Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 431499.pdf: 9135185 bytes, checksum: f582813177d93f41d7f068b6594f67b4 (MD5) Previous issue date: 2011-03-11 / Objetivo: o objetivo deste estudo foi analisar o efeito da laserterapia de baixa pot?ncia no processo de incorpora??o ?ssea de aloenxertos em bloco com congelamento profundo. Materiais e M?todos: foram utilizados 14 coelhos: dois coelhos como doadores do tecido ?sseo e 12 coelhos como receptores onde foram realizados aloenxertos e autoenxertos ?sseos em bloco na calv?ria. Foram divididos em grupos com tratamento com laserterapia de baixa pot?ncia (aloenxerto e autoenxerto) e grupos controles (aloenxerto e autoenxerto) sem irradia??o. Os animais foram mortos com 35 dias (n=6) e 70 dias (n=6). Os par?metros de energia empregados foram: aplica??o de laser de diodo (AsGaAl) comprimento de onda de 830 nm - 4 J/cm2 em quatro pontos sobre os blocos de enxertos perfazendo um total de 16 J/cm2 por aplica??o. A dose total do tratamento ap?s as oito aplica??es foi de 128 J/cm2. Resultados: o aloenxerto ?sseo processado por congelamento profundo associado ? laserterapia de baixa pot?ncia apresentou incorpora??o na interface com o hospedeiro, remodela??o ?ssea moderada, preenchimento parcial das lacunas osteoc?ticas, menor infiltrado inflamat?rio nos per?odos iniciais e maior deposi??o de fibras col?genas quando comparado ao grupo controle. Conclus?o: o aloenxerto ?sseo processado por congelamento profundo associado ? laserterapia de baixa pot?ncia ? adequado como uma alternativa para o tratamento de defeitos ?sseos. O processamento do osso al?geno pelo m?todo de congelamento profundo mant?m as caracter?sticas estruturais e de osteocondu??o do tecido ?sseo.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 439672.pdf: 3140896 bytes, checksum: adaf0986dd0bf8d5dad87d65250f73f6 (MD5) Previous issue date: 2012-05-17 / Objective: As the use of bone allografts in oral rehabilitation has increased, this study evaluated the effect of non-ablative laser on bone apposition when ground bone allografts are used. Studies in the literature show that the application of low-level laser therapy (LLLT) promotes tissue repair and new bone formation. Material and Methods: Four rabbits were used as bone donors, and ground bone allografts and autografts were implanted in the skull of 20 rabbits divided into four groups: two LLLT groups (allograft, autograft and blood clot), and two control groups (allograft, autograft and blood clot) that did not receive LLLT. The animals were killed at 35 (n=10) and 70 (n=10) days. Laser parameters were: laser diode application (GaAlAs), wavelength of 830 nm of 4 J/cm2 at four points in the skullcap at a total of 16 J/cm2 per application. Total treatment dose after eight applications was 128 J/cm2. Results: There was an increase in the apposition of collagen fibers, bone remodeling and vascularization, and there was less inflammatory infiltrate in the LLLT groups that received allografts at 35 days than in the allograft control group. At 70 days there was greater collagen fiber apposition, greater density of osteocytes lacunae, and a statistically significant difference in bone remodeling and vascularization when compared with the allograft control group. In the LLT autograft groups, there was also greater density of osteocytes lacunae, greater apposition of collagen fibers and greater bone remodeling at 35 and 70 days. Conclusion: Evaluation under light microscopy and SEM revealed a positive qualitative and quantitative effect of LLLT, which accelerated osteogenesis and the incorporation and remodeling of ground bone allografts and autografts / Objetivo: devido ao aumento da utiliza??o de aloenxertos ?sseos nas reabilita??es orais avaliou-se o efeito do laser n?o ablativo no processo de incorpora??o ?ssea de aloenxertos triturados. As pesquisas publicadas demonstram que aplica??o da laserterapia n?o ablativa (LLLT) apresenta vantagens no reparo tecidual e no processo de neoforma??o ?ssea. Materiais e M?todos: foram utilizados quatro coelhos como doadores do tecido ?sseo e realizados aloenxertos e autoenxertos triturados na calv?ria de 20 coelhos divididos em quatro grupos: dois grupos com LLLT (aloenxerto, autoenxerto e co?gulo sangu?neo) e outros dois grupos controle (aloenxerto, autoenxerto e co?gulo sangu?neo) sem irradia??o. Os animais foram mortos com 35 dias (n=10) e 70 dias (n=10). Os par?metros de energia empregados foram: aplica??o de laser de diodo (AsGaAl), comprimento de onda de 830 nm de 4 J/cm2 em quatro pontos da calota craniana perfazendo um total de 16 J/cm2 por aplica??o. A dose total do tratamento ap?s as oito aplica??es foi de 128 J/cm2. Resultados: houve um aumento da deposi??o de fibras col?genas, da remodela??o ?ssea, vasculariza??o e um menor infiltrado inflamat?rio nos grupos irradiados nos aloenxertos aos 35 dias quando comparado ao grupo controle al?geno. Aos 70 dias houve uma maior deposi??o de fibras col?genas e maior preenchimento das lacunas osteoc?ticas e foi observado diferen?a estat?stica significante na remodela??o ?ssea e na vasculariza??o quando comparado ao grupo controle al?geno. Os grupos de autoenxerto com LLLT apresentaram maior preenchimento das lacunas osteoc?ticas, maior deposi??o de fibras col?genas e maior remodela??o ?ssea aos 35 e 70 dias. Conclus?o: Observou-se atrav?s da Microscopia ?ptica e de MEV um efeito positivo qualitativo e quantitativo da LLLT, acelerando o processo de osteog?nese, incorpora??o e remodela??o de aloenxertos e autoenxertos ?sseos triturados

