avaliação e estudo de variáveis independentes com distribuição diferente da normal. / In this study concerning the parica (Schizolobium amazonicum), it was aimed to evaluate the interaction among different explant sources and plant growth regulators concentration on callus induction, through the approach of generalized linear models. The explants were extracted from seedlings germinated in vitro. Apical, cotyledon, root and nodal segments were used for induction with 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) from 0,0 to 2,1 mg L-1 and, was still tested hypocotyledonary segments for induction with indol-3-butyric acid (IBA) and 6-benzylaminopurine (BAP) combined from 0,0 to 1,0 mg L-1. It was used Woody Plant Medium (WPM) supplemented with 0,3% sucrose, 0,1% polyvinylpyrrolidone (PVP) and 0,6% agar. It was evaluated the callus percentage, the explant coverage percentage by callus and the ratio of dry mass by fresh mass. As a result, it was obtained 100% callus formation in that explants in contact with the lower concentrations applied, except for the root segments. It also reports that the higher chances of callus coverage were observed at the nodal explant, having been used 2,4-D, and the cotyledon explants, by using the IBA with BAP combination. The adjusted models selected proved itself a good inference alternative for allowing the evaluation and study of independent variables with distribution other than normal.

A teca (Tectona grandis L. f) é uma espécie lenhosa originária da Ásia que possui grande interesse econômico devidos as características nobres de sua madeira. Muito usada para construção de embarcações e móveis de luxo para exposição em ambientes abertos, seu consumo tem aumentado a cada ano, principalmente nos países produtores. Com a pressão das políticas ambientais sobre o uso da madeira de espécies nativas, a teca se mostra uma ótima alternativa para o mercado de madeira serrada. Contudo, a produção comercial desta espécie encontra algumas barreiras, sendo a principal delas, a propagação de matrizes adultas cujas características se adequam ao manejo silvicultural. Para possibilitar a reprodução fiel das árvores selecionadas e, para se realizar o rejuvenescimento do material adulto procedente dessas matrizes, faz-se uso de algumas técnicas, sendo uma delas, o uso da cultura de tecidos. Uma maneira bastante considerada no processo de rejuvenescimento e obtenção de mudas de espécies agrícolas e florestais é a formulação de protocolos de embriogênese somática. A embriogênese somática pode ser descrita como o processo pelo qual células somáticas desenvolvem estruturas semelhantes a embriões zigóticos, por meio de uma sequência ordenada de estágios embriogênicos característicos, sem ocorrência de fusão de gametas. Para tanto, o desenvolvimento de um protocolo eficiente de tal técnica exige muitos estudos preliminares. Com isso, o presente trabalho teve como objetivo estudar a calogênese em diferentes explantes de teca, através de uma sequência de indução utilizando difrentes fitorreguladores visando a obtenção de embriões somáticos. Para avaliar a resposta dos calos a cada etapa da indução foram realizadas análises histológica e histoquímica dos tecidos. Como respostas foram encontrados os balanços auxina/citocinina mais adequado para produção de calos, sendo eles 1,5/1,0 e, 1,5/4,0mgL-1 de picloram e BAP respectivamente. Verificou-se que o pulse com TDZ foi responsivo na obtenção de massas próembriogênicas, e que o uso da zeatina e da glutamina, não favorecem a maturação de tais estruturas, além de ocasionarem a morte celular programada das células da massa calosa. Contudo, os resultados mostram-se positivos e auxiliam na formulação de novos tratamentos e técnicas de indução da embriogênese somática para a espécie estudada. / Teak (Tectona grandis L. f) is a native woody species from Asia that has great economic interest due the noble characteristics of its wood. Widely used for building ships and luxury furniture for display outdoors, their consumption has increased every year, especially in producing countries. With the pressure of environmental policies on the use of native species of wood, teak shown a great alternative to the market for lumber. However, commercial production of this species has some barriers, the main one, being the propagation of mature breeders whose characteristics are suited to forestry management. In order to enable the faithful reproduction of the selected trees, and to perform the rejuvenation of these matrices derived of adult material, some techniques can be used, one of them is the use of tissue culture. Considered in a way quite rejuvenating and seedlings of agricultural and forest species process is the formulation of somatic embryogenesis protocols. Somatic embryogenesis can be described as the process by which somatic cells develop structures similar to zygotic embryos, through an ordered sequence of characteristic embryogenic stages without occurrence of the fusion of gametes. Thus, the development of an efficient protocol for this technique requires a lot of preliminary studies. Thus, the present work aimed to study the callus induction in different explants of teak, through a sequence induction using different growth regulators in order to obtain somatic embryos. To assess the response of each stage during callus induction, histological and histochemical tissue analysis were performed. Responses as the most suitable for callus production auxin / cytokinin balance sheets were found, they 1.5 / 1.0 and 1.5 / 4,0mgL-1 picloram/BAP, respectively. It was found that TDZ pulse was responsive to obtain pro-embryogenic masses, and that the use of zeatin and glutamine, are not conducive to maturation of such structures, and enacting the programmed cell death of the cell calli mass. However, the results show up positive and assist in the formulation of new treatments and techniques for induction of somatic embryogenesis of this species.

Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2016-03-10T19:58:47Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marieli Rossato - 2015.pdf: 1478784 bytes, checksum: a2e927078a0e03d9ccd322d3fbb3c4bb (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-03-14T15:21:51Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marieli Rossato - 2015.pdf: 1478784 bytes, checksum: a2e927078a0e03d9ccd322d3fbb3c4bb (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-14T15:21:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marieli Rossato - 2015.pdf: 1478784 bytes, checksum: a2e927078a0e03d9ccd322d3fbb3c4bb (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-02-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The aim of this work was to obtain protocol for Gabirobeira propagation in vitro and characterize anatomical and ultrastructure calogenesis. In the first experiment, shoots were induced in vitro, using culture medium WPM (Wood Plant Medium) with differents concentrations of 6-benzilaminopurine (0; 0,25; 0,5; 1,0 and 2,0 mg L-1), in the influence or not active photosynthetically radiation. In the second experiment, root formation was induced using different concentration (0; 0,5; 1,0; 1,5 and 2,0 mg L-1) of indolbutyric acid (IBA), naphthaleneacetic acid (NAA) and indoleacetic acid (IAA). The experimental design was completely randomized with 5 repetitions (each replication consisted of three tubes), with the factorial 2x5 for shoot multiplication (two environments and five concentrations). In the third experiment, callus were induced in nodal segments using different concentrations (0; 1,0; 2,0 and 4,0 mg L-1) of IBA, NAA, IAA, 2,4-diclorofenoxiacetic and Picloram. The concentration indicated for shoot induction is 1,0 mg L-1 kept in the dark for elongation. On the rooting experiment was not possible develop protocol for root formation. Callus were induced in all concentrations, except in the control, but 1,0 mg L-1 de picloram was more efficient. Through the showth curve of callus anatomic cuts and ultrastructural analysis, we can infer that after 28 days the callus should be transferred to new media culture since during it was possible to visualize the formation of meristematic center highlighting the periphery. / Objetivou-se o desenvolvimento de protocolo de propagação in vitro de Gabirobeira a partir de segmentos nodais e caracterizar anatômica e ultraestruturalmente a calogênese. No primeiro experimento, brotações foram induzidas in vitro, utilizando-se meio de cultura WPM (Wood Plant Medium) com diferentes concentrações de 6-benzilaminopurina (0; 0,25; 0,5; 1,0 e 2,0 mg L-1), na presença ou não de radiação fotossinteticamente ativa. No segundo experimento, rizogênese foi induzida utilizando diferentes concentrações (0; 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0 mg L-1) de ácido indolbutírico (AIB), ácido indolacético (AIA) e ácido naftalenoacético (ANA). O delineamento estatístico foi inteiramente casualizado com 5 repetições (cada repetição composta por 3 tubos) nos dois experimentos, sendo para as brotações esquema fatorial 2x5 (dois ambientes e cinco concentrações). No terceiro experimento, calos foram induzidos em segmentos nodais utilizando-se diferentes concentrações (0; 1,0; 2,0 e 4,0 mg L-1) de AIB, AIA, ANA, 2,4-diclorofenoxiaéctico e Picloram. A concentração indicada para indução de brotações é 1,0 mg L-1 de BAP mantida no escuro para que ocorra alongamento. Com os tratamentos testados não foi possível obter protocolo eficiente para rizogênese. Calos foram induzidos em todas as concentrações testadas, exceto na testemunha, porém 1,0 mg L-1 de picloram foi mais eficiente. Através da curva de crescimento do calo juntamente com as análises histoquímicas e ultraestruturais, é possível inferir que ao 28º dia os calos devem ser transferidos para novos meios de cultura, visto que durante este período é possível visualizar a formação de centro meristemático se destacando da periferia.