Introdução: As proteínas alimentares são fontes de peptídeos atuantes em vários processos metabólicos. Existem evidências de que a proteína do feijão caupi (Vigna unguiculata L. Walp) é capaz de reduzir o colesterol em hamsters e em humanos, porém, a permeabilidade após a digestão, o mecanismo de ação e a evidência direta da participação de peptídeos no metabolismo colesterol não são claros. Objetivo: Investigar a permeabilidade intestinal e avaliar o efeito nas vias luminal e endógena do metabolismo do colesterol de peptídeos provenientes de feijão caupi (Vigna unguiculata L. Walp). Metodologia: A permeabilidade dos peptídeos provenientes do caupi produzidos por hidrólise enzimática foi testada em linhagens de células Caco-2 usando placas Transwell®. Para investigar o efeito na via luminal, três peptídeos identificados na fração 3 kDa do hidrolisado (LLNPDDEQL; FFFGQDGGSKGEE e LNL) foram testados na solubilização de colesterol e fosfatidilcolina, no tamanho das micelas de colesterol e interação com ácidos biliares in vitro. Para verificar o efeito no metabolismo endógeno, linhagens de células HepG2 foram incubadas com peptídeos sintéticos (MELNAVSVVHS e MELNAVSVVSH) identificados como resultado do ensaio de permeação nas células Caco-2. A expressão de RNAm dos transportadores de colesterol NPC1L1, ABCA1 e ABCG1 foi realizada nas células Caco-2 e a expressão de HMGCR, SREBP2, LDLR, LXR, AMPK1 foi avaliada nas células HepG2. Resultados: A exposição das células Caco-2 à fração 3 kDa do hidrolisado (2,5 e 5 mg/mL) aumentou a expressão de ABCG1 nos tempos 6 h e 12 h. O níveis de RNAm dos genes SREBP2, HMGCR e LDLR reduziram nas HepG2 após 24h do tratamento com o peptídeo MELNAVSVVHS (50 M e 100 M). A fração 3 kDa do hidrolisado e os peptídeos LLNPDDEQL; FFFGQDGGSKGEE e LNL foram capazes de reduzir a solubilidade do colesterol micelar in vitro em no máximo 42 por cento , bem como, provocaram mudanças estruturais ao interagirem com a fosfatidilcolina, com destaque ao peptídeo LNL (50 por cento de ligação). O peptídeo LNL foi o único capaz de promover a precipitação do colesterol em forma de cristais devido à interação com os ácidos biliares. Conclusões: A fração 3 kDa do hidrolisado e todos os peptídeos testados foram capazes de insolubilizar o colesterol in vitro. Constata-se que o mecanismo de competição pelo espaço intramicelar com o colesterol se dá pela interação com os componentes micelares e não diretamente com o colesterol. O peptídeo do feijão caupi MELNAVSVVHS foi permeável e foi capaz de reduzir a expressão do fator de transcrição SREBP2 (consequentemente reduzindo HMGCR e LDLR) / Introduction: Food proteins are sources of peptides acting in sevral metabolic processes. There is evidence that cowpea (Vigna unguiculata L. Walp) protein is able to lower cholesterol levels in hamsters and humans, but its permeability after digestion, mechanism of action and direct evidences of peptide participation in cholesterol metabolism are not clear. Objective: To investigate the intestinal permeability and to evaluate the effect on the luminal and endogenous cholesterol metabolism pathways of peptides from cowpea (Vigna unguiculata L. Walp). Methods: The permeability of the cowpea peptides produced by enzymatic hydrolysis was tested on Caco-2 cell lines using Transwell® plates. To investigate the effect on the luminal pathway, three peptides identified in the 3 kDa hydrolyzate fraction (LLNPDDEQL; FFFGQDGGSKGEE and LNL) were tested for in vitro cholesterol and phosphatidylcholine solubilization, cholesterol micelle size changing and interaction with bile acids. To verify the effect on endogenous metabolism, HepG2 cell lines were incubated with synthetic peptides (MELNAVSVVHS or MELNAVSVVSH) identified as a result of the permeation assay on Caco-2 cells. The