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Padronização de um protocolo de PCR e Nested PCR para detecção de Listeria monocytogenes em queijos minas frescal / Standardization of a protocol for PCR and Nested PCR for detection of Listeria monocytogenes in Minas cheese

Souza, Stefania Marcia de Oliveira 25 February 2011 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária. 2011. / Submitted by alcianira lima persch (alcyrpl@yahoo.com.br) on 2011-06-23T00:59:46Z No. of bitstreams: 1 2011_StefaniaMarciadeOliveiraSouza.pdf: 2564047 bytes, checksum: 97b9b2a9bf641f22916bd222874a0c57 (MD5) / Approved for entry into archive by Guilherme Lourenço Machado(gui.admin@gmail.com) on 2011-06-27T16:48:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_StefaniaMarciadeOliveiraSouza.pdf: 2564047 bytes, checksum: 97b9b2a9bf641f22916bd222874a0c57 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-27T16:48:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_StefaniaMarciadeOliveiraSouza.pdf: 2564047 bytes, checksum: 97b9b2a9bf641f22916bd222874a0c57 (MD5) / O queijo tipo Minas frescal é um produto fresco caracterizado por possuir alto grau de umidade tornando-o extremamente suscetível à contaminação por diversos microrganismos, inclusive Listeria monocytogenes e diversos surtos já foram associados ao consumo de queijos frescos em todo o mundo. Neste trabalho, foi realizado um diagnóstico para detecção de L. monocytogenes utilizando três metodologias diferenciadas: ISO 11290, PCR convencional e Nested PCR, em massa de queijo tipo Minas frescal, artificialmente contaminada em tratamentos diferenciados. As amostras da massa do queijo foram analisadas em três momentos diferenciados: no dia da fabricação (Dia 0), cinco dias após a fabricação (Dia 5) e dez dias após a fabricação (Dia 10). Para avaliação das técnicas moleculares foram utilizados volumes de 1mL, 5mL e 10 mL a partir das amostras de queijo minas frescal. Os resultados obtidos demonstraram, que a PCR convencional detectou, a presença do patógeno, em no máximo, 33,3% do total das amostras e, apenas quando foram analisadas no dia 0, não ocorrendo detecção nos demais períodos, indicando baixa sensibilidade em relação às outras metodologias e a Nested PCR, apresentou frequência de detecção de 100% quando utilizado o volume de 1mL na realização da técnica nos três períodos analisados, com variações de no mínimo 66,6% nos demais tratamentos e volumes utilizados. Por outro lado, o método ISO 11290 apresentou frequência de 100% em todos os tratamentos e volumes avaliados, indicando melhor desempenho na detecção de L. monocytogenes em queijo minas frescal, em comparação com as demais metodologias. Ao considerarmos o curto prazo de validade desse tipo de alimento, a Nested PCR pode ser considerada mais adequada e, a sua utilização como uma ferramenta de diagnóstico para os Serviços de Inspeção, deve ser recomendada tendo em vista a obtenção de resultados com maior rapidez e alta frequência na detecção de L. monocytogenes, indicando sensibilidade e especificidade suficientes para a sua. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The Minas fresh cheese is a fresh product characterized by having high moisture content making it extremely susceptible to contamination by various microorganisms, including Listeria monocytogenes and several outbreaks have been associated with consumption of fresh cheeses in the world. In this study, we performed a diagnostic for detection of L. monocytogenes using three different methodologies: ISO 11290, conventional PCR and Nested PCR, mass Minas fresh cheese type, artificially contaminated in different treatments. Samples of the mass of cheese were analyzed at three different moments: the day of manufacture (day 0), five days after production (Day 5) and ten days after manufacture (Day 10). For evaluation of molecular techniques were used volumes of 1mL, 5mL and 10 mL from the samples of fresh cheese. The results showed that the conventional PCR detected the presence of the pathogen in up to 33.3% of total samples, and only when they were analyzed at day 0, no detection occurred in other periods, indicating low sensitivity to other methodologies and nested PCR, showed the frequency of detection of 100% when using the volume of 1mL in performing the technique in the three study periods, variations of at least 66.6% in other treatments and volumes used. Moreover, the ISO 11290 method presented frequency of 100% in all treatments and packages evaluated, indicating better performance in detecting L. monocytogenes in fresh cheese in comparison with other methodologies. In considering the short shelf life of such food, nested PCR can be considered more appropriate, and its use as a diagnostic tool for Inspection Services, should be recommended in order to obtain results more quickly and high frequency in the detection of L. monocytogenes, showing sensitivity and specificity for its implementation. .
