Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2016-10-11T19:43:22Z No. of bitstreams: 1 2014 - Maria Luiza Ribeiro de Oliveira.pdf: 7923335 bytes, checksum: b4bf6ee6e3e8616e057c10373b9ec475 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T19:43:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014 - Maria Luiza Ribeiro de Oliveira.pdf: 7923335 bytes, checksum: b4bf6ee6e3e8616e057c10373b9ec475 (MD5) Previous issue date: 2014-09-26 / CAPES / The aim of this study was to morphologically characterize the external appendages (buccula, rostrum; stridulatory groove; scutellum of male legs and genitalia of females) Triatoma carcavalloi, Triatoma circummaculata and Triatoma rubrovaria compare the morphology and morphometry of exoc?rios bodies and opercula of eggs through optical and scanning electron microscopy, besides examining the bionomic characteristics of T. carcavalloi in laboratory conditions, providing subsidies to assess the vectorial capacity of this species. Morphostructural the differences of adults were illustrated in scutellar region where only one species, T. circummaculata, presented in the harth form median depression. In the analyzes of the cephalic region, stridulatory groove is in the form of "U" shaped and T. circummaculata "V" T. carcavalloi and T. rubrovaria the buccula and T. carcavalloi described how to T. rubrovaria "U" and T. circummaculata "V". Already the rostrum of T. carcavalloi, T. circummaculata and T. rubrovaria presented two side slits 1 + 1 at the apex. Were analyzed and highlighted significant differences in the length, width and diameter of the body and lid of the eggs of T. rubrovaria, T. carcavalloi and T. circummaculata. In the femurs of the legs of the three species, in both sexes a pair of subapical denticles were found. The spongy pits were found only in males, tibia of fore and middle legs. Regarding the biology of T. carcavalloi, the average incubation period of the eggs in T. carcavalloi was 22.7 days. The largest number of eggs / female / week was observed during the warmer months and the eggs that failed to hatch were fertile. The first day of blood meal was 3.13 days after hatching, on average. The intermoult period N1-N2 averaged de18,52 days; N2-N3 was 62.77 days; N3-N4 was 86.93 days; N4-N5 and N5 was 119.05 days, adult was 193.43 days. The overall average of feeds throughout the nymphal development was 13.4. The results achieved for starvation resistance indicated that the nymphs of 3rd, 4th and 5th stages have higher resistance than adults, and in this case the males were less resistant than females. The highest mortality rate was recorded in N3 (22.2%). The median survival was 25.6 weeks for adultos.O total life cycle was long, averaging 503.4 dias. A general evaluation of the results showed that in all studied morphological characters there were significant differences in all three species, putting each species in its specific status. However, the species that differs in the largest number of features, particularly the size of the structures is T. circummaculata. The data obtained in addition to expanding the knowledge of T. carcavalloi bion?mico contribute to the assessment of the possible role of this species in the transmission of T. cruzi. / O objetivo deste trabalho foi caracterizar morfologicamente os ap?ndices externos (b?cula, rostro; sulco estridulat?rio; escutelo de machos, patas e genit?lia de f?meas) deTriatoma carcavalloi, Triatoma circummaculata e Triatoma rubrovaria, comparar a morfologia e a morfometria dos exoc?rios dos corpos e op?rculos dos ovos atrav?s da microscopia ?tica e eletr?nica de varredura, al?m de examinar as caracter?sticas bion?micas de Triatoma carcavalloi em condi??es de laborat?rio, fornecendo subs?dios para avaliar a capacidade vetorial dessa esp?cie. Foram ilustradas as diferen?as morfoestruturais dos adultos na regi?o escutelar onde apenas uma esp?cie, T. circummaculata, apresentou a forma codiforme na depress?o mediana. Nas an?lises da regi?o cef?lica, o sulco estridulat?rio ? em forma de ?U? em T. circummaculata e em forma de "V" em T. carcavalloi e T. rubrovaria, as b?culas de T. carcavalloi e T. rubrovaria apresentaram a forma de ?U? e T. circummaculata de ?V?. J? o rostro de T. carcavalloi, T. circummaculata e T. rubrovaria apresentaram duas fendas laterais 1+1 no ?pice. Foram analisadas e evidenciadas diferen?as significativas no comprimento, largura e di?metro do corpo e do op?rculo dos ovos de T. rubrovaria, T. carcavalloi e T. circummaculata. Nos f?mures das patas das tr?s esp?cies, em ambos os sexos foram encontrados um par de dent?culos subapicais. As fossetas esponjosas foram encontradas somente nos machos, nas t?bias das patas anteriores e medianas. Em rela??o a biologia de Triatoma carcavalloi, o per?odo m?dio de incuba??o dos ovos em T. carcavalloi foi de 22,7 dias. O maior n?mero de ovos / f?mea /semana foi observado durante os meses mais quentes e os ovos que n?o eclodiram eram f?rteis. O primeiro dia de repasto sangu?neo foi de 3,13 dias ap?s a eclos?o, em m?dia. O per?odo de intermuda N1-N2 foi em m?dia de18,52 dias; N2-N3 foi 62,77 dias; N3-N4 foi 86,93 dias; N4-N5 foi 119,05 dias e N5-adulto foi 193,43 dias. A m?dia geral de alimenta??es durante todo o desenvolvimento ninfal foi de 13,4. Os resultados logrados para resist?ncia ao jejum indicaram que as ninfas de 3?, 4? e 5? est?dios apresentam maior resist?ncia do que os adultos, e neste caso os machos foram menos resistentes do que as f?meas. A taxa de mortalidade mais alta foi registrada em N3(22,2%). A sobreviv?ncia m?dia foi de 25,6 semanas para os adultos.O ciclo de vida total foi longo, com m?dia de 503,4 dias.Uma avalia??o geral dos resultados apontou que em todos os caracteres morfol?gicos estudados houveram diferen?as significantes nas tr?s esp?cies, colocando cada esp?cie em seu status espec?fico. Entretanto, a esp?cie que difere em maior n?mero de caracter?sticas, principalmente no tamanho das estruturas ? Triatoma circummaculata. Os dados obtidos al?m de ampliar o conhecimento bion?mico de Triatoma carcavalloi contribuem para a avalia??o de uma poss?vel participa??o desta esp?cie na transmiss?o do T. cruzi.

