Orientador: Ricardo Della Coletta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-27T17:13:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrade_ClevertonRobertode_M.pdf: 4945048 bytes, checksum: bb1b214cc6a88afd54b208ac9a66daeb (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: IFGH é uma condição oral rara caracterizada por um aumento gengival generalizado com crescimento lento e progressivo. Evidências experimentais de monstram que o aumento gengival observado em pacientes com FGH pode estar associado com uma elevada capacidade proliferativa de fibroblastos residentes, um aumento na síntese de colágeno ou uma redução nos níveis de expressão, produção e secreção de MMPs. TGF-B1 é uma citocina com papel importante na patogênese de desordens fibróticas, incluindo FGH, devido a sua habilidade de estimular a síntese e reduzir a degradação de MEC. Embora tenha sido demons trado que em FGH, TGF-B1 em uma fração autócrina reduz os níveis de expressão e produção de MMPs, o papel desta citocina na modulação do crescimento celular não foi ainda estabelecido nesta doença. O objetivo deste estudo foi verificar o comportamento proliferativo de fibroblastos gengivais de 12 pacientes com FGH e determinar o papel do efeito autócrino de TGF-B1 como um estimulador do crescimento celular, através de 2 métodos bem descritos na literatura: oligonucleotídeos antisense contra a região de tradução de TGF-B1 e anticorpos neutralizantes. Quatro diferentes ensaios de análise de proliferação celular: incorporação demonstraram que os índices de proliferação foram significantemente maiores em de BrdU, expressão de PCNA, análise quantitativa de AgNORs e índice mitótico fibroblastos de FGH que em células controle. Oligonucleotídeos antisense reduziram a produção de TGF-B1 como demonstrado por ELlSA, enquanto que os níveis de expressão de RNAm para TGF-B1 não foram alterados significantemente como revelado por RT-PCR. A redução na produção e atividade de TGF-B1 acompanhadas pelo tratamento com oligonucleotídeos e anticorpos neutralizantes, respectivamente, resultaram na redução na capacidade proliferativa de fibroblastos de FGH. Estes resultados indicam a existência de um papel autócrino de TGF-B1 como um estimulador da proliferação celular de fibroblastos de FGH / Abstract: TGF-f31 autocrine stimulation regulates fibroblast proliferation in hereditary gingival fibromatosis Hereditary gingival fibromatosis (HGF) is a rare oral disease characterized by a slow and progressive enlargement of both the maxilla and mandible gingiva. Increased proliferation, elevated synthesis of extracellular matrix, particularly collagen, and reduced levels of matrix metalloproteinases seem to contribute to the pathogenesis of gingival overgrowth in HGF patients. Transforming growth factor (TGF-_1) is an important cytokine thought to play a major role in fibrotic disorders, such as HGF, due to its ability to stimulate the synthesis and reduce the degradation of extracellular matrix. In HGF fibroblasts, TGF-_1 autocrine stimulation reduces expression and production of matrix metalloproteinases. However, the role of TGF-_1 in the fibroblast growth modulation has not been established in this disease. The aim of this study was confirm the increased proliferation rate of HGF fibroblast cell lines and to explore a possible autocrine role of TGF-_ 1 as a cell growth stimulator by blocking production of this endogenous cytokine using two well established systems: antisense oligonucleotides and neutralizing antibodies. Four different cellular proliferation assays: BrdU-labeling, Agnor, PCNA and mitotic indexes confirmed that tibroblasts trom HGF proliferate significantly faster than those from normal gingiva. Antisense oligonucleotides reduced TGF-_1 production as demonstrated by capture ELlSA, whereas mRNA TGF-_ 1 statement levels were not significantly modified by using RT-PCR . Blocking TGF-_1 synthesis with oligonucleotides or its activity with specific antibodies resulted in a decreased magnitude of HGF fibroblast proliferation. These results are consistent with the existence of an autocrine role of TGF-_1 as a stimulator of HGF fibroblast proliferation / Mestrado / Mestre em Biologia e Patologia Buco-Dental

