Orientador: Sebastião Roberto Taboga / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T15:37:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Custodio_AnaMariaGalvan_M.pdf: 4317395 bytes, checksum: 951f93aab0b057bcee52459f54707a5e (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A glândula prostática não é um órgão exclusivo do aparelho reprodutor masculino. Inicialmente conhecida como glândula de Skene, estudos demonstraram que a próstata feminina está presente em várias espécies de roedores e em humanos. Evidências embriológicas e histoquímicas comprovaram a homologia entre os dois órgãos. Em ambos os sexos, a próstata é composta por elementos epiteliais, estromais e neuroendócrinos cuja diferenciação e cujo desenvolvimento estão sob a regulação hormonal. Muitas alterações fisiopatológicas do complexo prostático masculino podem se manifestar no órgão feminino. As fosfatases ácidas são enzimas difundidas na natureza podendo ser encontradas em animais e plantas. Pertencentes à classe das hidrolases apresentam habilidade de catalisar, em condições ácidas, a hidrólise de monoesteres ortofosfato. Assim, o objetivo deste trabalho foi comparar a expressão da fosfatase ácida nas próstatas femininas e masculinas de Meriones unguiculatus durante as fases do desenvolvimento pós-natal. Para isso, as próstatas de 18 animais foram removidas, congeladas em nitrogênio liquido, seccionadas em criostato e submetidas à incubação com o substrato sintético f3-glicerofosfato de Sódio. O controle da reação foi obtido incubando o material sem o substrato e com o inibidor NaF (fluoreto de sódio) adicionado a este. Após a reação citoquímica, as lâminas foram contra coradas com Metil-Green para a análise à microscopia de luz. A verificação ultra-estrutural da atividade enzimática nos compartimentos celulares também foi realizada. A intensidade da atividade fosfatásica ácida pennitiu distinguir quatro categorias de marcações nas próstatas de ambos os sexos: ácinos com marcação forte, intermediária, fraca e ausente. Nossos resultados apontaram atividade fosfatásica ácida em todas as idades do desenvolvimento pós-natal. A próstata feminina apresentou maturidade biológica e funcional anterior à masculina. Em ambos os sexos, ao longo do desenvolvimento pós-natal do animal, foram verificados a dependência da atividade fosfatásica ácida aos níveis de testosterona / Abstract: The prostate gland is not an exclusive organ of the male reproductive system. lnitially known as Skene' s gland, studies have demonstrated that the female prostate is present in several rodents and in human specie. Embryological and histochemical evidences have been proposed by the homology between these organs. Secretory epithelium, connective stroma, smooth muscle cells and neuroendocrine elements compose the female and male prostate gland. Androgen levels regulate the differentiation, development and maintenance of these structures. Some pathological alterations in the prostate gland may occur in the both male and female, however the existence of this organ in the female has been neglected. Acid phosphatase is a family of enzymes that are widespread in nature, and can be found in many animal and plant species. By Gõmõri' s method, the use of the f3-glycerophosphate was employed to analyze the acid phosphatasic activity in the female and male prostates of Meriones unguiculatus gerbil during the postnatal development. Eighteen animaIs were employed and their prostates, immediately after the removal, were ITozen at liquid nitrogen, sectioned in Leica cryostat and incubated in sodium f3-glycerophosphate substrate. The controls of the reaction were obtained by incubation without the substrate and with the inhibitor sodium fluoride added at the incubation media. After the reaction, the material was stained by methyl green. The ultrastructural analyses of the acid phosphatase activity were employed. In the both sexes, the acid phosphatase reaction intensity was classified in four categories: acini with high, intermediate, low and absent acinar demarcation. Ours results revealed that the maturation of the female prostate occurs previously to the male prostate. These data reinforce the dependence, in both sexes, of the acid phosphatase activity and of the androgen levels during the postnatal development. ln addition, our results demonstrate that the female prostate is a gland functionally active in the female organism / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Mary Anne Heidi Dolder / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:18:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_AdelinaAparecidaFrancisca_D.pdf: 14108792 bytes, checksum: 1219342c239466be393a3a69a7387917 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: o estudo do conjunto de características estruturais, ultra-estruturais e citoquímicas das fases iniciais da espermatogênese, assim como das células presentes nos canais condutores de esperma durante um ciclo reprodutivo podem contribuir de forma