VIANA, Sayonara de Melo. Persistência da infecção por Leishmania braziliensis em camundongos BALB/c mediada por citocinas e quimiocinas. 2013. 63 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-07-09T11:31:11Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_smviana.pdf: 993841 bytes, checksum: 334429f92171ab2195fc74d23d724801 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-07-10T10:49:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_smviana.pdf: 993841 bytes, checksum: 334429f92171ab2195fc74d23d724801 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-07-10T10:49:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_smviana.pdf: 993841 bytes, checksum: 334429f92171ab2195fc74d23d724801 (MD5) Previous issue date: 2013 / Leishmania braziliensis is the main causative agent of American cutaneous leishmaniasis in Brazil. Altough L. braziliensis infection is self-limited it is distinguished by its latency and chronicity and can persist in mice and patients even after spontaneous clinical cure or treatment. Little is known about the persistence feature in L. braziliensis’ infection in humans and mice. Thereby, the aim of this study was to characterize the parasite’s persistence in the murine model. The parasite load, lesion thickness and pattern of cytokines and chemokines involved in persistence were evaluated through BALB/c mice infection with a L. braziliensis strain and observation for 90 days after infection. The results showed that parasites gradually disappear in the footpad, while the parasite load was sustained in the draining lymph node until 90 days post-infection (p.i). In the footpad, TNF-α expression was higher at 30 days p.i, followed by the decrease in parasite load and lesion thickness in the site. IL-10 and TGF-β were more expressed at first and decreased after 30 days of infection. A higher concentration of TNF-α and IFN-γ was observed at 15 and 30 days post-infection in the draining lymph node, while IL-4 was significantly increased at 15 days post-infection, and IL-10 and TGF-β were the predominant cytokines after 90 days of infection. CCL2, CCL3, CXCL1 e CXCL10 were expressed in the footpad, with a peak at 30 days p.i. and reduction at 60 days. In the draining lymph node, CCL2 and CXCL10 presented a low expression at first, increasing to a peak at 45 days p.i., while CCL3 was more expressed at 30 days p.i., the same period of the maximum lesion thickness. In our work, we observed that Leishmania persists in draining lymph nodes, while CCL2, CXCL10, IL-10 and TGF- are significantly expressed/produced. These results indicate that these citokynes act synergistically, which can determinate parasite persistence in the draining lymph node. / A infecção por Leishmania braziliensis se distingue por sua latência e cronicidade, podendo persistir em camundongos e nos pacientes após a cura clínica espontânea ou após o tratamento. A persistência da infecção por L. braziliensis ainda tem sido pouco estudada, seja em humanos, seja em modelos experimentais. O objetivo deste trabalho, portanto, foi caracterizar a persistência da infecção por L. braziliensis utilizando o modelo murino. Foram avaliados em diferentes tempos a espessura da lesão, a carga parasitária e o padrão de citocinas e quimiocinas envolvidas no processo. Para isso, camundongos BALB/c foram infectados com uma cepa de L. braziliensis e acompanhados por 90 dias. Os resultados mostraram que os parasitos desapareceram gradativamente da pata, enquanto nos linfonodos a carga parasitária se manteve, mesmo 90 dias pós-infecção (p.i.). Houve pouca expressão de IFN-γ nas patas durante os períodos analisados, enquanto a expressão de TNF-α apresentou-se alta aos 30 dias de infecção. IL-10 e TGF-β apresentaram maior expressão inicialmente e regrediram a partir de 30 dias p.i. Quanto às quimiocinas, observou-se expressão de CCL2, CCL3, CXCL1 e CXCL10 nas patas; aos 30 dias todas as quimiocinas apresentaram máxima expressão, e diminuíram no 60o dia p.i. Através de detecção por ELISA no linfonodo de drenagem, observou-se um pico de concentração de TNF-α aos 15 dias e de IFN-γ aos 30 dias pós-infecção, o que precedeu a redução na espessura da lesão e diminuição da carga parasitária na pata. IL-4 foi predominante aos 15 dias p.i., tendo sua concentração muito diminuída aos 30 dias; a partir desse período a citocina foi pouco detectada. Já a concentração de IL-10 e TGF-β manteve-se alta e estável, a partir dos 30 dias p.i. Nos linfonodos, a expressão de CCL2 e CXCL10 aumentou gradativamente, atingindo pico aos 45 dias p.i., enquanto a expressão de CCL3 apresentou pico aos 30 dias p.i., regredindo depois. Em conclusão, os parasitos persistem no linfonodo de drenagem em períodos crônicos de infecção, quando CCL2, CXCL10, IL-10 e TGF- continuam sendo expressos/produzidos em quantidade. O quadro observado sugere um equilíbrio entre essas citocinas, o que pode ser determinante para a persistência do parasito no linfonodo.

LIMA, Antônio Augusto Guimarães. Estudo da correlação entre níveis séricos de citocinas (IL-1B , IL-6, IL-18BP, IL-33 e TNF-a) e da mieloperoxidade com o grau de obstrução coronariano em pacientes com hipótese diagnóstica de doença isquêmica do miocárdio. 2012. 126 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-07-26T13:33:25Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_aaglima.pdf: 2963429 bytes, checksum: 20853cfe3c17625832693e8de4329703 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-08-06T11:54:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_aaglima.pdf: 2963429 bytes, checksum: 20853cfe3c17625832693e8de4329703 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-08-06T11:54:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_aaglima.pdf: 2963429 bytes, checksum: 20853cfe3c17625832693e8de4329703 (MD5) Previous issue date: 2012 / Atherosclerosis is a complex multifactorial disease characterized by accumulation of inflammatory cells, lipoproteins, and fibrous tissue in the walls of large and medium arteries. The innate and adaptive immunity, with the presence of leukocytes, mainly monocytes and lymphocytes, have an important role in this process. This participation can take place by signaling with cytokines and the release of the enzyme myeloperoxidase (MPO) by the cytoplasmic granules. Cardiovascular risk factors classically play an important role in prevention, however, the majority of patients with CV events have one or no risk factor. Therefore new biomarkers are needed to define diagnosis and prognosis. This study selected patients with a diagnosis of stable angina (SA) or acute coronary syndrome (ACS) undergoing coronary angiography and evaluated by the Gensini score (GS). Performed serum activity MPO, serum tumor necrosis factor alpha (TNF-α), interleukins (1β, 6, 18bp and 33) (IL-1β, IL-6, IL-18bp, and IL-33, respectively). In two years carried out a review of medical records or telephone interviews in 93 patients in this sample. Used to analyze the variables: atherosclerotic burden (carotid, coronary or lower limb atherosclerosis); the clinical