Orientador: Carlos Alberto de Souza Costa / Co-orientador: Fernanda Gonçalves Basso / Banca: Gelson Luis Adabo / Banca: Carla Raquel Fontana Mendonça / Resumo:A idadedo indivíduo e a presença de inflamação podem influenciar o metabolismo celular, retardando o processo de reparo tecidual. Diferentes tratamentos, como a laserterapia de baixa potência (LBP) e a aplicação de fatores de crescimento são capazes promover bioestimulação celular através do aumento de sua proliferação e metabolismo. O objetivo deste estudo foi avaliar as atividades de fibroblastos obtidos da gengiva de indivíduos jovens e idosos (Estudo 1), a capacidade de resposta destas células expostas ao fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) (Estudo 2), bem como o efeito da LBP ou do fator de crescimento epidérmico (EGF) sobre a viabilidade e metabolismo destas células em cultura (Estudo 3). Culturas primárias de fibroblastos de gengiva de 6 pacientes (3 jovens - J; e 3 idosos - I) foram obtidas e semeadas em meio de cultura completo (DMEM), de acordo com cada protocolo proposto. No Estudo 1, fibroblastos em DMEM completo foram cultivados em placas de 24 compartimentos pelos períodos de 24, 48 ou 72 horas e submetidos a análise da viabilidade celular (MTT, n=36), produção de proteína total (PT, n=36) e síntese de colágeno Sirius Red (SR, n=36). No Estudo 2, após 24 horas do cultivo celular em placas de 96 compartimentos, o meio de cultura completo foi substituído por DMEM sem soro fetal bovino (SFB) acrescido ou não de TNF-α (100 ng/mL) e mantido em contato com as células por 24 horas adicionais. Então, as células foram analisadas quanto a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs, n=36), produção de óxido nítrico (NO, n=36) e síntese de quimiocina CCL5 (ELISA, n=36). No Estudo 3, fibroblastos cultivados em placas de 24 compartimentos foram tratados com EGF (100 μM) ou irradiados com laser de baixa potência (LASERTable, InGaAsP - 780 ± 3nm; 25mW). A viabilidade celular (Alamar Blue®, n=12), migração celular (Wound Healing, n=12)...(Resumo completo clicar acesso eletrônico) / Abstract: The age as well as the presence of inflammation can influence the cellular metabolism, slowing the tissue healing process. Different therapies, such as the application of growth factors and low level laser therapy (LLLT) are capable of biostimulating cells by increasing their proliferation and metabolism. The aim of this study was to evaluate: the functions of gingival fibroblasts obtained from young and elderly individuals (Study 1); the response of these cells exposed to tumor necrosis factor alpha - TNF-α (Study 2); and the effect of LLLT or epidermal growth factor - EGF on the viability and metabolism of these connective cell type (Study 3). Primary culture of gingival fibroblasts of 6 patients (3 young - Y and 3 elderly - E) were collected and cultured in complete culture medium (DMEM). In the Study 1 fibroblasts were seeded in 96-well plates in complete DMEM containing 10% of fetal bovine serum (FBS) for 24, 48 or 72 hours and subjected to evaluation of cell viability (MTT, n=36), total protein production (TP, n=36) and collagen synthesis (SR, n=36). In the Study 2, after 24-hour cell seeding, the complete DMEM was replaced by DMEM without FBS supplemented or not with TNF-α (100 ng/mL) which was kept in contact with cells for additional 24 hours. Then, the production of reactive oxygen TNF-α species (ROS, n=36), nitric oxide (NO, n=36) and synthesis of CCL5 chemokine (ELISA, n=36) were assessed. In the Study 3 fibroblasts were seeded in 24-well plates for 24 hours, and then exposed to EGF (100 μM) or submitted to low power laser irradiation (LASERTable device, InGaAsP - 780 ± 3nm; 25mW). Cell viability (Alamar Blue®, n=12), cell migration (Wound Healing, n=12), collagen synthesis (SR, n=12), and synthesis of vascular endothelial growth factor - VEGF (ELISA, n=12) were assessed 72 hours after the treatments. The data were statistical...(Complete abstract electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-18. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:46:37Z : No. of bitstreams: 1 000846277.pdf: 2026141 bytes, checksum: 0bb21e6aa2c7922e2a387ecf5fd901d7 (MD5) / The age as well as the presence of inflammation can influence the cellular metabolism, slowing the tissue healing process. Different therapies, such as the application of growth factors and low level laser therapy (LLLT) are capable of biostimulating cells by increasing their proliferation and metabolism. The aim of this study was to evaluate: the functions of gingival fibroblasts obtained from young and elderly individuals (Study 1); the response of these cells exposed to tumor necrosis factor alpha - TNF-α (Study 2); and the effect of LLLT or epidermal growth factor - EGF on the viability and metabolism of these connective cell type (Study 3). Primary culture of gingival fibroblasts of 6 patients (3 young - Y and 3 elderly - E) were collected and cultured in complete culture medium (DMEM). In the Study 1 fibroblasts were seeded in 96-well plates in complete DMEM containing 10% of fetal bovine serum (FBS) for 24, 48 or 72 hours and subjected to evaluation of cell viability (MTT, n=36), total protein production (TP, n=36) and collagen synthesis (SR, n=36). In the Study 2, after 24-hour cell seeding, the complete DMEM was replaced by DMEM without FBS supplemented or not with TNF-α (100 ng/mL) which was kept in contact with cells for additional 24 hours. Then, the production of reactive oxygen TNF-α species (ROS, n=36), nitric oxide (NO, n=36) and synthesis of CCL5 chemokine (ELISA, n=36) were assessed. In the Study 3 fibroblasts were seeded in 24-well plates for 24 hours, and then exposed to EGF (100 μM) or submitted to low power laser irradiation (LASERTable device, InGaAsP - 780 ± 3nm; 25mW). Cell viability (Alamar Blue®, n=12), cell migration (Wound Healing, n=12), collagen synthesis (SR, n=12), and synthesis of vascular endothelial growth factor - VEGF (ELISA, n=12) were assessed 72 hours after the treatments. The data were statistical...(Complete abstract electronic access below)

Orientador: Laercio Luis Vendite / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Matematica, Estatistica e Ciencia da Computação / Made available in DSpace on 2018-07-21T00:03:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Egreggio_AndreaRegina_M.pdf: 1755325 bytes, checksum: 755939d522c33b132d8db5c45207851c (MD5) Previous issue date: 1996 / Mestrado / Mestre em Matemática Aplicada

Orientador: Gil Eduardo Serra / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-22T14:32:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marques_TadeuAlcides_D.pdf: 4774613 bytes, checksum: c7e2b1d0b5fd0d96402e7be8802fc300 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo:Nas destilarias de álcool brasileiras utiliza-se o método de condução da fermentação denominado de "Melle-Boinot", que caracteriza-se pela recuperação e reciclagem de leveduras em ciclos de fermentações subsequentes. Contudo, juntamente com a reciclagem das leveduras ocorre a reciclagem de etanol e de outros componentes, que ao longo do processo ocorre de forma acumulativa. Ao final da fermentação o vinho é passado em centrífugas contínuas de pratos, para a separação do fermento, que contém as células de levedura, e da sua fase líquida que contém todos os componentes do vinho como água, etanol e metabólitos da fermentação, como metanol, propano 1, butanol e álcool amüico. Da mesma forma, em fermentações contínuas o fermento centrifugado apresenta as mesmas características. Assim sendo, o objetivo desse trabalho foi avaliar a interferência do etanol e metabólitos reciclados com o vinho sobre a performance fermentativa. As fermentações foram conduzidas em laboratório empregando-se a levedura Saccharomyces cerevisiae catalogada pela ESALQ/USP como IZ 1904, e mosto preparado a partir de melaço. Foram conduzidos dois ensaios empregando-se mosto com concentrações nominais de 180 e 310g/L de açúcares redutores totais. Os tratamentos empregados foram: a)fermento convencional: recuperação da biomassa de levedura e sua ressuspensão em vinho; b) fermento beneficiado: recuperação de biomassa de levedura e sua ressuspensão em água. A condução do ensaio deu-se ao longo de oito fermentações com sete reciclos de fermento com três repetições de ensaios. Empregando-se a menor concentração de ART no mosto (180g/L) observou-se efeitos discretos dos tratamentos testados. Nesse caso os teores de açúcares redutores residuais (ARR) foram maiores para os inóculos convencionais. Com o emprego de mosto com 310g/L de ART as diferenças foram