Submitted by JOÃO MARTINS DE MELLO NETO (joao_martins_182@hotmail.com) on 2018-05-05T04:28:36Z No. of bitstreams: 1 VERSÃO FINAL PARA A BIBLIOTECA JMMN.pdf: 3038526 bytes, checksum: 3833aa4fda2a808223e4a27b9eaba2b1 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Rimoli de Oliveira null (anapaula@foa.unesp.br) on 2018-05-07T12:39:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 melloneto_jm_me_araca_int.pdf: 3038526 bytes, checksum: 3833aa4fda2a808223e4a27b9eaba2b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-07T12:39:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 melloneto_jm_me_araca_int.pdf: 3038526 bytes, checksum: 3833aa4fda2a808223e4a27b9eaba2b1 (MD5) Previous issue date: 2018-03-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Objetivo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a progressão da periodontite experimental (PE) em ratas diabéticas submetidas à terapia com dose oncológica de zoledronato. Materiais e métodos: 120 animais (12 meses de idade) foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos experimentais: VEI-NG (n=30); VEI-DM (n=30), ZOL-NG (n=30) e ZOL-DM (n=30). Durante 7 semanas, a cada 3 dias, administrou-se pela via intraperitoneal 0,45ml de solução de NaCl 0,9% (VEI-NG e VEI-DM) ou 0,45ml desta solução acrescida de 100 µg/Kg de zoledronato (ZOL-NG e ZOL-DM). No 14º dia todos os animais foram submetidos: 1) indução da PE; 2) indução da diabetes com dose única de 0,3 ml de solução de estreptozotocina (60 mg/kg) diluída em solução de tampão citrato de sódio 0,1M, pH 4,0 (VEI-DM e ZOL-DM) ou apenas o veículo de tampão citrato (VEI-NG e ZOL-NG). As eutanásias foram realizadas aos 14, 21 e 35 dias após indução da PE. Foi realizada análise microtomográfica das hemimandibulas direitas e histopatológica e imunohistoquiímica (TNF-α e IL-1β) das hemimandibulas esquerdas. Os resultados foram analisados em microscopia óptica e submetidos à estatística com nível de significância de 5%. Resultados: A análise micro-CT mostrou uma menor perda óssea alveolar (POA), maior volume ósseo na furca (VOF) e maior espessura do trabeculado ósseo em ZOL-NG e ZOL-DM. ZOL-NG e ZOL-DM apresentaram maior porcentagem de tecido ósseo na furca (PTO) e a porcentagem de tecido ósseo não vital na furca (PON) foi maior em ZOL-DM. A resposta inflamatória periodontal foi maior em ZOL-NG e ainda maior em ZOL-DM, com inflamação mais intensa e nível das principais citocinas com atividade pró-inflamatória (TNFα e IL-1β) maior em ZOL e ainda maior em ZOL-DM. Conclusão: O diabetes mellitus promove exacerbação da resposta inflamatória periodontal ao longo do tratamento com dose oncológica de zoledronato, o que o coloca, juntamente com a doença periodontal, como um importante fator de risco para a osteonecrose dos maxilares. / The aim of the present study is to evaluate the progression of experimental periodontitis (PE) in diabetic female rats under therapy of oncological dosage of zoledronic acid. 120 female rats (12 months of age) were randomly assigned to four experimental groups: VEI-NG (n = 30); VEI-DM (n = 30), ZOL-NG (n = 30) and ZOL-DM (n = 30). For 7 weeks, every 3 days, 0.45 ml of 0.9% NaCl solution (VEI-NG and VEI-DM) or 0.45 ml of this solution plus 100 μg / kg zoledronate (ZOL) were administered intraperitoneally -NG and ZOL-DM). On the 14th day post-start of the experiment all animals were submitted to: 1) a ligature installation around the lower bilaterally first molar, which remained in position throughout the experimental period; 2) a caudal vein injection of 0.3 ml of streptozotocin solution (60mg/kg) diluted in 0.1 M sodium citrate buffer solution pH 4.0 (VEI-DM and ZOL-DM) or only the vehicle of sodium citrate buffer 0.1M, pH 4.0 (VEI-NG and ZOL-NG). As euthanasia were performed at 14, 21 and 35 days after the induction of PE by transcardiac perfusion with histological fixative. A microtomographic analysis of the right and posterior hemi-mandibles of the histological processing of the left hemi-jaw was performed. Patients with histories were submitted to hematoxylin-eosin staining or immunohistochemical reaction for: tumor necrosis factor alpha TNF-α and interleukin IL-1β. The results were analyzed by optical microscopy and submitted to statistical analysis with a significance level of 5%. The micro-CT analysis showed lower alveolar bone loss (POA), greater bone volume in the furcation (VOF) and greater thickness of bone trabecule in ZOL-NG and ZOL-DM compared to the VEI-NG and VEI-DM groups. ZOL-NG and ZOL-DM presented a higher percentage of bone tissue in the furcation (PTO) and a percentage of non-vital bone tissue in the furcation (PON) was higher in ZOL-NG and much higher in ZOL-DM. The periodontal inflammatory response was higher in ZOL-NG and even higher in ZOL-DM, with more intense inflammation and major cytokines with the higher pro-inflammatory activity (TNFα and IL-1β) in ZOL and even higher in ZOL-DM. Diabetes mellitus promotes exacerbation of the periodontal inflammatory response during treatment with the oncologic dose of zoledronate, which causes, along with periodontal disease, an important risk factor for osteonecrosis of the jaw.