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Aplicação de micro-organismos para remediação de áreas contaminadas com hidrocarbonetos

Allebrandt, Sara Regina January 2015 (has links)
A contaminação de solos e águas subterrâneas com hidrocarbonetos de petróleo tem sido objeto de muita preocupação nas ultimas décadas. E embora as indústrias petrolíferas ocupem um grande espaço na mídia com os grandes vazamentos acidentais, os postos de combustíveis em situação irregular demonstram na maioria das vezes uma contaminação silenciosa e que quando descobertos já ocasionaram um dano ambiental de grande extensão. Essas condições somadas a banalização dos procedimentos operacionais em instalações e a implementação tardia de uma legislação ambiental específica, fazem com que os pequenos e contínuos vazamentos apresentem elevados potenciais poluidores, colocando os postos de combustíveis na lista dos responsáveis pelo maior número de áreas contaminadas. Desta forma, tornam-se necessárias alternativas para mitigar esses impactos ambientais, sociais e econômicos e as técnicas de biorremediação surgem como uma solução de baixo custo, eficiência e viabilidade. Estas técnicas se baseiam na utilização de micro-organismos com potencial de biodegradar compostos, sendo práticas ambientalmente corretas e sustentáveis. Portanto, o objetivo deste trabalho foi desenvolver uma formulação comercial utilizando micro-organismos isolados do solo contaminado com hidrocarbonetos e comparar a aplicação desta formulação aos tratamentos de atenuação natural e bioestimulação. Para isso, 34 micro-organismos foram isolados de solo contaminado removidos de postos de combustíveis. Para avaliar a capacidade de biodegradação destes isolados, os mesmos foram submetidos a um teste prévio com indicador redox TTC, onde 24 foram positivos e então identificados através do sequenciamento do 16 S rRNA. O sequenciamento identificou 12 P. aeruginosa (99% de similaridade), três P. mendocina (99% de similaridade), uma P. pseudoalcaligenes (99% de similaridade) uma P. putida (97% de similaridade), uma P. stutzeri (99% de similaridade), três B. cereus (99% de similaridade), dois B. subtilis (99% de similaridade) e uma A. calcoaceticus (99% de similaridade). Os isolados identificados como P. aeruginosa não foram utilizados devido a sua patogenicidade, os demais foram submetidos a produção de biossurfactantes através da avaliação do índice de emulsificação, onde ambos tiveram uma IE entre 20 e 30%. Após os testes iniciais, cinco micro-organismos foram selecionados para compor o primeiro consórcio a ser utilizado no experimento de bioaumentação (P. mendocina (BPB 1.6), B. cereus (BPB 1.15), A. calcoaceticus (BPB 1.22), B. subtilis (BPB 1.13) e B. cereus (BPB 1.26). Para os experimentos foram montados os tratamentos de atenuação natural, bioaumentação/bioestimulação e bioestimulação, utilizado 300 g de um solo contaminado removido de um posto de combustível, o qual apresentou uma contaminação inicial de 134,49 mg Kg-1 de solo. Ao final do experimento (60 dias), os tratamentos mostraram uma redução de 84% para o tratamento de atenuação natural, 90% para o tratamento de bioaumentação/bioestimulação e 91% para o tratamento de bioestimulação. Após estes resultados um novo experimento foi montado em grande escala, utilizando 300 Kg de solo contaminado, onde os tratamentos de atenuação natural, bioaumentação/bioestimulação e bioestimulação foram monitorados com e sem a injeção de ar. O consórcio utilizado foi produzido em escala industrial (100 L) e composto por quatro micro-organismos, P. mendocina (BPB 1.8), B. cereus (BPB 1.20), B. cereus (BPB 1.26), B. sphaericus (BPB 1.35). A degradação dos contaminantes foram analisadas nas diferentes frações: C8–C11, C11–C14, C14–C20 e C20–C40, por cromatografia gasosa. Os resultados mostraram que o tratamento de atenuação natural com aeração reduziu 98% dos contaminantes. Já o tratamento de bioestimulação não obteve redução, tanto com a aplicação de ar quanto sem, e o tratamento de bioaumentação/biestimualação sem ar obteve uma redução de 85%. Para estes tratamento também foram monitorados a produção de CO2, o qual não obteve diferenças significativas entre os tratamentos, assim como a eletroforese em gel de gradiente desnaturante. / Contamination of soil and groundwater with petroleum hydrocarbons has been the subject of much concern in recent decades. And although oil industries occupy a large space in the media with large accidental spills, gas stations illegally staying show in most cases a silent contamination and when discovered already caused environmental damage of large extent. These conditions added the trivialization of operational procedures in facilities and the late implementation of a specific environmental legislation, make small continuous leaks and show high potential polluters, putting the gas stations in the list of the highest number of contaminated sites. Thus