Croton é o segundo maior gênero de Euphorbiaceae, com aproximadamente 1.300 espécies, sendo 300 delas existentes no Brasil em diversos biomas. Várias espécies apresentam um característico látex vermelho-sangue, chamado \"sangue-de-dragão\", sendo usadas mundialmente na medicina tradicional. Estudos químicos indicam a presença de múltiplas classes de compostos, sendo as principais: diterpenos (clerodanos, labdanos, kauranos e traquilobanos), óleos voláteis, esteroides e triterpenoides, alcaloides, proantocianidinas e flavonoides. Estes últimos são metabólitos secundários com grande variedade estrutural, possuindo atividades biológicas reconhecidas e de potencial interesse medicinal. Croton floribundus Spreng. e Croton urucurana Baill., por apresentarem várias atividades biológicas de interesse medicinal, são utilizadas na medicina tradicional. Entretanto, poucos estudos têm sido desenvolvidos no sentido de se conhecer melhor aquela classe de substâncias fenólicas. Um dos objetivos deste trabalho corresponde ao isolamento e identificação de flavonoides de folhas de Croton floribundus e Croton urucurana. O material pulverizado foi extraído por refluxo com metanol 80% e concentrado. O extrato seco foi tratado com tolueno e diclorometano. A fase metanólica resultante foi fracionada e subfracionada por meio de cromatografia em coluna de PVPP e Sephadex LH-20, e cromatografia em papel. Depois de fracionadas, as amostras foram analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e os compostos identificados por ressonância magnética nuclear de hidrogênio (1H) e carbono (13C) ou por CLAE com co-injeção de amostras autênticas. Em ambas as espécies foi identificado o flavonoide acilado tilirosídeo (5). Este parece ser um flavonoide característico do gênero. É um derivado acilado de kaempferol, isolado de um grande número de espécies de Croton. Em C.floribundus foram identificados três triglicosídeos: alcesefolisídeo (1), mauritianina (2), e isoramnetina-3-O-(2,6-di-ramnosil)-galactosídeo (3). Foram identificados também: quercetina-3-O-glucosídeo (4), helicrisosídeo-3\'-metil-éter (6), kaempferol (7), isoramnetina (8) 3-O-metil-kaempferol (9) e 3-O-metil isoramnetina (10). Em C.urucurana, foram identificados: orientina (11), rutina (12), vitexina (13), quercetina-7-O-ramnosídeo (14), ramnetina-3-O-ramnosídeo (15) e quercetina (16). Os flavonoides 1, 3, 14 mostraram-se inéditos, tanto para o gênero, quanto para a família. O flavonoide 15 foi inédito para o gênero, tendo sido encontrado na família, porém, na subfamília Euphorbioideae. Com a detecção do tilirosídeo, foi verificada a possibilidade de se utilizar os extratos proteicos de folhas jovens dessas duas espécies para acilar enzimaticamente flavonoides de interesse, pois estudos na literatura indicam que a acilação pode aumentar a estabilidade e biodisponibilidade de flavonoides, e também melhorar suas atividades biológicas. Para isso, folhas jovens foram coletadas e mantidas em N2 líquido, trituradas e extraídas com tampão de extração. O extrato obtido foi concentrado, sua concentração proteica foi determinada e, posteriormente, foi utilizado para acilar os substratos quercetina-3-O-glucosídeo, kaempferol-3-O-glucosídeo, quercetina-3-O-galactosídeo e quercetagetina-7-O-glucosídeo. p-Cumaroil-CoA e uma mistura de ácido p-cumárico e Coenzima A, foram utilizados como agentes acilantes. Foi verificado que o rendimento do extrato proteico de C.floribundus foi menor que o de C.urucurana. Enquanto o extrato de C.urucurana acilou os substratos glicosilados na posição 3, (kaemferol-3-O-glucosídeo, quercetina-3-O-glucosídeo e quercetina-3-Ogalactosídeo), não acilou o mono-glicosilado na posição 7 (quercetagetina-7-Oglucosídeo), indicando que as aciltransferases dessa espécie são regiosseletivas quanto à posição do resíduo de açúcar. Também demonstrou capacidade de acilação usando como agentes acilantes p-cumaroil-CoA e a combinação ácido p-cumárico + CoA + ATP. O extrato proteico de C.floribundus, talvez por ter apresentado um menor rendimento de extração, acilou apenas o kaempferol-3-O-glucosídeo, resultando no tilirosídeo, o flavonoide acilado característico do gênero / Croton is the second largest genus of Euphorbiaceae, with approximately 1,300 species, 300 among them native from Brazilian biomes. Several species of the genus, used worldly in traditional medicine, possess a characteristic blood colored latex, called \"dragon\'s blood\". Chemical studies about Croton species have uncovered multiple classes of secondary metabolites, such as diterpenes (clerodanes, labdanes, kauranes and trachylobanes), volatile oils, steroids and triterpenoids, alkaloids, proanthocyanidins and flavonoids. The latter are secondary metabolites with high structural diversity and recognized as having biological activities with medicinal potential. Croton floribundus Spreng. and C. urucurana Baill. have shown several medicinally promising biological activities and are used in traditional medicine. However, few investigations have been performed aiming the flavonoid chemistry of any of the two species. One of the objectives of the present study is the isolation and identification of flavonoids from leaves of C. floribundus and C. urucurana. Powdered material from both species was extracted by reflux with 80% methanol. The dry extracts were treated with toluene and dichloromethane, lyophilized and solubilized in methanol. The methanol solution was analyzed by polyvinylpolypyrrolidone column chromatography (PVPP-CC). The fractions obtained were further analyzed by PVPP-CC, Sephadex LH-20 column chromatography and paper chromatography. The fractions and isolated