Made available in DSpace on 2016-04-28T14:58:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008 - Thais Moreira Hidalgo de Almeida.pdf: 3286442 bytes, checksum: 491a402cc8bf5539730d0625fcbf7b31 (MD5) Previous issue date: 2008-02-28 / Germination, conservation and physical characteristics of seeds of four cacti species that occurs on Rio de Janeiro State coastal regions, Cereus fernambucensis Lem., Coleocephalocereus fluminensis (Miq.) Backeb., Pilosocereus arrabidae (Lem.) Byles & G.D. Rowley and Pilosocereus ulei (K. Schum.) Byles & G.D. Rowley were evaluated in this study. The first experiment, mounted in a completely randomized design and factorial system, tested two substrates (agar 1% and paper) and three temperatures (20?C, 25?C and 20-30?C) using four replicates of 40 seeds. The evaluation parameters were germination percentage (normal seedlings) and germination average time (ANOVA and Tukey; P<0,05). According to the germination analysis, the best combination of temperature and substrate is 20?C in agar for C. fernambucensis, 20?C and 20-30?C in paper or agar for C. fluminensis, 25?C in agar for P. arrabidae and 20, 25 and 20-30?C in paper, as well as, 20 and 25?C in agar for P. ulei. The use of agar 1% was suitable for germination of this cacti seeds, being necessary, however, studies that lead to reduction in the incidence of plant health problems. In another experiment the effects of storage and seed water content were evaluated on the germination percentage and germination average time of these four species. To better define the salts to be used in the seed drying process for this experiment, adsorption isotherms were built using static gravimetric method, with saturated salt solutions. The isotherms of all species showed a reverse sigmoidal pattern with increase of seed water content according to the increase in relative humidity. In the conservation experiment, also arranged in completely randomized design and factorial system, three different storage conditions (control, 30 days at 10?C and 30 days at -196?C) under three levels of water content, around 5, 7 and 9% (dry basis) were tested, with four replicates of forty seeds (ANOVA and Tukey; P<0,05) at the following conditions: C. fernambucensis in agar at 20?C, C. fluminensis and P. ulei in paper at 20?C and P. arrabidae in agar at 25?C. All four species showed dehydration and sub-zero temperature tolerance. Seed viability and four species showed dehydration and sub-zero temperature tolerance. Seed viability and vigour showed no changes when stored with water content around 7%, at 10?C and cryopreserved at -196?C. Cryopreservation can be recommended for the storage of this cacti species. / As caracter?sticas f?sicas, germina??o e conserva??o de sementes de quatro esp?cies de cact?ceas ocorrentes nas ?reas litor?neas do estado do Rio de Janeiro, Cereus fernambucensis Lem., Coleocephalocereus fluminensis (Miq.) Backeb., Pilosocereus arrabidae (Lem.) Byles & G.D. Rowley e Pilosocereus ulei (K. Schum.) Byles & G.D. Rowley foram avaliadas neste estudo. O primeiro experimento, montado em delineamento inteiramente casualizado e esquema fatorial, testou dois substratos (?gar 1% e sobre papel ) e tr?s temperaturas (20?C, 25?C e 20-30?C) utilizando quatro repeti??es de 40 sementes. Os par?metros de avalia??o foram porcentagem de germina??o (pl?ntulas normais) e tempo m?dio de germina??o (ANAVA e Tukey; P<0,05). De acordo com a an?lise de germina??o, as melhores temperaturas e substratos para a germina??o de sementes de C. fernambucensis s?o 20?C e ?gar; para C. fluminensis, 20?C e 20-30?C, tanto no substrato papel como em ?gar, para P. arrabidae, 25?C em ?gar e para P. ulei em papel a 20, 25 e 20-30?C e ?gar a 20 e 25?C. O uso de ?gar 1% se mostrou adequado a germina??o das sementes destas cact?ceas, sendo necess?rios, no entanto, estudos que levem a redu??o da incid?ncia de problemas fitossanit?rios. Em outro experimento foram avaliados os efeitos de armazenamento e teor de ?gua das sementes sobre o percentual e o tempo m?dio de germina??o destas quatro esp?cies. Para melhor defini??o dos sais a serem usados na secagem das sementes para este experimento, foram constru?das isotermas de adsor??o utilizando-se o m?todo gravim?trico, est?tico, com solu??es salinas saturadas. As isotermas de todas as esp?cies revelaram um padr?o sigmoidal inverso com o acr?scimo de teor de ?gua das sementes em fun??o do aumento da umidade relativa do ar. No experimento de conserva??o, tamb?m montado em delineamento inteiramente casualizado e esquema fatorial, foram testadas tr?s diferentes condi??es de armazenamento (controle, 30 dias a 10?C e 30 dias a -196?C) sob tr?s diferentes teores de ?gua, pr?ximos a 5, 7 e 9% (base seca), utilizando quatro repeti??es de 40 sementes (ANAVA e Tukey; P<0,05) e nas seguintes condi??es: C. fernambucensis em ?gar a 20?C, C. fluminensis e P. ulei em papel a 20?C e P. arrabidae em ?gar a 25?C. As quatro esp?cies demonstraram toler?ncia a desidrata??o e a temperatura sub-zero. A viabilidade e o vigor das sementes n?o apresentaram altera??es quando armazenados com teores de ?gua pr?ximos a 7%, tanto em c?mara fria a 10?C como criopreservado a -196?C. A criopreserva??o pode ser recomendada para o armazenamento das esp?cies estudadas.