become necessary alternatives to mitigate these environmental, social and economic impacts and bioremediation techniques emerge as a low-cost solution, efficiency and viability. These techniques based on the use of microorganisms with potential to biodegrade compounds, being environmentally friendly and sustainable practices. Therefore, the objective of this study was to develop a commercial formulation using isolated from soil microorganisms contaminated with hydrocarbons and compare the application of this formulation to natural attenuation and biostimulation treatments. For this, 34 microorganisms were isolated from contaminated soil removed from gas stations. To evaluate the biodegradability of these isolates, they were subjected to a pretest with TTC redox indicator, where positive and 24 were then identified through the sequencing of the 16 S rRNA. The sequencing identified 12 P. aeruginosa (99% similarity), three P. mendocina (99% similarity), one P. pseudoalcaligenes (99% similarity), one P. putida (97% similarity), one P. stutzeri (99% similarity) three B. cereus (99% similarity), two B. subtilis (99% similarity) and one A. calcoaceticus (99% similarity). The isolates identified as P. aeruginosa were not used because of their pathogenicity, others were submitted to biosurfactant production by assessing the emulsification index, which both had a IE between 20 and 30%. After initial testing, five micro-organisms were selected to compose the first consortium to be used in bioaugmentation experiment (P. mendocina (BPB 1.6), B. cereus (BPB 1.15), A. calcoaceticus (BPB 1:2) B. subtilis (BPB 1.13) and B. cereus (BPB 1.26). For the experiments were mounted the natural attenuation treatments, bioaugmentation / biostimulation and biostimulation, used 300 g of contaminated soil removed from a gas station, which presented an initial contamination of 134.49 mg kg-1 soil. At the end of the experiment (60 days), the treatments showed a 84% reduction for the treatment of natural attenuation, 90% for the biostimulation treatment, bioaugmentation/ and 91% for the biostimulation treatment. After these results a new experiment was conducted on a large scale, using 300 kg of contaminated soil, where treatments of natural attenuation, bioaugmentation / biostimulation and biostimulation were monitored with and without the injection of air. The consortium used was produced on an industrial scale (100 L) and consists of four micro-organisms, P. mendocina (BPB 1.8), B. cereus (BPB 1.20), B. cereus (BPB 1.26), B. sphaericus (BPB 1.35). The degradation of contaminants in different fractions was analyzed: C8–C11, C11–C14, C14–C20 and C20–C40, by gas chromatography. The results showed that treatment of natural attenuation with aeration reduced 98% of contaminants. Already the biostimulation treatment did not obtain reductions both with air and with no application, and treatment of bioaugmentation / biestimualação with no air obtained a reduction of 85%. For these treatment were also monitored the production of CO2, which did not have significant differences between treatments, as well as electrophoresis in denaturing gradient gel.
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Estudo da contaminação por compostos fenólicos de uma área impactada por resíduo de areia de fundição

Cunha, Andréa de Brito e January 2005 (has links)
A disposição de resíduos de fundição em áreas não licenciadas foi e ainda é uma prática empregada por muitas empresas do setor. Quando dispostos inadequadamente, podem poluir o solo e a água, alterando suas características físicas, químicas e biológicas, constituindo-se em um problema ambiental. A ação da sociedade em geral fez com que essa prática diminuísse, forçando as empresas a aumentar a taxa de reciclagem da areia e a dispor seus resíduos em aterros industriais licenciados por órgãos ambientais. Porém, um grande passivo ambiental foi deixado, de forma que estas áreas necessitam ser caracterizadas e recuperadas. Este trabalho avaliou a contaminação ambiental do descarte de areia de fundição em uma área na região de Passo Fundo, que recebeu predominantemente areia de moldagem do tipo "verde" e do processo "shell". Caracterizou-se o solo, a vegetação, a água de um córrego próximo e a água do lençol freático. Em função da presença de compostos fenólicos na fabricação de areia de moldagem do tipo shell, estudou-se mais detalhadamente a contaminação da área por compostos fenólicos. Empregou-se duas diferentes metodologias de análise de fenóis: o método de análise de fenol total por extração com clorofórmio e fenóis por cromatografia gasosa. Pode-se dizer, que o principal impacto ambiental encontrado na área foi a degradação física do terreno pela disposição dos resíduos. No presente caso, uma área de banhado foi destruída. O solo da área tornou-se mais arenoso em função da disposição deste resíduo e sua coloração tornou-se mais escura. Entretanto, há evidências de