Orientador: Janaina Habib Jorge / Resumo: As dificuldades de higienização e controle do biofilme das próteses podem resultar em desequilíbrio da microbiota e desencadear a proliferação dos micro-organismos, inclusive patogênicos. A adoção de métodos que inativem os micro-organismos da superfície da prótese é imprescindível para prevenção e tratamento de infecções. O objetivo deste estudo clínico, randomizado do tipo cross-over foi avaliar,a efetividade de sabonetes líquidos desinfetantes na inativação de micro-organismos presentes em próteses totais removíveis. Vinte e oito participantes totalmente desdentados superiores foram selecionados para o estudo de acordo com a sequencia estabelecida para utilização dos métodos de higienização: HS: hipoclorito de sódio 0,5% (grupo controle positivo); SD: sabonete líquido Dettol; SL: sabonete líquido Lifebuoy; PBS: solução de PBS (grupo controle negativo). O tratamento consistiu na imersão das próteses totais superiores dos participantes nas soluções por 8 horas (overnight), durante sete dias. Neste estudo clínico randomizado adotou-se delineamento cruzado (crossover), onde todos os tratamentos (métodos de desinfecção) foram aplicados a todos os participantes, eliminando, assim, a possibilidade de variação entre os indivíduos em resposta a estes tratamentos. Amostras do biofilme das próteses foram obtidas antes (baseline) e após cada tratamento, utilizando-se swab estéril, e o material microbiológico foi diluído e plaqueado em meios seletivos para Candida spp. O sabonete líqui... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The difficulties related to hygiene and biofilm control on buccal prosthesis may unbalance the microbiota and trigger the proliferation of microorganisms, including pathogens. Adopting methods that inactivate microorganisms at the surface of the prosthesis is essential for preventing and treating infections. The difficulties of sanitizing and controlling the biofilm of the prostheses can result in imbalance of the microbiota and trigger the proliferation of microorganisms, including pathogens. The adoption of methods that inactivate microorganisms on the surface of the prosthesis is essential for the prevention and treatment of infections. The objective of this cross-over randomized clinical trial was to evaluate the effectiveness of liquid disinfectant soaps in the inactivation of microorganisms present in total removable dentures. Twenty-eight upper fully edentulous participants were selected for the study according to the established sequence for use of the hygiene methods: HS: sodium hypochlorite 0.5% (positive control group); SD: Dettol liquid soap; SL: Lifebuoy liquid soap; PBS: PBS solution (negative control group). The treatment consisted in immersing the upper limbs of the participants in the solutions for 8 hours (overnight) for seven days. In this randomized crossover study, all treatments (disinfection methods) were applied to all participants, thus eliminating the possibility of variation among individuals in response to these treatments. Biofilm samples of the p... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Neste estudo, mostramos a possibilidade de identificação dos AgH de ETEC pela caracterização molecular do gene fliC pela análise de seu polimorfismo de restrição. Um único alelo de fliC de ETEC foi encontrado para cada antígeno flagelar, utilizando-se a endonuclease RsaI, com exceção do H21. Além de cepas móveis, isolados imóveis também puderam ser caracterizados por essa técnica molecular. A alta tipabilidade da PCR-RFLP foi comprovada por meio de sua aplicação não só a amostras de ETEC com AgH previamente desconhecidos, mas também a outras linhagens de E. coli. Observamos que após identificação do antígeno flagelar das amostras de ETEC pela PCR-RFLP, a determinação do antígeno somático pôde ser direcionada, diminuindo assim, o número de anti-soros utilizados para a pesquisa do AgO. A técnica de PCR-RFLP, em nosso estudo, mostrou uma sensibilidade de 83% e 100% de especificidade. Esta técnica foi mais rápida na identificação do AgH de E. coli (2 dias) em comparação à sorologia clássica (7 ou mais dias, dependendo da motilidade da cepa). Acreditamos que o método de soroaglutinação para determinação do AgH será substituído rapidamente pela PCR-RFLP. Contudo, a soro aglutinação não poderá ser totalmente dispensada em curto prazo. No futuro, com o perfil molecular obtido dos alelos de cepas procedentes de estudos epidemiológicos, novos padrões serão definidos para as cepas diarreiogênicas de E. coli, permitindo o abandono da sorologia para AgH. / In this study, we showed that the H antigens of ETEC can be characterised by restriction analysis of the polymorphism of the fliC gene. Only one allele of the fliC gene of ETEC was found for each flagellar antigen when restriction endonuclease RsaI was used, with the exception of H21 . Additionally, non-motile strains could also be characterised using this molecular technique. The high typeability of this technique was demonstrated by the fact that it can not only be applied to ETEC samples with previously unknown H antigens but also to all other lineages belonging to the E. coli species. Moreover, the determination of the somatic antigen was guided by the identification of the flagellar antigen of ETEC strains by PCR-RFLP, thus reducing the number of anti-AgO sera used. In this study, the PCR-RFLP technique showed a sensitivity of 83% and a specificity of 100%. This technique proved to be quicker for the identification of the E. coli AgH, taking 2 days to complete, in comparison to the 7 or more days necessary when using classic serotyping. We believe that the determination of the AgH by seroagglutination will soon be substituted by the PCR-RFLP technique. However, serotyping will still have to be used in the short run, for further studies involving PCR-RFLP must be carried out. In the future, with the determination of the molecular profiles of alleles of strains obtained in epidemiological studies, new patterns will have been described for the diarrhoeagenic strains of E. coli, thus permitting the abandonment of AgH serotyping for good.