picture in two years (asymptomatic or chest pain or death); clinical presentation (SA or ACS); cardiovascular events (stent, CABG, chest pain or death). The results combinations of cytokines and myeloperoxidase, with the variables presented demonstrate that IL-6 related in univariate analysis with the presence of atherosclerotic load (p <0.014), elevated serum levels of IL-18bp in patients with ACS both in univariate and multivariate analysis (p <0.001 and p <0.045 respectively), IL-1β was negatively correlated with the degree of GS in univariate and multivariate analysis (p <0.042 and <0.002 respectively); in a univariate analysis associated with the GS on patients who had chest pain or death, undergoing CABG, with CV events and ACS (p <0.001 for all). In multivariate analysis, patients with higher GS underwent CABG more often and had more chest pain or death (p <0.001 for all). The MPO activity showed no correlation or association with different variables. Patients with diabetes mellitus and in use of statin had higher GS (p <0.001 for both). In conclusion, patients with coronary stenosis were important predictors of cardiovascular events and more often underwent CABG. The IL-1β correlated negatively with GS and patients with at least one of the sites previously mentioned atheroclerosis had IL-6 levels elevated. IL-18bp correlated with elevated serum levels in patients with ACS. / Aterosclerose é uma doença complexa multifatorial caracterizada pelo acúmulo de células inflamatórias, lipoproteínas e tecido fibroso na parede das grandes e médias artérias. A imunidade inata e adaptativa, com a presença dos leucócitos, principalmente, monócitos e linfócitos, têm uma participação importante nesse processo. Esta participação poderá acontecer pela sinalização com as citocinas e com a liberação da enzima mieloperoxidase (MPO) pelos grânulos citoplasmáticos. Os fatores de risco cardiovasculares (CV) clássicos têm uma função importante na prevenção, porém, a maioria dos pacientes com eventos CV têm um ou nenhum fator de risco. Portanto novos marcadores biológicos são necessários para definir diagnóstico e prognóstico. Esse estudo selecionou pacientes com a hipótese diagnóstica de angina estável (AE) ou síndrome coronariana aguda (SCA), submetidos à coronariografia e avaliados pelo escore de Gensini (EG). Realizados a atividade da MPO, dosagens séricas do Fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), interleucinas (1β, 6, 18bp e 33) (IL-1β, IL-6, IL-18bp e IL-33, respectivamente). Em 2 anos realizado revisão de prontuários ou entrevistas por telefone em 93 pacientes desta amostra. Utilizado na análise as variáveis: carga aterosclerótica (aterosclerose em carótidas ou coronárias ou em membros inferiores); quadro clínico em 2 anos (assintomático ou dor torácica ou morte); apresentação clínica (AE ou SCA); eventos cardiovasculares (stent, cirurgia de revascularização miocárdica (CRM), dor torácica ou morte). Os resultados das associações das citocinas e MPO com as variáveis apresentadas demonstraram que a IL-6 relacionou-se em análise univariada com presença de carga aterosclerótica (p<0,014); níveis séricos elevados da IL-18bp associou-se em pacientes com SCA, tanto na análise uni e multivariada (p<0,001 e p<0,045 respectivamente); a IL-1β apresentou correlação negativa com o grau do EG na análise univariada e multivariada (p<0,042 e <0,002 respectivamente); em uma análise univariada o EG associou-se com pacientes que apresentaram dor torácica ou óbito, submetidos à CRM, com eventos CV e com SCA (p<0,001 em todos). Na análise multivariada os pacientes com EG mais elevados submeteram-se mais frequentemente a CRM e apresentaram mais dor torácica ou óbito (p<0,001 em todos). A atividade da MPO não apresentou correlação ou associação com as diversas variáveis analisadas. Pacientes portadores de Diabetes mellitus e em uso de estatinas apresentaram EG mais elevados (p<0,001 nos dois). Como conclusão, pacientes com obstruções coronarianas importante foram preditores de eventos cardiovasculares e mais frequentemente foram submetidos à CRM. A IL-1β correlacionou-se negativamente com o EG e pacientes com algum sítio de aterosclerose apresentaram IL-6 elevados. A IL-18bp orrelacionou-se com níveis séricos elevados em pacientes com SCA.

FIALLOS, Ana Cristina de Mello. Estudo do ranelato de estrôncio no reparo ósseo de defeitos críticos em calvária de ratos : participação da via RANK/RANKL/OPG. 2013. 106 f. Tese (Doutorado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-11-28T13:08:54Z No. of bitstreams: 1 2013_tese_acmfiallos.pdf: 4903363 bytes, checksum: 272c8345b679c207b1a71676236e573b (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2013-11-28T13:09:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_tese_acmfiallos.pdf: 4903363 bytes, checksum: 272c8345b679c207b1a71676236e573b (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-28T13:09:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_tese_acmfiallos.pdf: 4903363 bytes, checksum: 272c8345b679c207b1a71676236e573b (MD5) Previous issue date: 2013 / The bone repair is a multifunctional process involving various mediators. Among the many drugs that interfere with this process, we highlight the Strontium Ranelate (SrR), which has a dual mechanism of action, stimulating neoformation at the same time, which inhibits bone resorption. To evaluate the osteoinductive capacity, models of study that investigate the potential for bone repair site have been used, such as induction of critical size defects (CSD) in rat calvaria. The aim of this study was to evaluate bone healing induced by SrR in critical defects of 8 mm in diameter in rat calvaria. For this purpose, immediately after surgery, the CSD received a single application of SrR (2.1 and 6.3 mg) or no treatment (Control). Groups of animals were sacrificed at 0 h and at 15, 45, 90 and 120 days after induction of CSD and calvarial samples were removed and processed for analysis by macroscopic type Cone Beam Computed Tomography (CBCT), histological (HE) and immunohistochemical for RANKL and OPG. In CBCT analysis, it was found that induction of CSD group SrR 6.3 mg caused a significant reduction of the areas of CSD at 90 days (67.79 ± 2.32 mm²) and at 120 days (62.28 ± 4.17 mm²) compared to calvariae newly induced (0 h) (78.61 mm² ± 0.96) (p<0.05) but not compared to Control groups at 90 days (74.2 ± 2.73 mm²) and at 120 days (72.04 ±1.74 mm²) (p>0.05). We observed in the histological analysis of calvariae of Control groups significant changes related to bone repair when compared to normal group (p<0.05). The animals that received SrR (2.1 mg) showed no significant histological changes, compared to the Control groups in all experimental periods (p>0.05), while animals of SrR 6.3 mg group showed significantly histological features consistent with bone repair at 90 days and at 120 days as neoformation in edge and center of the CSD when compared to Control or SrR 2.1 mg groups (p<0.05). To complement these results, the calvariae of animals after 120 days of topical