A longevidade das restaurações com compósitos está diretamente relacionada ao sucesso do tratamento estético. A vida útil das restaurações pode ser influenciada por vários fatores como o material empregado, tempo de uso clínico e a degradação da matriz dentinária por metaloproteinases da matriz (MMPs), que podem afetar a integridade da interface adesiva, fazendo com que a união dentina-­adesivo seja comprometida. Assim, buscando melhores resultados na durabilidade das restaurações adesivas, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de substâncias inibidoras de MMPs (soluções de clorexidina -­ CHX a 0,2% e doxiciclina a 3%) e agente de ligação cruzada (extrato de semente de uva -­ grape seed extract - GSE a 15%) na Resistência de União (RU) de restaurações de resina composta submetidas à ciclagem mecânica. Cavidades de Classe I foram preparadas na área central da superfície exposta de 48 molares humanos hígidos, posteriormente separados em 4 grupos (n=12) de acordo com o tratamento de superfície recebido após o condicionamento de ácido: Grupo I -­ Controle (Sistema Adesivo -­ Adper Single Bond Plus -­ 3M ESPE); Grupo II -­ CHX 0,2% + Sistema Adesivo; Grupo III -­ GSE 15% + Sistema Adesivo e Grupo IV -­ Doxiciclina 3% + Sistema Adesivo. Após os procedimentos restauradores (Filtek Supreme Ultra -­ 3M ESPE), as amostras foram armazenadas em água destilada durante 24 horas a 37°C e subdividas em dois subgrupos: A -­ Controle (armazenado em saliva artificial) e B -­ Submetido à ciclagem mecânica (Coil Cycler, Proto-­tech, forca de 50 N, frequência de 1,5 Hz em 1 x 106 ciclos de aplicação). Após ciclagem mecânica, os corpos de prova foram cortados em palitos (0,8 x 0,8 mm; n = 5 por dente) e submetidos ao teste de microtração (Bisco) a velocidade de 1 mm/min. A atividade colagenolítica da MMP-­2 sob a ação dos primers bioativos foi analisada utilizando o kit EnzChek Gelatinase/Colagenase Assay (D-­12054, Molecular Probes, Eugene, OR, EUA). A atividade gelatinolítica das MMPs-­2 e -­9 após incubação com os primers bioativos foi avaliada através de zimografia convencional. Os resultados obtidos das duas análises foram apresentados na forma de porcentagem de inibição. Zimografia in situ foi realizada utilizando gelatina de fluorescência conjugada (Kit EnzChek Gelatinase/Collagenase Assay) como substrato de MMPs e avaliada com aumento de 40x através de microscopia de fluorescência. Posteriormente, os fótons fluorescentes foram analisados em software (ImageJ). Obtidos os resultados, os dados foram submetidos à análise estatística (2way ANOVA, Tukey, p>0,05) e demonstraram que os primers bioativos não exerceram influência significante sobre a RU dentina-­adesivo, independente da ação da ciclagem mecânica. A atividade colagenolítica, segundo zimografia convencional, demonstrou que os primers bioativos foram capazes de inibir as MMPs, sendo a CHX menos eficiente. Na análise de zimografia in situ, os primers bioativos diminuíram a atividade das MMPs localizadas na interface adesiva, com aumento da atividade gelatinolítica do grupo Controle sendo maior quando submetidos à ciclagem mecânica, efeito não encontrados no grupos tratados com primers bioativos. Concluiu-­se que, apesar de não apresentarem efeitos sobre a RU da interface adesiva, os primers bioativos apresentam ação sobre a degradação da camada híbrida. / The durability of composite resin restorations is one of the main points related to the success in aesthetic treatments. The longevity of adhesive restorations can be affected by various factors such as the materials, the clinical time of use and the dentin matrix degradation mediated by matrix metalloproteinases (MMPs). MMPs can affect the adhesive interface, compromising the bonding between dentin and adhesive. Thus, searching for better results on longevity of adhesive restorations, the aim of this study was to evaluate the effect of MMPs inhibitors (chlorhexidine -­ CHX 0.2% and doxycycline 3% ) and crosslinking agent (grape seed extract -­ GSE 15%) on resin composite bond strength (BS) of restorations submitted to load cycling. Class I cavities were performed in the central area of the exposed surface of 48 sound human molars. Then, it was divided into 4 groups (n=12) according to the surface treatment received after the acid etching: Group I -­ Control (Adhesive System -­ Adper Single Bond Plus -­ 3M ESPE); Group II -­ CHX 0.2% + Adhesive System; Group III -­ Doxycycline 3% + Adhesive System e Group IV -­ GSE 15% + Adhesive System. After restorative procedures (Filtek Supreme Ultra -­ 3M ESPE), the samples were stored in distilled water for 24 hours at 37°C and then subdivided into two subgroups (n=6): A -­ Control (stored in artificial saliva) and B -­ Submitted to load cycling (Coil Cycler, Proto-­tech, 50 N, 1.5 Hz, 1 x 106 cycles). After load cycling, the specimens were cut into sticks (0.8 x 0.8 mm; n = 5 per teeth) and submitted to the microtensile test (Bisco) at 1 mm/min. The collagenolytic activity of MMP-­2 under action of bioactive primers was analyzed using EnzChek Gelatinase/Colagenase Assay Kit (D-­12054, Molecular Probes, Eugene, OR, EUA). The gelatinolytic activity of MMPs-­2 and -­9 after incubation with the bioactive primers was evaluated by gelatin zymography. The results of these two analyzes were presented by percentage of inhibition. In situ zymography was performed using fluorescence conjugated gelatin (EnzChek Gelatinase/Collagenase Assay Kit) as MMP substrate and evaluated using 40x magnification under fluorescence microscopy. Then the fluorescent photons were analyzed with an appropriate software (ImageJ). The results were subjected to statistical analysis (2-­way ANOVA, Tukey, p<0.05) and the bioactive primers showed no significant influence on the dentin-­adhesive BS, regardless the load cycling action. According to gelatin zymography, the collagenolytic activity demonstrated that the bioactive primers were able to inhibit MMPs activity and CHX was less efficient. In situ zymography analysis, showed that the bioactive primers decreased the activity of MMPs located in adhesive interface. The data also demonstrated increased gelatinolytic activity on Control group, being higher when submitted to load cycling, and which effect was not found in the groups treated with bioactive primers. It could be concluded that although the bioactive primers did not influenced the BS of adhesive interface, they demonstrated positive results on hybrid layer degradation.