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-02-17T22:37:29Z No. of bitstreams: 1 ThiberioDeSouzaCastelo_TESE.pdf: 2616733 bytes, checksum: 7ec74d06a9aa91a8661ccee8c3a034fe (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-02-19T22:29:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ThiberioDeSouzaCastelo_TESE.pdf: 2616733 bytes, checksum: 7ec74d06a9aa91a8661ccee8c3a034fe (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-19T22:29:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ThiberioDeSouzaCastelo_TESE.pdf: 2616733 bytes, checksum: 7ec74d06a9aa91a8661ccee8c3a034fe (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / O objetivo foi estabelecer protocolos para obten??o e conserva??o de espermatozoides de cutias (Dasyprocta leporina) criadas em cativeiros no semi-?rido brasileiro, visando sua explora??o sustent?vel. Para tanto tr?s experimentos foram realizados. No primeiro, foi avaliada a influ?ncia da intera??o entre dois tipos de sonda (ondas senoidais e quadr?ticas) e dois protocolos de estimula??o (cont?nuo e seriado) sobre a efici?ncia da colheita de s?men de cutias por eletroejacula??o. A intera??o mais eficiente na obten??o de ejaculados com espermatozoides foi a que utilizou eletrodos em aneis associado com est?mulos em s?rie (4/7; 57%, P<0,05). No segundo, foi realizada a compara??o da a??o crioprotetora de diferentes subst?ncias (glicerol, etilenoglicol, dimetilsulf?xido, dimetilformamida) na criopreserva??o de espermatozoides epididim?rios. Relativo a isso, os maiores valores de motilidade (39,5?4,6%), vigor (2,9?0,2) e integridade de membrana (30,6?4,5%) foram obtidos nas amostras criopreservadas com glicerol quando comparada as amostras contendo etilenoglicol e dimetilformamida, contudo, sem diferen?a (P>0,05) quando comparada as criopreservadas com dimetilsulfoxido. Finalmente, foi analisado o efeito dos m?todos de obten??o de espermatozoides (eletroejacula??o vs colheita epididim?ria) sobre a qualidade dos espermatoz?ides criopreservados. Como resultado as amostras obtidas por lavagem epididm?ria apresentaram motilidade de 25,0?10,9% e vigor 2,4?0,8 e as obtidas por eletroejacula??o obtiveram 31,2?14,2% de motilidade e 2,2?0,7 de vigor, por?m sem diferen?as significativas (P>0,05), denotando a possibilidade de aplicar diretamente, com sucesso, o protocolo de criopreserva??o de espermatozoides epididimarios de cutias (Dasyprocta leporina) para ejaculados da mesma esp?cie. Na presente tese, foram alcan?ados avan?os significativos na obten??o e processamento de espermatozoides de cutias, possibilitando a forma??o de bancos de germoplasmas a partir de amostras oriundas tanto dos epid?dimos quanto por eletroejacula??o. / The general objective of this thesis was to stablish protocols to obtain and conserve agouti (Dasyprocta leporina) sperm bred in captivity in the Brazilian semi-arid, aiming its sustainable production. The thesis was divided in three experiments. In the first one, we studied the influence of the interaction between two probes (quadratics and sine waves) and two stimulation protocols (continuous and in series) on the agouti sperm collection by electroejaculation efficiency. The most efficient interaction on this obtainment was the one with probes with rings associated with stimuli in series (4/7; 57%, P<0.05). In the second experiment we compared the cryoprotectant effects of different substances (glycerol, ethyleneglycol, dimethylsulfoxide, dimethylformamide) on epididymis sperm cryopreservation. The highest values on motility (39.5?4.6%), vigor (2.9?0.2) and membrane integrity (30.6?4.5%) were observed on the samples cryopreserved using glycerol when compared to those with ethyleneglycol and dimethylformamide, but there was no difference (P>0.05) when compared to the samples cryopreserved with dimethylsulfoxide. At last, we studied the effects of the methods to obtain sperm (electroejaculation vs epididymal collection) on post thawing sperm quality. The samples obtained by epididymal retrograde flushing showed values for motility of 25.0?10.9% and vigor 2.4?0.8, and those obtained by electroejaculation had 31.2?14.2% of motility and vigor of 2.2?0.7, however, without statistical difference (P>0.05), which shows the possibility to successfully use the epididymal sperm cryopreservation protocol on agouti ejaculated sperm. In conclusion, significant advances on obtainment and processing of agouti sperm were made, allowing the establishment of germplasm banks from sperm samples obtained from the epididymis or by electroejaculation.