application of SrR (6.3 mg) showed intense immunostaining for OPG and RANKL negative, whereas the calvariae of Control groups showed moderate immunoreactivity only for RANKL. Thus, it can be concluded that the local treatment with SrR (6.3 mg) revealed its role favoring osteoinductive bone repair by modulating the CSD RANK/RANKL/OPG. / O reparo ósseo é um processo multifuncional com a participação de vários mediadores. Dentre os fármacos que interferem nesse processo, destaca-se o Ranelato de Estrôncio (RSr), o qual apresenta um mecanismo de ação dual, estimulando a neoformação ao mesmo tempo que inibe a reabsorção óssea. Para avaliar a capacidade osteoindutiva, modelos que favorecem o estudo do potencial de reparo ósseo local têm sido utilizados, tais como o de indução de defeitos de tamanhos críticos (CSD) em calvárias de ratos. O objetivo deste estudo foi avaliar o RSr no reparo ósseo de defeitos críticos de 8 mm de diâmetro induzidos em calvária de ratos. Para tanto, imediatamente após a cirurgia, os CSD receberam uma única aplicação de RSr (2,1 e 6,3 mg) ou nenhum tratamento (Controle). Grupos de animais foram sacrificados a 0 h e aos 15, 45, 90 e 120 dias após a indução do CSD e calvárias foram processadas para análise macroscópica, por meio de Tomografia Computadorizada tipo Cone Beam (TCCB), histológica (HE) e imunohistoquímica para RANKL e OPG. Na análise por TCCB, verificou-se que, no grupo RSr 6,3 mg, o RSr causou redução significativa da área do CSD aos 90 dias (67,79 ± 2,32 mm²) e 120 dias (62,28 ± 4,17 mm²), quando comparadas às calvárias recém-induzidas (0 h) (78,61 ± 0,96 mm²) (p<0,05), mas não em relação ao grupo Controle após 90 dias (74,2 ± 2,73 mm²) e 120 dias (72,04 ± 1,74 mm²) (p>0,05). Na análise histológica das calvárias dos animais do grupo Controle foram observadas alterações histológicas significantes relacionadas ao reparo ósseo como neoformação óssea restrita às bordas do CSD quando comparados aos animais do grupo normal em todos os períodos experimentais (p<0,05). Os animais do grupo RSr (2,1 mg) não apresentaram alterações histológicas significantes quando comparados ao grupo Controle em todos os períodos experimentais (p>0,05) enquanto que, nos animais do grupo RSr (6,3 mg), foram observados aspectos histológicos compatíveis com reparo ósseo aos 90 dias e aos 120 dias como neoformação óssea em borda e no centro do CSD com diferenças significativas quando comparados aos grupos Controle ou RSr 2,1 mg (p<0,05). Complementando esses resultados, as calvárias dos animais após 120 dias da aplicação local de RSr (6,3 mg) apresentaram intensa imunoexpressão para OPG e negativa para RANKL, enquanto que as calvárias do grupo Controle apresentaram imunoexpressão moderada apenas para RANKL. Assim, pode-se concluir que o tratamento local com RSr evidenciou seu papel osteoindutor favorecendo a reparação óssea do CSD pela modulação da via RANKL/RANK/OPG.

CUSTÓDIO, Charllyany Sabino. Estudo de alterações comportamentais e neuroinflamatórias induzidas pela administração sistêmica de lipopolissacarídeo de escherichia coli em camundongos. 2012. 82 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-07-07T16:07:28Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_cscustódio.pdf: 757850 bytes, checksum: 67f83a151b1bb10a8063e8cc9ab3fd28 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-07-07T16:10:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_cscustódio.pdf: 757850 bytes, checksum: 67f83a151b1bb10a8063e8cc9ab3fd28 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-07T16:10:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_cscustódio.pdf: 757850 bytes, checksum: 67f83a151b1bb10a8063e8cc9ab3fd28 (MD5) Previous issue date: 2012 / Based on evidences that systemic administration of lipopolysaccharide (LPS) in animals can trigger time-dependent pathophysiological changes, which together are named sickness behavior and depression, we sought to determine by immune challenge with systemic administration of LPS (0.5 mg / kg, ip) in male mice, the behavioral changes on parameters such as: behavior related to depression and anxiety, pre-pulse inhibition (PPI), working memory, motor coordination and locomotor activity, 1, 5 and 24h after administration of endotoxin, respectively, the time points for the development of disease and behavior depressive-like, and neurochemical by evaluating the levels of cytokines (TNF and IL1β) in the blood (plasma) and brain areas (prefrontal cortex (PFC), hippocampus (HC) and striatum (ST). Moreover, were measured brain levels of nitrite. Changes 1.5 h post-LPS were hypolocomotion, behaviors related to depression and anxiety, working memory deficits, accompanied by increases in levels of IL-1β in plasma and PFC, TNF a and reductions in plasma levels of nitrite in ST and PFC. Twenty-four hours after LPS, depression-related behavior and deficits of working memory remained, while the levels of PPI reduced significantly accompanied by an increase in the content of IL-1β in the PFC and decreased levels of nitrite in HC, ST and PFC. Taken together, the results of this study provide further evidence for changes in levels of PPI behavior similar to LPS-induced depression and for the involvement of nitric oxide in behavior similar to depression induced by LPS in mice. / Baseando-se na evidência que a administração sistêmica de Lipopolissacarídeo (LPS) em animais pode desencadear alterações fisiopatológicas tempo-dependentes, que em conjunto são denominadas comportamento de doença ou depressão símile, buscou-se determinar através do desafio imune com administração sistémica de LPS (0,5 mg / kg, ip) em camundongos machos, as alterações comportamentais, sobre parâmetros tais como: comportamentos relacionados à depressão e à ansiedade, inibição pré-pulso (PPI), memória de trabalho, atividade locomotora e coordenação motora, 1,5 e 24 h após a administração da endotoxina, respectivamente, os pontos de tempo chave para o desenvolvimento dos comportamentos de doença e à depressão semelhante, e neuroquímicas através da avaliação dos níveis de citocinas (IL1β e TNFα) no sangue (plasma) e nas áreas cerebrais (córtex pré-frontal - CPF, hipocampo - HC e corpo estriado - ST). Além disso, foram dosados os níveis cerebrais de nitrito. As alterações 1,5 h pós-LPS foram: hipolocomoção, comportamentos relacionados à depressão e à ansiedade, déficits de memória de trabalho, acompanhado por incrementos no teor de IL-1β no plasma e PFC, TNFα no plasma e reduções nos níveis de nitrito no ST e PFC. O comportamento relacionado à depressão e os déficits de memória de trabalho mantiveram-se em vinte e quatro horas pós-LPS, enquanto os níveis de PPI reduziram significativamente acompanhados por um aumento no teor de IL-1β no PFC e diminuição dos níveis de nitrito no HC, ST e PFC. Tomados em conjunto, os resultados do presente estudo fornecem novas evidências para alterações de PPI no comportamento semelhante à depressão induzido por LPS e para o envolvimento do óxido nítrico no comportamento semelhante à depressão induzido por LPS em camundongos.