significativa para o entendimento da morfologia e fisiologia da reprodução, do processo de maturação dos espermatozóides e de aspectos comportamentais e ecológicos de populações de lagartos. Com o objetivo de contribuir para essas diferentes áreas do conhecimento, o presente trabalho traz novos dados do lagarto Tropidurus itambere, sobre o ciclo reprodutivo testicular e epididimário, a espermatogênese, diferenciação das espermátides e dos espermatozóides analisados com o uso de técnicas de citoquímica estrutural e ultra-estrutural e com o uso de imunocitoquímica ultra-estrutural. Além disso, espermatozóides testiculares e espermatozóides presentes no receptáculo seminal de remeas foram observados com a utilização de lectinas, para localização de açúcares específicos. Também são caracterizados os aspectos morfológicos e histoquímicos (localização de glicoproteínas, polissacarídeos, glicosaminoglicanos ácidos) dos canais condutores de esperma em machos e fêmeas. Esses dados foram obtidos para animais durante o ciclo reprodutivo anual, capturados num fragmento de Mata Atlântica do estado de São Paulo. O ciclo reprodutivo é anual, com breve período de descontinuidade, dados muito semelhantes aos estabelecidos em outros trabalhos prévios de ecologia. A espermatogênese é mostrada pela primeira vez em lagartos desde suas fases iniciais da diferenciação celular. Algumas variações puderam ser notadas quanto à ultra-estrutura do espermatozóide deste lagarto Tropidurídeo e outros das famílias Iguanidae e Agamidae, reforçando a revisão sistemática proposta recentemente. O oviduto é constituído por três regiões distintas, das quais a mais distal é responsável pela estocagem dos espermatozóides por um curto período do ciclo anual. Foram detectados em eventos da espermatogênese, durante o ciclo anual proteínas básicas (principalmente no cone subacrosomal, centríolos da peça intermediária, corpos densos, proteínas periféricas do axonema e bainha fibrosa do flagelo), polissacarídeos (célula de Sertoli e sua organização durante os picos do ciclo reprodutivo, e na formação do complexo acrosomal), glicogênio (formação do complexo acrosomal), fosfatase ácida (em regiões claras do complexo acrosomal e em volta de espermatozóides em degeneração no período quiescente) e lipídeos (na vesícula pró-acrosomal e em vesículas espalhadas no citoplasma da célula de Leydig), áçucares específicos (durante a formação do complexo acrosomal em espermátides e em quase todas as estruturas do espermatozóide). Taís dados inexistiam para o grupo de Lacertílio_ e guardam algumas semelhanças, principalmente quanto à formação do acrosomo, com alguns anuros e aves. Foi detectada através de imunocitoquímica a presença de actina no cone subacrosomal e perforatório do complexo acrosomal, o que confirma a homologia destas organelas quanto à estrutura e função no espermatozóide de lagartos / Abstract: The study of the structural, ultrastructural and cytochemical characteristics of the initial phases of spermatogenesis was undertaken, also including the cells present in the sperm throughout the reproductive cycle. This data brings significant contributions toward a better understanding of the morphology and physiology of reproduction, of the maturation process of the spermatozoa and the behavior and ecology of lizard populations. With this objective, this study brings new data on the lizard, Tropidurus itambere, its testicular and epididymal characteristics during the reproductive cycle, its spermatogenesis showing the differentiation of spermatid and spermatozoon structure and ultrastructure, as analyzed by cytochemical techniques and with ultrastructural immunocytochemistry. A comparison of testicular spermatozoa and those found in the female's seminal receptical was made using lectins to locate specific sugars. Morphological and histochemical methods located glycoproteins, polisaccharides, acid glycosaminoglycans in the sperm ducts of males and females. This data was studied throughout the reproductive cycle of animals obtained from a fragment of the Atlantic forest in the state of São Paulo. The cycle is annual with a brief descontinuous period, as previously very similar of the established by ecological studies. Spermatogenesis is shown for the first time in a lizard, including the first stages of cell differentiation. Some variations were observed for the spermatozoon of this Tropiduridae lizard in relation to the Iguanidae and Agamidae, which reinforces recent revision of their systematic positions. The oviduct is divided into three portions, the most distal one being responsible for spermatozoon storage during a short period in the annual cycle. Basic proteins were detected in specific structures during the annual cycle (especially the subacrosomic cone, centrioles in the midpiece, dense bodies, peripheral proteins of the axoneme and fibrous sheath of the flagellum). Polisacchaddes were found in the Sertoli cell, showing peak organization of this cell during the reproductive period