Orientador: Marcia Carneiro Valera / Banca: Celso Luiz Caldeira / Banca: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Banca: Claudio Antonio Talge Carvalho / Banca: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Resumo: A proposta deste trabalho foi avaliar a efetividade dos extratos glicólicos de própolis e de gengibre, hidróxido de cálcio, clorexidina gel e associações como medicação intracanal (MIC) sobre Candida albicans, Enterococcus faecalis, Escherichia coli e endotoxinas em canais radiculares. Foram utilizadas 96 raízes de dentes unirradiculados que tiveram seus canais contaminados com suspensões dos microrganismos por 28 dias. Após a coleta de confirmação, os canais foram instrumentados com solução salina e divididas de acordo com a medicação intracanal utilizada: hidróxido de cálcio [Ca(OH)2] + solução salina; clorexidina gel 2% (CLX); Ca(OH)2 + CLX; própolis (PRO); PRO + Ca(OH)2; gengibre (GENG); GENG + Ca(OH)2; solução salina. Foram realizadas as seguintes coletas do conteúdo do canal radicular: coleta de confirmação (após 28 dias de contaminação), 1a coleta (imediatamente após a instrumentação), 2ª coleta (imediatamente após 14 dias da ação da MIC), 3ª coleta (7 dias após remoção da MIC). Para todas as coletas foram avaliadas: a) atividade antimicrobiana; b) quantificação de endotoxinas pelo teste cromogênico do lisado de amebócitos de Limulus. Os resultados foram submetidos aos testes estatísticos Kruskal-Wallis e Dunn (5%). Verificou-se que todas as MIC foram capazes de eliminar os microrganismos dos canais radiculares, entretanto, o Ca(OH)2 não foi capaz de eliminar completamente C. albicans e E. faecalis. Verificou-se que as MIC contendo Ca(OH)2 foram capazes de diminuir significativamente as endotoxinas dos canais radiculares, sendo semelhantes entre si e diferentes do grupo salina. As medicações CLX, PRO, GENG e salina foram semelhantes entre si. Conclui-se que todas as MIC foram capazes de eliminar os microrganismos do canal radicular e reduzir a quantidade de endotoxinas dos canais radiculares, entretanto, as MIC à base de hidróxido... (Resumo completo clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The purpose of this study was to evaluate the effectiveness of glycolic propolis and ginger extracts, calcium hydroxide, chlorhexidine gel and associations as intracanal medication (ICM) on Candida albicans, Enterococcus faecalis, Escherichia coli and endotoxins in root canals. Ninety-six roots of single-rooted teeth were contaminated with suspensions of the microorganisms for 28 days. After the confirmation collection, the canals were instrumented with saline and divided according to the intracanal medication used: calcium hydroxide [Ca(OH)2] + saline; 2% chlorhexidine gel (CLX); Ca(OH)2 + CLX; propolis (PRO); PRO + Ca(OH)2; ginger (GENG); GENG + Ca(OH)2; saline. Samples of the root canal content were performed in the following periods: confirmation collection (after 28 days of contamination), 1st collection (immediately after instrumentation), 2nd collection (immediately after 14 days of the action of ICM), 3rd collection (7 days after removal of the ICM). All samples were analyzed according to the following parameters: a) antimicrobial activity, b) quantification of endotoxins by the chromogenic Limulus amoebocyte lysate assay. The results were statistically analyzed by the Kruskal-Wallis and Dunn tests (5%). It was verified that all ICM were able to eliminate the microorganisms from the root canals; however, the Ca(OH)2 was not able to completely eliminate C. albicans and E. faecalis. It was verified that ICM containing Ca(OH)2 were able to significantly decrease endotoxins from the root canals, being similar to each other and to the saline group. The medications CLX, PRO, GENG and saline were similar to each other. It was concluded that all ICM were able to eliminate the microorganisms from the root canal and reduce the amount of endotoxins from the root canals. However, the ICM containing calcium hydroxide were more effective in neutralizing endotoxins / Doutor

Esse estudo in vitro avaliou a resistência adesiva da dentina preparada com laser de Er:YAG ou broca, reidratada com clorexidina ou água deionizada, após armazenamento em saliva artificial e termociclagem. Cento e vinte terceiros molares humanos hígidos foram seccionados no terço médio da coroa, expondo a superfície dentinária (n=10). Os espécimes foram divididos aleatóriamente de acordo com o tratamento [laser de Er:YAG + reidratação com água deionizada (LW), laser de Er:YAG + reidratação com clorexidina a 2% (LC), turbina de alta-rotação com broca #245 + reidratação com água deionizada (TW) e turbina de alta-rotação com broca #245 + reidratação com clorexidina a 2% (TC)]. Após o preparo da dentina, os espécimes foram condicionados com ácido fosfórico 35%, lavados e secos com