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Análise de hidrolisados de proteína de uso cosmetológico por eletroforese capilar / Analysis of protein hydrolysates for cosmetological use by capillary electrophoresis

Neide Mitsue Fujiya 14 May 2001 (has links)
As proteínas têm sido objeto de extenso estudo e um dos passos mais importantes que se obteve industrialmente nas últimas décadas foi a produção de proteínas hidrolisadas, viabilizando sua aplicação em uma gama de produtos cosméticos e alimentícios. Os hidrolisados de proteína são incorporados em formulações destinadas aos cuidados de cabelo e pele, possuindo facilidade de penetração na cutícula dos cabelos proporcionando brilho, hidratação e condicionamento. Também são incluídos em cremes e loções para o corpo, possuindo propriedades amaciantes, hidratantes e de proteção à pele. Neste trabalho, a técnica de eletroforese capilar foi utilizada para a obtenção do perfil eletroforético de diversos hidrolisados, a saber, de soja, leite, seda, queratina, pele de animal bovino, incluindo proteína de origem marinha, variando-se condições analíticas e instrumentais. Os hidrolisados apresentaram um perfil pouco resolvido e uma investigação com extração em fase sólida foi realizada, proporcionando um fracionamento de peptídeos e, posteriormente um perfil eletroforético com maior resolução. O método de Kjeldhal foi empregado para a determinação de proteínas totais dos diversos hidrolisados de proteína estudados. Duas metodologias para a obtenção das massas molares dos hidrolisados de proteína foram implementadas, utilizando a eletroforese capilar em gel. Um dos métodos empregou o polímero linear de acrilamida para a separação de padrões de proteína na faixa de 14 a 94 kDa. Outro método desenvolvido utilizou dextran (com massa molar de 2.000.000), como rede polimérica, para a separação de padrões de proteína entre 2.512 a 16.949 Da e de 14 a 67 kDa. Os hidrolisados de proteína estudados apresentaram massa molar na faixa de 10-70 kDa. O método com detecção indireta foi desenvolvido para a separação de uma mistura de 20 aminoácidos, sendo que dezesseis aminoácidos foram efetivamente separados em dois métodos distintos. A metodologia estudada foi aplicada para a identificação dos aminoácidos dos hidrolisados de proteína (QUERATAN, SILKION, LACTOSOL, PROSOJA, PROMARIN e PROTEINAN). A quantificação dos aminoácidos foi realizada para o hidrolisado de queratina (QUERATAN), apresentando concentrações na faixa de mgL-1. / Proteins have been object of extensive investigation and in the last years, an important step has been reached from an industrial point of view, which was the production of protein hydrolysates, employed in cosmetic and nourishing products. Protein hydrolysates are employed in shampoo formulations and skin care products because they confer to the products characteristics associated to protection, conditioning and repair of the hair fiber whereas to the body they contributes to moisturization. In this work, the profile of protein hydrolysates from a variety of sources was determined by capillary electrophoresis optimizing analytical and instrument conditions. The protein hydrolysates presented a poorly resolved peak profile. However, when the hydrolisates were submitted to solid phase extraction procedures, a rich peptide mapping was obtained. The Method of Kjeldhal was employed to determine the total protein of several protein hydrolysates. Two methodologies to determine molar masses of protein hydrolysates were implemented using capillary gel electrophoresis. Acrilamide was used to separate protein standards from 14,4 to 94 kDa and dextran, a physical gel, was used to separated protein of 2,5- 16 kd and 14 - 67 kDa. Additionally, an indirect UV/vis absorbance detection methodology was developed to identify and quantify free amino acids in the protein hydrolysates.