Submitted by Nivaldo Melo (nivaldo.melo@ufvjm.edu.br) on 2015-11-24T14:55:41Z No. of bitstreams: 2 dimas_ramon_mota_queiroz.pdf: 1024970 bytes, checksum: 0466fd6b8765945d60ee22030aa0c778 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-12-01T16:00:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dimas_ramon_mota_queiroz.pdf: 1024970 bytes, checksum: 0466fd6b8765945d60ee22030aa0c778 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-01T16:00:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dimas_ramon_mota_queiroz.pdf: 1024970 bytes, checksum: 0466fd6b8765945d60ee22030aa0c778 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2015 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / O controle vetorial da doen?a de Chagas (DCh) por meio do Programa de Controle da Doen?a de Chagas foi um marco no Brasil e exemplo para outros pa?ses, por diminuir drasticamente o n?mero de domic?lios infestados e eliminar a transmiss?o vetorial pelo Triatoma infestans. O Vale do Jequitinhonha ? conhecido por ter sido uma regi?o de ativa transmiss?o da DCh, nos per?odos iniciais do controle. A pobreza e a falta de informa??o das popula??es residentes ? ?poca, associado ?s m?s condi??es das edifica??es, propiciavam condi??es para a manuten??o de popula??es de triatom?neos no ambiente domiciliar. O presente estudo objetivou identificar, analisar e desvelar a atividade de trabalho de agentes e gestores que atuaram no controle vetorial da DCh na regi?o do Vale do Jequitinhonha entre as d?cadas de 50 e 90 do s?culo XX, como enxergavam o Programa e o modo que eram recebidos pela popula??o em um contexto de controle vetorial verticalizado. O material de an?lise foi obtido pela realiza??o de entrevistas com agentes e gestores que atuaram na regi?o no per?odo proposto, com grava??o em ?udio, transcri??o e posterior an?lise pela t?cnica de an?lise de conte?do. Foi poss?vel identificar que o sal?rio foi o principal motivo da escolha do servi?o, tamb?m associado ? perman?ncia dos agentes na fun??o. Em rela??o ?s dificuldades existentes na realiza??o do servi?o foi destacada a locomo??o, que se dava a p? por grandes dist?ncias, associada ? quantidade de peso levado pelos agentes, aos riscos aos quais estavam expostos e ? rigidez do Programa. A rela??o com os moradores foi evidenciada de maneira positiva, a partir do momento em que estes passavam a conhecer o servi?o e visualizar seus benef?cios. Os inseticidas utilizados foram associados positivamente ? aceita??o da popula??o e negativamente ?s dificuldades no transporte e exposi??o das equipes de trabalho, sendo a maior parte destes problemas relacionados ao desconhecimento sobre os efeitos do produto ao organismo. Em rela??o ao ambiente familiar, os entrevistados apontaram a saudade e aus?ncia no lar por per?odos prolongados como uma dificuldade, o que esteve relacionado a outros problemas como o alcoolismo e o div?rcio em alguns casos. Apesar das dificuldades, as falas est?o associadas ? satisfa??o com o trabalho, sendo destacada a seriedade e a efic?cia das a??es realizadas. N?o obstante ao sucesso do Programa, s?o apontados problemas no modelo atual de descentraliza??o o que se refere ? falta de apoio da gest?o municipal para a realiza??o do servi?o, baixa motiva??o, rotatividade e despreparo dos agentes municipalizados. Palavras-chave: An?lise qualitativa; Doen?a de Chagas; Controle vetorial; Atividade de / Disserta??o (Mestrado Profissional) ? Programa de P?s-Gradua??o em Sa?de, Sociedade e Ambiente, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2014. / ABSTRACT Vector control of Chagas disease by the Chagas Disease Control Program was a historic milestone in Brazil and an example for other countries, due to drastically reduction in number of houses infested by triatomines and to elimination of vector-borne transmission by Triatoma infestans. Jequitinhonha Valley is known as a region that presented high levels of Chagas disease transmission at the beginning of control activities. Poverty and lack of information among people were factors which allowed maintenance of triatomine populations in domestic environment. The present study aimed to identify, analyze and unveiling the work activity of agents and managers who worked in vector control of Chagas disease at Jequitinhonha Valley from 50s to 90s of 20th century, including how they perceived the control program and how they were received by residents. Study material was obtained by means of interviews with nine agents and three managers who worked at region. The interviews were recorded, transcribed, and analyzed by the instrument of content analysis that consists in highlighting passages according to their meanings, joining them into categories and making inferences. It was observed that the payment was the main reason of job chose. The heavy that was needed to carry by big distances, risks, and inflexibility of Program was pointed as difficulties. The relationship between agents and population was improved when people saw the benefices of work. The agents reported difficulties in manipulation of insecticides during spraying activities. In the family environment, they pointed absence from home in extended periods as a difficulty which was related to other problems such as alcoholism and divorce, in some cases. Despite the difficulties, was observed job satisfaction, and highlighted effectiveness of actions taken. Also. was mentioned problems in the current model of decentralization which refers to the lack of support of the municipal administration to perform the service, low motivation and lack of preparation of municipal agents. Keywords: Qualitative analysis; Chagas disease; Vector control; Work activity.