SILVA, P. G. B. Expressão de marcadores inflamatórios na osteonecrose dos maxilares induzida por bisfosfonatos e efeito do tratamento crônico com ácido zoledrônico nos tecidos gengival e ósseodentário de ratos. 2016. 118 f. Tese (Doutorado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-01-20T15:18:34Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_pgbsilva.pdf: 8439068 bytes, checksum: eec500000ee5d63a08793ff09fbff38f (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-01-20T15:18:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_pgbsilva.pdf: 8439068 bytes, checksum: eec500000ee5d63a08793ff09fbff38f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-20T15:18:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_pgbsilva.pdf: 8439068 bytes, checksum: eec500000ee5d63a08793ff09fbff38f (MD5) Previous issue date: 2016-11-22 / The Zoledronic Acid (ZA) is a bisphosphonate (BF) that can lead to immune-inflammatory dysregulation leading to Bisphosphonate-related Osteonecrosis of the Jaws (BRONJ). The objective of this study was to determine the cellular profile and the immune expression of inflammatory markers in mandibular bone of a BRONJ experimental model and in gingival and tooth of rats chronically treated with ZA. Materials and Methods: Male Wistar rats (180-220 g) were chronically infused (four times) venously with sterile saline or 0.04, 0.20 or 1.00 mg/kg of ZA and the left hemimandible was subjected to first molar exodontia (day 49). After 70 days we performed the euthanasia and the hemimandibles (right and left) were histologically and immunohistochemically analyzed (CD68, Tumor Necrosis Factor alpha (TNF-α), Interleukin(IL)-1β, inducible Nitric Oxide Synthases (iNOS), Nuclear Factor kappa B (NF-kB) and IL-18(bidding protein) bp). In bone subjected to exodontia (left hemimandible) we counted the viable and empty osteocyte lacunae, the viable and apoptotic osteoclasts, the polymorphonuclear neutrophils cells (PMN), mast cells and positive cytoplasmic cells for cited markers. Dental pulp and periodontium of first right molar (contralateral hemimandible) was histologically analyzed by presence of inflammatory cells, dilated/ectasic blood vessels (pulp only) and immunohistochemically by scores. We repeated the protocol (saline versus 0.20 mg/kg ZA) to dosage of TNF-α, IL-1β, myeloperoxidase (MPO), Malondialdehyde (MDA) e Glutathione (GSH) of gingiva of animals. Results: the BRONJ was observed in 0.20 mg/kg and 1.00 mg/kg ZA-treated animals that showed increase in percentage of empty osteocyte lacunae (p<0.001) and percentage of apoptotic osteoclast (p<0.001), total osteoclasts number (p=0.003), PMN (p=0.009), cytoplasmic positive cells for CD68 (p<0.001), TNF-α (p=0.001), IL-1β (p=0.001), iNOS (p<0.001) e NF-kB (p=0.006), and nuclear positivity for NF-kB (p=0.011). The immune expression of IL-18bp decreased dose dependently (p=0.005). In dental pulp there was augment in number of mononuclear CD68+ cells (p=0.026) and immunostaining for TNF-α (p=0.020), IL-1β (p=0.027), iNOS (p=0.001) in odontoblasts and IL-1β (p=0.027) in non odontoblasts dental pulp cells. In periodontium ZA treated animals showed an increase in number of animals showing inflammatory cells (p=0.001) and cytoplasmic immunostaining for TNF-α (p=0.003), IL-1β (p=0.004), iNOS (p=0.008) and NF-kB (p=0.025). MPO (p<0.001), TNF-α (p=0.002), IL-1β (p<0.001) and GSH (p=0.005) levels were significantly raised in 0.20 mg/kg ZA treated gingiva animals. Conclusion: There is overexpression of inflammatory markers in exodontia area with establishing of BRONJ. The chronic infusion of ZA raised the expression of inflammatory markers and cells in gingiva, periodontium and pulp tissue of rats. / O Ácido Zoledrônico (AZ) é um bisfosfonato (BF) capaz de causar desregulação imune-inflamatória estando associado à Osteonecrose dos Maxilares induzida por Bisfosfonatos (OMB). O objetivo deste estudo foi determinar o perfil celular e a imunoexpressão de marcadores inflamatórios do osso mandibular em modelo murino de OMB e nos tecidos gengival e osseodentário de ratos tratados cronicamente com AZ. Materiais e Métodos: Ratos Wistar machos (180-220g) foram submetidos a quatro infusões venosas de solução salina estéril ou AZ nas doses de 0,04, 0,20 ou 1,00 mg/kg, sendo o lado esquerdo submetido a exodontia do primeiro molar inferior (dia 49). Após 70 dias, realizou-se eutanásia e as mandíbulas dos animais foram hemisseccionadas (lados esquerdo e direito) e submetidas a análise histológica e técnica de imuno-histoquímica pelo método da estreptavidina-biotina-peroxidase para CD68, Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-α), Interleucina(IL)-1β, Óxido nítrico sintase induzida (iNOS), Fator Nuclear kappa B (NF-kB) e IL-18 bp (bindding protein). No tecido ósseo do lado submetido à exodontia (lado esquerdo), contaram-se as lacunas de osteócitos (vazias e preenchidas), osteoclastos (normais e apoptóticos), polimorfonucleares neutrófilos (PMN), mastócitos e células com marcação positiva para os marcadores supracitados. A polpa dentária e o periodonto do primeiro molar inferior direito (lado contralateral) foram analisados por microscopia de luz convencional quanto à presença de animais exibindo vasos dilatados/ectásicos (somente polpa dentária) e células inflamatórias. O estudo imuno-histoquímico foi realizado por meio da mesma técnica através de escores. O experimento foi