O melasma é uma das desordens pigmentativas da pele adquiridas mais comuns que afetam a face da mulher adulta e pode causar comprometimento significativo da qualidade de vida psicossocial. Apesar da grande demanda terapêutica, o tratamento do melasma continua sendo desafiador com resultados inconsistentes, constantes recidivas e frequentes relatos de efeitos adversos. Assim, substâncias ativas alternativas para o controle do melasma são de grande interesse para a área clínica. Considerando que o extrato de oliva com concentração padronizada de hidroxitirosol apresenta propriedades antioxidantes, anti-inflamatórias e potencial ação despigmentante por inibição da tirosinase, a enzima central envolvida na melanogênese, o mesmo apresenta grande potencial para o controle do melasma. Técnicas não invasivas de biofísica e de análise de imagem da pele, como a microscopia confocal de reflectância, são ferramentas fundamentais para a avaliação objetiva da eficácia de tratamentos em estudos clínicos e caracterização do melasma. Nesse contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a eficácia do uso oral e/ou tópico do extrato de oliva padronizado em hidroxitirosol no controle do melasma por técnicas de biofísica e análise de imagem da pele. Para isso, um estudo clínico randomizado, duplo-cego e placebo controle foi realizado a partir da inclusão de 56 participantes entre 30 e 50 anos, fototipo III ou IV e melasma na região malar. As participantes foram randomizadas em quatro grupos (n=14): controle, tópico, oral e tópico e oral e receberam o tratamento diário contendo o extrato de oliva ou o placebo/veículo por 90 dias. A caracterização das estruturas morfológicas do melasma foi realizada com o microscópio confocal de reflectância. A avaliação objetiva do melasma para verificar a eficácia dos tratamentos foi realizada mensalmente por técnicas de biofísica como as medidas de luminosidade, melanina e eritema, que foram complementadas pelo índice de severidade e área do melasma modificado (mMASI). Os resultados obtidos apresentaram grande variabilidade intrínseca. Ainda, apesar de observada maior redução da pigmentação do melasma no grupo que recebeu o tratamento oral, quando comparado aos outros grupos, incluindo o grupo controle, nenhuma diferença significativa nos seguimentos avaliados foi observada. Por fim, o extrato de oliva padronizado em hidroxitirosol não é eficaz para o controle do melasma nas concentrações usadas no estudo / Melasma is one of the most common hyperpigmentation disorder that affects the face of adult women and can cause significant psychosocial life quality impairment. Despite great therapeutical demand, melasma treatment remains challenging with unpredictable results, relapses and frequent adverse effects. Therefore, alternative active substances for melasma control is of great interest for clinical area. This way, olive extract containing standardized concentration of hydroxytyrosol presents antioxidant effect and potential depigmenting action by tyrosinase inhibition, the main enzyme involved in melanogenesis. Non-invasive biophysical techniques and image analysis, as confocal reflectance microscopy, are indispensable tools to evaluate the treatment efficacy in clinical trials and melasma characterization. This way, the objective of the present study was to evaluate the clinical efficacy of an oral and/or topical treatment based on an olive extract titrated in hydroxytyrosol for melasma control using biophysical and skin imaging techniques. For this, a randomized, double-blinded and placebocontrolled clinical trial was conducted by the inclusion 56 women aged 30-50 years, phototype III and IV and melasma. The participants were randomized in four groups (n=14): control, oral or topical - and received daily treatment containing hydroxytyrosol or placebo for 90 days. Efficacy evaluation were performed once a month by biophysical techniques for lightness, melanin and erythema quantification and complemented by the modified melasma area and severity index (mMASI). Results presented great intrinsic melasma variability. Furthermore, depite reduced pigmentation observed in melasma for the oral group compared to the other treatment groups, including the control group, no significant difference was observed at the evaluations. In conclusion, the oral use of olive extract containing hydroxytyrosol was not efficient for melasma control at the studied concentrations

A cotinina, principal produto de biotransformação da nicotina, é considerada um excelente marcador biológico de exposição tanto para fumantes ativos quanto passivos. A cotinina apresenta maior estabilidade química que a nicotina e possui uma meia vida de eliminação de cerca de 40 horas. Assim, um método analítico sensível, preciso e exato foi desenvolvido, para sua determinação, empregando-se a cromatografia em fase gasosa com coluna capilar (HP-Ultra2, 25m x 0.20mm x 0.33µm) e detetor de nitrogênio e fósforo (CGIDNP). A nicotina e a cotinina foram extraídas sob condições alcalinas com diclorometano, de amostras de urina às quais foi adicionado o padrão interno (clorprenalina). Após evaporação do extrato sob fluxo de nitrogênio, o resíduo foi retomado utilizando-se 50 µL de metanol onde 1 µL foi injetado no CG/DNP. O método mostrou-se linear na faixa de 10 a 200 ng/mL com coeficiente de correlação (r) igual a 0,0965 e 0,9966 para a cotinina e nicotina, respectivamente. Os limites de detecção e quantificação foram 5 ng/mL e 10 ng/mL, tanto para a cotinina quanto para a nicotina. A nicotina e a cotinina mantiveram-se estável por 15 e 21 dias a 20°C. A avaliação das amostras de urina de algumas crianças evidenciaram o contato com pais ou parentes fumantes, apresentando resultados de cotinina entre 13,70 a 272,60 ng/mL. O método validado neste trabalho mostrou-se apropriado para a avaliação da presença de cotinina em amostras de urina de