Submitted by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-03-23T14:53:53Z No. of bitstreams: 1 DIS_ELUSA_SCHEIBLER_PARCIAL.pdf: 424780 bytes, checksum: 1d777a8f417e06f635286ca4d52e7d71 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T14:53:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_ELUSA_SCHEIBLER_PARCIAL.pdf: 424780 bytes, checksum: 1d777a8f417e06f635286ca4d52e7d71 (MD5) Previous issue date: 2017-01-13 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Candidiasis is the most prevalent fungal infection in the oral cavity of human beings. It is an oportunistic disease, which has predisposing factors such as xerostomia, alcohol and tobacco use, ill-fitted and poor cleaned dentures, diabetes mellitus, severe nutritional deficiencies and imunosuppressive conditions such as HIV infection and chemotherapy. Nystatin and chlorhexidine have been widely used to control oral infections, sometimes in an associated protocol. Nevertheless, there are reports about an antagonistic interaction when these drugs are combined. The present work aimed to analyze, in vitro, the effect of combined nystatin and chlorhexidine on Candida albicansand the stability of their mixture as well. The drugs were tested alone and in different combinations including single formulation and independent formulations with different time intervals. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the drugs was determined by the broth microdilution method, and also their effects on the optical density (OD) of suspensions and biofilms of C. albicans were evaluated.The stability of nystatin/chorhexidine mixture was tested in high performance liquid chromatography (HPLC). Nystatin/chlorhexidine single formulation did not show a significantly differentMICcompared to the drugs used alone.The combinations with time intervalsbetween drugs showed higher MIC than the drugs alone, except for the MIC of chlorhexidine with 10-min interval. According to our results, the combination of the drugs interferes with theMIC, increasing its level, exceptfor the chlorhexidine MIC in nystatin/chlorhexidine single formulation. Nystatin/chlorhexidine combinations showed impaired activity against C.albicans biofilms. Among the combinations, that with 30-min interval showed the highest antifungal effect and the single formulation the lowest. The drugs when combined showed high percentages of degradation at all the times evaluated. Conclusion: The combination of nystatin and chlorhexidine interferes with their effectiveness and also increases their rate of degradation. / A candid?ase ? a infec??o f?ngica mais prevalente na cavidade oral de seres humanos. ? uma infec??o oportunista, que tem por fatores predisponentes a xerostomia, o uso de ?lcool e tabaco, pr?teses mal-higienizadas e mal-adptadas, diabetes mellitus, defici?ncias nutricionais graves e condi??es imunossupressoras como infec??o pelo HIV e quimioterapia. A nistatina e a clorexidina t?m sido amplamente empregadas no controle de processos infecciosos da cavidade oral, algumas vezes simultaneamente. Entretanto, h? relatos na literatura de que, se empregadas de forma combinada, essas drogas teriam intera??o antag?nica. O presente estudoteve por objetivo avaliar, in vitro, o efeito do uso concomitante de clorexidina e nistatina sobre Candida albicans. As drogas foram testadas em diferentes combina??es, incluindo formula??o ?nica e formula??es independentes empregadas de formaassociadacom diferentes intervalos de tempo. Os testes foram realizados determinando-se a concentra??o inibit?ria m?nima (CIM) por meio do m?todo de microdilui??o em caldo,bemcomo avalia??o do efeito sobre a densidade ?ptica das suspens?es e biofilmes de C. albicans. A estabilidade da mistura de nistatina e clorexidina foi testada por meio de cromatografia l?quida de alta efici?ncia (HPLC). A formula??o ?nica nistatina/clorexidina n?o exibiu CIM significativamente diferente dos respectivos f?rmacos empregados isoladamente. As combina??es com intervalos de tempo intermedi?riostiveram CIM significativamente maiordo que o f?rmaco isolado, exceto para a CIM da clorexidina ao intervalo de 10 min. De acordo com esses resultados, a combina??o dos f?rmacos interfere nasrespectivas CIMs, elevando-as, com exce??o da CIM da clorexidina para formula??o ?nica. Comparadas ao uso das drogas isoladas, as combina??es de nistatina e clorexidina exibiram atividade diminu?da nos biofilmes de C.albicans,tendo o intervalo de 30 minutos o maior efeito antif?ngico, ea formula??o ?nica, o menor. A mistura das drogas teve elevadas percentagens de degrada??o em todos os tempos avaliados. Conclus?o: A combina??o de nistatina e clorexidina interfere na efetividadedas drogas e tamb?m eleva as suas taxas de degrada??o.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-12-04T20:39:16Z No. of bitstreams: 1 AleidaMariaDaSilvaLima_DISSERT.pdf: 1394996 bytes, checksum: b7dfff2dc66acf246836f373fbcdae6b (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-12-06T23:54:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 AleidaMariaDaSilvaLima_DISSERT.pdf: 1394996 bytes, checksum: b7dfff2dc66acf246836f373fbcdae6b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-06T23:54:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AleidaMariaDaSilvaLima_DISSERT.pdf: 1394996 bytes, checksum: b7dfff2dc66acf246836f373fbcdae6b (MD5) Previous issue date: 2012-02-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / A candis?ase vulvovaginal (CVV) ? uma doen?a inflamat?ria, no tecido vaginal, causada principalmente por leveduras patog?nicas de Candida albicans. E atualmente CVV ? um problema significativo na sa?de da mulher. As ? glucanas s?o polissacar?deos estruturais da parede celular da levedura Saccharomyces cerevisiae e existem v?rios relatos que demonstram o efeito imunomodulador desta estrutura em infec??es bacterianas, virais, f?ngicas e parasit?rias. Sabendo disso, o presente estudo avaliou se a ?