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台灣醫學美容保養品產業先進者優勢探討 / A case study on the first-mover advantage of cosmeceutical industry

周千玉, Chou, Chien Yu Unknown Date (has links)
全球醫學美容的蓬勃發展,醫療院所在提供醫學美容服務同時,除了專業的醫療技術之外,也向消費者推薦這些可以幫助術後保養的醫學美容保養品。而這些經由臨床測試及專業醫師證實對於皮膚健康有療效的醫學美容保養品,既有科學的證實加上醫師推薦,形成一定的公信力,和一般市面上的美容商品形成區隔,進而讓這些起手術後搭配塗抹的醫學美容產品,也另闢形成一個全新的商機。 本研究針對醫學美容保養品產業以先進者優勢的相關研究進行探討,而過去的醫學美容文獻比較注重於由消費者端出發的議題研究,對於醫美品牌廠商進入產業的經營卻付之闕如。有鑑於此,本研究透過個案研究的方法,以國內醫美保養品品牌為例進行先進者優勢之探討,試圖找出欲成功達先進者優勢廠商需具備的能力和面向。 根據本研究顯示出台灣醫學美容保養品廠商進入市場具有先進者優勢,本研將究對於各品牌採用不同通路(醫療、開架式、網路)、不同品牌定位(高、中、平價)的醫學美容品牌,以其先進者廠商佔據不同的市場。各品牌廠商的優勢組合及養成及差異化形成:品牌廠商一方面教育消費者,並建立起「醫學美容保養品」的新概念,將專業度提升和傳統的保養進行區隔;另一方面建立起公司自身優勢,在此產業進入的廠商的優勢來源有:佔有技術領先、關鍵要素佔領和將顧客不確定性的消除,隨著廠商本身不同的資源,選擇專屬自身的行銷組合經營,並與供應商、通路商和終端的顧客建立關係。將產品多元化和採多品牌策略,滿足不同消費族群,而達到產能擴增、成本減低和增加其市佔率,藉此不斷擴增公司資源,進行更多的產品創新、技術精進和品牌行銷,卻也成為後進者進入市場的天然屏障,得以維持自身的優勢。 / Medical cosmetology is now growing rapidly around the whole world. Clinics, which perform cosmetic surgery, provide not only professional medical services, but also promote those cosmeceutical products which can help quick recovery from surgery. These cosmeceutical products, which have the approval from doctors and passed clinical trial, build a strong barrier for its competitor and create a new business opportunity. This research tries to study the First-Mover Advantage of the cosmeceutical industry. The old studies of cosmetic surgery focus more on customer driven issues. There are not many researches about business running for cosmeceutical brand. Therefore, our research study the First-Mover Advantage of cosmeceutical industry in Taiwan by case study methodology and try to find what are the necessary requirements for the First-Mover company. According to our research, cosmeceutical companies have the fist-mover advantage in Taiwan market. In this study, for each cosmeceutical brand have different channel (medical, open-frame , network), different brand positioning (high, middle, parity), with its advanced to occupy a different market. Each brand has their advantages of combination, and develop the differentiation. The cosmeceutical surgery brand companies educate its customer about the new concept of medical skincare product and build up its advantages. The advantages of these companies are: technology leadership, key factor occupation, customer uncertainty elimination. According to different resources of each company, the market and business strategy should be properly managed. The first mover companies have to build up the relationship with its suppliers, channels and end users. Use product diversification and multiple-brand strategy can satisfy various customer groups, increase production capacity, reduce costs and raise the market share. Based on the above strategies, the first mover companies can build up a strong barrier which the followers cannot easily passed, by product innovation, technology improvement, and branding.
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Caractérisation des propriétés mécaniques du tissu cutané par élastographie impulsionnelle haute fréquence : applications en dermatologie et en cosmétique / Characterization of the mechanical properties of skin tissue by high frequency impulse elastography : applications in dermatology and cosmetics

Chartier, Caroline 22 June 2017 (has links)
L’exploration du tissu cutané est aujourd’hui limitée par le peu de méthodes dites quantitatives permettant de décrire objectivement les propriétés mécaniques du tissu cutané. L’élastographie permet une exploration locale d’un milieu et offre la possibilité pour certaines méthodes d’estimer quantitativement le module d’élasticité (module d’Young). Nous avons mis au point une technique d’élastographie ultrasonore impulsionnelle haute fréquence 1D (HF-TE) et haute résolution permettant une description micrométrique des propriétés mécaniques du tissu cutané pour des applications en cosmétique et en dermatologie. / Nowadays, exploration of cutaneous tissue is limited by the few number of available approaches, known as quantitative methods, allowing an objective description of the mechanical properties of skin tissue. Elastography allows a local exploration of a medium and offers the possibility for some strategies to quantitatively estimate the modulus of elasticity (Young’s modulus). A 1-D high-frequency ultrasonic transient elastography method (HF-TE) allowing a micrometric description of the mechanical properties of skin tissue has been designed for cosmetic and dermatological applications. An experimental system of high-frequency transient elastography has been developed : software, hardware and measurement methodology. The HF-TE technique has been validated using simulation and measurements in monolayer and bilayer calibrated phantoms developed in the laboratory. The Young’s modulus values measured in monolayer media were then compared with those measured by two others dynamic techniques.