compounds obtained were analyzed by HPLC. Isolated compounds were identified by 1H and 13C NMR and HPLC co-chromatography with authentic samples. The acylated flavonol tiliroside (5) was obtained from extracts of both species. It seems to be a characteristic marker of the genus, having been reported for a high number of Croton species. From the leaf extract of C. floribundus three triglycosides were obtained in the present work: alcesefoliside (1), mauritianin (2) and isorhamnetin-3-O-(2,6-dirhamnosyl)-galactoside (3). Other glycosides identified were quercetin-3-O-glucoside (4), 3\'-helichrysoside-3-O-methyl ether (6), kaempferol (7), isorhamnetin (8), 3-O-methyl-kaempferol (9) and 3-O-methyl-isorhamnetin (10). The following compounds were obtained from C. urucurana: orientin (11), rutin (12), vitexin (13), quercetin-7-O-rhamnoside (14), rhamnetin-3-O-rhamnoside (15) and quercetin (16). Flavonoids 1, 3 and 14 are new regarding genus Croton and family Euphorbiaceae. Flavonoid 15 was previously found in subfamily Euphorbioideae and is now reported for the first time in Croton. Taking into account the detection of tiliroside in the material analyzed, and that acylation increases both stability and bioavailability of flavonoids, while enhancing their biological activity, an approach was planned to use protein extracts of young leaves of both species aiming the enzymatic acylation of several flavonoids. Young leaves were maintained in liquid N2, ground and treated with extraction buffer. The extract obtained was concentrated and mixed with p-coumaroyl-CoA and a mix of p-coumaric acid and Coenzyme A. The extract was used in assays aiming the acylation of quercetin-3-O-glucoside, kaempferol-3-O-glucoside, quercetin-3-O-galactoside and quercetagetin-7- O-glucoside. The concentration of the protein extract from C. floribundus was lower than that of C. urucurana. The extract from C. urucurana acylated the 3-O-glycosilated substrata kaempferol-glucoside, quercetin-glucoside and quercetin-galactoside, but was ineffective toward quercetagetin-7-O-glucoside. These results suggest that acyltransferases in the extract are regioselective about the position of attachment of the sugar moiety. They were shown to be effective using either p-coumaroyl or the combination p-coumaroyl-CoA + ATP. C. floribundus protein extract acylated only kaempferol-3-O-glucoside, yielding tiliroside, the characteristic acylated flavonoid of Croton

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:54:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LARA CANDIDA DE SOUSA MACHADO.pdf: 3187014 bytes, checksum: c478f4284cb57a232b5b7079c413a8db (MD5) Previous issue date: 2012-12-19 / INTRODUCTION: The herbal and other natural products are widely used therapeutic resources to aid the healing of skin wounds of early civilization to the present. Among the plants used for treatment of infected wounds, the Croton urucurana stands out for being a healing plant that accelerates the healing process. OBJECTIVE: To evaluate the healing activity of extracts of the stem bark of Croton urucurana skin wounds in mice, induced by Bothrops moojeni. METHODOLOGY: The ethanolic extract from the stem bark of Croton urucurana (EECC) obtained through a maceration dynamic process, was diluted in saline to obtain concentrations of 10%, 20% and 40%. It was stablished a pilot experiment to determine the minimum dose necrotizing using mice (n = 5) of Swiss lineage, males with body mass index ranging from 18 to 25g. To evaluate the healing activity, it was performed in mice (n = 60) of the same type and with the same characteristics were randomly divided into five groups of twelve animals each (n = 12): GC - Control Group, GS - Group Soro, GT1 - Group Treatment with 10% EECC, GT2 - Group Treatment EECC to 20% and GT3 - Group Treatment EECC to 40%. For induction of the wound, the animals were anesthetized intramuscularly with sodium thiopental at the dose of 40mg/kg. After shaving the dorsum of the mice,it was inoculated intradermally 120μg/50µL of saline in order to obtain a necrose. RESULTS: The minimum necrotic dose of venom from Bothrops moojeni in mice is 120 mg of venom diluted into 50 uL intradermally saline in the dorsal region. There was a significant decrease of skin wounds of the GT1 group in 7th and 12th days compared to the GC. There was a significant decrease of skin wounds of the group GT2 and GT3 on the 12th day compared to the GC.The Histological analysis of the groups GT1, GT2 and GT3 allows to conclude that the skin wounds show a process of evident scarring at 12 days of treatment compared to the GC, by stimulating angiogenesis, neoformation of hair follicles and fibrous repair. CONCLUSION: The skin wounds in mice induced by the venom of Bothrops moojeni when treated with EECC (10%, 20% and 40%), have a more rapid healing process in the control group. / INTRODUÇÃO: As plantas medicinais e outros produtos naturais são recursos terapêuticos amplamente utilizados no auxílio da cicatrização de feridas cutâneas dos primórdios da civilização até a atualidade. Dentre as plantas utilizadas para tratamento de feridas infectadas, a Croton urucurana se destaca, por ser uma planta com poderes curativos e que aceleram o processo de cicatrização. OBJETIVO: Avaliar a atividade cicatrizante de extratos das cascas do caule de Croton urucurana nas feridas cutâneas de camundongos, induzidas pelo veneno de Bothrops moojeni. METODOLOGIA: O extrato etanólico das cascas do caule da Croton urucurana (EECC) obtido através de um processo de maceração dinâmica, foi diluído em solução salina para obtenção das concentrações de 10%, 20% e 40%. Foi