repetido (infusão de salina versus AZ 0,20 mg/kg) para dosagem de TNF-α, IL-1β, mieloperoxidase (MPO), malanoaldeído (MDA) e glutationa (GSH) das gengivas excisadas cirurgicamente no dia da eutanásia dos animais. Resultados: a OMB foi observada nos animais tratados com 0,20 e 1,00 mg/kg de AZ com aumento do percentual de lacunas de osteócitos vazias (p<0.001) e osteoclastos apoptóticos (p<0.001), número total de osteoclastos (p=0.003), PMN (p=0.009) e células com positividade citoplasmática para CD68 (p<0.001), TNF-α (p=0.001), IL-1β (p=0.001), iNOS (p<0.001) e NF-kB (p=0.006), e positividade nuclear NF-kB (p=0.011). A imunoexpressão de IL-18bp foi reduzida de forma dose-dependente (p=0.005). Na polpa dentária, houve incremento do número de mononucleares CD68+ (p=0.026) e imunoexpressão de TNF-α (p=0.020), IL-1β (p=0.027), iNOS (p=0.001) em odontoblastos e IL-1β (p=0.027) em células não odontoblastos. No periodonto, observaram-se, nos grupos tratados com AZ, um aumento do número de células inflamatórias (p=0.001) e imunoexpressão citoplasmática para TNF-α (p=0.003), IL-1β (p=0.004), iNOS (p=0.008) e NF-kB (p=0.025). Os níveis de MPO (p<0.001), TNF-α (p=0.002), IL-1β (p<0.001) e GSH (p=0.005) estavam significantemente aumentados na gengiva dos animais tratados com 0,20 mg/kg de AZ. Conclusão: Conclui-se que há superexpressão de marcadores inflamatórios no sítio de exodontia não cicatrizado e com instalação da OMB. A infusão crônica de AZ mostrou-se capaz de aumentar a expressão de citocinas inflamatórias e do infiltrado inflamatório nos tecidos gengival e osseodentário de ratos.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-27Bitstream added on 2014-06-13T20:05:13Z : No. of bitstreams: 1 farina_vh_dr_sjc.pdf: 1033533 bytes, checksum: 4116915d0a454c0eba6d51e8a71d9e1f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A osteoporose é uma das doenças mais prevalentes entre os idosos. Há na literatura poucos relatos sobre a ação de medicamentos homeopáticos no tratamento da osteoporose e na reparação óssea na vigência desta doença. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação do medicamento homeopático Calcarea phosphorica 6CH (CP) em comparação ao medicamento alopático alendronato (A) na reparação óssea em ratas ovariectomizadas. Foram utilizados quatro grupos de 30 ratas, sendo três grupos submetidos à ovariectomia (OVZ) e um à cirurgia sham. Após 60 dias foi realizada uma lesão monocortical nas tíbias de todas as ratas e iniciados os tratamentos: I- OVZ/tratado com A (1,2 mg/ml, três vezes por semana/animal), II- OVZ/tratado com CP (2 glóbulos/1 ml água/dia/animal), III- OVZ/tratado com água (1 ml/dia/animal) e IV- sham tratado com água (1 ml/dia/animal). Os animais (n= 6) foram sacrificados após 3, 6, 10, 17 e 28 dias da confecção da lesão óssea. As tíbias foram fixadas em formol 10%, submetidas à análise radiográfica, descalcificadas e submetidas à análise histológica/histomorfométrica. Os resultados mostraram que CP estimulou proliferação tecidual intensa com formação de calo mais volumoso que os demais grupos nas fases iniciais da reparação, no entanto este calo mostrou grande quantidade de tecido mole que foi rapidamente remodelado. A quantidade proporcional de tecido ósseo no calo variou entre os diferentes tratamentos, mas a quantidade de osso ao final do experimento foi semelhante entre os grupos. Enquanto com A formou-se inicialmente bastante osso que mostrou resistência à remodelação, com CP houve pouca formação óssea inicial, que aumentou até o final do experimento. Concluiu-se que a Calcarea phosphorica estimulou a reparação óssea por um mecanismo de ação diferente do alendronato e que o alendronato foi a melhor opção para... / Osteoporosis is one of the most prevalent diseases in the elderly population. There are few reports in scientific literature about the efficiency of homeopathy in the treatment of osteoporosis and in bone repair in the presence of this disease. The aim of this work was to evaluate the efficiency of the homeopathic medicine Calcarea phosphorica 6CH (CP) compared to alendronate (A) on bone repair in ovariectomized rats. Four groups of 30 female rats were used. Three of these groups were submitted to ovariectomy (OVX) and one group had sham surgery (S). After 60 days, a 2,5mm monocortical lesion was drilled on the tibiae of all rats and treatment began according to: A- OVX/alendronate (1,2mg/ml/3times a week/rat), CP- OVX/Calcarea phosp 6CH (2 globules/1ml/day/rat), O- OVX/placebo (1ml/day/rat) and S- sham/placebo (1ml/day/rat). The animals (n=6) were sacrificed 3, 6, 10, 17 and 28 days after making the bone defect. The tibiae were fixed in 10% phormol solution, submitted to digital X ray, decalcified and submitted to histological and histomorphometric analyses. The results showed that CP stimulated intense tissue proliferation leading to the formation of a callus larger than the other groups in the initial phases of repair (10 days), but this callus showed a large amount of soft tissue that was fast remodeled. The amount of bone tissue in the callus varied among the different treatments but, at the end of the experimental period (28 days) all groups showed equivalent amounts. The treatment with A showed earlier bone formation, which was resistent to remodelation while with CP bone formed later, accumulated progressively and showed remodelation. It was concluded that alendronate and Calcarea phosphorica stimulated bone repair by different mechanisms of action and that alendronate was a better option of treatment of bone lesions being Calcarea phosphorica 6CH better than absence... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by CRISTIAN STATKIEVICZ (c.statkievicz@gmail.com) on 2016-10-15T03:12:53Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO CRISTIAN VERSÃO FINAL - REPOSITÓRIO.pdf: 7053318 bytes, checksum: 7e3743d0506776749bc5bf1702e95116 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-10-20T18:34:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 statkievicz_c_me_araca.pdf: 7053318 bytes, checksum: 7e3743d0506776749bc5bf1702e95116 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-20T18:34:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 statkievicz_c_me_araca.pdf: 7053318 bytes, checksum: 7e3743d0506776749bc5bf1702e95116 (MD5) Previous issue date: 2016-08-30 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / OBJETIVOS: Os objetivos do presente estudo foram avaliar o efeito da terapia com laser em baixa intensidade (LLLT) e da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) no processo de reparo alveolar de ratas com os principais fatores de risco para a osteonecrose dos maxilares associada à terapia medicamentosa (ONM-M). MATERIAIS E MÉTODOS: Ratas senis (n=29) foram distribuídas nos grupos: SAL, ZOL, ZOL/LLLT e ZOL/aPDT. Durante sete semanas, a cada dois dias, administrou-se pela via intraperitoneal 0,45ml de NaCl 0,9% (SAL) ou 0,45ml desta mesma solução acrescida de 100μg/Kg de zoledronato (ZOL, ZOL/LLLT e ZOL/aPDT). Decorridas três semanas, realizou-se a exodontia do primeiro molar inferior esquerdo. Nos grupos ZOL/LLLT e ZOL/aPDT as ratas foram submetidas respectivamente a LLLT ou aPDT aos 0, 2 e 4 dias pós exodontia. A eutanásia foi realizada 28 dias após a exodontia. No sítio de extração dental foram realizadas análises: histopatológica do processo de reparação tecidual, histométrica da área de tecido ósseo neoformado (ATO) e imunoistoquímica direcionada para os seguintes biomarcadores: PCNA, BAX, C3C, TNFα, IL-1β, IL-6, HIF-1α, VEGF, CD31, BMP2/4, RUNX-2, OCN, OPG, RANKL e TRAP. RESULTADOS: Os grupos tratados com zoledronato apresentaram maior imunomarcação para OPG e menor imunomarcação para RANKL e TRAP. Em ZOL observou-se áreas de osteonecrose, comprometimento da reparação tecidual, menor ATO, menor imunomarcação para PCNA, HIF-1α, VEGF, CD31, BMP2/4 e OCN, e maior imunomarcação para BAX, C3C, TNFα, IL-1β, IL-6 e RUNX-2 em relação ao SAL. ZOL/LLLT apresentou melhora em alguns parâmetros em relação ao ZOL (ATO, PCNA, TNFα, HIF-1α, VEGF, CD31 e RUNX-2), no entanto, poucos foram os parâmetros que se igualaram ao SAL (PCNA, HIF-1α, VEGF, CD31 e RUNX-2). ZOL/aPDT não apresentou áreas de osteonecrose, o processo de reparação tecidual não diferiu significativamente de SAL, assim como, os seguintes parâmetros ATO, PCNA, BAX, C3C, IL-1β, HIF-1α, VEGF, CD31, RUNX-2 e OCN. CONCLUSÕES: O zoledronato compromete o processo de reparação tecidual do sítio de extração dental em ratas com os principais fatores de risco para a ONM-M. LLLT e aPDT são capazes de melhorar eventos relacionados com o processo de reparo alveolar. A aPDT se mostrou a terapia preventiva mais efetiva para evitar a ONM-M. RELEVÂNCIA CLÍNICA: A aPDT pode se constituir em uma alternativa de terapia preventiva para evitar o desencadeamento de ONM-M pós exodontia. / OBJECTIVES: The aim of this study was to evaluate the effects of Low Level Laser Therapy (LLLT) and antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) in the alveolar bone repair in rats with the high risk factors for Medication-Related Osteonecrosis of the Jaw (MRONJ). MATERIALS AND METHODS: Senile rats (n = 29) were distributed into four groups: SAL, ZOL, ZOL/LLLT and ZOL/aPDT. For seven weeks, every two days, 0,45ml 0.9% NaCl (SAL) or 0,45ml of this same solution plus 100μg/kg zoledronate (ZOL, ZOL/LLLT and ZOL/aPDT) were administered intraperitoneally. After three weeks, the first lower left molar was extracted. In ZOL/LLLT and ZOL/aPDT groups, the rats were submitted to LLLT or aPDT therapy at 0, 2 and 4 days after tooth extraction. Euthanasia was performed 28 days after tooth extraction. In dental extraction site was performed the histopathology analysis of the tissue repair, histometric analysis of newly formed bone area (NFB) and immunohistochemistry related to the following biomarkers: PCNA, BAX, C3C, TNFα, IL-1β, IL-6, HIF-1α, VEGF, CD31, BMP2/4, RUNX-2, OCN, OPG, RANKL and TRAP. RESULTS: The groups treated with zoledronate showed higher immunolabeling for OPG and lower immunolabeling for RANKL and TRAP. In ZOL group was observed areas of osteonecrosis, impairment of wound healing, lower ATO, lower immunolabeling for PCNA, HIF-1α, VEGF, CD31, BMP2/4 and OCN, and higher immunolabeling for BAX, C3C, TNFα, IL-1β, IL-6 and RUNX-2 when compared to the SAL group. ZOL/LLLT showed improvement in some parameters regarding to ZOL (ATO, PCNA, TNFα, HIF-1α, VEGF, CD31 and RUNX-2), however, few parameters were similar to the SAL (PCNA, HIF-1α, VEGF, CD31 and RUNX-2). ZOL/aPDT did not present areas of osteonecrosis and the tissue repair did not differ significantly from the SAL groups, as well as the following parameters: PCNA, BAX, C3C, IL-1β, HIF-1α, VEGF, CD31, RUNX-2 and OCN. CONCLUSIONS: The zoledronate compromises the tissue repair of dental extraction site in rats with the high risk factors for MRONJ. LLLT and aPDT were able to improved the events related to wound's healing. The aPDT showed to be the most effective preventive therapy to MRONJ. CLINICAL RELEVANCE: The aPDT can be in a preventive therapy to prevent the triggering of MRONJ after dental extraction. / FAPESP: 2014/02199-1

