ALBUQUERQUE, André Cardoso. Germinação e estabelecimento inicial de espécies congêneres de ambiente seco. 2015. 34 f. Dissertação (Mestrado em ecologia e recursos naturais)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2015. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-05-19T17:59:49Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_acalbuquerque.pdf: 957472 bytes, checksum: 8e9d6447f163459cf0f8fbfa85a192fb (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-05-27T20:07:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_acalbuquerque.pdf: 957472 bytes, checksum: 8e9d6447f163459cf0f8fbfa85a192fb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-27T20:07:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_acalbuquerque.pdf: 957472 bytes, checksum: 8e9d6447f163459cf0f8fbfa85a192fb (MD5) Previous issue date: 2015 / In severe abiotic conditions, environmental filter selects phylogenetically related species. This trend promotes the problem of competitive exclusion, differentiation the regeneration niche for coexistence mechanism. There are studies of germination requirements and initial establishment of herbaceous species that indicate interspecific differences related to specialization pulse or interpulse, contributing to the coexistence in plant communities of arid and semi-arid environments. But there is a lack of studies seeking evidence for woody species. Seeking to fill the gap investigate differences in seed characteristics, germination and early development in two species of Mimosa. We found biometrics and water content in the seeds; germination under different temperatures; germination under different degrees of water stress; imbibition curve and initial development in lighting and irrigation treatments. Mimosa casealpiniifolia Benth. presented interpulse features on germination and early development, because of the higher seed size (larger amount of reserves); higher water content in the seed; Conservative soaking in water absorption curve; resistance to more intense water stress and better initial growth in water treatment interpulse than wrist. Mimosa tenuiflora Benth. showed characteristics of expertise to the wrists on germination and early development: small amount of reserves; low moisture content; rapid and greater water absorption in the imbibition curve; less resistance to water stress and better initial growth in pulse than interpulse. We conclude that the congeners studied tree species differ in the characteristics of seeds and germination; and have different initial responses and the development of treatments and interpulse pulse, so that indicates a performance difference in different moments of the water system; which can be related to the coexistence of these species. / Em condições abióticas severas, o filtro ambiental seleciona espécies filogeneticamente aparentadas. Essa tendência promove o problema de exclusão competitiva, sendo a diferenciação no nicho de regeneração um mecanismo para a coexistência. Existem estudos dos requerimentos de germinação e estabelecimento inicial de espécies herbáceas que indicam diferenças interespecíficas relacionadas à especialização a pulso ou interpulsos, contribuindo para a coexistência em comunidades vegetais de ambientes áridos e semiáridos. Porém existe uma falta de estudos buscando evidências para espécies lenhosas. Buscando preencher essa lacuna, investigamos diferenças em características de sementes, germinação e desenvolvimento inicial em duas espécies de Mimosa. Verificamos biometria e conteúdo de água nas sementes; germinação sob diferentes temperaturas; germinação sob diferentes graus de estresse hídrico; curva de embebição e desenvolvimento inicial sob tratamentos de luminosidade e irrigação. Mimosa casealpiniifolia Benth. apresentou características de interpulso na germinação e no desenvolvimento inicial, devido ao maior tamanho das sementes (maior quantidade de reservas); maior teor de água na semente; absorção conservadora de água na curva de embebição; resistência a estresse hídrico mais intenso e crescimento inicial melhor em tratamento hídrico de interpulso do que pulso. Mimosa tenuiflora Benth. apresentou características de especialização aos pulsos na germinação e no desenvolvimento inicial: pequena quantidade de reservas; baixo teor de umidade; rápida e maior absorção de água na curva de embebição; menor resistência ao estresse hídrico e crescimento inicial melhor em pulso do que interpulso. Concluímos que as espécies arbóreas congêneres estudadas divergem nas características das sementes e germinação; e apresentam respostas de desenvolvimento inicial distinta quanto aos tratamentos de pulso e interpulso, de forma que indica uma diferenciação de desempenho em diferentes momentos deste regime hídrico; que pode estar relacionada com a coexistência dessas espécies.