and its disorganization in quiescence, as well as occurring during acrosomal complex formation, while glycogen was identified only in the acrosomal complex.. Acid phosphatase was verified in the clear regions of the acrosomal complex and surrounding the degenerating sperm cells of the quiescent period. Lipids are plentiful in the Leydig cells of this period and in the pro acrosomic vesicle. Specific sugars were verified during the acrosomic complex formation in spermatids and mark almost all structures in the spermatozoon. This data is new among lizards and can be compared with anurans and birds, especially for acrosome formation. Actin was detected with an immunocytochemical method in the subacrosomic cone and the perforatorium of the acrosomic complex, thus confirming their homology as to structure and function / Doutorado / Histologia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientadora : Maria Luiza Silveira Mello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T14:36:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Britto_CarmendoMontedeCarvalho_M.pdf: 2938500 bytes, checksum: c1aa6f2bd5d31bbb1d98e3056e89d1c3 (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: Espermatozóides de touros da raça "pé-duro" em vias de extinção, foram estudados com relação a anomalias de cabeça e resposta citoquímica à reação de Feulgen, ao método do "fast green" alcalino e metacromasia induzida, e comparados aos de touros de rebanho de elite. Os objetivos eram avaliar a propriedade de métodos citoquímicos em diagnosticar alterações cromatínicas em espermatozóides de touro e, com base nesses resultados, estabelecer a viabi-lidade de se considerar os animais "pés-duros como doadores de sêmen em centrais de inseminação. Com exceção do método do "fast green" alcalino, os outros revelaram anomalias em espermatozóides de gado "pé-- duro" e de plantel de elite. Com base no tipo e frequên-cia dessas características, pelo menos 50% de touros "pés- duros" parecem reunir qualidades de sêmen que os indica-riam como doadores potenciais. Os restantes, por apresen-tarem espermatozóides com níveis altos ou de patologia de cabeça ou de alterações citoquímicas mais frequência reduzida de células no ejaculado, seriam desaconselhados como doadores, pelo menos nas condições zootecnicas em que se encontravam. Em alguns espécimes de elite foram também detectados níveis altos de patologia de cabeça que os afas-tariam como doadores. As anomalias de cabeça, no geral, parecem ser oca-sionadas por fenômenos de degeneração testicular não con-gênitos. Alterações em níveis supra-organizacionais cromatina se refletiriam na cinética de hidrólise de da espermatozóides morfologicamente normais tanto submetidos à reação de Feulgen como à metacromasia induzida. O método do "fast green" alcalino, por outro lado, nao se mostrou recomendável para o estudo "in situ" de protamina dos espermatozóides de touros, mesmo para aque-les com supostas alterações a nível do complexo DNA-proteína / Abstract: Spermatozoa from "pé-duro" bulls were studied with respect to anomalies of the head and cytochemical methods such as the Feulgen reaction, the alkaline fast green and induced metachromasy, and the results compared method with those obtained from bulls of an elite herd.The object was to evaluate the propriety of cytochemical methods in diagnosing alterations in the chromatin of the spermatozoa of bulls, and based on these results, establish the viability of considering "pé-duro" animals as semen donors in insemination centres. With the exception of the alkaline fast green method, the tests revealed anomalies in the spermatozoa of the "pé-duro" cattle and the elite herd.Based on the type and frequency of these characteristics, it seems that at least 50% of the "pé-duro" bulls present semen qualities which indicate them as potential donors. The remainder would not be recommended as donors at least under their present zootechnical conditions, due to spermatozoa with either high levels of head pathology or cytochemical alterations, plus a reduced frequency of cells in the ejaculate. High levels of head pathology were also detected in some of the elite specimens, which eliminated them as donors In general the head anomalies seemed to be a result of the phenomenon of non-congenital testicular degeneration. Alterations in the chromatin at a supra-organizational level were reflected in the kinetics of hydrolysis of morphalogically normal spermatozoids, when submitted to the Feulgen reaction and to induced metachromasy. On the other hand the alkaline fast green method was shown to be unsuitable for the ¿in situ¿ study of the protamines of bull spermatozoids, even for those with supposed alterations at the level of the DNA-protein com-plex / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia

Orientador: Maria Luiza Silveira Mello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-20T03:24:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Falco_JoseRicardoPenteado_M.pdf: 2917405 bytes, checksum: 8b61e7b5e40b4496f622ec51394ad4d2 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Núcleos das glândulas da espennateca de rainhas de Apis mellifera, virgens, recém-fecundadas e enve1hecidas, foram estudados através de testes citoquímicos apropriados- reação de Feulgen e concentração crítica de eletrólitos (CEC), a fim de se verificar possíveis alterações ao nível de DNA e complexos DNA-proteína com a fecundação e o envelhecimento. Foram encontradas: 1 )alterações nos valores de CEC com a fecundação e com o envelhecimento, 2)poliploidização dos núcleos da camada íntima e do epitélio glandular nas três situações em estudo. Alterações nos valores de CEC (aumento com a fecundação e decréscimo com o envelhecimento) indicam modificações na disponibilidade de grupamentos fosfatos livres do DNA (não ligados à proteínas), que poderiam ser causadas pela alteração na estrutura cromatínica, em resposta ao processo de fecundação (início da secreção glandular), e pelo envelhecimento (nonnal, casual, ou programado), devido a alterações quantitativas e qualitativas das proteínas nucleares. Estas alterações devem estar relacionadas à diferenças na expressão gênica, e também poderiam ser as responsáveis pelas alterações nos valores Feulgen­DNA, detectados à nivel das subclasses de conteúdo de DNA. Assume-se não ter havido perda no conteúdo de DNA para a idade considerada como envelhecida neste estudo / Abstract: Spermathecal glands nuclei of virgin, mated and old queen bees of Apis mellifera were studied cytochemically using the Feulgen reaction and the critical eletrolyte concentration (CEC) method, in order to detect possible changes in DNA and DNA-protein complexes with fecundation and ageing. The results showed l)altered CEC values (increase with fecundation and decrease with aging), 2)poliploidy on secretory epithelium and intima in the three situations studied. Differences in CEC values indicate differences in availability of free DNA phosphates, that could be caused by altered chromatin structure, due to alteractions in nuclear proteins, in response to fecundation and aging. The differences may be related to changes in gene expression, and could be responsible for the altered Feulgen-DNA values, detected in DNA content subclasses. No loss of DNA could be assumed, at least considering the insect age presumed here to be involved with aging processes / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Ciências Biológicas

Submitted by Milena Dias (milena.dias@ufpe.br) on 2015-03-11T18:54:51Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Rafael J. R. Padilha 2013 - Biblioteca-UFPE.pdf: 1472601 bytes, checksum: 92378dee73d227bb531c33d4c68f5d1a (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-11T18:54:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Rafael J. R. Padilha 2013 - Biblioteca-UFPE.pdf: 1472601 bytes, checksum: 92378dee73d227bb531c33d4c68f5d1a (MD5) Previous issue date: 2013 / Uma alternativa para identificar componentes bioquímicos necessários ao estabelecimento e manutenção do parasito no hospedeiro pode ser obtida através da citoquímica. Foi realizado um estudo citoquímico ultraestrutural do verme adulto macho de S. mansoni com 25, 45 e 130 dias. Para localizar sítios de cálcio utilizamos a técnica de Hepler e para evidenciar grupamentos aniônicos empregamos a ferritina cationizada, além do tratamento enzimático com condroitinase, tripsina e neuraminidase. Para a identificação de lipídios insaturados foi utilizada, a técnica do Tampão Imidazol e para localizar proteínas básicas empregamos às técnicas do Ácido Fosfotúngstico (PTA) e da Prata Amoniacal. A localização de sítios de cálcio mostrou-se bastante uniforme, demarcando os espaços internos, principalmente, o tecido muscular do verme, independente da sua idade. As amostras tratadas com ferritina cationizada apresentaram uma forte marcação na membrana do tegumento e glicocálice a intensidade da marcação aumentou de acordo com a idade do verme. O tratamento das amostras com a neuraminidase não alterou o padrão de marcação, enquanto com a tripsina marcou moderadamente a superfície do trematóide. Já, o tratamento com a condroitinase resultou em marcação pontual na superfície do verme. Foi observada a presença de lipídios insaturados de formato globular em toda a região tegumentar e subtegumentar do verme, sendo maior a concentração de lipídios à medida que verme ficava mais velho. Através da técnica da prata amoniacal, identificamos forte marcação dos carboidratos ácidos nas regiões tegumentares e subtegumentares do verme, com marcação do glicocálice presente apenas nos vermes com 45 dias. Já com o PTA foi identificada a presença de proteínas básicas no núcleo e nucléolo de células subtegumentares para todos os vermes, além de corpos de inclusão e espículas do tegumento nos vermes com 45 e 130 dias. O esclarecimento da composição bioquímica da região tegumentar e subtegumentar do verme adulto S. mansoni fornece dados para um melhor entendimento das relações parasitohospedeiro.