uma recuperação natural, visto que há o crescimento de vegetação pioneira. Observou-se na área uma concentração baixa de metais tóxicos, porém um aumento da concentração de compostos fenólicos. O compostos fenólicos identificados foram: fenol, o-cresol, 2-fenilfenol, 3-fenilfenol, 4-fenilfenol e bisfenol A. O bisfenol A foi considerado como a substância indicativa da contaminação do meio ambiente por areia de fundição. Quanto a determinação de compostos fenólicos, a metodologia utilizando técnicas cromatográficas mostrou-se mais adequada de para a determinação de compostos fenólicos oriundos dos resíduos de fundição, pois permite uma análise precisa para cada tipo de composto fenólico. A metodologia de determinação de fenol total por extração com clorofórmio não é seletiva, detectando na análise vários compostos fenólicos de ocorrência natural e mascarando a influência da contaminação de origem antrópica. / The illegal disposal of wastes in open areas was a common practice by the foundry industry. It is concerned that it can pollute the soil and water, modifying its physical, chemical and biological properties, becoming a serious environmental problem. The action of the society provided that this practice was inhibited. The industries were forced to recycle the foundry sand and to dispose their solid wastes in engineered landfills approved by the governmental agencies. However, the old landfills should be characterized and recovered. Thus, this work aims to evaluate the environmental contamination of a foundry sand landfill in the city of Passo Fundo, Rio Grande do Sul, Brazil, which has received mainly "green" and "shell" molding sands. It was characterized the soil, vegetation, surface water of a nearby stream and the underground water. A special emphasis was given in this work to the phenolic compounds, due the presence in the shell molding sand. It was applied two different methodologies for phenolic compounds analysis: total phenolic compounds by chloroform extraction and phenolic compounds by gas chomatrography. The results showed that the main environmental impact found was the physical degradation of the area. In the present case, the solid waste material covered a natural wetland. The local soil contains a higher amount of sand and its color became darker. However, a natural recovery of the place is happening, thus there is pioneer vegetation growing. The amounts of toxic metals in the area are in the same level of the background, however there are higher amounts of phenolic compounds in the soil and water. The phenolic compounds indentified were: phenol, o-cresol, 2- fenilphenol, 3-fenilphenol, 4-fenilphenol e bisphenol A. The bisphenol A was considered the main the indicator of environmental contamination by foundry sand. Concerning the determination of phenolic compounds, the gas chromatography technique proved to be more adequate, then it allows a precisely quantification for each type of phenolic compound. The determination by chloroform extraction methodology is not selective, detecting many phenolic compounds from natural and antropic sources of contamination.
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Efeitos da transferência de massa na relação matemática entre espessuras real e aparente em fase livre de gasolina com etanol nas contaminações subterrâneas

Finotti, Alexandra Rodrigues January 2003 (has links)
Esta tese trata da relação matemática entre as espessuras real e aparente em contaminações subterrâneas com gasolina e com gasolina e etanol. Foi testada a hipótese de que a relação entre as espessuras dos dois tipos de gasolinas pode ser descrita pela mesma relação matemática desde que esta relação incorpore as tensões interfaciais entre a água e a gasolina e gasolina e o ar que ocorrem no meio poroso. É proposta uma relação matemática hidrostática para o equilíbrio considerando o contato entre o poço de monitoramento e o meio poroso e a tensão interfacial responsável pelos efeitos capilares no meio poroso e a densidade dos fluidos. Os experimentos conduzidos em meio poroso e colunas acrílicas mostraram um ajuste estatisticamente melhor da equação matemática proposta para a gasolina pura e um ajuste que apresentou menor representatividade estatística para a gasolina com etanol. Esta discrepância está relacionada ao fato da transferência de massa do etanol presente na gasolina para a água não ser um fenômeno desprezível, causar grande influência no sistema e não estar contemplada na relação matemática proposta. Outro fenômeno observado em gotas de fluidos em experimentos para medir a tensão interfacial pode ser responsável pelo ajuste menos representativo da equação que é a presença de instabilidades na interface de contato entre a gasolina e a água. Estas instabilidades que são chamadas na literatura de Efeito Marangoni produzem variações na interface entre água e gasolina e são também responsáveis pela diferença no ajuste da equação.