mRNA expression of the cholesterol transporters NPC1L1, ABCA1 and ABCG1 was performed on Caco-2 cells and the expression of HMGCR, SREBP2, LDLR, LXR, AMPK1 was evaluated in HepG2 cells. Results: Exposure of Caco-2 cells to the 3 kDa hydrolyzate fraction (2.5 and 5 mg/mL) increased ABCG1 expression at 6 h and 12 h times. The mRNA levels of the SREBP2, HMGCR and LDLR genes were reduced in HepG2 after 24h of treatment with the MELNAVSVVHS peptide (50 M and 100 M). The 3 kDa of the hydrolyzate fraction and the peptides LLNPDDEQL; FFFGQDGGSKGEE and LNL were able to reduce the solubility of micellar cholesterol in vitro in a maximum of 42 per cent , as well as, caused structural changes when interacting with phosphatidylcholine, with emphasis on the LNL peptide (50 per cent of binding). The LNL peptide alone was able to promote cholesterol precipitation in the form of crystals due to interaction with bile acids. Conclusions: The 3 kDa hydrolysate fraction and all peptides tested were able to insolubilize cholesterol in vitro. It was observed that the mechanism of competition for the intramicellar space with cholesterol is given by the interaction with the micellar components and not directly with the cholesterol. The MELNAVSVVHS cowpea peptide was permeable and was able to reduce the expression of the SREBP2 transcription factor (thereby reducing HMGCR and LDLR)

Introdução: As proteínas alimentares são fontes de peptídeos atuantes em vários processos metabólicos. Existem evidências de que a proteína do feijão caupi (Vigna unguiculata L. Walp) é capaz de reduzir o colesterol em hamsters e em humanos, porém, a permeabilidade após a digestão, o mecanismo de ação e a evidência direta da participação de peptídeos no metabolismo colesterol não são claros. Objetivo: Investigar a permeabilidade intestinal e avaliar o efeito nas vias luminal e endógena do metabolismo do colesterol de peptídeos provenientes de feijão caupi (Vigna unguiculata L. Walp). Metodologia: A permeabilidade dos peptídeos provenientes do caupi produzidos por hidrólise enzimática foi testada em linhagens de células Caco-2 usando placas Transwell®. Para investigar o efeito na via luminal, três peptídeos identificados na fração 3 kDa do hidrolisado (LLNPDDEQL; FFFGQDGGSKGEE e LNL) foram testados na solubilização de colesterol e fosfatidilcolina, no tamanho das micelas de colesterol e interação com ácidos biliares in vitro. Para verificar o efeito no metabolismo endógeno, linhagens de células HepG2 foram incubadas com peptídeos sintéticos (MELNAVSVVHS e MELNAVSVVSH) identificados como resultado do ensaio de permeação nas células Caco-2. A expressão de RNAm dos transportadores de colesterol NPC1L1, ABCA1 e ABCG1 foi realizada nas células Caco-2 e a expressão de HMGCR, SREBP2, LDLR, LXR, AMPK1 foi avaliada nas células HepG2. Resultados: A exposição das células Caco-2 à fração 3 kDa do hidrolisado (2,5 e 5 mg/mL) aumentou a expressão de ABCG1 nos tempos 6 h e 12 h. O níveis de RNAm dos genes SREBP2, HMGCR e LDLR reduziram nas HepG2 após 24h do tratamento com o peptídeo MELNAVSVVHS (50 M e 100 M). A fração 3 kDa do hidrolisado e os peptídeos LLNPDDEQL; FFFGQDGGSKGEE e LNL foram capazes de reduzir a solubilidade do colesterol micelar in vitro em no máximo 42 por cento , bem como, provocaram mudanças estruturais ao interagirem com a fosfatidilcolina, com destaque ao peptídeo LNL (50 por cento de ligação). O peptídeo LNL foi o único capaz de promover a precipitação do colesterol em forma de cristais devido à interação com os ácidos biliares. Conclusões: A fração 3 kDa do hidrolisado e todos os peptídeos testados foram capazes de insolubilizar o colesterol in vitro. Constata-se que o mecanismo de competição pelo espaço intramicelar com o colesterol se dá pela interação com os componentes