fumantes passivos, apresentando as vantagens de fácil execução, curto tempo de análise e baixo custo. / Cotinine, the principal product of biotransformation of nicotine, is considered an excellent biological marker to measure the exposure to cigarette smoke for both the active and passive smokers. Cotinine presents a higher chemical stability than the nicotine and it possesses a half-life of elimination of approximate 40 hours. Therefore, a sensible analytical method, very precise and accurate, was developed using a process of gas chromatography with a nitrogen phosphorous detector (GC/NPD). Nicotine and the cotinine were extracted, under alkaline conditions with dichloromethane, from urine samples which had the internal standard clorprenaline added to them. After evaporation of the extract under nitrogen flux, the residue was retaken using 50 µL of methanol, where 1 µL was injected in the GC/NPD. The method proved to be linear in the range of 10 to 200 ng/mL with a coefficient of correlation (r) equal to 0,0965 and 0,9966 to cotinine and nicotine, respectively. The limits of detection and quantification were 5ng/mL and 10ng/mL for both cotinine and nicotine. Nicotine and cotinine maintained themselves stable for 15 and 21 days at -20 C°. The evaluation of same urine samples taken fron children passively exposured to tobacco throgh there parentes or relatives evidenced cotinine levels fron 13,70 to 272,60 ng/mL. The validated method in this work proved to be appropriate for the evaluation of the cotinine presence in the urine samples taken from.

Made available in DSpace on 2018-08-01T23:26:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_9826_DISSERTAÇÃO FINAL.pdf: 516782 bytes, checksum: f8a8e0ac8e3f39b30abbc544c45a8cf3 (MD5) Previous issue date: 2016-04-12 / Não existem estudos conclusivos que determinem a exata relação entre a recessão gengival e a hipersensibilidade dentinária cervical. Diante da prevalência do problema de hipersensibilidade dentinária cervical associado com a recessão gengival, justifica-se a importância do conhecimento da relação destas condições clinicas. O objetivo deste estudo é avaliar pacientes com recessão gengival vestibular e sua associação com a hipersensibilidade dentinária cervical em estudo clínico em 61 pacientes atendidos na Clínica Odontológica do Curso de Odontologia da UFES. Eles foram selecionados quanto à presença de recessão gengival e após identificada a recessão o paciente foi submetido a avaliação com o intuito de identificar a relação com hipersensibilidade da dentinária cervical. Foram anotados de todos os pacientes dados referentes à idade, sexo, e o tipo de dente. No exame clínico foram avaliados os seguintes parâmetros: determinação da presença ou não do sangramento, presença visível de placa, altura da recessão gengival e hipersensibilidade dentinária cervical. O grau de sensibilidade foi classificado utilizando estímulo térmico (Endo-Ice Spray MAQUIRA®- PR/ Brasil), segundo UCHIDA em grau 0,1,2,3 sendo 0 (sem desconforto significativo),1 (desconforto, mas sem dor considerável), 2 (dor aguda durante a aplicação do estímulo), 3 (dor aguda durante e após a aplicação do estímulo). A associação entre os dentes que apresentam recessão gengival e a presença de hipersensibilidade dentinária cervical apresentou significância estatística com p<0,001, sendo a soma do grau sensibilidade em 69,5%, com índice 3 em 39,6% seguido de índice 2 com 29,9%. A recessão gengival e hipersensibilidade dentinária cervical são mais comuns do lado esquerdo do que o lado direito da arcada dentária com mais recessão gengival do lado esquerdo 56.4% (87 dentes) do que do lado direito 43,6% (67 dentes), o sangramento à sondagem e o índice de placa visível não apresentaram significância estatística ao nível de 5% (p = 0,227 e p = 0,687). Conclui-se que houve relação entre hipersensibilidade dentinária cervical e recessão gengival. / The gingival recession is commonly associated to cervical dentinal hypersensitivity. However, there are no conclusive studies which determine such relationship. The prevalence between these two clinical conditions is usually originated in cervical dentinal hypersensitivity, associated with gingival recession and it justifies the importance of understanding the relationship of these clinical conditions. The objective of this clinical study is to evaluate patients with vestibular gingival recession and the relationship of such condition with the cervical dentin hypersensitivity. Sixtyone patients were submitted to treatment at the Dental Clinic of the UFES School of Dentistry with gingival recession. Subjects were examined in search for the presence of gingival recession and evaluated in order to identify the relationship of each lesion with the cervical dentinal hypersensitivity. Age, gender and teeth type were taken into consideration. The following parameters were recorded through clinical examination: presence or absence of bleeding, visible presence of plaque/biofilm, gingival recession and cervical dentin hypersensitivity. The sensitivity factor (UCHIDA) was applied for sensitivity measurement. The association between the teeth with gingival recession and the presence of cervical dentin hypersensitivity showed statistical significance p<0.001, where the sum of the sensitivity factors were: 69.5% with index 3 in 39.6% of subjects, followed by index 2 featuring 29.9. It was observed, within the studied group, that gingival recession and cervical dentine hypersensitivity are more common on the left side than on the right side of the dentin with arch gingival recession on the left 56.4% (87 teeth) than the right side of 43.6% (67 teeth), bleeding on probing and visible biofilm index were not statistically significant at 5% (p=0.227 and p=0.687). It was concluded that there is a relationship between cervical dentin hypersensitivity and gingival recession.