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:04:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4414_1.pdf: 421863 bytes, checksum: 1dc983d91fb57f58244502a9a24c4406 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2003 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O perfil de crescimento e o consumo de fosfato e glicose, bem como o conteúdo de fósforo, a distribuição, estrutura e localização de polifosfato foram avaliados em Cunninghamella elegans cultivada em meios contendo diferentes concentrações de fosfato. Os resultados permitiram evidenciar a influência dessas concentrações sobre a produção de biomassa e o metabolismo do polifosfato no organismo estudado. A maior concentração de fosfato no meio de cultivo proporcionou maior rendimento da biomassa ao longo do crescimento. Observou-se uma relação entre consumo de fosfato e glicose com o crescimento e a quantidade de polifosfato total nos micélios cultivados em diferentes concentrações de fosfato. Diferentes frações do polifosfato celular de C. elegans foram identificadas e quantificadas através de extrações seqüenciais. A citoquímica ultrastrutural foi utilizada, com sucesso, para identificar a localização e a distribuição de polifosfato em C. elegans. Os resultados revelaram diferenças no padrão de marcação citoquímica nas diferentes fases do crescimento e meios de cultivo. Uma marcação uniforme do polifosfato foi observada sobre a superfície celular, em especial, na parede celular e na membrana citoplasmática. Produtos de reação, resultantes da marcação citoquímica, foram também visualizados em estruturas trabeculares, vacuolares e vesiculares, sob a forma de corpos eletrondensos e grânulos dispersos no citoplasma. Os resultados demonstraram o potencial de C. elegans na acumulação de polifosfato, sugerindo uma possível aplicação em processos biotecnológicos

Orientador: Angelo Luiz Cortelazzo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-07T07:38:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ribeiro_ViktoriaKovesdy_M.pdf: 7983680 bytes, checksum: 5d4ac508a6df0a6cc6853aab29ae2d9a (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: As restingas da região nordeste são pouco estudadas em todos os seus aspectos. Assim, o presente trabalho teve como objetivo analisar sementes de espécies de grande ocorrência na restinga da Reserva Particular do Patrimônio Nacional (RPPN) de Nossa Senhora do Outeiro de Maracaípe em Ipojuca, no litoral pernambucano, dentro de uma perspectiva mais ampla de análise para contribuir com o conhecimento de sua estrutura e das potencialidades de utilização econômica junto à população local. Foram coletadas sementes de 22 espécies, que foram fixadas em solução de FAA 70 ou fixador de Karnovsky para processamento e análise microscópica. Destas, oito espécies foram incluídas em historesina Leica ou em parafina, seguindo-se corte em micrótomo com 5 a 8 cm de espessura, conforme o meio de inclusão: Coccoloba laevis Casar. (Polygonaceae), Licania rigida (Chrysobalanaceae), Myrcia guianensis (Aulb.) DC. (Myrtaceae), Simaba cuneata A.St.-Hil. & Tul. (Simaroubaceae), Manilkara salzmannii (A.DC.) Lam (Sapotaceae), Maytenus impressa Reiss. (Celastraceae), Ocotea gardneri (Meisn.) Meiz (Lauraceae) e Serjania sp (Sapindaceae). Os materiais foram corados por diversos métodos gerais e citoquímicos, visando a determinação de proteínas, polissacarídeos, lipídios, radicais aniônicos totais e compostos fenólicos. Para as quatro primeiras espécies citadas, foram dosadas as principais reservas presentes nas sementes. Os resultados citoquímicos foram confirmados pelas dosagens bioquímicas revelando que C. laevis é uma espécie onde predomina o amido, L. rígida tem maiores teores de proteínas e S. cuneata é oleaginosa. M guianensis mostrou-se moderadamente rica em carboidratos e proteínas. Chamou a tenção a incomum quantidade de açúcares livres presentes nas sementes, que variou de 10% em C. laevis até 25% em L. rígida, podendo representar fator adaptativo interessante à falta de água. Cristais de oxalato, presença de taninos e tegumento lignificado também foram características encontradas na maioria das espécies e também podem estar relacionadas à defesa e estratégias de dispersão das sementes. Os testes citoquímicos revelaram ainda que O. gardneri e Serjania sp são ricas em amido e proteínas, enquanto que M. salzmannii apresenta lipídios em quantidades apreciáveis. Finalmente, pôde ser notado que M. impressa apresenta endosperma bem desenvolvido, possivelmente com hemiceluloses como sua principal reserva; seus cotilédones apresentaram quantidades apreciáveis de proteínas. As demais espécies coletadas encontram-se processadas para inclusão e corte para futura análise e caracterização citoquímica / Abstract: ¿ Restinga of the northeast have been barely studied in all their aspects. Thus, this work was as objective analyzes seeds of arboreal species of great occurrence in the ¿Reserva Particular do Patrimônio Nacional (RPPN) de Nossa Senhora do Outeiro de Maracaípe¿ in Ipojuca, located at the sea coast of Pernambuco to contribute with the knowledge of structure and these economic potentialities. Twenty-two species of fruits were harvested and the seeds were fixed in FAA70 or Karnovsky solutions and processed for microscopic analysis. Of these, eight species were embedded in Leica Historesin or paraffin and sectioned (5-7cm thick): Coccoloba laevis Casar. (Polygonaceae), Licania rigida (Chrysobalanaceae), Myrcia guianensis (Aulb.) DC. (Myrtaceae), Simaba cuneata A.St.