Made available in DSpace on 2014-04-12T02:01:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000456862-Texto+Completo-0.pdf: 1746696 bytes, checksum: c92dca2426345a2d123a27f95d55a3b7 (MD5) Previous issue date: 2014 / Bisphosphonates are drugs widelly used to treat diseases characterized by intense bone resorption. Although very efficacious, they are also associated with cases of osteonecrosis in jaw bones called bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaws (BRONJ). The disease is difficult to treat and its etiology is considered multifactorial but it has not yet been completely understood. Among other etiologic factors, the major or secondary role of microorganisms in BRONJ has been discussed. The aim of this work was to evaluate by means of histomorphometry in Gram, Gomori-Grocott and immunohistochemistry (IHC) the microorganisms found in surgically induced wounds in maxillae of rats subjected to bisphosphonate therapy. Thirty-four rats were allocated into three groups according to the treatment received: (1) zoledronic acid group (n=12); (2) clodronate group (n=12); and (3) control group (n=10, normal saline). Sixty days after started the treatment, tooth extractions and surgical wounds in soft tissue were performed. Forty-two days after surgeries, rats were euthanized, the specimens were processed and histological analysis performed. At the tooth extraction site, the zoledronic acid group had higher prevalence of Actinomyces than the clodronate and control, whereas at the soft tissue wound, both test groups showed higher values than control. Candida occurrence did not significantly differ between the groups. At the tooth extraction site, single Gram-positive cocci were more prevalent in the zoledronic acid, whereas at the soft tissue wound, they were more prevalent in both test groups than controls. Single Gram-negative cocci did not show any significant difference between the groups at the tooth extraction site; at the soft tissue wound, they were more prevalent in the zoledronic acid group. At the tooth extraction site, bacilli did not differ between the groups, whereas at the soft tissue wound site, they were significantly higher in the test groups. Diplococci, streptococci and staphylococci were rarely found, without significant difference between the groups. Actinomyces was the most prevalent microorganism, followed by single cocci and bacilli. Streptococci, staphylococci, Candida and diplococci do not seem to play a significant role in such lesions whereas the anatomical site seems to be a determinant of the microorganisms involved. / Bisfosfonatos são fármacos amplamente empregados no tratamento de doenças caracterizadas por intensa reabsorção óssea e têm sido associados a quadros de osteonecrose maxilar (BRONJ). A BRONJ é uma condição de difícil tratamento, cuja etiologia, embora considerada multifatorial, não foi completamente esclarecida. Entre outros fatores etiológicos, a participação dos microrganismos como fator principal ou secundário tem sido discutida na literatura. O presente estudo teve por objetivo avaliar, por meio de histomorfometria nas técnicas de Gram, Gomori-Grocott e imunoistoquímica (IHQ), os microrganismos de feridas cirúrgicas induzidas em maxilas de ratos sob terapia com bisfosfonatos. Trinta e quatro ratos foram distribuídos em três grupos de acordo com o tratamento administrado: (1) grupo ácido zoledrônico (n=12); (2) grupo clodronato (n=12); e (3) grupo-controle (n=10, solução salina). Sessenta dias após iniciado o tratamento, os animais foram submetidos a exodontias e indução cirúrgica de lesão de tecido mole. Decorridos 42 dias dos procedimentos cirúrgicos, foi realizada a eutanásia, e os espécimes foram submetidos a processamento histológico. No sítio das exodontias, o grupo ácido zoledrônico teve maior prevalência de Actinomyces que o clodronato e o controle, enquanto no sítio da ferida de tecido mole, ambos os grupos-teste exibiram maiores valores que o controle. A ocorrência de Candida não diferiu significativamente entre os grupos. No sítio de exodontia, cocos Gram-positivos isolados foram mais prevalentes no grupo ácido zoledrônico, ao passo que, na região de ferida de tecido mole, eles foram mais prevalentes nos grupos-teste que no controle. A prevalência de cocos Gram-negativos isolados não exibiu diferença significativa entre os grupos no sítio das exodontias; entretanto, no sítio da ferida de tecido mole, foi maior no grupo ácido zoledrônico. Os bacilos não diferiram entre os grupos no sítio de exodontia, mas na área de ferida de tecido mole, foram mais prevalentes nos grupos-teste. A ocorrência de diplococos, estreptococos e estafilococos foi rara e não exibiu diferença significativa entre os grupos. Tanto em sítio de exodontia, quanto de ferida de tecido mole, o Actinomyces foi o microrganismo mais prevalente seguido pelos cocos isolados e bacilos. Estreptococos, estafilococos, Candida e diplococos não exercem papel significativo no desenvolvimento das lesões. O sítio anatômico parece ser fator determinante dos microrganismos envolvidos.

