In the early 1970s, a trial was conducted in Beagles comparing an irradiated spherule vaccine for Valley Fever against a control vaccine. The results did not show a significant difference between the vaccinated and the control dogs. Reactions to the vaccine were significant.

In the early 1970s, a trial was conducted in Beagles comparing an irradiated spherule vaccine for Valley Fever against a control vaccine. The results did not show a significant difference between the vaccinated and the control dogs. Reactions to the vaccine were significant.

In the early 1970s, a trial was conducted in Beagles comparing an irradiated spherule vaccine for Valley Fever against a control vaccine. The results did not show a significant difference between the vaccinated and the control dogs. Reactions to the vaccine were significant.

In the early 1970s, a trial was conducted in Beagles comparing an irradiated spherule vaccine for Valley Fever against a control vaccine. The results did not show a significant difference between the vaccinated and the control dogs. Reactions to the vaccine were significant.

In the early 1970s, a trial was conducted in Beagles comparing an irradiated spherule vaccine for Valley Fever against a control vaccine. The results did not show a significant difference between the vaccinated and the control dogs. Reactions to the vaccine were significant.

Thesis (Ph. D.)--University of Texas at Austin, 2001. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 96-102). Available also in a digital version from Dissertation Abstracts.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Os fungos dimÃrficos Coccidioides spp. e Histoplasma capsulatum var. capsulatum, sÃo os agentes causadores da coccidioidomicose e da histoplasmose, respectivamente, sendo capazes de acometer o homem e outros animais. A genÃtica das populaÃÃes H. capsulatum var. capsulatum tÃm sido caracterizadas mundialmente. Contudo, para Coccidioides spp. ainda hà escassez de estudos de variabilidade genÃtica, especialmente em isolados do Brasil. De modo geral, a terapia antifÃngica contra essas micoses à efetiva, embora em quadros crÃnicos ou disseminados, o tratamento seja muitas vezes, prolongado e difÃcil de tolerar. Ademais, casos refratÃrios e recidivos jà foram descritos. Recentemente, foi demonstrada a capacidade de H. capsulatum de formar biofilme. Pouco se sabe sobre qual o papel desse mecanismo na patogÃnese da histoplasmose e nenhum relato sobre a sensibilidade à antifÃngicos de H. capsulatum em biofilme, foi descrito atà o momento. Na busca por novos compostos com atividade antifÃngica, o sesquiterpeno farnesol tem se destacado por seu efeito inibitÃrio sobre o crescimento de bactÃrias e fungos. Diante do exposto, este trabalho teve por objetivo realizar a caracterizaÃÃo molecular de isolados brasileiros de C. posadasii, bem como, determinar o efeito in vitro do farnesol ante aos fungos dimÃrficos C. posadasii e H. capsulatum var. capsulatum, avaliando sua atuaÃÃo sobre o crescimento fÃngico, sensibilidade aos antifÃngicos, permeabilidade celular, produÃÃo de ergosterol e sobre o crescimento em biofilme. Para tanto, cepas de C. posadasii foram avaliadas por meio das tÃcnicas de RAPD e M13-fingerprinting. O mÃtodo de macrodiluiÃÃo foi utilizado para determinar a concentraÃÃo inibitÃria mÃnima (CIM) de farnesol isolado em combinaÃÃes com antifÃngicos. C. posadasii tambÃm foi submetido quantificaÃÃo do ergosterol apÃs a exposiÃÃo concentraÃÃes sub-inibitÃrias de farnesol. Ademais, a atividade do farnesol ante C. posadasii tambÃm foi avaliada na presenÃa de estresse osmÃtico, induzido por adiÃÃo de NaCl ao meio de cultura, durante os ensaios de sensibilidade. Por fim, cepas de H. capsulatum foram avaliadas na fase filamentosa e na fase leveduriforme, pelo mÃtodo de microdiluiÃÃo com farnesol isolado e em combinaÃÃo com antifÃngicos. A sensibilidade antifÃngica destas drogas tambÃm foi avaliada ante H. capsulatum sob a forma de biofilme. Os resultados de RAPD e M13-fingerprinting mostraram perfis eletroforÃticos semelhantes, mostrando poucos polimorfismos entres os isolados. O farnesol exibiu valores de CIMs baixos, variando de 0,0078-0,0616 ÂM para C. posadasii e de 0,0078-0,0312 para H. capsulatum. As combinaÃÃes de farnesol com antifÃngicos mostraram efeitos sinÃrgicos (FICI ≤ 0,5) em ambas as espÃcies. A quantificaÃÃo de ergosterol, mostrou que a exposiÃÃo a concentraÃÃes sub-inibitÃrias de farnesol diminuiu a quantidade de ergosterol extraÃdo das cÃlulas fÃngicas e CIMâs mais baixos foram encontrados para o farnesol quando as cepas foram submetidas a estresse osmÃtico, indicando que esse composto atua na membrana fÃngica. As combinaÃÃes de farnesol com itraconazol e com anfotericina B apresentaram as maiores porcentagens de reduÃÃo do crescimento fÃngico em biofilme. Em conclusÃo, o farnesol apresentou resultados promissores como agente antifÃngico ante C. posadasii e H. capsulatum, apresentando tambÃm aÃÃo adjuvante aumentando a sensibilidade aos antifÃngicos in vitro. Ademais, este estudo contribuiu para caracterizaÃÃo do perfil de sensibilidade do biofilme de H. capsulatum in vitro, bem como para caracterizaÃÃo genÃtica dos isolados de C. posadasii do Brasil.