micelares e não diretamente com o colesterol. O peptídeo do feijão caupi MELNAVSVVHS foi permeável e foi capaz de reduzir a expressão do fator de transcrição SREBP2 (consequentemente reduzindo HMGCR e LDLR) / Introduction: Food proteins are sources of peptides acting in sevral metabolic processes. There is evidence that cowpea (Vigna unguiculata L. Walp) protein is able to lower cholesterol levels in hamsters and humans, but its permeability after digestion, mechanism of action and direct evidences of peptide participation in cholesterol metabolism are not clear. Objective: To investigate the intestinal permeability and to evaluate the effect on the luminal and endogenous cholesterol metabolism pathways of peptides from cowpea (Vigna unguiculata L. Walp). Methods: The permeability of the cowpea peptides produced by enzymatic hydrolysis was tested on Caco-2 cell lines using Transwell® plates. To investigate the effect on the luminal pathway, three peptides identified in the 3 kDa hydrolyzate fraction (LLNPDDEQL; FFFGQDGGSKGEE and LNL) were tested for in vitro cholesterol and phosphatidylcholine solubilization, cholesterol micelle size changing and interaction with bile acids. To verify the effect on endogenous metabolism, HepG2 cell lines were incubated with synthetic peptides (MELNAVSVVHS or MELNAVSVVSH) identified as a result of the permeation assay on Caco-2 cells. The mRNA expression of the cholesterol transporters NPC1L1, ABCA1 and ABCG1 was performed on Caco-2 cells and the expression of HMGCR, SREBP2, LDLR, LXR, AMPK1 was evaluated in HepG2 cells. Results: Exposure of Caco-2 cells to the 3 kDa hydrolyzate fraction (2.5 and 5 mg/mL) increased ABCG1 expression at 6 h and 12 h times. The mRNA levels of the SREBP2, HMGCR and LDLR genes were reduced in HepG2 after 24h of treatment with the MELNAVSVVHS peptide (50 M and 100 M). The 3 kDa of the hydrolyzate fraction and the peptides LLNPDDEQL; FFFGQDGGSKGEE and LNL were able to reduce the solubility of micellar cholesterol in vitro in a maximum of 42 per cent , as well as, caused structural changes when interacting with phosphatidylcholine, with emphasis on the LNL peptide (50 per cent of binding). The LNL peptide alone was able to promote cholesterol precipitation in the form of crystals due to interaction with bile acids. Conclusions: The 3 kDa hydrolysate fraction and all peptides tested were able to insolubilize cholesterol in vitro. It was observed that the mechanism of competition for the intramicellar space with cholesterol is given by the interaction with the micellar components and not directly with the cholesterol. The MELNAVSVVHS cowpea peptide was permeable and was able to reduce the expression of the SREBP2 transcription factor (thereby reducing HMGCR and LDLR)

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-10-04T17:35:36Z No. of bitstreams: 1 2013 - Fernanda Santana de Paulo.pdf: 1349643 bytes, checksum: 8da583439baf6dcac85c9ddb6af5ffbc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-04T17:35:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013 - Fernanda Santana de Paulo.pdf: 1349643 bytes, checksum: 8da583439baf6dcac85c9ddb6af5ffbc (MD5) Previous issue date: 2013-02-27 / CAPES / Embrapa / The cowpea bean is a legume that has a wide economic potential, but it has not been explored efficiently. For this reason it has shown a yield potential far from the expectations of a so efficient legume in NBF as can be. The objective of this study is to obtain appropriate levels of P, Co, Mo nutrients. It is believed that these nutrients can optimize nodulation, nitrogen biological fixation and the growth of cowpea bean plants in representative soils from Cerrado, Mato Grosso. Based on the chemical analysis from the soil cited before, calculations for fertilization and liming were