GUIMARÃES, Mariana Vasconcelos. A Matricaria recutita previne a perda óssea alveolar osteoclástica induzida por ligadura em ratos via inibição das citocinas TNF-a E IL-1b. 2014. 112 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-05-25T12:07:43Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_mvguimarães.pdf: 2059480 bytes, checksum: 31b9b00c067b268367244fc8d8424c98 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-05-25T12:27:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_mvguimarães.pdf: 2059480 bytes, checksum: 31b9b00c067b268367244fc8d8424c98 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-25T12:27:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_mvguimarães.pdf: 2059480 bytes, checksum: 31b9b00c067b268367244fc8d8424c98 (MD5) Previous issue date: 2014 / Periodontitis is an immunoinflammatory disease in that the involvement of chemical mediators culminates in destruction of alveolar bone. Long recognized regarding its pathogenesis, however, frequently some patients do not respond insatisfactorily to conventional treatments, which makes pharmacological alternatives are sought. In this context, Matricaria recutita (MTR), known as chamomile, stands out in the literature for its anti-inflammatory and a variety of constituents, especially apigenin (APG) flavonoid. Thus, the present study evaluated the involvement of cytokines in the anti-inflammatory and antiresorptive activities of MTR in alveolar bone resorption (ABR) induced by ligature in rats. For this, we used the dry extract of MTR (apigenin content 128.5±0.99 mg/g). The ABR was induced in 90 wistar rats (199.3 ± 3.2 g) by ligation (nylon 3.0) of 2° upper left molar, and contralateral was used as control. The rats received v.o. Tween 80 (TW) or MTR (10, 30 and 90 mg/kg) daily until 11 d, when they were killed. The hemiarcadas were processed for macroscopic (mm2) or histometric, histological and immunohistochemical analyzes for the ligand of the receptor activator of nuclear factor kappa B (RANKL), osteoprotegerin (OPG) and tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP). Blood samples were collected for measurement of bone alkaline phosphatase (BALP), while the gingival tissue was used for measuring of mieloperoxidase activity (MPO; mg/g) and of tumor necrosis factor-alpha (TNF-a) and interleukin-1β (IL-1β) levels (pg/mg) by ELISA. Systemically, serum bone alkaline phosphatase (BALP), AST/ALT, urea and creatinine, and white blood count were made, and we evaluated of macroscopic aspects of liver, kidneys and spleen, in addition to variation in body mass. Was set at p <0.05 (#) for Normal, (*) for TW and () for MTR 10 mg/kg; Ethical aspects: the Ethics Committee for Animal Use-UFC 70/13. It was found that ligation for 11 days caused intense ABR with furcation lesion pronounced, resorption of alveolar bone and cementum in the region between the first and second molars, reduction of serum BALP, intense leukocyte infiltrate in the periodontium these animals, increasing significant MPO, TNF-, IL-1β in challenged area underlying gingival tissue, and increased to RANKL and TRAP immunostaining, and reduced to OPG. Systemically, there was leukocytosis with a predominance of mononuclear cells. No major changes in organs and weight of animals were observed. MTR prevented, significantly, the ligature-induced ABR [TW=5.5±0.2; MTR (10)=4.4±0.1*; (30)=2.9±0.1*; (90)=2.8±0*], corroborating the reduction of furcation lesions [Normal=10.4±0.8; TW=137.4±23.3#; MTR (90)=81.0±9.6*#] and the preservation of the alveolar bone and cementum [(Normal=0(0-0); TW=3(1-3)#, MTR (90)=1(1-3)#*] compared to the TW group while no bone anabolic activity was showed because MTR dit not prevent the reduction of serum BALP induced by ligature [Normal=99.4±3.4; TW=61.3±2.6#; MTR (10)=70.6±3.6#; (30)=74.5±3.7#; (90)=78.5±2.8#); p>0.05]. However, MTR significantly prevented the leukocyte infiltration and the increase of MPO activity [Normal=3.6±0.5; TW=9.4±0.9#; MTR (10)=10.2±3.3; (30)=4.5±0.8*; (90)=4.2±0.7*], of TNF-a [Normal=0.2±0; TW=1.2±0.2#; MTR (10)=0.4±0.2*; (30)=0.2±0.1*; (90)=0.1±0*] and of IL-1β [Normal=1.5±0.3; TW=8.0±1.4#; MTR (10)=8.9±1.9#; (30)=1.8±1.0*; (90)=1.5±0.9*] levels caused by ligature, and reduced immunostaining for RANKL and TRAP, and increased for OPG, comparing to TW group. Additionally, MTR prevented the leukocytosis caused by ligation and did not alter liver, kidney, spleen conditions or the variation of body mass. In short, the MTR prevented the ABR by reducing TNF-a and IL-1β, thus preventing the osteoclast activation due RANK-RANKL-OPG axis, without interfering with bone anabolism. / A periodontite é uma doença imunoinflamatória onde a participação de mediadores químicos culmina em destruição de osso alveolar. Muito se reconhece a respeito de sua patogênese, contudo, frequentemente alguns pacientes respondem de forma insatisfatória aos tratamentos convencionais, o que faz com que alternativas farmacológicas sejam buscadas. Neste contexto, a Matricaria recutita (MTR), conhecida como camomila, destaca-se na literatura por sua propriedade anti-inflamatória e sua variedade de constituintes, especialmente o flavonoide apigenina. Assim, o presente estudo avaliou a participação de citocinas nas atividades anti-inflamatória e antirreabsortiva da MTR na reabsorção óssea alveolar (POA) induzida por ligadura em ratos. Para isso, utilizou-se extrato seco de MTR (teor de apigenina de 128,5±0,99 mg/g). A POA foi induzida em 90 ratos Wistar (199,3±3,2 g) por ligadura (náilon 3.0) do 2° molar superior esquerdo, e contralateral como controle. Os ratos receberam v.o. Tween 80 (TW) ou MTR (10, 30 e 90 mg/kg) diariamente até o 11º d, quando foram mortos. As hemiarcadas foram processadas para macroscopia (mm2) ou para análises histométrica, histológica e imunohistoquímica para o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa-B (RANKL), a osteoprotegerina (OPG) e a fosfatase ácida resistente ao tartarato (TRAP). Amostras de sangue foram coletadas para dosagem de fosfatase alcalina óssea (FAO), enquanto que o tecido gengival foi utilizado para a dosagem da atividade de mieloperoxidase (MPO; mg/g), do fator de necrose tumoral-alfa (TNF-a) e da interleucina-1β (IL-1β) (pg/mg) por ELISA. Sistemicamente, foram feitas dosagens séricas AST/ALT, ureia e creatinina, avaliados leucograma, os aspectos macroscópicos de fígado, rins e baço, além da variação de massa corpórea. Considerou-se p<0,05 (#) para Normais, (*) para TW e () para MTR 10 mg/kg; Aspectos éticos: Comissão de Ética para Uso de Animais-UFC nº 70/13. Verificou-se que a ligadura durante 11 dias causou intensa POA, com lesão pronunciada de furca e reabsorção de osso alveolar e cemento na região entre o primeiro e segundo molares, redução dos níveis séricos de FAO, intenso infiltrado leucocitário no periodonto destes animais, aumento significante de MPO, de TNF-a, de IL-1β no tecido gengival subjacente à área desafiada, além de imunomarcação aumentada para RANKL e TRAP, e reduzida para OPG. Sistemicamente, observou-se leucocitose com predomínio de mononucleares. Não foram observadas alterações importantes de órgãos e peso dos animais. MTR foi capaz de prevenir, de forma significante, a POA induzida por ligadura [TW=5,5±0,2; MTR (10)=4,4±0,1*; (30)=2,9±0,1*; (90)=2,8±0*], sendo corroborada pela redução das lesões de furca [Normal=10,4±0,8; TW=137,4±23,3#; MTR (90)=81,0±9,6#*] e preservação de osso alveolar e cemento [(Normal=0(0-0); TW=3(1-3)#; MTR (90)=1(1-3)#*] em comparação ao grupo TW, embora não demonstrou atividade anabólica óssea por não prevenir a redução dos níveis séricos de FAO induzida pela ligadura [Normal=99,4±3,4; TW=61,3±2,6#; MTR (10)=70,6±3,6#; (30)=74,5±3,7#; (90)=78,5±2,8#); p>0,05]. Entretanto, MTR preveniu significantemente o infiltrado leucocitário e o aumento da atividade de MPO [Normal=3,6±0,5; TW=9,4±0,9#; MTR (10)=10,2±3,3; (30)=4,5±0,8*; (90)=4,2±0,7*], dos níveis de TNF-a [Normal=0,2±0; TW=1,2±0,2#; MTR (10)=0,4±0,2*; (30)=0,2±0,1*; (90)=0,1±0*] e de IL-1β [Normal=1,5±0,3; TW=8,0±1,4#; MTR (10)=8,9±1,9#; (30)=1,8±1,0*; (90)=1,5±0,9*], proporcionando imunomarcação reduzida para RANKL e TRAP, e aumentada para OPG, em comparação ao grupo TW. Adicionalmente, a MTR preveniu a leucocitose causada pela ligadura e não alterou as condições hepáticas, renais, esplênicas e a variação de massa corpórea. Em suma, a MTR preveniu a POA via redução de TNF-a e IL-1β, prevenindo, assim, a ativação osteoclástica decorrente do eixo RANK-RANKL-OPG, sem interferir no anabolismo ósseo.