-glucana tem atividade imunomoduladora em camundongos com candid?ase vulvovaginal sob a influ?ncia do estr?geno. Os animais foram inoculados com C. albicans, por via intravaginal, e tratados com glucana, vaginal e intraperitonealmente, e os animais do grupo de controle receberam por via intraperitoneal, solu??o salina. Os animais tratados com glucana intraperitoneal e vaginal mostraram menor n?mero de UFC, no fluido vaginal, em compara??o com animais controles. No entanto, os resultados mais marcantes foram do intraperitoneal, confirmando com o histopatol?gico, por?m sem diferen?a estatisticamente significante. Em rela??o ao influxo dos neutr?filos polimorfonucleares (PMNs), os grupos tratados com glucana mostraram maior infiltra??o desses. Al?m disso, observou-se que os animais tratados com glucana apresentaram uma maior quantidade de IFN-?, no lavado vaginal, em compara??o com o controle. Os dados sugerem que glucana pode ter uma atividade importante na prote??o contra C. albicans. / Vulvovaginal candidiasis (VVC) is an inflammatory disease, on vaginal tissue, caused mainly by pathogenic yeasts of Candida albicans. And actually, VVC is currently a significant problem in women's health. The ?-glucans are structural polysaccharides of the cell wall of the fungi Saccharomyces cerevisiae and there are several reports that demonstrate the immunomodulatory effect this structure in infections of bacterial, viral, fungal and parasitic. Knowing this, the present study evaluated whether ?- glucan has immunomodulatory activity in mice with vulvovaginal candidiasis under the influence of estrogen. The animals were inoculated with C. albicans, intravaginally, and treated with glucan, vaginally and intraperitoneally, and the control group animals received saline, intraperitoneally. The animals treated with intraperitoneal and vaginal glucan showed smaller number of the CFU, in the vaginal fluid, compared with control animals. However the results more marked was of the intraperitonel, confirmed with histopathological, but in neither case the results were statistically significant. Relative to influx of the polymorphonuclear neutrophilis (PMNs), the groups treated with glucan showed greater infiltration. Moreover, it was observed that animals treated with glucan showed a higher quantity of IFN-?, in vaginal washed, compared with the control. The data suggest that glucan may have an important activity in protection against C. albicans.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 386680.pdf: 5694528 bytes, checksum: b449d9dde8f5f2112de1c98de09f8c96 (MD5) Previous issue date: 2006-12-12 / O uso indiscriminado de antif?ngicos tem acarretado resist?ncia da Candida sp., o que requer novas alternativas de tratamento para a candidose oral. A aplica??o da terapia fotodin?mica (PDT) tem sido investigada na inativa??o de microrganismos patog?nicos ao hospedeiro humano. O presente estudo teve por objetivo avaliar, in vitro, a a??o da PDT sobre a viabilidade da Candida sp. e de c?lulas epiteliais. Culturas de Candida sp. obtidas a partir da coleta de amostras de 38 pacientes portadores de candidose oral e culturas de c?lulas HEp-2 foram submetidas ? PDT. Foi empregado o laser diodo fosfeto de ?ndio-g?lio-alum?nio (InGaAlP) nas dosimetrias de 100 J/cm2, 270 J/cm2 e 450 J/cm2 associado ao fotossensibilizador azul de metileno na concentra??o de 100 Rg/mL. Ap?s o tratamento, a viabilidade das unidades formadoras de col?nias (UFCs) e das c?lulas epiteliais foi quantificada. As tr?s dosimetrias empregadas determinaram inativa??o significativa da Candida sp. (p<0,05). A dosimetria de 450 J/cm2 foi a mais eficaz, inativando 72,42% das UFCs de Candida sp., seguida pelas dosimetrias de 270 J/cm2 e 100 J/cm2 com inativa??o m?dia de 45,84% e 22,83% respectivamente. A Candida albicans foi significativamente mais sens?vel ao tratamento, com inativa??o m?dia de 50,44% das UFCs, enquanto as outras esp?cies de Candida apresentaram inativa??o m?dia de 41,18% (p<0,05). Depois de submetidas ? PDT, as c?lulas HEp-2 exibiram viabilidade semelhante nas diferentes dosimetrias (p>0,05). A viabilidade m?dia das c?lulas HEp-2, avaliada imediatamente ap?s a PDT, independentemente da dosimetria aplicada, foi de 70,81%, sendo esta significativamente menor do que a do grupo-controle, que foi de 86,21% (p<0,05). A PDT com azul de metileno e laser nas dosimetrias de 100 J/cm2, 270 J/cm2 e 450 J/cm2 determinou inativa??o significativa da Candida sp., sendo a C. albicans mais sens?vel que as outras esp?cies. As c?lulas epiteliais HEp-2 foram menos sens?veis ? PDT do que a Candida sp., apresentando m?dia de inativa??o fotodin?mica 2,24 vezes menor que a das c?lulas f?ngicas, fato que indica a exist?ncia de uma margem de seguran?a para aplica??o in vivo. S?o necess?rios novos estudos in vitro e em modelos animais para melhor fundamentarem-se os resultados obtidos