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:30:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PedroHASL_Dissret.pdf: 4618668 bytes, checksum: 5bca73a0220258bdbd17a75573adb995 (MD5) Previous issue date: 2009-08-31 / Oral and facial bone defects can undertake appearance, psychosocial well-being and stomathognatic function of its patients. Over the yerars several strategies for bone defect regeneration have arised to treat these pathologies, among them the use of frozen and irradiated bone allograft. Manipulation of bone grafts it s not determined yet, and several osteotomy alternatives can be observed. The present work evaluated with a microscope the bone fragments obtained from different osteotomy methods and irrigation on rings and blocks allografts irradiated and frozen at 80? negative in a rabbit model. The study is experimental in vitro and it sample was an adult male New Zealand rabbit. The animal was sacrificed to obtain long bones, that were submitted to freezing at 80? negative and irradiated with Cobalt- 60. Then the long bones were sectioned into 24 bone pieces, divided into 4 groups: G1 (n=06) osteotomy was performed with bur No. 6 forming rings with 5 mm thickness with high-speed handpiece with manual irrigation; G2 (n=06) osteotomy was performed with bur No. 6 forming rings with 5 mm thick with surgical motor with a manual irrigation rotation 1500 rpm; GA (n=06), osteotomy with trephine using manual irrigation with saline; and GB (n=06), osteotomy with trephine using saline from peristaltic pumps of surgical motor. Five bone pieces of each group were prepared for analysis on light microscopy (LM) and one on electronic scan electronic microscopy (SEM). On the SEM analysis edges surface, presence of microcracks and Smear Layer were evaluated. Analyzing osteotomy technics on SEM was observed: increased presence of microcracks cutting with high speed; increased presence of areas covered by Smear Layer when cutting with motor implant. The irrigation analysis with SEM was observed: that the presence of microcracks does not depend on the type of irrigation; on manual irrigation, there was greater discrepancy between the cutting lines. The descriptive analysis of the osteotomy and irrigation process on LM showed: histological analysis showing the bony margins with clear tissue changed layer, composed of blackened tissue of charred appearance near to the cortical bone; on the edges of the bony part, bone fragments that were displaced during the bone cut and bone irregularities were observed. After analysis of results we can conclude: that there was greater regularity of the bone cut using high-speed handpiece than using motor implant; the cut with trephine using saline irrigated from peristaltic pumps of surgical motor showed greater homogeneity when compared with manual irrigation; charred tissue was found in all obtained bone samples, whit no significant statistically difference on the proportion of carbonization of the two analysed technics / Os defeitos ?sseos bucais e faciais comprometem a apar?ncia, o bem estar psicossocial e a fun??o estomatogn?tica dos seus portadores. Diante da necessidade de tratamento dessas patologias, surgiram, com o decorrer do tempo, diversas estrat?gias para a regenera??o de defeitos ?sseos, dentre elas o uso de aloenxerto ?sseo congelado e irradiado. A manipula??o dos enxertos ?sseos ainda n?o est? determinada, podendo-se observar v?rias alternativas de osteotomia. Este trabalho avaliou microscopicamente os fragmentos ?sseos obtidos por diferentes m?todos de osteotomia e de irriga??o sobre an?is e blocos de aloenxertos irradiados e congelados a 80?C negativos de coelho. O estudo ? do tipo Experimental in vitro e teve como amostra 01 coelho, adulto, da ra?a New Zealand. O animal foi sacrificado para obten??o de ossos longos, os quais foram congelados a 80? negativos e irradiados com Cobalto-60. Em seguida, os ossos foram seccionados em 24 pe?as ?sseas, divididos em quatros grupos: G1 (n=06) foi realizado a osteotomia com broca esf?rica n? 6 formando an?is com 5 mm de espessura com caneta de alta rota??o com irriga??o manual; G2 (n=06) foi realizado a osteotomia com broca esf?rica n? 6 formando an?is com 5 mm de espessura com motor cir?rgico com irriga??o manual a uma rota??o de 1500 rpm; GA (n=06), osteotomia com trefina usando irriga??o manual com soro fisiol?gico; e GB (n=06), osteotomia com trefina usando soro fisiol?gico proveniente de bombas perist?lticas do motor cir?rgico. De cada grupo, cinco pe?as ?sseas foram destinadas ? an?lise em Microscopia de Luz (ML) e uma analisada por Microscopia Eletr?nica de Varredura (MEV). A an?lise por ML levou em considera??o a presen?a de tecido carbonizado. Na an?lise por MEV levou em considera??o: superf?cie das bordas; presen?a de microfissuras e Smear Layer. Ao analisar a t?cnica de osteotomia utilizando MEV observa-se: maior presen?a de microfissuras ao corte com alta rota??o; maior presen?a de ?reas cobertas por uma camada de smear layer em cortes com motor de implante. Na analise da irriga??o com MEV observou-se que: a presen?a de microfissuras n?o depende do tipo de irriga??o; na irriga??o manual, verificou-se uma discrep?ncia maior entre as linhas de corte. Ao avaliar descritivamente o processo de osteotomia e irriga??o na ML, verificou-se que: na an?lise histol?gica as margens ?sseas apresentavam uma evidente camada alterada de tecido, composta por um tecido enegrecido de aspecto carbonizado, pr?ximo ao osso cortical; nas margens da pe?a ?ssea foram observados fragmentos ?sseos deslocados durante o corte ?sseo e irregularidades ?sseas. Ap?s an?lise dos resultados, pode-se concluir que: houve maior regularidade do corte ?sseo utilizando caneta de alta rota??o do que motor de implante; o corte com trefina usando irriga??o com bombas perist?lticas do motor de implante se mostrou mais homog?nea quando comparada ? t?cnica com irriga??o manual; tecido carbonizado foi encontrado em todos os esp?cimes ?sseos obtidos, sem diferen?a estatisticamente significativa na propor??o de carboniza??o nas duas t?cnicas de irriga??o estudadas