Submitted by carla santos (biblioteca.cp2.carla@bahiana.edu.br) on 2018-08-15T19:35:26Z No. of bitstreams: 1 FL??VIA DA SILVA VILLAS-B??AS.pdf: 2796975 bytes, checksum: 86a0ab8784427655cff4212727c5e6e6 (MD5) / Approved for entry into archive by JOELMA MAIA (ebmsp-bibliotecacp2@bahiana.edu.br) on 2018-08-16T16:42:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 FL??VIA DA SILVA VILLAS-B??AS.pdf: 2796975 bytes, checksum: 86a0ab8784427655cff4212727c5e6e6 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T16:42:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FL??VIA DA SILVA VILLAS-B??AS.pdf: 2796975 bytes, checksum: 86a0ab8784427655cff4212727c5e6e6 (MD5) Previous issue date: 2018-03-23 / Fundamento: A doen??a de Chagas ?? uma infec????o parasit??ria sist??mica que afeta diversos ??rg??os, inclusive o olho, e pode evoluir com altera????es neuroftalmol??gicas na fase cr??nica da doen??a. No entanto, nenhum estudo foi realizado, at?? o momento, para esclarecer os padr??es e caracter??sticas das altera????es neuroftalmol??gicas a fim de oferecer possibilidades de preven????o e desenvolvimento de terapias precoces. Objetivos: (1) explorar a hip??tese de que a doen??a de Chagas predisp??e a altera????es neuroftalmol??gicas; (2) testar a hip??tese de que a doen??a de Chagas predisp??e a redu????o da press??o intraocular; (3) explorar potenciais causas cardiovasculares para altera????es neuroftalmol??gicas em pacientes chag??sicos. Metodologia: estudo observacional, de corte transversal, incluindo pacientes encaminhados do ambulat??rio de Chagas e Insufici??ncia Card??aca do Hospital S??o Rafael, no per??odo de junho de 2014 a junho de 2016, com doen??a de Chagas confirmada por dois testes sorol??gicos positivos. Pacientes controles, pareados por sexo e idade, foram recrutados a partir dos funcion??rios do Instituto Brasileiro de Oftalmologia e Preven????o da Cegueira, onde o estudo foi realizado. Os pacientes foram submetidos a exames oftalmol??gicos, incluindo medida da acuidade visual, refra????o, medida da press??o intraocular, avalia????o estrutural e funcional do nervo ??ptico e camada de fibras nervosas por meio de retinografia, tomografia de coer??ncia ??ptica e perimetria automatizada padr??o. Resultados: foram avaliados 41 indiv??duos portadores da doen??a de Chagas e 41 controles, sendo 26 (63%) do sexo feminino, com m??dia de idade de 59??8 anos em ambos os grupos (p= 0,96). Dentre os pacientes chag??sicos, 15 (37%) apresentavam a forma card??aca com disfun????o do ventr??culo esquerdo; 14 (34%), forma card??aca sem disfun????o do ventr??culo esquerdo e 12 (29%), forma indeterminada. Em rela????o ao Objetivo 1, foram observadas altera????es neuroftalmol??gicas em 24 pacientes (58,5%) do grupo chag??sico e 07 (17%) do grupo controle (p ??? 0,01). Foram vistas altera????es do nervo ??ptico sugestivas de glaucoma, afinamento localizado da rima neural, hemorragia peripapilar, palidez do nervo ??ptico, defeito da camada de fibras nervosas localizado e redu????o da espessura da camada de fibras nervosas peripapilar. Observou-se que a preval??ncia das altera????es neuroftalmol??gicas n??o mostrou diferen??a entre os pacientes chag??sicos com e sem disfun????o ventricular (n= 15 e n= 26, respectivamente; p=0,13). Por??m, a compara????o dos chag??sicos (n= 13) sem disfun????o ventricular com os controles (n=41) mostrou diferen??a significante (p=0,005). O exame de tomografia de coer??ncia ??ptica mostrou diminui????o da espessura global da camada de fibras nervosas (89 ?? 9.7 ??m) e da espessura da camada de fibras nervosas inferior (113 ?? 17.4 ??m) nos pacientes chag??sicos. Nos controles, esses valores foram de 94 ?? 10.9 ??m com p =0.03 e 121 ?? 19.7 ??m com p=0.03, respectivamente. No Objetivo 2, n??o foi observada diferen??a na press??o intraocular entre os grupos chag??sico e controle (m??dias 14,5 ?? 4 mmHg e 14 ?? 4mmHg, respectivamente, p=0,53). Na avalia????o do Objetivo 3, n??o foram observadas diferen??as nos padr??es cardiovasculares dos pacientes chag??sicos com e sem altera????es neuroftalmol??gicas. Conclus??es: Os pacientes com doen??a de Chagas tiveram maior preval??ncia de altera????es neuroftalmol??gicas do que os controles sem a doen??a. A press??o intraocular n??o influenciou os achados descritos, uma vez que foi semelhante entre os grupos. A compara????o da estrutura e fun????o card??acas dos pacientes chag??sicos que tiveram altera????es neuroftalmol??gicas com os que n??o tiveram, sugeriu uma influ??ncia da doen??a de Chagas independente da cardiopatia apresentada.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:09:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 389724.pdf: 1507104 bytes, checksum: d66164492503d9b8044243e149198bf8 (MD5) Previous issue date: 2007-03-23 / O triatom?neo Panstrongylus megistus ? um dos mais importantes vetores na transmiss?o secund?ria da doen?a de Chagas no Brasil. Nos estados do sul, esta esp?cie ocorre principalmente em ec?topos silvestres, ao contr?rio de Minas Gerais, Bahia e algumas ?reas da regi?o nordeste, onde ? encontrado em ec?topos artificiais, apresentando maior valor epidemiol?gico. O presente estudo buscou avaliar os ?ndices de infec??o por Trypanosoma cruzi em P. megistus e no gamb?, Didelphis albiventris, o mais importante reservat?rio silvestre do protozo?rio, bem como as fontes alimentares utilizadas por estes insetos. A ?rea de coleta est? inserida em um fragmento de floresta, localizado no bairro Ponta Grossa, zona periurbana do munic?pio de Porto Alegre. As coletas ocorreram entre