Orientador: Carlos Alberto de Souza Costa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-23T00:05:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Basso_FernandaGoncalves_D.pdf: 8499661 bytes, checksum: 9dfc3430a1139624dd55e0ba12f9fe40 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Estudos recentes têm demonstrado que a etiopatogenia da osteonecrose induzida por bisfosfonatos parece estar associada, pelo menos em parte, à citotoxicidade destes medicamentos às células ósseas e dos tecidos adjacentes. O tratamento da osteonecrose com antibióticos sistêmicos e tópicos, bem como com o tratamento cirúrgico, têm sido os mais indicados, sendo que alguns trabalhos clínicos apresentaram a laserterapia de baixa intensidade (LBI) como tratamento coadjuvante para esta alteração. Porém, os efeitos da LBI sobre as células envolvidas na etiopatogenia da osteonecrose ainda não foram demonstrados. Portanto, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito in vitro de um bisfosfonato nitrogenado de alta potência - Ácido Zoledrônico (AZ) - sobre células dos tecidos ósseo, conjuntivo e epitelial, e avaliar o efeito da LBI sobre estas células pré-expostas ao AZ. Foram utilizadas três linhagens celulares humanas: células epiteliais (HaCaT), fibroblastos de gengiva (HGF) e osteoblastos (SaOs-2). As células foram cultivadas em meio de cultura (DMEM) contendo 10% de soro fetal bovino (SFB), por 48 horas. A seguir, este DMEM foi substituído por meio sem SFB por 24 horas, seguido da aplicação de AZ, na concentração de 5 ?M, por 48 horas. Após este período, o DMEM contendo AZ foi aspirado e um novo meio de cultura completo (10% SFB) foi adicionado. As células foram então submetidas à irradiação com LBI, utilizando o protótipo LaserTABLE (InGaAsP - 780 nm +-3 nm, 25 mW), nas doses de 0,5; 1,5; 3; 5 e 7 J/cm2. Foram realizadas 3 irradiações a cada 24 horas. Decorrido 24 horas da última irradiação, procedeu-se a avaliação da viabilidade celular, produção de proteína total, atividade de fosfatase alcalina, formação de nódulos de mineralização, expressão gênica de colágeno tipo I (Col-I), fator de crescimento fibroblástico tipo 2 (FGF2), fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e fosfatase alcalina (ALP), além da análise da morfologia celular em MEV. Os dados foram submetidos à avaliação de normalidade, e analisados estatisticamente, utilizando os testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney, considerando o nível de significância de 5%. O AZ causou redução significativa da viabilidade celular, produção de proteína total e expressão de Col-I e VEGF para todas as linhagens celulares avaliadas (p<0,05), assim como alterações morfológicas significativas. A expressão e atividade de ALP e a formação de nódulos de mineralização pelos osteoblastos também foi negativamente afetada (p<0,05). A LBI produziu efeitos diversos, de acordo com cada linhagem celular. Considerando as linhagens celulares isoladamente, as melhores doses foram de 5 e 7 J/cm2; 3 J/cm2, e 0,5 J/cm2, para as células epiteliais, fibroblastos e osteoblastos, respectivamente. Associada ao AZ, para as células epiteliais, a dose de 5 J/cm2 promoveu os melhores efeitos, enquanto para os fibroblastos de gengiva e osteoblastos, as melhores doses foram de 3 J/cm2 e 0,5 J/cm2, respectivamente. Estes resultados demonstram que a LBI pode promover estimulação das células da mucosa oral e tecido ósseo tratadas com AZ, assim como das células presentes em áreas adjacentes, o que poderia promover um aumento da capacidade de reparo destes tecidos / Abstract: Recent studies have demonstrated that the etiopathogenesis of bisphosphonates-induced osteonecrosis may be related, at least in part, to the cytotoxicity of these drugs on bone and oral mucosa cells. Systemic and topic antibiotic administration as well as surgical procedures have been used to treat osteonecrosis. Additionally, many clinical studies have proposed low-level laser therapy (LLLT) as an adjuvante treatment for this pathological condition. However, the effects of LLLT on bisphosphonate-treated cells have not been elucidated. Therefore, this study aimed to evaluate the effect of a potent nitrogen-containing bisphosphonate - Zoledronic Acid (ZA) - on cultured bone, fibroblast and epithelial cells, as well as to assess the effects of LLLT applied on these cells previously exposed to ZA. Three human cell lines were used: epitelial cells (HaCaT), gingival fibroblastos (HGF) and osteoblasts (SaOs-2). Cells were seeded in culture medium (DMEM) containing 10% of fetal bovine sérum (FBS) for 48 hours. After that, the culture medium was replaced by FBS-free DMEM, followed by addition of ZA at 5 ?M, for additional 48 hours. After this period, a new DMEM was added (10% FBS). The cells were subjected to LLLT using a laser diode prototype LaserTABLE (InGaAsP - 780 nm +-3 nm, 25 mW), at 0.5; 1.5; 3; 5 and 7 J/cm2. Cells were irradiated for 3 times, every 24 hours. Twentyfour hours after the last irradiation, cell viability, total protein production, alcaline phophatase activity, mineral nodule formation, gene expression of collagen type I (Col-I), fibroblastic growth factor type 2 (FGF2), vascular endotelial growth factor (VEGF) and alcaline phosphatase (ALP), and also cell morphology (SEM) were evaluated. Data were subjected to normality evaluation and statisticaly analyzed using Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests at 5% of significance level. ZA caused a significant decrease on cell viability, total protein production, gene expression of Col-I and VEGF for all cell lines (p<0.05), as well as intense cell morphological changes. Gene expression and activity and mineral nodule formation by osteoblasts were also negatively affected by ZA (p<0.05). LLLT promoted diverse effects, according to cell type. Considering cell lines in an isolated way, 5 and 7 J/cm2; 3 J/cm2; and 0.5 J/cm2 promoted the best results for epitelial cells, gingival fibroblastos and osteoblasts, respectively. Regarding the LLLT applied to epitelial cells pre-treated with ZA, 5 J/cm2 promoted the most significant effects. For gingival fibroblasts and osteoblasts, the most relevant results were obtained at 3 J/cm2 and 0.5 J/cm2, respectively. These data show that LLLT can promote biostimulation on bone ZA-treated cells as well as on fibroblasts and epithelial adjacent cells, what could improve local tissue repair / Doutorado / Patologia / Doutora em Estomatopatologia