realizado um experimento piloto para determinação da dose mínima necrosante, utilizando camundongos (n=5) da linhagem Swiss, machos, com massa corpórea variando de 18 a 25g. Para avaliação da atividade cicatrizante foram utilizados camundongos (n=60) da mesma espécie e com as mesmas características, distribuídos aleatoriamente em cinco grupos de doze animais cada (n=12): GC Grupo Controle, GS Grupo Soro, GT1 Grupo Tratamento com EECC a 10%, GT2 Grupo Tratamento com EECC a 20% e GT3 Grupo Tratamento com EECC a 40%. Para indução da ferida, os animais foram anestesiados via intramuscular com tiopental sódico na dose de 40 mg/Kg. Após a tricotomia no dorso do camundongo, foi inoculado intradermicamente 120 µg/50 µL de salina, afim de se obter uma necrose.RESULTADOS: A dose mínima necrosante do veneno de serpente Bothrops moojeni em camundongo é de 120 µg de peçonha diluída em 50 µL salina intradermicamente da região dorsal. Houve retração significativa das feridas cutâneas do grupo GT1 nos dias 7º e 12º em relação ao grupo GC. Houve retração significativa das feridas cutâneas do grupo GT2 e GT3 no 12º dia em relação ao grupo GC. A análise histológica dos grupos GT1, GT2 e GT3 permitem concluir que as feridas cutâneas apresentam processo de cicatrizações evidentes em 12 dias de tratamento em relação ao grupo GC, por estimular a angiogênese, neoformação dos folículos pilosos e reparação fibrosa. CONCLUSÃO: As feridas cutâneas em camundongos induzidos pela peçonha de Bothrops moojeni quando tratadas com EECC (10%, 20% e 40%), apresentam um processo de cicatrização mais acelerado em relação ao grupo controle.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O lÃtex vermelho (Sangre de Grado) extraÃdo de algumas espÃcies de Croton à utilizado na medicina popular no tratamento de cÃncer, reumatismo, feridas, Ãlceras, diarrÃia, cÃlicas intestinais e no combate Ãs infecÃÃes. O presente trabalho teve por objetivo investigar uma possÃvel atividade antimicrobiana do lÃtex do Croton urucurana Baill. (LCU) e seu potencial antiinflamatÃrio intestinal e antinociceptivo visceral. Foram utilizados os modelos de colite induzida por Ãcido acÃtico e lesÃo intestinal induzida por isquemia-reperfusÃo mesentÃrica em ratos; contorÃÃes abdominais induzidas por Ãcido acÃtico, cistite induzida por ciclofosfamida e dor visceral induzida por capsaicina em camundongos; alÃm de modelos, in vitro, avaliando as atividades antibacteriana e antifÃngica do LCU. No modelo de colite induzida por Ãcido acÃtico, o prÃ-tratamento com LCU (200 e 400 mg/kg, v.r.) reduziu (p<0,05) a relaÃÃo peso Ãmido/comprimento do cÃlon, a atividade das enzimas mieloperoxidase e catalase e a produÃÃo de nitrito em relaÃÃo ao controle. No modelo de isquemia-reperfusÃo mesentÃrica o prÃ-tratamento com o LCU (200 e 400 mg/kg, v.o.) preveniu (p<0,01) o aumento das atividades da mieloperoxidase e catalase e o aumento dos nÃveis de nitrito associados à isquemia-reperfusÃo. O LCU (200 mg/kg) tambÃm preveniu (p<0,001) a reduÃÃo no nÃvel de glutationa reduzida neste modelo. Ambas as doses reduziram (p<0,05) o nÃmero de contorÃÃes induzidas por Ãcido acÃtico, o nÃmero de comportamentos nociceptivos induzidos pela capsaicina e o tempo de comportamentos relacionados a dor visceral na cistite induzida por ciclofosfamida. O prÃ-tratamento com naloxona (5 mg/kg, i.p.) reverteu a atividade antinociceptiva do LCU (200 mg/kg, v.o.) no modelo de dor visceral induzida por capsaicina, contudo, a ioimbina (2 mg/kg, i.p.) nÃo foi capaz de reverter tal efeito. A atividade antinociceptiva do LCU, neste modelo, nÃo foi potencializada pela administraÃÃo de L-nitro arginina metil Ãster (20 mg/kg, i.p.) ou vermelho de rutÃnio (3 mg/kg, s.c.). O LCU nÃo demonstrou atividade contra Staphylococcus aureus e Escherichia coli e as leveduras Candida sp., Trichosporon sp. e Malassezia sp., no entanto, apresentou atividade contra os dermatÃfitos Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton tonsurans, Trichophyton rubrum, Microsporum canis e Epidermophyton floccosum no mÃtodo de difusÃo em discos e demonstrou concentraÃÃo inibitÃria mÃnima de 1,25 mg/mL para o Trichophyton tonsurans e 2,5 mg/mL para as demais espÃcies. Os resultados sugerem que o LCU apresenta atividade antiinflamatÃria intestinal, possivelmente por sua aÃÃo antioxidante, alÃm de atividades antinociceptiva visceral e antifÃngica. Sua atividade antinociceptiva nÃo depende de mecanismo &#945;2-adrenÃrgico, contudo parece haver envolvimento de mecanismo nitriÃrgico e opiÃide, assim como de receptores vanilÃides. Estes resultados confirmam o uso popular do LCU e este pode ser explorado como alternativa para o tratamento das dermatofitoses, das doenÃas inflamatÃrias intestinais e dos distÃrbios da funÃÃo gastrointestinal / The red sap (Sangre de Grado) extracted from some Croton species is used in folk medicine for the treatment of cancer, rheumatism, wounds, ulcers, diarrhoea, intestinal colics and to combat infections. The aim of this study was to evaluate a possible antimicrobian activity of the sap extracted from Croton urucurana Baill. (SCU) and its intestinal antiinflammatory and visceral antinociceptive potential. The experimental models used were acetic acid-induced colitis and mesenteric ischemia/reperfusion-induced intestinal injury in rats; acetic acid-induced writhing, cyclophosphamide-induced cystitis and capsaicin-induced visceral pain in mice; and in vitro models to evaluate the antibacterian and antifungal activities of SCU. In the acetic acid-induced colitis, the pretreatment with SCU (200 and 400 mg/kg, r.r.) reducted (p<0,05) the wet weight/length ratio of colonic tissue, the myeloperoxidase