ar. A reidratação da dentina foi realizada através da aplicação de 1.5!L de água deionizada ou clorexidina 2%. Um sistema adesivo etch and rinse foi aplicado seguido da restauração com resina composta. Em cada grupo os espécimes foram sub-divididos de acordo com o envelhecimento [24 horas de armazenamento em saliva artificial / sem termociclagem (NA); 6 meses de armazenamento em saliva artificial / 12.000 ciclos térmicos (6A); 12 meses de armazenamento em saliva artificial / 24.000 ciclos térmicos(12A)]. Após cada período de envelhecimento, os dentes foram seccionados a fim de se obter 4 palitos com area de ±1.0 mm2, que foram submetidos ao teste de microtração usando uma máquina universal de testes com velocidade de 0.5 mm/min. Para a análise da interface adesiva em MEV foram utilizados 36 terceiros molares hígidos (n = 3) que foram restaurados e envelhecidos como descrito no protocolo empregado para o teste adesivo. ANOVA a dois critérios mostrou que não houve diferença significante para a interação entre os fatores e para o fator envelhecimento. O teste de Tukey 5% mostrou que o grupo LC apresentou os menores valores de resistência adesiva. A análise da interface adesiva através da MEV demonstrou que para os grupos irradiados houve formação de camada híbrida irregular com presença de fendas e o envelhecimento não interferiu na morfologia da interface adesiva. A reidratação com clorexidina influenciou negativamente a resistência adesiva do prepare com laser de Er:YAG. O envelhecimento em saliva artificial e termociclagem não interferiram na resistência adesiva da dentina. / This in vitro study evaluated the bond strength of dentin prepared with Er: YAG laser or turbine, rehydrated with chlorhexidine or deionized water after artificial saliva storage and thermocycling. One hundred twenty human third molars were sectioned in order to expose the dentin surface (n=10). The specimens were equally and randomly divided according to treatment [Er:YAG laser + deionized water rehydration (LW), Er:YAG laser + chlorhexidine 2% rehydration (LC), bur on high-speed turbine + deionized water rehydration (BW) and bur on high-speed turbine + chlorhexidine 2% rehydration (BC)]. After dentin preparation, the specimens were etched with 35% phosphoric acid, washed and dried with air. The dentin rehydration method was performed with deionized water or chlorhexidine 2% by applying 1.5!L of each solution. An etch and rinse adhesive system was then applied and the samples were restored with a composite. In each group, the specimens were sub-divided in accordance with the aging method [24 hours artificial saliva storage, no thermocycling (NA); 6 months of artificial saliva storage, 12.000 thermocycling (6A); 12 months of artificial saliva storage, 24.000 thermocycling (12 A)]. After each aging period, each tooth was sectioned in order to obtain 4 sticks with a cross-sectional area of 1.0 mm2, which were submitted to microtensile test using the Universal Test Machine (0.5 mm/min). For the adhesive interface analysis by SEM, 36 healthy third molars (n=3) were restored and aged as the protocol used for the adhesive test. The two-way ANOVA showed no significant differences for the interaction between the factors and for the aging factor. Tukey test 5% showed that the LC group had the lowest bond strength values. The adhesive interface analysis by SEM showed that the irradiated groups presented irregular hybrid layer and cracks and the aging did not affect the adhesive interface morphology. The rehydration with chlorhexidine negatively influenced the bond strength of the preparation with the Er:YAG laser. The artificial saliva aging and thermocycling did not interfere with dentin bond strength.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a pasta à base de hidróxido de cálcio (Calen®), associada ou não ao digluconato de clorexidina a 0,4%, em cultura de macrófagos da linhagem RAW 264.7, cultura primária de células da linhagem osteoblástica e em tecido subcutâneo de camundongos. Além disso, foi avaliada a atividade antimicrobiana desses materiais. Em cultura de macrófagos RAW 264.7 foram avaliados os seguintes aspectos: a viabilidade celular (Ensaio de MTT), propriedades imunoestimuladoras (dosagem de óxido nítrico) e propriedades antiinflamatórias (dosagem de óxido nítrico, TNF-&alpha; e IL-1&alpha;). Em cultura primária de células da linhagem osteoblástica foram avaliados viabilidade celular (períodos de 3, 7 e 10 dias), conteúdo de proteína total (Método de Lowry modificado nos períodos de 7 e 10 dias), atividade da fosfatase alcalina (liberação de timolftaleína nos períodos de 7 e 10 dias e in situ pelo método do Fast red), proteínas da matriz não-colágena (marcação por Imunofluorescência Indireta e Fluorescência Direta por meio da utilização da faloidina e DAPI, nos períodos de 3, 7 e 14 dias) e