made. From the results obtained, were established doses for the elements of the present work (P, Co and Mo). The experiment was conducted in a greenhouse conditions and performed in a randomized block design. It was used a factorial arrangement 2 x 5 (2 soils; five doses of each element of the present study ? inoculated with 3262 strain) + 1 + 3 replicates. The additional treatment (+1) was included to evaluate crop performance when applied 50 Kg.ha-1 of nitrogen. The study was split in two trials. In the first trial, different dosages of phosphorous were tested: control (without Phosphorus application); low (44 mg.vase-1 of P), medium (88 mg.vase-1 of P), medium-low (130mg.vase-1 of P) and high (175 mg.vaso-1 of P). These tests were made to obtain a optimum dosage. In the second trial, cobalt and molybdenum nutrient was tested as the following levels respectively: 0, 2, 3, 4, 6 mg and 0, 8, 16, 32 and 64 mg. In the thirty-fifth day, the experiment developed in a greenhouse was collected. From the plants were evaluated height and plant diameter, nodulation (dry matter and number of nodules), shoot dry matter, root dry matter, chlorophyll content and N accumulation in shoot. The 88mg of P.vase-1 dosage that corresponds to 200 kg.ha-1 of P2O5 and the medium-high Cobalt and Molybdenum dosage that corresponds the application of 32g of Mo.ha-1 + 4g.ha-1 of Co provided higher nodulation in cowpea bean plants with consequent increase of biomass and nitrogen accumulation. The site where soil was collected had influence on the development and on the nodulation of the cowpea bean crop, when submitted to different dosages of P and Co+Mo. / O feij?o-caupi ? uma leguminosa de vasto potencial econ?mico, por?m n?o est? sendo explorado de maneira eficiente apresentando-se com potencial produtivo bem aqu?m das expectativas de uma leguminosa t?o eficiente em FBN. Sendo ent?o, o objetivo deste trabalho obter os n?veis adequados dos nutrientes P, Co e Mo que otimizem a nodula??o, a fixa??o biol?gica de nitrog?nio e o crescimento de plantas de feij?o-caupi em solos representativos do Cerrado do Mato Grosso. Com base na an?lise qu?mica do solo, foram realizados os c?lculos da necessidade de calagem e aduba??o e foram estabelecidas as doses dos elementos em estudo (P, Co e Mo). O experimento foi realizado em condi??es de casa de vegeta??o. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso em esquema fatorial 2 x 5 (2 solos; 5 doses de cada elemento de estudo ? inoculadas com a estirpe 3262) +1 e 3 repeti??es. O tratamento adicional (+1) foi inclu?do para avaliar o desempenho da cultura na dose de N proporcional a 50 kg.ha-1. O trabalho foi dividido em dois ensaios, onde primeiro foram testadas dosagens diferenciadas de f?sforo que foram denominadas: controle, (sem aplica??o de F?sforo); baixa (44 mg.vaso-1 de P), m?dia (88 mg.vaso-1 de P), m?dia-alta (130 mg.vaso-1 de P), alta (175 mg.vaso-1 de P) para a obten??o de uma dosagem ?tima. Na segunda fase, foram testados os micronutrientes Co nas doses: 0, 2,3 ,4 ,6 mg e Mo nas doses: 0, 8, 16, 32 e 64 mg. Em casa de vegeta??o, aos 35 dias foi feita a coleta, as vari?veis avaliadas foram: altura e di?metro da planta, nodula??o (massa de n?dulos secos e n?mero de n?dulos), massa seca da parte a?rea, massa seca da raiz, teor de clorofila e ac?mulo de N na parte a?rea. A dose de 88 mg de P. vaso-1, que corresponde a 200 kg.ha-1de P2O5 e at? a dose m?dia-alta de cobalto e molibd?nio com correspondente a aplica??o de 32 g de Mo. ha-1 + 4 g ha-1de Co proporcionou maior nodula??o das plantas de feij?o-caupi com consequente aumento da biomassa do vegetal e ac?mulo de nitrog?nio. O local de coleta de solo influenciou no desenvolvimento e nodula??o da cultura do feij?o-caupi, quando submetida a diferentes doses de P e Co+Mo.