Ras é uma proteína G monomérica que converte estímulos extracelulares em sinais bioquímicos intracelulares e controla uma variedade de processos biológicos, tais como, proliferação, diferenciação, adesão e morte celular por apoptose. Além da ativação mediada por fatores de crescimento e hormônios, Ras pode ser ativado pela interação com o óxido nítrico (NO&#183;), um radical capaz de mediar processos de sinalização. Essa interação resulta na S-nitrosação do resíduo de cisteína 118 de Ras. Assim, propusemo-nos avaliar a participação da proteína Ras e das MAP quinases: ERK1/2, JNK e p38 no processo de apoptose de células THP-1 induzida pelo doador de NO&#183;, S-nitrosoglutationa (SNOG). Para tanto, transfectamos células THP-1 com o plasmídeo que carrega o gene que codifica para a proteína Ras mutada, na qual o resíduo de cisteína 118 foi trocado por um resíduo de serina, o que tornou Ras não responsiva ao NO&#183;. A apoptose foi evidenciada através da formação de corpos apoptóticos, exposição de fosfatidilserina e ativação de caspase-3. A modulação da apoptose via reação de S-nitrosação foi demonstrada através da diminuição estatisticamente significativa da exposição de fosfatidilserina nas células transfectadas com o plasmídeo p21 RasC118S quando comparadas com as células selvagens e parentais. A ativação da proteína Ras ocorreu após 5, 15 e 30 minutos da adição de SNOG nas células parentais; entretanto, nas células transfectadas com o plasmídeo p21 RasC118S não observamos resposta de ativação de Ras. A avaliação das MAP quinases revelou ativação de máxima de ERK após 4 horas e ativação máxima de JNK e p38 após 2 horas de incubação com SNOG. Em relação as MAP quinases nas células transfectadas, as células p21 RasC118S apresentaram diminuição apenas da ativação ERK, quando comparadas com as células p21RasWt. A utilização dos inibidores específicos de MEK, JNK e p38; PD09895, CEP11004 e SB22004, respectivamente demonstrou que apenas a inibição de ERK diminuiu significativamente a apoptose nas células THP-1. Concluímos que na apoptose de células THP-1 estimulada por NO&#183;, o radical livre ativa Ras via S-nitrosação, que por sua vez, recruta ERK, MAP quinase participante desta cascata de sinalização. Finalmente, demonstramos que ERK exerce papel fundamental na condução do sinal de apoptose no modelo que estudamos. / Ras is a monomeric small G protein that converts intracellular stimulus into intracellular biochemical signals. Ras controls a myriad of biological processes such as, proliferation, differentiation, adhesion and cell death by apoptosis. In addition to growth factor-mediated activation of Ras, nitric oxide (NO&#183;) directly interacts with and activates Ras via S-nitrosation on a single cysteine residue (Cys118). Therefore, we investigated the participation of Ras and of the MAP kinases (ERK, JNK and p38) in the apoptosis of THP-1 cells induced by the NO&#183; donor S-nitrosoglutathione (SNOG). For that, we transfected THP-1 cells with a plasmid that contains the gene that codifies for the mutated Ras protein, in which the cysteine residue 118 was replaced by a serine. Apoptosis was evidenced by apoptotic bodies formation, phosphatidylserine exposition and caspase-3 activation. Parental and wild type Ras transfected-THP-1 cells (Wt) exposed phosphatidylserine upon treatment with 1.0 mM SNOG. The importance of the S-nitrosation reaction in the process was evidenced by a decrease on phosphatidylserine exposition in the cells transfected with the plasmid p21RasC118S, as compared to parental and wild type cells. Ras activation occurred within the first 30 minutes after SNOG addition to parental cells. However in p21RasC118S transfected cells, we were unable to detect activation of Ras. Regarding the MAP kinases located downstream on the Ras-mediated signaling cascade, ERK activity was maximum after 4 hours incubation with the NO&#183; donor. JNK and p38 MAP kinase followed different kinetics, displaying maximum activity after 2 hours incubation with SNOG. The use of specific inhibitors to MEK, JNK and p38; PD09895, CEP11004 and S822004 respectively has shown that only ERK inhibition has significantly decreased THP-1 cells apoptosis. We concluded that NO&#183; induced apoptosis in THP-1 cells activating Ras by S-nitrosation and recruiting the MAP kinase ERK, a downstream element of this signaling cascade. Furthermore, our findings support a major role for ERK in the NO&#183; mediated apoptosis of THP-1 cells.