Neuroblastoma (NB) é a forma mais indiferenciada de tumores neuroblásticos e a principal causa de morte por câncer pediátrico. Alterações epigenéticas interagem em todas as etapas do desenvolvimento do câncer, promovendo a progressão tumoral. A remodelação da cromatina é influenciada pela acetilação de histonas e a metilação de DNA. Acetiltransferases de histona (HATs), desacetilases de histonas (HDAC) e metiltransferase de DNA (DNMTs) são alvos de estratégias terapêuticas em tumores. Os retinoides agem nas vias de diferenciação celular, anti-proliferação e pró-apoptose. Nesse trabalho, é proposto que a combinação desses moduladores epigenéticos e de diferenciação em linhagens de células de NB humano é mais efetiva que os agentes isolados. Os tratamentos induziram mudanças na expressão de marcadores de diferenciação e indiferenciação, como c-Myc, β-3tubulina, NeuN e Bmi1, e alterações morfológicas nas duas linhagens celulares utilizadas, SK-N-BE(2) e SH-SY5Y. Os dados encontrados podem contribuir para uma melhor compreensão dos mecanismos moleculares dos moduladores retinoides e epigenéticos em NB capazes de acrescentar melhorias nas atuais estratégias terapêuticas. / Neuroblastoma (NB) is the most undifferentiated form of neuroblastic tumors and the leading cause of death from pediatric cancer. Epigenetic changes interact at all stages of cancer development, promoting tumor progression. Chromatin remodeling is influenced by histone acetylation and DNA methylation. Histone acetyltransferases (HATs), histone deacetylases (HDAC), and DNA methyltransferase (DNMTs) are targets for therapeutic strategies in cancer. Retinoids act on cell differentiation pathways and display anti-proliferation and pro-apoptotic actions. In the present research we examined the effects of combining epigenetic modulators and a retinoid receptor agonist in human NB cells. The retinoid all trans-retinoic acid (ATRA) combined with inhibitors of either histone deacetylases (HDACs) or DNA methyltransferase was more effective than any drug given alone in impairing the proliferation of SH-SY5Y and SK-N-BE(2) NB cells. In addition, the treatments induced differential changes in the expression of differentiation markers including c-Myc, β-3tubulin, NeuN and Bmi1, and morphological changes in SK-N-BE(2) e SH-SY5Y cell lines. The data contribute to a better understanding of the molecular mechanisms of retinoid modulators and epigenetic in NB able to add improvements in current therapeutic strategies.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T22:35:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 320037.pdf: 1679970 bytes, checksum: ef7c5e9994dac949503795a373ca9fb2 (MD5) Previous issue date: 2013 / A Crista Neural (CN) constitui uma população de células que emergem a partir das pregas dorsais do neuroepitélio durante a neurulação. Estas células migram ao longo de todo o eixo antero-posterior embrionário dos vertebrados até encontrarem seus locais definidos onde irão diferenciar em diversos derivados neurais e mesenquimais. As células da CN cefálica (CNC) e da CN Truncal (CNT) podem dar origem a neurônios e células gliais do sistema nervoso periférico, melanócitos e células endócrinas. Diferentemente do que ocorre com a CNC, a CNT possui uma limitada capacidade de originar elementos mesenquimais in vivo. Entretanto, sob determinadas condições in vitro, a CNT pode originar fenótipos mesenquimais. Até o momento, a maior parte dos estudos com a CNT foram realizados sobre substratos bidimensionais (2D), geralmente revestidos moléculas isoladas da matriz extracelular (colágeno, laminina, fibronectina) ou sobre monocamadas de fibroblastos embrionários (3T3). Atualmente, sabe-se que este tipo de ambiente não reflete a complexa fisiologia dos tecidos in vivo. No presente estudo nós realizamos cultivos de células isoladas da CNT sobre um extrato solúvel da membrana basal, comumente denominado de Matrigel. Elaboramos uma metodologia que permitiu criar dois microambientes dentro do mesmo poço de cultivo: um ambiente bidimensional (2D) e um ambiente tridimensional (3D). Verificamos que o Matrigel permite a diferenciação dos principais fenótipos da CNT (neurais: células gliais, células musculares lisas, neurônios, melanócitos e mesenquimais: condrócitos). Embora tenham sido observadas algumas variações na obtenção dos fenótipos descritos conforme o lote de Matrigel utilizado, o uso de uma mistura destes lotes permitiu normalizar a frequência de poços de cultivo contendo cada tipo celular. Além disso, 70% dos poços de cultivo apresentavam nódulos de cartilagem, os quais frequentemente se encontravam na região 3D. Interessantemente, esta frequência de condrócitos detectada utilizando um microambiente 3D de Matrigel, resultou ser muito maior quando comparado a trabalhos anteriores realizados sobre ambientes 2D convencionais. Estes dados sugerem que o Matrigel pode ser um ótimo substrato para estudar a diferenciação e multipotencialidade das células da CN. / Abstract : The Neural Crest (NC) is a cell population that detach from dorsal neural folds during neurulation. These cells migrate along the entire vertebrate embryonic axis until they find their final destination and differentiate into both neural and mesenchymal phenotypes. Cephalic NC (CNC) and Trunk NC cells (TNCCs) give rise to neurons and glia from the peripheral nervous system, melanocytes and endocrine cells. Differently from CNC, TNC have a limited capacity to give rise to mesenchymal derivatives in vivo. Nevertheless, under special culture conditions, TNC can give rise to mesenchymal phenotypes. Until now, most of studies of TNC were conducted on 2D substrates, usually covered with extracellular matrix molecules (e.g. collagen, laminin, fibronectin) or under fibroblast feeder-layers (3T3). Nowadays, it is worth knowing that this kind of environment does not mimic the complex tissue physiology in vivo. In the present study, we conducted cell cultures isolated from TNC on a soluble extract of basal membrane, commonly named Matrigel. We performed a new methodology that permitted to create two microenvironments in the same culture well: a two-dimensional (2D) and a three-dimensional (3D) environment. We observed that Matrigel permits the differentiation of the main TNC phenotypes (glial cells, melanocytes, smooth muscle cells, neurons and chondrocytes). Even though we observed some described variations on the phenotypes obtained according to the Matrigel lot used, the use of a mixture of lots allowed normalizing the frequency of culture wells containing each cell type. Moreover, 70% of culture wells contained cartilage nodules, which were frequently on the 3D zone. Interestingly, this frequency of chondrocytes detected using a 3D microenvironment of Matrigel resulted even higher than previous reports performed on traditional 2D cultures. Together, this data suggest that Matrigel could be an excellent substrate to study NC differentiation and multipotenciality.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:48:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 318826.pdf: 2249187 bytes, checksum: ecdc16b944998e0aff30a802496dc0be (MD5) Previous issue date: 2013 / A manipulação do sexo gonadal em peixes de cultivo é uma importante técnica utilizada na aquicultura, pois permite obter benefícios associados a um dos sexos. Os hormônios esteroides são utilizados para controlar o sexo gonadal. Apesar desta técnica já ser utilizada com várias espécies pouco se sabe a respeito do uso do 17ß-estradiol (E2) com o robalo-peva Centropomus parallelus e robalo-flecha Centropomus undecimalis. Estas duas espécies são nativas, eurialinas e com alto valor de mercado. Sendo assim, o objetivo desta Tese foi avaliar o efeito de rações com diferentes concentrações de E2 na proporção dos sexos, na sobrevivência e crescimento dos juvenis de robalo-peva e robalo-flecha. Os experimentos foram divididos em duas etapas: feminização e pós feminização. No final dos experimentos foi possível obter um alto percentual de fêmeas. Também foi possível observar que o crescimento dos peixes só foi reduzido durante o tratamento hormonal. Após o fim da oferta da ração com hormônio os peixes recuperaram o crescimento. Além disso, o hormônio não afetou a sobrevivência dos peixes. Com este trabalho concluiu-se que o uso de E2 na ração é eficiente na feminização de juvenis de robalo-peva e robalo-flecha. <br> / The manipulation of gonadal sex in fish farming is an important technique used in aquaculture, since it gives benefits associated with one sex. The steroid hormones are used to control the gonadal sex. Although this technique is already used in several species, little is known about the use of 17ß-estradiol (E2) with fat snook Centropomus parallelus and common snook Centropomus undecimalis. These two species are native, and eurialinas with high market value. Therefore, the aim of these experiments was to evaluate the effect of diets with different concentrations of E2 in the sex ratio, survival and growth of juvenile fat snoook and common snook. The experiments were divided into two stages: feminization and post-feminization. At the end of the experiments was to obtain a high percentage of females. The growth of the treated fish was significantly retarded during the period of treatment, while there was no side effect detected post-tretament and the retarded fish caught up after the E2 treatment. Furthermore, the hormone did not affect survival. With this work it was concluded that the use of E2 in the diet is effective in feminization of juvenile fat snook and comoon snook.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:31:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340354.pdf: 1524038 bytes, checksum: f77f0c2ce406fc64da4df7465217fc36 (MD5) Previous issue date: 2016 / No tratamento endodôntico de dentes permanentes imaturos despolpados o preparo mecânico do canal é desaconselhado para não fragilizar ainda mais a estrutura dental. A abordagem clássica permite a desinfecção do canal radicular pelo preparo químico com soluções antimicrobianas e medicação intracanal, mas não a retomada do processo de rizogênese para a complementação do canal radicular. A neoformação de tecido pulpar, por abordagem de engenharia tecidual, tem potencial para melhor resolver essas situações clínicas. Com o uso do Modelo de Fatia Dental/Arcabouço para Engenharia de Tecido Pulpar o objetivo deste trabalho foi desenvolver polpas dentais com morfologia e função semelhantes àquelas do tecido original, em dentinas submetidas a tratamentos com diferentes materiais endodônticos. Para tanto, após o acesso endodôntico e a aplicação dos protocolos de tratamento com hipoclorito de sódio, EDTA, pasta de hidróxido de cálcio ou triantibiótica, fatias de 1 mm de espessura foram obtidas da região cervical de molares, seguido pela produção de arcabouço sintético no espaço da câmara pulpar e semeadura de células-tronco de polpa de dentes permanentes humanos (DPSC). O conjunto fatia dental/arcabouço/células foi implantado em tecido subcutâneo de camundongos. Depois de 35 dias, os implantes foram removidos e processados para análise histo-morfológica, imuno-histoquímica, e microscopia eletrônica confocal. Os resultados das análises histológicas mostraram que houve formação tecidual em todos os grupos, com destaque para o grupo tratado pela pasta Triantibiótica. Da análise em microscopia confocal conclui-se que, mesmo quando tratada por soluções irrigadoras ou pastas antimicrobianas, a dentina apresentou condições de servir como substrato para a sobrevivência e a diferenciação das DPSC em odontoblastos funcionais, com capacidade de deposição de matriz dentinária.<br> / Abstract : In the endodontic treatment of immature permanent teeth, mechanical preparation of the root canal is not recommended to do not further weaken the tooth structure. The classical approach allows the disinfection of the root canal by chemical preparation with antimicrobial solutions and intracanal dressing, but not the resumption of the root formation process for the completion of root canal. The pulp tissue neoformation by tissue engineering approach has the potential of better solving these clinical situations. Using the Tooth Slice/Scaffold Model for Dental Pulp Tissue Engineering, the aim of this study was to develop dental pulps with similar morphology and function to those of the original tissue, in dentin subjected to treatments with different materials. For this purpose, after the endodontic access and application of the treatment protocols with sodium hypochlorite, EDTA, calcium hydroxide or triple antibiotic pastes, 1 mm slices from the cervical region of third molars were obtained, followed by the production of a synthetic polymeric scaffold within the pulp chamber and seeding of dental pulp stem cells from human permanent teeth (DPSC). Tooth slice/scaffold/cells sets were implanted subcutaneously in mice. After 35 days, the implants were retrieved and processed for histo-morphological, immunohistochemical, and confocal electron microscopy analyzes. The results of histological analyzes showed that there was tissue formation in all groups, especially the group treated by triple antibiotic paste. From the confocal microscopy analysis, it was concluded that even when treated by irrigating solutions or antimicrobial pastes, dentin is able to serve as substrate for survival and differentiation of DPSC in functional odontoblasts, with dentin matrix deposition capacity.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Psicologia, 2007. / Submitted by Aline Jacob (alinesjacob@hotmail.com) on 2010-01-26T13:59:05Z No. of bitstreams: 1 2007_HugoLeonardoPovoaSandall.pdf: 1263342 bytes, checksum: cbfedeb38fce8c6a613faf3c15fdaab7 (MD5) / Approved for entry into archive by Carolina Campos(carolinacamposmaia@gmail.com) on 2010-01-26T17:27:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_HugoLeonardoPovoaSandall.pdf: 1263342 bytes, checksum: cbfedeb38fce8c6a613faf3c15fdaab7 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-01-26T17:27:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_HugoLeonardoPovoaSandall.pdf: 1263342 bytes, checksum: cbfedeb38fce8c6a613faf3c15fdaab7 (MD5) Previous issue date: 2007-05-31 / O presente estudo avaliou o efeito de variáveis das lojas e do cenário sobre a freqüência de comportamentos precorrentes de uma cadeia iniciada quando o consumidor passou diante das lojas e terminada quando nelas entrou. Também relacionou a freqüência dos comportamentos e taxas de conversão ao nível de reforço informativo, à distância relativa, à categoria de loja, ao fluxo diário e à densidade relativa de consumidores no período do dia. Pouco se conhece a respeito das relações entre tráfego e cadeias de comportamentos associadas à compra em contextos de varejo. O modelo sob a perspectiva comportamental tem sido usado para investigar comportamento de procura e efeitos de diferenciação de marca sobre escolha e compra de produtos. Foi utilizada uma amostra por tráfego e a observação sistemática de vídeos coletados diante de oito lojas selecionadas de acordo com distância e nível informativo. O efeito conjunto das variáveis ao longo da cadeia partiu de 59,5% para o comportamento de passar até 14,0% para o comportamento de entrar. Estes resultados sugerem que à medida que as respostas se aproximam do fim da cadeia, tal como entrar na loja, menor é a influência de fatores associados ao mall do que respostas no início da cadeia, tal como a passar pela frente da loja. Categoria de loja, distância relativa e diferenciação de marca apresentaram os maiores efeitos sobre os comportamentos precorrentes, particularmente passar, indicando que moda feminina (vs. moda jovem) e um nível informativo mais elevado tendem a aumentar o comportamento de passar enquanto uma maior distância relativa tende a diminuí-lo. O estudo pode representar uma etapa inicial para o elaboração de um modelo explicativo para o comportamento de aproximação a lojas em contextos de varejo e tem diversas implicações gerenciais, algumas das quais se relacionaram ao desenvolvimento de medidas de eficiência de estratégias de marketing em ambientes de varejo. ____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This study examined the effects of store and consumer setting variables upon the frequency of precurrent behaviour in a sequence that starts when the consumer passes by the store and finishes when he/she enters it. It also examined the relations between the frequency of such behaviours and conversion rates with relative distance, store category, daily consumer flow and consumer relative density throughout the day. Little is known about the relationship between traffic and behaviour sequences associated to purchasing in retail contexts. The behaviour perspective model has been used to investigate searching behaviour and the effects of brand differentiation on choice and purchase of products. A traffic sample was used based on systematic observations recorded by video cameras located in front of eight stores selected according to location and informational level. The total amount of variance explained by the chosen independent variables varied from 59.5% for the behaviour of just passing in front of the store to 14% for the behaviour of entering the store. These results suggest that responses closer to the end of the approaching sequence, such as entering the store, are less influenced by factors associated to the mall than responses at the beginning of the sequence, such as passing in front of the store. Store category, relative distance and brand differentiation showed the largest effects on precurrent behaviour, particularly passing, indicating that as women's clothing (vs. young clothing) and higher informational level tend to increase the behaviour of passing in front of the store and higher relative distance tend to decrease it. The study may represent an initial step towards the elaboration of an explanatory model for the behaviour of approaching stores in retail contexts and has several managerial implications, some of which related to the development of methodologies to measure the efficiency of marketing strategies in retail environments.

Orientador: Paulo Noronha Lisboa Filho / Banca: Paulo Tambasco de Oliveira / Banca: Angela Maria Moraes / Banca: Ana Paula Ramos / Banca: Valdecir Farias Ximenes / Resumo: O titânio e suas ligas são utilizados em diversas aplicações, dentre elas em implantes ortopédicos e dentários devido à sua reconhecida biocompatibilidade. No entanto, falhas e subsequentes efeitos colaterais clínicos ainda são recorrentes em implantes. Neste contexto, melhorias podem ser alcançadas projetando biomateriais nos quais o bulk e a superfície do titânio são independentemente modificadas. Deste modo, filmes finos nanoestruturados de óxidos metálicos, tais como TiO2 e ZnO, podem melhorar as propriedades físico-químicas, a biocompatibilidade e a resistência à corrosão dos implantes de titânio. Além disso, a conjugação de biomoléculas, como peptídeos derivados da proteína da matriz dentinária 1 (DMP1), na superfície dos óxidos metálicos pode melhorar sua bioatividade, acelerando o processo de osteointegração. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi funcionalizar óxidos metálicos com diferentes moléculas bifuncionais e investigar as propriedades físico-químicas de grupos silano, amino, ácido carboxílico, tiol e hidroxila que atuaram como espaçadores entre os óxidos metálicos e os peptídeos da DMP1. Além disso foram realizadas análises de biocompatibilidade, mineralização, resistência à corrosão e à tribocorrosão das superfícies bio-funcionalizadas com os peptídeos da DMP1. Neste trabalho, filmes de TiO2 e ZnO nanométricos foram sintetizados pelo método sol-gel e depositados pela técnica spin coating em substratos de titânio. Posteriormente, os filmes finos de óxidos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Titanium and its alloys are used in a variety of applications, including orthopedic and dental implants because of their recognized biocompatibility. However, failures and subsequent clinical side effects are still recurrent in implants. In this context, improvements can be achieved by designing biom aterials in which the bulk and surface of the titanium are independently tailored . Thus, nanostructured metal oxides thin films, such as TiO 2 and ZnO, can improve the physicochemical properties, biocompatibility and corrosion resistance of titanium implant s. In addition, the conjugation of biomolecules, such as peptides derived from the dentin matrix 1 protein (DMP1), on the surface of the metal oxides can improve their bioactivity, accelerating the os t eointegration process. Therefore, the objective of thi s work was to functionalize metal oxides with different bifunctional molecules and to investigate the physicochemical properties of silane, amino, carboxylic acid, thiol and hydroxyl groups that act as spacers between metal oxides and DMP1 peptides. In add ition, biocompatibility, mineralization, corrosion and tribocorrosion resistance of the bio - functionalized surfaces were performed. In this work, nanosized TiO 2 and ZnO thin films were synthesized by sol - gel method and deposited by spin coating technique o n titanium substrates. Subsequently, the thin films of metal oxides were functionalized with (3 - aminopropyl) trimethoxysilane (APTMS), 3 - (4 - aminophenyl) pr... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Fernanda da Cruz Landim / Resumo: As células-tronco mesenquimais (CTM) representam uma atrativa ferramentapara a medicina regenerativa, a engenharia de tecidos e a terapia celular. Naespécie bovina, as pesquisas sobre a caracterização de CTM ainda são raras,principalmente utilizando-se o tecido adiposo como fonte de obtenção. Com oobjetivo de isolar e caracterizar CTM derivadas do tecido adiposo de bovinos,foram utilizadas amostras de seis vacas e isoladas CTM por meio de digestãoenzimática e cultivo celular em monocamada. As células em primeira (P0) eterceira passagem (P3) foram, então, submetidas a caracterizaçãoimunofenotípica por citometria de fluxo. A diferenciação osteogênica eadipogênica foi avaliada microscopicamente após 10 dias de indução e porqPCR em tempo real após 3 e 15 dias de indução. Foram obtidas célulasfibroblastóides e aderentes ao plástico. Estas apresentaram, na citometria defluxo, marcação positiva para CD44 (86,6 % em P0 e 76,6 % em P2) e vimentina(82,48 % em P2), baixa marcação de CD34 (8,7 % em P0 e 1,8 % em P2) emarcação negativa para MHC II (2,1 % em P0 e 2,3 % em P2). Na avaliaçãomicroscópica, todas as amostras responderam positivamente às diferenciaçõesnas linhagens osteogênica e adipogênica, além de apresentarem expressão deosteopontina e colágeno tipo I e PPAR-γ, respectivamente, pelo qPCR em temporeal. Não foi observada a expressão de osteocalcina em nenhuma amostrasubmetida a indução osteogênica. Os resultados obtidos indicam o tecidoad... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Neuroblastoma (NB) é a forma mais indiferenciada de tumores neuroblásticos e a principal causa de morte por câncer pediátrico. Alterações epigenéticas interagem em todas as etapas do desenvolvimento do câncer, promovendo a progressão tumoral. A remodelação da cromatina é influenciada pela acetilação de histonas e a metilação de DNA. Acetiltransferases de histona (HATs), desacetilases de histonas (HDAC) e metiltransferase de DNA (DNMTs) são alvos de estratégias terapêuticas em tumores. Os retinoides agem nas vias de diferenciação celular, anti-proliferação e pró-apoptose. Nesse trabalho, é proposto que a combinação desses moduladores epigenéticos e de diferenciação em linhagens de células de NB humano é mais efetiva que os agentes isolados. Os tratamentos induziram mudanças na expressão de marcadores de diferenciação e indiferenciação, como c-Myc, β-3tubulina, NeuN e Bmi1, e alterações morfológicas nas duas linhagens celulares utilizadas, SK-N-BE(2) e SH-SY5Y. Os dados encontrados podem contribuir para uma melhor compreensão dos mecanismos moleculares dos moduladores retinoides e epigenéticos em NB capazes de acrescentar melhorias nas atuais estratégias terapêuticas. / Neuroblastoma (NB) is the most undifferentiated form of neuroblastic tumors and the leading cause of death from pediatric cancer. Epigenetic changes interact at all stages of cancer development, promoting tumor progression. Chromatin remodeling is influenced by histone acetylation and DNA methylation. Histone acetyltransferases (HATs), histone deacetylases (HDAC), and DNA methyltransferase (DNMTs) are targets for therapeutic strategies in cancer. Retinoids act on cell differentiation pathways and display anti-proliferation and pro-apoptotic actions. In the present research we examined the effects of combining epigenetic modulators and a retinoid receptor agonist in human NB cells. The retinoid all trans-retinoic acid (ATRA) combined with inhibitors of either histone deacetylases (HDACs) or DNA methyltransferase was more effective than any drug given alone in impairing the proliferation of SH-SY5Y and SK-N-BE(2) NB cells. In addition, the treatments induced differential changes in the expression of differentiation markers including c-Myc, β-3tubulin, NeuN and Bmi1, and morphological changes in SK-N-BE(2) e SH-SY5Y cell lines. The data contribute to a better understanding of the molecular mechanisms of retinoid modulators and epigenetic in NB able to add improvements in current therapeutic strategies.