The cowpea culture has a huge alimentary importance; it is one of the most cultivated by the rural zone population of North/Northeastern of Brazil. Abiotic stress such as droughts can reduce the crop yield. Therefore, the identification and understanding of the drought tolerance mechanisms are fundamental when selecting cultivars more tolerant to water deficit. This paperwork had as objective the study of ecophysiological and biochemical responses showed by the cultivation of cowpea ´BRS-xiquexique´ when submitted to different water regimes. The studies of the ecophysilogical responses and biochemical analyses were realized in the agricultural greenhouse and in the Botany Department of Biology applied laboratory at the Federal University of Sergipe, located in São Cristóvão-SE. For the cultivation were used vases with 10 litres containing soil composed of vegetal land and washed sand in a proportion of 2:1. There were sown 4 seeds by vase but after 15 days the 2 more vigorous were chosen. By the 46th day of cultivation the irrigation was suspended. The trial design was made with three treatments and five repetitions (T0 = 100% repositioning of the daily lost water by the plant, T1 = 50% repositioning of the daily lost water by the plant, T2 = 25% repositioning of the daily lost water by the plant). Always in the interval of 8am to 8:30am the vases were weighed and the water lost in the last 24 hours was the answer for the established proportions for each treatment. During the experiments, ecophysiological analyses were done every two days and the biochemical analyses, every four days. The ecophysiological studied variables were transpiration (E), stomatal conductance (gs), liquid photosynthesis (A), leaf water potential (ψ), CO2 concentration (Ci) and total chlorophyll. Establishing the ratio of photosynthesis and transpiration it was determined the efficiency of water use (A/E). For the biochemical studies, the variables were the soluble sugar content, level of proline, level of proteins, level of chlorophylls a and b. Every cophsyological and biochemical data was submitted to variance analyses and the averages were compared through Tukey test, by the level of 5% significance with the aid of the statistical programme GraphPad Prism. Version 4.0. Through the results analysis it was possible to identify correlation between water abolition and the ecophysiological responses presented. There was decline in the following values: water potential, transpiration rate, stomatal conductance, liquid photosynthesis and efficient use of water. There was increase in: internal concentration of CO2 and leaf temperature. For the stomatal conductance there was no significant differences between the plants of the treatments T1 and T2, however, there were differences among them and treatment T0 (witness). For the other variables, it could be observed important differences even though in isolated days. Concerning to the biochemical responses, in general there were no changes in levels of the studied variables, susceptible to correlation to the water disability. / A cultura do feijão-caupi é de grande importância alimentar, destacando-se como uma das mais cultivadas pelas populações da zona rural do Norte/Nordeste do Brasil. Estresses abióticos como a seca podem reduzir os rendimentos das lavouras. Portanto, a identificação e a compreensão dos mecanismos de tolerância à seca são fundamentais para a seleção de cultivares mais tolerantes ao déficit hídrico. Este trabalho teve como objetivo o estudo das respostas ecofisiológicas e bioquímicas apresentadas pela cultivar de feijão-caupi BRSXiquexique quando submetida a diferentes regimes hídricos. Os estudos das respostas ecofisiológicas e bioquímicas foram conduzidos na estufa agrícola e no Laboratório de Botânica Aplicada do Departamento de Biologia da Universidade Federal de Sergipe, localizada no município de São Cristóvão-SE. Para o cultivo foram usados vasos com capacidade de 10 litros contendo solo composto de terra vegetal e arei lavada na proporção de 2:1. Foram semeadas 4 sementes por vaso e após 15 dias foi feito desbaste deixando-se apena as duas plantas mais desenvolvidas. O cultivo seguiu em condições semi-controladas até o 46º dia quando foram suspensas a irrigações. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com três tratamentos e cinco repetições (T0 = reposição de 100% da quantidade de água perdida diariamente pela planta; T1 = reposição de 50% da quantidade de água perdida diariamente pela planta e T2 = reposição de 25% da quantidade de água perdida diariamente pela planta). Sempre das 08h00min às 08h30min os vasos foram pesados e reposta a água perdida nas 24 horas anteriores nas proporções estabelecidas por cada tratamento. Durante os experimentos foram feitas análises ecofisiológicas, a cada dois dias, e bioquímicas, a cada quatro dias. As variáveis ecofisiológicas estudadas foram transpiração (E), condutância estomática (gs), fotossíntese líquida (A), potencial hídrico foliar (Ψ), concentração interna de CO2 (Ci) e clorofila total. Estabelecendo a razão entre fotossíntese e transpiração determinou-se a eficiência do uso da água (A/E). Já as variáveis