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MaizaRA_TESE.pdf: 1687383 bytes, checksum: 6a89b25caa7db5fc536b4051629db0e3 (MD5) Previous issue date: 2013-12-06 / Candid?ase ? um problema de import?ncia crescente, devido o aumento do n?mero de indiv?duos imunocomprometidos e o surgimento de cepas resistentes aos antif?ngicos convencionais. ? de fundamental import?ncia a busca por novos agentes antif?ngicos mais eficazes, menos t?xicos, sendo os ?leos essenciais (OEs) excelentes alternativas para esse prop?sito. Esse estudo investigou a atividade biol?gica do OE de Mentha spicata L. sobre Candida guilliermondii de origem anal e vaginal. Para tanto foram determinadas a Concentra??o Inibit?ria M?nima (CIM), Concentra??o Fungicida M?nima (CFM), cin?tica do crescimento das leveduras (Time-Kill), altera??es micromorfol?gicas (t?cnica do microcultivo em c?mara ?mida) e investiga??o do mecanismo de a??o antif?ngico, utilizando o bioensaio do sorbitol. O OE de M. spicata foi obtido pelo processo de extra??o por destila??o a vapor. Na an?lise fitoqu?mica desse ?leo foi observada a presen?a de carvona com 84,32%, seguida pelo limoneno (13,70%) e tra?os de iso-dihidrocarvona (0,82%). Os resultados da an?lise da CIM variou entre 32 e 128 &#956;g/mL. A CFM variou entre 64 e 1024 &#956;g/mL. Na avalia??o da a??o de OE e da nistatina 100UI/mL, o antif?ngico padr?o apresentou o efeito fungicida a partir de 4 horas e para OE de M. spicata foi observado efeito fungist?tico na CIM, CIMX2 e CIMX4 frente ?s cepas avaliadas. O OE de M. spicata apresentou forte atividade antif?ngica contra as cepas de C. guilliermondii, promovendo altera??es micromorfol?gicas vis?veis por microscopia ?ptica, nas concentra??es testadas (CIM, CIMx2), resultado semelhante ao que se observou com a nistatina (100UI/mL). Na investiga??o do mecanismo de a??o antif?ngico foi constatado que houve altera??o da CIM na presen?a de sorbitol, com eleva??o dos valores quatro vezes maior que a concentra??o inicial, o que indica que os componentes desse OE apresentam a??o direta sobre a parede celular das leveduras. Conclui-se que o OE de Mentha spicata ? um potencial agente terap?utico no tratamento de candid?ase

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-04-01T19:51:45Z No. of bitstreams: 1 CelesteMariaDeMenezesSouza_DISSERT.pdf: 828781 bytes, checksum: 9755e5418c5ee46cbd00b3d37d799061 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-04-07T21:48:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CelesteMariaDeMenezesSouza_DISSERT.pdf: 828781 bytes, checksum: 9755e5418c5ee46cbd00b3d37d799061 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-07T21:48:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CelesteMariaDeMenezesSouza_DISSERT.pdf: 828781 bytes, checksum: 9755e5418c5ee46cbd00b3d37d799061 (MD5) Previous issue date: 2015-04-24 / Diagn?sticos imprecisos das vulvovaginites geram tratamentos inadequados que causam preju?zos ? sa?de das mulheres. Sendo assim, a pesquisa tem como objetivo: avaliar sistematicamente a efic?cia dos m?todos diagn?sticos das vulvovaginites infecciosas. Para tanto, adota como m?todo: realiza??o de um estudo de corte transversal com 200 mulheres no menacme com queixa de corrimento vaginal. Foi coletado material vaginal dessas mulheres para realiza??o dos seguintes exames: microbiol?gico a fresco e corado pelo Gram, citologia oncol?gica, teste das aminas e mensura??o do pH vaginal. Foi avaliada a efic?cia dos m?todos dispon?veis para diagn?stico do corrimento vaginal (sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e valor preditivo negativo). Os dados foram inseridos em planilha do software Excel/Office 2010 com todas as vari?veis e, ap?s, exportados para o Graphpad Prism 6, para an?lise estat?stica. Resultados: na avalia??o da efic?cia dos m?todos, foram estudadas 200 pacientes, tendo como padr?o ouro o exame microbiol?gico corado pelo Gram, atrav?s do qual foram obtidos os seguintes resultados: exame a fresco para a candid?ase vaginal: sensibilidade = 31%, especificidade = 97%, valor preditivo positivo (VPP) = 54%, valor preditivo negativo (VPN) = 93%, acur?cia = 91%; exame a fresco para vaginose bacteriana: sensibilidade = 80%, especificidade = 95%, valor preditivo positivo (VPP) = 80%, valor preditivo negativo (VPN) = 95%, acur?cia = 92%; abordagem sindr?mica para vaginose bacteriana: sensibilidade = 95%, especificidade = 43%, valor preditivo positivo (VPP) = 30%, valor preditivo negativo (VPN) = 97%, Acur?cia = 54%; abordagem sindr?mica para a candid?ase vaginal: sensibilidade = 75%, especificidade = 91%, valor preditivo positivo (VPP) = 26%, valor preditivo negativo (VPN) = 98%, acur?cia = 90%; Papanicolau para a candid?ase vaginal: sensibilidade = 68%, especificidade = 98%, valor preditivo positivo (VPP) = 86%, valor preditivo negativo (VPN) = 96%, acur?cia = 96%; Papanicolau para vaginose bacteriana: sensibilidade = 75%, especificidade = 100%, valor preditivo positivo (VPP) = 100%, valor preditivo negativo (VPN) = 94%, acur?cia = 95%. Houve apenas um ?nico caso de tricomon?ase vaginal, diagnosticado pela citologia oncol?gica e exame a fresco, confirmado pelo Gram. A abordagem sindr?mica o deu como vaginose bacteriana. A partir desses dados e tendo ainda o suporte da literatura mundial, foi elaborado o Protocolo de diagn?stico e tratamento das Vulvovaginites da Maternidade Escola Janu?rio Cicco /UFRN. Desse estudo, restou como conclus?o: o Papanicolau e o exame a fresco demonstraram, respectivamente, baixa e muito baixa sensibilidade para a candid?ase vaginal; a abordagem sindr?mica apresentou muito baixa especificidade e acur?cia para a vaginose bacteriana, o que implica, na pr?tica cl?nica, um grande n?mero de pacientes n?o diagnosticadas ou tratadas de forma incorreta. / Inaccurate diagnosis of vulvovaginitis generates inadequate treatments that cause damages women's health. Objective: evaluate the effectiveness of methods when diagnosing vulvovaginitis. Method: a cross-sectional study was performed with 200 women who complained about vaginal discharge. Vaginal smear was collected for microbiological tests, considering the gram stain method as gold standard. The efficacy of the available methods for diagnosis of vaginal discharge was assessed (sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value). Data were inserted to Graphpad Prism 6, for statistical analysis. Results: the following results were obtained: wet mount for vaginal candidiasis: sensitivity = 31%; specificity = 97%; positive predictive value (PPV) = 54%; negative predictive value (NPV) =93%; accuracy = 91%. Wet mount for bacterial vaginosis: sensitivity = 80%; specificity =95%; positive predictive value (PPV) = 80%; negative predictive value (NPV) = 95%; accuracy = 92%. Syndromic approach for bacterial vaginosis: sensitivity = 95%; specificity=43%; positive predictive value (PPV) =30%; negative predictive value (NPV) = 97%; accuracy = 54%. Syndromic approach for vaginal candidiasis: sensitivity = 75%; specificity =91%; positive predictive value (PPV) = 26%; negative predictive value (NPV) = 98%; accuracy = 90%. Pap smear for vaginal candidiasis: sensitivity = 68%, specificity = 98%; positive predictive value (PPV) = 86%; negative predictive value (NPV) =96%; accuracy = 96%. Pap smear for bacterial vaginosis: sensitivity = 75%; specificity = 100%; positive predictive value (PPV) = 100%; negative predictive value (NPV) =94%; accuracy = 95%. There was only one case of vaginal trichomoniasis reported ? diagnosed by oncological cytology and wet mount ? confirmed by Gram. The syndromic approach diagnosed it as bacterial vaginosis. From the data generated and with support on world literature, the Maternidade Escola Janu?rio Cicco?s vulvovaginitis protocol was constructed. Conclusion: Pap smear and wet mount showed respectively low and very low sensitivity for vaginal candidiasis. Syndromic approach presented very low specificity and accuracy for bacterial vaginosis, which implies a large number of patients who are diagnosed or treated incorrectly.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:14:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AntonioARH.pdf: 1355873 bytes, checksum: c7ebee3518ab1fe810e379bbdf3b4446 (MD5) Previous issue date: 2007-08-31 / Post-menarche patients with clinical signs of vulvovaginitis were analyzed in this study, whose aims were the following: identify the frequency of C. albicans and non C. albicans species and negative results, correlate the vaginal culture for yeast with risk factors and symptomatology; compare positive and negative results for yeast in the vaginal and anal cultures; compare the positive results for C. albicans with other results found in the vaginal and anal cultures; and compare concomitant positivity for C. albicans and non C. albicans in the vaginal and anal cultures. Sample selection occurred between May, 2003 and May, 2005, and included 99 patients from Natal, Brazil. The laboratory methods used consisted of CHROMagar Candida culture medium, thermotolerance test at 42-45?C and hypertonic NaCL, in addition to the classic methods of carbohydrate assimilation and fermentation. We used absolute numbers, percentages, means of central tendency, chi-squared test (&#967;2) with Yates correction, Fisher s exact test and odds ratio for statistical analysis. The most frequent species was C. albicans in 69% of the cases. The positivity for Candida spp showed an association with the use of tight-fitting intimate clothing and/or synthetics, allergic diseases and the occurrence of itching, leukorrhea and erythema. Anal colonization increased the likelihood of vaginal contamination by 2.8 and 4.9 times, respectively, for Candida spp and C. albicans. When compared to the other species, C. albicans-positive anal colonization increased by 3.7 times the likelihood of vaginal positivity. These data suggest likely vaginal contamination originating in the anus / Pacientes ap?s a menarca, com quadro cl?nico compat?vel com vulvovaginite foram analisadas no presente estudo, cujos objetivos foram: identificar a frequ?ncia de esp?cies de C. albicans, n?o C. albicans e resultados negativos; correlacionar a cultura vaginal para leveduras com fatores de risco e sintomatologia; comparar resultados positivos com os negativos para leveduras nas culturas vaginais e anais; comparar os resultados positivos para C. albicans com outros resultados encontrados nas culturas vaginais e anais; comparar a positividade concomitante para C. albicans e n?o C. albicans nas culturas vaginais e anais. A sele??o da casu?stica ocorreu entre maio de 2003 e maio de 2005, sendo inclu?das 99 pacientes, procedentes de Natal, RN. Os m?todos laboratoriais utilizados consistiram em cultivo em CHROmagar Candida, provas de termotoler?ncia a 42-45oC e NaCl hipert?nico, al?m dos m?todos cl?ssicos