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / A coccidioidomicose à uma infecÃÃo sistÃmica, predominantemente pulmonar, causada pelos fungos dimÃrficos Coccidioides immitis e C. posadasii. O Brasil està na relaÃÃo de paÃses com Ãreas endÃmicas da coccidioidomicose (RESTREPO, 2006), circunscritas Ãs zonas do semiÃrido da regiÃo do Nordeste (COX & MAGEE, 2004). Esse cenÃrio leva a uma investigaÃÃo maior para novas estratÃgias inibitÃrias contra Coccidioides posadasii. Baseando-se neste contexto, buscou-se estudar novas estratÃgias, como avaliar a interaÃÃo in vitro dos principais antifÃngicos utilizados no tratamento da coccidioidomicose, analisar o efeito inibitÃrio in vitro de drogas antimicrobianas, como o sulfametoxazol com trimetoprim (SMX/TMP) associado ou nÃo com anfotericina B (AMB), bem como avaliar a interaÃÃo in vitro das drogas antituberculose com drogas antifÃngicas frente a cepas de C. posadasii isoladas no Nordeste brasileiro. O estudo foi conduzido em ensaio de macrodiluiÃÃo, de acordo com o protocolo descrito no documento M-38A, padronizado pelo Clinical Laboratory Standars Institute (CLSI, 2002). A interaÃÃo sinÃrgica das drogas foi avaliada pelo mÃtodo do Checkerboard. Este estudo mostrou que as oito combinaÃÃes entre duas drogas antifÃngicas testadas como anfotericina B com derivados azÃlicos e voriconazol com derivados azÃlicos e caspofungina respectivamente apresentaram efeito inibitÃrio in vitro frente aos isolados de C. posadasii; porÃm apenas uma combinaÃÃo voriconazol com anfotericina B exibiu interaÃÃo sinÃrgica, cuja concentraÃÃo inibitÃria mÃnima (CIM) foi reduzida em 15 vezes, quando se comparou com a CIM da droga testada isoladamente. O SMX/TMP mostrou efeito inibitÃrio in vitro com frente a cepas de C. posadasii, entretanto, houve diminuiÃÃo da CIM da AMB em cerca de 5,85 vezes quando associado à SMX/TMP. Com relaÃÃo Ãs 24 combinaÃÃes entre drogas antifÃngicas com drogas antituberculose testadas todas apresentaram efeito inibitÃrio in vitro frente aos isolados de C. posadasii. Das 24 combinaÃÃes, foram observadas interaÃÃes sinÃrgicas em 16 associaÃÃes, das quais anfotericina B com rifampicina; itraconazol com rifampicina ou etambutol ou pirazinamida; fluconazol com etambutol e voriconazol com etambutol foram reduzidas as CIMs em dez vezes, ao se comparar com a CIMs da droga testada isoladamente. Futuros estudos em modelos animais sÃo necessÃrios para confirmar a utilidade destas combinaÃÃes. Este trabalho à fonte de apoio para novas investigaÃÃes de combinaÃÃes que resultem em interaÃÃes sinÃrgicas, bem como para determinar a correlaÃÃo de resultados in vivo. / The coccidiodomicose is a systemic infection, predominantly lung caused by dimorphic fungi Coccidioides immitis and C. posadasii. Brazil is among the countries with endemic areas of coccidiodomicose, confined to the semiarid areas of Northeast Brazil. This scenario leads to a larger investigation into new strategies for an injunction against C.posadasii. Based on this context, the purpose of this study was to investigate new strategies, to evaluate the in vitro interaction of the major antifungal agents used in the treatment of coccidioidomycosis, analyze the inhibitory effect in vitro antimicrobial drugs, such as sulfamethoxazole and trimethoprim (SMX / TMP ) associated or not with amphotericin B (AMB) and evaluate the in vitro interaction of antituberculosis drugs with antifungal drugs against C. posadasii strains isolated in northeastern Brazil. The study was conducted in test macrodilution according to the protocol described in document M-38A, standardized by the Clinical Laboratory Standars Institute (CLSI, 2002). The synergistic interaction of the drugs was evaluated by the Checkerboard method. This study showed that the eight combinations of two antifungal drugs such as amphotericin B with azole derivatives and voriconazole with derivative azole and caspofungin, respectively showed inhibitory effect in vitro against the isolates of C. posadasii, but only a combination of voriconazole with amphotericin B showed synergistic interaction, whose minimum inhibitory concentration (MIC) was reduced by 15 times when compared with the MIC of the drug tested alone. SMX/TMP had an inhibitory effect in vitro against strains of C. posadasii, however, decreased the MIC of AMB at 5,85 times when associated with SMX / TMP. Regarding the 24 combinations of antifungal drugs with antituberculosis drugs tested showed any inhibitory effect in vitro against the isolates of C. posadasii. Of the 24 combinations, synergistic interactions were observed in 16 associations, of which, amphotericin B with rifampicin, itraconazole or rifampicin with ethambutol or pyrazinamide, ethambutol with fluconazole and voriconazole with ethambutol MICs were reduced ten-fold when compared with the MICs of drugs tested in isolation. Future studies in animal models are needed to confirm the usefulness of these combinations. This work is a source of support for new investigations of combinations that result in synergistic interactions, as well as to determine the correlation of results in vivo.