-Hil. & Tul. (Simaroubaceae), Manilkara salzmannii (A.DC.) Lam (Sapotaceae), Maytenus impressa Reiss. (Celastraceae), Ocotea gardneri (Meisn.) Meiz (Lauraceae) and Serjania sp (Sapindaceae). After removing the paraffin and hydration, the materials were stained using several cytochemical methods to detect anionic residues, proteins, polysaccharides, starch, lipids and lignin. The stained sections were examined by light microscopy, using polarized light in some cases. The first four mentioned species of seeds were submitted to extraction to detect their principal reserves. The cytochemical results were confirmed by biochemical dosage revealing that C. laevis is a species where the starch is predominant; L. rigida has got higher contents of proteins and S. cuneata is oleaginous. M guianensis showed moderately rich in carbohydrates and proteins. Free and soluble sugars presented an unusual quantity in the seeds, with variation from 10% in C. laevis up to 25% in L. rigida , showing an possible and interesting adaptative factor to lack of water. Oxalate crystals, presence of tannins and lignified teguments were also characteristics found in most of the species and can be related to the defense and strategies of dispersion of the seeds. The cytochemical analysis revealed that although O. gardneri and Serjania sp are rich in starch and proteins, M. salzmannii presents lipids in appreciable amounts. Finally, it could be found that M. impressa presents endosperm well developed, possibly with hemiceluloses as the principal reserve while their cotyledons presented appreciable amounts of proteins. The other harvested fruits and seeds were processed for embebition and cut for future analysis and cytochemical characterization / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Sonia M. C. Dietrich / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T07:48:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_ThelmaReginaGabrielda_D.pdf: 24147285 bytes, checksum: b2d4ff0860f0a34188a660ec8abbbc77 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: O presente trabalho, foi realizado com sementes de D. miscolobium, uma espécie arbórea dos cerrados, de importância econômica como madeira e conhecida como cabiuna do cerrado. Como objetivos principais teve: verificar aspectos fisiológicos da germinação das sementes dessa espécie, determinar o padrão de crescimento para o eixo embrionário, detectar as alterações nos conteúdos das principais reservas da semente e sua mobilização e estabelecer parâmetros que permitissem analisar o padrão de desenvolvimento e crescimento da plântula, na fase inicial da germinação. Para atingir esses objetivos foram feitas determinações de massa fresca e massa seca de eixos e cotilédones, caracterizações e detecções citoquímicas e quantificações bioquímicas. Os resultados demonstraram o alto poder germinativo das sementes dessa espécie independentemente da procedência, tamanho ou cor de suas sementes. Entretanto, apesar da padronização das sementes, verificou-se uma variação considerável na velocidade de germinação e crescimento, que pode ser ilustrada pelas determinações de massa, indicando a grande variabilidade que se pode encontrar em estudos com espécies selvagens. Por isso, procurou-se caracterizar citoquimicamente um padrão morfológico de crescimento e desenvolvimento que permitisse uma visualização mais clara destes processos. Foi possível observar diferenças no padrão morfológico dos compostos de reserva, já a partir de 48 horas de embebição, seguindo-se um período variável de tempo sem modificações muito evidentes, até a protrusão da radícula. Selecionaram-se assim, 7 estádios de crescimento com base no comprimento do eixo hipocótilo-radicular. Nesse material não foram verificadas diferenças citoquímicas marcantes até 20 mm de comprimento, o mesmo ocorrendo no intervalo de 20 e 50 mm. Dessa forma, dos 7 estádios inicialmente estabelecidos foram selecionados 5, a saber: sementes quiescentes (E0); sementes com 48 horas de embebição (E1); protrusão da radícula (E2); eixo hipocótilo-radicular até 20 mm (E3) e 50 mm (E4). Nos diferentes métodos de coloração utilizados no estudo citoquímico, pode-se observar em E0, a uniformidade do conteúdo citoplasmático, com um aspecto globular e agregado. A partir de 48 horas de embebição (E1) já pôde ser observada uma separação dos glóbulos citoplasmáticos principalmente nas células da região central dos cotilédones. Essa desagregação