Aim: The aim of this thesis is to describe the process by which the inherited disease, cystic fibrosis, (CF) was recognised as an important clinical entity in the United Arab Emirates (UAE) and the Sultanate of Oman (Oman). It examines the clinical presentation of the first patients and assesses their degree of severity. Further, it describes the first studies carried out to determine the underlying CF mutations associated with the disease in the UAE and Oman. An estimate is offered of the birth frequency of the condition. Overall, the cultural, geographical and historical aspect of the societies in which the disease occurs is stressed. Methods: An initial literature search was carried out using Medline of any literature pertaining to the Arab World and CF. this was read and classified into the relevance to Arabs in general, the Middle East and then specifically the Arab (Persian) Gulf societies. Thereafter, a clinic was established at Tawam Hospital, Al Ain, UAE, for children presenting With chronic respiratory disease that could serve as a national referral centre. It was run by the Author as a service of the Paediatric Department of the UAE University Medical School. I sent a letter to every Paediatrician working in the UAE informing them of our clinic and offering our services for the diagnosis and management of chronic respiratory disease in children. This was based on the author's experience as a respiratory paediatrician in Australia and New Zealand and as the Professor of Paediatrics in the UAE. No such service then existed in the UAE. Funding was sought to establish a research programme and develop a molecular genetics laboratory in the UAE Medical School. A series of successful research applications provided the grants to commence the investigations. Once a small number of children had been identified as having CF from those referred to the respiratory clinic, the initial project was to assess and report their clinical presentation. Following this an early start was made on the identification of the mutations responsible. Once these were established an attempt was made to estimate the frequency of the condition at birth. Additional clinical studies revolved around assessing the severity of the condition that was associated with the main mutations that were identified. A clinical comparison was made with those with the mutation AF508 and the other main mutation, despite the obvious limitation of small numbers then available. Radiological assessment was made to evaluate the progression of the disease. The final aspect of the study was to assess patients from Oman and compare their findings and mutations with the neighbouring UAE. Based on information gained hypotheses are proposed regarding the spread of the gene mutation by population drift. Thesis outline: A literature review is presented in the form of a critique on the disease and a resume of the relevant aspects of the genetics of CF. Additionally, facts about the two countries' geography and history are presented. Finally, knowledge about CF mutations and population origins from other areas is presented. The second main section deals with the clinical features of the disorder as it presents in the UAE. Molecular findings are then presented and details of the common mutation found in Bedouin Arabs. Hypotheses are then presented based on the information gathered. Results: CF is not a rare disease in the Arab children of the UAE and Oman. These findings refute previous reports of CF being a rare or non-existent disease in Arabs. The condition presents with a severe clinical picture, with early colonisation of the respiratory tract with staphylococcus, haemophilus and pseudomonas organisms, even with conventional CF management practices in place. The CF mutation S549R is prevalent in Arabs of Bedouin stock, while AF508 is found in those of Baluch origin. The former may be descendants of Arabs who left southern Arabia and travelled to the Trucial Coast at the time of the destruction of the great dam at Marib. The origins of this mutation may lie in the area that corresponds to the modern Republic of Yemen. The latter groups are descendants of those who came originally from Baluchistan. It is hypothesised also that the ancestral home of the AF508 mutation may be in the geographical area now known as Baluchistan, that spans three separate modern political territories. The evidence presented supports the concept that the S549R mutation may be associated with a severe, if not the severest, clinical pattern recognised. It equates with that seen with the homozygous AF508 genotype. The absence of an additional mutation in the promoter region accounts for the different clinical pattern seen in previously described patients. Conclusions: There needs to be a major awareness of the presence of CF as a severe clinical disease in the children of the Gulf States. The clinical presentation and findings support the concept of under recognition of the disease. Climatic conditions put the children at special risk of hyponatraemia and electrolyte imbalance. The absence of surviving adults with the disease suggests premature deaths have occurred, but the high fertility rates have maintained the gene pool for this recessive disorder.