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / INTRODUCCIÓN: Los bisfosfonatos corresponden a fármacos ampliamente utilizados en la actualidad para tratar alteraciones del metabolismo óseo. Pese a sus efectos positivos, también presentan efectos adversos; y es así como encontramos a la osteonecrosis de los maxilares asociada a medicamentos. Se han descrito múltiples efectos adversos in vitro de estos fármacos en variadas líneas celulares derivadas de linaje óseo. Por otro lado, estudios recientes han descrito que la molécula salival Histatina-1 es un agente promotor de la reparación de heridas y protector de la mucosa oral. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de Histatina-1 sobre las líneas celulares SAOS-2 y MC3T3-E1 y además comprobar si estos efectos antagonizan el efecto negativo del Ácido Zoledrónico (Zoledronato), el bisfosfonato más potente usando en la actualidad. MATERIAL Y MÉTODOS: Se realizaron ensayos de viabilidad celular con Azul de Tripan y de transmigración en cámara Boyden para ambas líneas celulares, evaluando concentraciones crecientes de Zoledronato y de Histatina-1, tanto de manera independiente, como en conjunto. RESULTADOS: Los resultados obtenidos comprobaron los efectos adversos del bisfosfonato en ambas líneas celulares. Además se observó que la Histatina-1 tiene un efecto pro-migratorio en la línea MC3T3-E, mientras que éste es capaz de antagonizar el efecto del Zoledronato en la migración de ambas líneas celulares y en la mortalidad de la línea MC3T3-E1. CONCLUSIONES: Los efectos positivos alcanzados por Histatina-1 en ambas líneas celulares abren el campo de la investigación en busca de un posible agente pro-reparación ósea. / Adscrito a Proyecto Fondecyt 1140907

El objetivo de estudio fue determinar el nivel de conocimiento sobre osteonecrosis de los maxilares relacionados con los bifosfonatos en cirujanos dentistas, Chiclayo. El estudio tiene un enfoque cuantitativo, nivel de investigación descriptivo, diseño observacional y de tipo prospectivo, transversal y descriptivo. La población total fue de 1188 Cirujanos Dentistas registrados en el Colegio Odontológico del Perú, región Lambayeque en donde se realizó un muestreo aleatorio simple y se obtuvo una muestra de 341 cirujanos dentistas. Se creó un cuestionario virtual en el programa Google Forms, que estuvo conformado por 16 preguntas con 5 alternativas de respuesta para evaluar el nivel de conocimiento, con características dicotómicas, calificando desde bajo a alto, donde la puntuación baja era de 0 – 5, medio de 6 – 10 y alto de 11 – 16. Cada una de las respuestas correctas recibió una puntuación de 1; mientras que, una respuesta incorrecta recibió una puntuación de 0. Se encontró a los cirujanos dentistas, el 56.3% tienen un nivel de conocimiento medio sobre osteonecrosis de los maxilares relacionados con los bifosfonatos, el 38.1% tienen nivel alto y el 5.6% tienen nivel bajo.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-10-27T10:50:40Z No. of bitstreams: 1 475906 - Texto Completo.pdf: 2818432 bytes, checksum: ef1bbe62cc37365a42f48dd4ca4182ea (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-27T10:50:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 475906 - Texto Completo.pdf: 2818432 bytes, checksum: ef1bbe62cc37365a42f48dd4ca4182ea (MD5) Previous issue date: 2015-07-17 / Bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw (BRONJ) is an important side-effect of bisphosphonates. The condition has high morbidity and its treatment is difficult, where many therapies have been tried including antibiotics, surgical interventions, and also some alternative therapies such as low-level laser therapy, platelet-rich plasma and hyperbaric oxygen therapy (HBOT). Nevertheless, there is no consensus about the effectiveness of HBOT in BRONJ. The aim of the present study was to investigate the effect of HBOT on tooth extraction site in rats treated with bisphosphonate. Thirty-five Wistar rats were treated with zoledronic acid, subjected to tooth extractions and allocated into groups according to HBOT regimen: (1) 7 days of HBOT; (2) 14 days of HBOT; (3) without HBOT (7-day control); (4) without HBOT (14-day control). The site of tooth extractions was analyzed by histomorphometry and immunohistochemistry. Bone exposure volume did not significantly differ between pre- and post-HBOT or between test groups and controls.At 7 days, the HBOT group showed amounts of epithelium and root fragment that were significantly less than the control. At 14 days, non-vital bone was significantly less in the HBOT group than in the control. HBOT groups compared to each other showed higher amounts of non-vital bone and less root fragment at 7 days. The HBOT group showed at 7 days lower expression of VEGF, RANKL, BMP-2 and OPG compared to the control, whereas at 14 days, there was no significant difference. Comparing HBOT groups at 7 and 14 days to each other, VEGF and OPG showed significantly higher expression at 14 days, whereas RANKL and BMP-2 did not show any significance.Conclusion: HBOT can reduce the amounts of non-vital bone microscopically detected in tooth extraction sites of rats subjected to bisphosphonate therapy. The effect seems to occur in a dose-dependent mode. Further studies are required to clarify the mechanisms accounting for this effect. / A osteonecrose maxilar associada aos bisfosfonatos (bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw, BRONJ) ? um importante efeito adverso desses f?rmacos. A condi??o exibe elevada morbidade e dif?cil tratamento, sendo que v?rias modalidades terap?uticas t?m sido empregadas, entre as quais se destacam antibioticoterapia, interven??es cir?rgicas e terapias alternativas como a terapia a laser de baixa intensidade, plasma rico em plaquetas e oxigenoterapia hiperb?rica (hyperbaric oxygen therapy, HBOT). Entretanto, n?o existe consenso sobre a efetividade da HBOT no tratamento da BRONJ. O presente estudo teve por objetivo investigar o efeito da HBOT em s?tio de exodontias em ratos sob tratamento com bisfosfonatos. Trinta e cinco ratos Wistar foram tratados com ?cido zoledr?nico, submetidos a exodontias e distribu?dos em grupos de acordo com o regime de HBOT recebido: (1) 7 dias de HBOT; (2) 14 dias de HBOT; (3) sem HBOT (controle de 7 dias); (4) sem HBOT (controle de 14 dias). O s?tio das exodontias foi analisado por meio de histomorfometria e imunoistoqu?mica. O volume de exposi??o ?ssea n?o diferiu significativamente entre os per?odos pr?