SAMPAIO, Leonardo Ribeiro. O ranelato de estrôncio reduz dor articular e dano estrutural em artrite experimental por um mecanismo dependente de citocinas. 2012. 52 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-05-27T13:51:16Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_lrsampaio.pdf: 9096525 bytes, checksum: 2e08831ebf43fb253079202bc9f9222c (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-05-27T13:51:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_lrsampaio.pdf: 9096525 bytes, checksum: 2e08831ebf43fb253079202bc9f9222c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-27T13:51:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_lrsampaio.pdf: 9096525 bytes, checksum: 2e08831ebf43fb253079202bc9f9222c (MD5) Previous issue date: 2012 / Strontium ranelate (SR) is a compound currently used to treat osteoporosis that, similar to bisphosphonates, may also provide analgesia. We aim to investigate the anti-inflammatory activity of SR in zymosan arthritis and in the anterior cruciate ligament transection (ACLT) osteoarthritis (OA) model. Rats received 1 mg zymosan intra-articularly or saline into the knee. Other groups were subjected to ACLT or a sham procedure. Hypernociception (joint pain) was assessed using the articular incapacitation and paw-pressure tests. Cell influx and cytokines were measured in joint exudates and OA severity was evaluated using histopathology 70 days after ACLT. Groups received either SR (30 – 300 mg/kg per os) or saline. SR dose-dependently and significantly inhibited joint pain in both arthritis models, while not altering cell influx. Chronic daily administration of the same dose of SR (300 mg/kg) that was antihypernociceptive significantly reduced OA severity at histopathology. Joint levels of IL-1β and TNF measured in the acute phase of zymosan arthritis were significantly reduced by SR, whereas those of CINC-1 were not altered. This is the first report that SR provides analgesia in two arthritis models. Additionally, daily administration of SR prevented joint damage in an OA model. These effects are associated to inhibition of inflammatory cytokines release into the inflamed joints. In addition to demonstrate that SR may operate through a cytokine-dependent mechanism, these results suggest a potential disease-modifying effect of SR in OA. / O ranelato de estrôncio (RE) é um composto atualmente usado para tratar osteoporose que, da mesma forma que os bifosfonados, talvez possa ter um efeito analgésico. Nós objetivamos avaliar a atividade anti-inflamatória do RE na artrite por zymosan e no modelo de osteoartrite (OA) da transecção do ligamento cruzado anterior (TLCA). Ratos receberão 1 mg de zymosan intra-articular ou salina no joelho. Outros grupos foram submetidos a TLCA ou a uma falsa- operação. Hipernocicepção (dor articular) foi avaliada através dos testes da incapacitação articular e da pressão da pata. O influxo celular e citocinas foram mensurados nos exudatos articulares e a gravidade da OA foi avaliada através da análise histopatológica após 70 dias da TLCA. Os grupos receberam o RE (30 – 300 mg/kg por gavagem) ou salina. RE reduziu significativamente e de forma dose-dependente a dor articular nos dois modelos de artrite, ao mesmo tempo em que não alterou o influxo celular. A administração crônica da mesma dose do RE que teve ação analgésica (300 mg/kg) também reduziu significativamente a gravidade da OA na análise histopatológica. Os níveis articulares de TNF-α e IL-1β mensurados na fase aguda da artrite por zymosan foram significativamente reduzidos pelo RE, enquanto que os níveis de CINC-1 não foram alterados. Trata-se do primeiro relato mostrando que o RE teve efeito analgésico em dois modelos de artrite. Além disso, a administração diária do RE preveniu o dano articular no modelo de OA. Estes efeitos estiveram associados a inibição da liberação de citocinas inflamatórias nas articulações inflamadas. Além de demonstrar que o RE pode operar por um mecanismo dependente de citocinas, estes resultados sugerem um potencial de droga modificadora do curso da doença do RE na OA.