MELO, Charlline Vládia Silva de. Atividade antifúngica in vitro e mecanismo de ação de análogos químicos da isoniazida frente a Coccidioides posadasii. 2014. 80 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by Eliene Nascimento (elienegvn@hotmail.com) on 2015-03-11T14:16:58Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_cvlmelo.pdf: 1418913 bytes, checksum: 8e7ca0b761e03c5831be6c466907127d (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-03-11T14:19:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_cvlmelo.pdf: 1418913 bytes, checksum: 8e7ca0b761e03c5831be6c466907127d (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-11T14:19:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_cvlmelo.pdf: 1418913 bytes, checksum: 8e7ca0b761e03c5831be6c466907127d (MD5) Previous issue date: 2014 / Coccidioidomicose é uma micose sistêmica que acomete o homem e outros animais domésticos e silvestres, causada pelo fungo dimórfico geofílico Coccidioides posadasii. Nos últimos anos, a melhoria dos métodos de diagnóstico micológico e o aumento da ocorrência de doenças imunossupressoras causaram grande impacto na incidência das micoses profundas e oportunistas no mundo. Apesar da existência de terapias antifúngicas eficazes contra a coccidioidomicose, a busca por novas drogas para o tratamento desta doença se faz necessária. O objetivo desse estudo foi determinar o efeito inibitório, in vitro, e o mecanismo de ação dos análogos químicos da isoniazida, isolados e em combinação com os antifúngicos anfotericina B (AMB) e itraconazol (ITC), frente a cepas de Coccidioides posadasii (n=12). Para isso 12 cepas de C.posadasii, foram repicadas em ágar dextrose batata e utilizadas na realização dos testes de sensibilidade frente ao agente antituberculose isoniazida (INH) e seus análogos químicos. Os ensaios foram conduzidos por meio do teste de macrodiluição em caldo ou definição da concentração inibitória mínima (CIM) e o sinergismo foi avaliado pelo método do tabuleiro. Os análogos químicos inibiram o crescimento de todas as cepas de C. posadasii testadas isoladamente, com valores de CIM para cada composto que variaram de 100 a 400 µg/mL, para os análogos P3-[N’-(1- (4-methoxifeniletilideno) isonicotinohidrazida] P5- [N’- (1-m-tolileilidene) isonicotinohidrazida] e P6- [N’-(1-(4-metilfenil) etilideno) isonicotinohidrazida], de 25 a 100 µg/mL para a PACT- N’- (1-feniletilideno) isonicotinohidrazida e de 0,0625 a 0,125 µg/mL para AMB e 0,125 a 0,5 µg/mL para ITC. Quanto a combinação entre as drogas antifúngicas e os análogos químicos da droga isoniazida, todos foram capazes de inibir o crescimento in vitro das cepas de C. posadasii. Sinergismo foi detectado em 8 combinações não sendo observado nenhum antagonismo em nenhuma delas. Os análogos da isoniazida apresentaram valores de CIM de 2, 4, 8, 16, 32 vezes superior à atividade da droga antituberculose padrão. A extração dos esteróis e a permeabilidade da membrana fúngica foram averiguadas, respectivamente, por saponificação com aquecimento e por meio da leitura do sobrenadante da suspensão fúngica em comprimento de onda de 260 e 280 nm. Todos os compostos inibiram o crescimento in vitro das cepas de C. posadasii. Foi observado que os análogos da isoniazida isolados e em combinação com antifúngicos foram capazes de causar redução do teor de ergosterol celular; apenas os análogos P3 e P6 foram capazes de alterar a permeabilidade da membrana plasmática nas condições testadas. Em conclusão, os resultados mostram que os análogos derivados da isoniazida possuem atividade inibitória frente a C. posadasii