and catalase activities and the nitrite production in comparison to control animals. In mesenteric ischemia/reperfusion model the pretreatment with SCU (200 and 400 mg/kg, p.o.) prevented (p<0,01) the increase in the myeloperoxidase and catalase activities and the ischemia/reperfusion-associated increase in nitrite level. The SCU (200 mg/kg, p.o.) also prevented (p<0,001) the depletion in reduced glutathione level in this model. Both doses reduced (p<0,05) the number of acetic acid-induced writhing, the number of capsaicin-induced nociceptive behaviour and the time of visceral pain-related behaviour in cyclophosphamide-induced cystitis in mice. The pretreatment with naloxone (5 mg/kg, i.p.) reverted the SCU (200 mg/kg, p.o.) antinociceptive activity in capsaicin-induced visceral pain model, however, ioimbine (2 mg/kg, i.p.) failed to mitigate in a significant manner, this antinociceptive effect. The SCU antinociceptive activity, in this model, was not potentiated by L-nitro-arginine-methyl esther (20 mg/kg, i.p.) or rutheniun red (3 mg/kg, s.c.). SCU failed to show activity against the bacterias (Staphylococus aureus and Escherichia coli) and yeasts tested (CÃndida sp., Trichosporon sp. and Malassezia sp.), although, presented activity against the dermatophytes Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton tonsurans, Trichophyton rubrum, Microsporum canis and Epidermophyton floccosum in paper disk diffusion method and showed minimal inhibitory concentration of 1,25 mg/mL for Trichophyton tonsurans and 2,5 mg/mL for the others species. In conclusion, the results of this study suggest that the SCU presents intestinal antiinflammatory activity, possible because of its antioxidant action, visceral antinociceptive activity and antifungal activity against dermatophytes. Its antinociceptive effect is probable dependent of opioid and nitriergic mechanism, with a possible participation of vaniloid receptors without involvement of &#945;2-adrenergic receptors. This results confirm its popular use, and it can be explored as an alternative treatment for dermatophytosis, inflammatory intestinal diseases and functional gastrointestinal disorders

Croton é o segundo maior gênero de Euphorbiaceae, com aproximadamente 1.300 espécies, sendo 300 delas existentes no Brasil em diversos biomas. Várias espécies apresentam um característico látex vermelho-sangue, chamado \"sangue-de-dragão\", sendo usadas mundialmente na medicina tradicional. Estudos químicos indicam a presença de múltiplas classes de compostos, sendo as principais: diterpenos (clerodanos, labdanos, kauranos e traquilobanos), óleos voláteis, esteroides e triterpenoides, alcaloides, proantocianidinas e flavonoides. Estes últimos são metabólitos secundários com grande variedade estrutural, possuindo atividades biológicas reconhecidas e de potencial interesse medicinal. Croton floribundus Spreng. e Croton urucurana Baill., por apresentarem várias atividades biológicas de interesse medicinal, são utilizadas na medicina tradicional. Entretanto, poucos estudos têm sido desenvolvidos no sentido de se conhecer melhor aquela classe de substâncias fenólicas. Um dos objetivos deste trabalho corresponde ao isolamento e identificação de flavonoides de folhas de Croton floribundus e Croton urucurana. O material pulverizado foi extraído por refluxo com metanol 80% e concentrado. O extrato seco foi tratado com tolueno e diclorometano. A fase metanólica resultante foi fracionada e subfracionada por meio de cromatografia em coluna de PVPP e Sephadex LH-20, e cromatografia em papel. Depois de fracionadas, as amostras foram analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e os compostos identificados por ressonância magnética nuclear de hidrogênio (1H) e carbono (13C) ou por CLAE com co-injeção de amostras autênticas. Em ambas as espécies foi identificado o flavonoide acilado tilirosídeo (5). Este parece ser um flavonoide característico do gênero. É um derivado acilado de kaempferol, isolado de um grande número de espécies de Croton. Em C.floribundus foram identificados três triglicosídeos: alcesefolisídeo (1), mauritianina (2), e isoramnetina-3-O-(2,6-di-ramnosil)-galactosídeo (3). Foram identificados também: quercetina-3-O-glucosídeo (4), helicrisosídeo-3\'-metil-éter (6), kaempferol (7), isoramnetina (8) 3-O-metil-kaempferol (9) e 3-O-metil isoramnetina (10). Em C.urucurana, foram identificados: orientina (11), rutina (12), vitexina (13), quercetina-7-O-ramnosídeo (14), ramnetina-3-O-ramnosídeo (15) e quercetina (16). Os flavonoides 1, 3, 14 mostraram-se inéditos, tanto para o gênero, quanto para a família. O flavonoide 15 foi inédito para o gênero, tendo sido encontrado na família, porém, na subfamília Euphorbioideae. Com a detecção do tilirosídeo, foi verificada a possibilidade de se utilizar os extratos proteicos de folhas jovens dessas duas espécies para acilar enzimaticamente flavonoides de interesse, pois estudos na literatura indicam que a acilação pode aumentar a estabilidade e biodisponibilidade de flavonoides, e também melhorar suas atividades biológicas. Para isso, folhas jovens foram coletadas e mantidas em N2 líquido, trituradas e extraídas com tampão de extração. O extrato obtido foi concentrado, sua concentração proteica foi determinada e, posteriormente, foi utilizado para acilar os substratos quercetina-3-O-glucosídeo, kaempferol-3-O-glucosídeo, quercetina-3-O-galactosídeo e quercetagetina-7-O-glucosídeo. p-Cumaroil-CoA e uma mistura de ácido p-cumárico e Coenzima A, foram utilizados como agentes acilantes. Foi verificado que o rendimento do extrato proteico de C.floribundus foi menor que o de C.urucurana. Enquanto