RODRIGUES, Naya Lúcia de Castro. Efeito imunomodulador de CXCL10 na infecção de macrófagos murinos por cepa de Leishmania braziliensis isolada de paciente refratário ao tratamento com antimônio. 2015. 70 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-06-09T13:06:29Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_nlcrodrigues.pdf: 1639310 bytes, checksum: 2551a905c5b85238b0070f3202c8c5ab (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-06-09T13:11:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_nlcrodrigues.pdf: 1639310 bytes, checksum: 2551a905c5b85238b0070f3202c8c5ab (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-09T13:11:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_nlcrodrigues.pdf: 1639310 bytes, checksum: 2551a905c5b85238b0070f3202c8c5ab (MD5) Previous issue date: 2015 / Chemotherapy available for leishmaniasis is effective in many cases, however is still not satisfactory, presenting several inconveniences, one of them, resistance to antimony, which is a major current problems. Few studies using treatment with recombinant chemokines for leishmaniasis have been reported. The objective of this study was to evaluate the immunomodulatory effect in vitro of CXCL10 and its association with Glucantime for the infection of macrophages by Leishmania braziliensis strain refractory to treatment with antimony. For this, murine macrophages were infected with L. braziliensis and treated or not with CXCL10 (25, 50 e 100ng/mL), Glucantime (32mg/mL), and CXCL10+Glucantime [(25, 50 e 100ng/mL) + (32mg/mL)]. After 24 and 48h of infection were evaluated: parasitic load (macrophages infected count on coverslips stained), nitric oxide concentration (NO) and the pattern of the cytokines TNF-α, IL-12, IL-4, IL-10, and TGF-β in the culture supernatant. The results showed that the treatment with CXCL10 and CXCL10+Glucantime combination resulted in a significant reduction of the parasitic load, ranging from 70.5% to 95% and 92.4% and 95.0%, respectively, compared with the control untreated, while treatment with Glucantime decreased infection of macrophages to 74.0%. The reduction of the parasitic load was correlated with the increase of NO in all concentrations of CXCL10 (p <0.001). However, it was not observed the same dynamic when it was used to CXCL10+Glucantime association. TNF-α and IL-12 levels increased as a function of the concentration of CXCL10 in the first 24h, however, was inhibited when the infected macrophages were treated with Glucantime (p <0.05). The concentration of TNF-α was lower in cells treated with CXCL10+Glucantime than in those treated only with CXCL10 in both time periods. To the association CXCL10+Glucantime the IL-12 only induced a significant production within 24h when CXCL10 was used at a concentration of 100ng/ml (p <0.01). CXCL10 and association CXCL10+Glucantime treated cells showed a decrease of IL-4 concentration decreasing as the chemokine concentrations were higher (p <0.01) while treatment with Glucantime had a high production of this cytokine. In both times evaluated, treatment with CXCL10 induced IL-10 production at concentrations of 50ng/ml, and 100ng/ml, induced a 3-fold more IL-10 (p <0.001) when compared with antimony or with association CXCL10+Glucantime. TGF-β showed different behavior in the two time periods, an increase in the early hours, and fall in the past 48h. Glucantime induced TGF-β concentration higher than that induced by CXCL10. The association CXCL10+Glucantime showed increased production of TGF-β inverse of the concentration of CXCL10 used. In conclusion, in vitro treatment with CXCL10 induced a Th1 response profile (increase of TNF-α, and IL-12), controlling the intracellular parasitemia and modulation of the inflammatory response mediated by IL-10, in macrophages infected with L. braziliensis refractory to antimony. The Glucantime+CXCL10 association, although it has reduced parasitic load, not inducing a significant increase in nitric oxide, and showing a induction of TNF-α, IL-12 and reduction IL-4,. / A quimioterapia disponível para as leishmanioses é eficaz em muitos casos, contudo ainda não é satisfatória, apresentando várias inconveniências, uma delas, a resistência aos antimoniais, que é um dos grandes problemas atuais. Poucos estudos utilizando tratamento com quimiocinas recombinantes para as leishmanioses têm sido relatados. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito imunomodulador in vitro de CXCL10 e sua associação com Glucantime na infecção de macrófagos por cepa de Leishmania braziliensis refratária ao tratamento com antimônio. Para isso, macrófagos murinos foram infectados com L. braziliensis e tratados ou não com CXCL10 (25, 50 e 100ng/mL), Glucantime (32mg/mL) e CXCL10+Glucantime [(25, 50 e 100ng/mL) + (32mg/mL)]. Após 24 e 48h de infecção, avaliou-se: carga parasitária (contagem de macrófagos infectados em lamínulas coradas), concentração de óxido nítrico (NO) e o padrão da citocinas TNF-α, IL-12, IL-4, IL-10 e TGF-β nos sobrenadantes das culturas. Os resultados mostraram que os tratamentos com CXCL10 e a associação CXCL10+Glucantime resultaram em uma significante redução da carga parasitária, variando entre 70,5% a 95% e 92,4% a 95,0%, respectivamente, quando comparado com o controle não tratado, enquanto o tratamento com Glucantime apresentou redução da infecção dos macrófagos de 74,0%. A redução da carga parasitária foi correlacionada com o aumento de NO em todas as concentrações de CXCL10 (p< 0,001). No entanto, não foi observada a mesma dinâmica quando utilizado a associação CXCL10+Glucantime. Os níveis de TNF-α e IL-12 aumentaram em função da concentração de CXCL10 nas primeiras 24h, no entanto, foi inibida quando os macrófagos parasitados foram tratados com Glucantime (p<0,05). A concentração de TNF-α foi menor nas células tratadas com CXCL10 + Glucantime do que naquelas tratadas somente com CXCL10 em ambos os tempos avaliados. Para IL-12 a assosciação CXCL10+Glucantime só induziu uma produção significante nas primeiras 24 h quando CXCL10 foi utilizado na concentração de 100ng/ml (p<0,01). As células tratadas com CXCL10 e associação CXCL10+Glucantime apresentaram uma redução da concentração de IL-4, diminuindo à medida que as concentrações da quimiocina foram maiores (p<0,01), enquanto o tratamento com Glucantime apresentou uma elevada produção desta citocina. Em ambos os tempos avaliados, o tratamento com CXCL10 induziu a produção de IL-10 nas concentrações de 50ng/mL e 100ng/mL, uma indução 3 vezes mais de IL-10 (p<0,001), quando comparado ao antimônio ou com a associação CXCL10+Glucantime. TGF-β mostrou comportamento diferente nos dois tempos avaliados, com aumento nas primeiras horas e queda nas últimas 48h. Glucantime induziu concentração de TGF-β superior àquela induzida por CXCL10. A associação CXCL10+ Glucantime apresentou produção elevada de TGF-β inversa à concentração de CXCL10 utilizada. Em conclusão, o tratamento in vitro com CXCL10 induziu um perfil de resposta Th1 (aumento de TNF-α e IL-12), com controle da parasitemia intracelular, e modulação da resposta inflamatória mediada por IL-10, em macrófagos infectados por L. braziliensis refratária ao antimônio. A associação Glucantime+CXCL10, embora tenha reduzido carga parasitária, não induzindo aumento significante de óxido nítrico, mostrando uma indução de TNF-α, IL-12 e reduzindo IL-4.

