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Cultivo de c?lulas da medula ?ssea humana sobre membranas de col?geno bovino e arcabou?os de ?cido poliglic?ico polil?tico (PLGA)

Fritscher, Guilherme Genehr 16 January 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 388585.pdf: 2402252 bytes, checksum: 61c5f710d7d456a08638eac157bdc111 (MD5) Previous issue date: 2007-01-16 / O estroma da medula ?ssea, al?m de conter uma popula??o heterog?nea de c?lulas conjuntivas, nervosas e hematopoi?ticas, mant?m uma quantidade de c?lulas com caracter?sticas de c?lulas tronco (c?lulas mesenquimais indiferenciadas). Estas possuem capacidade de se diferenciarem em qualquer c?lula de natureza conjuntiva quando estimuladas pelo organismo. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar a ades?o, a prolifera??o e a diferencia??o de c?lulas mesenquimais da medula ?ssea cultivadas sobre membrana de col?geno bovino e sobre arcabou?o de ?cido poliglic?lico polil?tico (PLGA) com a adi??o do gel de plasma rico em plaquetas (PRP) e/ ou da prote?na morfogen?tica ?ssea recombinante humana (rhBMP-4). As c?lulas foram coletadas da medula ?ssea da crista do osso il?aco humana e separadas por t?cnica espec?fica. As c?lulas foram cultivadas em dois suportes: membrana de col?geno e arcabou?o de PLGA, e receberam 4 tratamentos distintos: (1) com rhBMP-4, (2) com rhBMP-4 e PRP, (3) com PRP e (4) controle (somente meio de cultura). Os subgrupos foram avaliados em 6, 9, 14 e 21 dias. Foram realizadas an?lises microsc?picas das membranas e arcabou?os com as colora??es de Iodeto de Prop?dio e de Hematoxilina e Eosina. Foi feito PCR em tempo real a fim de se avaliar a express?o de osteopontina e osteocalcina e PCR convencional para osteopontina. Os resultados mostraram ades?o celular tanto na membrana de col?geno como no arcabou?o de PLGA. Sugere-se haver uma maior prolifera??o e diferencia??o celular nos grupos que foram adicionados PRP, e rhBMP-4 e PRP juntos. Nos grupos com rhBMP-4 parece haver uma maior diferencia??o celular que o grupo controle. Os dados obtidos indicam que o PRP e/ ou a presen?a de rhBMP-4 induzem ades?o, prolifera??o e diferencia??o de c?lulas da medula ?ssea em c?lulas de linhagem osteog?nica
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Indu??o de respostas de defesa cruzada em Solanum tuberosum utilizando indutores de resist?ncia contra pat?genos

Pacheco Neto, Calino Ferreira 31 March 2014 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-10-24T15:48:35Z No. of bitstreams: 1 DIS_CALINO_FERREIRA_PACHECO_NETO_COMPLETO.pdf: 463906 bytes, checksum: b8097cd7556014c152e145a0681d517a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-24T15:48:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_CALINO_FERREIRA_PACHECO_NETO_COMPLETO.pdf: 463906 bytes, checksum: b8097cd7556014c152e145a0681d517a (MD5) Previous issue date: 2014-03-31 / Rhizoctonia solani is a pathogenic ubiquitous fungus in Solanum tuberosum cultures, causing severe losses in production. Plant resistance can be induced by molecules that promote natural plant defense system. In the present study, the efficiency of the inducers Acibenzolar-Smethyl (BION?), Ceratocystis fimbriata extract and Xanthomonas axonopodis extract against the pathogenic fungus Rhizoctonia solani in potato plants was evaluated. Plants treated with the inducer XTH were resistant to the pathogen at 21 dpi. The biotic inducer XTH was more efficient than Bion? and CTS on promoting plant resistance. The highest activity of POX was observed at 9 dpi on the XTH treatment. Inoculation of R. solani caused a progressive increase in the PPO activity in XTH- and control-plants. Both inducers CTS and Bion? caused a reduction on PPO activity over time. Levels of phenolics compounds and flavonoids were similar among all treatments. Plants were more susceptible to R. solani when induced with CTS or Bion?. XTH did not show a negative effect on plant resistance. XTH presented a good potential as inducer, delaying disease progression and promoting plant resistance against R. solani. / Apesar da batata ser um dos alimentos mais consumidos do mundo, a sua produ??o apresenta s?rias dificuldades devido a doen?as causadas por fungos, bact?rias e v?rus, reduzindo a produtividade e aumentando os custos de produ??o. Assim, este trabalho teve por objetivo analisar os mecanismos envolvidos na defesa cruzada de Solanum tuberosum cv. ?gata, atrav?s a a??o de indutores bi?ticos no metabolismo de fenilpropan?ides. Plantas jovens de S. tuberosum mantidas em casa de vegeta??o foram aspergidas com indutores de defesa: extratos autoclavados de Xanthomonas axonopodis e de Ceratocystis fimbriata, al?m do indutor sint?tico Bion?. Ap?s cinco dias do tratamento, as plantas foram desafiadas com o fungo patog?nico Rhizoctonia solani, sendo analisados o progresso da doen?a e os par?metros bioqu?micos: compostos fen?licos totais, flavon?ides quercet?nicos e atividade das enzimas polifenoloxidase e peroxidases. As plantas tratadas com o indutor XTH foram resistentes ao pat?geno at? 21 dpi. O indutor bi?tico XTH foi mais eficiente que o Bion? e CTS na promo??o da resist?ncia vegetal. A atividade mais elevada da POX foi observada em 9 dpi com o tratamento XTH. A inocula??o de R. solani causou o aumento progressivo da atividade da PPO nas plantas dos tratamentos XTH e controle. Os indutores CTS e Bion? causaram a diminui??o da atividade de PPO ao longo do experimento. Os n?veis dos compostos fen?licos e dos flavonoides foram similares entre todos os tratamentos. As plantas foram mais suscet?veis ao pat?geno R. solani quando aspergidas previamente com CTS ou Bion?. O XTH apresenta um bom potencial de utiliza??o como indutor de resist?ncia, retardando o progresso da doen?a e promovendo a resist?ncia contra R. solani.
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Detec??o de prote?nas em Plectranthus barbatus e avalia??o da atividade biol?gica sobre linhagens de c?lulas RAW 264.7 e A549