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Estudo do envelhecimento cutâneo e da eficácia cosmética de substâncias ativas empregadas em combatê-lo / Study of cutaneous aging and the cosmetic efficacy of active substances used to combat it

Luciana Scotti 18 December 2002 (has links)
O envelhecimento cutâneo tem grande importância na pesquisa, influenciando muito no bem-estar psíquico do indivíduo e nos relacionamentos sociais, na auto-estima e na qualidade de vida. Devido a isso, é dado crescente valor à aparência e, cada vez mais as pessoas buscam a juventude da pele, visando mantê-la firme, macia, com aparência saudável e homogeneamente pigmentada. A Cosmetologia busca entender profundamente este processo, desenvolvendo diversas formulações que retardam o envelhecimento cutâneo, com ações emoliente, umectante, hidratante, tonificante, fotoprotetora e uniformizadora da textura da pele. Para atingir isto, os produtos cosméticos incorporam vitaminas, oligoelementos, extratos vegetais, antioxidantes, alfa e beta hidroxiácidos e protetores solares, dentre outros. O público está mais exigente, esclarecido e interessado nos efeitos reais das formulações cosméticas, e menos enganáveis pela falsa publicidade. Portanto, os cosmetólogos estão constantemente pesquisando substâncias novas para combater e principalmente, prevenir o envelhecimento cutâneo. Novas formulações têm sido desenvolvidas com substâncias que possam atingir a eficácia pretendida e que sejam seguras ao usuário. / The cutaneous aging has great importance in the research. It largely influences not only on the psychic well-being of the individual but also on the social relationships, self-respect and quality of life. Due to this, increasing value has been given to the appearance and, people are looking for the youth of the skin, in order to keep it firm, soft, healthy and with homogeneous pigmentation. Cosmetology tries to understand this process, developing some formulations that delay the skin aging, with emollient, humectant, moisturizing, tonic, photoprotective and conditioning skin actions. In order to reach that, vegetable extracts, vitamins, antioxidants, oligoelements, sunscreens, alpha and beta hydroxy acids, and other substances are incorporated in the cosmectic products. Nowadays, the people are more demanding, clarified and interested in the real effects of the cosmetic formulations, and they are not so easily-fooled. Therefore, the cosmetic experts are often researching new substances in order to attack and mainly to prevent the cutaneous aging, and for this new formulations have been developed with substances which are able to reach the intended effectiveness and that are safe.