de assimila??o e fermenta??o de carboidratos. Para a an?lise estat?stica foram utilizados n?meros absolutos, percentuais, medidas de tend?ncia central, Teste do qui-quadrado (&#967;2) com corre??o de Yates e Teste exato de Fisher, al?m de Odds ratio. A esp?cie mais freq?ente foi C. albicans em 69% dos casos. A positividade para Candida spp apresentou associa??o com o uso de roupas ?ntimas justas e/ou sint?ticas, doen?as al?rgicas e ocorr?ncia de prurido, leucorr?ia e eritema. A coloniza??o anal determinou um aumento da chance para coloniza??o vaginal, sendo 2,8 e 4,9 maior, respectivamente para Candida spp e C. albicans. A coloniza??o anal positiva para C. albicans implicou numa chance 3,7 vezes maior para a positividade vaginal em compara??o ?s outras esp?cies. Esses dados sugerem uma prov?vel contamina??o vaginal a partir do ?nus

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarianaGD_DISSERT.pdf: 1350118 bytes, checksum: 5e25fd552ff8be29e71b6c0ae2fa383c (MD5) Previous issue date: 2011-02-25 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Despite Candida species are often human commensals isolated from various oral sites such as: tongue, cheek and palatal mucosa plus subgingival region, there are some properties linked to the organism commonly known as virulence factors which confer them the ability to produce disease. Oral candidiasis is one of the main oral manifestations reported in literature related to kidney transplant patients. The objectives of the present study were to identify and investigate virulence factors of yeasts isolated from the oral cavity of kidney transplant recipients admitted at the Hospital Universit?rio Onofre Lopes, in Natal RN. Seventy Candida species isolated from 111 kidney transplant recipients were investigated in this study. Identification of the isolates was performed by using the evidence of germ tube formation, hypertonic broth, tolerance to grow at 42?C, micromorphology and biochemical profiles. We observed a high rate of isolation of yeasts from the oral cavity of kidney transplant recipients (63.1%) being C. albicans was the most prevalent species. Oral candidiasis was diagnosed in 14.4% of transplant recipients. We evaluated virulence properties of the isolates regarding to: biofilm formation on polystyrene microplates as well as XTT reduction, adherence to acrylic resin and human buccal epithelial cells and proteinase activity. Most isolates were able to form biofilm by the method of adhesion to polystyrene. All isolates of Candida spp. remained viable during biofilm formation when analyzed by the method of XTT reduction. The number of CFU attached to the acrylic resin suggested high adherence for C. parapsilosis. C. albicans isolates showed higher median adherence to human buccal epithelial cells than non-C. albicans Candida isolates. Nevertheless, this difference was not statistically significant. C. dubliniensis showed low ability to adhere to plastic and epithelial cells and biofilm formation. Proteolytic activity was observed for all the isolates investigated, including the unique isolate of C. dubliniensis. There was a statistically significant association between proteinase production and the presence of oral candidiasis. Studies related to oral candidiasis in renal transplant recipients are limited to clinical and epidemiological data, but investigations concerning Candida spp. virulence factor for this group of individuals are still scarce. We emphasize the importance of studies related to virulence factors of yeasts isolated from this population to contribute to the knowledge of microbiological aspects of oral candidiasis / Apesar das leveduras do g?nero Candida serem frequentemente comensais humanos, isoladas de diferentes s?tios orais, incluindo l?ngua, mucosa jugal, mucosa palatal e regi?o subgengival, existem algumas propriedades ligadas a Candida spp., comumente denominadas fatores de virul?ncia, que lhes conferem a capacidade de produzir doen?a. Candid?ase bucal ? uma das principais manifesta??es orais citadas na literatura em rela??o aos pacientes transplantados renais. O objetivo deste estudo foi realizar identifica??o e avaliar os fatores de virul?ncia de leveduras isoladas da cavidade bucal de receptores de transplante renal que s?o acompanhados no Hospital Universit?rio Onofre Lopes, na cidade do Natal RN. Foram utilizadas 70 leveduras do g?nero Candida isoladas de 111 receptores de transplante renal. A identifica??o dos isolados foi realizada atrav?s das provas de forma??o de tubo germinativo, caldo hipert?nico, toler?ncia ? temperatura de 42?C, an?lise da micromorfologia e perfil bioqu?mico das leveduras. Observamos elevado ?ndice de isolamento de leveduras na cavidade bucal dos receptores de transplante renal (63,1%), havendo predom?nio de C. albicans. Candid?ase bucal foi diagnosticada em 14,4% dos transplantados. Avaliou-se o potencial de virul?ncia das leveduras atrav?s da forma??o de biofilme pelo m?todo de ader?ncia a microplaca de poliestireno, redu??o do XTT, habilidade de ader?ncia a corpos de prova de resina acr?lica e a c?lulas epiteliais bucais, bem como atividade de proteinase. A maioria dos isolados foi capaz de produzir biofilme pelo m?todo de ader?ncia ao poliestireno, determinada atrav?s de leitura em espectrofot?metro. Todos os isolados de Candida spp. permaneceram vi?veis durante a forma??o do biofilme pelo m?todo da redu??o do XTT. A contagem