NUNES,Sammara Tavares. Associação de polimorfismos dos genes de citocinas com susceptibilidade para infecção por micobactérias. 2010. 76 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Patologia, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-01-02T13:54:24Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_stnunes.pdf: 5960414 bytes, checksum: 809527b6966a214358d9f4c75ceb6f26 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T16:27:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_stnunes.pdf: 5960414 bytes, checksum: 809527b6966a214358d9f4c75ceb6f26 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-02T16:27:49Z (GMT). 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Cytokines SNPs TNF-α (-308G>A), TGF-β codon 10 and 25, IL-10 (-1082G>A, -819C>T, -592C>A), IL-6 (-174G>C) and IFN-γ (+874T>A) were amplified by the polymerase chain reaction using sequence-specific primers (SSP-PCR) (One-Lambda). Statistical analysis was proceeded using GraphPad prism 5, and p values were determined by the Fisher test, with significance when p<0.05. Frequencies of TNFα genotypes were not different among patients and controls. However, IL-10 genotypes analyses showed a reduction on the frequency of the GCC/GCC in patients (7.1% vs 17.9%, p=0.006). This reduction was also observed with the IL-6 GC (22.1% vs 32.8%, p=0.04) and IFNγ TA (36.6% vs 51.6%, p=0.01) genotypes. In contrast, the frequencies of the IL-6 GG (72.1% vs 57.0%, p=0.008) and the IFNγ AA (54.0% vs 41.4%, p=0.03) genotypes were increased in patients. Furthermore, there was a trend to an increase in the frequency of the TGFβ CC/GC genotype (7.5% vs 0.8%, p=0.06). In conclusion, IL-10 (GCC/GCC), IL-6 (GC) and IFN-γ (TA) genotypes conferred protection against, while TGF-β (CC/GC), IL-6 (GG) and IFN-γ (AA) genotypes determined susceptibility to mycobacteria infection. On the other hand, T allele in codon 10 and G allele in codon 25 of the TGF-β gene, determined protection against tuberculosis. In contrast, the IL-6 -174G conferred susceptibility to mycobacteria infection. / Os estudos de polimorfismos dos genes de citocinas podem ser utilizados como uma ferramenta de análise antropológica para determinar perfis genéticos distintos, para traçar relações entre populações e para promover o entendimento das disparidades raciais na susceptibilidade genética a doenças. O objetivo deste estudo foi correlacionar os polimorfismos das citocinas, TNF-α -308, TGF-β, códon 10 e códon 25, IL-10 -1082, -819, -592, IL-6 -174, e IFN-γ +874 com a susceptibilidade e a proteção às infecções por M. tuberculosis e M. leprae. A casuística incluiu 194 pacientes, sendo 65 com hanseníase e 129 com tuberculose. Como controles foram selecionados 168 voluntários saudáveis. Todos os indivíduos assinaram termo de consentimento informado e o estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética local. Para a obtenção do DNA genômico e amplificação foram coletados 3-5ml de sangue periférico, sendo utilizado na extração do DNA o kit Easy-DNA (Invitrogen). Os SNPs dos genes das citocinas TNF-α (-308G>A), TGF-β códon 10 e 25, IL-10 (-1082G>A, -819C>T, -592C>A), IL-6 (-174G>C) e IFN-γ (+874T>A) foram tipificados por reação em cadeia da polimerase, empregando-se iniciadores de seqüência específica (PCR-SSP) (One-Lambda). Utilizou-se para a análise estatística o programa GraphPad prism 5, sendo o valor de ρ determinado através do Teste de Fisher bicaudal com significância em ρ<0,05. Durante a comparação dos resultados entre os grupos estudados observou-se que não houve diferenças entre as freqüências dos genótipos de TNFα. Entretanto, na análise dos genótipos de IL10, houve uma redução da freqüência do GCC/GCC nos casos (7,1% vs 17,9%, p=0,006). Esta redução também foi observada quando analisados os genótipos IL-6 GC (22,1% vs 32,8%, p=0,04) e IFNγ TA (36,6% vs 51,6%, p=0,01). No entanto, as freqüências dos genótipos GG de IL-6 (72,1% vs 57,0%, p=0,008) e AA de IFNγ (54,0% vs 41,4%, p=0,03) estavam aumentadas nos casos. Ademais, houve uma tendência para aumento da freqüência do CC/GC de TGFβ (7,5% vs 0,8%, p=0,06). Dessa forma pode-se concluir que os genótipos: IL-10 (GCC/GCC), IL-6 (GC) e IFN-γ (TA) conferiram efeito protetor, enquanto os genótipos TGF-β (CC/GC), IL-6 (GG) e IFN-γ (AA) conferiram efeito de susceptibilidade para infecção por micobactérias. Por outro lado, os alelos T no códon 10 e G no códon 25 de TGF-β determinaram efeito protetor contra tuberculose. Em contraste, o alelo -174G de IL-6 determinou susceptibilidade às infecções por micobactérias.

LIMA, Luana Nepomuceno Gondim Costa. Estudo do polimorfismo do genes das citocinas TNFa, IFNy, TGFß, IL-6, E IL-10 em hanseníase . 2009. 164 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-01-05T12:56:35Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_lngclima.pdf: 1702836 bytes, checksum: 54a1aa9b42b5683d9013d146e3e741d1 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T16:26:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_lngclima.pdf: 1702836 bytes, checksum: 54a1aa9b42b5683d9013d146e3e741d1 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-02T16:26:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_lngclima.pdf: 1702836 bytes, checksum: 54a1aa9b42b5683d9013d146e3e741d1 (MD5) Previous issue date: 2009 / As citocinas desempenham um papel importante na resposta imune do hospedeiro contra o M. leprae. Polimorfismos de genes de citocinas têm sido implicados como um fator do hospedeiro influenciando a susceptibilidade para doenças infecciosas. O objetivo deste estudo foi verificar a relação entre a hanseníase e os polimorfismos dos genes TNFα (fator de necrose tumoral-α) -308 G→A; IFNγ (interferon-γ) +874 T→A; IL-6 (interleucina-6) -174 G→C; IL-10 -1082 A→T, -819 C→T, -592 A→C e TGFβ (fator de crescmento tumoral-β) códon 10 e códon 25. O estudo foi realizado com moradores do município de Sobral com 15 anos ou mais, no Estado do Ceará, durante o período de março de 2006 a julho de 2008. Os indivíduos foram divididos em três grupos. O grupo caso índice foi composto por 46 indivíduos com hanseníase. Controles internos foram 110 contactantes que residiam no domicílio do caso índice e os controles externos foram 83 indivíduos que não residiam no mesmo domicílio do caso índice. Desses indivíduos foram coletados 3ml para extração de DNA através do “Genomic Prep Blood DNA Isolation Kit” (GE Healthcare) e para tipificação dos polimorfismos dos genes das citocinas através do “kit” da “One-Lambda” (Canoga Park, CA, EUA). Também forma coletados 4,9ml de sangue para detecção de anticorpos IgM para PGL-I utilizando um teste ELISA. Os dados epidemiológicos e clínicos foram obtidos a partir de um questionário aplicado à todos participantes, padronizado para o projeto “Epidemiologia da hanseníase no Ceará: aprofundamento dos estudos imuno-epidemiológicos”, ao qual esse estudo está vinculado. Assim, não foram observadas associações significantes entre os polimorfismos dos genes das citocinas estudados e a susceptibilidade à hanseníase. Em relação ao gene IL-10, os indivíduos com o genótipo GCC/GCC apresentaram uma tendência a desenvolver a hanseníase mais precocemente. Em relação aos SNPs do gene IFNγ e TGFβ encontramos uma associação do genótipo T/T do IFNγ e do genótipo T/T G/G do TGFβ com uma predisposição à doença em indivíduos vacinados, podendo ser que indivíduos com esses genótipo não sejam beneficiados com a vacina. Em relação aos SNPs do gene IL-6 do grupo de controles internos foi observada uma associação entre um considerável aumento do genótipo C/C e a positividade para o anti-PGL-I. Dessa forma, o estudo do polimorfismo dos genes das citocinas traz um melhor esclarecimento da relação entre a genética do hospedeiro e a hanseníase, complementando estudos sobre a sua transmissão e fatores intra e extra-familiares em suas características imunológicas.