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Análise da ação condicionadora de substâncias cosméticas adicionadas em alisante capilar à base de tioglicolato de amônio / Analysis of the conditioning action of cosmetic substances added in capillary straightener based on ammonium thioglycolate

Tania Cristina de Sa Dias 05 October 2004 (has links)
O alisamento químico é o método mais empregado para melhorar a penteabilidade e a estilização de cabelos afro-étnicos. O cabelo é composto basicamente de três partes: cutícula, córtex e medula. O principal constituinte é uma proteína, a queratina. O tratamento com agente alcalino, redutor e/ou oxidante, provoca modificações nessa estrutura, ocasionando danos que podem ocorrer na camada superficial (cutícula) ou em toda a fibra, atingindo inclusive o córtex e modificando as propriedades físico-químicas do cabelo, pois o torna mais quebradiço, frágil, sem brilho, áspero e com mais dificuldade para ser penteado e desembaraçado. O emprego de agentes condicionadores auxilia na melhora dos atributos físicos e sensoriais do cabelo tornando-o mais resistente e facilitando o manuseio. Neste estudo foi preparado um creme-base alisante com tioglicolato de amônio acrescido de agentes condicionadores pré-escolhidos e adicionados no momento do uso. A formulação-base foi submetida ao estudo de estabilidade física por dois meses. Foram realizados testes de: quantificação da perda de proteína equivalente em albumina, empregando-se o método de Lowry modificado por Peterson; penteabilidade e tração de ruptura. Os resultados indicaram que a adição de óleo de jojoba e de silicones, como Lauril PEG/PPG18/18 meticona e Ciclopentasiloxano (e) PEG-12 polímero de dimeticone reticulado, melhoram os atributos físico-químicos e sensoriais das mechas de cabelo afro-étnico, sendo indicado como agentes condicionadores que poderão ser acrescidos à formulação do creme-base alisante. / Chemical hair relaxing is the most common used method to improve combability and styling on afro-ethnic hair. The hair is basically composed of three parts: cuticle, cortex and medulla. The main basic element is a protein, the keratin. The treatment with an alkaline reducing agent and/or an oxidant agent causes modifications in this structure, and related damages that can occur in the superficial layer (cuticle) through ali the fiber, reaching the cortex and modifying the physical-chemical properties of the hair. In that case, the hair becomes more fragile, it has no shine, gets rough and it is very difficulty to comb and to detangle it. Conditioning agents can improve the physical and sensorial attributes of the hair, thus allowing it to become more resistant and making it easier to take care of. In this study a hair straightener cream-base with ammonium thioglycolate was prepared and the selected conditioning agents added at the moment of the use. The straightener cream-base was submitted to the physical stability study for two months. The tests had been carried through: quantification of protein loss of albumine equivalent, using the Lowry method modified by Peterson; the combability and rupture traction. The results have indicated that the addition of Jojoba oil and silicones as Lauryl PEG/PPG-18/18 methicone; and Cyclopentasiloxane (and) PEG-12 dimethicone crosspolymer, improve the physical-chemical and sensorial attributes of the afro-ethnic hair tresses, being indicated as conditioning agents that could be added in a hair straighteners cream formulation to help its care.
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Estudo comparativo da estabilidade de formulações cosméticas contendo papaína livre e modificada / Comparative study of cosmetic formulations stability containing free and modified papain

Claudineia Aparecida Sales de Oliveira Pinto 08 April 2005 (has links)
A papaína é uma enzima utilizada em formulações tópicas como agente proteolítico debridante, no tratamento de lesões abertas de grande extensão e queimaduras. Também empregada como agente promotor da permeação cutânea, peeling químico e como agente depilatório progressivo. A estabilidade de formulações contendo enzimas não é facilmente alcançada. No presente trabalho realizou-se a modificação da papaína com polietilenoglicol, visando maior estabilidade. O Teste de Estabilidade Normal de formulações cosméticas incorporadas de papaína não modificada e modificada apresentou um perfil diferenciado para a atividade da enzima modificada, nas diferentes condições de temperatura (5 ± 1 °C; 22 ± 2 °C, 40 ± 2 °C), sendo que a mais adequada para a papaína não modificada foi de 5 ± 1 °C e para a modificada foi de 22 ± 2,0 °C. Estes resultados confirmam o aumento da estabilidade da papaína modificada e o seu potencial de aplicação em formulações de uso tópico. / Papain is an enzyme used in formulations for local application as proteolitic debridant agent, treatment of wound exposed in large extension and burns. It is also applied as promotor agent of cutaneous permeation, chemical peeling and as progressive depilatory agent. The stability of formulations with enzymes is not easily obtained. In this work modification of papain with polyethylenglycol was made in order to obtain more stability. The Test of Normal Stability of cosmetic formulations incorporated with papain not-modified and modified, showed a differentiated profile for modified enzyme in different conditions of temperature (5 ± 1 °C; 22 ± 2 °C, 40 ± 2 °C), being that, the most adequated for papain not-modified was 5 ± 1°C and for modified was 22 ± 2,0 °C. These results confirm the increase of stability of papain modified and its potential application in formulations for local application.
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Fullerton College cosmetology curriculum manual

Lopez, Connie Chacon 01 January 2004 (has links)
This manual was developed to support the Cosmetology program at Fullerton College. The skills and competencies incorporated are based on the recommendations of the Fullerton College Cosmetology Department Advisory Board. Course of study includes the cognitive, psychomotor, and affective domains.