maiores, destacando-se sempre o inoculo beneficiado. Dos resultados obtidos pode-se concluir que a reciclagem de vinho, através da centrifugação para a recuperação do fermento, ao final da fermentação, recicla também metabólitos que interferem na performance fermentativa. Essa interferência negativa acentua-se ao longo dos reciclos e com o aumento do teor de ART no mosto de alimentação. Os resultados permitem inferir que deve-se estudar uma reestruturação no tratamento do fermento nas destilarias, de acordo com as possibilidades do uso de equipamentos ou processos, que permitam uma melhor separação do vinho das células de leveduras / Abstract: This trial was conducted to evaluate the influence of metabolites presents in wine, from separated materials by Melle-Boinot process in the parameters of alcoholic fermentation simulated in laboratory conditions. The experiments were taken using Saccharomyces cerevisiae (IZ 1904) and juice of molasse from Piracicaba County, State of São Paulo, Brazil, with two contents of Total Reducing Sugars in juice: 180 and 310g/L. The treatments were: yeast dispel in water (optimized culture) and yeast dispel in water and wine (conventional culture). The seven recycles were taken of yeast after the turn on the alcoholic fermentation. Using juice with 180g/L of TRS, the residual sugar contents in wine were greatest when conventional culture was used. Several differences were observed when the content of TRS in juice was 3 lOg/L. From the results it can be concluded which: l)The interference of the wine recycled on the metabolism of yeast is easily detected when the greatest sugar content in juice was used.2)The effects of metabolites on the metabolism of yeasts were verified. It is an indication of which the Melle-Boinot process may be optimized in industrials conditions / Doutorado / Doutor em Engenharia de Alimentos

Made available in DSpace on 2017-03-14T14:10:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-04. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-14T14:42:46Z : No. of bitstreams: 1 000874678_20181204.pdf: 199887 bytes, checksum: 7fcbda625640b77a88d2ddde7778f477 (MD5) / Objetivou-­‐se  avaliar  os  efeitos  da  fototerapia  de  baixa  intensidade  realizada  com   diodos  emissores  de  luz  (LEDs)  nos  comprimentos  de  onda  azul  (455  nm)  e  vermelho   (630  nm)  sobre    o  metabolismo  de  células  pulpares.   Quatro  estudos  foram   desenvolvidos.  No  estudo  1  foi  avaliado  o  efeito  do  LED  vermelho  sobre  células   MDPC-­‐23,  utilizando-­‐se  dose  de  energia  fixa  (DE)  de  2J/cm2,  com  variação  da   densidade  de  potência  (DP)  em  20  e  40mW/cm2  e  frequência  de  exposição.  Vinte  e   quatro  horas  após  a  irradiação  foram  avaliadas  a  viabilidade  celular,  o  número  de   células  viáveis  e  a  dosagem  de  proteína  total.  No  estudo  2  investigou-­‐se  o  efeito  da   luz  azul  sobre  células  MDPC-­‐23.  Foram  utilizadas  DE  de  2J/cm2  e  4J/cm2  e  DP  de  20   mW/cm2    e  foram  avaliadas  a  viabilidade,  número  de  células  viáveis,  morfologia   celular  em  MEV  e  expressão  gênica  de  fosfatase  alcalina  (Alp),  colágeno  (Col-­‐I)  e   proteína  da  matriz  dentinária  (Dmp-­‐1).  O  estudo  3  deterrminou  os  efeitos   transdentinários  da  luz  azul  e   vermelha  sobre  células  MDPC-­‐23.  As  DPs  foram   ajustadas  em  40  e  80mW/cm2  para  luz  vermelha  e  azul,  respectivamente.  Após   irradiação  foram  avaliadas  a  viabilidade  celular,  atividade  de  fosfatase  alcalina,   produção  de  proteína  total  e  colágeno.  No  estudo  4  foram  investigados  os  efeitos   bioestimuladores  da  luz  azul  sobre  cultura  primária  de  polpa  humana.  Foram   utilizadas  DE  de  2  e  4J/cm2  com  DP  de  20mW/cm2... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / The  overall  aim  of  this  work  was  to  evaluate  the  effects  of  the  low  level   phototherapy  using  light  emitting  diodes  (LEDs)  at  the  blue  (455nm)  and  red   (630nm)  wavelengths  on  the  metabolism  of  pulp  cells  in  culture.  Four  studies  were   performed.  In  the  first  study,  the  effect  of  red  LEDs  on  MDPC-­‐23  cells  was   investigated,  using  a  fixed  energy  dose  of  2J/cm2  and  varying  the  density  of  potency   in  20  and  40mW/cm2  and  the  frequency  of  irradiation.  