bioquímicas estudadas foram teor de açúcares solúveis, teor de prolina, teor de proteína e teores das clorofilas a e b. Todos os dados ecofisiológicos e bioquímicos obtidos foram submetidos à análise de variância e as médias foram comparadas mediante teste de Tukey, ao nível de 5% de significância com auxílio do programa estatístico GraphPad Prism. Versão 4.0. Por meio das análises dos resultados foi possível identificar correlação entre a supressão hídrica e as respostas ecofisiológicas apresentadas. Houve quedas nos potenciais hídricos, nas taxas de transpiração, condutância estomática, fotossíntese líquida, uso eficiente da água e aumentos nas concentrações internas de CO2 e nas temperaturas foliares. Não houve diferenças significativas entres as plantas dos tratamentos T1 e T2 para a variável Condutância estomática enquanto que nas outras puderam ser observadas diferenças mesmo que em dias isolados. Em relação às respostas bioquímicas no geral não houve mudanças nos teores das variáveis estudadas passíveis de correlação com a deficiência hídrica.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-08-10T13:22:32Z No. of bitstreams: 1 Maria de Fatima da Silva.pdf: 619107 bytes, checksum: 566cd7dafe2052de47a3a66eb87eda27 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-10T13:22:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria de Fatima da Silva.pdf: 619107 bytes, checksum: 566cd7dafe2052de47a3a66eb87eda27 (MD5) Previous issue date: 2011-02-28 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Cowpea (Vigna unguiculata (L.) Walp) in Brazil is grown in the most different climatic conditions. By the adaptability to tropical conditions and recognized as a culture of high socioeconomic value, this legume has an important role for the capitalization of small farmers in the Northeast region. Cowpea may obtain adequate quantities of N by the process of biological nitrogen fixation (FBN) when associated with specific and effective bacteria. However, in Brazil the practice of inoculation is not widely processed due to the low agricultural technology and inconsistent responses using the seed inoculation process. The main goal of this study was to evaluate the effect of different rates of inoculum on effectivity and competitiveness of Bradyrhizobium (strain BR 3267) on cowpea grown in greenhouse conditions. The first experiment was carried out with five different concentration of strain BR 3267 (rhizobia cells/mL of inoculant), N mineral fertilizer treatment without inoculation, and a control without inoculation and N mineral fertilizer. The second experiment conducted in Leonard jars with inoculant produced with BR 3267 strain, 15 native rhizobia (isolated from the used soil), and a control treatment without inoculation and no N mineral fertilizer applied. The application of the low recommended rate increased number and dry biomass of nodules, shoot dry biomass and shoot N total uptake. In the Leonard jars experiment the rhizobia strain BR 3267 was more effective on nitrogen fixation and showed greater competitiveness compared to the native rhizobia isolates. The BRS Pujante cultivar was benefit by the FBN process when inoculated with strain BR 3267 proportional to the inoculum rate. / O feijão - caupi (Vigna unguiculata (L.) Walp.) é cultivado, no Brasil, nas mais diferentes condições edafoclimáticas. Devido a sua boa adaptabilidade às condições tropicais e por ser uma cultura de alto valor sócio-econômico, tem um papel importante para a capitalização de pequenos agricultores na região Nordeste. Por ser uma leguminosa, o feijão-caupi pode adquirir N em quantidades adequadas para suprir suas necessidades através do processo de fixação biológica do nitrogênio (FBN) quando associado com bactérias específicas e efetivas. Entretanto a prática da inoculação não é muito utilizada devido ao baixo aporte tecnológico nas aéreas de cultivo e respostas inconsistentes com os inoculantes utilizados. O objetivo do presente estudo foi de avaliar o efeito da aplicação de diferentes taxas de inóculo, habilidade competitiva e eficiência para a FBN da estirpe de Bradyrhizobium sp. BR 3267 na cultura do feijão-caupi em casa de vegetação. No primeiro experimento, conduzido em vasos com solo foram usados sete tratamentos, compreendendo cinco concentrações de células da estirpe BR 3267 (células/mL de inoculante), um tratamento sem inoculação e com adição de fertilizante nitrogenado, e um controle sem inoculação e sem adição de fertilizante nitrogenado. O segundo experimento constituiu de 17 tratamentos, compostos por 15 estirpes nativas, a estirpe BR 3267 e um tratamento sem inoculação e sem adição de nitrogênio, em vasos de Leonard com substrato estéril. A aplicação da dose mínima recomendada incrementou número e biomassa seca dos nódulos, biomassa seca da parte aérea e o acúmulo de nitrogênio na parte aérea. Em substrato estéril a população rizobiana nativa não foi mais eficiente quando comparada à estirpe BR 3267. A estirpe BR 3267 foi mais competitiva e eficiência em relação à população rizobiana nativa. A cultivar BRS Pujante foi mais beneficiada pela FBN quando inoculada com a estirpe BR 3267, proporcionalmente à taxa de inóculo.