o extrato de C.urucurana acilou os substratos glicosilados na posição 3, (kaemferol-3-O-glucosídeo, quercetina-3-O-glucosídeo e quercetina-3-Ogalactosídeo), não acilou o mono-glicosilado na posição 7 (quercetagetina-7-Oglucosídeo), indicando que as aciltransferases dessa espécie são regiosseletivas quanto à posição do resíduo de açúcar. Também demonstrou capacidade de acilação usando como agentes acilantes p-cumaroil-CoA e a combinação ácido p-cumárico + CoA + ATP. O extrato proteico de C.floribundus, talvez por ter apresentado um menor rendimento de extração, acilou apenas o kaempferol-3-O-glucosídeo, resultando no tilirosídeo, o flavonoide acilado característico do gênero / Croton is the second largest genus of Euphorbiaceae, with approximately 1,300 species, 300 among them native from Brazilian biomes. Several species of the genus, used worldly in traditional medicine, possess a characteristic blood colored latex, called \"dragon\'s blood\". Chemical studies about Croton species have uncovered multiple classes of secondary metabolites, such as diterpenes (clerodanes, labdanes, kauranes and trachylobanes), volatile oils, steroids and triterpenoids, alkaloids, proanthocyanidins and flavonoids. The latter are secondary metabolites with high structural diversity and recognized as having biological activities with medicinal potential. Croton floribundus Spreng. and C. urucurana Baill. have shown several medicinally promising biological activities and are used in traditional medicine. However, few investigations have been performed aiming the flavonoid chemistry of any of the two species. One of the objectives of the present study is the isolation and identification of flavonoids from leaves of C. floribundus and C. urucurana. Powdered material from both species was extracted by reflux with 80% methanol. The dry extracts were treated with toluene and dichloromethane, lyophilized and solubilized in methanol. The methanol solution was analyzed by polyvinylpolypyrrolidone column chromatography (PVPP-CC). The fractions obtained were further analyzed by PVPP-CC, Sephadex LH-20 column chromatography and paper chromatography. The fractions and isolated compounds obtained were analyzed by HPLC. Isolated compounds were identified by 1H and 13C NMR and HPLC co-chromatography with authentic samples. The acylated flavonol tiliroside (5) was obtained from extracts of both species. It seems to be a characteristic marker of the genus, having been reported for a high number of Croton species. From the leaf extract of C. floribundus three triglycosides were obtained in the present work: alcesefoliside (1), mauritianin (2) and isorhamnetin-3-O-(2,6-dirhamnosyl)-galactoside (3). Other glycosides identified were quercetin-3-O-glucoside (4), 3\'-helichrysoside-3-O-methyl ether (6), kaempferol (7), isorhamnetin (8), 3-O-methyl-kaempferol (9) and 3-O-methyl-isorhamnetin (10). The following compounds were obtained from C. urucurana: orientin (11), rutin (12), vitexin (13), quercetin-7-O-rhamnoside (14), rhamnetin-3-O-rhamnoside (15) and quercetin (16). Flavonoids 1, 3 and 14 are new regarding genus Croton and family Euphorbiaceae. Flavonoid 15 was previously found in subfamily Euphorbioideae and is now reported for the first time in Croton. Taking into account the detection of tiliroside in the material analyzed, and that acylation increases both stability and bioavailability of flavonoids, while enhancing their biological activity, an approach was planned to use protein extracts of young leaves of both species aiming the enzymatic acylation of several flavonoids. Young leaves were maintained in liquid N2, ground and treated with extraction buffer. The extract obtained was concentrated and mixed with p-coumaroyl-CoA and a mix of p-coumaric acid and Coenzyme A. The extract was used in assays aiming the acylation of quercetin-3-O-glucoside, kaempferol-3-O-glucoside, quercetin-3-O-galactoside and quercetagetin-7- O-glucoside. The concentration of the protein extract from C. floribundus was lower than that of C. urucurana. The extract from C. urucurana acylated the 3-O-glycosilated substrata kaempferol-glucoside, quercetin-glucoside and quercetin-galactoside, but was ineffective toward quercetagetin-7-O-glucoside. These results suggest that acyltransferases in the extract are regioselective about the position of attachment of the sugar moiety. They were shown to be effective using either p-coumaroyl or the combination p-coumaroyl-CoA + ATP. C. floribundus protein extract acylated only kaempferol-3-O-glucoside, yielding tiliroside, the characteristic acylated flavonoid of Croton

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2015-11-18T08:17:52Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1425978 bytes, checksum: 47bf341b7bf97215f27f8b01fcb80154 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-18T08:17:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1425978 bytes, checksum: 47bf341b7bf97215f27f8b01fcb80154 (MD5) Previous issue date: 2015-07-15 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O câncer é uma doença caracterizada pelo aumento descontrolado da proliferação celular. Em geral ocorrem paralelamente ao aumento do crescimento e perda da diferenciação celular. Assim as células cancerígenas perdem suas características originais de diferenciação e se tornam atípicas. As leucemias são neoplasias malignas que acometem as células do sangue e tem origem na medula óssea. São cânceres de grande incidência e de difícil tratamento, havendo, portanto, uma constante procura por terapias mais eficientes. O presente trabalho investigou a ação citotóxica do extrato hidroalcóolico de