outubro de 2005 e setembro de 2006, onde foram investigados anexos no peridomic?lio e tocas, principalmente de gamb?s, no ambiente silvestre. Para o encontro das tocas utilizaram-se as t?cnicas de carretel de rastreamento e transecto. Os transectos foram tra?ados no sentido norte sul do fragmento, considerando tocas encontradas at? 5 metros da linha estipulada. A infec??o dos gamb?s foi determinada por xenodiagn?stico e a amostra de T. cruzi caracterizada por rea??o de polimeriza??o em cadeia (PCR). A an?lise de fonte alimentar dos barbeiros coletados foi realizada atrav?s do teste de preciptina. Os P. megistus adultos foram capturados apenas no ambiente peridomiciliar. Dos 33 encontrados, 28 foram analisados e 18 (64%) estavam infectados por T. cruzi. Os triatom?neos foram observados de outubro a fevereiro e o m?s de dezembro foi o de maior ocorr?ncia. A amostragem do ambiente natural indicou 61 tocas, sendo que, no total, 10 (16%) apresentaram ninfas ou vest?gios de barbeiros. A presen?a do barbeiro foi constatada somente em tocas de ?rvores, o que indica uma prefer?ncia arbor?cola da esp?cie. Nestas tocas foram obtidas 27 ninfas, onde 19 (73%), das 26 analisadas, estavam infectadas por T. cruzi. Entre os 43 gamb?s capturados, 39 foram analisados e 27 (69%) estavam infectados pelo protozo?rio. A an?lise de preciptina resultou em sete fontes alimentares utilizadas pelos barbeiros adultos: ave (13/28 46,4%), roedor (8/28 28,6%), gamb? (4/28 14,3%), tatu (3/28 10,7%), gato (3/28 10,7%), c?o (3/28 10,7%) e lagarto (2/28 7,1%); e seis associadas a ninfas: ave (12/26 46,2%), roedor (9/26 34,6 %), gamb? (7/26 26,9%), tatu (1/26 3,8%), cavalo (1/26 3,8%) e boi (1/26 3,8%). O n?mero de fontes alimentares encontradas indica o ecletismo alimentar tanto em ninfas como em adulto de P. megistus. Os altos ?ndices de infec??o por T. cruzi encontrados, tanto nos barbeiros como nos gamb?s, e a presen?a de ninfas alimentadas em gamb?s nos ocos de ?rvores do ambiente natural, indicam que ambos os indiv?duos s?o respons?veis pela manuten??o do ciclo silvestre do protozo?rio no local. A aus?ncia de col?nias peridomiciliares e a semelhan?a entre as fontes alimentares dos adultos e das ninfas mostram a baixa tend?ncia invasiva da esp?cie no local, possivelmente devido ao estado de preserva??o da mata somado ao clima ?mido.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2016-10-13T18:50:52Z No. of bitstreams: 1 2015 - Vitor Sueth Santiago.pdf: 10611307 bytes, checksum: 28bcb538332e756e608d3f04694b22b6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-13T18:50:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015 - Vitor Sueth Santiago.pdf: 10611307 bytes, checksum: 28bcb538332e756e608d3f04694b22b6 (MD5) Previous issue date: 2015-10-16 / CAPES / FAPERJ / CAPES-PROCAD / This work aimed to characterize the trypanocidal activity of curcumin, as well as synthesise a set of structurally-related compounds to investigate the relationships between chemical structure and biological activity (SAR). The isolation of natural curcumin was carried along with two other natural curcuminoides, which together with a third (cyclocurcumin) formed the very first set of derivatives subjected to a screening against epimastigotes forms of T. cruzi (Dm28c strain). This screening pointed out the 1,3-diketone moiety as well as the methoxyl- group in the position 3 of the aromatic ring as potencial pharmacophores. Then, a set of synthetic analogues were prepared based on rational changes on the three structural subunits present in curcumin. These synthetic derivatives were subjected to the same screening, and three of them showed superior trypanocidal activity compared to the natural product. Then, taking the informations obtained from this first screening, the synthesis of constrained analogues were performed which showed an interesting result based on the ring-size of the derivatives. In parallel, a series of 1,3-pyrimidine derivatives were prepared, based on potential bioisosteric relationships between the 1,3-diketone moiety and the 1,3-pyrimidine heterocycle. All the derivatives obtained were tested against T. cruzi, and those shown trypanocidal activity were submited to a cell viability assay, where three of the synthetic derivatives demonstrated selective toxicity against the parasite: (E) ? 2 - (4 ? hydroxy - 3-methoxybenzylidene) ? 6 - ((E) ? 3 - (4 ? hydroxy ? 3 - methoxyphenyl) acryloyl) cyclohexanone; (2E,6E) - 2,6 ? bis (4 ? hydroxy ? 3 -methoxybenzylidene) cyclohexanone and 4,4 '- ((1E,1'E) - (2 ? chloropyrimidine - 4,6 - diyl) bis (ethene - 2,1 - diyl)) bis (2 -methoxyphenol). These derivatives were tested in an assay of infected macrophages, and they prove to be toxic for both parasite forms (trypomastigote and amastigote). The investigation of the probable mechanism of action started with a scanning/transmission electronic microscopy of the curcumin-treated parasites in a sublethal dose. The analysis of ultraestructural changes in parasite treated cells suggested the enzyme CYP51 as well as tubulin as possible targets for curcumin. The HPLC analysis of the membrane lipids of treated parasites showed no difference when compared to non treated control. The flow cytometry analysis showed a characteristic profile similar to those compounds who binds to tubulin and disrupts microtubules. To improve this hypothesis, the T. cruzi tubulin was modelled by homology and the curcuminoids were docked at the literature known curcumin site. The results obtained showed a good correlation between the best-scored