do n?mero de UFC aderidas ao corpo de prova demonstrou alta capacidade de ader?ncia de C. parapsilosis. Os isolados de C. albicans apresentaram maior mediana de ades?o ? c?lula epitelial bucal humana do que os isolados de C. n?o-C. albicans, contudo essa diferen?a n?o foi estatisticamente significativa. C. dubliniensis apresentou baixa capacidade de ader?ncia ao pl?stico e c?lulas epiteliais e forma??o do biofilme. Observamos atividade proteol?tica em todos os isolados pesquisados, inclusive o isolado de C. dubliniensis, e associa??o estatisticamente significativa entre a produ??o de proteinase e a presen?a de candid?ase bucal. Estudos relacionados ? candid?ase bucal em receptores de transplante renal limitam-se ? investiga??o de aspectos cl?nicos e epidemiol?gicos, n?o havendo dados concernentes a fatores de virul?ncia. Ressaltamos a import?ncia da realiza??o de estudos relacionados aos fatores de virul?ncia de leveduras isoladas nessa popula??o, a fim de que se aprofunde o conhecimento dos aspectos microbiol?gicos da candid?ase bucal / 2020-01-01

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarianaAPM_DISSERT.pdf: 2606420 bytes, checksum: 97be52d447dc533f85354f32faddd0ad (MD5) Previous issue date: 2013-03-27 / Funda??o de Apoio ? Pesquisa do Estado do Rio Grande do Norte / Vulvovaginal candidiasis (VVC) is one of the most common causes of vaginitis and affects about 75% of women of reproductive age. The majority of cases (80 to 90%) are due to C. albicans, the most virulent species of the genus Candida. Virulence attributes are scarcely investigated and the source of infection remains uncertain. Objective: This study aimed to evaluate the virulence factors and genotypes of clinical isolates of C. albicans sequentially obtained from the anus and vagina of patients with sporadic and recurrent VVC. Materials and methods: We analyzed 62 clinical isolates of C. albicans (36 vaginal and 26 anal strains). Direct examination of vaginal and anal samples and colony forming units (CFU) counts were performed. Yeasts were identified using the chromogenic media CHROMagar Candida? and by classical methodology, and phenotypically characterized regarding to virulence factors, including the ability to adhere to epithelial cells, proteinase activity, morphogenesis and biofilm formation. The genotypes of the strains were investigated with ABC genotyping, microsatellite genotyping with primer M13 and RAPD. Results: We found 100% agreement between direct examination and culture of vaginal samples. Filamentous forms were present in most of the samples of vaginal secretion, which presented CFU counts significantly higher than the samples of anal secretion. There was no statistically significant difference between virulence factors of infecting vaginal isolates and those presented by colonizing anal isolates; as well as for the comparison of the vaginal isolates from patients with different clinical conditions (sporadic or recurrent VVC). There was a decrease in the ability to adhere to HBEC, morphogenesis and biofilm formation of the vaginal isolates during the progress of infection. There was an association between the ability to express different virulence factors and the clinical manifestations presented by the patients. Genotype A was the most prevalent (93.6%), followed by genotype C (6.4%). We found maintenance of the same ABC genotype and greater prevalence of microevolution for the vaginal strains of C. albicans sequentially obtained. Vaginal and anal isolates of C. albicans obtained simultaneously from the same patient presented the same ABC genotype and high genetic relatedness. Conclusion: It is noteworthy that the proliferation of yeast and bud-to-hypha transition are important for the establishment of CVV. The expression of virulence factors is important for the pathogenesis of VVC, although it does not seem to be determinant in the transition from colonization to infection or to the installation of recurrent condition. Genotype A seems to be dominant over the others in both vaginal and anal isolates of patients with VVC. The most common scenario was microevolution of the strains of C. albicans in the vaginal environment. It is suggested that the anal reservoir constituted a possible source of vaginal infection, in most cases assessed / Candid?ase vulvovaginal (CVV) ? uma das causas mais comuns de vaginite e acomete cerca de 75% das mulheres em idade reprodutiva, sendo a maioria dos casos (80 a 90%) devido ? C. albicans, esp?cie mais virulenta do g?nero. Atributos de virul?ncia em CVV s?o pouco investigados, bem como a fonte da infec??o permanece incerta. Objetivo: Este trabalho teve por finalidade avaliar os fatores de virul?ncia e gen?tipos de isolados cl?nicos de C. albicans sequencialmente obtidos do ?nus e da vagina de pacientes com CVV espor?dica e recorrente. Material e m?todos: Foram analisados 62 isolados cl?nicos de C. albicans (36 isolados vaginais e 26 isolados anais). Realizou-se o exame direto das amostras de secre??o vaginal e anal e contagem de unidades formadoras de col?nia (UFC); as leveduras foram identificadas por meio cromog?nico CHROMagar Candida? e por metodologia cl?ssica e caracterizadas fenotipicamente quanto a fatores de virul?ncia, incluindo a capacidade de ader?ncia a CEBH, a atividade de proteinase, a morfog?nese e a forma??o de biofilme. Para a avalia??o da variabilidade genot?pica, empregou-se a t?cnica