Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2017 / Made available in DSpace on 2017-09-19T04:09:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 347992.pdf: 2382912 bytes, checksum: 7d4dc8be152c8579ca29709f01adf318 (MD5) Previous issue date: 2017 / O glifosato e os herbicidas à base de glifosato são considerados praguicidas de amplo espectro e pós-emergente, e são os mais utilizados na agricultura mundial para matar uma variedade de ervas daninhas terrestres e aquáticas. Assim, pelo uso excessivo deste agroquímico nas culturas, especialmente quando aplicado por pulverização, pode ocorrer a sua infiltração no solo e a lixiviação para os corpos de água, atingindo diferentes organismos aquáticos não-alvos. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi investigar a toxicidade celular do herbicida à base de glifosato, Roundup® WG (0,065; 0,65 e 6,5 mg/L), após 15 dias, sobre a morfologia, ultraestrutura e proteínas envolvidas na fusão e fissão mitocondrial no ovário do peixe-zebra, Danio rerio. Primeiramente, foi obtida a concentração letal média (CL50) de 42,61 mg/L em 96 horas para D. rerio após exposição ao Roundup® WG. Após exposição de D. rerio ao Roundup® WG por 15 dias, as células germinativas foram caracterizadas em três fases: ovócitos pré-vitelogênicos I (PreI), ovócitos pré-vitelogênicos II (Pre II) e ovócitos vitelogênicos (Vit), baseado em critérios morfológicos já estabelecidos na literatura. Uma diminuição no diâmetro dos ovócitos PreI foi observada nas três concentrações do Roundup® WG e uma diminuição do diâmetro dos ovócitos PreII nas duas maiores concentrações avaliadas. Em relação ao conteúdo da proteína vitelina, um aumento foi observado nos ovários das fêmeas expostas, sugerindo uma relação dose-dependente do Roundup® WG. Na análise ultraestrutural, foram observadas zonas de vacuolização nas células foliculares e um aumento do espaço perivitelínico, com presença de macro e micro vesículas, bem como compartimentos mitocondriais comprometidos nos ovários de fêmeas expostas. Também, foi observado uma redução do número de mitocôndrias e um aumento de mitocôndrias alteradas com uma severidade alta nos ovócitos, bem como uma diminuição no conteúdo de Drp1, Mfn1 e Mfn2 envolvidas na fissão e fusão mitocondrial, que pode indicar à mitocôndria como um dos alvos do Roundup® WG. Estes resultados, sugerem que Roundup® WG poderia ser considerado como um possível disruptor endócrino nos ovários de D. rerio, afetando à maturação ovariana. No entanto, devem ser realizados mais testes toxicológicos avaliando outros parâmetros reprodutivos e seu impacto nos peixes. Além disso, a menor concentração de glifosato avaliada neste estudo, que é a concentração permitida pelo CONAMA (0,065 mg/L), provocou diminuição no diâmetro dos ovócitos PreI, aumento do conteúdo de vitelina, bem como alteração nas mitocôndrias e diminuição de Drp1 e Mfn2, isso poderia indicar que o limite máximo permissível de glifosato no Brasil precisa ser reavaliado. Assim, o presente estudo demonstrou diferentes alterações no ovário de D. rerio expostos às concentrações do Roundup® WG, indicando a toxicidade reprodutiva deste herbicida. / Abstract: Glyphosate and glyphosate-based herbicides are considered broad-spectrum and post-emergent pesticides, and are the most widely used in global agriculture to kill a variety of terrestrial and aquatic weeds. Thus, due to the excessive use of this agrochemical in the crops, especially when applied by spraying, infiltration into the soil and leaching into the water bodies can occur, reaching different non-target aquatic organisms. Therefore, the objective of this study was to investigate the cellular toxicity of glyphosate-based herbicide, Roundup® WG (0.065, 0.65 and 6.5 mg/L) on morphology, ultrastructure and proteins involved in fusion and fission mitochondrial in the ovaries of zebrafish, Danio rerio. First, the determination of mean lethal concentration (LC50) was 42.61 mg/L in 96 hours for D. rerio after exposure to Roundup® WG. After exposure of D. rerio to concentrations of Roundup® WG for 15 days, germ cells of ovaries were characterized in three phases: pre-vitellogenic oocytes I (PreI), pre-vitellogenic oocytes II (PreII) and vitellogenic oocytes (Vit), based on morphological criteria already established in the literature. A diameter decrease in the PreI was observed in the three concentrations of Roundup® WG as well as a diameter decrease of the PreII oocytes when two highest concentrations were evaluated. In relation to the content of the vitellin