Os ensaios clínicos ocorrem cada vez mais em uma escala global e as pesquisas patrocinadas vem mudando para as regiões emergentes. A condução desses estudos traz benefícios para centros de pesquisa, pacientes e para o país como um todo. No entanto, a alocação de ensaios clínicos por companhias farmacêuticas multinacionais é um processo complexo determinado por múltiplos fatores e o conhecimento de quais fatores as companhias farmacêuticas valorizam mais ao alocar ensaios clínicos é escasso. Assim, compreender melhor esse processo é essencial para governos e centros de pesquisa que desejam atrair mais ensaios clínicos patrocinados por companhias farmacêuticas multinacionais. O objetivo deste trabalho é apresentar os atributos de centros de pesquisa clínica necessários para melhorar a captação de estudos clínicos patrocinados. Para identificar os fatores considerados determinantes da seleção de centros de pesquisa por patrocinadores e organizações representativas de pesquisa clínica foi desenvolvido um estudo descritivo-exploratório por meio da revisão da literatura através de buscas em bases de dados. As buscas resultaram na seleção de 16 materiais bibliográficos que abordaram a questão seleção de centros de pesquisa. Os fatores considerados mais críticos para a seleção foram disponibilidade de população alvo e capacidade de recrutamento, tempo de start-up e interesse e motivação da equipe do centro. Além disso, a infraestrutura é considerada um pré-requisito que pode inviabilizar a seleção e a qualidade de dados também é muito valorizada. Os custos diretos de execução do ensaio não foram considerados muito importantes, ao contrário dos custos indiretos. A partir do conhecimento dos pré-requisitos e dos fatores determinantes da seleção de um centro para um ensaio clínico multicêntrico patrocinado por companhias farmacêuticas, a Empresa Brasileira de Serviços Hospitalares poderá promover e direcionar os esforços para organizar uma rede de centros de pesquisa que pode ser muito atrativa. / Clinical trials are increasingly occurring on a global scale and sponsored research has been shifting to emerging regions. Conducting these studies brings benefits to research centers, patients, and the country as a whole. However, the allocation of clinical trials by multinational pharmaceutical companies is a complex process determined by multiple factors and the knowledge of what factors pharmaceutical companies value most when allocating clinical trials is scarce. So, better understanding this process is essential for governments and research centers wishing to attract more clinical trials sponsored by multinational pharmaceutical companies. The objective of this work is to present the attributes of clinical research centers necessary to improve the capture of sponsored clinical studies. To identify the factors considered as determinants of the selection of research centers by sponsors and clinical research organizations, a descriptive-exploratory study was developed through the review of the literature through searches in databases. The search resulted in the selection of 16 bibliographic materials that addressed the issue of selection of research centers. The factors considered most critical for center selection were target population availability and recruiting capacity, start-up time, and interest and motivation of the center staff. In addition, infrastructure is considered a prerequisite that can make selection unfeasible and data quality is also highly valued. The direct costs of running the trial were not considered very important, as opposed to indirect costs. From the knowledge of the prerequisites and determinants of the selection of a center for a multi-center clinical trial sponsored by pharmaceutical companies, the Empresa Brasileira de Serviços Hospitalares can promote and direct efforts to organize a network of research centers that can be very attractive.

Os ensaios clínicos ocorrem cada vez mais em uma escala global e as pesquisas patrocinadas vem mudando para as regiões emergentes. A condução desses estudos traz benefícios para centros de pesquisa, pacientes e para o país como um todo. No entanto, a alocação de ensaios clínicos por companhias farmacêuticas multinacionais é um processo complexo determinado por múltiplos fatores e o conhecimento de quais fatores as companhias farmacêuticas valorizam mais ao alocar ensaios clínicos é escasso. Assim, compreender melhor esse processo é essencial para governos e centros de pesquisa que desejam atrair mais ensaios clínicos patrocinados por companhias farmacêuticas multinacionais. O objetivo deste trabalho é apresentar os atributos de centros de pesquisa clínica necessários para melhorar a captação de estudos clínicos patrocinados. Para identificar os fatores considerados determinantes da seleção de centros de pesquisa por patrocinadores e organizações representativas de pesquisa clínica foi desenvolvido um estudo descritivo-exploratório por meio da revisão da literatura através de buscas em bases de dados. As buscas resultaram na seleção de 16 materiais bibliográficos que abordaram a questão seleção de centros de pesquisa. Os fatores considerados mais críticos para a seleção foram disponibilidade de população alvo e capacidade de recrutamento, tempo de start-up e interesse e motivação da equipe do centro. Além disso, a infraestrutura é considerada um pré-requisito que pode inviabilizar a seleção e a qualidade de dados também é muito valorizada. Os custos diretos de execução do ensaio não foram considerados muito importantes, ao contrário dos custos indiretos. A partir do conhecimento dos pré-requisitos e dos fatores determinantes da seleção de um centro para um ensaio clínico multicêntrico patrocinado por companhias farmacêuticas, a Empresa Brasileira de Serviços Hospitalares poderá promover e direcionar os esforços para organizar uma rede de centros de pesquisa que pode ser muito atrativa. / Clinical trials are increasingly occurring on a global scale and sponsored research has been shifting to emerging regions. Conducting these studies brings benefits to research centers, patients, and the country as a whole. However, the allocation of clinical trials by multinational pharmaceutical companies is a complex process determined by multiple factors and the knowledge of what factors pharmaceutical companies value most when allocating clinical trials is scarce. So, better understanding this process is essential for governments and research centers wishing to attract more clinical trials sponsored by multinational pharmaceutical companies. The objective of this work is to present the attributes of clinical research centers necessary to improve the capture of sponsored clinical studies. To identify the factors considered as determinants of the selection of research centers by sponsors and clinical research organizations, a descriptive-exploratory study was developed through the review of the literature through searches in databases. The search resulted in the selection of 16 bibliographic materials that addressed the issue of selection of research centers. The factors considered most critical for center selection were target population availability and recruiting capacity, start-up time, and interest and motivation of the center staff. In addition, infrastructure is considered a prerequisite that can make selection unfeasible and data quality is also highly valued. The direct costs of running the trial were not considered very important, as opposed to indirect costs. From the knowledge of the prerequisites and determinants of the selection of a center for a multi-center clinical trial sponsored by pharmaceutical companies, the Empresa Brasileira de Serviços Hospitalares can promote and direct efforts to organize a network of research centers that can be very attractive.