formações nodulares de matriz mineralizada (marcação pelo vermelho de Alizarina nos períodos de 3, 7 e 14 dias). A atividade antimicrobiana foi avaliada por meio do teste de difusão em ágar, sobre 2 microrganismos indicadores (Enterococcus faecalis e Kocuria rhizophila). A biocompatibilidade após implantanção de tubos de polietileno contendo as pastas no tecido subcutâneo de camundongos isogênicos Balb/c. Os dados numéricos foram submetidos à análise estatística por meio do teste de Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn, com nível de significância de 5%. Os resultados referentes à exposição das células da linhagem RAW 264.7 de macrófagos evidenciou baixa atividade imunoestimuladora da pasta à base de hidróxido de cálcio (Calen®), associada ou não ao digluconato de clorexidina 0,4%, nas diferentes concentrações avaliadas. Por outro lado, pôde-se observar atividade antiinflamatória, com inibição na liberação de óxido nítrico e das citocinas (TNF-&alpha; e IL1-&alpha;), quando da utilização da associação hidróxido de cálcio e clorexidina na concentração de 25&micro;g/ml. Resultados semelhantes ao controle foram observados após a avaliação da pasta à base de hidróxido de cálcio (Calen®), associada ou não ao digluconato de clorexidina a 0,4% em cultura primária de células da linhagem osteoblástica uma vez que os dados numéricos do conteúdo de proteína total, da quantidade de fosfatase alcalina e das formações nodulares de matriz mineralizada não foram estatisticamente diferentes (p>0,05). Em relação à caracterização morfológica das culturas primárias os resultados obtidos foram semelhantes quando comparou-se a pasta Calen®, associada ou não à clorexidina a 0,4%. Em relação à atividade antimicrobiana, a associação hidróxido de cálcio e clorexidina promoveu a formação de maiores halos de inibição (em mm), em relação ao Enterococcus faecalis, embora sem diferença estatística significante com os demais grupos avaliados (p>0,05). No tecido conjuntivo subcutâneo de camundongos, a análise microscópica demonstrou ser esta associação biocompatível, com tecido circunjacente e reacional, apresentando fibrosamento discreto e semelhante ao tecido conjuntivo fibroso normal, aos 63 dias de avaliação, sem diferença estatística com grupo controle (p>0,05). Com base nas metodologias empregadas e nos resultados obtidos pode-se concluir que a adição da clorexidina não apresentou benefícios adicionais à pasta à base de hidróxido de cálcio. / The aim of this study was to evaluate the calcium hydroxide-based paste (Calen®), associated or not to 0.4% chlorexidine digluconate, in culture of RAW 264.7 macrophages lineage, primary culture of osteoblastic lineage, and mice subcutaneous tissue. Besides we evaluated the antimicrobial activity of those materials. In RAW 264.7 macrophages culture the followed aspects were evaluated: cellular viability (MTT assay), immunestimulatory (nitric oxide detection) and anti-inflammatory (nitric oxide, TNF-&alpha; and IL-1-&alpha; detection) properties. In primary cell culture of osteoblastic lineage we evaluated the cellular viability for 3, 7 and 10 days, total protein content (Lowry modified method for 7 and 10 days), alkalinic phosphatase activity (thymolphthalein liberation for 7 and 10 days, and in situ by Fast red method), extracellular matrix noncollagen protein (stained by indirect immunofluorescence and direct fluorescence by phalloidin and DAPI for 3, 7 and 14 days), and mineralized matrix nodular formation (stained by Alizarin red for 3, 7 and 14 days). Antimicrobial activity was evaluated by agar diffusion test with Enterococcus faecalis and Kocuria rhizophila as indicators, and the biocompatibility after polyethylene tubes with the paste implanted into Balb/c mice subcutaneous tissue. The data were statistically analyzed by Kruskal-Wallis test, followed by Dunn\'s post test, considering a level of significance of 5%. The results of macrophage RAW 264.7 cells lineage exposition showed low stimullatory activity for the different concentrations evaluated of calcium hydroxide-based paste (Calen®), associated or not to 0.4% chlorexidine digluconate. On the other hand, we could observe anti-inflammatory activity with inhibition of nitric oxide and cytokines quantification (TNF--&alpha; e IL1--&alpha;), after the use of 25-&micro;g/ml calcium hydroxide associated to chlorhexidine (25-&micro;g/ml). Same results to the control were observed after evaluation of Calen® paste associated or not to 0.4% chlorexidine digluconate, in culture of RAW 264.7 macrophages lineage, primary culture of osteoblastic lineage because the data of total protein content, alkaline phosphatase, and mineralized matrix nodular formation were not statistically different (p>0.05). In relation to the morphological characterization of primary culture, the results obtained were the