- e p?s-HBOT, nem entre grupo-teste e controle.Aos 7 dias, o grupo HBOT exibiu propor??o de epit?lio e resto radicular significativamente menor que o controle. Aos 14 dias, a propor??o de osso n?o-vital foi significativamente menor no grupo HBOT que no controle. Quando os grupos-teste foram comparados entre si, foi observada maior propor??o de osso n?o-vital e menor propor??o de resto radicular aos 7 dias. O grupo HBOT exibiu, aos 7 dias, express?o de VEGF, RANKL, BMP-2 e OPG significativamente menor que o controle, enquanto aos 14 dias essa diferen?a n?o foi significativa. Quando os grupos-teste foram comparados entre si, VEGF e OPG exibiram express?o significativamente maior aos 14 dias, enquanto RANKL e BMP-2 n?o exibiram diferen?a significativa.Conclus?o: A HBOT est? associada a menor propor??o de osso n?o-vital detectado microscopicamente em s?tios de exodontias de ratos submetidos a terapia com bisfosfonato. O efeito parece ser dose-dependente e novos estudos s?o necess?rios para esclarecer os mecanismos respons?veis por esse efeito.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 456862.pdf: 1746696 bytes, checksum: c92dca2426345a2d123a27f95d55a3b7 (MD5) Previous issue date: 2014-01-10 / Bisphosphonates are drugs widelly used to treat diseases characterized by intense bone resorption. Although very efficacious, they are also associated with cases of osteonecrosis in jaw bones called bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaws (BRONJ). The disease is difficult to treat and its etiology is considered multifactorial but it has not yet been completely understood. Among other etiologic factors, the major or secondary role of microorganisms in BRONJ has been discussed. The aim of this work was to evaluate by means of histomorphometry in Gram, Gomori-Grocott and immunohistochemistry (IHC) the microorganisms found in surgically induced wounds in maxillae of rats subjected to bisphosphonate therapy. Thirty-four rats were allocated into three groups according to the treatment received: (1) zoledronic acid group (n=12); (2) clodronate group (n=12); and (3) control group (n=10, normal saline). Sixty days after started the treatment, tooth extractions and surgical wounds in soft tissue were performed. Forty-two days after surgeries, rats were euthanized, the specimens were processed and histological analysis performed. At the tooth extraction site, the zoledronic acid group had higher prevalence of Actinomyces than the clodronate and control, whereas at the soft tissue wound, both test groups showed higher values than control. Candida occurrence did not significantly differ between the groups. At the tooth extraction site, single Gram-positive cocci were more prevalent in the zoledronic acid, whereas at the soft tissue wound, they were more prevalent in both test groups than controls. Single Gram-negative cocci did not show any significant difference between the groups at the tooth extraction site; at the soft tissue wound, they were more prevalent in the zoledronic acid group. At the tooth extraction site, bacilli did not differ between the groups, whereas at the soft tissue wound site, they were significantly higher in the test groups. Diplococci, streptococci and staphylococci were rarely found, without significant difference between the groups. Actinomyces was the most prevalent microorganism, followed by single cocci and bacilli. Streptococci, staphylococci, Candida and diplococci do not seem to play a significant role in such lesions whereas the anatomical site seems to be a determinant of the microorganisms involved. / Bisfosfonatos s?o f?rmacos amplamente empregados no tratamento de doen?as caracterizadas por intensa reabsor??o ?ssea e t?m sido associados a quadros de osteonecrose maxilar (BRONJ). A BRONJ ? uma condi??o de dif?cil tratamento, cuja etiologia, embora considerada multifatorial, n?o foi completamente esclarecida. Entre outros fatores etiol?gicos, a participa??o dos microrganismos como fator principal ou secund?rio tem sido discutida na literatura. O presente estudo teve por objetivo avaliar, por meio de histomorfometria nas t?cnicas de Gram, Gomori-Grocott e imunoistoqu?mica (IHQ), os microrganismos de feridas cir?rgicas induzidas em maxilas de ratos sob terapia com bisfosfonatos. Trinta e quatro ratos foram distribu?dos em tr?s grupos de acordo com o tratamento administrado: (1) grupo ?cido zoledr?nico (n=12); (2) grupo clodronato (n=12); e (3) grupo-controle (n=10, solu??o salina). Sessenta dias ap?s iniciado o tratamento, os animais foram submetidos a exodontias e indu??o cir?rgica de les?o de tecido mole. Decorridos 42 dias dos procedimentos cir?rgicos, foi realizada a eutan?sia, e os esp?cimes foram submetidos a processamento histol?gico. No s?tio das exodontias, o grupo ?cido zoledr?nico teve maior preval?ncia de Actinomyces que o clodronato e o controle, enquanto no s?tio da ferida de tecido mole, ambos os grupos-teste exibiram maiores valores que o controle. A ocorr?ncia de Candida n?o diferiu significativamente entre os grupos. No s?tio de exodontia, cocos Gram-positivos isolados foram mais prevalentes no grupo ?cido zoledr?nico, ao passo que, na regi?o de ferida de tecido mole, eles foram mais prevalentes nos grupos-teste que no controle. A preval?ncia de cocos Gram-negativos isolados n?o exibiu diferen?a significativa entre os grupos no s?tio das exodontias; entretanto, no s?tio da ferida de tecido mole, foi maior no grupo ?cido zoledr?nico. Os bacilos n?o diferiram entre os grupos no s?tio de exodontia, mas na ?rea de ferida de tecido mole, foram mais prevalentes nos grupos-teste. A ocorr?ncia de diplococos, estreptococos e estafilococos foi rara e n?o exibiu diferen?a significativa entre os grupos. Tanto em s?tio de exodontia, quanto de ferida de tecido mole, o Actinomyces foi o microrganismo mais prevalente seguido pelos cocos isolados e bacilos. Estreptococos, estafilococos, Candida e diplococos n?o exercem papel significativo no desenvolvimento das les?es. O s?tio anat?mico parece ser fator determinante dos microrganismos envolvidos.