se acentuou nos estádios E2 e E3 e no estádio E4 esses glóbulos se apresentaram maiores, em menor quantidade, com um formato circular bem definido. À diferença dos cotilédones esse processo nos eixos embrionários foi mais rápido. A natureza protéica do material no interior desses corpos foi demonstrada por métodos específIcos, evidenciando-se a natureza hidrofóbica de seu envoltório. As paredes celulares em geral mostraram aumento da disponilidade de radicais aniônicos no decorrer dos estádios. Juntamente com as determinações citoquímicas pôde-se constatar bioquimicamente a presença de uma grande quantidade de reserva lipídica nos cotilédones e principalmente nos eixos em E0, havendo redução deste conteúdo em estádios mais avançados. A composição dos ácidos graxos revelou a presença significativa dos ácidos linoléico, linolênico, esteárico+oléico e palmítico. Nos cotilédones a determinação do conteúdo protéico mostrou teores em tomo de 15% de sua massa fresca e seca. As sementes dessa espécie podem então ser classificadas como oleaginosas, com um conteúdo proteico razoável e pouca quantidade de carboidratos solúveis e amido / Doutorado / Biologia Vegetal / Doutor em Ciências

Orientador: Debora de Queiroz Tavares / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-02T12:29:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lenci_CamilaGoncalves_M.pdf: 18774017 bytes, checksum: 8a3ed97bb212871530149f72aae93a2c (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Recentemente, as espécies selvagens de Theobroma despertaram o interesse de pesquisadores da área da biotecnologia, como possíveis bancos de recursos genéticos úteis ao melhoramento do cacau (Theobroma cacao) como planta e como matéria prima do chocolate. Atributos como composição lipídica, perfil protéico, teor de polifenóise resposta a chocolatização,vêm sendo avaliados para as sementes das espécies selvagens. Oobjetivo deste estudo foi contribuir para o conhecimento das espécies de Theobroma selvagens através da avaliação da morfologia e ultraestrutura do tecido cotiledonar e da composição química das sementes maduras de Theobroma obovatum e Theobroma microcarpum comparativamente ao Theobroma cacao. O material fixado foi incluído em resina GMA para os métodos de análise histoquímica,e incluído em resina Epóxi para a observação da ultraestrutura em microscópio eletrônico de transmissão. As sementes maduras foram submetidas ainda às técnicas de microscopia eletrônica de varredura e aos métodos bioquímicos para a determinação da composição química. Demonstrou-sea semelhançaentre T. obovatum e T. cacao bem como a diversidade existente no gênero ao compará-los ao T. microcarpum. Em T; obovatum, pode-se notar o mesmo padrão de acúmulo de componentes dé reserva e morfologiado tecido cotiledonarobservadoem T. cacao, os vacúolos de proteína ocupam a porção central da célula de reserva ou estão comprimidos entre os glóbulos lipídicos. Em T. microcarpum os vacúolos protéicos ocupam os espaços remanescentes em meio aos grandes grãos de amido. Entre as três espécies de Theobroma estudadas T.cacao é a espécie que tem a maior expressão de células fenólicas, seguida por T. obovatum; essas células geralmente acompanham os vasos condutores ou estão dispersas pelo parênquimacotiledonar, agrupadas ou não. A composição química das sementes de T. obovatum (=60% de lipídeos,25% de proteínas, 10% de carboidratos e 5% de fenóis totais) aproxima-se dos valores encontrados em T. cacao (=49% de lipídeos, 27% de proteínas, 18% de carboidratos e 8% de fenóis totais) e ambos são bastante diferentes dos valores encontradosem sementes de T. microcarpum (= 6% de lipídeos, 13%de proteínas, 75%de carboidratose 2,7% de fenóis totais) nas quais o amido é o principalcomponentede reserva. / Abstract: Lately,the wildTheobroma species have called attention of the biotechnology field researchers, as a possible bank of useful genetic resources to the improvement of cocoa (Theobroma cacao) as a plant and raw material for chocolate. Attributes such as lipid composition, protein profile,polyphenol content and response to the chocolate process have been searched in seeds of the wildspecies. The aim of this study was to contribute to the knowledge of the wild Theobroma species. The cotiledonary tissue's morphology and ultrastructure and the chemical composition of Theobroma obovatum's and Theobroma microcarpum's mature seeds were investigated and compared to T. cacao. The fixed material was included in resin GMA for the histochemistry methods and included in Epoxi resin for transmission electron microscopy (TEM).The mature seeds were also submitted to the scanning electron microscopy (SEM) techniques and chemical compositon analysis. We could observe a clear similarity between T. obovatum and T. cacao as well as the diversity in the genus when compared to T. microcarpum. It can be noticed in T. obovatum the same pattem of storage compounds' accumulation and cotiledona'Y tissue's morphology observed in T. cacao, the protein