Objetivos: O objetivo geral desta tese foi estudar o comportamento clínico da cárie dentária em superfícies oclusais de molares permanentes. Ela é composta por três estudos cujos objetivos específicos foram: (1) Avaliar a acurácia e reprodutibilidade de um índice visual para o registro do acúmulo de biofilme em superfícies oclusais; (2) Avaliar o efeito independente do acúmulo de biofilme e do estágio eruptivo na atividade de cárie em superfícies oclusais de molares permanentes; e (3) Comparar as taxas de incidência/progressão de cárie em superfícies oclusais hígidas e lesões cariosas inativas bem como avaliar o risco de progressão de cárie nestas superfícies. Metodologia: Avaliou-se visualmente o acúmulo de biofilme nas superfícies oclusais de 80 molares permanentes de acordo com os escores a seguir: 0 = sem biofilme visível; 1 = biofilme dificilmente detectável nas fossas e fissuras; 2 = biofilme facilmente detectável nas fossas e fissuras; 3 = superfície oclusal parcialmente ou totalmente coberta por biofilme espesso. As avaliações clínicas foram executadas três vezes, sem uso de evidenciador no primeiro e no segundo exames e usando fucsina a 7% na terceira observação. Reprodutibilidade intra-examinador, sensibilidade, especificidade, valores preditivos positivo e negativo e acurácia foram calculados, utilizando o exame com fucsina como o padrão ouro. Estas medidas diagnósticas foram calculadas para cada escore do índice original e para o índice dicotomizado de acordo com a presença de biofilme espesso (0 + 1 versus 2 + 3). Na linha de base, 298 escolares entre 6 e 15 anos tiveram seus molares permanentes examinados com relação ao estágio de erupção (1 = superfície oclusal parcialmente erupcionada; 2 = superfície oclusal totalmente erupcionada e mais da metade da superfície vestibular coberta por tecido gengival; 3 = superfície oclusal totalmente erupcionada e menos da metade da superfície vestibular coberta por tecido gengival; 4 = dente em oclusão funcional), acúmulo e localização de biofilme, conforme o critério descrito anteriormente e presença e localização de lesões cariosas ativas nas superfícies oclusais. Para ser incluído no estudo longitudinal, os escolares deveriam ser classificados como cárie-inativos e apresentar pelo menos um molar permanente hígido e um molar permanente com lesão cariosa inativa (n=258). Após 12 meses, novo exame clínico foi realizado conforme o exame inicial (estágio de erupção, acúmulo de biofilme, presença de cárie ativa). Em ambos os exames, a exata localização das lesões cariosas foram registradas em esquemas das superfícies oclusais a fim de garantir o monitoramento da mesma lesão ao longo do tempo. A análise estatística utilizou equações de estimativas generalizadas com ligação logística tendo em vista a presença de dados aglomerados. Odds ratio (OR) e seus respectivos intervalos de confiança de 95% (IC 95%) foram estimados. As taxas de incidência/progressão de cárie em superfícies oclusais hígidas e lesões cariosas inativas foram comparadas através do teste do qui-quadrado. Resultados: As análises repetidas demonstraram que o índice avaliado é reprodutível (k=0.8). A dicotomização a partir da presença ou ausência de biofilme espesso obteve sensibilidade, especificidade, acurácia e valores preditivos positivo e negativo ≥ 0.95. Foi observada uma associação significativa entre atividade de cárie e estágio eruptivo de molares permanentes. Ajustado para o acúmulo de biofilme, os molares em erupção apresentaram um risco de apresentar lesões cariosas ativas significativamente maior do que os molares em oclusão funcional (estágio eruptivo 1, OR=63,3, IC 95%=22-183,7; estágio eruptivo eruptivo 2, OR=14,9, IC 95%=7,1-31,2; estágio eruptivo 3, OR=4,1, IC 95%=2-8,4). Ajustado para o estágio eruptivo, os dentes com biofilme facilmente detectável foram mais suscetíveis à atividade de cárie do que os dentes sem biofilme visível (grau 2, OR=5,5, IC 95%=2,5-12,3; grau 3, OR=14,5, IC 95%=6,5-32,4). No estudo longitudinal, 200 escolares foram reexaminados após 12 meses (taxa de perda de 22,5%). Foram encontradas pequenas taxas de progressão das lesões cariosas inativas (3,9%) e incidência nas superfícies hígidas (2,6%) ao longo de 12 meses, não tendo sido encontrada diferença entre os grupos (qui-quadrado, p=0,48). Ajustado para o acúmulo de biofilme, estágio eruptivo, tipo de molar e arco, as lesões cariosas inativas apresentaram um risco à progressão similar às superfícies oclusais hígidas (OR=0,98, IC 95%=0,40-2,38). A presença de biofilme facilmente detectável (graus 2 + 3) na superfície oclusal foi o único preditor da incidência e progressão de cárie após 1 ano (OR=2,73, IC 95%=1,01-7,41). Conclusões: Acúmulos de biofilme em superfícies oclusais de molares permanentes podem ser visualmente avaliados de modo acurado e reprodutível. O uso de um corante evidenciador pode não ser necessário. O período de erupção dos molares permanentes pode ser visto como um período de risco para o desenvolvimento de lesões cariosas ativas em crianças e