poses obtained from the docking study and the experimental IC50 values obtained from the assays of the natural derivatives against parasite cells. / Este trabalho teve como principal objetivo a caracteriza??o da atividade tripanocida da curcumina, bem como a s?ntese diversos derivados estruturalmente an?logos a fim de investigar rela??es entre a estrutura qu?mica e a atividade biol?gica. O isolamento da curcumina da matriz natural foi realizado juntamente com outros dois curcuminoides, que em conjunto com um terceiro (ciclocurcumina) formou o primeiro conjunto de compostos submetido a uma triagem biol?gica sobre formas epimastigotas de T. cruzi (cepa Dm28c). Nesta triagem foi detectado como farmac?foro a subunidade 1,3-dicetona e o grupamento metoxila na posi??o 3 do anel arom?tico. Em seguida, foi sintetizada uma cole??o de derivados com modifica??es em tr?s subunidades estruturais da curcumina, os quais foram submetidos a uma triagem frente ao parasito. Tr?s dos an?logos sint?ticos apresentaram atividade t?xica frente ao parasito de maneira superior ao produto natural. Em seguida, usando informa??es da primeira triagem, procedeu-se para a s?ntese de an?logos estruturalmente restritos, os quais apresentaram um importante resultado acerca dos aspectos conformacionais associados ao tamanho do anel utilizado para a restri??o. Em paralelo foi sintetizada uma s?rie de derivados estruturalmente originais explorando a potencial rela??o bioisost?rica entre a subunidade 1,3-dicetona e o anel pirimid?nico. Ap?s triagem de todos os derivados frente a formas epimastigotas de T. cruzi, foi realizado um ensaio de viabilidade celular onde tr?s derivados sint?ticos demonstraram toxicidade seletiva frente ao parasito nas concentra??es testadas: (E) -2- (4-hidr?xi-3-metoxibenzilideno) ? 6 - ((E) ? 3 - (4 - hidr?xi- 3- -metoxifenil) acriloil) cicloexanona, (2E,6E) -2,6-bis (4 ? hidr?xi ? 3 - metoxibenzilideno) cicloexanona e 2-cloro-4,4'- ((1E,1'E) ? pirimidina - 4,6 - diilbis (eteno - 2,1-diil)) bis (2-metoxifenol). Estes derivados foram utilizados em um modelo de macr?fagos infectados, onde provaram ser t?xicos tanto para formas tripomastigotas quanto para formas amastigotas do parasito. Na investiga??o do prov?vel mecanimo de a??o desta classe de compostos, os parasitos tratados com curcumina foram submetidos ? microscopia eletr?nica, onde foram observadas altera??es ultraestruturais no parasito que sugerem como alvos a CYP51 e a tubulina. O ensaio de quantifica??o dos lip?dios n?o-saponific?veis da membrana celular de T. cruzi sugere que n?o houve inibi??o de CYP51, ao passo que a citometria de fluxo das culturas tratadas mostrou um perfil caracter?stico de subst?ncias que atuam sobre os microt?bulos das c?lulas, se ligando ? tubulina. Foi ent?o constru?da por modelagem molecular um modelo de tubulina de T. cruzi onde os curcuminoides naturais ativos foram ancorados, e as pontua??es do ancoramento foram coerentes com os valores de CI50 encontrados.

Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T12:40:01Z No. of bitstreams: 2 joao_gabriel_guimares_luz.pdf: 5854830 bytes, checksum: 3b384576c220fecec7431b8c107b9ea1 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T12:40:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 joao_gabriel_guimares_luz.pdf: 5854830 bytes, checksum: 3b384576c220fecec7431b8c107b9ea1 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T12:40:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 joao_gabriel_guimares_luz.pdf: 5854830 bytes, checksum: 3b384576c220fecec7431b8c107b9ea1 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-07T12:40:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 joao_gabriel_guimares_luz.pdf: 5854830 bytes, checksum: 3b384576c220fecec7431b8c107b9ea1 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2014 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / O objetivo desse trabalho foi desenvolver um imunosensor fundamentado em espectroscopia de resson?ncia de pl?smons de superf?cie (SPR) para a detec??o de anticorpos anti-Trypanosoma cruzi por meio da imobiliza??o de ant?genos brutos do parasito em monocamadas auto-organizadas mistas (SAMs) formadas por ?cido 11-mercaptoundecan?ico (11-MUA) e ?cido 3-mercaptopropi?nico (3-MPA). Na sua constru??o, as concentra??es de cada alcanotiol, bem como a propor??o de cada um deles na composi??o das SAMs mistas foram definidas atrav?s de c?lculos de cobertura de superf?cie Posteriormente, o ant?geno em diferentes concentra??es foi imobilizado sobre as SAMs mistas ativadas constru?das em disco de ouro e, a varia??o do ?ngulo de SPR (??SPR) decorrente dessa etapa foi monitorada em tempo real. O imunosensor desenvolvido foi ent?o eletroquimicamente caracterizado por voltametria c?clica (VC) e espectroscopia de imped?ncia eletroqu?mica (EIE) e as respostas do mesmo frente a um pool de soros de indiv?duos infectados e n?o infectados pelo T. cruzi foram avaliadas. Em seguida, foram determinados par?metros para otimiza??o do dispositivo, incluindo tempo de imobiliza??o e concentra??o do ant?geno, bloqueio e regenera??o da superf?cie sensora e tempo envolvido nas an?lises do imunoensaio. Por fim, a dilui??o de trabalho do soro e o ponto de corte do imunosensaio foram escolhidos e os ?ndices de desempenho do mesmo como t?cnica para o imunodiagn?stico da DC foram calculados empregando 171 soros, sendo 99 de indiv?duos infectados pelo T. cruzi, 30 de n?o infectados e 42 portadores de outras infec??es. Os maiores valores de foram encontrados para a concentra??o 1.0 mmol L-1 de 11-MUA