de genotipagem ABC, al?m da genotipagem por microssat?lites e RAPD. Resultados: Verificou-se 100% de concord?ncia entre o exame direto e a cultura de amostras vaginais, observando-se a presen?a de formas filamentosas na maioria das amostras de secre??o vaginal, as quais apresentaram contagem de UFC significativamente superior ?quela apresentada pelas amostras de secre??o anal. N?o se observou diferen?a estatisticamente significativa quando se comparou os fatores de virul?ncia dos isolados vaginais infectantes com aqueles apresentados pelos isolados anais colonizantes; bem como comparando-se os isolados vaginais de C. albicans obtidos de grupos de pacientes com diferentes condi??es cl?nicas (CVV espor?dica e com CVVR). Observa-se uma tend?ncia ? diminui??o da capacidade de ader?ncia, morfog?nese e forma??o de biofilme do isolado vaginal infectante ao longo do tempo e sugere-se associa??o entre a capacidade de expressar os diferentes fatores de virul?ncia estudados e as manifesta??es cl?nicas apresentadas pelas pacientes. O gen?tipo A foi o mais prevalente (93,6%), seguido do gen?tipo C (6,4%). Houve manuten??o do mesmo gen?tipo ABC e maior preval?ncia de microevolu??o das cepas vaginais de C. albicans obtidas sequencialmente, bem como se observou o mesmo gen?tipo ABC e alta similaridade gen?tica entre isolados vaginais e anais de C. albicans obtidos simultaneamente da mesma paciente. Conclus?o: Ressalta-se que a prolifera??o da levedura e a transi??o levedura-hifa s?o importantes no estabelecimento da CVV. A express?o dos fatores de virul?ncia ? importante na patog?nese de CVV, contudo n?o parece ser determinante na transi??o de coloniza??o para infec??o nem na instala??o de quadro recorrente de CVV. O gen?tipo A demonstra ser dominante em rela??o aos demais tanto em isolados vaginais quanto em isolados anais de pacientes com CVV. Verifica-se a ocorr?ncia de microevolu??o das cepas de C. albicans no ambiente vaginal como cen?rio mais comum. Sugere-se que o reservat?rio anal constituiu uma poss?vel fonte da infec??o vaginal, na grande maioria dos casos avaliados

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Candida spp. possuem fatores de virul?ncia que contribuem para o processo infeccioso, incluindo a capacidade de aderir a c?lulas epiteliais e a forma??o de biofilme em superf?cies bi?ticas e abi?ticas. O extrato obtido a partir das folhas de Eugenia uniflora [acetona: ?gua (7:3, v/v)] tem demonstrado atividade antif?ngica contra Candida spp. Este estudo avaliou a influ?ncia do extrato de E. uniflora na ades?o ?s C?lulas Epiteliais Bucais Humanas (CEBH) e forma??o de biofilme de 42 cepas de Candida spp. isoladas da cavidade oral de pacientes transplantados renais. As cepas de Candida spp. pertencentes a um banco de microorganimos foram reativadas e reidentificadas fenotipicamente atrav?s da metodologia cl?ssica e por m?todos moleculares (genotipagem ABC e RAPD), quando necess?rio, para a conclus?o da identifica??o em n?vel de esp?cie. Para os ensaios de virul?ncia avaliados in vitro, as leveduras foram cultivadas na presen?a e aus?ncia de 1000 ?g/ mL de extrato. Uma propor??o de 10:1 c?lulas (c?lulas Candida spp. x CEBHs) foi incubada durante 1 hora a 37 ?C, 200 rpm, fixadas com formalina a 10% e o n?mero de c?lulas de Candida aderidas a 150 CEBH foram determinadas em microsc?pio ?ptico. Os biofilmes foram formados em microplacas de poliestireno na presen?a e aus?ncia do extrato. A quantifica??o foi realizada com colora??o por cristal violeta a 570 nm. Todos os isolados apresentaram-se vi?veis e na reidentifica??o fenot?pica apresentaram caracter?sticas sugestivas de cada esp?cie identificada. Duas cepas identificadas presuntivamente como Candida dubliniensis foram confirmadas como pertencentes a esta esp?cie atrav?s da genotipagem ABC, e as cepas identificadas como pertencentes ao complexo Candida parapsilosis foram diferenciadas atrav?s da genotipagem por RAPD. Candida albicans destacou-se como a esp?cie com maior potencial de ades?o ao epit?lio bucal, enquanto que C. tropicalis apresentou expressiva forma??o de biofilme. Detectamos que o extrato de E. uniflora foi capaz de reduzir a ades?o ao CEBH tanto para Candida albicans como para as esp?cies de Candida n?o-Candida albicans. Por outro lado, apenas 16 cepas de Candida spp. (36%) apresentaram a forma??o de biofilme reduzida na presen?a do extrato. No entanto, duas cepas de C. tropicalis altamente produtoras de biofilme tiveram uma redu??o expressiva na capacidade de forma??o de biofilme. Este estudo refor?a a ideia de que, al?m da inibi??o do crescimento, E. uniflora pode interferir com a express?o de alguns fatores de virul?ncia de Candida spp., e pode ser eventualmente aplicada no futuro como um poss?vel agente antif?ngico. / Candidiasis is a major oral manifestation in kidney transplant patients. Candida spp. possess essential virulence factors which contribute for the infectious process, including the ability to adhere to epithelial cells and biofilm formation. The extract obtained from the leaves of Eugenia uniflora [acetone: water (7:3, v/v)] has demonstrated antifungal activity against Candida spp. This study evaluated the influence of the extract of E. uniflora in adhesion to human buccal epithelial cells (HBEC) and biofilm formation of 42 strains of Candida spp. isolated from the oral cavity of kidney transplant patients. Candida spp. strains belonging to a culture