Cell  viability,  number  of  viable   cells  and  production  of  total  protein  were  analyzed  after  24h  from  the  irradiation.  In   the  second  study  it  was  evaluated  the  effect  of  the  blue  light  on  MDPC-­‐23  cells.  The   energy  doses  of  2  or  4J/cm2  with  a  dose  of  potency  of  20mW/cm2  were  delivered  to   the  cells.  Cell  viability,  number  of  viable  cells,  cell  morphology  in  SEM  and  gene   expression  for  alkaline  phosphatase  (Alp),  collagen  (Col-­‐I)  and  dentin  matrix  protein   (Dmp-­‐1)  were  analyzed.  The  third  study  investigated  the  transdentinal  effects  of  a   blue  and  red  light  on  MDPC-­‐23  cells.  The  densities  of  potencies  were  adjusted  in  40   and  80mW/cm2  for  the  blue  and  red  lights,  respectively.  After  irradiation  of  the  cell   culture,  cell  viability,  alkaline  phosphatase  activity,  production  of  total  protein  and   collagen  were  determined.  Lastly,  the  biostimulatory  effect  of  the  blue  light  on  a   primary  culture  of  human  pulp  was  investigated  in  the  fourth  study. .. (Complete abstract electronic access below)

Orientador: Fernanda da Cruz Landim Alvarenga / Banca: Eunice Oba / Banca: Mateus José Sudano / Resumo: O sistema de cultivo in vitro de embriões apresenta menor eficiência em relação ao in vivo, sendo caracterizado por menores taxas de desenvolvimento e de adesão, além de uma menor tolerância à certas alterações que provocam estresse, como agentes físicos, químicos, térmicos, osmóticos, oxidativos, radioativos, entre outros. De acordo com a intensidade do estresse, pode-se estimular uma resposta celular favorecendo o desenvolvimento embrionário, adquirindo maior tolerância através de aceleração no metabolismo, proliferação e crescimento celular. O objetivo do presente trabalho foi analisar o efeito do estresse óptico em diferentes momentos ao longo do cultivo e conhecer as possíveis aplicações, a partir do estresse subletal e da bioestimulação promovida pela irradiação com diodo emissor de luz (LED). Com isto, os resultados demonstraram que em alguns estágios do desenvolvimento embrionário, tal como em blastocistos, o uso do estresse óptico pode ser benéfico ao embrião, protegendo-o de eventos como a apoptose. Os principais resultados demonstram que na produção de blastocistos houve aumento na produção dos mesmos nos grupos irradiados, apesar de não haver diferença estatística (Controle 23,2; IRD3inf 31,3; IRD6Infra 33,3). O estímulo por LED prévio à vitrificação mostrou que a irradiação por infravermelho em D3 pode estimular o aumento, em média, do numero de células (Controle: 91,9; IRD3inf: 112,8). Em relação às células apoptóticas, grupos irradiados com luz infravermelha mostraram menos número de células envolvidas neste processo (Controle: 11,6; IRD6inf: 6,6; IRFIVinf: 7,8), e a irradiação por luz vermelha pareceu aumentar a apoptose (IRD3verm: 15,6; IRD6verm: 16,1). Em relação à taxa de reexpansão, o a irradiação por luz vermelha teve efeito sobre o grupo irradiado em D3, mostrando uma diminuição significativa para o mesmo (Controle: 70,5 IRD3 verm; 39,3). De ... / Abstract: The in vitro embryo culture system has lower efficiency compared to in vivo, because the in vitro system is characterized by lower rates of development, deployment, and a lower tolerance to certain changes that cause stress, such as physical, chemical, thermal, osmotic, oxidative and radioactive among others. According to the stress intensity it is possible to stimulate a cellular response promoting embryonic development and acquiring greater tolerance by the acceleration of metabolism, cell proliferation and growth. The objective of this study was to analyze the effect of the optical stress at different periods throughout the embryo development and understand the possible applications for this stimulation, from sublethal stress and biostimulation promoted by irradiation with lasers. Therefore, the results showed that optical stress can be beneficial to the embryos at certain stages of their development, such as blastocysts stage, protecting them from apoptosis. The main results show that an increase in blastocysts production for infrared