protein, an increase in its content was observed in the ovaries of exposed females, depending on the concentration of the herbicide. In the ultrastructural analysis, zones of vacuolization in follicular cells and an increase of perivitelinic space with presence of macro and micro vesicles were observed, as well as compromised mitochondria compartments in the ovaries of exposed females. In addition, reductions in the number of mitochondria and an increase of altered mitochondria with high severity in oocytes were observed, as well as a decrease in the content of Drp1, Mfn1 and Mfn2 involved in mitochondrial fission and fusion. These may indicate the mitochondria as a Roundup® WG target. These results suggest that Roundup® WG could be considered as a possible endocrine disrupter in the ovaries of D. rerio, affecting ovarian maturation. However, further toxicological tests should be performed to evaluate other reproductive parameters and their impact on fish. In addition, the lowest concentration of glyphosate evaluated in this study, which is the concentration allowed by CONAMA (0.065 mg/L), caused a diameter decrease of the PreI, an increase in vitellin content, as well as a change in the mitochondria and a decrease in Drp1 and Mfn2. In this respect, the maximum permissible limit of glyphosate in Brazil needs to be reevaluated. Thus, the present study demonstrated different alterations in the ovaries of D. rerio exposed to concentrations of Roundup® WG, indicating reproductive toxicity of this herbicide.

Os disruptores endócrinos são substâncias químicas, sintéticas ou naturais, capazes de interferir no sistema endócrino de seres humanos e animais. Pertencem à classe dos micro poluentes, pois mesmo em concentrações de μg e ng.L-1 causam efeitos adversos aos organismos a eles expostos. Os hormônios destacam-se dentre os disruptores endócrinos por serem compostos potencialmente ativos no sistema biológico e estão relacionados à origem de diversos tipos de cânceres. Esta dissertação teve por objetivo desenvolver e validar metodologia para determinar hormônios, considerados disruptores endócrinos, em amostras de água bruta e tratada da região da Bacia Hidrográfica do Rio Paraíba do Sul utilizando a técnica de cromatografia gasosa com detecção por espectrometria de massas. A população atendida pelas unidades da SABESP dessa região é de aproximadamente 11 milhões de habitantes. Através do processo de validação, a metodologia desenvolvida pode ser considerada seletiva, robusta, exata, linear e precisa para a análise proposta. Aplicando o procedimento analítico validado nas amostras coletadas, alguns dos compostos estudados puderam ser detectados tanto em água bruta como em água tratada permanecendo abaixo do limite de quantificação, exceto a cafeína que apresentou concentração média de 0,45 μg.L-1 em água bruta e 0,17 μg.L-1 em água tratada, observando-se indícios de contaminação principalmente nas épocas secas. Este projeto de pesquisa está vinculado a uma parceria entre o Instituo de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN) e a Companhia de Saneamento Básico do Estado de São Paulo (SABESP). / The endocrine disruptors are chemicals substances, synthetic or natural, which can interfere in endocrine system from humans and animals. They belong to the class of micro pollutants, because even at concentrations of μg e ng.L-1 can cause adverse effects to organisms to them exposed. The hormones stand out as endocrine disruptors because they are potentially active compounds in biological systems and are related to the origin of several types of cancers. This work aimed to develop and validate analytical methodology to determine hormones, considered endocrine disruptors, in drinking water and raw water at region of Paraíba do Sul River, using gas chromatography with mass spectrometry detector. The population served by the units of SABESP is around 11 million inhabitants. By the validation process, the developed methodology can be considered selective, robust, accurate and linear for the proposed analysis. Applying the validated analytical procedure for the samples, some compounds could be detected at drinking water and raw water remaining below limit of quantization, except caffeine that was detected in mean concentration of 0,45 μg.L-1 in raw water and 0,17 μg.L-1 in drinking water, principally due to drought season. This Project is linked to a partnership between Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN) and Companhia de Saneamento Básico do Estado de São Paulo (SABESP).

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:52:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000419330-Texto+Completo-0.pdf: 2707705 bytes, checksum: c9acda4f0390091f8e585aeb1dfbff6d (MD5) Previous issue date: 2009 / This research essay involved students and teachers of elementary school, especially classes of Sciences 7th grade, and sought to allow the researcher to be entirely on the pre-knowledge about the damage to human health caused by endocrine disruptors (hormone disruptors) dispersed in environment and its relationship with biological systems, especially with the hormonal system, and discover how it can promote an interdisciplinary action to expand such knowledge. Simulators hormone can bind directly to cellular receptors designed specifically to hormones, to block these binding sites so that the true hormones can not make this connection, organism inducing the creation of new sites of cell receptors, changing the message biochemistry of hormones true, and change substantially the amount of hormones circulating in the blood, among other disorders. Therefore, before a relatively unexplored subject in the media and the importance of ecological, social and public health, we identified the need to bring up the subject in order to rescue the students the spirit of scientific, ethical, reflective and critical situation, for the better development of their citizenship. We tried to also bring to the school environment and teaching methodologies able to integrate scientific knowledge, through proposals for interdisciplinary work, in order to break sealed and compartmentalized knowledge, very common in a society whose culture favors the over-specialization.This research essay sought to contextualize and problematize the issue of rational use of plastic and the risks to which we humans are exposed through interdisciplinary educational activities with students and teachers at a State school in Porto Alegre-RS. / Este trabalho de pesquisa envolveu alunos e professores do Ensino Fundamental, em especial turmas de Ciências de 7ª série, e procurou permitir que o pesquisador se inteirasse sobre os pré-conhecimentos acerca dos danos à saúde humana causadas pelos disruptores endócrinos (desreguladores hormonais) dispersos no ambiente e sua relação com os sistemas biológicos, principalmente com o sistema hormonal, e descobrir como seria possível promover uma ação interdisciplinar para a ampliação desses conhecimentos. Os simuladores hormonais podem se ligar diretamente aos receptores celulares designados especificamente aos hormônios, bloquear esses sítios de ligação de maneira que os verdadeiros hormônios não possam fazer esta ligação, induzir o organismo à criação de novos sítios de receptores celulares, alterar a mensagem bioquímica dos hormônios verdadeiros, e modificar substancialmente a quantidade de hormônios circulantes no sangue, entre outros distúrbios orgânicos. Portanto, diante de um tema pouco explorado pela mídia e de importância ecológica, social e para a saúde pública, identificamos a necessidade de se trazer à tona o assunto, no intuito de resgatar nos alunos o espírito científico, ético, reflexivo e de criticidade, para o melhor desenvolvimento da sua cidadania. Buscou-se trazer também para o ambiente escolar metodologias de ensino capazes de integrar o conhecimento científico, através de propostas de trabalho de caráter interdisciplinar, visando a ruptura de conhecimentos estanques e compartimentalizados, muito comum em uma sociedade cuja cultura privilegia a superespecialização.Este trabalho de pesquisa procurou contextualizar e problematizar a questão do uso racional do plástico e os riscos a que nós seres humanos estamos expostos por meio de atividades didáticas interdisciplinares com alunos e professores de uma escola estadual de Porto Alegre- RS.