e 3-MPA e para as SAMs mistas formadas na propor??o de 1:10. A imobiliza??o dos ant?genos foi conduzida com ?xito, de modo que houve linearidade entre a concentra??o utilizada e o ??SPR. Por VC e EIE, foi demonstrado que a liga??o covalente das prote?nas aumentou a resist?ncia ? transfer?ncia eletr?nica quando comparado com o comportamento da sonda eletroqu?mica sobre as SAMs mistas. Ademais, o imunosensor se mostrou, semelhante ao ELISA, capaz de detectar anticorpos anti-T. cruzi em amostras de soros dilu?das at? 1280 vezes. J? em rela??o aos soros negativos, o dispositivo detectou ??SPR significativas apenas at? a dilui??o 1:160, o que demonstrou razo?vel capacidade do m?todo em distinguir indiv?duos infectados de n?o infectados. Dentre os par?metros anal?ticos avaliados ficou definido o tempo de imobiliza??o e a concentra??o do ant?geno em 20 minutos e 30 ?g mL-1, o bloqueio da superf?cie por 10 minutos com solu??o de BSA 1.0%, a regenera??o pela inje??o de SDS 1.0% e o tempo de avalia??o da resposta do dispositivo em 20 minutos. A dilui??o do soro em 1:320 e o ponto de corte a 17.2 m? foram os crit?rios metodol?gicos definidos para o imunosensaio. Os ?ndices de desempenho calculados determinaram um excelente potencial do imunosensor no diagn?stico sorol?gico da doen?a de Chagas, com valores de sensibilidade de 100%, especificidade de 97.2%, valor preditivo positivo igual a 98%, valor preditivo negativo de 100% e acur?cia global estimada em 99.6%. O n?mero de rea??es cruzadas em soros de indiv?duos com leishmaniose visceral foi menor no m?todo proposto (1/7) do que no ELISA (6/7). A partir dos resultados ? poss?vel afirmar que foi desenvolvido com ?xito um imunosensor sens?vel, espec?fico, r?pido, simples e de f?cil execu??o para o diagn?stico sorol?gico da doen?a de Chagas. / Disserta??o (Metrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2014. / ABSTRACT The aim of the present study was to describe the development of an unpublished SPR-based immunosensor for detection of anti-T. cruzi antibodies in human serum through the covalently immobilized T. cruzi antigen on a mixed SAM of 11-mercaptoundecanoic acid (11-MUA) and 3-mercaptopropionic acid (3-MPA) on a SPR sensor chip. In its construction, the concentrations of each alkanethiol, and the proportion of each in the composition of the mixed SAMs were defined by calculation of surface coverage Subsequently, the antigen at different concentrations was immobilized on the activated mixed SAMs built on gold disc, and the change in the SPR angle (??SPR) resulting from this step was monitored in real time. The imunosensor developed was electrochemically characterized by cyclic voltammetry (CV) and electrochemical impedance spectroscopy (EIS), and the responses of a pool of sera from individuals infected and not infected with T. cruzi were also evaluated. Then, some parameters for the optimization of the device were defined, including immobilization time and antigen concentration, blocking and regeneration of the sensor surface and time involved in the analysis of the immunoassay. Finally, the working dilution of the serum and the cut-off point were chosen and the performance indices of the technique were calculated using 171 sera - 99 individuals infected with T. cruzi, 30 not infected and 42 with other infections. The highest values ??of ? were found for the 1.0 mmol L-1 concentration of 11-MUA and 3-MPA and mixed SAMs formed at 1:10 proportion. The immobilization of antigens was conducted successfully, so there was linearity between the concentration used and ??SPR. For VC and EIS has been demonstrated that covalent attachment of the protein increased the electron transfer resistance when compared with the behavior of the electrochemical probe on the mixed SAMs. Furthermore, imunosensor showed, similarity to ELISA, capable of detecting anti-T. cruzi in sera diluted up 1280 times. In relation to the negative sera, the device detected significant ??SPR only until dilution 1:160, which demonstrated the ability of the method to distinguish infected from uninfected individuals. The following analytical parameters were defined: time of immobilization and antigen concentration at 20 minutes and 30 mg mL-1, blocking surface for 10 minutes with 1.0% BSA solution, regeneration by injection of 1.0% SDS and time evaluation of the response of the device in 20 minutes. The serum dilution at 1:320 and cut-off point at 17.2 m? were the methodological criteria for immunoassay. The performance indices calculated for the imunosensor demonstrated a great potential in serological diagnosis of Chagas' disease, with a sensitivity of 100%, specificity of 97.2%, positive predictive value of 98%, negative predictive value of 100% and global accuracy estimated in 99.6%. The number of cross-reactivity with sera from individuals with visceral leishmaniasis was lower (1/7) than in ELISA (6/7). Based on the results, it is possible to stay that a sensitive, specific, rapid, simple and easy immunosensor was successfully with potential application at serological diagnosis of Chagas disease.