Coccidioidomicose consiste em enfermidade causada pelos fungos dimÃrficos do gÃnero Coccidioides â C. immitis e C. posadasii â que acomete o homem e diversos animais como bovinos, ovinos, roedores e cÃes. Restrita ao continente americano, casos da doenÃa vem ocorrendo no Estado do Cearà desde 1995. A infecÃÃo ocorre geralmente por contato inalatÃrio com as estruturas infectantes do fungo presentes no ambiente, os artroconÃdeos. Em sua fase parasitÃria, os microrganismos se apresentam sob a forma de esfÃrulas responsÃveis pelas manifestaÃÃes clÃnicas da doenÃa. A maioria dos casos cursa de forma assintomÃtica, sendo os quadros respiratÃrios os mais comuns em pacientes clinicamente enfermos. O diagnÃstico da doenÃa se baseia em tÃcnicas microbiolÃgicas como pesquisa direta e cultura, porÃm estes procedimentos demandam estrutura especializada â nÃvel de biosseguranÃa III -por tratar-se de microrganismo de classe biolÃgica 3. Abordagem imunolÃgica mostra-se promissora por prescindir da manipulaÃÃo fÃngica e ser exeqÃÃvel em diversos laboratÃrios de rotina micolÃgica. Neste trabalho, objetivou-se traÃar perfil clÃnicolaboratorial dos casos de coccidioidomicose ocorridos no Estado do Cearà entre os anos de 1995 e 2007, alÃm de obter fraÃÃes antigÃnicas a partir do fracionamento de AntÃgeno total de C. posadasii empregÃveis como imunodiagnÃstico da doenÃa. Foram catalogados 19 casos da doenÃa no perÃodo em estudo. Todos os pacientes eram homens jovens com manifestaÃÃes respiratÃrias, com exceÃÃo de um caso. O hÃbito recreativo de caÃar tatus foi relatado por 18 pacientes. A abordagem laboratorial destes casos consistiu em estudo microbiolÃgico, associado a tÃcnicas moleculares, imunolÃgicas, histopatolÃgicas ou de experimentaÃÃo animal. O fracionamento protÃico do AntÃgeno total de C. posadasii originou trÃs fraÃÃes antigÃnicas com teor protÃico distinto, perfil eletroforÃtico diferenciado e imunorreatividade pela tÃcnica de Western blotting. A fraÃÃo 60-90% revelou banda imunorreagente de aproximadamente 30 a 40 KDa reconhecida por soros de coccidioidomicose, porÃm apresentando reatividade cruzada com alguns soros de paciente com histoplasmose. Esta banda protÃica, em estudos posteriores, poderà ser caracterizada e purificada com potencial utilizaÃÃo como ferramenta para o imunodiagnÃstico da doenÃa. / Coccidiodomycosis is a disease caused by dimorphic fungi of the Coccidioides genus â C. immitis and C. posadasii â which afflicts people and various animals, such as cattle, goats, rodents and dogs. It is restricted to the Americas and cases have been reported in the state of Cearà only since 1995. The infection generally results from inhaling the infectious structures arthroconidia -of the fungus. In its parasitic phase, the microorganisms responsible for the clinical signs of the disease have a spherical shape. Most cases are asymptomatic, and respiratory problems are the most common symptoms in patients that are clinically affected. The diseaseâs diagnosis is based on microbiological techniques such as direct examination of clinical specimens and culturing, but these procedures require specialized biosecurity level 3 facilities because the microorganism falls in biological class 3. The immunological approach appears promising because it does not require manipulation of the fungi and can be performed in various laboratories equipped for routine mycological tests. The aim of this work is to outline the clinical and laboratory profile of the cases of coccidiodomycosis that occurred in the state of Cearà between 1995 and 2007 and to report experiments to obtain antigenic fractions from fractioning AntÃgeno total of C. posadasii, as a possible means for immunodiagnosis of the disease. A total of 19 cases of the disease were cataloged in the study period. All the patients were young men with respiratory symptoms, except for one case. All but one of the patients reported they engaged in recreational hunting of armadillos. The laboratory approach in these cases consisted of microbiological examination combined with molecular, immunological, histopathological techniques or animal experiments. The protein fractioning of AntÃgeno total of C. posadasii produced three antigenic fractions with different protein content, electrophoretic profile and immunoreactivity according to the Western blotting technique. The 60-90% fraction showed an immunoreactive band of approximately 30 to 40 KDa, recognizable by sera from patients with coccidiodomycosis, but showed crossreactivity with some sera from patient with histoplasmosis. This protein band, in subsequent studies, can be characterized and purified for potential use as a tool for immunodiagnosis of the disease.