same after comparison of Calen® paste, associated or not to 0.4% chlorexidine digluconate. About antimicrobial activity, the association Calcium hydroxide and chlorhexidine promoted formation of largest inhibition halo (in mm) for Enterococcus faecalis, but with no statistically significant with others evaluated groups (p>0.05). The microscopic analysis in mice conjunctive subcutaneous tissue demonstrated biocompatibility of that association with the around and reactional tissue, sowing a discret fibrosis, as well as the normal conjunctive fibrous tissue after 63 days of evaluation with no statistically difference with the control group (p>0.05). Based on the methodology used, and the results obtained in this work, we could conclude that the addition of chlorexidine showed no additional benefits to the calcium hydroxide-based paste.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Biofilms are biological communities with a high degree of organization in which microorganisms are adhered to a surface. Microorganisms, when in biofilm, become a target of concern in the clinical field due to the low response to antimicrobial treatments and ease of colonization of surfaces such as implants, catheters and surgical instruments. Several studies have shown that antimicrobial and biocides have their effectiveness decreased against biofilms. Chlorhexidine is a powerful antiseptic widely used in hospitals especially applied in hand antisepsis, disinfection of environments, and sterilization of surgical instruments used in invasive procedures. Thus, the present study aimed to determine whether bacterial and fungal biofilms are able to resist the antimicrobial action of chlorhexidine. Disk diffusion and susceptibility tests were performed according to Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI), 2013. To determine the Biofilm Inhibition Concentration (BIC), chlorhexidine was tested at concentrations of Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and at higher concentrations when necessary. The plates were developed with a solution of 0.1% crystal violet and the optical density (OD) was obtained at 570 nm. Results showed that chlorhexidine has excellent antimicrobial activity against most organisms tested in its free form; however, it was less effective against biofilms of Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Staphylococcus aureus resistant to Methicillin (MRSA) and Pseudomonas aeruginosa, developed in isolation for each species. Thus, chlorhexidine is likely to have its antimicrobial activity decreased when exposed to microorganisms in biofilms. This probably occurs due to resistance mechanisms attributed to the biofilm structure exopolysaccharide matrix, quorum sensing (QS), genetic diversity and to the inappropriate use of this biocide. / Biofilmes são comunidades biológicas com elevado grau de organização, onde os microrganismos se encontram aderidos a uma superfície. Os microrganismos, quando em biofilme, tornam-se alvo de preocupação na área clínica devido à baixa resposta aos tratamentos antimicrobianos e à facilidade de colonização de superfícies como próteses, cateteres e instrumentos cirúrgicos. Vários estudos demonstram que os antimicrobianos e biocidas têm sua eficácia diminuída frente aos biofilmes. A clorexidina é um poderoso antisséptico largamente empregado no ambiente hospitalar, aplicado especialmente na antissepsia de mãos, desinfecção de ambientes cirúrgicos e esterilização de instrumentos utilizados em procedimentos invasivos. Deste modo, o presente trabalho teve como objetivo verificar se biofilmes bacterianos e fúngico são capazes de resistir à atuação antimicrobiana da clorexidina. Testes de disco-difusão e de suscetibilidade foram conduzidos de acordo com CLSI (Clinical Laboratory Standards Institute), 2013. Para a determinação da CIB (Concentração de Inibição de Biofilme), a clorexidina foi testada nas concentrações da CIM (Concentração Inibitória Mínima) e em concentrações maiores, quando necessário. As placas foram reveladas com solução de 0.1% de Cristal Violeta e a densidade óptica (D.O.) obtida em 570nm. Os resultados demostraram que a clorexidina possui uma excelente atividade antimicrobiana para a maioria dos microrganismos testados em suas formas livres, porém, mostrou-se menos eficaz contra os biofilmes de Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Staphylococcus aureus resistentes a Meticilina (MRSA) e Pseudomonas aeruginosa, desenvolvidos de forma isolada para cada espécie. Assim, sugere-se que a clorexidina apresenta sua atividade antimicrobiana diminuída quando exposta a microrganismos em biofilme. Provavelmente isso ocorra devido aos mecanismos de resistência atribuídos à estrutura do biofilme - matriz exopolissacarídica, quorum sensing (QS), diversidade genética - e também ao uso inadequado deste biocida.