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RoseanePS_Dissert.pdf: 3732658 bytes, checksum: 742911363ad84dd9ebc1a2c58e9d1d3f (MD5) Previous issue date: 2009-12-14 / Artemisia vulgaris (AV) is an antihelmintic and antimalarial drug; Aloe vera(babosa) acts as antidiabetic, laxative and anti-inflammatory; Benznidazole (BZ) is a trypanocidal of Trypanosoma cruzi (TC). Technetium-99m (99mTc) has been used in nuclear medicine to obtain diagnostic images. This study evaluated the plant effects in TC parasitemia and in the biodistribution of 99mTc in mice. Twenty mice were infected by TC. At the peak of parasitemia, 5 mice received babosa; 5 received AV and 5 received BZ. The parasitemia was determined in 0, 2, 4 and 6 h of drugs administration. Five infected mice without drugs, 5 mice without TC and the group treated with AV, received 99mTc. The radioactivity was calculated. Infected mice that received babosa reduced significantly (p<0.05) the parasitemia. The percentage of activity (%ATI) decreased significantly in the AV group. These results indicate that babosa possibly is an anti-TC drug and AV reduces the %ATI probably due to its biological effects / Artemisia vulgaris (AV) ? um vegetal com propriedades antihelm?ntica e antimal?rica; Aloe vera (babosa) tem ??o antidiab?tica, laxante e anti-inflamat?ria; Benzonidazol (BZ) ? um tripanomicida. O tecn?cio-99m (99mTc), na forma de pertecnetato de s?dio (Na99mTcO4), tem sido usado na medicina nuclear para obten??o de imagens diagn?sticas. Este estudo avaliou o efeito de plantas na parasitemia do T. cruzi e na biodistribui??o do 99mTc em camundongos. Vinte camundongos foram infectados por T. cruzi. No pico da parasitemia, 5 camundongos foram tratados com extrato aquoso de babosa, 5 AV e 5 BZ. A parasitemia foi determinada durante os tempos 0, 2, 4 e 6 horas ap?s administra??o das drogas. Cinco camundongos infectados e que n?o receberam drogas, 5 camundongos n?o infectados e o grupo tratado com AV receberam Na99mTcO4. O percentual de Atividade Total Injetada nos ?rg?os (%ATI/g), correspondente ? energia gama emitida ou radioatividade, foi calculada no contador gama. Os camundongos infectados que receberam babosa reduziram significativamente (p<0,05) a parasitemia. A porcentagem da radiatividade total (%ATI/g) diminuiu significativamente no grupo tratado com AV. Estes resultados indicam que a babosa possivelmente ? uma droga anti-T. cruzi e a AV reduz a %ATI/g provavelmente devido seus efeitos biol?gicos. Este trabalho teve a participa??o de pesquisadores das ?reas de Parasitologia, Estat?stica, Cirurgia, Medicina Nuclear e An?lises Cl?nicas, atestando seu car?ter multidisciplinar

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CarlosRNB_DISSERT.pdf: 3053054 bytes, checksum: 21a986fcce16c387458463b332b62819 (MD5) Previous issue date: 2011-08-01 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Introdu??o: A aus?ncia de dados recentes sobre a infec??o pelo Trypanosoma cruzi na ?rea end?mica do estado do Rio Grande do Norte motivou a realiza??o de um inqu?rito soroepidemiol?gico amostral em moradores da zona rural da mesorregi?o oeste e do munic?pio de Caic?, na mesorregi?o central. M?todos: Dezesseis munic?pios foram sorteados, 15 da mesorregi?o oeste e um da central, com popula??o estimada em 83.852 indiv?duos. Foram coletadas 1.950 amostras de sangue na mesorregi?o oeste e 390 em Caic?. A pesquisa de anticorpos anti-T. cruzi foi realizada usando os kits Chagatest? ELISA, Chagatest? HAI-hemaglutina??o indireta, e a rea??o de imunofluoresc?ncia indireta. Nos soros com resultados indeterminados foi realizado o western blot TESAcruzi? para confirma??o da reatividade. Resultados: A estimativa da soropreval?ncia revelou 6,5% para a mesorregi?o oeste e 3,3% em Caic?. A soropositividade eleva-se progressivamente com a idade at? a quinta d?cada de vida em Caic? e na sexta d?cada no oeste. As preval?ncias mais elevadas foram encontradas em grupos de munic?pios localizados na ?rea central e geograficamente pr?ximos dessa mesorregi?o. Apenas o grau de escolaridade e o conhecimento do triatom?neo evidenciaram associa??o ? soropositividade. N?o foram identificados indiv?duos sororreativos com idade inferior a 18 anos e n?o houve evid?ncia de associa??o quanto ao sexo. Conclus?es: A infec??o pelo T. cruzi persiste mais elevada e concentrada em munic?pios da ?rea central da mesorregi?o oeste, mas sugerem o decl?nio da transmiss?o vetorial nessa mesorregi?o e em Caic?. As vari?veis epidemiol?gicas parecem n?o exercer influ?ncia na soropositividade, ? exce??o da escolaridade e conhecimento do triatom?neo nos sororreativos da mesorregi?o oeste

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:14:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DanielaFN_DISSERT.pdf: 1916728 bytes, checksum: c978ce72793f6aa4c1ad2ea49598626d (MD5) Previous issue date: 2013-06-11 / Introdu??o: O dano mioc?rdico na doen?a de Chagas resulta tanto da a??o parasit?ria quanto da resposta imune do hospedeiro humano. O mimetismo molecular entre prote?nas do Trypanosoma cruzi e v?rios ant?genos do hospedeiro tem sido amplamente descrito gerando c?lulas T CD8+ e anticorpos autorreativos. Entretanto, a gera??o dos autoanticorpos e seu papel na imunopatogenia da doen?a de Chagas ainda n?o t?m sido elucidados, o que nos levou, neste trabalho, a avaliar a produ??o de imunoglobulina G total (IgGt) e seus isotipos anti-T. cruzi, prote?nas card?acas e sua poss?vel associa??o com as diferentes formas cl?nicas da doen?a de Chagas. M?todos: A produ??o de IgGt e isotipos foi mensurada pelo m?todo de ELISA no soro de pacientes com as formas cl?nicas indeterminada (IND, n=72), card?aca (CARD, n=47) e digestiva/cardio-digestiva (DIG/CARD-DIG, n=12) da doen?a de Chagas, usando como ant?genos as formas epimastigota e tripomastigota do T. cruzi e prote?nas card?acas humana (miosina e troponina T). As amostras de indiv?duos n?o infectados saud?veis (CONT, n= 30) e pacientes com cardiomiopatia isqu?mica (ISCH, n=15) foram usadas