Freitas, Alcides Alves de 20 April 2017 (has links)
Submitted by Raniere Barreto (raniere.barros@ufvjm.edu.br) on 2018-05-10T17:58:30Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) alcides_alves_freitas.pdf: 1707403 bytes, checksum: f9233629066db73fd877b2885aa875bd (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2018-05-14T14:47:32Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) alcides_alves_freitas.pdf: 1707403 bytes, checksum: f9233629066db73fd877b2885aa875bd (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-14T14:47:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) alcides_alves_freitas.pdf: 1707403 bytes, checksum: f9233629066db73fd877b2885aa875bd (MD5) Previous issue date: 2017 / O boldo da terra (Plectranthus barbatus) ? popularmente utilizado para o tratamento de dist?rbios gastrintestinais e para doen?as hep?ticas. Devido ? exist?ncia de um grande n?mero de esp?cies dispon?veis para pesquisa e estudos farmacol?gicos, o estudo dessa planta torna-se importante para o conhecimento t?cnico-cient?fico, especialmente com a finalidade do desenvolvimento de novos f?rmacos. Com isto, o objetivo desse trabalho foi detectar prote?nas ativas de Plectranthus barbatus (boldo da terra) e avaliar a atividade biol?gica em c?lulas A549 e RAW264.7. As amostras dos procedimentos de extra??o das folhas e caule do P. barbatus foram submetidas ? quantifica??o de prote?na. Foi detectado em gel de poliacrilamida SDS-PAGE 12% prote?nas com peso molecular em torno de 30kDa e 94kDa o que ? descrito na literatura como lectinas e lipoxigenases. Os extratos foram caracterizados por cromatografia l?quida de alta efici?ncia com picos aparentes em 16 e 27 minutos. N?o foi detectada atividade de inibi??o da tripsina. Os resultados dos testes biol?gicos em cultura de c?lulas demonstraram que o extrato purificado de inibidores de protease n?o alterou a viabilidade celular de ambas as linhagens, no entanto, foi capaz de inibir a produ??o de ?xido n?trico na concentra??o de 10 ?g/ml para folha e caule e 100 ?g/ml para folha. Este trabalho demonstra pela primeira vez a extra??o de prote?nas em folhas e caule de Plectranthus barbatus e a atividade dessa mol?cula em cultura celular. Esse extrato n?o alterou a viabilidade celular de ambas as linhagens celulares, podendo ser caracterizados como n?o citot?xico nas concentra??es testadas. Conclui-se, portanto, que embora as folhas, caules e flores do Plectranthus barbatus seja utilizado amplamente pela popula??o esse trabalho demonstrou a detec??o de lectina e lipoxigenase at? agora desconhecidos nessa esp?cie em estudo. / Disserta??o (Mestrado Profissional) ? Programa de P?s-Gradua??o em Tecnologia, Sa?de e Sociedade, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2017. / The boldo da terra (Plectranthus barbatus) is popularly used for the treatment of gastrointestinal disorders and for liver diseases. Due to the existence of a large number of species available for research and pharmacological studies, the study of this plant becomes important for technical-scientific knowledge, especially for the purpose of developing new drugs. With this, the objective of this work was to detect active proteins of Plectranthus barbatus and to evaluate the biological activity in cells A549 and RAW264.7. Samples of P. barbatus leaf and stem extraction procedures were submitted to protein quantification. SDS-PAGE was detected in 12% proteins with molecular weight around 30kDa and 94kDa which is described in the literature as lectins and lipoxygenases. The extracts were characterized by high performance liquid chromatography with apparent peaks at 16 and 27 minutes. No trypsin inhibition activity was detected. The results of the biological tests in cell culture demonstrated that the purified protease inhibitor extract did not alter the cell viability of both strains, however, it was able to inhibit the production of 10 ?g / ml nitric oxide to leaf and And 100 ?g / ml for leaf. This work demonstrates for the first time the extraction of proteins in leaves and stem of Plectranthus barbatus and the activity of this molecule in cell culture. This extract did not alter the cellular viability of both cell lines and could be characterized as non-cytotoxic at the concentrations tested. It was concluded, therefore, that although the leaves, stems and flowers of Plectranthus barbatus were used extensively by the population, this work demonstrated the detection of lectin and lipoxygenase hitherto unknown in this species under study.
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A influ?ncia da criopreserva??o nas c?lulas mesenquimais indiferenciadas do ligamento periodontal de humanos an?lise comparativa in vitro