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2017-07-24T12:38:24Z No. of bitstreams: 1 2010 - Wilson Franklim de Vasconcelos Filho.pdf: 785209 bytes, checksum: a1bf8c5a2306da3cdf30db3da6cf4f0d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-24T12:38:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010 - Wilson Franklim de Vasconcelos Filho.pdf: 785209 bytes, checksum: a1bf8c5a2306da3cdf30db3da6cf4f0d (MD5) Previous issue date: 2010-03-05 / Planos de Reestrutura??o e Expans?o das Universidades Federais (Reuni) / Even with technological advances in the field of artificial insemination, there is a huge number of people freezing semen in a manual way. This technique has proven to be viable, however, it is difficult to standardize the cooling and freezing curves, since they depend on the quality of the material used (refrigerator sealing, type of cooler, liquid nitrogen level and other). Therefore, the objective of this study was to evaluate the effect of the cryopreservation of bovine semen using two freezing techniques (conventional and automated) on motility, vigor and heat resistance of the sperm after thawing. The experiment was developed over a period of 12 weeks, divided into two parts, an initial six weeks part where Tris-yolk extender was used and a second part in which the extender used was Citrate-yolk. Three Holstein bulls were used for weekly semen collection by artificial vagina method. After collection, were evaluated: volume, motility, mass motility and sperm concentration to find out the number of doses. After dilution, the semen was stored in straws of 0.5 ml. Then the straws were subjected to conventional freezing technique (use of refrigerator, nitrogen vapor and immersion in liquid nitrogen) and automated technique (machine from Cryogen ?). After 24 hours the samples were thawed, re-tested and underwent the quick thermoresistance test. The results were analyzed by Kruskal-Wallis analysis of variance (nonparametric) with a significance level of 5% with the aid of BioEstat 4 and Systat 11 PC-programs. There was significant difference (p <0.05) between automated and manual techniques for both extenders used, and the automated technique has presented the best results for motility and vigor after cryopreservation and thermoresistance test. Thus, we can conclude that the automated technique to freezing bovine semen has shown to be advantageous and practical because as well as providing better results, it standardizes cooling and freezing curves. / Mesmo com os avan?os tecnol?gicos no campo da insemina??o artificial, ainda ? grande o n?mero de pessoas que realizam a congela??o de s?men de maneira manual. Esta t?cnica tem se mostrado vi?vel, por?m, ? dif?cil padronizar as curvas de resfriamento e de congela??o, uma vez que dependem da qualidade do material utilizado (veda??o da geladeira, tipo de caixa de isopor, quantidade de gelo, n?vel de nitrog?nio l?quido e outros). Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da criopreserva??o de s?men bovino utilizando duas t?cnicas de congela??o (convencional e automatizada) sobre a motilidade, vigor e resist?ncia t?rmica dos espermatoz?ides ap?s a descongela??o. O experimento foi elaborado em um per?odo de 12 semanas, sendo dividido em duas partes, uma inicial de seis semanas onde foi utilizado o diluidor Tris-gema e uma segunda parte na qual o diluidor utilizado foi Citrato-gema. Foram utilizados tr?s touros holandeses para coleta de s?men semanal pelo m?todo da vagina artificial. Ap?s a coleta, foram avaliados: volume, motilidade, turbilhonamento, vigor e concentra??o esperm?tica para determina??o do n?mero de doses. Ap?s dilui??o, o s?men foi envasado em palhetas de 0,5 ml. Em seguida, as palhetas foram submetidas ?s t?cnicas de congela??o convencional (uso de geladeira, vapor de nitrog?nio e imers?o em nitrog?nio l?quido) e automatizada (aparelho da Cryogen?). Ap?s 24 horas as amostras foram descongeladas, reavaliadas e submetidas ao teste de termoresist?ncia r?pido (TTR). Os resultados foram analisados pelo teste Kruskal-Wallis (an?lise de vari?ncia n?o param?trica) com n?vel de signific?ncia de 5% com aux?lio dos programas BioEstat 4 e Systat 11. Houve diferen?a significativa (p<0,05) entre as t?cnicas automatizada e manual para os dois diluidores testados, sendo a t?cnica automatizada a que apresentou melhores resultados para motilidade e vigor ap?s a criopreserva??o e teste de resist?ncia t?rmica. Desta forma, pode-se concluir que a t?cnica automatizada para congela??o de s?men bovino apresenta-se vantajosa e pr?tica pois al?m de proporcionar melhores resultados, ela padroniza as curvas de refrigera??o e de congelamento.