collection were reactivated and phenotypically re-identified by classical and molecular methods (genotyping ABC and RAPD), when necessary, to complete the identification to the species level. For the virulence tests evaluated in vitro, yeasts were grown in the presence and absence of 1000 ?g/mL of the extract. A ratio of 10: 1 (Candida spp. cells x HBECs) was incubated for 1 hour at 37 ? C, 200 rpm, fixed with 10% formalin and the number of Candida cells adhered to 150 HBEC determined by optical microscope. Biofilms were formed on polystyrene microplates in the presence or absence of the extract. The quantification was performed with crystal violet staining at 570 nm. All isolates were viable and exhibited phenotypic characteristics suggestive of each species identified. Two strains presumptively identified as Candida dubliniensis belonged to this species as determined with genotyping ABC, while strains identified as belonging to the Candida parapsilosis species complex were differentiated by RAPD genotyping. Candida albicans was found to be the most adherent species to the buccal epithelia, while C. tropicalis showed remarkable biofilm formation.We could detect that the extract of E. uniflora was able to reduce adhesion to HBEC for both Candida albicans and non-Candida albicans Candida species. On the other hand, only 16 Candida spp. strains (36 %) showed reduced biofilm formation. However, two highly biofilm producer strains of C. tropicalis had an expressive reduction in biofilm formation. This study reinforces the idea that besides growth inhibition, E. uniflora may interfere with the expression of some virulence factors of Candida spp., and may be possibly applied in the future as a novel antifungal agent.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 WalicyranisonPS_DISSERT.pdf: 2780035 bytes, checksum: 20a70f53e533bfb0816b6d9b02b8af32 (MD5) Previous issue date: 2013-06-11 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Candida albicans is a diploid yeast that in some circumstances may cause oral or oropharyngeal infections. The investigation of natural products is mandatory for the discovery of new targets for antifungal drugs development. This study aimed to determine the genotypes of 48 clinical isolates of C. albicans obtained from the oral cavity of kidney transplant patients from two distinct geographic regions of Brazil. In addition, we investigated three virulence factors in vitro: phospholipase activity, morphogenesis and the ability to evade from polymorphonuclear neutrophils. The expression of these virulence factors in vitro was also investigated in the presence of the crude extract of Eugenia uniflora. The genotype A was the most prevalent (30 isolates; 62.5%), followed by genotype C (15 isolates; 31.5%) and genotype B (3 isolates; 6.25%). When microsatellite technique with primer M13 was applied, 80% of the isolates from the South were placed within the same cluster. All Genotype C strains were grouped together within two different clusters. Genotype C was considered more resistant to PMNs attack than genotypes A and B. Strains isolated from the South of Brazil showed higher ability to combat PMNs phagocytosis. We found a high rate of genotype C strains isolated from the oral cavity of this group of patients. The crude extract of E. uniflora inhibited proper hypha formation and phagocytosis by PMNs, but had no significant effect on phospholipase activity. This study characterized oral C. albicans strains isolated from kidney transplant recipients and will contribute for the better understanding of the pathogenesis and alternative therapeutics for oral candidiasis / Candida albicans ? uma levedura dipl?ide que em certas circunst?ncias pode causar infec??es da cavidade oral e da orofaringe. A investiga??o de produtos naturais ? fundamental para a descoberta de novos alvos para o desenvolvimento de drogas antif?ngicas. Este estudo objetivou determinar os gen?tipos de 48 isolados cl?nicos de C. albicans obtidos da cavidade oral de pacientes transplantados renais de duas distintas regi?es geogr?ficas do Brasil. Al?m disso, foram investigados tr?s fatores de virul?ncia in vitro: atividade de fosfolipase, morfog?nese e a capacidade de escapar do ataque de neutr?filos polimorfonucleares. A express?o destes fatores de virul?ncia tamb?m foi investigada na presen?a do extrato bruto de Eugenia uniflora. O gen?tipo A foi o mais prevalente (30 isolados; 62,5%), seguido do gen?tipo C (15 isolados; 31,5%) e do gen?tipo B (3 isolados; 6,25%). Quando a t?cnica do microssat?lite com o primer M13 foi empregada, 80% dos isolados da regi?o Sul foram agrupados no mesmo cluster. Todos os isolados do gen?tipo C foram agrupados juntos em dois diferentes clusters bem definidos. Isolados do gen?tipo C foram considerados mais resistentes ? a??o de PMNs do que os dos gen?tipos A e B. As cepas isoladas do Sul do Brasil demonstraram maior habilidade em combater a fagocitose por PMNs. Encontrou-se uma alta taxa de isolados do gen?tipo C da cavidade oral deste grupo de pacientes. O extrato bruto de E. uniflora inibiu a forma??o de hifa e fagocitose por PMNs, mas n?o apresentou efeito significativo na atividade de fosfolipase. Este estudo caracterizou isolados cl?nicos de C. albicans da cavidade oral de pacientes transplantados renais, contribuindo para um melhor entendimento da patog?nese e terap?utica alternativa para a candid?ase oral