MELO, Caroline Mourão. Estudo do efeito farmacológico da alfa e beta-amirina, uma mistura de triterpenos isolada de protium heptaphyllum, na pancreatite aguda experimental . 2009. 153 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-05-25T12:38:35Z No. of bitstreams: 1 2009_tese_cmmelo.pdf: 6818284 bytes, checksum: 73a0ebdea14df94f91bf8d3e2a8e3334 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-05-30T14:16:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_tese_cmmelo.pdf: 6818284 bytes, checksum: 73a0ebdea14df94f91bf8d3e2a8e3334 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-30T14:16:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_tese_cmmelo.pdf: 6818284 bytes, checksum: 73a0ebdea14df94f91bf8d3e2a8e3334 (MD5) Previous issue date: 2009 / Triterpenes are natural compounds with anti-inflammatory and cytoprotective effects relatively non-toxic. Acute pancreatitis, an inflammation of the pancreas, may lead to systemic inflammatory response syndrome (SIRS) and multiple organ dysfunction syndrome (MODS), conditions that can lead the patient to death. In this study, a mixture of triterpenes isolated from Protium hepthaphyllum was investigated for their effects in models of acute pancreatitis. In the model of acute pancreatitis induced by L-arginine, male Wistar rats were treated with a mixture of ,β-amyrin (10, 30 and 100 mg/kg, p.o.) or with vehicle (2% Tween 80 in distilled water, 10 ml/kg) 48, 24 and 1.5 h before the administration of L-arginine (2 x 2.5 g/kg, 1 h apart) or with metilprednisolone (30 mg/kg, i.m.) 30 min before the administration of L-arginine. In cerulein-induced pancreatitis, male Swiss mice were treated with a mixture of ,β-amyrin (10, 30 and 100 mg/kg, p.o.) or with vehicle (2% Tween 80 in distilled water, 10 ml/kg) 48, 24 and 1.5 h before administration of cerulein (5 x 50 mg/kg, 1 h apart) or with thalidomide (200 mg/kg, p.o.) 1h before administration of cerulein. Animals treated with saline (0.9% NaCl) were included in both models. We analyzed the pancreatic edema, serum amylase, lipase and cytokines (TNF-, IL-6), myeloperoxidase, reactive substances to thiobarbituric acid (TBARS), histology and immunohistochemistry (TNF-, iNOS and nitrotyrosine) pancreatic. L-arginine and cerulein significantly increased pancreatic edema and serum levels of amylase, lipase, TNF- and IL-6. Histopathologic evaluation of pancreas revealed the presence of edema, neutrophil infiltration, hemorrhage, acinar vacuolization and necrosis. We observed a marked increase in the expression of TNF-, iNOS and nitrotyrosine in the evaluation by immunohistochemistry. The pre-treatment with alpha and beta-amyrin (10, 30 and 100 mg/kg, p.o.), metilprednisolone (30 mg/kg, i.m.) or thalidomide (200 mg/kg, p.o.) significantly attenuated the severity of acute pancreatitis induced by either L-arginine, and by cerulein, as evidenced by the reduction of pancreatic edema, amylase, lipase and serum cytokines, myeloperoxidase and pancreatic TBARS. Furthermore, treatment with ,β-amyrin and the reference drugs suppressed the histopathological changes and expression of cytokines and nitrotyrosine pancreatic. Together, these results indicate that the mixture of ,-amyrin reduces the severity of acute pancreatitis induced by L-arginine or cerulein acting as anti-inflammatory and antioxidant agent. / Os triterpenos pentacíclicos são compostos naturais com atividade antiinflamatória e citoprotetora e são relativamente atóxicos. A pancreatite aguda, uma inflamação aguda do pâncreas, pode levar à síndrome da resposta inflamatória sistêmica (SRIS) e à síndrome da disfunção múltipla de órgãos (MODS), condições que podem levar o paciente ao óbito. Neste trabalho, a mistura de triterpenos pentacíclicos alfa,β-amirina, isolada do Protium hepthaphyllum, foi investigada quanto aos seus efeitos nos modelos de pancreatite aguda induzida por L-arginina em ratos e por ceruleína em camundongos. No modelo de pancreatite aguda induzida por L-arginina, ratos Wistar machos foram tratados com a mistura de alfa,β-amirina (10, 30 e 100 mg/kg, v.o.) ou com o veículo (2% de Tween 80 em água destilada, 10ml/kg) 48, 24 e 1,5h antes da administração de L-arginina (2 x 2,5 g/kg; 1 h de intervalo) ou com metilprednisolona (30 mg/kg, i.m.) 30 min antes da administração de L-arginina. Na pancreatite induzida por ceruleína, camundongos Swiss machos foram tratados com a mistura de alfa,β-amirina (10, 30 e 100 mg/kg, v.o.) ou com o veículo (2% de Tween 80 em água destilada, 10ml/kg) 48, 24 e 1,5h antes da administração de ceruleína (5 x 50 μg/kg; 1 h de intervalo) ou com talidomida (200 mg/kg, v.o.) 1h antes da administração de ceruleína. Animais tratados apenas com salina (0,9%, NaCl) foram incluídos nos dois modelos. Foram analisados o edema pancreático, níveis séricos de amilase, lipase e citocinas (TNF alfa, IL-6), mieloperoxidase, substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), histologia e imunohistoquímica (TNF-alfa, iNOS e nitrotirosina) pancreática. L-arginina e ceruleína aumentaram significativamente o edema pancreático e os níveis séricos de amilase, lipase, TNF alfa, IL-6. A avaliação histopatológica do pâncreas revelou a presença de edema, infiltração neutrofílica, hemorragia, vacuolização e necrose acinar. Foi observado um aumento acentuado na expressão de TNF alfa, iNOS e nitrotirosina na avaliação por imunohistoquímica. O pré-tratamento com alfa e beta-amirina (10, 30 e 100 mg/kg, v.o.), metilprednisolona (30 mg/kg, i.m.) ou talidomida (200 mg/kg, v.o.) atenuaram significativamente a severidade da pancreatite aguda induzida tanto por L-arginina, quanto por ceruleína, evidenciado pela redução do edema pancreático, amilase, lipase e citocinas séricas, mieloperoxidase e TBARS pancreático. Além disso, o tratamento com alfa,β-amirina e com as drogas de referência suprimiram as alterações histopatológicas e a expressão de citocinas e nitrotirosina pancreáticas. Em conjunto, esses resultados indicam que alfa,β-amirina melhora a severidade da pancreatite aguda induzida por L-arginina ou ceruleína por agir como antiinflamatório e antioxidante.