Croton urucurana em células leucêmicas humanas U937 e THP-1. As linhagens de células U937, THP-1 foram plaqueadas em volume de 100 μL/poço (1x10 6 cels/mL) em placas de 96 poços, tratadas com extrato nas concentrações finais de 50 μM, 100 μM, 200 μM e 400 μM e 800 μM para os testes de viabilidade celular com MTT (-3-(4,5-dimetil-2-tiazol) 2,5-difenil-2-H-brometo de tetrazom). Após 48h a viabilidade foi avaliada pelo MTT e o sobrenadante utilizado para dosagem da enzima Lactato Desidrogenase (LDH). Microscopia de fluorescência foi usada para avaliar a apoptose. O extrato foi capaz de induzir apoptose em ambas as linhagens de células testadas nas concentrações 400 e 800 μg/mL (p≤0,05). O aumento percentual da morte celular por apoptose foi associado a alterações no potencial de membrana mitocondrial sugerindo o envolvimento da via intrínseca de ativação da apoptose. / Cancer is a disease characterized by the uncontrolled rise of in the cellular proliferation. In general, it occurs in parallel to the increased growth and loss of cellular differentiation. Thus, the cancer cells lose their original properties of this cellular differentiation and become atypical. The leukaemia is a malign bone neoplasia, which affects the blood cells and have its source in the bone marrow. They are called cancers with great incidence and tough treatment, being, therefore a constant search for more efficient therapies.Thepresent study investigated the toxic action of the hydro alcoholic extract of the Croton urucuranain leukaemic cells U937, THP-1 which were plated in volume of 100 μL/pool (1x106 cels/mL) in plaques of 96 pools, treated in extracts in the final concentrations of 50 μM, 100 μM, 200 μM, 400 μM and 800 μM for the tests of cellular viability with MTT (-3- (4,5-dimethyl-2-thyazole) 2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide). After 48h the viability was tested by the MTT and the supernatant used to dosage the lactate dehydrogenase (LDH). The fluorescent microscopy was used to evaluate the apoptosis. The extract was capable to induce the apoptosis in both lineages of the tested cells, in the concentrations of 400 and 800 μg/mL (p≤0,05). The percentage increase of the cellular death by apoptosis was associated with alterations in the mitochondrial membrane potential, which suggests an involvement in the intrinsic activation path of the apoptosis.

Croton urucurana Baillon, comumente conhecida como \"sangra-d\'água\", é uma árvore medicinal do suldeste brasileiro utilizada como cicatrizante e antiinflamatório. A espécie carece de estudos botânicos, químicos e farmacológicos para que possa ser utilizada com segurança. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a casca, a folha e o látex obtidos desta espécie, através de estudos farmacognósticos, isolando princípios ativos e verificando a toxicidade e as atividades antiúlcera e cicatrizante. Dentre as principais características macroscópicas podemos citar: (a) casca; enrolada com presença de manhas brancas, fratura fibrosa e sabor adstringente; (b) folha; simples, pubescente, cordiforme, peninérvea e ápice agudo. Quanto as características microscópicas temos: (a) casca; floema, pseudocórtex e periderme apresentado drusas, cristais prismáticos e amiloplastos; grande quantidade de esclereídes, células com taninos e laticíferos não articulados; (b) folha; mesofilo assimétrico com presença de grandes drusas; epiderme com pêlos estelares e estômas paracíticos. Na triagem fitoquímica foram encontrados alcalóides, esteróides, compostos fenólicos, taninos, saponinas e óleo essencial. O teor de taninos presente no látex é de 1,02%, determinado por gravimetria. Foram realizadas determinações físico-químicas (segundo Farmacopéia Brasileira) e cromatográficas das drogas (casca e folha) e de seus extratos. A taspina, um alcalóide cicatrizante, foi isolado do látex e identificado por I.V. e RM.N. O látex é altamente tóxico por via oral, e apresenta atividade cicatrizante e antiúlcera, verificado por ensaios com ratos Wistar. / Croton urucurana Baillon, commonly known as \"sangra-d\'água\", is a medicinal tree a southest brazilian, used for healing of wounds and antiinflammatory. There are not data about the botanical, chemical and pharmacological studies for the drug to used with safety. The objective of our search to was characterize to bark, the leaf and the latex obtained from this species, through pharmagnostics studies, active principle isolation and its toxicity, antiulcer and wound healing activities. the main macroscopic characteristics are: (a) bark, rolled up with presence of white spots, its fractures is fibrous and flavor astringent; (b) leaf; simple, puberulent, cordate, pinnately veined and acute apice. The microscopic characteristics have: (a) bark; phoem, pseudocortex and periderm with druses, prismatic crystals and starch; great amount of sclereids, cells with phenolic content and non-articulate laticifers; (b) leaf; asymmetric mesophyll with enormous druses of calcium oxalate, abundant in the palisade parenchyma; epidermis with stellate hairs and stomata paracytic. In the phytochemical screening there were detected alkaloids, steroids, phenolics compounds, tannins, saponins and essential Gil. The proportion of tannins presents in the latex is of 1,02%. The physical-chemical and chromatographic profiles (according to Farmacopéia Brasileira) of the drugs (bark and leaf) and of its extracts were determined. The taspine, a wound healing alkaloid, was isolated of the latex and identified by I.R. and M.N.R. The látex showed to be highly toxicant and to have a wound healing and antiulcer activity, assayed in Wistar rats.