Submitted by Jos? Henrique Henrique (jose.neves@ufvjm.edu.br) on 2018-02-08T18:24:25Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) karine_beatriz_costa.pdf: 1519823 bytes, checksum: a9100527a90f32a6eb92e5f97960ea08 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2018-03-09T19:22:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) karine_beatriz_costa.pdf: 1519823 bytes, checksum: a9100527a90f32a6eb92e5f97960ea08 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-09T19:22:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) karine_beatriz_costa.pdf: 1519823 bytes, checksum: a9100527a90f32a6eb92e5f97960ea08 (MD5) Previous issue date: 2017 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / O desbalan?o entre a produ??o de esp?cies reativas de oxig?nio e nitrog?nio e a a??o dos sistemas de defesa antioxidante ? uma condi??o conhecida como desequil?brio redox. O exerc?cio f?sico m?ximo ? associado ao aumento da produ??o de esp?cies reativas e pode ser utilizado como modelo fisiol?gico para o estudo do desequil?brio redox. Condi??es pr?-anal?ticas de manejo de amostras biol?gicas, como o tempo de congelamento, podem interferir na integridade de analitos. Assim, esse estudo avaliou o efeito do tempo de congelamento da amostra na quantifica??o de biomarcadores de estado redox no gastrocn?mio, cora??o e c?rebro de camundongos swiss submetidos a uma sess?o de exerc?cio m?ximo. Vinte e seis camundongos foram divididos em grupo controle, que n?o realizou exerc?cio, e grupo exerc?cio, submetido a uma sess?o de exerc?cio em piscina, com aumento progressivo de carga, at? a exaust?o. Os tecidos foram coletados imediatamente ap?s o protocolo experimental e seccionados para avalia??o a fresco e ap?s 1, 3 e 6 meses de congelamento a -80 ?C. O exerc?cio m?ximo modificou o estado redox de tecidos frescos, demonstrado pelo aumento da peroxida??o lip?dica, da atividade das enzimas antioxidantes catalase e super?xido dismutase e diminui??o da capacidade antioxidante total em todos os tecidos analisados e pelo aumento de derivados carbon?licos em prote?nas no gastrocn?mio e c?rebro. O efeito do exerc?cio sobre a peroxida??o lip?dica foi reduzido no gastrocn?mio congelado por 6 meses e no c?rebro e cora??o isso ocorreu j? com um m?s de congelamento da amostra. Por outro lado, o tempo de congelamento n?o alterou o efeito do exerc?cio sobre os derivados carbon?licos em prote?nas e a capacidade antioxidante total n?o enzim?tica. A resposta ao exerc?cio da catalase, em todos os tecidos, e da super?xido dismutase no gastrocn?mio foi reduzida ap?s um m?s de congelamento. J? no c?rebro e cora??o a resposta da super?xido dismutase ao exerc?cio foi reduzida apenas ap?s tr?s meses de congelamento. De maneira geral, os resultados desse estudo mostram que o tempo de congelamento afeta, de maneira dependente do tecido e do marcador em an?lise, a resposta de biomarcadores do estado redox a uma sess?o de exerc?cio m?ximo. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa Multic?ntrico de P?s-gradua??o em Ci?ncias Fisiol?gicas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2017. / The imbalance between the production of oxygen and nitrogen species and the antioxidant system function is known as redox imbalance. Maximum physical exercise is associated with increased production of reactive species and can be used as a physiological model for the study of redox imbalance. Pre-analytical conditions, such as sample freezing duration, may interfere with analyte integrity. Thus, this study evaluated the effect of sample freezing duration on the quantification of redox biomarkers in the gastrocnemius, heart and brain of Swiss mice submitted to a maximal exercise session. Twenty-six mice were divided into control group, who did not exercise, and exercise group, who performed a maximal swim test. The tissues were collected immediately after the experimental protocol and sectioned for fresh evaluation and after 1, 3 and 6 months of freezing at -80 ? C. The maximal exercise modified the redox status of fresh tissues, demonstrated bythe increase on levels of lipid peroxidation, activity of the antioxidant enzymes catalase and superoxide dismutase and reduction of the total antioxidant capacity, in all the analyzed tissues, and by the increase of protein carbonyl content in the gastrocnemius and brain. The effect of exercise on lipid peroxidation was reduced in gastrocnemius frozen for 6 months and in the brain and heart this occurred in samples after one month of freezing. On the other hand, the freezing duration did not alter the exercise effect on proteins carbonyl content and the total non-enzymatic antioxidant capacity. The catalase response to exercise in all tissues and the superoxide dismutase response in the gastrocnemius were reduced after one month of freezing. However in the brain and heart the response of superoxide dismutase to exercise was reduced only after three months of freezing. This study shows that freezing duration, depending on the tissue and marker under analysis, affects the evaluation of the redox state response to a maximal exercise session.