irradiated groups, although there was no statistical difference (control 23.2; IRD3inf 31.3; IRD6Inf 33.3). The infrared LED stimulus prior to vitrification showed a higher number of cells for embryos in D3 (control: 91.9; IRD3inf: 112.8). Also, infrared irradiation appeared to decrease the number of apoptotics cells, when compared to controls (control: 11.6; IRD6inf: 6.6; IRFIVinf: 7.8), and red light irradiation appeared to increase apoptosis (IRD3verm: 15.6; IRD6verm: 16.1). Regarding re-expansion rate, the red light irradiation in D3 is related a significant decrease in the rate (control: 70.5; IRD3verm: 39.3). According to the results, irradiation with infrared light effect is shown in blastocyst production, which is economically important to embryos IVP. Moreover, the apoptosis analysis showed that the association between the techniques applied in this study are important for the in ... / Mestre

Orientador: Josemeri Hebling / Banca: / Co-orientador: Fernanda Gonçalves Basso / Banca: Carla Raquel Fernanda mendonça / Banca: Francisco Wanderley Garcia de Paula e Silva / Banca: Andréa Abi Rached Dantas / Banca: Patrícia Petromilli Nordi Sasso Garcia / Resumo: Objetivou-­‐se  avaliar  os  efeitos  da  fototerapia  de  baixa  intensidade  realizada  com   diodos  emissores  de  luz  (LEDs)  nos  comprimentos  de  onda  azul  (455  nm)  e  vermelho   (630  nm)  sobre    o  metabolismo  de  células  pulpares.   Quatro  estudos  foram   desenvolvidos.  No  estudo  1  foi  avaliado  o  efeito  do  LED  vermelho  sobre  células   MDPC-­‐23,  utilizando-­‐se  dose  de  energia  fixa  (DE)  de  2J/cm2,  com  variação  da   densidade  de  potência  (DP)  em  20  e  40mW/cm2  e  frequência  de  exposição.  Vinte  e   quatro  horas  após  a  irradiação  foram  avaliadas  a  viabilidade  celular,  o  número  de   células  viáveis  e  a  dosagem  de  proteína  total.  No  estudo  2  investigou-­‐se  o  efeito  da   luz  azul  sobre  células  MDPC-­‐23.  Foram  utilizadas  DE  de  2J/cm2  e  4J/cm2  e  DP  de  20   mW/cm2    e  foram  avaliadas  a  viabilidade,  número  de  células  viáveis,  morfologia   celular  em  MEV  e  expressão  gênica  de  fosfatase  alcalina  (Alp),  colágeno  (Col-­‐I)  e   proteína  da  matriz  dentinária  (Dmp-­‐1).  O  estudo  3  deterrminou  os  efeitos   transdentinários  da  luz  azul  e   vermelha  sobre  células  MDPC-­‐23.  As  DPs  foram   ajustadas  em  40  e  80mW/cm2  para  luz  vermelha  e  azul,  respectivamente.  Após   irradiação  foram  avaliadas  a  viabilidade  celular,  atividade  de  fosfatase  alcalina,   produção  de  proteína  total  e  colágeno.  No  estudo  4  foram  investigados  os  efeitos   bioestimuladores  da  luz  azul  sobre  cultura  primária  de  polpa  humana.  Foram   utilizadas  DE  de  2  e  4J/cm2  com  DP  de  20mW/cm2... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The  overall  aim  of  this  work  was  to  evaluate  the  effects  of  the  low  level   phototherapy  using  light  emitting  diodes  (LEDs)  at  the  blue  (455nm)  and  red   (630nm)  wavelengths  on  the  metabolism  of  pulp  cells  in  culture.  Four  studies  were   performed.  In  the  first  study,  the  effect  of  red  LEDs  on  MDPC-­‐23  cells  was   investigated,  using  a  fixed  energy  dose  of  2J/cm2  and  varying  the  density  of  potency   in  20  and  40mW/cm2  and  the  frequency  of  irradiation.  Cell  viability,  number  of  viable   cells  and  production  of  total  protein  were  analyzed  after  24h  from  the  irradiation.  In   the  second  study  it  was  evaluated  the  effect  of  the  blue  light  on  MDPC-­‐23  cells.  The   energy  doses  of  2  or  4J/cm2  with  a  dose  of  potency  of  20mW/cm2  were  delivered  to   the  cells.  Cell  viability,  number  of  viable  cells,  cell  morphology  in  SEM  and  gene   expression  for  alkaline  phosphatase  (Alp),  collagen  (Col-­‐I)  and  dentin  matrix  protein   (Dmp-­‐1)  were  analyzed.  The  third  study  investigated  the  transdentinal  effects  of  a   blue  and  red  light  on  MDPC-­‐23  cells.  The  densities  of  potencies  were  adjusted  in  40   and  80mW/cm2  for  the  blue  and  red  lights,  respectively.  After  irradiation  of  the  cell   culture,  cell  viability,  alkaline  phosphatase  activity,  production  of  total  protein  and   collagen  were  determined.  