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Análise de hidrolisados de proteína de uso cosmetológico por eletroforese capilar / Analysis of protein hydrolysates for cosmetological use by capillary electrophoresis

Fujiya, Neide Mitsue 14 May 2001 (has links)
As proteínas têm sido objeto de extenso estudo e um dos passos mais importantes que se obteve industrialmente nas últimas décadas foi a produção de proteínas hidrolisadas, viabilizando sua aplicação em uma gama de produtos cosméticos e alimentícios. Os hidrolisados de proteína são incorporados em formulações destinadas aos cuidados de cabelo e pele, possuindo facilidade de penetração na cutícula dos cabelos proporcionando brilho, hidratação e condicionamento. Também são incluídos em cremes e loções para o corpo, possuindo propriedades amaciantes, hidratantes e de proteção à pele. Neste trabalho, a técnica de eletroforese capilar foi utilizada para a obtenção do perfil eletroforético de diversos hidrolisados, a saber, de soja, leite, seda, queratina, pele de animal bovino, incluindo proteína de origem marinha, variando-se condições analíticas e instrumentais. Os hidrolisados apresentaram um perfil pouco resolvido e uma investigação com extração em fase sólida foi realizada, proporcionando um fracionamento de peptídeos e, posteriormente um perfil eletroforético com maior resolução. O método de Kjeldhal foi empregado para a determinação de proteínas totais dos diversos hidrolisados de proteína estudados. Duas metodologias para a obtenção das massas molares dos hidrolisados de proteína foram implementadas, utilizando a eletroforese capilar em gel. Um dos métodos empregou o polímero linear de acrilamida para a separação de padrões de proteína na faixa de 14 a 94 kDa. Outro método desenvolvido utilizou dextran (com massa molar de 2.000.000), como rede polimérica, para a separação de padrões de proteína entre 2.512 a 16.949 Da e de 14 a 67 kDa. Os hidrolisados de proteína estudados apresentaram massa molar na faixa de 10-70 kDa. O método com detecção indireta foi desenvolvido para a separação de uma mistura de 20 aminoácidos, sendo que dezesseis aminoácidos foram efetivamente separados em dois métodos distintos. A metodologia estudada foi aplicada para a identificação dos aminoácidos dos hidrolisados de proteína (QUERATAN, SILKION, LACTOSOL, PROSOJA, PROMARIN e PROTEINAN). A quantificação dos aminoácidos foi realizada para o hidrolisado de queratina (QUERATAN), apresentando concentrações na faixa de mgL-1. / Proteins have been object of extensive investigation and in the last years, an important step has been reached from an industrial point of view, which was the production of protein hydrolysates, employed in cosmetic and nourishing products. Protein hydrolysates are employed in shampoo formulations and skin care products because they confer to the products characteristics associated to protection, conditioning and repair of the hair fiber whereas to the body they contributes to moisturization. In this work, the profile of protein hydrolysates from a variety of sources was determined by capillary electrophoresis optimizing analytical and instrument conditions. The protein hydrolysates presented a poorly resolved peak profile. However, when the hydrolisates were submitted to solid phase extraction procedures, a rich peptide mapping was obtained. The Method of Kjeldhal was employed to determine the total protein of several protein hydrolysates. Two methodologies to determine molar masses of protein hydrolysates were implemented using capillary gel electrophoresis. Acrilamide was used to separate protein standards from 14,4 to 94 kDa and dextran, a physical gel, was used to separated protein of 2,5- 16 kd and 14 - 67 kDa. Additionally, an indirect UV/vis absorbance detection methodology was developed to identify and quantify free amino acids in the protein hydrolysates.