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Analise de fatores que podem interferir em resultado de hemocultura em uma unidade de terapia intensiva pediatrica

Pereira, Ricardo Mendes, 1966- 13 December 1996 (has links)
Orientador: Antonia Teresinha Tresoldi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-22T12:24:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_RicardoMendes_M.pdf: 1520175 bytes, checksum: b72623f1efee2f0c6215da3dd73cbd69 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A hemocultura é o melhor método para o diagnóstico de bacteremia ou fungemia. É conhecido que vários fatores podem interferir no resultado deste exame, desde o tipo de bacteremia, passando pela coleta do sangue até o processamento da amostra no laboratório. O objetivo deste trabalho é o de analisar fatores que podem interferir no resultado de hemocultura em uma população pediátrica, visto a existência de poucos relatos de padronização de hemocultura em Pediatria. Durante três meses 100 amostras de hemocultura foram analisadas em relação ao local e modo de coleta, idade dos pacientes, diagnóstico clínico, tipo de anti-séptico utilizado, uso prévio de antibiótico e volume de sangue coletado por amostra. A positividade das amostras teve relação com a idade dos pacientes. A taxa de contaminação em relação ao numero total de amostras e em relação ao número de amostras positivas foi de 5% e 19%, respectivamente. Todas as amostras falso-positivas foram colhidas em menores de um ano de idade. A hemocultura diagnosticou bacteremia por agentes multi-resistente mesmo nos pacientes que faziam uso de antibiótico. Devido a importância da hemocultura e o conhecimento de fatores que interferem no resultado, deve-se realizar uma análise crítica em relação a indicação e coleta do exame para evitar iatrogenias para os pacientes / Abstract: Blood culture is the best method for diagnosing bacteremia or fungemia. It is known that many factors can interfere with the results of this exam, fram the type of bacteremia, passing thraugh the blood collection, until pracessing the specimen at the laboratory. The goal of this work is to analyze factors that can interfere with the results of blood culture in a pediatric population, because there is few works done on systematization of blood culture procedures in Pediatrics. During three months, 100 blood specimens were analyzed for way and of collecting the samples, age of the subjects, clinical diagnosis, type of anti-septic substance used, the prior use of antibiotic and total volume collected for each sample. Samples positivity were related to the age of the subjects. The contamination rate related to the total number of the samples and to the number of positive samples was 5% and 19%, respectively. All false-positive specimens were collected fram children under 1 year of age. Blood culture diagnosed bacteremia caused by multi-resistant agents even in the patients that site were in use of antibiotic. Because the importance of the blood culture and the knowledge of factors that can interfere with its results, one should have a critica! analysis of its indications and of the manner ofthe blood collection in order to avoid iatragenies to the patients / Mestrado / Mestre em Pediatria
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Estudo de metodologia para caracterização de leveduras da fermentação alcoolica industrial atraves de taxonomia numerica e potencial fermentativo

Malto, Miriam Laranjeira 29 September 1997 (has links)
Orientador: Maria Isabel Rodrigues / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-22T23:03:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Malto_MiriamLaranjeira_M.pdf: 4119859 bytes, checksum: f04ab39545840f89b5e4431a76835e62 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: A indústria alcooleira, no sentido de buscar maior produtividade e rendimento com redução de custos, vem estudando as formas de controlar e otimizar o processo de fermentação alcoólica. Um dos problemas-chave é a importância do controle microbiológico na fermentação alcoólica, detectando microrganismos prejudiciais ao bom rendimento da fermentação, principalmente em relação às leveduras "selvagens". Qualquer atitude drástica para eliminar essas leveduras, acarretará prejuízos para a levedura de processo. Diferenciando-se da contaminação bacteriana que pode ser controlada por antibióticos específicos que não afetam a levedura. Esse trabalho consistiu no acompanhamento do potencial fermentativo e identificação das leveduras isoladas mensalmente durante o período da safra da indústria alcooleira Clealco. Todas as leveduras presentes numa concentração 106 ou superior foram isoladas para a realização dos testes. Isto porque, a partir desta concentração as leveduras boas produtoras de etanol ou não, podem dominar o processo rapidamente. Para as análises, a metodologia escolhida foi aquela compatível com a realidade de um laboratório de controle microbiológico de uma usina alcooleira, ou seja, técnicas simples sem necessidade de instrumentos complexos, contudo não afetando a qualidade do diagnóstico final. Foram empregados os testes de Taxonomia Numérica para a identificação de leveduras, proposto por GRIFFITS (1981), que compara as características da cepa a ser identificada com características de outras já anteriormente identificadas por Taxonomia Clássica. Paralelamente, analisou-se os parâmetros cinéticos e o