Lastly,  the  biostimulatory  effect  of  the  blue  light  on  a   primary  culture  of  human  pulp  was  investigated  in  the  fourth  study. .. (Complete abstract electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-06Bitstream added on 2014-11-10T11:57:44Z : No. of bitstreams: 1 000784225.pdf: 760734 bytes, checksum: c70c8782d6352b14ba371a32c3549c66 (MD5) / O sistema de cultivo in vitro de embriões apresenta menor eficiência em relação ao in vivo, sendo caracterizado por menores taxas de desenvolvimento e de adesão, além de uma menor tolerância à certas alterações que provocam estresse, como agentes físicos, químicos, térmicos, osmóticos, oxidativos, radioativos, entre outros. De acordo com a intensidade do estresse, pode-se estimular uma resposta celular favorecendo o desenvolvimento embrionário, adquirindo maior tolerância através de aceleração no metabolismo, proliferação e crescimento celular. O objetivo do presente trabalho foi analisar o efeito do estresse óptico em diferentes momentos ao longo do cultivo e conhecer as possíveis aplicações, a partir do estresse subletal e da bioestimulação promovida pela irradiação com diodo emissor de luz (LED). Com isto, os resultados demonstraram que em alguns estágios do desenvolvimento embrionário, tal como em blastocistos, o uso do estresse óptico pode ser benéfico ao embrião, protegendo-o de eventos como a apoptose. Os principais resultados demonstram que na produção de blastocistos houve aumento na produção dos mesmos nos grupos irradiados, apesar de não haver diferença estatística (Controle 23,2; IRD3inf 31,3; IRD6Infra 33,3). O estímulo por LED prévio à vitrificação mostrou que a irradiação por infravermelho em D3 pode estimular o aumento, em média, do numero de células (Controle: 91,9; IRD3inf: 112,8). Em relação às células apoptóticas, grupos irradiados com luz infravermelha mostraram menos número de células envolvidas neste processo (Controle: 11,6; IRD6inf: 6,6; IRFIVinf: 7,8), e a irradiação por luz vermelha pareceu aumentar a apoptose (IRD3verm: 15,6; IRD6verm: 16,1). Em relação à taxa de reexpansão, o a irradiação por luz vermelha teve efeito sobre o grupo irradiado em D3, mostrando uma diminuição significativa para o mesmo (Controle: 70,5 IRD3 verm; 39,3). De ... / The in vitro embryo culture system has lower efficiency compared to in vivo, because the in vitro system is characterized by lower rates of development, deployment, and a lower tolerance to certain changes that cause stress, such as physical, chemical, thermal, osmotic, oxidative and radioactive among others. According to the stress intensity it is possible to stimulate a cellular response promoting embryonic development and acquiring greater tolerance by the acceleration of metabolism, cell proliferation and growth. The objective of this study was to analyze the effect of the optical stress at different periods throughout the embryo development and understand the possible applications for this stimulation, from sublethal stress and biostimulation promoted by irradiation with lasers. Therefore, the results showed that optical stress can be beneficial to the embryos at certain stages of their development, such as blastocysts stage, protecting them from apoptosis. The main results show that an increase in blastocysts production for infrared irradiated groups, although there was no statistical difference (control 23.2; IRD3inf 31.3; IRD6Inf 33.3). The infrared LED stimulus prior to vitrification showed a higher number of cells for embryos in D3 (control: 91.9; IRD3inf: 112.8). Also, infrared irradiation appeared to decrease the number of apoptotics cells, when compared to controls (control: 11.6; IRD6inf: 6.6; IRFIVinf: 7.8), and red light irradiation appeared to increase apoptosis (IRD3verm: 15.6; IRD6verm: 16.1). Regarding re-expansion rate, the red light irradiation in D3 is related a significant decrease in the rate (control: 70.5; IRD3verm: 39.3). According to the results, irradiation with infrared light effect is shown in blastocyst production, which is economically important to embryos IVP. Moreover, the apoptosis analysis showed that the association between the techniques applied in this study are important for the in ...