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Modelagem molecular aplicada à cosmetologia: planejamento de compostos antienvelhecimento / Molecular modeling applied to cosmetology: planning antiaging compounds

Scotti, Luciana 05 December 2006 (has links)
Nesta pesquisa, calculou-se, por meio da modelagem molecular, parâmetros físico-químicos importantes à capacidade anti-radicalar de compostos fenólicos extraídos de plantas da flora nacional, Chimarrhis turbinata e Arrabidaea samydoides. As propriedades eletrônicas também podem ser analisadas por meio de superfícies representadas por legendas de cores no campo 3D. Mapa de potencial eletrostático, distribuição orbitalar de HOMO e de LUMO e densidade de spin foram superfícies avaliadas neste trabalho. Em adição, estudos de QSAR (Quantitative Structure-Activity Relationships), cálculos de descritores moleculares holísticos por meio dos programas DRAGON e VOLSURF, cálculos estatísticos incluindo algoritmo genético e PLS (Partial Least Squares), demonstraram a influência de determinadas características moleculares como fundamentais à atividade biológica. A pesquisa concluiu que o grupo farmacofórico favorável à atividade antioxidante é estrutura que apresenta predominantemente características hidrofílicas, grupos hidroxila como substituintes, características eletrônicas favoráveis à doação de elétron e à estabilização do radical fenóxi formado, além de reduzido comprometimento estérico. Consideramos que os métodos empregados no trabalho podem ser considerados como abordagem inovadora para a Ciência Cosmética, indicando potencial ação antioxidante, que poderá ser utilizada em formulações antienvelhecimento. / In this research, the calculated physico-chemical parameters, by molecular modelling, have been reported in the literature for supplying important information about the antiradicalar behavior of phenolic compounds, as the studied herein from Chimarrhis turbinata sp. and Arrabidaea samydoides sp. The electronic properties also can be analyzed by means of surfaces represented by legends of colors in the 3D field. Map of electrostatic potential, HOMO and LUMO distribution orbitalar and spin density have been used in this work. In addition, QSAR studies (Quantitative Structure-Activity Relationships), calculations of holistic molecular descriptors by softwares DRAGON and VOLSURF, statistical analysis including genetic algorithm and PLS (Partial Least Squares), demonstrate the influence of the molecular structure in the biological activity. Therefore, pharmacofor favorable to the antioxidant activity structure that presents predominantly characteristic hydrophilic, groups hydroxyl as substituintes, electronic characteristics favorable to the donation of electron and the stabilization of the radical formed, besides reduced inibition esteric. These recent methods can be considered as an innovative approach for Cosmetic Science toward antioxidant action that could be used in antiaging products.
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Aplicação do cloreto de trifeniltetrazólio no teste de limite microbiano em medicamentos e cosméticos / Triphenyltetrazolium chloride application in microbial limit test for medicines and cosmetics

Ohara, Mitsuko Taba 27 October 1992 (has links)
O cloreto de trifeniltetrazólio (TTC) foi empregado neste trabalho visando padronização de método alternativo para o teste de limite microbiano em medicamentos e cosméticos, com redução no tempo de análise, além de possibilitar a aplicação da técnica de semeadura em profundidade em amostras hidroinsolúveis com opacidade e carga contaminante menor que 102 UFC/g (mL).Na técnica de tubos múltiplos, a aplicação do corante não possibilitou a redução do tempo de incubação, pois a sensibilidade para detecção de suspensão bacteriana por meio de coloração do trifenilformazano foi de 108 UFC/mL após 1 hora de reação e 107 UFC/mL após 4 horas, suspensões estas visivelmente turvas. A adição de glicose e ácido glutâmico no meio de caseina-sola, nas concentrações de 0,5% e 0,1%, respectivamente, não aumentou a sensibilidade da reação. O polissorbato 20, adicionado ao meio de cultura, líquido ou sólido, promoveu a difusão do trifenilformazano das células para o meio, fator que não favorece a visualização da massa celular no meio líquido e nem das colônias. A concentração mínima de TTC que resultou em coloração máxima no meio líquido foi de 500 e 1000 µg/mL, dependendo da espécie bacteriana. Entretanto, suspensões bacterianas com 102, 10 e 1 UFC/mL testadas, pela técnica de tubos multiplos, com adição do corante na forma de solução após 20 horas em meio de caseina-soja, forneceram resultados equivalentes, quanto ao número de tubos positivos