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Coccidioidomicose no estado do Ceará : caracterização protéica, descrição de microepidemia, virulência in vivo e potencial imunoprotetor de antígeno isolado de Coccidioides posadasii / Coccidioidomycosis in Ceará : protein description, description ofoutbreak, virulence in vivo and potential for isolated antigen imunoprotetor Coccidioides posadasii

Moreira Filho, Renato Evando January 2012 (has links)
MOREIRA FILHO, Renato Evando. Coccidioidomicose no Estado do Ceará : caracterização protéica, descrição de microepidemia, virulência in vitro e potencial imunoprotetor de antígeno isolado de Coccidioides posadasii. 2012. 120 f. Tese (Doutorado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-07-03T12:10:23Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_remoreira filho.pdf: 2491729 bytes, checksum: 8762d6066fd649edcf1e81678a3329ae (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-07-04T16:14:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_remoreira filho.pdf: 2491729 bytes, checksum: 8762d6066fd649edcf1e81678a3329ae (MD5) / Made available in DSpace on 2013-07-04T16:14:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_remoreira filho.pdf: 2491729 bytes, checksum: 8762d6066fd649edcf1e81678a3329ae (MD5) Previous issue date: 2012 / Scientific researches seeking to use Coccidioides posadasii antigens are common in the literature, as relevant instruments to diagnosis and possible immunoprotector effect in humans. Thus, we performed biochemical characterization of protein antigen derived from C. posadasii, an active search for human cases of coccidioidomycosis in Ceará, as well as evaluation of immune response in vivo. To achieve these goals, the biochemical characterization of the antigen was performed by electrophoresis (SDS-PAGE and 2D-PAGE), detection of proteases, glycoproteins and N-terminal sequencing and we reported three human cases of coccidiodiomycosis in armadillo hunters with its clinical description and laboratory evaluation. Further, a murine model was described testing a possible imunoprotector effect with an in-house antigen. For biochemical analysis, it was observed delimitation bands in ranges 45-67 kDa and 67-97 kDa (SDS-PAGE), detection of glycoproteins, proteases and N-terminal sequencing demonstrating the bands being a β-glucosidase and a glutamine synthetase. In clinical cases, it was found pneumonic disease, direct mycological examination, sputum culture, double radial immunodiffusion (antigen in-house) and PCR positive for C. posadasii. In the murine model, the infected group, in the presence of antigen and adjuvant, showed, histologically, lung disorders smaller than the other groups, and increased splenic lymphoid stimulus. Regarding the cytokines (IL-6, IL-12 and TNF), there was no significant difference between groups, but a trend toward immunoprotective response. The infected group, without immunoprotection, showed greater weight loss. In the macroscopic analysis, the maximum commitment was the presence of 2 granulomas in the latter group. In the analysis of blood counts, the white run showed major differences between groups. In conclusion, the in-house antigen showed that it was a β-glucosidase and a glutamine synthetase which tended to stimulate cellular immunity in a murine model. Moreover, the description of human cases contributes to the spread of early diagnosis of coccidioidomycosis and requires additional laboratory investigations. / Pesquisas científicas buscando a utilização de antígenos de Coccidioides posadasii são comuns na literatura especializada, uma vez que, são instrumentos relevantes para diagnóstico e possível efeito imunoprotetor em humanos. Diante do exposto, foi realizada caracterização bioquímica de antígeno protéico oriundo de C. posadasii. busca ativa de casos humanos de coccidioidomicose no Estado do Ceará, bem como, avaliação da resposta imunológica in vivo. Para concretizar tais objetivos, a caracterização bioquímica do antígeno foi realizada por meio de eletroforese (SDS-PAGE e 2D-PAGE), detecção de proteases, glicoproteínas e sequenciamento N-terminal e foram buscados, ativamente, quadros de coccidiodiomicose em três caçadores de tatu com a respectiva descrição clínica e avaliação laboratorial. Ademais, foi descrito modelo murino de coccidioidomicose com testagem de possível efeito imunoprotetor do antígeno in-house. Quanto a análise bioquímica, observou-se delimitação de bandas nas faixas de 45-67 kDa e 67-97 kDa (SDS-PAGE), detecção de glicoproteínas, proteases e sequenciamento N-terminal demonstrando serem as bandas uma β-glucosidase e uma glutamina sintetase. Nos casos clínicos, foram encontrados queixas pneumônicas, exame micológico direto, cultivo de escarro, imunodifusão radial dupla (com antígeno in-house) e PCR positivos para C. posadasii. No modelo murino, o grupo infectado, na presença de antígeno e adjuvante, apresentou, na análise histopatológica, menores alterações pulmonares que os demais grupos, além de maior estímulo linfóide esplênico. No que concerne a dosagem de citocinas (IL-6, IL-12 e TNFα), não se observou diferença significativa entre os grupos, mas uma tendência à resposta imunoprotetora. O grupo infectado, sem imunoproteção, apresentou maior perda ponderal. Na análise macroscópica, o máximo comprometimento foi a presença de 2 granulomas, neste último grupo. Na análise dos hemogramas, a série branca demonstrou maiores diferenças entre os grupos. Em conclusão, o antígeno in-house se mostrou tratar-se de uma β-glicosidase e uma glutamina sintetase que tenderam a estimular a imunidade celular em modelo murino. Além disso, a descrição de casos humanos contribui para a difusão do diagnóstico precoce da coccidioidomicose e requer investigações laboratoriais complementares.
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EstratÃgias para o conhecimento da coccidioidomicose: uma doenÃa emergente no Nordeste brasileiro / Strategies for the knowledge of coccidioidomicose - an emergent illness in the Brazilian Northeast

Rossana de Aguiar Cordeiro 06 October 2006 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A coccidioidomicose à uma infecÃÃo sistÃmica causada pelos fungos dimÃrficos Coccidioides immitis e C. posadasii. A doenÃa acomete o homem e uma grande variedade de animais, sendo endÃmica no Estado do CearÃ, onde à causada pela espÃcie C. posadasii. O presente estudo buscou analisar as caracterÃsticas fenotÃpicas de C. posadasii e desenvolver mÃtodos independentes de cultivo para o diagnÃstico laboratorial da coccidioidomicose. O estudo fenotÃpico de 10 cepas (7 isolados clÃnicos e 3 isolados ambientais) foi conduzido por anÃlises macro e micromorfolÃgica, anÃlise da cinÃtica de crescimento frente a estresse salino, tÃrmico e de pH; testes de assimilaÃÃo de fontes de carbono e nitrogÃnio e determinaÃÃo do perfil de sensibilidade frente a antimicrobianos. Adicionalmente, foram avaliados mÃtodos de extraÃÃo de antÃgenos de cepas locais de C. posadasii e amplificaÃÃo de seqÃÃncias genÃticas exclusivas do fungo em escarro. Foram observadas trÃs variaÃÃes morfolÃgicas das cepas de C. posadasii cultivadas em Ãgar batata, Ãgar Sabouraud dextrose a 2% e Ãgar YEG. Com relaÃÃo a micromorfologia, foi detectado que a quantificaÃÃo de artroconÃdios estava relacionada à idade e a morfologia das colÃnias. A avaliaÃÃo da cinÃtica de crescimento das cepas, in vitro, revelou que as cepas de C. posadasii sÃo inibidas por elevada concentraÃÃo salina e temperaturas acima de 40 C, mas nÃo sofrem influÃncia quanto à variaÃÃo de pH do meio. A anÃlise nutricional demonstrou que vÃrios compostos, inclusive os Ãons oxidados nitrito e nitrato, podem ser utilizados como fontes de carbono e/ou nitrogÃnio. Todas as cepas de C. posadasii foram sensÃveis Ãs drogas antifÃngicas anfotericina B, caspofungina e aos derivados azÃlicos cetononazol, itraconazol, fluconazol e voriconazol. Foi observado que, a exceÃÃo da pirazinamida, todos as demais drogas antituberculose alteraram o crescimento das cepas de C. posadasii in vitro. CombinaÃÃes formadas pelos quimioterÃpicos antituberculose tambÃm mostraram efeito inibitÃrio sobre o crescimento das cepas. Os protocolos experimentais culminaram com uma preparaÃÃo antigÃnica estÃvel e imunoreativa, adequada para utilizaÃÃo em testes sorolÃgicos presuntivos para diagnÃstico da coccidioidomicose. A identificaÃÃo molecular de C. posadasii foi realizada, com sucesso, a partir da amplificaÃÃo da seqÃÃncia do gene pra diretamente de culturas filamentosas e escarro contendo estruturas parasitÃrias do fungo. Acredita-se que as caracterÃsticas fenotÃpicas descritas para as cepas de C. posadasii poderÃo auxiliar estudos futuros que objetivem a individualizaÃÃo biolÃgica das espÃcies C. immitis e C. posadasii. Os resultados desse estudo contribuÃram para o estabelecimento de estratÃgias para o maior conhecimento da coccidioidomicose no Brasil / Coccidiodomycosis is a systemic infection caused by the dimorphic fungi species Coccidioides immitis and C. posadasii. The disease affects both humans and animals, and is considered endemic in the semiarid areas of Cearà State (Northeast Brazil), where it is caused by C. posadasii. The aims of this study were to analyse the phenotypical characteristics of C. posadasii and to develop culture independent methods for improving of the laboratorial diagnosis of coccidioidomycosis. The phenotypical study was conducted with 10 strains (7 from clinical and 3 from ambiental sources) by macro and micromorphology analyses; in vitro growth under different conditions of salinity, temperature and pH; nutritional analysis and antimicrobial susceptibility tests. In addition, methods of antigens extraction and amplification of C. posadasii DNA directly in sputum were also tested. The mycological analysis showed three morphological variations of C. posadasii strains cultivated in potato agar, Sabouraud agar and YEG agar. Regarding to micromorphology, it was observed that arthroconidia counts were related to colony aging and texture. Growth rates of C. posadasii strains were inhibited by high salt concentrations, temperatures above 40 C, but were not affected by the range of pH. Nutritional analyses showed that several compounds, including the oxidized ions, nitrite and nitrate, were efficiently metabolized by C. posadasii strains as carbon and/ or nitrogen sources. The antifungal susceptibility analysis showed that all of the strains of C. posadasii were sensitive to amphotericin B, caspofungin and the azoles ketoconazole, itraconazole, fluconazole, and voriconazole. With the exception of pyrazinamide, all of the tested drugs interfered with the in vitro growth of C. posadasii. Combined antituberculosis drugs also inhibit fungal growth in vitro. Experimental protocols produced a stable and immunoreactive antigen, suitable in presumptive serologic tests for the diagnosis of coccidioidomycosis. Molecular identification of C. posadasii was achieved by PCR amplification of the specific pra gene directly from filamentous cultures and sputum with fungal parasitic structures. The data obtained by phenotypical analyses may be useful in future studies for biological distinction of C. immitis and C. posadasii species. The results of this study provided approaches for a better understanding of coccidioidomycosis in Brazil
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Estratégias para o conhecimento da coccidioidomicose : uma doença emergente no Nordeste brasileiro / Strategies for the knowledge of coccidioidomicose - an emergent illness in the Brazilian Northeast

Cordeiro, Rossana de Aguiar January 2006 (has links)
CORDEIRO, Rossana de Aguiar. Estratégias para o conhecimento da coccidioidomicose : uma doença emergente no nordeste brasileiro. 2006. 109 f. Tese (Doutorado) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Fortaleza, 2006 / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-10-06T15:52:40Z No. of bitstreams: 1 2006_tese_racordeiro.pdf: 1752948 bytes, checksum: b5e5aa361d6e54b745c5d53d311964db (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-10-07T16:39:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_tese_racordeiro.pdf: 1752948 bytes, checksum: b5e5aa361d6e54b745c5d53d311964db (MD5) / Made available in DSpace on 2011-10-07T16:39:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_tese_racordeiro.pdf: 1752948 bytes, checksum: b5e5aa361d6e54b745c5d53d311964db (MD5) Previous issue date: 2006 / Coccidiodomycosis is a systemic infection caused by the dimorphic fungi species Coccidioides immitis and C. posadasii. The disease affects both humans and animals, and is considered endemic in the semiarid areas of Ceará State (Northeast Brazil), where it is caused by C. posadasii. The aims of this study were to analyse the phenotypical characteristics of C. posadasii and to develop culture independent methods for improving of the laboratorial diagnosis of coccidioidomycosis. The phenotypical study was conducted with 10 strains (7 from clinical and 3 from ambiental sources) by macro and micromorphology analyses; in vitro growth under different conditions of salinity, temperature and pH; nutritional analysis and antimicrobial susceptibility tests. In addition, methods of antigens extraction and amplification of C. posadasii DNA directly in sputum were also tested. The mycological analysis showed three morphological variations of C. posadasii strains cultivated in potato agar, Sabouraud agar and YEG agar. Regarding to micromorphology, it was observed that arthroconidia counts were related to colony aging and texture. Growth rates of C. posadasii strains were inhibited by high salt concentrations, temperatures above 40° C, but were not affected by the range of pH. Nutritional analyses showed that several compounds, including the oxidized ions, nitrite and nitrate, were efficiently metabolized by C. posadasii strains as carbon and/ or nitrogen sources. The antifungal susceptibility analysis showed that all of the strains of C. posadasii were sensitive to amphotericin B, caspofungin and the azoles ketoconazole, itraconazole, fluconazole, and voriconazole. With the exception of pyrazinamide, all of the tested drugs interfered with the in vitro growth of C. posadasii. Combined antituberculosis drugs also inhibit fungal growth in vitro. Experimental protocols produced a stable and immunoreactive antigen, suitable in presumptive serologic tests for the diagnosis of coccidioidomycosis. Molecular identification of C. posadasii was achieved by PCR amplification of the specific pra gene directly from filamentous cultures and sputum with fungal parasitic structures. The data obtained by phenotypical analyses may be useful in future studies for biological distinction of C. immitis and C. posadasii species. The results of this study provided approaches for a better understanding of coccidioidomycosis in Brazil / A coccidioidomicose é uma infecção sistêmica causada pelos fungos dimórficos Coccidioides immitis e C. posadasii. A doença acomete o homem e uma grande variedade de animais, sendo endêmica no Estado do Ceará, onde é causada pela espécie C. posadasii. O presente estudo buscou analisar as características fenotípicas de C. posadasii e desenvolver métodos independentes de cultivo para o diagnóstico laboratorial da coccidioidomicose. O estudo fenotípico de 10 cepas (7 isolados clínicos e 3 isolados ambientais) foi conduzido por análises macro e micromorfológica, análise da cinética de crescimento frente a estresse salino, térmico e de pH; testes de assimilação de fontes de carbono e nitrogênio e determinação do perfil de sensibilidade frente a antimicrobianos. Adicionalmente, foram avaliados métodos de extração de antígenos de cepas locais de C. posadasii e amplificação de seqüências genéticas exclusivas do fungo em escarro. Foram observadas três variações morfológicas das cepas de C. posadasii cultivadas em ágar batata, ágar Sabouraud dextrose a 2% e ágar YEG. Com relação a micromorfologia, foi detectado que a quantificação de artroconídios estava relacionada à idade e a morfologia das colônias. A avaliação da cinética de crescimento das cepas, in vitro, revelou que as cepas de C. posadasii são inibidas por elevada concentração salina e temperaturas acima de 40 C, mas não sofrem influência quanto à variação de pH do meio. A análise nutricional demonstrou que vários compostos, inclusive os íons oxidados nitrito e nitrato, podem ser utilizados como fontes de carbono e/ou nitrogênio. Todas as cepas de C. posadasii foram sensíveis às drogas antifúngicas anfotericina B, caspofungina e aos derivados azólicos cetononazol, itraconazol, fluconazol e voriconazol. Foi observado que, a exceção da pirazinamida, todos as demais drogas antituberculose alteraram o crescimento das cepas de C. posadasii in vitro. Combinações formadas pelos quimioterápicos antituberculose também mostraram efeito inibitório sobre o crescimento das cepas. Os protocolos experimentais culminaram com uma preparação antigênica estável e imunoreativa, adequada para utilização em testes sorológicos presuntivos para diagnóstico da coccidioidomicose. A identificação molecular de C. posadasii foi realizada, com sucesso, a partir da amplificação da seqüência do gene pra diretamente de culturas filamentosas e escarro contendo estruturas parasitárias do fungo. Acredita-se que as características fenotípicas descritas para as cepas de C. posadasii poderão auxiliar estudos futuros que objetivem a individualização biológica das espécies C. immitis e C. posadasii. Os resultados desse estudo contribuíram para o estabelecimento de estratégias para o maior conhecimento da coccidioidomicose no Brasil
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Perfil de sensibilidade de cepas de Coccidioides posadasii a associação de drogas antimicrobianas / The coccidiodomicose is a systemic infection, predominantly lung caused by dimorphic fungi Coccidioides immitis and C. posadasii.

Medrano, Délia Jéssica Astete January 2010 (has links)
MEDRANO, Delia Jessica Astete. Perfil de sensibilidade de cepas de Coccidioides posadasii a associação de drogas antimicrobianas. Fortaleza,2010. 146 f. Tese (Doutorado) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-10-05T15:37:12Z No. of bitstreams: 1 2010_tese_djamedrano.pdf: 3128064 bytes, checksum: 0f3a21eec28eb85ca0c5d157d3bdc8aa (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-10-07T16:22:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_tese_djamedrano.pdf: 3128064 bytes, checksum: 0f3a21eec28eb85ca0c5d157d3bdc8aa (MD5) / Made available in DSpace on 2011-10-07T16:22:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_tese_djamedrano.pdf: 3128064 bytes, checksum: 0f3a21eec28eb85ca0c5d157d3bdc8aa (MD5) Previous issue date: 2010 / The coccidiodomicose is a systemic infection, predominantly lung caused by dimorphic fungi Coccidioides immitis and C. posadasii. Brazil is among the countries with endemic areas of coccidiodomicose, confined to the semiarid areas of Northeast Brazil. This scenario leads to a larger investigation into new strategies for an injunction against C.posadasii. Based on this context, the purpose of this study was to investigate new strategies, to evaluate the in vitro interaction of the major antifungal agents used in the treatment of coccidioidomycosis, analyze the inhibitory effect in vitro antimicrobial drugs, such as sulfamethoxazole and trimethoprim (SMX / TMP ) associated or not with amphotericin B (AMB) and evaluate the in vitro interaction of antituberculosis drugs with antifungal drugs against C. posadasii strains isolated in northeastern Brazil. The study was conducted in test macrodilution according to the protocol described in document M-38A, standardized by the Clinical Laboratory Standars Institute (CLSI, 2002). The synergistic interaction of the drugs was evaluated by the Checkerboard method. This study showed that the eight combinations of two antifungal drugs such as amphotericin B with azole derivatives and voriconazole with derivative azole and caspofungin, respectively showed inhibitory effect in vitro against the isolates of C. posadasii, but only a combination of voriconazole with amphotericin B showed synergistic interaction, whose minimum inhibitory concentration (MIC) was reduced by 15 times when compared with the MIC of the drug tested alone. SMX/TMP had an inhibitory effect in vitro against strains of C. posadasii, however, decreased the MIC of AMB at 5,85 times when associated with SMX / TMP. Regarding the 24 combinations of antifungal drugs with antituberculosis drugs tested showed any inhibitory effect in vitro against the isolates of C. posadasii. Of the 24 combinations, synergistic interactions were observed in 16 associations, of which, amphotericin B with rifampicin, itraconazole or rifampicin with ethambutol or pyrazinamide, ethambutol with fluconazole and voriconazole with ethambutol MICs were reduced ten-fold when compared with the MICs of drugs tested in isolation. Future studies in animal models are needed to confirm the usefulness of these combinations. This work is a source of support for new investigations of combinations that result in synergistic interactions, as well as to determine the correlation of results in vivo. / A coccidioidomicose é uma infecção sistêmica, predominantemente pulmonar, causada pelos fungos dimórficos Coccidioides immitis e C. posadasii. O Brasil está na relação de países com áreas endêmicas da coccidioidomicose (RESTREPO, 2006), circunscritas às zonas do semiárido da região do Nordeste (COX & MAGEE, 2004). Esse cenário leva a uma investigação maior para novas estratégias inibitórias contra Coccidioides posadasii. Baseando-se neste contexto, buscou-se estudar novas estratégias, como avaliar a interação in vitro dos principais antifúngicos utilizados no tratamento da coccidioidomicose, analisar o efeito inibitório in vitro de drogas antimicrobianas, como o sulfametoxazol com trimetoprim (SMX/TMP) associado ou não com anfotericina B (AMB), bem como avaliar a interação in vitro das drogas antituberculose com drogas antifúngicas frente a cepas de C. posadasii isoladas no Nordeste brasileiro. O estudo foi conduzido em ensaio de macrodiluição, de acordo com o protocolo descrito no documento M-38A, padronizado pelo Clinical Laboratory Standars Institute (CLSI, 2002). A interação sinérgica das drogas foi avaliada pelo método do Checkerboard. Este estudo mostrou que as oito combinações entre duas drogas antifúngicas testadas como anfotericina B com derivados azólicos e voriconazol com derivados azólicos e caspofungina respectivamente apresentaram efeito inibitório in vitro frente aos isolados de C. posadasii; porém apenas uma combinação voriconazol com anfotericina B exibiu interação sinérgica, cuja concentração inibitória mínima (CIM) foi reduzida em 15 vezes, quando se comparou com a CIM da droga testada isoladamente. O SMX/TMP mostrou efeito inibitório in vitro com frente a cepas de C. posadasii, entretanto, houve diminuição da CIM da AMB em cerca de 5,85 vezes quando associado à SMX/TMP. Com relação às 24 combinações entre drogas antifúngicas com drogas antituberculose testadas todas apresentaram efeito inibitório in vitro frente aos isolados de C. posadasii. Das 24 combinações, foram observadas interações sinérgicas em 16 associações, das quais anfotericina B com rifampicina; itraconazol com rifampicina ou etambutol ou pirazinamida; fluconazol com etambutol e voriconazol com etambutol foram reduzidas as CIMs em dez vezes, ao se comparar com a CIMs da droga testada isoladamente. Futuros estudos em modelos animais são necessários para confirmar a utilidade destas combinações. Este trabalho é fonte de apoio para novas investigações de combinações que resultem em interações sinérgicas, bem como para determinar a correlação de resultados in vivo.
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Coccidioidomicose no estado de Ceará (1995-2007) : características clínico-laboratoriais e análise das frações protéicas do antígeno total de Coccidioides posadasii no imunodiagnóstico / Coccidioidomycosis State of Ceará (1995 - 2007) : characteristics clinical laboratory and analysis of protein fractions of antigen total Coccidioides posadasii in the immunodiagnosis

Bandeira, Silviane Praciano January 2008 (has links)
BANDEIRA,Silviane Praciano. Coccidioidomicose no estado de Ceará (1995-2007) : características clínico-laboratoriais e análise das frações protéicas do antígeno total de Coccidioides posadasii no imunodiagnóstico. 2008. 99 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-01-05T16:27:26Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_spbandeira.pdf: 16064378 bytes, checksum: 09bcd7b6cc31ba256a9179dec2fc8d76 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T14:19:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_spbandeira.pdf: 16064378 bytes, checksum: 09bcd7b6cc31ba256a9179dec2fc8d76 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T14:19:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_spbandeira.pdf: 16064378 bytes, checksum: 09bcd7b6cc31ba256a9179dec2fc8d76 (MD5) Previous issue date: 2008 / Coccidiodomycosis is a disease caused by dimorphic fungi of the Coccidioides genus – C. immitis and C. posadasii – which afflicts people and various animals, such as cattle, goats, rodents and dogs. It is restricted to the Americas and cases have been reported in the state of Ceará only since 1995. The infection generally results from inhaling the infectious structures arthroconidia -of the fungus. In its parasitic phase, the microorganisms responsible for the clinical signs of the disease have a spherical shape. Most cases are asymptomatic, and respiratory problems are the most common symptoms in patients that are clinically affected. The disease’s diagnosis is based on microbiological techniques such as direct examination of clinical specimens and culturing, but these procedures require specialized biosecurity level 3 facilities because the microorganism falls in biological class 3. The immunological approach appears promising because it does not require manipulation of the fungi and can be performed in various laboratories equipped for routine mycological tests. The aim of this work is to outline the clinical and laboratory profile of the cases of coccidiodomycosis that occurred in the state of Ceará between 1995 and 2007 and to report experiments to obtain antigenic fractions from fractioning Antígeno total of C. posadasii, as a possible means for immunodiagnosis of the disease. A total of 19 cases of the disease were cataloged in the study period. All the patients were young men with respiratory symptoms, except for one case. All but one of the patients reported they engaged in recreational hunting of armadillos. The laboratory approach in these cases consisted of microbiological examination combined with molecular, immunological, histopathological techniques or animal experiments. The protein fractioning of Antígeno total of C. posadasii produced three antigenic fractions with different protein content, electrophoretic profile and immunoreactivity according to the Western blotting technique. The 60-90% fraction showed an immunoreactive band of approximately 30 to 40 KDa, recognizable by sera from patients with coccidiodomycosis, but showed crossreactivity with some sera from patient with histoplasmosis. This protein band, in subsequent studies, can be characterized and purified for potential use as a tool for immunodiagnosis of the disease. / Coccidioidomicose consiste em enfermidade causada pelos fungos dimórficos do gênero Coccidioides – C. immitis e C. posadasii – que acomete o homem e diversos animais como bovinos, ovinos, roedores e cães. Restrita ao continente americano, casos da doença vem ocorrendo no Estado do Ceará desde 1995. A infecção ocorre geralmente por contato inalatório com as estruturas infectantes do fungo presentes no ambiente, os artroconídeos. Em sua fase parasitária, os microrganismos se apresentam sob a forma de esférulas responsáveis pelas manifestações clínicas da doença. A maioria dos casos cursa de forma assintomática, sendo os quadros respiratórios os mais comuns em pacientes clinicamente enfermos. O diagnóstico da doença se baseia em técnicas microbiológicas como pesquisa direta e cultura, porém estes procedimentos demandam estrutura especializada – nível de biossegurança III -por tratar-se de microrganismo de classe biológica 3. Abordagem imunológica mostra-se promissora por prescindir da manipulação fúngica e ser exeqüível em diversos laboratórios de rotina micológica. Neste trabalho, objetivou-se traçar perfil clínicolaboratorial dos casos de coccidioidomicose ocorridos no Estado do Ceará entre os anos de 1995 e 2007, além de obter frações antigênicas a partir do fracionamento de Antígeno total de C. posadasii empregáveis como imunodiagnóstico da doença. Foram catalogados 19 casos da doença no período em estudo. Todos os pacientes eram homens jovens com manifestações respiratórias, com exceção de um caso. O hábito recreativo de caçar tatus foi relatado por 18 pacientes. A abordagem laboratorial destes casos consistiu em estudo microbiológico, associado a técnicas moleculares, imunológicas, histopatológicas ou de experimentação animal. O fracionamento protéico do Antígeno total de C. posadasii originou três frações antigênicas com teor protéico distinto, perfil eletroforético diferenciado e imunorreatividade pela técnica de Western blotting. A fração 60-90% revelou banda imunorreagente de aproximadamente 30 a 40 KDa reconhecida por soros de coccidioidomicose, porém apresentando reatividade cruzada com alguns soros de paciente com histoplasmose. Esta banda protéica, em estudos posteriores, poderá ser caracterizada e purificada com potencial utilização como ferramenta para o imunodiagnóstico da doença.
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Perfil de sensibilidade de cepas de Coccidioides posadasii a associaÃÃo de drogas antimicrobianas / The coccidiodomicose is a systemic infection, predominantly lung caused by dimorphic fungi Coccidioides immitis and C. posadasii.

DÃlia JÃssica Astete Medrano 10 September 2010 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / A coccidioidomicose à uma infecÃÃo sistÃmica, predominantemente pulmonar, causada pelos fungos dimÃrficos Coccidioides immitis e C. posadasii. O Brasil està na relaÃÃo de paÃses com Ãreas endÃmicas da coccidioidomicose (RESTREPO, 2006), circunscritas Ãs zonas do semiÃrido da regiÃo do Nordeste (COX & MAGEE, 2004). Esse cenÃrio leva a uma investigaÃÃo maior para novas estratÃgias inibitÃrias contra Coccidioides posadasii. Baseando-se neste contexto, buscou-se estudar novas estratÃgias, como avaliar a interaÃÃo in vitro dos principais antifÃngicos utilizados no tratamento da coccidioidomicose, analisar o efeito inibitÃrio in vitro de drogas antimicrobianas, como o sulfametoxazol com trimetoprim (SMX/TMP) associado ou nÃo com anfotericina B (AMB), bem como avaliar a interaÃÃo in vitro das drogas antituberculose com drogas antifÃngicas frente a cepas de C. posadasii isoladas no Nordeste brasileiro. O estudo foi conduzido em ensaio de macrodiluiÃÃo, de acordo com o protocolo descrito no documento M-38A, padronizado pelo Clinical Laboratory Standars Institute (CLSI, 2002). A interaÃÃo sinÃrgica das drogas foi avaliada pelo mÃtodo do Checkerboard. Este estudo mostrou que as oito combinaÃÃes entre duas drogas antifÃngicas testadas como anfotericina B com derivados azÃlicos e voriconazol com derivados azÃlicos e caspofungina respectivamente apresentaram efeito inibitÃrio in vitro frente aos isolados de C. posadasii; porÃm apenas uma combinaÃÃo voriconazol com anfotericina B exibiu interaÃÃo sinÃrgica, cuja concentraÃÃo inibitÃria mÃnima (CIM) foi reduzida em 15 vezes, quando se comparou com a CIM da droga testada isoladamente. O SMX/TMP mostrou efeito inibitÃrio in vitro com frente a cepas de C. posadasii, entretanto, houve diminuiÃÃo da CIM da AMB em cerca de 5,85 vezes quando associado à SMX/TMP. Com relaÃÃo Ãs 24 combinaÃÃes entre drogas antifÃngicas com drogas antituberculose testadas todas apresentaram efeito inibitÃrio in vitro frente aos isolados de C. posadasii. Das 24 combinaÃÃes, foram observadas interaÃÃes sinÃrgicas em 16 associaÃÃes, das quais anfotericina B com rifampicina; itraconazol com rifampicina ou etambutol ou pirazinamida; fluconazol com etambutol e voriconazol com etambutol foram reduzidas as CIMs em dez vezes, ao se comparar com a CIMs da droga testada isoladamente. Futuros estudos em modelos animais sÃo necessÃrios para confirmar a utilidade destas combinaÃÃes. Este trabalho à fonte de apoio para novas investigaÃÃes de combinaÃÃes que resultem em interaÃÃes sinÃrgicas, bem como para determinar a correlaÃÃo de resultados in vivo. / The coccidiodomicose is a systemic infection, predominantly lung caused by dimorphic fungi Coccidioides immitis and C. posadasii. Brazil is among the countries with endemic areas of coccidiodomicose, confined to the semiarid areas of Northeast Brazil. This scenario leads to a larger investigation into new strategies for an injunction against C.posadasii. Based on this context, the purpose of this study was to investigate new strategies, to evaluate the in vitro interaction of the major antifungal agents used in the treatment of coccidioidomycosis, analyze the inhibitory effect in vitro antimicrobial drugs, such as sulfamethoxazole and trimethoprim (SMX / TMP ) associated or not with amphotericin B (AMB) and evaluate the in vitro interaction of antituberculosis drugs with antifungal drugs against C. posadasii strains isolated in northeastern Brazil. The study was conducted in test macrodilution according to the protocol described in document M-38A, standardized by the Clinical Laboratory Standars Institute (CLSI, 2002). The synergistic interaction of the drugs was evaluated by the Checkerboard method. This study showed that the eight combinations of two antifungal drugs such as amphotericin B with azole derivatives and voriconazole with derivative azole and caspofungin, respectively showed inhibitory effect in vitro against the isolates of C. posadasii, but only a combination of voriconazole with amphotericin B showed synergistic interaction, whose minimum inhibitory concentration (MIC) was reduced by 15 times when compared with the MIC of the drug tested alone. SMX/TMP had an inhibitory effect in vitro against strains of C. posadasii, however, decreased the MIC of AMB at 5,85 times when associated with SMX / TMP. Regarding the 24 combinations of antifungal drugs with antituberculosis drugs tested showed any inhibitory effect in vitro against the isolates of C. posadasii. Of the 24 combinations, synergistic interactions were observed in 16 associations, of which, amphotericin B with rifampicin, itraconazole or rifampicin with ethambutol or pyrazinamide, ethambutol with fluconazole and voriconazole with ethambutol MICs were reduced ten-fold when compared with the MICs of drugs tested in isolation. Future studies in animal models are needed to confirm the usefulness of these combinations. This work is a source of support for new investigations of combinations that result in synergistic interactions, as well as to determine the correlation of results in vivo.
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Atividade antifúngica in vitro e mecanismo de ação de análogos químicos da isoniazida frente a Coccidioides posadasii / Antifungal activity in vitro and mechanism of action of chemical analogues of isoniazid against Coccidioides posadasii

Melo, Charlline Vládia Silva de January 2014 (has links)
MELO, Charlline Vládia Silva de. Atividade antifúngica in vitro e mecanismo de ação de análogos químicos da isoniazida frente a Coccidioides posadasii. 2014. 80 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by Eliene Nascimento (elienegvn@hotmail.com) on 2015-03-11T14:16:58Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_cvlmelo.pdf: 1418913 bytes, checksum: 8e7ca0b761e03c5831be6c466907127d (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-03-11T14:19:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_cvlmelo.pdf: 1418913 bytes, checksum: 8e7ca0b761e03c5831be6c466907127d (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-11T14:19:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_cvlmelo.pdf: 1418913 bytes, checksum: 8e7ca0b761e03c5831be6c466907127d (MD5) Previous issue date: 2014 / Coccidioidomicose é uma micose sistêmica que acomete o homem e outros animais domésticos e silvestres, causada pelo fungo dimórfico geofílico Coccidioides posadasii. Nos últimos anos, a melhoria dos métodos de diagnóstico micológico e o aumento da ocorrência de doenças imunossupressoras causaram grande impacto na incidência das micoses profundas e oportunistas no mundo. Apesar da existência de terapias antifúngicas eficazes contra a coccidioidomicose, a busca por novas drogas para o tratamento desta doença se faz necessária. O objetivo desse estudo foi determinar o efeito inibitório, in vitro, e o mecanismo de ação dos análogos químicos da isoniazida, isolados e em combinação com os antifúngicos anfotericina B (AMB) e itraconazol (ITC), frente a cepas de Coccidioides posadasii (n=12). Para isso 12 cepas de C.posadasii, foram repicadas em ágar dextrose batata e utilizadas na realização dos testes de sensibilidade frente ao agente antituberculose isoniazida (INH) e seus análogos químicos. Os ensaios foram conduzidos por meio do teste de macrodiluição em caldo ou definição da concentração inibitória mínima (CIM) e o sinergismo foi avaliado pelo método do tabuleiro. Os análogos químicos inibiram