Vasconcelos, Rodrigo Gadelha 04 February 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T15:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RodrigoGV_DISSERT.pdf: 1378162 bytes, checksum: aa53c22bf2541e2d42d5b5659f380375 (MD5) Previous issue date: 2011-02-04 / Cryopreservation is a process where cells or biological tissues are preserved by freezing at very low temperatures and aims to cease reversibly, in a controlled manner, all the biological functions of living tissues, i.e., maintain cell preservation so that it can recover with high degree of viability and functional integrity. This study aimed to evaluate the influence of cryopreservation on the mesenchymal stem cells originating from the periodontal ligament of human third molars by in vitro experiments. Six healthy teeth were removed and the periodontal cells grown in culture medium containing α-MEM supplemented with antibiotics and 15% FBS in a humidified atmosphere with 5% CO2 at 37? C. Cells isolated from each sample were divided into two groups: Group I - immediate cell culture (not fresh cryopreserved cells) and Group II - cell cryopreservation, during a period of 30 days. Analyses of rates of cell adhesion and proliferation in different groups were performed by counting the cells adhered to the wells, in intervals of 24, 48 and 72 hours after the start of cultivation. The number of cells in each well was obtained by counting viable cells with the use of hemocytometer and the method of exclusion of cells stained by trypan blue. The difference between groups for each of the times was analyzed by Wilcoxon test. Regarding the temporal evolution for each group, analysis was done by Friedman's test to verify the existence of differences between times and, when it existed, the Wilcoxon penalty was applied. The results showed no statistically significant difference between the two groups analyzed in this study. Therefore, we conclude that the cryopreservation process, after a period of 30 days, did not influence the cell type studied, and there was no difference in growth capacity in vitro between the groups / A criopreserva??o ? um processo em que c?lulas ou tecidos biol?gicos s?o preservados atrav?s do congelamento a temperaturas muito baixas e objetiva cessar reversivelmente, de forma controlada, todas as fun??es biol?gicas dos tecidos vivos; ou seja, manter a preserva??o celular de maneira que esta possa recuperar-se com alto grau de viabilidade e integridade funcional. Este trabalho se prop?s avaliar in vitro a influ?ncia da criopreserva??o nas c?lulas mesenquimais indiferenciadas procedentes do ligamento periodontal de terceiros molares humanos. Para tanto, foram utilizados 6 dentes sadios os quais tiveram as referidas c?lulas removidas e cultivadas em meio de cultura α-MEM contendo antibi?ticos e suplementado com 15% de FBS, em atmosfera ?mida com 5% de CO2 a 37? C. As c?lulas isoladas de cada amostra foram divididas em dois grupos: Grupo I cultivo celular imediato (c?lulas frescas n?o criopreservadas) e Grupo II criopreserva??o celular, durante um per?odo de 30 dias. As an?lises dos ?ndices de ades?o e prolifera??o celular nos diferentes grupos foram realizadas atrav?s das contagens das c?lulas aderidas ?s superf?cies dos po?os de cultivo celular, nos intervalos de 24, 48 e 72 horas ap?s o in?cio do cultivo. O n?mero de c?lulas em cada po?o foi obtido pela contagem das c?lulas vi?veis atrav?s do uso do hemocit?metro e o m?todo de exclus?o das c?lulas coradas pelo azul de trypan. A diferen?a entre os grupos para cada um dos tempos foi analisada pelo teste de Wilcoxon. Em rela??o ? evolu??o temporal para cada um dos grupos, a an?lise foi feita pelo teste de Friedman para verificar a exist?ncia de diferen?a entre os tempos e, quando ela existiu, foi aplicado o teste de Wilcoxon com penaliza??o. Os resultados demonstraram que n?o houve diferen?a estatisticamente significativa entre os dois grupos analisados neste estudo. Portanto, conclui-se que o processo de criopreserva??o, ap?s um per?odo de 30 dias, n?o exerceu influ?ncia no tipo celular estudado; n?o havendo, portanto, nenhuma diferen?a na capacidade de crescimento in vitro entre os grupos

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