Orientador: Gilson Hélio Tonillo / Coorientador: Joaquim Mansano Garcia / Coorientador: Annelise Carla Camples / Banca: Maricy Apparício Ferreira / Banca: Fabiana Ferreira de Souza / Resumo: Com a descoberta das células-tronco abriu-se um leque de possibilidades nas pesquisas de nichos destas em diferentes órgãos e também no estudo de doenças e regeneração tecidual. O fígado vem sendo alvo de muitos estudos já que as doenças crônicas deste órgão tem como resolução um transplante, o que é caro e há poucos doadores. O fígado é composto, principalmente, por hepatócitos, no entanto, seu cultivo e mantença in vitro são difíceis. Assim, uma alternativa é a manutenção das células progenitoras hepáticas. Elas são conhecidas em camundongos, humanos, mas, pouco mencionadas em cães. Esse trabalho objetivou mostrar a existência das células progenitoras hepáticas no cultivo celular de fígado fetal de cães por imunocitoquímica e citometria de fluxo a fim de saber se este nicho celular existe no cultivo e se é possível num futuro próximo a separação desta linhagem nesta espécie. Foram utilizados para a realização do trabalho 10 fetos sendo que destes foi possível o aproveitamento em sete animais. Foi realizado no trabalho isolamento, cultivo de células hepáticas, criopreservação, curva de crescimento celular, imnocitoquímica e citometria de fluxo. A cultura celular durou sete passagens, com dobramento populacional de 31,7 horas, na imunocitoquímica as células foram marcadas positivamente para os seguintes marcadores: EpCAM, NCAM, Nestina e Thy-1.Na citometria de fluxo foi possível realizar a dupla marcação das células com os maracadores EpCam e NCAM que resultaram em 0... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: With the discovery of stem cells has opened up a range of possibilities in niche research these in different organs and also in the study of diseases and tissue regeneration the liver has been the subject of many studies since chronic diseases of this organ has the resolution a transplant, which is expensive and there are few donors. The liver consists mainly of hepatocytes; however, its cultivation and maintenance in vitro are difficult. Thus, an alternative is to maintain the hepatic progenitor cells. They are known in mice, humans, but rarely mentioned in dogs. This study aimed to show the existence of hepatic progenitor cells in cell culture fetal liver of dogs by immunocytochemistry and flow cytometry in order to know if this cell niche exists in the cultivation and whether it is possible in the near future the separation of this lineage in this species. They were used to carry out the work 10 fetuses and of these it was possible to use in seven animals. Work was carried out in isolation, cultivation of liver cells, cryopreservation, cell growth curve, immunocytochemistry and flow cytometry. The cell culture lasted seven passes, doubling time in 31.7 hours, in immunocytochemistry cells were positively stained for the following markers: EpCAM, NCAM, Nestin and Thy-1. In flow cytometry it was possible to double staining of cells with EpCam markers and NCAM which resulted in 0.5 % ± 0.173 of the total of the cells analyzed. Concludes that the purpose of the desir... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre