O objetivo desta pesquisa foi avaliar a reparação de defeitos de furca classe II em cães tratados com o retalho deslocado coronariamente, sozinho ou em associação com a regeneração tecidual guiada e o enxerto de tecido reparativo de alvéolos utilizando uma análise imuno-histoquímica. Os defeitos foram criados nos 2os, 3os e 4os pré-molares direitos e esquerdos mandibulares em quatro cães sem raça definida. No lado teste de cada cão, após a instrumentação radicular, os defeitos foram enxertados com o tecido reparativo, removidos de locais de extração dental com cinco dias de reparação. As áreas cirúrgicas foram recobertas com membranas absorvíveis e o retalho deslocado coronariamente suturado. No lado controle, após a instrumentação radicular, o retalho também foi deslocado coronariamente e suturado. Após 45 dias os cães foram sacrificados. As análises imuno-histoquímicas para osteonectina, osteopontina e sialoproteína óssea foram feitas no plano vestíbulo-lingual das furcas dos 3os pré-molares. As marcações imuno-histoquímicas foram similares entre os grupos demonstrando que eles provavelmente estavam em um estágio reparativo semelhante. / The aim of this research was to evaluate the repair of class II furcation defects in dogs treated with the coronally positioned flap alone or in association with guided tissue regeneration and post extraction tissue graft using an immunohistochemical analysis. The defects were created on the lower jaw right and left 2nd, 3rd and 4th premolars on four mongrel dogs. On the test side of each dog, after root instrumentation, the defects were grafted with a alveolar socket reparative tissue removed from five days healing teeth extraction sites. The surgical areas were covered with absorbable membranes and a coronally positionated flap was sutured. At the control side, after root instrumentation the coronally positionated flap was sutured. After 45 days, the dogs were sacrificed. The immunohistochemical analyses for osteonectin, osteopontin and bone sialoprotein were done on the bucal-lingual plane extent of the 3rd premolars furcations. The immunohistochemical expressions were similar among the two groups showing that they probably were in a similar healing stage.

Foram analisadas a capacidade seladora e a adaptação marginal in vitro, de alguns materiais quando utilizados em perfurações na região de furca. Utilizou-se cento e quatro dentes molares humanos extraídos superiores e/ou inferiores, dos quais oitenta e oito foram usados para analisar o selamento e dezesseis para a adaptação marginal dos materiais seladores utilizados sob M.E.V. Os dentes tiveram suas coroas eliminadas em um nível logo acima do assoalho da câmara pulpar, e as raízes, logo abaixo da região de furca. Em seguida, realizou-se a impermeabilização de toda a superfície externa dos espécimes, e a sua inclusão em uma base de silicona pesada. Ao centro do assoalho de cada espécime, foi realizada uma perfuração com 1,4 mm de diâmetro. Frontalmente às perfurações, na base de silicona, foram realizadas depressões onde foram posicionadas, imediatamente antes da obturação, bolinhas de algodão padronizadas umedecidas com água destilada. Em cada grupo, formou-se 2 subgrupos, um recebendo uma matriz de gesso Paris e o outro não. As obturações das perfurações foram, então, realizadas com os seguintes materiais: Grupo I (MTA – Angelus), Grupo II (ProRoot – MTA), Grupo III (Super-EBA), Grupo IV (MBP-c). Posteriormente, os espécimes foram imersos em solução corante rhodamine B 0,2% a 37°C, por 48 horas. Após lavagem dos espécimes e remoção da impermeabilização, os mesmos foram seccionados longitudinalmente, expondo-se as perfurações e as possíveis marcas de infiltração. A leitura da infiltração marginal, foi realizada por meio de um microscópio óptico, utilizando-se de escores numéricos – 0, 1, 2 e 3, para sua quantificação. Para visualização da adaptação marginal dos materiais obturadores às paredes dentinárias, os espécimes foram submetidos à mesma metodologia descrita anteriormente, exceto quanto à impermeabilização da superfície externa e a imersão na solução corante. Após a presa dos cimento os espécimes, foram submetidos ao M.E.V., obtendo-se fotomicrografias com aumento de 50 e 200X. Os resultados referentes à infiltração marginal, foram submetidos aos testes estatísticos, permitindo as seguintes conclusões: Quando utilizado isoladamente (sem a matriz), o cimento MBP-c apresentou os menores índices de infiltração marginal, seguido pelo Super-EBA, havendo diferença estatística entre esses e os cimentos ProRoot – MTA e MTA – Angelus (p<0,001). Na presença da matriz de gesso Paris, o cimento MBP-c apresentou os menores índices de infiltração marginal, havendo diferença estatística entre esse e os cimentos ProRoot – MTA e MTA – Angelus (p<0,05); A matriz de gesso Paris influenciou negativamente, com diferenciação estatística (p<0,05), o selamento produzido pelos cimentos Super-EBA e o MBP-c (p<0,05); A utilização da matriz de gesso Paris evitou o extravasamento dos materiais seladores; Foi observada uma relação direta entre a adaptação marginal e a capacidade de selamento do material. / This paper analyses the sealing capacity and the marginal adaptation in vitro of a few materials when utilized under furcal perforations. The experiment utilized a hundred and forty four extracted human mandibular and maxillary molars. From the total amount, eighty-eight were utilized for checking the sealing and sixteen for checking the marginal adaptation under M.E.V. The teeth had its crowns seccionated and removed in an upper level close to the top of the floor of the pulp chamber, and the roots close to the bottom of the furcal area. Following that , there was an impermeabilization of the whole external surface of the specimens, and the inclusion in a heavy silicon base. There was a 1.4mm perforation to the center of the floor of each specimen. Up front to the perforation, in the silicon base, depressions were made and little cotton pellets moisturized with distilled water were positioned before the obturation. In each group, subgroups were created. One receiving a Plaster of Paris matrix and the other no. The obturation of perforations were then, made with the following materials: Group I (MTA – Angelus), Group II (ProRoot – MTA), Group III (Super-EBA), Group IV (MBP-c). After that, the specimens were submerged in a rhodamine B 0,2% solution at 37°C, for 48 hours. After cleaning the roots and removing the impermeabilization, they were seccionated in the axis direction, thus revealing the perforations and possible leakage marks. The reading of the marginal adaptation was performed by an optical microscope utilizing numerical scores 0, 1, 2 e 3. In order to visualize the marginal adaptation of the obturation materials in regards to the dentinal walls, the specimens were introduced to the same methodology as described before, except for the steps of impermeabilization of the external surface and the submerging in dye. After cement placement, the M.E.V was applied and photos with 50X e 200X were obtained. The results regarding the marginal infiltration were statistically tested. Thus allowing the following conclusions: when isolated and tested (without the matrix), the cement MBP-c presented the smallest coefficient of marginal leakage, followed by the Super-EBA. There was a statistical significance between those and the cements ProRoot – MTA e MTA – Angelus (p<0,001). In the presence of the Plaster of Paris matrix, the cement MBP-c presented the smallest levels of marginal leakage, having statistical significance between those and the cements ProRoot – MTA e MTA – Angelus (p<0,05); There was a significant statistical variation, in the marginal leakage of the cements due to the presence of the Plaster of Paris matrix to the Super-EBA and to MBP-c (p<0,05). The utilization of the Plaster of Paris matrix avoided the leakage of the sealing materials. A direct relationship could be found between the marginal adaptation and the material sealing capacity

O objetivo desta pesquisa foi avaliar a reparação de defeitos de furca classe II em cães tratados com o retalho deslocado coronariamente, sozinho ou em associação com a regeneração tecidual guiada e o enxerto de tecido reparativo de alvéolos utilizando uma análise imuno-histoquímica. Os defeitos foram criados nos 2os, 3os e 4os pré-molares direitos e esquerdos mandibulares em quatro cães sem raça definida. No lado teste de cada cão, após a instrumentação radicular, os defeitos foram enxertados com o tecido reparativo, removidos de locais de extração dental com cinco dias de reparação. As áreas cirúrgicas foram recobertas com membranas absorvíveis e o retalho deslocado coronariamente suturado. No lado controle, após a instrumentação radicular, o retalho também foi deslocado coronariamente e suturado. Após 45 dias os cães foram sacrificados. As análises imuno-histoquímicas para osteonectina, osteopontina e sialoproteína óssea foram feitas no plano vestíbulo-lingual das furcas dos 3os pré-molares. As marcações imuno-histoquímicas foram similares entre os grupos demonstrando que eles provavelmente estavam em um estágio reparativo semelhante. / The aim of this research was to evaluate the repair of class II furcation defects in dogs treated with the coronally positioned flap alone or in association with guided tissue regeneration and post extraction tissue graft using an immunohistochemical analysis. The defects were created on the lower jaw right and left 2nd, 3rd and 4th premolars on four mongrel dogs. On the test side of each dog, after root instrumentation, the defects were grafted with a alveolar socket reparative tissue removed from five days healing teeth extraction sites. The surgical areas were covered with absorbable membranes and a coronally positionated flap was sutured. At the control side, after root instrumentation the coronally positionated flap was sutured. After 45 days, the dogs were sacrificed. The immunohistochemical analyses for osteonectin, osteopontin and bone sialoprotein were done on the bucal-lingual plane extent of the 3rd premolars furcations. The immunohistochemical expressions were similar among the two groups showing that they probably were in a similar healing stage.

Submitted by DAVID JONATHAN RODRIGUES GUSMAN null (davidgusman2@gmail.com) on 2017-03-13T20:24:16Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - repositório.pdf: 2782554 bytes, checksum: f50fde3c779b38d95fd2a6a0f3853086 (MD5) / Rejected by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: Incluir o número do processo de financiamento nos agradecimentos da dissertação/tese. Corrija esta informação e realize uma nova submissão com o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2017-03-20T17:42:04Z (GMT) / Submitted by DAVID JONATHAN RODRIGUES GUSMAN null (davidgusman2@gmail.com) on 2017-03-21T14:09:30Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - repositório.pdf: 1782759 bytes, checksum: 3919ad9a78c59ab55a6cf6d2ad793a6b (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2017-03-22T16:48:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 gusman_djr_me_araca.pdf: 1782759 bytes, checksum: 3919ad9a78c59ab55a6cf6d2ad793a6b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-22T16:48:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 gusman_djr_me_araca.pdf: 1782759 bytes, checksum: 3919ad9a78c59ab55a6cf6d2ad793a6b (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente estudo tem por objetivo avaliar o efeito dos quimioterápicos 5-Fluorouracil (5-FU) e da Cisplatina (CIS) sob os tecidos periodontais saudáveis e durante os estágios inicias da periodontite experimental (PE) induzida em ratos. No presente estudo, foram utilizados 156 ratos machos, distribuídos aleatoriamente em 6 grupos: SPE-SS (n= 26): sem indução da PE e que receberam administração de solução salina (grupo Sham); SPE-CIS (n= 21) – sem indução da PE e que receberam administração de CIS; SPE-5FU (n= 27) – sem indução da PE e que receberam administração de 5-FU; PE-SS (n= 27): indução da PE e que receberam administração de solução salina; PE-CIS (n= 28) - indução da PE e que receberam administração de CIS; PE-5FU (n= 27) - indução da PE e que receberam administração de 5-FU. Os animais receberam 2 injeções para administração dos quimioterápicos com intervalo de 48 horas entre elas (períodos: baseline e 02 dias), aplicando-se as doses de 5 mg/kg e 2,5mg/kg (CIS) e 60 mg/kg e 40 mg/kg (5-FU). Logo após a primeira injeção, foi realizado a indução da PE adaptado-se um fio de algodão número 24 ao redor do primeiro molar inferior esquerdo. Nos períodos de 03, 05 e 07 dias após indução da PE, os animais foram eutanasiados pela administração de dose letal de thiopental (150mg/kg). Para análise hematológica de leucócitos totais (LT), foram obtidas amostras sanguíneas no baseline e no último período de eutanásia e para fosfatase alcalina (FA) no baseline e em todos os períodos experimentais. As mandíbulas obtidas foram fixadas em formaldeído tamponado 4%, descalcificadas em EDTA e incluídas em parafina para confecção de cortes histológicos seriados de 4 μm de espessura no sentido mésio-distal para coloração com Hematoxilina e Eosina e realização de reações imunoistoquímicas. Foi realizado análise histológica (escores), histométrica de porcentagem de osso na furca (POF) e padrões de imunomarcação para TNFα, IL-1β e RANKL (escores). Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística (p<0,05) em programa computacional especializado. Observou-se uma diminuição nos níveis de LT nos grupos SPE-5FU e PE-5FU aos 7 dias. A FA sérica diminuiu aos 3, 5 e 7 dias nos grupos SPE-CIS, SPE-5FU, PE-SS, PE-CIS e PE-5FU. Histologicamente, SPE-CIS e SPE-5FU obtiveram uma exacerbação do processo inflamatório comparado ao SPE-SS, isso foi condizente com os resultados imunoistoquímicos, com maior padrão de imunomarcação para TNFα e IL-1β. Para PE-CIS e PE-5FU houve maior exacerbação do processo inflamatório comparados com os demais grupos, isso foi condizente com os resultados imunoistoquímicos, com maior padrão de imunomarcação para TNFα e IL-1β aos 3 e 7 dias e RANKL aos 7 dias. Deste modo, houve menor POF nos grupos PE-CIS e PE-5FU comparado ao PE-SS em todos períodos experimentais, além disso, PE-5FU apresentou menor POF até mesmo comparado ao PE-CIS aos 5 e 7 dias. Diante dos limites do presente estudo, pode-se concluir que os quimioterápicos promoveram uma exacerbação do processo inflamatório nos tecidos periodontais saudáveis e agravaram a progressão da PE em seu estágio inicial. / The aim of the present study was to evaluate the effect of the chemotherapics 5-Fluorouracil (5-FU) and Cisplatin (CIS) on healthy periodontal tissues and during the early stages of induced experimental periodontitis (EP) in rats. 156 male rats were randomly set in 6 groups: NP-SS (n = 26): without EP induction and received saline solution (Sham group); NP-CIS (n = 21) - without EP induction and received CIS; NP-5FU (n = 27) - without EP induction and received 5-FU; EP-SS (n = 27): induction of EP and received saline solution; EP-CIS (n = 28) - induction of EP and received CIS; EP-5FU (n = 27) - induction of PE and received 5-FU. The animals received 2 injections of chemotherapics with 48-hour interval between them, with doses of 5 mg/kg and 2.5 mg/kg (CIS) and 60 mg/kg and 40 mg/kg (5-FU). After the first injection, the induction of EP was performed by the placement of a number 24 cotton thread around the lower left first molar. At 03, 05 and 07 days after EP induction the animals were euthanized by administration of thiopental (150mg/kg). For hematological analysis of total leukocytes (TL), blood samples were obtained at baseline and in the last euthanasia period, and for Alkaline Phosphatase (AP), at baseline and in all experimental periods. The collected mandibles were fixed in buffered 4% formaldehyde, demineralized in EDTA and embedded in paraffin for preparation of serial histological sections of 4 μm thickness in mesiodistal direction for Hematoxylin and Eosin staining and immunohistochemical reactions. Histotologic (scores), histometry of the percentage of bone in the furcation (PBF) and immunolabelling standards for TNFα, IL-1β and RANKL (scores) analyzes were performed. The data were submitted to statistical analysis (p <0.05) in a specialized computer program. A decrease of the TL levels in NP-5FU and EP-5FU groups was observed at 7 days. Serum AP decreased at 3, 5 and 7 days in NP-CIS, NP-5FU, EP-SS, EP-CIS and EP-5FU. Histologically, NP-CIS and NP-5FU presented an exacerbation of the inflammatory process compared to the NP-SS, this was consistent with the immunohistochemical results, with higher immunolabelling pattern of TNFα and IL-1β. In EP-CIS and EP-5FU was observed an increased exacerbation of the inflammatory process compared to the other groups, this was consistent with the immunohistochemical results, with a higher immunolabelling pattern for TNFα and IL-1β at 3 and 7 days, and RANKL at 7 days. Thus, there was a smaller POF in EP-CIS and EP-5FU compared to the EP-SS in all experimental periods, moreover, EP-5FU presented smaller POF even compared to EP-CIS at 5 and 7 days. Given the limitations of the present study, it can be concluded that chemotherapy exacerbated the inflammatory process in healthy periodontal tissues and aggravated the progression of EP in its initial stage. / FAPESP: 2014/11427-8

Orientador: Juliano Milanezi de Almeida / Co-orientador: Valdir Gouveia Garcia / Banca: Juliana Rico Pires / Banca: Letícia Helena Theodoro / Resumo: O presente estudo avaliou por meio de análise histomorfometrica, imunoistoquimica e da Fosfatase Alcalina (FA) os efeitos do quimioterápico 5-fluorouracil (5-FU), nos tecidos periodontais normais, na evolução da periodontite experimental (PE) e no tratamento periodontal mecânico de Raspagem e Alisamento Radicular (RAR). Foram tratados 150 ratos, dos quais 92 foram utilizados e divididos aleatoriamente em 6 grupos submetidos aos seguintes tratamentos: Grupo C (n=24) - animais não tratados com 5-FU, sem PE, área contralateral dos Grupos PE e PE + RAR que foram utilizadas como controle negativo. Grupo PE (n=16) - animais portadores da PE. Grupo PE + RAR (n=18) - animais portadores da PE e tratados localmente pela técnica da RAR. Grupo 5-FU (n=24) - animais tratados sistemicamente com 5-FU. Grupo 5-FU + PE (n=16) - animais tratados sistemicamente com 5-FU, com indução PE. Grupo 5-FU + PE + RAR (n=18) - animais tratados sistemicamente com 5-FU, portadores da PE e tratados localmente com RAR. A PE foi induzida pela adaptação de um fio de algodão ao redor do primeiro molar inferior esquerdo. Nos animais dos grupo 5-FU, 5-FU + PE e 5-FU + PE + RAR o 5-FU foi administrado no momento da indução da PE e após 48 horas. Após 7 dias da evolução da PE, nos animais dos grupos PE, PE + RAR, 5-FU + PE e 5-FU + PE + RAR a ligadura foi removida e os grupos PE + RAR e 5-FU + PE + RAR foram tratados localmente com RAR. Os animais foram eutanasiados aos 7, 15 e 30 dias após a remoção da ligadura. Foram obtidos cortes seriados de 4 μm de espessura no sentido mésio-distal e corados com Hematoxilina e Eosina ou Tricrômico de Masson. A porcentagem de osso na furca (POF) foi avaliada por análises histomorfométrica e foram realizadas... / Abstract: The present study evaluated by histomorphometric, immunohistochemistry and Alkaline Phosphatase (ALP) analysis the effects of the chemotherapeutic 5-fluorouracil (5-FU), in the normal periodontal tissues, in the evolution of experimental periodontitis (EP) and in the mechanical periodontal treatment Scaling and Root Planing (SRP). 150 rats were treated, of which 92 were used and randomly divided into 6 groups of the following treatments: Group C (n = 24) - animals not treated with 5-FU without PE, contralateral area of groups EP and EP + SRP that were used as negative control. EP group (n = 16) - animals with EP. Group EP + SRP (n = 18) - animals with EP and treated locally by SRP. Group 5-FU (n = 24) - animals treated systemically with 5-FU. Group 5-FU + EP (n = 16) - animals treated systemically with 5-FU and with EP induction. Group 5-FU + EP + SRP (n = 18) - animals treated systemically with 5-FU, with EP and treated locally with SRP. The EP was induced by placing a cotton thread around the left mandibular first molar. In the animals of the groups 5-FU, 5-FU + EP and 5-FU + EP + SRP, 5-FU was administered at the time of induction of EP, and after 48 hours. After 7 days of evolution of EP, the animals of groups EP, EP + SRP, 5-FU + EP and 5-FU + EP + SRP, the ligature was removed and the groups PE + SRP and 5-FU + EP + SRP were treated locally with SRP. The animals were sacrificed at 7, 15 and 30 days after removal of the bandage. Were obtained from serial sections of 4 mm thick in the mesio-distal and stained with Hematoxylin and Eosin or Masson's Trichrome. The Percentage of Bone in the Furcation (PBF) was evaluated by histomorphometric analysis... / Mestre

Made available in DSpace on 2014-08-27T14:36:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-09Bitstream added on 2014-08-27T15:57:08Z : No. of bitstreams: 1 000749780_20180809.pdf: 435833 bytes, checksum: bcbdc341e351502f1ddd028ace313ed3 (MD5) Bitstreams deleted on 2018-08-10T11:59:47Z: 000749780_20180809.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2018-08-10T12:00:50Z : No. of bitstreams: 1 000749780.pdf: 3128544 bytes, checksum: 9979af99499fa80f9ed83ce4458bcb53 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente estudo avaliou por meio de análise histomorfometrica, imunoistoquimica e da Fosfatase Alcalina (FA) os efeitos do quimioterápico 5-fluorouracil (5-FU), nos tecidos periodontais normais, na evolução da periodontite experimental (PE) e no tratamento periodontal mecânico de Raspagem e Alisamento Radicular (RAR). Foram tratados 150 ratos, dos quais 92 foram utilizados e divididos aleatoriamente em 6 grupos submetidos aos seguintes tratamentos: Grupo C (n=24) - animais não tratados com 5-FU, sem PE, área contralateral dos Grupos PE e PE + RAR que foram utilizadas como controle negativo. Grupo PE (n=16) – animais portadores da PE. Grupo PE + RAR (n=18) – animais portadores da PE e tratados localmente pela técnica da RAR. Grupo 5-FU (n=24) - animais tratados sistemicamente com 5-FU. Grupo 5-FU + PE (n=16) - animais tratados sistemicamente com 5-FU, com indução PE. Grupo 5-FU + PE + RAR (n=18) - animais tratados sistemicamente com 5-FU, portadores da PE e tratados localmente com RAR. A PE foi induzida pela adaptação de um fio de algodão ao redor do primeiro molar inferior esquerdo. Nos animais dos grupo 5-FU, 5-FU + PE e 5-FU + PE + RAR o 5-FU foi administrado no momento da indução da PE e após 48 horas. Após 7 dias da evolução da PE, nos animais dos grupos PE, PE + RAR, 5-FU + PE e 5-FU + PE + RAR a ligadura foi removida e os grupos PE + RAR e 5-FU + PE + RAR foram tratados localmente com RAR. Os animais foram eutanasiados aos 7, 15 e 30 dias após a remoção da ligadura. Foram obtidos cortes seriados de 4 ?m de espessura no sentido mésio-distal e corados com Hematoxilina e Eosina ou Tricrômico de Masson. A porcentagem de osso na furca (POF) foi avaliada por análises histomorfométrica e foram realizadas... / The present study evaluated by histomorphometric, immunohistochemistry and Alkaline Phosphatase (ALP) analysis the effects of the chemotherapeutic 5-fluorouracil (5-FU), in the normal periodontal tissues, in the evolution of experimental periodontitis (EP) and in the mechanical periodontal treatment Scaling and Root Planing (SRP). 150 rats were treated, of which 92 were used and randomly divided into 6 groups of the following treatments: Group C (n = 24) - animals not treated with 5-FU without PE, contralateral area of groups EP and EP + SRP that were used as negative control. EP group (n = 16) - animals with EP. Group EP + SRP (n = 18) - animals with EP and treated locally by SRP. Group 5-FU (n = 24) - animals treated systemically with 5-FU. Group 5-FU + EP (n = 16) - animals treated systemically with 5-FU and with EP induction. Group 5-FU + EP + SRP (n = 18) - animals treated systemically with 5-FU, with EP and treated locally with SRP. The EP was induced by placing a cotton thread around the left mandibular first molar. In the animals of the groups 5-FU, 5-FU + EP and 5-FU + EP + SRP, 5-FU was administered at the time of induction of EP, and after 48 hours. After 7 days of evolution of EP, the animals of groups EP, EP + SRP, 5-FU + EP and 5-FU + EP + SRP, the ligature was removed and the groups PE + SRP and 5-FU + EP + SRP were treated locally with SRP. The animals were sacrificed at 7, 15 and 30 days after removal of the bandage. Were obtained from serial sections of 4 mm thick in the mesio-distal and stained with Hematoxylin and Eosin or Masson's Trichrome. The Percentage of Bone in the Furcation (PBF) was evaluated by histomorphometric analysis... / FAPESP: 11/03021-3

Foram analisadas a capacidade seladora e a adaptação marginal in vitro, de alguns materiais quando utilizados em perfurações na região de furca. Utilizou-se cento e quatro dentes molares humanos extraídos superiores e/ou inferiores, dos quais oitenta e oito foram usados para analisar o selamento e dezesseis para a adaptação marginal dos materiais seladores utilizados sob M.E.V. Os dentes tiveram suas coroas eliminadas em um nível logo acima do assoalho da câmara pulpar, e as raízes, logo abaixo da região de furca. Em seguida, realizou-se a impermeabilização de toda a superfície externa dos espécimes, e a sua inclusão em uma base de silicona pesada. Ao centro do assoalho de cada espécime, foi realizada uma perfuração com 1,4 mm de diâmetro. Frontalmente às perfurações, na base de silicona, foram realizadas depressões onde foram posicionadas, imediatamente antes da obturação, bolinhas de algodão padronizadas umedecidas com água destilada. Em cada grupo, formou-se 2 subgrupos, um recebendo uma matriz de gesso Paris e o outro não. As obturações das perfurações foram, então, realizadas com os seguintes materiais: Grupo I (MTA – Angelus), Grupo II (ProRoot – MTA), Grupo III (Super-EBA), Grupo IV (MBP-c). Posteriormente, os espécimes foram imersos em solução corante rhodamine B 0,2% a 37°C, por 48 horas. Após lavagem dos espécimes e remoção da impermeabilização, os mesmos foram seccionados longitudinalmente, expondo-se as perfurações e as possíveis marcas de infiltração. A leitura da infiltração marginal, foi realizada por meio de um microscópio óptico, utilizando-se de escores numéricos – 0, 1, 2 e 3, para sua quantificação. Para visualização da adaptação marginal dos materiais obturadores às paredes dentinárias, os espécimes foram submetidos à mesma metodologia descrita anteriormente, exceto quanto à impermeabilização da superfície externa e a imersão na solução corante. Após a presa dos cimento os espécimes, foram submetidos ao M.E.V., obtendo-se fotomicrografias com aumento de 50 e 200X. Os resultados referentes à infiltração marginal, foram submetidos aos testes estatísticos, permitindo as seguintes conclusões: Quando utilizado isoladamente (sem a matriz), o cimento MBP-c apresentou os menores índices de infiltração marginal, seguido pelo Super-EBA, havendo diferença estatística entre esses e os cimentos ProRoot – MTA e MTA – Angelus (p<0,001). Na presença da matriz de gesso Paris, o cimento MBP-c apresentou os menores índices de infiltração marginal, havendo diferença estatística entre esse e os cimentos ProRoot – MTA e MTA – Angelus (p<0,05); A matriz de gesso Paris influenciou negativamente, com diferenciação estatística (p<0,05), o selamento produzido pelos cimentos Super-EBA e o MBP-c (p<0,05); A utilização da matriz de gesso Paris evitou o extravasamento dos materiais seladores; Foi observada uma relação direta entre a adaptação marginal e a capacidade de selamento do material. / This paper analyses the sealing capacity and the marginal adaptation in vitro of a few materials when utilized under furcal perforations. The experiment utilized a hundred and forty four extracted human mandibular and maxillary molars. From the total amount, eighty-eight were utilized for checking the sealing and sixteen for checking the marginal adaptation under M.E.V. The teeth had its crowns seccionated and removed in an upper level close to the top of the floor of the pulp chamber, and the roots close to the bottom of the furcal area. Following that , there was an impermeabilization of the whole external surface of the specimens, and the inclusion in a heavy silicon base. There was a 1.4mm perforation to the center of the floor of each specimen. Up front to the perforation, in the silicon base, depressions were made and little cotton pellets moisturized with distilled water were positioned before the obturation. In each group, subgroups were created. One receiving a Plaster of Paris matrix and the other no. The obturation of perforations were then, made with the following materials: Group I (MTA – Angelus), Group II (ProRoot – MTA), Group III (Super-EBA), Group IV (MBP-c). After that, the specimens were submerged in a rhodamine B 0,2% solution at 37°C, for 48 hours. After cleaning the roots and removing the impermeabilization, they were seccionated in the axis direction, thus revealing the perforations and possible leakage marks. The reading of the marginal adaptation was performed by an optical microscope utilizing numerical scores 0, 1, 2 e 3. In order to visualize the marginal adaptation of the obturation materials in regards to the dentinal walls, the specimens were introduced to the same methodology as described before, except for the steps of impermeabilization of the external surface and the submerging in dye. After cement placement, the M.E.V was applied and photos with 50X e 200X were obtained. The results regarding the marginal infiltration were statistically tested. Thus allowing the following conclusions: when isolated and tested (without the matrix), the cement MBP-c presented the smallest coefficient of marginal leakage, followed by the Super-EBA. There was a statistical significance between those and the cements ProRoot – MTA e MTA – Angelus (p<0,001). In the presence of the Plaster of Paris matrix, the cement MBP-c presented the smallest levels of marginal leakage, having statistical significance between those and the cements ProRoot – MTA e MTA – Angelus (p<0,05); There was a significant statistical variation, in the marginal leakage of the cements due to the presence of the Plaster of Paris matrix to the Super-EBA and to MBP-c (p<0,05). The utilization of the Plaster of Paris matrix avoided the leakage of the sealing materials. A direct relationship could be found between the marginal adaptation and the material sealing capacity

O presente estudo teve como objetivo caracterizar a expressão da família SIBLING (Small Integrin-Binding Ligand, N-linked Glycoproteins) após tratamento regenerativo de furca com enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários. Para isto, os 2os e 3os pré-molares superiores foram extraídos em quatro cães s.r.d. Cinco dias após as extrações, defeitos padronizados de furca classe II foram criados nos 2os, 3os e 4os pré-molares inferiores, bilateralmente. Estes defeitos foram tratados imediatamente com raspagem, alisamento e polimento corono-radicular (RAPCR) e retalho deslocado coronariamente (RDC) (Grupo Controle) ou com RAPCR + RDC + enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários (Grupo Teste) em um experimento de boca-dividida. Após um período de 6 semanas de reparação, os animais foram sacrificados e foi realizada análise imuno-histoquímica para avaliar a localização dos membros da família de proteínas SIBLING, composta pelas seguintes proteínas nãocolágenas da matriz extracelular: osteopontina (OPN), sialoproteína óssea (BSP), proteína da matriz dentinária 1 (DMP1), sialofosfoproteína da dentina (DSPP) e fosfoglicoproteína da matriz extracelular (MEPE). Não foram encontradas diferenças na expressão da família SIBLING entre os grupos teste e controle. Todas as proteínas foram expressas no novo osso, novo cemento e novo ligamento periodontal, em ambos os grupos. Os osteoclastos demonstraram imunolocalização intracelular intensa somente para a OPN. Cementócitos e o novo ligamento periodontal demonstraram, particularmente, marcação intensa para a MEPE. Houve uma diferença evidente entre o padrão de marcação entre o lado tratado (vestibular) e o não-tratado (lingual) de todos os espécimes, com presença de maior marcação do lado vestibular, para todos os anticorpos testados. Podemos concluir que não houve diferenças no padrão de expressão da família SIBLING após o uso do enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários. A família de proteínas SIBLING é expressa durante o processo de reparação de defeitos de furca, indicando possíveis papéis e funções para as proteínas OPN, BSP, DMP1, DSP e MEPE como moléculas alvo em terapias de regeneração periodontal. / The present study aimed in characterizing the expression of the SIBLING (Small Integrin- Binding Ligand, N-linked Glycoproteins) family in a regenerative treatment of furcation defects with a reparative tissue graft obtained from extraction sockets. The second and third upper premolars were extracted in four mixed breed dogs. Five days later, standardized class II furcation defects were created in the second, third and fourth mandibular premolars, bilaterally. The defects were immediately treated with either debridement and root planning (DRP) combined with a coronally positioned flap (CPF) (Control Group), or with DRP+CPF + a reparative tissue graft derived from the second and third premolar extraction sockets (Experimental Group) in a split-mouth design. After 6 weeks period of healing, the animals were sacrificed and immunohistochemistry was carried out to assess the localization of members of the SIBLING family of noncollagenous extracellular matrix proteins, namely osteopontin (OPN), bone sialoprotein (BSP), dentin matrix protein 1 (DMP1), dentin sialophosphoprotein (DSPP) and matrix extracellular phosphoglycoprotein (MEPE). No differences in the SIBLING family of proteins expression were noted between the control and experimental group. All proteins were expressed in new bone, new cementum and new periodontal ligament in both groups. Osteoclasts exhibited intense intracellular localization only for OPN. Cementocytes and the newly formed periodontal ligament demonstrated particularly intense staining for MEPE. There was an evident difference between the staining pattern between the treated (buccal side) and non-treated (lingual) side of the specimens, with a more intense staining pattern in the buccal side, for all the tested antibodies. In conclusion, there were no differences in the pattern of SIBLING expression following the use of a reparative tissue graft obtained from extraction sockets. The SIBLING family of proteins is expressed during the healing process of furcation defects indicating possible roles and functions of OPN, BSP, DMP1, DSPP and MEPE as target molecules in periodontal regeneration therapies.

O presente estudo teve como objetivo caracterizar a expressão da família SIBLING (Small Integrin-Binding Ligand, N-linked Glycoproteins) após tratamento regenerativo de furca com enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários. Para isto, os 2os e 3os pré-molares superiores foram extraídos em quatro cães s.r.d. Cinco dias após as extrações, defeitos padronizados de furca classe II foram criados nos 2os, 3os e 4os pré-molares inferiores, bilateralmente. Estes defeitos foram tratados imediatamente com raspagem, alisamento e polimento corono-radicular (RAPCR) e retalho deslocado coronariamente (RDC) (Grupo Controle) ou com RAPCR + RDC + enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários (Grupo Teste) em um experimento de boca-dividida. Após um período de 6 semanas de reparação, os animais foram sacrificados e foi realizada análise imuno-histoquímica para avaliar a localização dos membros da família de proteínas SIBLING, composta pelas seguintes proteínas nãocolágenas da matriz extracelular: osteopontina (OPN), sialoproteína óssea (BSP), proteína da matriz dentinária 1 (DMP1), sialofosfoproteína da dentina (DSPP) e fosfoglicoproteína da matriz extracelular (MEPE). Não foram encontradas diferenças na expressão da família SIBLING entre os grupos teste e controle. Todas as proteínas foram expressas no novo osso, novo cemento e novo ligamento periodontal, em ambos os grupos. Os osteoclastos demonstraram imunolocalização intracelular intensa somente para a OPN. Cementócitos e o novo ligamento periodontal demonstraram, particularmente, marcação intensa para a MEPE. Houve uma diferença evidente entre o padrão de marcação entre o lado tratado (vestibular) e o não-tratado (lingual) de todos os espécimes, com presença de maior marcação do lado vestibular, para todos os anticorpos testados. Podemos concluir que não houve diferenças no padrão de expressão da família SIBLING após o uso do enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários. A família de proteínas SIBLING é expressa durante o processo de reparação de defeitos de furca, indicando possíveis papéis e funções para as proteínas OPN, BSP, DMP1, DSP e MEPE como moléculas alvo em terapias de regeneração periodontal. / The present study aimed in characterizing the expression of the SIBLING (Small Integrin- Binding Ligand, N-linked Glycoproteins) family in a regenerative treatment of furcation defects with a reparative tissue graft obtained from extraction sockets. The second and third upper premolars were extracted in four mixed breed dogs. Five days later, standardized class II furcation defects were created in the second, third and fourth mandibular premolars, bilaterally. The defects were immediately treated with either debridement and root planning (DRP) combined with a coronally positioned flap (CPF) (Control Group), or with DRP+CPF + a reparative tissue graft derived from the second and third premolar extraction sockets (Experimental Group) in a split-mouth design. After 6 weeks period of healing, the animals were sacrificed and immunohistochemistry was carried out to assess the localization of members of the SIBLING family of noncollagenous extracellular matrix proteins, namely osteopontin (OPN), bone sialoprotein (BSP), dentin matrix protein 1 (DMP1), dentin sialophosphoprotein (DSPP) and matrix extracellular phosphoglycoprotein (MEPE). No differences in the SIBLING family of proteins expression were noted between the control and experimental group. All proteins were expressed in new bone, new cementum and new periodontal ligament in both groups. Osteoclasts exhibited intense intracellular localization only for OPN. Cementocytes and the newly formed periodontal ligament demonstrated particularly intense staining for MEPE. There was an evident difference between the staining pattern between the treated (buccal side) and non-treated (lingual) side of the specimens, with a more intense staining pattern in the buccal side, for all the tested antibodies. In conclusion, there were no differences in the pattern of SIBLING expression following the use of a reparative tissue graft obtained from extraction sockets. The SIBLING family of proteins is expressed during the healing process of furcation defects indicating possible roles and functions of OPN, BSP, DMP1, DSPP and MEPE as target molecules in periodontal regeneration therapies.

Orientador: Maria José Hitomi Nagata / Banca: Ronaldo Célio Mariano / Banca: Valdir Gouveia Garcia / Banca: Mário Taba Júnior / Banca: Álvaro Francisco Bosco / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar, histologicamente, o processo de cicatrização de defeitos de furca Classe II, criados cirurgicamente e tratados com a associação do Plasma Rico em Plaquetas (PRP), partículas esféricas de Novo Vidro Bioativo (NVB) e Sulfato de Cálcio (SC). Os segundos e quartos prémolares mandibulares de 8 cães foram usados neste estudo. Defeitos de furca Classe II (5 mm de altura x 2 mm de profundidade) foram criados cirurgicamente e imediatamente tratados. Usando o modelo de boca dividida, os dentes foram aleatoriamente divididos em 2 grupos: Grupo C (controle): o defeito foi preenchido somente com coágulo sanguíneo e Grupo T (teste): o defeito foi preenchido com a associação de PRP, NVB e SC. Os retalhos foram reposicionados para cobrir totalmente os defeitos. A eutanásia dos animais foi realizada aos 90 dias pósoperatórios. Foram obtidos cortes histológicos seriados mésio-distais, corados com Hematoxilina e Eosina. Foram realizadas análises histométrica, usando um software analisador de imagens, e histológica. Foram avaliadas medidas lineares e de área da cicatrização periodontal, calculadas como porcentagem do defeito original. Os dados percentuais foram transformados em arcoseno para análise estatística (análise de variância, p < 0,05). A regeneração óssea e de tecido conjuntivo nos defeitos de furca foi incompleta na maioria dos espécimes. O Grupo C apresentou quantidade de neoformação óssea e regeneração periodontal significativamente maior que o Grupo T. Quantidade considerável de partículas remanescentes de NVB foi observada na maioria dos espécimes do Grupo T. Dentro dos limites do presente estudo, pode-se concluir que a associação do PRP, NVB e SC não foi mais efetiva que o debridamento cirúrgico somente no tratamento de defeitos de furca Classe II. / Abstract: The purpose of this study was to histologically evaluate the healing of surgically created Class II furcation defects treated using a combination of platelet-rich plasma (PRP), new spherical bioactive glass (NBG) particles and calcium sulfate (CS). The second and fourth mandibular premolars of eight mongrel dogs were used in this study. Class II furcation defects (5 mm in height x 2 mm in depth) were surgically created and immediately treated. Using a split-mouth design, teeth were randomly divided into two groups: group C (control) - defect filled with blood clot only; and group T (test) - defect filled with a combination of PRP, NBG and CS. Flaps were repositioned to cover all defects. The animals were euthanized 90 days post-surgery. Mesio-distal serial sections were obtained and stained with either hematoxylin and eosin. Histometric, using image-analysis software, and histologic analyses were performed. Linear and area measurements of periodontal healing were evaluated and calculated as a percentage of the original defect. Percentage data were transformed into arccosine for statistical analysis (analysis of variance; P<0.05). Regeneration of bone and connective tissue in the furcation defects was incomplete in most of the specimens. Group C had significantly more bone formation and periodontal regeneration than group T. A considerable amount of remaining NBG particles was observed in most specimens of group T. Within the limits of this study, it can be concluded that the combination of PRP, NBG and CS was not more effective than the surgical debridement alone in the treatment of Class II furcation defects. / Doutor