A Doença de Alzheimer (DA) é uma desordem neurodegenerativa caracterizada por um declínio cognitivo global, incluindo uma perda progressiva de memória, orientação e raciocínio, associada com a degeneração especifica de neurônios colinérgicos. As alterações histopatológicas que definem a DA são protéicos de β-amilóide e tau hiperfosforilada em placas senis e emaranhados neurofibrilares, respectivamente. Porém, os mecanismos moleculares que levam a DA não estão bem caracterizados e ainda não há nenhum tratamento eficaz para prevenir ou reverter os seus sintomas. Parte dessa dificuldade se deve à escassez de modelos experimentais adequados. Previamente nosso grupo estabeleceu condições experimentais para a diferenciação do neuroblastoma humano SH-SY5Y em neurônios dopaminérgicos a partir da adição de ácido retinóico (AR). Alguns estudos sugerem que esta linhagem, quando tratada com AR e fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF), apresenta uma mudança para um fenótipo colinérgico. Dessa forma, este trabalho tem por objetivo caracterizar a diferenciação colinérgica desta linhagem e estabelecer as melhores condições de tratamento com ácido ocadáico (AO), que promove a hiperfosforilação e deposição da proteína tau, em combinação com oligômeros solúveis de β-amilóide (Aβ1-42), para uso como modelo in vitro ao estudo da DA. As células proliferativas foram cultivadas em meio DMEM/F12 com 10% de soro fetal ( FB). A diferenciação foi induzida com 10μM de AR em meio a cultura com 1% de SFB durante sete dias, sendo o BDNF (10 nM) acrescentado a partir do quarto dia. Determinamos a atividade da Acetilcolinesterase (AChE), da Colina Acetiltransferase (ChAT) e o imunoconteúdo de ChAT como marcadores colinérgicos. O co-tratamento com BDNF resultou em células com notável morfologia neuronal, apresentando aumento na densidade e comprimento de neuritos e nos marcadores colinérgicos. Após o estabelecimento do modelo colinérgico, as células diferenciadas da linhagem de neuroblastoma SH-SY5Y foram desafiadas com uma curva de dose das neurotoxinas Aβ1-42 ou AO, e a neurotoxicidade foi avaliada pelo ensaio do brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2il)-2,5-difeniltetrazolium (MTT) em combinação com a densidade de neuritos. A partir desses resultados, doses subletais das toxinas foram selecionadas para estabelecer o modelo in vitro da Doença de Alzheimer. Esses resultados fazem dessa linhagem celular uma ferramenta útil no campo da neurociência, podendo torná-la um modelo adequado para o estudo da Doença de Alzheimer. / Alzheimer's disease (AD) is a neurodegenerative disorder characterized by a global cognitive decline, including progressive loss of memory, orientation and reasoning associated with a specific degeneration of cholinergic neurons. Histopathological changes that define AD are amyloid-β hyperphosphorylated tau deposits in senile plaques and neurofibrillary tangles, respectively. However, the leading molecular mechanisms are not well elucidated and still there is no effective treatment to prevent or reverse the symptoms. Part of this difficulty is due to the lack of suitable experimental models. Our group previously established experimental conditions for the differentiation of human neuroblastoma SH-SY5Y cells into dopaminergic neurons-like with retinoic acid (RA) addition. Some studies suggested that when treated with RA and brain-derived neurotrophic factor (BDNF) this cell line has a shift to a cholinergic like phenotype. Thus, this study aims to characterize the cholinergic differentiation of SH-SY5Y cell line and to determine the best conditions for okadaic acid (OA) treatment, which promotes the deposition and hyperphosphorylation of tau protein, in combination with solubleoligomers of β- myl (Aβ - 42). Thereby we established a suitable AD in vitro model. Exponentially growing SH-SY5Y cells were maintained in DMEM / F12 medium with 10% fetal bovine serum (FBS). Differentiation was triggered by the combination of 10 μM of RA plus medium with 1% of FBS during 7 days, BDNF was added on 4th day. We determined Acetylcholinesterase (AChE) and Choline Acetyltransferase (ChAT) enzymatic activities and the ChAT immunocontent as cholinergic markers. Once the cholinergic like in vitro model was established, the differentiated SH- Y5Y cells were challeng with of Aβ -42 or AO dose curve, and neurotoxicity was evaluated by an 3-(4,5-dimethylthiazol-2il)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay in combination with neurite density. Hence, sublethal doses of neurotoxins were selected to determine the in vitro model of Alzheimer's disease. Taken together, these results suggested SH-SY5Y cell line as a useful and suitable model in Alzheimer's disease research.