Croton urucurana Baillon, comumente conhecida como \"sangra-d\'água\", é uma árvore medicinal do suldeste brasileiro utilizada como cicatrizante e antiinflamatório. A espécie carece de estudos botânicos, químicos e farmacológicos para que possa ser utilizada com segurança. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a casca, a folha e o látex obtidos desta espécie, através de estudos farmacognósticos, isolando princípios ativos e verificando a toxicidade e as atividades antiúlcera e cicatrizante. Dentre as principais características macroscópicas podemos citar: (a) casca; enrolada com presença de manhas brancas, fratura fibrosa e sabor adstringente; (b) folha; simples, pubescente, cordiforme, peninérvea e ápice agudo. Quanto as características microscópicas temos: (a) casca; floema, pseudocórtex e periderme apresentado drusas, cristais prismáticos e amiloplastos; grande quantidade de esclereídes, células com taninos e laticíferos não articulados; (b) folha; mesofilo assimétrico com presença de grandes drusas; epiderme com pêlos estelares e estômas paracíticos. Na triagem fitoquímica foram encontrados alcalóides, esteróides, compostos fenólicos, taninos, saponinas e óleo essencial. O teor de taninos presente no látex é de 1,02%, determinado por gravimetria. Foram realizadas determinações físico-químicas (segundo Farmacopéia Brasileira) e cromatográficas das drogas (casca e folha) e de seus extratos. A taspina, um alcalóide cicatrizante, foi isolado do látex e identificado por I.V. e RM.N. O látex é altamente tóxico por via oral, e apresenta atividade cicatrizante e antiúlcera, verificado por ensaios com ratos Wistar. / Croton urucurana Baillon, commonly known as \"sangra-d\'água\", is a medicinal tree a southest brazilian, used for healing of wounds and antiinflammatory. There are not data about the botanical, chemical and pharmacological studies for the drug to used with safety. The objective of our search to was characterize to bark, the leaf and the latex obtained from this species, through pharmagnostics studies, active principle isolation and its toxicity, antiulcer and wound healing activities. the main macroscopic characteristics are: (a) bark, rolled up with presence of white spots, its fractures is fibrous and flavor astringent; (b) leaf; simple, puberulent, cordate, pinnately veined and acute apice. The microscopic characteristics have: (a) bark; phoem, pseudocortex and periderm with druses, prismatic crystals and starch; great amount of sclereids, cells with phenolic content and non-articulate laticifers; (b) leaf; asymmetric mesophyll with enormous druses of calcium oxalate, abundant in the palisade parenchyma; epidermis with stellate hairs and stomata paracytic. In the phytochemical screening there were detected alkaloids, steroids, phenolics compounds, tannins, saponins and essential Gil. The proportion of tannins presents in the latex is of 1,02%. The physical-chemical and chromatographic profiles (according to Farmacopéia Brasileira) of the drugs (bark and leaf) and of its extracts were determined. The taspine, a wound healing alkaloid, was isolated of the latex and identified by I.R. and M.N.R. The látex showed to be highly toxicant and to have a wound healing and antiulcer activity, assayed in Wistar rats.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-07-29T18:15:18Z No. of bitstreams: 2 Disssertação - Jean Sardinha de Almeida - 2016.pdf: 1339332 bytes, checksum: 418c173cb4b8d6405108b91607c5d13d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-01T13:32:48Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Disssertação - Jean Sardinha de Almeida - 2016.pdf: 1339332 bytes, checksum: 418c173cb4b8d6405108b91607c5d13d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-01T13:32:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Disssertação - Jean Sardinha de Almeida - 2016.pdf: 1339332 bytes, checksum: 418c173cb4b8d6405108b91607c5d13d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-03-01 / The objective this paper was evaluate the inlcusion of crude extract of Croton urucurana Baillon or composed of essential oil of cashew and castorbean oil or monensin on the degradability of dry matter and fiber in vitro and dry matter in situ and fermentation ruminal metabolic parameters in beef cattle. The experiment was conducted in the Institute of Biological Sciences (ICB) and the School of Veterinary and Animal Science of the Federal University of Goiás – GO, from August 2015 until January 2016. There were four treatments through in vitro technique: control, monensin, Croton urucurana Baillon, biophytus (functional oil composed of cashew and castorbean), with five repetitions. Were evaluated the parameters of degradability of dry matter. Metabolic analysis and in situ was through four animals distributed in a Latin square, were measured glucose, urea, urea nitrogen in the blood, aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, gamma glutamyl transpeptidase, albumin, total bilirubin and factions, creatinine, Total cholesterol, HDL, LDL, VLDL, triglyceride