e negativos frente às duas concentrações. A comparação desta técnica alternativa com a da subcultura demonstrou ser o tempo de 20 horas de incubação insuficientes para detecção pelo TTC, quando inoculadas alíquotas de 1 mL de suspensão com número da ordem de 1 UFC/mL Na técnica de semeadura em profundidade, após incubação de 48 horas, a coloração das colônias bacterianas foi efetuada cobrindo-se a superfície do meio de cultura com 5 mL de ágar a 1,0% contendo TTC. A concentração de 0,025% do corante promoveu a coloração das colônias após 1 hora. Entretanto, na presença de suspensão de hidróxido de alumínio a 6% a concentração mínima eficaz de TTC foi de 0,1%. Para leveduras em meio líquido essa concentração foi de 2.500 µ/mL no meio neutralizado. Em meio sólido, na presença de material opalescente, a concentração eficaz foi de 2,0%, com o TTC adicionado na dispersão de ágar em tampão pH 7,5. Amostras de produtos comercializados com característica opalescente foram submetidas à análise pelo método de tubos múltiplos com sub-cultura e pela revelação com TTC. Simultaneamente as mesmas foram testadas pelo método de semeadura em profundidade, inoculando-se 2 mL das diluições 1:4 e 1:10 com revelação das colônias com o corante. O tempo para obtenção dos resultados foi de 72 horas pelo método oficial e de 50 horas pelo método com TTC, tanto em meio líquido como em sólido. A comparação dos dados obtidos pelos 3 métodos não resultou em diferença significativa para a maioria das amostras testadas. Entretanto, os coeficientes de variação foram sempre menores para o método de semeadura em profundidade com a amostra diluída de 1:4, indicando maior precisão deste sobre os outros, principalmente em relação ao número mais provável. / The conventional methods for bioburden assessment are restrictive when applied to evaluate microbiological quality of pharmaceuticals and cosmetics. Triphenyltetrazolium chloride (TTC) was applied in this standartization study as alternative method for microbial limit test of pharmaceuticals and cosmetics. This method aimed at to reduce the assay time by conciliating the pour-plate technique analysis low bioburden of samples containing opacifiers. The application of this dye in the multiple tubes technique did not reduce incubation time, because the bacterial suspension sensitivity to triphenylformazan colour was 108 CUF/mL to 1 hour reaction and 107 CUF/mL to 4 hours. Suspensions with these bioburden are clearly turbid. The addition of 0.5% glicose and 0.1% glutamic acid to soybean-casein digest medium did not increase the reaction sensitivity. The addition of polissorbate 20 to solid ar liquid media promotted the difusion of triphenylformazan trom the cells to media; it rendered difficult of cellular mass detection in liquid medium and as much as colonies. The minimum concentration of TTC that produced maximum colour in liquid medium was 500 and 1,000 µg/mL, depending on the bacteria. However, bacterial suspensions with 102 CUF/mL tested by multiple tubes technique with 20 hours of incubation and by microbial growth detection after TTC addition provided equivalent numbers of positive and negative tubes with both concentrations. The comparison of this alternative method with that of sub-culture proved that 20 hours of microbial growth is not enough to be detected by TTC, when 1 mL of 1 CUF/mL suspension was planted. The dying of bacterial colonies was performed by covering the medium surface with 5 mL of 1% agar with TTC, molten at 48 C. The concentration of TTC that colored colonies in 1 hour was 0.025%. However, in presence of 6% aluminium hidroxide suspension the minimum effective concentration was 0.1%. The concentration required to detect yeasts in liquid media was 2,500 µg/mL in neutral pH condition. To detect yeast colonies in opalescent solid medium effective TTC concentration was 2%; in this case the dye was added to agar dispersed in 7.5 phosfate buffer. Samples of marketed produtcts were analysed through multiple tubes method with sub-culture and by TTC addition. Same samples were tested through pour-plate technique by inoculating 2 mL of 1:4 and 1:10 dilutions. The time required for resutts was 72 hours by the official method and 50 hours by alternative proposed method in liquid or solid medium. When the 3 method results were compared no significant differences were observed in almost all of the samples. However, the coefficient of variation related to pour-plate method results from 1:4 sample dilution was always lower than the others, mainly when compared with those obtained trom multiple tubes method. Therefore, the alternative pour-plate method is the most accurate one.

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