Potencial Fermentativo de cada levedura isolada durante o período de safra. A correlação destes parâmetros com os resultados de Taxonomia Numérica forneceu informações rápidas e seguras das condições de fermentação. Essa metodologia permite a tomada de decisões antes da perda do controle da fermentação, como ocorre atualmente quando não há um acompanhamento durante o processo / Abstract: The ethanol fermentation industries have studied alternative way to control and optimise the alcoholic fermentation process. One of the key problems is the importance of the microbiological control in the alcoholic fermentation by detecting the microrganisms that damage for the good alcoholic performance of the fermentation, mainly in relation to wild yeasts. Any drastic act for eliminating these yeasts, shall result in damage for the process yeast. By different of the bacterian contamination, that can be controlled by specific antibiotics, which does not affect the yeast. The purpose this work is to evaluate the Fermentation Potential and identification of the yeasts isolated of the processing period from the ethanol fermentation industry Clealco. Each yeast strain encountered in the concentration 106 or higher was isolated to carry out the tests. This procedure carried out because good or bad ethanol producer yeasts with higher concentration can dominate the process fast. For the analysis, the selected methodology was that compatible with the reality of a microbiological control laboratory of an alcoholic factory, i.e., a factory that uses simple approaches without the necessity to use complex instruments, moreover not affecting the quality of the final diagnostic. It was employed the Numerical Taxonomy tests for yeasts identification, proposed by GRIFFITHS (1981), which compare the characteristics of the yeast unknown with the others already identified. Moreover, the kinetics parameters and the Fermentation Potential of each yeast isolated during the harvest were analyzed. The correlation these parameters with the results of the Numerical Taxonomy supplied fast and safety information about the fermentation conditions. This methodology permits to make decisions before the fermentation control fail, as occur when there is not a supervision during the process / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos
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Isolamento de Listeria spp e estudo de sua ocorrencia em carne, leite e derivados

Destro, Maria Teresa 10 April 1990 (has links)
Orientador : Antonio de Melo Serrano / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-14T00:15:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Destro_MariaTeresa_M.pdf: 3400324 bytes, checksum: 0205581628211aa9aaa5b0e64639de79 (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: A presente pesquisa teve por objetivo verificar a eficiência de alguns meios para isolamento de Listeria a partir de alimentos, assim como avaliar a contaminação de alguns produtos alimentícios por este grupo de bactérias. Numa primeira fase, avaliamos a capacidade seletiva dos meios ágar McBride modificado ("MLA"), ágar Vogel-Johnson modificado ("MVJ") e ágar cloreto de lítio feniletanol moxalactam ("LPM") para amostras de leite e de carne bovina moída artificialmente contaminadas. Para as amostras de leite, os 3 meios mostraram-se semelhantes, mas para as amostras de carne moída os meios "LPM" e "MVJ" foram mais seletivos, permitindo o isolamento de colônias típicas de Listeria de modo mais eficiente, após incubação por 48 horas. Na segunda fase examinamos 140 amostras de alimentos colhidas no varejo em Campinas, SP. Bactérias do gênero Listeria estiveram presentes em 67 amostras (48%) sendo a maior incidência para carnes e derivados (95% de amostras positivas). Os leites e queijos apresentaram 12,5% de amostras positivas, sendo a totalidade dos leites pasteurizados, tipos B e C, negativa para o gênero. Os produtos cárneos examinados (carne bovina moída, salsicha e lingüiça, 20 amostras de cada produto) apresentaram 71,7% das amostras positivas para Listeria monocytogenes; 80,0% para L. innocua; 1,7% para L. seeligeri; 3,3% para L. welshimeri e 1,7% para L. murrayi. Já a partir dos produtos lácteos (leite cru tipo B e queijo minas frescal, 20 amostras de cada produto) foi possível observar a presença de L. monocytogenes em 5,0% das amostras, L. innocua em 20,0% e tanto L. seeligei quanto L. welshimeri em 2,5%. / Abstract: The purpose of this research was to evaluate some plating media and a methodology to recover Listeria spp from food, as well as to evaluate the problem of food contamination by this genus of bacteria. In the first step we evaluated the selectivity of 3 media: modified McBride Listeria agar (MLA), modified Vogel-Johnson agar (MVJ) and lithium chloride-phenylethanol-moxalactam (LPM). Pasteurized milk and raw minced meat artificially innoculated were used. All 3 media worked equally well for the milk samples but MVJ and LPM were the best for the meat samples. The best incubation time was 48 hours. The second step was the evaluation of 140 samples obtained from retail stores in Campinas, SP. Listeria spp was detected in 67 (48%) samples. From 60 meat products samples 95% showed Listeria spp as well as 12,5% of the milk and milk products. Listeria spp was not detected in all pasteurized milk samples. In meat and meat products (20 samples per product) Listeria monocytogenes could be islolated from 71,7%; Listeria innocua from 80,0%; L. welshimeri from 3,3% and L. seeligeri and L. murrayi from 1,7% . In raw milk and cheese samples (20 samples per product) Listeria monocytogenes was detected in 5,0%; L. innocua in 20,0% and L. seeligeri & L. welshimeri in 2,5%. / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos
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Aplicação de parametros de crescimento da flora microbiana de frango na avaliação da contaminação microbiana da carcaça

Ibarra Leon, Jose de Jesus 15 July 2018 (has links)
Orientador: Fumio Yokoya / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-15T02:05:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 IbarraLeon_JosedeJesus_D.pdf: 2449437 bytes, checksum: f2ec5571711fecdcbcfa900bb6175844 (MD5) Previous issue date: 1980 / Resumo: As contagens de microrganismos totais e de psicrotróficos foram comparadas com as estimativas das contaminações obtidas por meio de incremento na absorbância de meio de cultura inoculado com a flora contaminante de carcaças de frango logo após o processamento e após a estocagem a 4 - 5 °C por 48, 96 e 144 horas. Para a estimativa da flora contaminante, as sus pensões microbianas obtidas da superfície da carcaça foram inoculadas em BHI e incubadas com agitação a diversas temperaturas na faixa de 26,5 °C até 43,0 °C, acompanhando-se o crescimento microbiano pelo aumento de absorbância. Gráficos de logaritmo da absorbância contra tempo foram construídos para as temperaturas de incubação estudadas e das curvas traçadas foram calculados os valores de k (velocidade de crescimento, h-1 ) e R, definido pela equação: R = ln(Ap/Ao) onde: Ao é a absorbância lida no tempo zero da incubação, e Ap é a absorbância obtida pelo prolongamento da tangente da curva de crescimento até tempo zero. Através do gráfico padrão construído com dados de absorbância contra número de microrganismos, foram calculadas as absorbâncias (Aop) correspondentes as contagens totais e de psicrotróficos nas carcaças após 0, 48, 96 e 144 horas de estocagem. Valores de Rl (R1 = ln(Ao/Ap)) foram calculados para as absorbâncias corrigidas pelo gráfico padrão. Baseando-se na equação de crescimento microbianoe na equação da constante R1, foi desenvolvida uma relação matemática para se avaliar a contaminação das carcaças, utilizando-se dos dados de crescimento a 28 °C e do gráfico padrão. Os valores obtidos pelo método proposto, quando comparados com aqueles do plagueamento em meio solido para contagem total ou de psicrotróficos, proporcionaram coeficientes de correlação linear de 0,94; 0,91; 0,83 e 0,64 para contagem total após 0, 48, 96 e 144 horas de estocagem e valores de 0,94; 0,83; 0,82 e 0,86 para contagem de psicrotróficos após 0, 48, 96 e 144 horas de estocagem das carcaças. O método proposto no presente trabalho permite avaliar as contagens microbianas num tempo máximo de 11 horas, o qual abre promissoras perspectivas para a aplicação industrial do método / Abstract: Total plate counts and psychrotrophies counts we re compared with estimation of microbial load on chickens, obtained by increase of the absorbance of culture medium inoculated -with the contaminant microflora of the carcasses immediatly after processing and after 48, 96 and 144 h of storage at 4 - 5 °C. For estimating the contaminant microflora on the carcasses, microbial suspensions obtained by sampling the skin were inoculated in BHI and incubated with agitation at different temperatures in the range of 26,5 ° to 43,5 °C, measuring the microbial growth through absorbance (A) increase. Growth curves were constructed plotting ln A vs. time for each incubation temperature and from the curves drawn there were calculated the k values (growth rate, h-1) and R values which is definided by the equation R = ln(Ap/Ao) where, Ao is the absorbance at time zero of incubation, and Ap is the absorbance obtained by extending the tangent of the growth curve to zero time. Using a standard curve constructed with absorbance readings vs number of microorganisms, corrected absorbances (Aop) were calculated for the total plate counts and psychrotrophies counts obtained on the carcasses after 0, 48, 96 and 144 h of storing. Values of R1 (R1 = ln(Ap/Aop)) were calculated - for the corrected absorbances using the standard curve. For evaluation of microbial load on the carcasses, a mathematical relation was developed using the growth and R1 equations with growth data at 28 °C and the standard curve. The values obtained by this method, when compared with those of plating,- give correlation coefficients of 0.94, 0.91, 0.88 and 0.64 for total plate counts after 0, 48, 96 and 144 h storing and 0.94, 0.83, 0.82 and 0.86 for psychrotrophics counts after 0, 48, 96 and 144 h of cold storage. The proposed method in the present work allows the evaluation of microbial load in no more than 11 h, which is very promissing for industrial applications / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos
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Efeitos da irradiação gama da descontaminação do jerked beff comercializando em Recife-Pe