and lactate dehydrogenase. Ruminal parameters were determined by protozoa count, ammonia nitrogen, pH, short chain fatty acids, bacterial reductive activity. The experimental design was completely at random. The data were submitted to analysis of variance and compared by Tukey test at 5% probability. The treatments did not increase the IVDMD (P> 0.05). There was no significant effect (P> 0.05) of the treatments on in vitro degradation parameters of DM and NDF in all evaluated times. For MS degradability in situ parameters, there was a significant effect (P <0.05) between treatments for soluble and effective degradation fraction with 2% by pass rate. The DM intake, had significant difference (P <0.05) between treatments, with lower consumption for monensin with admission was independent of diet type, either directly via the rumen cannula, it can be show that the lower consumption of diet with monensin supplementation is not by means of sensory but physiological and metabolic mechanisms. There was no significant effect (P> 0.05) for pH between treatments, but the collections after feeding was significant (P <0.05) monensin treatment, occurring up before feeding up two hours. Acetic acid levels were significant (P <0.05) for the hours of collection. The levels of butyric acid was affected by treatments (P <0.05) and not the hours of collection (P> 0.05). The concentrations of AST, GGT, LDH FA and was not affected by treatments (P> 0.05). The inclusion of essential oils, Croton urucurana Baillon and monensin in beef cattle diets hay base has not improved the evaluated parameters. The effective degradability of dry matter had better results with the inclusion of functional oils composed cashews and castorbeans. The intake was influenced by monensin and functional oil in addition the fuction of the two are similar, can be used one over the other. / Objetivou-se por meio do presente trabalho avaliar a inclusão de extrato bruto de Croton urucurana Baillon, e composto de óleo essencial de caju e mamona e monensina sódica sobre a degradabilidade da matéria seca e fibra in vitro e matéria seca in situ, e a fermentação ruminal e parâmetros metabólicos em bovinos de corte. O experimento foi conduzido no Instituto de Ciências Biológicas (ICB) e na Escola de Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal de Goiás – GO no período de agosto de 2015 a janeiro de 2016. Foram quatro tratamentos por meio da técnica in vitro: controle, monensina, sangra d’água, Biophytus (óleo funcional composto de caju e mamona), com cinco repetições onde foram avaliados os parametros da degradabilidade da matéria seca. As análises metabólicas e em in situ foram por meio de quatro animais distribuídos em um quadrado latino, onde foram mensuradas glicose, ureia, nitrogênio ureico no sangue, aspartato aminotransferase, fosfatase alcalina, gama glutamil transpeptidase, albumina, bilirrubina total, bilirrubina direta e indireta, creatinina, colesterol total, HDL, LDL, VLDL, lactato desidrogenase e triacilglicerol. Os parâmetros ruminais foram determinados por meio da contagem de protozoários, nitrogênio amoniacal, pH, ácidos graxos de cadeia curta, atividade redutiva bacteriana. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado. As médias foram submetidas à análise de variância e comparadas pelo teste de Tuckey a 5% probabilidade. Os tratamentos não aumentaram a DIVMS, (P>0,05). Não houve efeitos significativo (P>0,05) dos tratamentos sobre os parâmetros de degradação in vitro de MS e FDN em nenhum dos tempos avaliados. Para os parâmetros de degradabilidade da MS in situ, houve efeito significativo (P<0,05), entre os tratamentos para a fração solúvel e degradação efetiva com 2% de taxa de passagem. O consumo de MS apresentou diferença significativa (P < 0,05) entre os tratamentos, com um menor consumo para monensina, visto que a sua admissão foi de forma independente da dieta, os seja diretamente no rúmen via cânula, pode-se afirmar que o menor consumo da dieta com suplementação de monensina não se dá por meio de mecanismos sensoriais e sim fisiológicos e metabólicos. Não houve efeito significativo (P > 0,05) para o pH entre os tratamentos, mas para as coletas após a alimentação foi significativo (P < 0,05) para o tratamento monensina, ocorrendo um aumento de antes da alimentação até duas horas após. Os níveis do ácido acético foram significativos (P<0,05) para a horas de coletas. Os níveis do ácido butírico foi afetado pelos tratamentos (P<0,05) e não pelas horas de coleta (P>0,05). As concentrações das enzimas AST, GGT, FA e LDH não foram influenciados pelos tratamentos (P>0,05). A inclusão de óleo funcional, sangra d’ água e monensina em dietas de bovinos de corte a base de feno não melhorou os paramentos avaliados. A degradabilidade efetiva da matéria seca apresentou melhores resultados com a inclusão de óleos funcionais compostos caju e mamona. O consumo foi influenciado pela monensina e o óleo funcional, além disso, o comportamento dos dois foram similares e podem ser usados um em detrimento ao outro.