adolescentes. Superfícies oclusais com lesões cariosas inativas não requerem atenção adicional àquela normalmente dispensada às superfícies oclusais hígidas em um período de 12 meses. / Objectives: The general aim of this thesis was to study the clinical behavior of dental caries on the occlusal surfaces of permanent molars. It is composed by three studies whose specific aims were: (1) To assess the accuracy and reproducibility of a simplified, visual index to assess biofilm accumulation on occlusal surfaces ; (2) To estimate the independent effects of biofilm accumulation and eruption stage on the occurrence of active caries lesions on occlusal surfaces of permanent molars; and (3) To compare caries incidence and progression on sound occlusal surfaces and on surfaces presenting inactive enamel lesions as well as to estimate the risk of caries progression on these surfaces. Methods: Biofilm accumulation on occlusal surfaces of 80 permanent molars was visually assessed and scored as follows: (0) no visible biofilm; (1) hardly detectable biofilm, restricted to grooves and fossae; (2) biofilm easily detectable in grooves and fossae; and (3) occlusal surface partially or totally covered with heavy biofilm accumulations. Clinical examinations were performed three times, using no detector dye in the first and second examinations, and using 7% fuchsine in the third examination. Intra-examiner reproducibility, sensitivity, specificity, positive and negative predictive values, and accuracy were calculating using the examination with fuchsine as the gold standard. These diagnostic measures were calculated for each biofilm score and for the dichotomized index according to the presence of thick biofilm (0 + 1 versus 2 + 3). At baseline, 298 6-15-year-old schoolchildren had their permanent molars examined in regards to stage of eruption (1 = the occlusal surface partially erupted; 2 = the occlusal surface fully erupted, but more than half of the tooth facial surface was covered with gingival tissue; 3 = the occlusal surface fully erupted, and less than half of the tooth facial surface was covered with gingival tissue; 4 = full occlusion), occurrence and localization of occlusal plaque as previously described, and occurrence and localization of occlusal caries. To be included in the study, children should present a status of caries-inactive dentition with at least one permanent molar with sound occlusal surface and another permanent molar with inactive occlusal enamel lesion (n=258). After 12 months, clinical examination was repeated according to the baseline examination (stage of eruption, plaque accumulation, and active occlusal caries). In both examinations, the exact localization of occlusal caries was detailed mapped on standardized drawings of the occlusal groove-fossa-system in order to assure that the same lesion would be monitored over time. Statistical analysis was performed using generalized estimating equations with a logistic link function due to the clustering of data. Odds ratio (OR) and their respective 95% confidence intervals (95% CI) were estimated. The proportion of new caries lesions or lesions that progressed on sound occlusal sites and on sites presenting inactive enamel lesions was compared using the Chi-square test. Results: Repeated analysis showed that the index under study is reproducible (k=0.8). It was observed a significant association between stage of eruption and active caries on permanent molars. Adjusted for biofilm accumulation, molars under eruption were at an increased risk for active caries than molars in full occlusion (stage of eruption 1, OR=63.3, IC 95%=22-183.7; stage of eruption 2, OR=14.9, IC 95%=7.1-31.2; stage of eruption 3, OR=4.1, IC 95%=2-8.4). Adjusted for stage of eruption, teeth with easily detectable biofilm were more susceptible to caries activity than those without visible biofilm accumulation (score 2, OR=5.5, 95% CI=2.5-12.3; score 3, OR=14.5, 95% CI=6.5-32.4). At the longitudinal study, 200 schoolchildren were followed (dropout rate of 22.5%). It was observed low rates of lesion progression in inactive enamel lesions (3.9%) and sound surfaces (2.6%), with no difference between them (chi-square test, p=0.48). Adjusted for plaque, stage of eruption, type of molar and dental arch, inactive enamel lesions presented a similar risk for caries progression than sound occlusal surfaces (OR=0.98, 95%CI=0.40-2.38). The presence of easily detectable plaque (scores 2 + 3) on occlusal sites was the only predictor for caries incidence and progression after 1 year (OR=2.73: 95% CI 1.01-7.41). Conclusions: Biofilm accumulation on occlusal surfaces of permanent molars can be visually assessed in an accurate and reproducible way. The use of a detector dye may not be necessary. The stage of eruption of permanent molars can be regarded as a risk period for active caries in children and adolescents. Occlusal surfaces harboring inactive caries lesions do not require additional attention than the one normally given to sound occlusal surfaces over a 12-months period.