o crescimento de todas as cepas de C. posadasii testadas isoladamente, com valores de CIM para cada composto que variaram de 100 a 400 µg/mL, para os análogos P3-[N’-(1- (4-methoxifeniletilideno) isonicotinohidrazida] P5- [N’- (1-m-tolileilidene) isonicotinohidrazida] e P6- [N’-(1-(4-metilfenil) etilideno) isonicotinohidrazida], de 25 a 100 µg/mL para a PACT- N’- (1-feniletilideno) isonicotinohidrazida e de 0,0625 a 0,125 µg/mL para AMB e 0,125 a 0,5 µg/mL para ITC. Quanto a combinação entre as drogas antifúngicas e os análogos químicos da droga isoniazida, todos foram capazes de inibir o crescimento in vitro das cepas de C. posadasii. Sinergismo foi detectado em 8 combinações não sendo observado nenhum antagonismo em nenhuma delas. Os análogos da isoniazida apresentaram valores de CIM de 2, 4, 8, 16, 32 vezes superior à atividade da droga antituberculose padrão. A extração dos esteróis e a permeabilidade da membrana fúngica foram averiguadas, respectivamente, por saponificação com aquecimento e por meio da leitura do sobrenadante da suspensão fúngica em comprimento de onda de 260 e 280 nm. Todos os compostos inibiram o crescimento in vitro das cepas de C. posadasii. Foi observado que os análogos da isoniazida isolados e em combinação com antifúngicos foram capazes de causar redução do teor de ergosterol celular; apenas os análogos P3 e P6 foram capazes de alterar a permeabilidade da membrana plasmática nas condições testadas. Em conclusão, os resultados mostram que os análogos derivados da isoniazida possuem atividade inibitória frente a C. posadasii
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Coccidioides posadasii de origem clínica e ambiental : um estudo da diversidade genética / Coccidioides posadasii, clinical and environmental strains: study of genetic diversity

Lima, Rita Amanda Chaves de January 2010 (has links)
LIMA, Rita Amanda Chaves de. Coccidioides posadasii de origem clínica e ambiental : um estudo da diversidade genética. 2010. 91 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-03-18T13:26:44Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_raclima.pdf: 2032085 bytes, checksum: c3f5ac005ba0fdb42b1c01f27d117165 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-03-18T13:27:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_raclima.pdf: 2032085 bytes, checksum: c3f5ac005ba0fdb42b1c01f27d117165 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-18T13:27:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_raclima.pdf: 2032085 bytes, checksum: c3f5ac005ba0fdb42b1c01f27d117165 (MD5) Previous issue date: 2010 / Coccidiodomycosis is a systemic infection, predominantly pulmonary, caused by the geophilic and dimorphic fungi, Coccidioides immitis and Coccidioides posadasii. In Brazil, coccidioidomycosis is associated with semi-arid areas in the Northeastern region of this country, which is considered one of the endemic areas of this disease in South America. These pathogens are morphologically indistinguishable species, but they exhibit molecular differences. Different molecular techniques have been described for the characterization of these species. The nuclear ribosomal DNA (rDNA) from Coccidioides spp. has been described as an important molecular marker for the identification, taxonomy and phylogeny. Currently, there are still shortages of maps for epidemiological approaches in order to direct the correlation between populations of Coccidioides spp. and the outbreaks of coccidiomycosis. Given the above, this study aimed at performing the molecular identification of 18 clinical and environmental isolates of C. posadasii, from Northeastern Brazil, maintained in the fungal collection of the Specialized Medical Mycology Center (CEMM), through PCR, as well as, to analyze the genetic diversity of these isolates by sequencing of 18S-28S regions of nuclear rDNA. The identification of the isolates was performed through PCR, using specific primers Coi9-1F and Coi9-R. The sequencing of the 18S-28S rDNA regions was performed through the method of chain termination by dideoxynucleotides, using the kit DYEnamicTM ET terminators cycle sequencing (GE Healthcare). The results confirmed the identification of all strains included in this study as belonging to the species C. posadasii. The phylogenetic tree based on 18S-28S rDNA region of C. posadasii from CEMM and Coccidioides spp. from Genbank. reveals the formation of a unique cluster encompassing the following strains CEMM 05-2-063, CEMM 05-2-064, CEMM 05-2-066 and CEMM 05-2-065, in a properly sustained branch, which apparently seems to group these isolates according to their geographical origin. The strains of C. posadasii showed lower genetic divergence in the ITS1 and ITS2 regions, when compared to strains of C. immitis. Analyses did not detect differences between strains of clinical origin and those of environmental origin. Further studies involving the analysis of fast evolving markers, such as microsatellites, can provide evidences to determine whether the groups found in this study are derived from a lineage of clonal reproduction. / A coccidioidomicose é uma infecção sistêmica, predominantemente pulmonar, causada pelos fungos dimórficos e geofílicos, Coccidioides immitis e Coccidioides posadasii. No Brasil, a coccidioidomicose está associada a locais situados na zona semi-árida da região Nordeste, considerada uma das áreas endêmicas da doença na América do Sul. Estes patógenos consistem em espécies morfologicamente indistinguíveis, mas que exibem diferenças moleculares peculiares. O DNA ribossômico nuclear (rDNA) de Coccidioides spp. tem sido apontado como importante marcador molecular utilizado na identificação, taxonomia e filogenia. Atualmente, ainda há escassez de mapas de abordagens epidemiológicas para direcionar a correlação entre as populações de Coccidioides spp. com os surtos de coccidioidomicose. Diante do exposto, este estudo teve por objetivo, realizar a identificação molecular de 18 isolados clínicos e ambientais de C. posadasii, oriundos do Nordeste brasileiro, mantidos na Micoteca do Centro Especializado em Micologia Médica (CEMM), através da técnica de PCR, bem como, analisar a diversidade genética destes isolados por meio do seqüenciamento das regiões 18S-28S do rDNA nuclear. A identificação dos isolados foi realizada por PCR utilizando os primers específicos Coi9-1F e Coi9-R. O sequenciamento das regiões 18S-28S rDNA foi realizado pelo método da terminação da cadeia pelo didesoxinucleotídeo, usando-se o kit DYEnamicTM ET terminators cycle sequencing (GE Healthcare). Os resultados confirmaram a identificação de todas as cepas incluídas neste estudo, como pertencentes à espécie C. posadasii. A árvore filogenética, baseada na região 18S-28S rDNA de C. posadasii do CEMM, juntamente com sequências de Coccidioides spp. depositadas no Genbank. revela a formação de um cluster exclusivo englobando as cepas CEMM 05-2-063, CEMM 05-2-064, CEMM 05-2-065 e CEMM 05-2-066, em um ramo adequadamente sustentado, que aparentemente parece agrupar estes isolados segundo sua origem geográfica. As cepas de C. posadasii apresentaram menor índice de divergência genética nas regiões ITS1 e ITS2, quando comparadas às cepas de C. immitis A análise não detectou diferenças entre as cepas de origem clínica e as de origem ambiental. Estudos posteriores envolvendo a análise de marcadores de evolução mais rápida, os microssatélites, podem fornecer evidências para determinar se os agrupamentos encontrados neste estudo são resultantes de uma linhagem de reprodução clonal.
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Coccidioidomicose no estado de Cearà (1995-2007): caracterÃsticas clÃnico-laboratoriais e anÃlise das fraÃÃes protÃicas do antÃgeno total de Coccidioides posadasii no imunodiagnÃstico / Coccidioidomycosis State of Cearà (1995 - 2007): characteristics clinical laboratory and analysis of protein fractions of antigen total Coccidioides posadasii in the immunodiagnosis

Silviane Praciano Bandeira 04 December 2008 (has links)
Coccidioidomicose consiste em enfermidade causada pelos fungos dimÃrficos do gÃnero Coccidioides â C. immitis e C. posadasii â que acomete o homem e diversos animais como bovinos, ovinos, roedores e cÃes. Restrita ao continente americano, casos da doenÃa vem ocorrendo no Estado do Cearà desde 1995. A infecÃÃo ocorre geralmente por contato inalatÃrio com as estruturas infectantes do fungo presentes no ambiente, os artroconÃdeos. Em sua fase parasitÃria, os microrganismos se apresentam sob a forma de esfÃrulas responsÃveis pelas manifestaÃÃes clÃnicas da doenÃa. A maioria dos casos cursa de forma assintomÃtica, sendo os quadros respiratÃrios os mais comuns em pacientes clinicamente enfermos. O diagnÃstico da doenÃa se baseia em tÃcnicas microbiolÃgicas como pesquisa direta e cultura, porÃm estes procedimentos demandam estrutura especializada â nÃvel de biosseguranÃa III -por tratar-se de microrganismo de classe biolÃgica 3. Abordagem imunolÃgica mostra-se promissora por prescindir da manipulaÃÃo fÃngica e ser exeqÃÃvel em diversos laboratÃrios de rotina micolÃgica. Neste trabalho, objetivou-se traÃar perfil clÃnicolaboratorial dos casos de coccidioidomicose ocorridos no Estado do Cearà entre os anos de 1995 e 2007, alÃm de obter fraÃÃes antigÃnicas a partir do fracionamento de AntÃgeno total de C. posadasii empregÃveis como imunodiagnÃstico da doenÃa. Foram catalogados 19 casos da doenÃa no perÃodo em estudo. Todos os pacientes eram homens jovens com manifestaÃÃes respiratÃrias, com exceÃÃo de um caso. O hÃbito recreativo de caÃar tatus foi relatado por 18 pacientes. A abordagem laboratorial destes casos consistiu em estudo microbiolÃgico, associado a tÃcnicas moleculares, imunolÃgicas, histopatolÃgicas ou de experimentaÃÃo animal. O fracionamento protÃico do AntÃgeno total de C. posadasii originou trÃs fraÃÃes antigÃnicas com teor protÃico distinto, perfil eletroforÃtico diferenciado e imunorreatividade pela tÃcnica de Western blotting. A fraÃÃo 60-90% revelou banda imunorreagente de aproximadamente 30 a 40 KDa reconhecida por soros de coccidioidomicose, porÃm apresentando reatividade cruzada com alguns soros de paciente com histoplasmose. Esta banda protÃica, em estudos posteriores, poderà ser caracterizada e purificada com potencial utilizaÃÃo como ferramenta para o imunodiagnÃstico da doenÃa. / Coccidiodomycosis is a disease caused by dimorphic fungi of the Coccidioides genus â C. immitis and C. posadasii â which afflicts people and various animals, such as cattle, goats, rodents and dogs. It is restricted to the Americas and cases have been reported in the state of Cearà only since 1995. The infection generally results from inhaling the infectious structures arthroconidia -of the fungus. In its parasitic phase, the microorganisms responsible for the clinical signs of the disease have a spherical shape. Most cases are asymptomatic, and respiratory problems are the most common symptoms in patients that are clinically affected. The diseaseâs diagnosis is based on microbiological techniques such as direct examination of clinical specimens and culturing, but these procedures require specialized biosecurity level 3 facilities because the microorganism falls in biological class 3. The immunological approach appears promising because it does not require manipulation of the fungi and can be performed in various laboratories equipped for routine mycological tests. The aim of this work is to outline the clinical and laboratory profile of the cases of coccidiodomycosis that occurred in the state of Cearà between 1995 and 2007 and to report experiments to obtain antigenic fractions from fractioning AntÃgeno total of C. posadasii, as a possible means for immunodiagnosis of the disease. A total of 19 cases of the disease were cataloged in the study period. All the patients were young men with respiratory symptoms, except for one case. All but one of the patients reported they engaged in recreational hunting of armadillos. The laboratory approach in these cases consisted of microbiological examination combined with molecular, immunological, histopathological techniques or animal experiments. The protein fractioning of AntÃgeno total of C. posadasii produced three antigenic fractions with different protein content, electrophoretic profile and immunoreactivity according to the Western blotting technique. The 60-90% fraction showed an immunoreactive band of approximately 30 to 40 KDa, recognizable by sera from patients with coccidiodomycosis, but showed crossreactivity with some sera from patient with histoplasmosis. This protein band, in subsequent studies, can be characterized and purified for potential use as a tool for immunodiagnosis of the disease.

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