storage vacuoles (PSVs) occupy the central portion of the cell or they are squeezed between the lipid bodies. In T. microcarpum the PSVs occupy the spaces among the large starch grains. Conceming these species, T. cacao has the major phenoliccell expression, followed by T. obovatum. The phenolic cells usually come along with the vascular bundle or can be dispersed through the parenchyma, as gathered or isolated cells. The chemical composition of T. obovatum seeds (=60% of lipids,25% of proteins, 10% of carbohydrates and 5% of total phenols) approaches to the values found in T. cacao seeds (=49% of lipids,27% of proteins, 18% of carbohydrates and 8% of total phenols) and both of them are different from the values found in T. microcarpumseeds (= 6% of lipids, 13% of proteins, 75% of carbohydrates and 2.7% of total phenols) which accumulate starch as the main storage compound. / Mestrado / Mestre em Alimentos e Nutrição

Resumo: Este estudo trouxe a análise morfológica, histológica, ultraestrutural e citoquímica do intestino médio de fêmeas de Amblyomma cajennense e mostrou que esse órgão passa, por grandes modificações à medida que o processo de alimentação progride, tornando-se acentuadas nos indivíduos reinfestados. Do intestino médio de A. cajennense, partem dois pares de divertículos que se ramificam totalizando 8 ramos. Naquelas em jejum a porção anterior do intestino médio é enrugada devido à forte musculatura. Em algumas regiões do intestino médio, estruturas, descritas pela primeira vez, foram denominadas de nódulos, resultado dos espaços presentes entre as fibras musculares ao redor do intestino. Á medida que progridem as infestações a superfície dos divertículos em jejum, semi e ingurgitados de 1ª e 2ª infestações enruga-se extremamente estando nas semi de 3ª infestação menos enrugada e ingurgitadas de 3ª infestação mais lisa. A histologia do intestino médio em jejum mostrou a presença de epitélio pseudo-estratificado com células: generativas e digestivas. Nas semi e ingurgitadas de 1ª infestação e semi de 2ª infestação o epitélio sofre estratificação. Nas semi de 2ª infestação observou-se no epitélio a presença do terceiro tipo celular: a secretora. Nas ingurgitadas de 2ª infestação e nas semi e ingurgitadas de 3ª infestação o epitélio se desorganizou. No lúmen do intestino das semi submetidas à 1ª infestação, observou-se esferas membranosas; com estruturas fortemente coradas no interior. Outras com seu interior preenchido apenas por restos de citoplasma. A desorganização no epitélio intestinal de fêmeas fixadas em hospedeiros reinfestados sugeriu que os anticorpos liberados pelo hospedeiro contra o intestino dos carrapatos tenham agido nestes. A histoquímica detectou pouca proteína no epitélio intestinal daquelas em jejum... (resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study showed the morphological, histological, ultrastructural and cytochemical analysis of the medium intestine of Amblyomma cajennense females since this organ goes through significant modifications as the feeding process progresses and these modifications are stronger in reinfested individuals. Two pairs of diverticulum emerge from A. cajennense medium intestine and are divided in eight branches. In the unfed females ones the anterior portion of the medium intestine is wrinkled due to the strong musculature. In some regions of the medium intestine, structures which were described for the first time were called nodules, resulting from the spaces between the muscular fibers around the intestine. As the infestations progress the surface of unfed, semi and engorged females diverticulum are extremely wrinkled, being smooth in the semi of 3rd infestation and smoother in engorged of 3rd infestation. The histology of the unfed medium intestine showed the presence of a pseudostratified epithelium with generative and digestive cells. In semi and engorged of 1st infestation and semi of 2nd infestation the epithelium suffered stratification. In semi of 2nd infestation the presence of a third cellular type was observed: the secretory one. In engorged of 2nd infestation and in semi and engorged of 3rd infestation the epithelium was disorganized. In semi submitted to 1st infestation the intestine lumen presented membranous spheres, with strongly stained structures. Others were filled by rests of cytoplasm. The disorganization of the intestinal epithelium of females fixed in reinfested hosts suggested that the antibodies released by the host against the ticks' intestine had acted on them. Histochemistry revealed little protein in the intestinal epithelium in the unfed ones, unlike those of first infestation semi and engorged and of second semi, which had the epithelium strongly stained... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Maria Izabel Camargo Mathias / Coorientador: Gervásio Henrique Bechara / Banca: Glaucia Maria Cavasin / Banca: Roberta Cornelio Ferreira Nocelli / Banca: Pablo Henrique Nunes / Banca: Rusleyd Maria Magalhães de Abreu / Doutor