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:18:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DeniseMD.pdf: 54846 bytes, checksum: 61beb5b55055ae5d403c739177202529 (MD5) Previous issue date: 2009-02-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Mesenchymal stem cells (MSCs) are known as a population of multi-potential cells able to proliferate and differentiate into multiple mesodermal tissues including bone, cartilage, muscle, ligament, tendon, fat and stroma. Several applications of the study of EC can be emphasized the therapeutic techniques such as guided bone regeneration by implantation of EC in the affected site, without the need for bone grafts, using titanium as a vehicle. The process of cryopreservation is essential for the maintenance of cell cultures, since the cell line is frozen, it can be maintained in liquid nitrogen for an indefinite period and then thawed for therapeutic or experimental purposes. The aim of this study was to isolate a population of MSCs derived from the subendothelium of the umbilical vein human (MSCs-SUVH) to assess cytogenetic analysis by the possibility of appearance of chromosomal changes in two different situations: MSCs-SUVH regarding the process of cryopreservation and MSCs-SUVH grown on the surface of titanium. Flow cytometry analysis revealed that, this cell population was positive for the markers CD29, CD73 and CD90, but there was no expression of hematopoietic lineage markers, such as CD14, CD34 and CD45 and demonstrated capacity for osteogenic differentiation. The chromosomes obtained from the primary culture of MSCs-SUVH were analyzed by GTW banding technique, and results are described as guidelines to ISCN 2005. There was not the emergence of clonal chromosomal changes in the MSCs-SUVH in different situations analyzed. However one of the strings presented a balanced paracentric inversion, probably a cytogenetic constitutional alterations, which was present before and after the experimental situations that the MSCs-SUVH was submitted / C?lulas-tronco mesenquimais (CTMs) s?o conhecidas como uma popula??o de c?lulas capazes de se proliferar e diferenciar em m?ltiplos tecidos de origem mesod?rmico incluindo osso, cartilagem, m?sculo, ligamento, tend?o, gordura e estroma. Das diversas aplica??es do estudo das CTMs podem-se ressaltar as t?cnicas terap?uticas como a regenera??o ?ssea guiada atrav?s da implanta??o de CTMs no local afetado, sem a necessidade de enxertos ?sseos, usando o tit?nio como ve?culo. O processo de criopreserva??o ? essencial para a manuten??o de cultivos celulares, uma vez que a linhagem celular ? congelada, a mesma pode ser mantida em nitrog?nio l?quido por tempo indeterminado e depois descongelado para fins experimentais ou terap?uticos. Deste modo, o objetivo desse trabalho foi isolar uma popula??o de c?lulas-tronco mesenquimais derivadas do subendot?lio da veia umbilical humana (CTMs-SVUH) para avaliar atrav?s da an?lise citogen?tica a possibilidade de surgimento de altera??es cromoss?micas em duas diferentes situa??es: CTMs-SVUH frente ao processo de criopreserva??o e CTMs-SVUH cultivadas sobre a superf?cie de tit?nio. An?lise por citometria de fluxo revelou que, esta popula??o celular foi positiva para os marcadores CD29, CD73 e CD90, mas foram negativas para marcadores de linhagem hematopoi?tico como, CD14, CD34 e CD45 e demonstraram capacidade de diferencia??o osteog?nica. Os cromossomos obtidos a partir da cultura prim?ria de CTMs-SVUH foram analisados atrav?s da t?cnica de bandeamento GTW, e os resultados descritos conforme orienta??es do ISCN 2005. N?o houve o aparecimento de altera??es cromoss?micas clonais nas CTMs-SVUH nas diferentes situa??es analisadas. Entretanto um dos cord?es apresentou uma invers?o parac?ntrica balanceada, provavelmente uma altera??o citogen?tica constitucional, que esteve presente antes e depois das situa??es experimentais a que as CTM-SVUH foram submetidas

Submitted by Jadson Francisco de Jesus SILVA (jadson@uefs.br) on 2018-01-30T22:51:06Z No. of bitstreams: 1 Tese Definitivo ZERGurgel.pdf: 2392487 bytes, checksum: 97870ae444449d037535f874c18b1d37 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-30T22:51:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Definitivo ZERGurgel.pdf: 2392487 bytes, checksum: 97870ae444449d037535f874c18b1d37 (MD5) Previous issue date: 2017-07-24 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Comanthera mucugensis Giul. subsp. mucugensis, an endemic species of the municipality of Mucug?-BA is threatened with extinction. To reduce extractivism in natural populations, it is necessary to develop efficient multiplication protocols; In this sense somatic embryogenesis and organogenesis may be viable and preservation cryopreservation may be a strategy for its long-term. The objectives of this study were: (1) to analyze the embryogenic competence and the indirect organogenesis of C. mucugensis; (2) to evaluate the cryopreservation of seeds and different methods of cryopreservation of C. mucugensis plants and (3) to identify the best way to store seeds in the long term. Experiments were performed to induce somatic embryogenesis with different concentrations of 2,4-D X BAP and Picloran X BAP and for indirect organogenesis BAP and ANA were used. Seeds were cryopreserved for 0 (control), 1, 7, 30, 360 and 540 days and other seeds were stored at different temperatures to verify the best form of storage. Plants were cryopreserved with the technique of vitrification and encapsulation-desiccation. Plants from cryopreserved seeds were acclimatized in sand and vegetal soil (1: 1) for 60 days. The work showed that the plant regulators Picloran and 2,4-D are promising in the induction of callus with embryogenic potential and that the plant regulator ANA at 4.9 ?M is efficient in indirect organogenesis. The seeds of C. mucugensis can be cryopreserved without compromising their physiological quality, but the techniques for cryopreservation of plants have not been efficient. / Comanthera mucugensis Giul. subsp. mucugensis, possui flor de interesse comercial que devido ao extrativismo excessivo encontra-se amea?ada de extin??o. Para suprir a demanda do mercado e evitar o decl?nio populacional, faz-se necess?rio desenvolver protocolos para sua multiplica??o, podendo a embriog?nese som?tica e a organog?nese serem alternativas vi?veis. Al?m disso, ? importante investir em estudos de conserva??o a longo prazo como, por exemplo, a criopreserva??o. O trabalho teve como objetivos: realizar estudos para tornar a micropropaga??o mais eficiente e avaliar a conserva??o de C. mucugensis em diferentes temperaturas como estrat?gia para a conserva??o do seu germoplasma. Foram testados para a indu??o da embriog?nese som?tica 2,4-D x BAP e Picloram x BAP e para organog?nese indireta BAP e ANA. Na criopreserva??o foram avaliadas sementes mantidas em nitrog?nio l?quido (-196?C) por 0, 1, 7, 30, 360 e 540 dias e as plantas inteiras foram submetidas a duas t?cnicas: vitrifica??o e encapsulamento-desidrata??o. Para avaliar o armazenamento, as sementes foram mantidas em temperatura ambiente, 4?C, -20?C, -80?C e -196?C por 30, 90 e 180 dias. Visando observar se a criopreserva??o das sementes interfere no desenvolvimento, plantas oriundas da germina??o in vitro de sementes criopreservadas foram aclimatizadas em areia e terra vegetal (1:1) por 60 dias. O trabalho demonstrou que os reguladores vegetais Picloram e 2,4-D s?o promissores na indu??o de calos com potencial embriog?nico e que o regulador vegetal ANA (4,9 ?M) ? eficiente na organog?nese indireta. As sementes de C. mucugensis podem ser criopreservadas sem comprometer sua qualidade fisiol?gica, entretanto, n?o foram eficientes as t?cnicas para criopreserva??o de plantas inteiras.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:43:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FernandaGA_DISSERT.pdf: 1532248 bytes, checksum: 8b25b3bf5e0afc796607cf138b0a9885 (MD5) Previous issue date: 2013-02-14 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Dental pulp stem cells have been widely investigated because of their ability to differentiate into both dental and non-dental cells, with potential use in therapies involving tissue engineering. The technique of cell cryopreservation represents a viable alternative for the conservation of these cells, since it stops reversibly, in a controlled manner, all of cell biological functions in an ultra low temperature. The present study aimed to evaluate, using in vitro experiments, the influence of a cryopreservation protocol on the biologic acti vity of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED). Cells obtained from the pulp of three deciduous teeth on end-stage exfoliation or with indicated extraction were expanded in &#945;-MEM culture medium supplemented with antibiotics and 15% fetal bovine serum. At second subculture (P2), a group of cells were submitted to cryopreservation for 30 days in 10% DMSO diluted in fetal bovine serum, at -80? C, while the remind cells continued under normal conditions of cell culture. Cell proliferation was evaluated in both groups (not cryopreserved or cryopreserved) by Trypan blue stain essay at intervals of 24, 48 and 72h after plating. Cell cycle analysis of SHEDs submitted or not to the cryopreservation protocol was performed in the same intervals. Events related to cell death were studied by Annexyn V and PI expression under flow cytometry at the intervals of 24 and 72h. The presence of nuclear morphological changes was evaluated by DAPI staining at 72h interval. It was observed that both groups exhibited an upward cell proliferation curve, without considerable changes in cell viability throughout the experiment. The distribution of cell in the cell cycle phasis was consistent with cell proliferation in both groups. There were no nuclear morphological damages in the end range of the experiment. therefore, it is concluded that the proposed cryopreservation protocol is efficient for storing the studied cell type, allowing its use in future experimental studies / C?lulas-tronco da polpa dental humana t?m sido amplamente investigadas em raz?o da sua capacidade de diferenciar-se tanto em c?lulas dentais quanto n?o dentais, com potencial de utiliza??o em terapias envolvendo a engenharia de tecidos. A t?cnica de criopreserva??o celular representa uma alternativa vi?vel para a conserva??o dessas c?lulas, j? que cessa reversivelmente, de forma controlada, todas as suas fun??es biol?gicas em uma temperatura ultra-baixa. O presente estudo teve como objetivo avaliar, atrav?s de experimentos in vitro, a influ?ncia de um protocolo de criopreserva??o na atividade biol?gica de c?lulas-tronco da polpa de dentes humanos d ec?duos esfoliados (SHED). C?lulas obtidas da polpa de tr?s dentes dec?duos em est?gio final de esfolia??o ou com exodontia indicada foram expandidas em meio de cultivo &#945;-MEM suplementado com antibi?ticos e 15% de soro fetal bovino. No segundo subcultivo (P2), um grupo de c?lulas foi submetido a criopreserva??o por 30 dias em DMSO dilu?do a 10% em soro fetal bovino, a 80?C negativos, enquanto o restante seguiu em condi??es normais de cultivo. A prolifera??o celular em ambos os grupos (criopreservado e n?o criopreservado) foi avaliada atrav?s do m?todo de colora??o por azul de Tripan nos intervalos de 24, 48 e 72 horas ap?s o plaqueamento. Nestes mesmos intervalos foi realizada a an?lise do ciclo celular das SHEDs submetidas ou n?o ao protocolo de criopreserva??o. Os eventos relacionados ? morte celular foram analisados atrav?s da express?o de Anexina V e PI em citometria de fluxo, nos intervalos de 24 e 72 horas. A presen?a de altera??es morfol?gicas nucleares foi avaliada atrav?s da marca??o por DAPI no intervalo de 72 horas. Observou-se que ambos os grupos exibiram uma curva de prolifera??o celular ascendente, sem altera??es consider?veis na viabilidade celular ao longo do experimento. A distribui??o das c?lulas nas fases do ciclo celular foi coerente com c?lulas em prolifera??o nos dois grupos. N?o foram observados danos morfol?gicos nucleares no intervalo final do experimento . Deste modo, conclui-se que o protocolo de criopreserva??o proposto ? eficiente para o armazenamento do tipo celular estudado, permitindo a sua utiliza??o em futuros estudos experimentais