como controle. Os t?tulos de autoanticorpos foram correlacionados com par?metros da fun??o card?aca obtidos por exames eletrocardiogr?ficos, radiogr?ficos e ecocardiogr?ficos. Resultados: Neste estudo foram inclu?dos 131 indiv?duos sem diferen?a significativa relativa ? idade ou sexo. Destes, 55% foram classificados como IND, 35,9% CARD e 9,1% DIG/CARD-DIG. Os t?tulos de IgGt foram mais elevados em pacientes com as formas cl?nicas IND, CARD e DIG/CARD-DIG do que em indiv?duos CONT e ISCH usando os ant?genos as formas tripomastigotas e epimastigotas do T. cruzi e, prote?nas card?acas humanas. Os pacientes com formas cl?nicas CARD e DIG/CARD-DIG mostraram a produ??o mais elevada de IgG total dirigida contra ant?genos de tripomastigota e epimastigota do que os IND. Os grupos de pacientes IND e CARD apresentaram uma similar produ??o de IgG total espec?fica direcionada ? miosina e troponina T, e mais elevada do que em indiv?duos CONT e ISCH. H? uma correla??o negativa entre a produ??o de anticorpos anti-prote?nas card?acas com a fra??o de eje??o do ventr?culo esquerdo (FEVE) em pacientes chag?sicos cr?nicos. Os pacientes foram agrupados em baixo e alto produtores de autoanticorpos e comparados com a fra??o de eje??o demonstrando que em pacientes alto produtores de anti-troponina T (p=0.042) e miosina (p=0.013) a FEVE foi mais baixa do que os baixo produtores. A maioria dos pacientes chag?sicos produz simultaneamente autoanticorpos direcionados ? ambas prote?nas card?acas (r=0.9508, p=0.0001). Conclus?es: Estes resultados indicam que os autoanticorpos anti- troponina T e miosina card?aca parecem induzir redu??o FEVE e deve ser associado com o desenvolvimento de cardiomiopatia chag?sica

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GeorgeHFS_DISSERT.pdf: 1763122 bytes, checksum: 18e2cb37f905538f998bc0737edfeb96 (MD5) Previous issue date: 2010-12-03 / Trypanosoma cruzi infection was evaluated in 390 resident individuals in different rural communities of Caic? municipality, State of Rio Grande do Norte (RN). Of 28 investigated communities the soroprevalence of T. cruzi infection was 2.8% in eight rural communities individuals. The epidemiological characteristics of seropositive shown that the age ranged from 22 to 64 years, being significantly raised from 31 years (90.9%). The female gender was predominant and low education degree. Those individuals reported that they never donated blood, but they had direct contact with triatomines bug. The isolation of the parasite was performed by blood culture and xenoculture methods to determine the genetic variability of the samples. Twenty seven T. cruzi isolates were analyzed by RAPD as genetic marker using three random primers (M13-40, gt11-F and L15996). The T. cruzi isolates showed 73.7% of shared bands considering the average obtained with the three primers, and were genetically well correlated. Using this marker it was possible to separate the populations of the parasite in three distinct groups. The first group composed by isolates obtained of triatomines and humans from four different districts (Caic?, Cara?bas, Serra Negra doNorte and Governador Dix-Sept Rosado); the second contained isolates obtained of triatomines of two different species (T. brasiliensis and P. lutzi) captured in Cara?bas and Serra Negra do Norte. The third grouped isolates obtained from humans of Angicos and Caic? municipalities. In different localities of distinct mesoregions, State of RN, a profile genetic well correlated was identified among all isolates and the presence of three distinct groups of the parasite circulating among vertebrate and invertebrate hosts / A infec??o pelo Trypanosoma cruzi foi avaliada em 390 indiv?duos residentes em diferentes comunidades rurais do munic?pio de Caic?, Estado do Rio Grande do Norte (RN). De 28 comunidades investigadas a soropreval?ncia da infec??o pelo T. cruzi foi 2,8% em indiv?duos de oito comunidades rurais. As caracter?sticas epidemiol?gicas dos indiv?duos com sorologia reativa demonstraram que, a idade variou de 22 a 64 anos, sendo significativamente mais elevada a partir de 31 anos (90,9%). O g?nero feminino foi predominante e baixo grau de escolaridade. Esses indiv?duos relataram que nunca doaram sangue, mas tiveram contato direto com triatom?neos. O isolamento do parasito foi realizado usando os m?todos de hemocultura e xenocultura para determinar ? variabilidade gen?tica das amostras. Em 27 isolados foi realizada a t?cnica de RAPD como marcador gen?tico usando tr?s iniciadores aleat?rios (M13-40, &#955;gt11-F e L15996). Os isolados do T. cruzi se mostraram bem correlacionados, com 73,7% de bandas compartilhadas, quando a an?lise foi realizada considerando a m?dia obtida com os tr?s iniciadores. Com este marcador foi poss?vel separar as popula??es do parasito em tr?s grupos distintos. O primeiro grupo composto por isolados obtidos de triatom?neos e humanos procedentes de quatro munic?pios distintos (Caic?, Cara?bas, Serra Negra do Norte e Governador Dix-Sept Rosado); o segundo agrupou os demais isolados obtidos de triatom?neos de duas esp?cies diferentes (T. brasiliensis e P. lutzi) capturadas em Cara?bas e Serra Negra do Norte. O terceiro grupo reuniu as amostras isoladas apenas de seres humanos procedentes dos munic?pios de Angicos e Caic?. Em diferentes munic?pios de mesorregi?es distintas do Estado do RN foi identificado um perfil gen?tico bem correlacionado entre todos os isolados e a presen?a de tr?s grupos gen?ticos distintos do parasito, circulando entre hospedeiros vertebrados e invertebrados