de Albuquerque Silva, Márcio 31 January 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T23:17:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9491_1.pdf: 3715021 bytes, checksum: 5467ecffe19f4234a02c9fd42e40d60a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Ao longo dos séculos, técnicas de preservação de alimentos foram se aprimorando com o aumento do desenvolvimento científico. Estes métodos incluem a salga, o congelamento, a secagem, o enlatamento, a pasteurização e a irradiação que estão sendo empregados e bem aceitos em alguns países, visando tornar os alimentos os mais estáveis possíveis por mais tempo, e evitar as doenças de origem alimentar que são um dos principais problemas de saúde em todo o mundo. Em todas as fases do processamento tecnológico do Jerked beef a carne é exposta a contaminações. Objetivou-se verificar quais das doses de radiação entre 2, 4 e 6kGy seria eficaz na descontaminação do produto comercializado em uma grande rede de supermercados do Recife. Foram adquiridas amostras de Jerked beef sendo estas divididas em três lotes. Em condições estéreis, a carne foi cortada e pesada. Sub-amostras foram destinadas ao grupo controle e a irradiação com fonte de cobalto-60. As sub-amostras foram adicionadas em um Erlenmeyer com água destilada esterilizada e foram agitadas gerando uma água de lavagem, e outras ficaram em repouso havendo a formação de uma água de dessalga. Alíquotas dessas águas foram semeadas em placas e as mesmas incubadas para contagem da população microbiana. Usando a metodologia da água de lavagem não houve observação de crescimento em nenhuma placa. Para a água de dessalga os resultados foram: Para o primeiro lote o grupo controle apresentou contagens variando de 5,0x105 -9,6x108 UFC/g e as amostras irradiadas apresentaram crescimento variando de 1,7x105-3,3x105 UFC/g para a dose de 2kGy, 0 a 6x104 UFC/g para a dose de 4kGy e não apresentou crescimento para a dose de 6kGy. Do lote dois obtiveram-se as seguintes contagens 2,3x109- 4,1x109 UFC/g para o controle, 6,6x107- 1,1x109 UFC/g; 1,8x105-1,7x106 UFC/g; 0 a 1,3x105 UFC/g para as doses de 2kGy, 4 kGy, 6 kGy respectivamente. O lote três apresentou um maior índice de contaminação, apresentando contagens no grupo controle variando de 5x1011-5x1016UFC/g , na dose de 2kGy a variação foi de 8,1x109-1,1x1012 UFC/g , para a dose de 4kGy foram 2,0x106-9,0x1010 UFC/g e a dose de 6kGy apresentou a variação de 5,5104 a 1,3x105. As provas de susceptibilidade a antibióticos foram realizadas segundo o CLSI (Clinical Laboratory Standard Institute). Os resultados revelaram contaminação em todos os lotes de jerked beef analisados mesmo irradiados, sendo as doses de 4kGy e 6kGy as que se apresentaram mais eficazes na redução microbiana
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Metais pesados em solo, água e hortaliças em áreas produtoras de olerícolas na Zona da Mata de Pernambuco

Cunha Filho, Fernando Ferreira da 31 January 2013 (has links)
Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-03-03T13:31:42Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Fernando Ferreira da Cunha.pdf: 3274828 bytes, checksum: 6a9da709e078e6c4ccf8226030d6fe0b (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-03T13:31:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Fernando Ferreira da Cunha.pdf: 3274828 bytes, checksum: 6a9da709e078e6c4ccf8226030d6fe0b (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013 / CAPES / Na Zona da Mata de Pernambuco predomina o cultivo de hortaliças folhosas e são estes tipos de vegetais que apresentam maior capacidade de absorver metais pesados e, atrelado ao fato de que os agricultores não respeitam o período de carência das aplicações de agrotóxicos, é provável que muitas hortaliças comercializadas e consumidas estejam com altos teores de metais. Os problemas ainda são mais graves, pois nessa região há uma maior incidência de chuvas e grande parte dos agroquímicos aplicados, no solo e na planta são carreados pelas chuvas para os rios e barragens. Essas águas, além de servirem para a irrigação, são usadas para consumo humano e animal. Diante dos diagnósticos do uso excessivo de fertilizantes e agrotóxicos, o objetivo deste trabalho foi avaliar os níveis de metais pesados no solo, planta e água de irrigação em áreas produtoras de olerícolas na Zona da Mata de Pernambuco. As coletas das amostras de solo foram feitas em dois ambientes distintos: ambientes cultivados (AC) e ambientes sem cultivos (AR), em três camadas (0-20, 20-40 e 40-60 cm). Nos ambientes cultivados foram coletadas amostras de Alface (Lactuca sativa), Coentro (Coriandrum sativum) e Cebolinha (Allium fistulosum). Coletou-se mensalmente 300 mL de água das barragens e rio que abastecem as áreas de cultivo. Em todas as amostras foram determinadas as concentrações de oito metais: Cádmio (Cd), Chumbo (Pb), Cobre (Cu), Cromo (Cr), Ferro (Fe), Manganês (Mn), Níquel (Ni) e Zinco (Zn). Notou-se que as altas concentrações dos metais Fe, Mn, Cu e Zn no solo e material vegetal, se deram pelas constantes aplicações de agrotóxicos e fertilizantes. Os solos apresentaram contaminação por Cr, Pb e Cd, metais perigosos aos seres vivos, segundo os níveis estabelecidos pelo CONAMA (2009). De um modo geral, foi observado maiores valores de metais pesados nos ambientes cultivados, isto devido às práticas agrícolas. A alface, por apresentar uma maior área foliar, teve maiores teores de metais, quando comparado ao coentro e a cebolinha. Foi verificada contaminação no material vegetal apenas com Zn, Pb e Ni. Já as amostras de água apresentaram valores de Fe acima do valor estabelecido pela Resolução CONAMA 430/2011.

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