Orientador: Juliane Maria Guerreiro Tanomaru / Banca: Denise M Spolidorio / Banca: Flaviana Bombarda de Andrade / Resumo: Medicações intracanal (MIC) são utilizadas para complementar a desinfecção do sistema de canais radiculares. A associação de antimicrobianos ao hidróxido de cálcio visa aumentar sua ação. As MIC (Capítulo 1) hidróxido de cálcio (HC)/óleo de melaleuca (OM) 4,5%/polietilenoglicol 400 (PL), HC/OM 9%/PL, HC/CLX 0,4%/PL e HC/PL (Capítulo 2) HC/farnesol (FAR) 4,5%/PL, HC/FAR 9%/PL e HC/PL foram analisadas. O teste de contato direto sobre células planctônicas (Capítulos 1 e 2) foi realizado utilizando suspensões das MIC. O teste de contato direto das MIC sobre briofilme (Capítulo 2) foi realizado em blocos de dentina bovina (5mm x 5mm x 0,7mm) com biofilme de Enterococcus faecalis induzidos por 15 dias e contato com as suspensões das MIC por 6 horas. A efetividade antibacteriana (Capítulos 1 e 2) foi avaliada em canais radiculares de dentes de humanos extraídos. Canais radiculares de dentes unirradiculares padronizados em 15mm foram preparados até MTwo #40/.04 e contaminados com E. faecalis por 21 dias. As MIC foram mantidas no canal durante 7 dias. A primeira coleta (C1) foi realizada após período de contaminação, a segunda coleta (C2), imediatamente após a remoção das MIC e terceira coleta (C3), realizada 7 dias após a remoção das MIC. Foi realizada contagem de UFCmL-1. O pH foi avaliado após preenchimento de tubos de polietileno (Capítulos 1 e 2) com as pastas por 12 horas, 1, 3, 7, 14, 21 e 28 dias. A difusão de íons hidroxila por meio de dentina bovina (Capítulos 1 e 2) foi ava... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Intracanal medications (ICM) are used to complement desinfection of the root canal system. The association of antimicrobials to calcium hydroxide aims to improve its action. The ICM (Chapter 1) calcium hydroxide (CH)/tea tree oil (TTO) 4.5%/polyethylene glycol 400 (PL), CH/TTO 9%/PL, CH/chlorhexidine (CHX) 0.4%/PL e CH/PL (Chapter 2) CH/farnesol (FAR) 4.5%/PL, CH/FAR 9%/PL and HC/PL were analysed. Direct contact test against E. faecalis planktonic cells (Chapters 1 and 2) was performed by using suspension of ICM. Direct contact test on biofilm (Chapter 2) was performed on bovine dentin blocks (5mm x 5mm x 0.7mm) with E. faecalis biofilms induced by 15 days and contact with the suspensions of ICM for 6 hours. Antibacterial effectiveness was evaluated in root canals of extracted human teeth (Chapters 1 e 2). Standardized single-rooted teeth with 15mm were prepared up to #40/.04 MTwo and contaminated with E. faecalis for 21 days. As ICM were kept within the root canals for 7 days. The first sample (S1) was performed after contamination, S2 immediately after the ICM removal and S3 7 days after the ICM removal.It was performed UFCmL-1 count. pH was evaluated after filling the polyethylene tubes (Chapter 1 and 2) with the ICM for 12 hours, 1, 3, 7, 14, 21 and 28 days. The diffusion of hydroxyl ions through the bovine dentin (Chapters 1 and 2) was evaluated after filling root canals of bovine teeth after 1, 3, 7, 14, 21, 28 and 60 days. Data was statistically analyzed using ANOVA an... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Alvimar Lima de Castro / Banca: Takeo Adhemar Furuse / Banca: Décio dos Santos Pinto / Banca: Norberto Perri Moraes / Banca: Izabel Yoko Ito / Resumo: A cárie dental, por ser uma doença cujo desenvolvimento depende basicamente da susceptibilidade dental, de microrganismos cariogênicos, e de um substrato fermentável que resulta na produção de ácidos, apresenta evolução que depende de fatores que favoreçam essas condições, como a radioterapia da região de cabeça e pescoço. Nesse sentido, o presente trabalho teve como objetivo comparar os efeitos do flúor, da clorexidina, e do iodeto de sódio, na prevenção das seqüelas como cárie de irradiação e/ou osteorradiomielite em pacientes portadores de câncer, tendo a radioterapia como um dos métodos terapêuticos utilizados. Foram utilizados 52 pacientes divididos em três grupos, que foram respectivamente tratados com gluconato de clorexidina a 0,12%, fluoreto de sódio a 0,5%, e solução de iodeto de sódio (2%)-H2O2 (10 volumes), após adequação do meio bucal e cicatrização das áreas de extrações dentárias, através de bochechos diários utilizando-se a substância referente ao grupo de estudo previamente estabelecido. Concluiu-se que o uso de fluoretos, clorexidina e solução de iodeto de sódio potencializaram os meios físicos de profilaxia, sendo a clorexidina a mais eficaz na redução de ufc de S. mutans. Considera-se, ainda, que a ocorrência de cárie e/ou osteorradionecrose nesses pacientes pode ser controlada, desde que sejam instituídos adequados meios de higiene bucal. / Abstract: The dental carie, for being a disease whose development depends basically of dental susceptibility, cariogenic microorganisms, and a fermentable substratum that results in the production of acids, it presents evolution that depends on factors that favor those conditions, as the radiotherapy of head and neck region. In that sense, the present work had as objective compares the effects of the fluorides, chlorhexidine, and sodium iodite, in the prevention of the sequels as radiation carie and/or osteoradionecrosis in oncology patients, tends the radiotherapy as a therapeutic method used. 52 patients were used divided in three groups, that they were treated respectively with chlorhexidine gluconate 0,12%, sodium fluoride 0,5%, and a combination of sodium iodite solution 2% and peroxide 10%, after dental assessment and cicatrization of the areas of dental extractions, through daily mouthfuls being used the substance regarding the previously established study group. It was concluded that the fluorides use, chlorhexidine and sodium iodites solution potentializing the physical methods of prophylaxis, being the chlorhexidine the most effective in the reduction of cfu of S. mutans. It's also considered that the occurrence of radiation carie and/or osteoradionecrosis in those patient can be controlled, since appropriate methods of buccal hygiene are instituted. / Doutor

Orientador: Fernanda Lourenção Brighenti / Banca: Aline Voltan / Banca: Fabíola Galbiati / Banca: Elisa Aparecida Giro / Banca: Marlise Inêz Klein Furlan / Resumo: A proximidade entre micro-organismos presentes no biofilme dentário determina a existência de interações entre eles, que podem beneficiar ou antagonizar as espécies envolvidas. Os objetivos deste estudo foram: 1) apresentar uma revisão de literatura sobre interações entre espécies bacterianas cariogênicas no biofilme oral; 2) validar o uso do reator 'drip-flow' (DFR) para desenvolver biofilmes dentários e testar agentes antimicrobianos; 3) avaliar o crescimento e a suscetibilidade à clorexidina de biofilmes compostos por Streptococccus mutans ATCC 25175 e Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, usando o DFR; 4) avaliar o crescimento e a suscetibilidade à clorexidina de biofilmes compostos por Streptococccus mutans e Actinomyces naeslundii ATCC 12104, usando o DFR. Biofilmes cresceram sobre lâminas de vidro cobertas com hidroxiapatita e caldo BHI suplementado com sacarose 0.2% ou 0.5%, dependendo das espécies e um fluxo de 10 mL/h foi usado. O DFR foi incubado por 24 h a 37 °C / 5% CO2. Biofilmes foram tratados com clorexidina 0.2% (CHX) ou NaCl 0.9% por 2 min. Crescimento e efeito dos tratamentos foram determinados por contagem de unidades formadoras de colônias (UFC). Biofilmes foram marcados com o kit de Viabilidade Live/Dead e analisados por microscopia confocal de varredura a laser para diferenciar células com membranas íntegras das lesadas pela ação da CHX. A validação do DFR foi analisada por teste t (α=0.05). Avaliação da interação foi analisada por ANOVA dois fatores e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The proximity between microorganisms present in dental biofilm determines the existence of interaction between them, which can benefit or antagonize the involved species. The aims of this study were: 1) to present a review about interactions among cariogenic bacterial species within oral biofilm; 2) to show the applicability of the drip flow reactor (DFR) for developing oral biofilms and testing antimicrobial agents; 3) to evaluate the growth and chlorhexidine susceptibility of biofilms comprised by Streptococcus mutans ATCC 25175 and Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, using DFR; 3) to assess the growth and chlorhexidine susceptibility of biofilms comprised by Streptococcus mutans ATCC 25175 and Actinomyces naeslundii ATCC 12104, using DFR. Biofilms grew on hydroxyapatite coated glass slides, with BHI broth at 10 mL/h flow rate supplemented with 0.2 or 0.5% sucrose depending on the species used. DFR was incubated for 24 h at 37 °C / 5% CO2. Biofilms were treated with 0.2% chlorhexidine (CHX) or 0.9% NaCl for 2 min. Growth and effect of treatments were determined by colony forming units (CFU) counts. Biofilms were stained using the Live/Dead Viability kit and analyzed by confocal laser scanning microscopy (CLSM) to differentiate bacterial cells without damage and damaged by the action of CHX. DFR validation was analyzed by unpaired t test (α=0.05). Interaction evaluation was analyzed by two-way ANOVA and Tukey test (α=0.05). Literature review showed the role of microbial int... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Mário Tanomaru Filho / Banca: Mario Roberto Leonardo / Banca: Léa Assed Bezerra da Silva / Banca: Igor Prokopowitsch / Banca: Francisco José de Souza Filho / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a microbiota presente no sistema canais radiculares antes e após o preparo biomecânico; e as condições histopatológicas da reparação apical e periapical após preparo biomecânico dos canais radiculares de dentes com reação periapical crônica. Foram utilizados 78 canais radiculares de dentes de cães, os quais, após indução de lesão periapical, foram submetidos ao preparo biomecânico utilizando as seguintes soluções irrigadoras: solução de digluconato de clorexidina a 2%, de hipoclorito de sódio a 2,5% ou soro fisiológico. Um grupo controle não recebeu preparo biomecânico. Foram realizadas culturas microbiológicas antes e após 30 dias do preparo biomecânico. Após este período os animais foram mortos para processamento e análise histopatológica. O estudo microbiológico demonstrou que houve redução dos microrganismos nos grupos que utilizaram soluções antimicrobianas (p<0,05), com melhor resultado para a solução de clorexidina. Os grupos que utilizaram solução fisiológica controle apresentaram aumento de microrganismos. No estudo histopatológico, foi observado, de um modo geral, infiltrado inflamatório periapical severo e em grande extensão, severo espessamento do ligamento periodontal e grandes áreas de reabsorção óssea e apical em todos os grupos (p>0,05). Concluiu-se que o emprego de soluções irrigadoras antimicrobianas durante o preparo biomecânico promove redução da microbiota endodôntica, sem a sua eliminação do sistema de canais radiculares em dentes de cães com lesão periapical. A solução de clorexidina a 2% proporcionou maior redução da microbiota que a solução de hipoclorito de sódio a 2,5% (p<0,05). Porém, os resultados histopatológicos demonstram que somente o preparo biomecânico não foi capaz de criar condições para reparação dos tecidos apicais e periapicais. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the microorganisms in the root canal system before and after biomechanical preparation and the apical and periapical repair after this biomechanical preparation. The study was performed in 78 root canals of dog's teeth with induced chronic periradicular lesion. There were used the following endodontic irrigating solutions: 2% chlorhexidine digluconate solution; 2.5% sodium hypochlorite solution, saline solution and a control group without biomechanical preparation. The microbiological sampling were performed before and 30 days after the biomechanical preparation. After this period the animals were killed to histological analysis. In the microbiologic study, the results showed that the antimicrobial solutions used reduced the number of microorganisms (p<0.05). The chlorhexidine solution showed better performance. The group that used saline solution and the control group presented an increased number of microorganisms. The histological results showed a severe periapical inflammation, severe thickness of periodontal ligament, apical and osseous resorption in all groups (p>0.05). It was concluded that the antimicrobial endodontic solution reduced but not eliminated the microorganisms present in root canals of dogþs teeth with necrosis and periapical lesion. The chlorhexidine solution was more effective in reducing the number of microorganisms than sodium hypochlorite solution (p<0.05). Although, the histopathological results showed that the biomechanical preparation alone was not capable to promote an adequate condition for the apical and periapical tissues repair. / Doutor

Orientador: Gervásio Henrique Bechara / Banca: Tânia de Freitas Raso / Banca: Eliana Reiko Matushima / Banca: Karin Werther / Banca: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Resumo: Um dos maiores entraves na criação de avestruzes é relacionado à contaminação da região umbilical de avestruzes recém-eclodidos. Neste trabalho, objetivou-se avaliar a cicatrização umbilical de avestruzes (Struthio camelus) mediante a antissepsia com clorexidina associada à secção total ou parcial do cordão umbilical. Também foi avaliado o desempenho ponderal e investigado a causa de morte, associando-os com a onfalite. Foram utilizados 227 filhotes, cujo cordão umbilical foi seccionado totalmente ou 0,5 cm acima da sua inserção. A antissepsia da região umbilical consistiu na aplicação de clorexidina, em solução aquosa ou alcoólica, nas concentrações de 0,5%, 1,0% e 2,0%, durante três dias. Também foi incluído um grupo sem tratamento. A cicatrização umbilical e o desenvolvimento ponderal foram avaliados aos 14 e 28 dias de idade do filhote. As aves que vieram a óbito foram necropsiadas e fragmentos de umbigo foram submetidos ao exame histopatológico. Os resultados mostraram que as soluções de clorexidina reduziram o risco de onfalite, sendo a solução alcoólica 2% a mais eficiente. A cicatrização foi mais rápida nas aves em que o cordão umbilical foi seccionado totalmente. Pela análise microscópica dos cortes histológicos de umbigo não se evidenciou diferenças morfológicas entre o grupo sem tratamento e o grupo da clorexidina alcoólica 2%. Em geral, os filhotes apresentaram baixo desenvolvimento decorrente de manejo inadequado. Nenhuma morte foi associada a onfalite. Conclui-se que, o uso de clorexidina para a antissepsia da região umbilical de avestruzes recém-eclodidos, é seguro e favorece a cicatrização umbilical, sendo necessário para uma maior efetividade remover o cordão umbilical na altura da sua inserção. / Abstract: The contamination of the umbilical region of newly hatched ostrich is one of the major problems in the bird production. This work aimed to evaluate the umbilical healing of ostriches (Struthio camelus) through the use of chlorhexidine as antiseptic associated to the total or partial umbilical cord cut off. It was evaluated both the weight performance and "causa mortis" associated with omphalitis occurrence as well. It was used 227 newly hatched ostriches of which the umbilical cords were either sectioned totally or 0.5 cm above their insertion. The umbilical region antisepsis consisted of topical administration of an aqueous or alcoholic solution of chlorhexidine, 0.5, 1.0 or 2.0% during three days. A group of non-treated animals was added also. The umbilical healing and weight performance were evaluated in the ostriches at 14 and 28 days of age. Those animals which came to death were necropsied and umbilical fragments were submitted to histopathological exam. Results showed that all the chlorhexidine solutions reduced the risk of omphalitis, being the alcoholic solution 2% the most efficient. Umbilical healing was faster in animals in which the umbilical cord was totally cut off. The histopathological exam revealed no morphological differences between the non-treated group and the alcoholic chlorhexidine 2% group. In general, the newly hatched ostriches presented low weight performance due to inadequate handling. Animal deaths were not associated to omphalitis. It can be concluded that the use of chlorhexidine as antiseptic for newly hatched ostriches is safe and favors the umbilical healing. Moreover, for a better effectiveness it is necessary to remove the umbilical cord in its insertion. / Doutor