Os disruptores endócrinos são substâncias químicas, sintéticas ou naturais, capazes de interferir no sistema endócrino de seres humanos e animais. Pertencem à classe dos micro poluentes, pois mesmo em concentrações de μg e ng.L-1 causam efeitos adversos aos organismos a eles expostos. Os hormônios destacam-se dentre os disruptores endócrinos por serem compostos potencialmente ativos no sistema biológico e estão relacionados à origem de diversos tipos de cânceres. Esta dissertação teve por objetivo desenvolver e validar metodologia para determinar hormônios, considerados disruptores endócrinos, em amostras de água bruta e tratada da região da Bacia Hidrográfica do Rio Paraíba do Sul utilizando a técnica de cromatografia gasosa com detecção por espectrometria de massas. A população atendida pelas unidades da SABESP dessa região é de aproximadamente 11 milhões de habitantes. Através do processo de validação, a metodologia desenvolvida pode ser considerada seletiva, robusta, exata, linear e precisa para a análise proposta. Aplicando o procedimento analítico validado nas amostras coletadas, alguns dos compostos estudados puderam ser detectados tanto em água bruta como em água tratada permanecendo abaixo do limite de quantificação, exceto a cafeína que apresentou concentração média de 0,45 μg.L-1 em água bruta e 0,17 μg.L-1 em água tratada, observando-se indícios de contaminação principalmente nas épocas secas. Este projeto de pesquisa está vinculado a uma parceria entre o Instituo de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN) e a Companhia de Saneamento Básico do Estado de São Paulo (SABESP). / The endocrine disruptors are chemicals substances, synthetic or natural, which can interfere in endocrine system from humans and animals. They belong to the class of micro pollutants, because even at concentrations of μg e ng.L-1 can cause adverse effects to organisms to them exposed. The hormones stand out as endocrine disruptors because they are potentially active compounds in biological systems and are related to the origin of several types of cancers. This work aimed to develop and validate analytical methodology to determine hormones, considered endocrine disruptors, in drinking water and raw water at region of Paraíba do Sul River, using gas chromatography with mass spectrometry detector. The population served by the units of SABESP is around 11 million inhabitants. By the validation process, the developed methodology can be considered selective, robust, accurate and linear for the proposed analysis. Applying the validated analytical procedure for the samples, some compounds could be detected at drinking water and raw water remaining below limit of quantization, except caffeine that was detected in mean concentration of 0,45 μg.L-1 in raw water and 0,17 μg.L-1 in drinking water, principally due to drought season. This Project is linked to a partnership between Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN) and Companhia de Saneamento Básico do Estado de São Paulo (SABESP).

Orientador: Sebastião Roberto Taboga / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-16T00:12:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Biancardi_ManoelFrancisco_M.pdf: 6869231 bytes, checksum: 32275d5e0c79d81cecdc898bc5e42bb9 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A próstata é uma glândula encontrada não somente em machos de mamíferos, podendo estar presente em fêmeas de alguns roedores e também em mulheres. Os andrógenos são essenciais durante o desenvolvimento e também para a manutenção da homeostasia prostática ao longo da vida. No entanto, sensíveis interferências, principalmente em momentos críticos do desenvolvimento, podem predispor este órgão a desenvolver lesões durante a vida adulta e senil. Pesquisas tem demonstrado que o programa de expressão gênica controlado pelo receptor de andrógeno durante a organogênese prostática é muito semelhante ao que é ativado durante a instalação do câncer de próstata. Aliado a isso, um grande número de estudos tem demonstrado que a predisposição às desordens prostáticas tem sua origem nos momentos iniciais da vida. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar se a exposição androgênica intra-uterina e pós-natal pode interferir na morfofisiologia da próstata de roedores, podendo levar ao surgimento de desordens prostáticas durante a vida adulta. Para isto, este trabalho foi dividido em duas etapas. Primeiro, grupos de ratos Wistar jovens e adultos não tratados e de ratas adultas tratadas com testosterona (1 mg/Kg/48 horas) durante 7, 14 e 21 dias foram analisadas. As próstatas destes animais foram submetidas a análises morfométrico-estereológicas, imunohistoquímicas e ultra-estruturais. Em uma segunda etapa, grupos de gerbilos machos e fêmeas expostos à testosterona durante a vida embrionária (100 ?g ou 1 mg) e pós-natal (100 ?g) foram avaliados na vida adulta. As glândulas prostáticas destes animais foram submetidas a análises morfométrico-estereológicas, imunohistoquímicas, além da reconstrução tridimensional. Os resultados mostraram que as próstatas das ratas sujeitas a terapias androgênicas durante a vida adulta apresentaram um intenso desenvolvimento, tornando-se mais ativas nos processos de síntese e secreção. Além de sofrer um intenso desenvolvimento, a glândula prostática destes animais tornou-se, morfologicamente e fisiologicamente, muito semelhante à próstata ventral dos ratos. Entretanto, apesar das próstatas das ratas tratadas sofrerem um expressivo desenvolvimento induzido pela ação androgênica, não foram observadas a presença de lesões nestas glândulas. Já os machos e as fêmeas de gerbilos que sofreram exposição androgênica anormal durante o período embrionário, apresentaram uma alta incidência de lesões prostáticas na vida adulta, podendo-se evidenciar a presença frequente de focos inflamatórios e de neoplasias intra-epiteliais. Os resultados mostraram que o excesso de andrógeno interfere significantemente na homeostasia prostática, levando a um intenso desenvolvimento glandular ou mesmo predispondo esta glândula a desenvolver lesões durante a vida adulta. Estes aspectos são de grande interesse, pois é cada vez maior o número de relatos na literatura mostrando que a desbalanço hormonal durante os momentos iniciais do desenvolvimento prostático podem predispor este órgão a manifestar doenças durante a vida adulta e senil. / Abstract The prostate is a gland found not exclusively in male mammals, may also be present in female of some rodents and also in women. The androgens are essential for the development and maintenance of prostatic homeostasis throughout life. However, sensible interferences, especially during critical stages of development, can predispose this organ to develop lesions in adult and senile life. Researches have shown that the gene expression program controlled by androgen receptor during prostatic organogenesis is very similar to that activated during the installation of prostate cancer. Moreover, a large number of studies have demonstrated that the predisposition to prostate disorders has its origin in the early stages of life. Thus, the objective of this study was to evaluate whether intrauterine and postnatal androgen exposure alters the morphophysiology of rodents prostate leading to the development of prostatic disorders in adulthood. For this, the work was divided into two stages. At first, groups of untreated young and adult male Wistar rats and adult female rats treated with testosterone (1mg/Kg/48 hours) for 7, 14 and 21 were analyzed. The prostates of these animals were subjected to morphometric-stereological, immunohistochemical and ultrastructural analyses. In a second step, groups of male and female gerbils exposed to testosterone (100 ?g or 1 mg) during embryonic and postnatal (100 ?g) life were analyzed at adulthood. The prostatic glands of these animals were subjected to morphometric-stereological, immunohistochemical and also to three-dimensional reconstruction analyses. The results showed that prostates of female rats subjected to androgen therapy during adulthood had an intense development, presenting a more active synthesis and secretion status. In addition to this intense development, the prostate gland of these animals became morphologically and physiologically very similar to the ventral prostate of adult male rats. However, despite the prostates of treated rats suffered a significant development caused by the androgenic action, it was not observed the presence of lesions in these glands. In other hand, males and females gerbils submitted to abnormal androgen exposure during the embryonic period exhibited a high incidence of prostatic lesions in adulthood, being frequent the presence of inflammatory foci and intraepithelial neoplasia. The results showed that androgen excess interfere significantly in the prostate homeostasis, leading to an intense glandular development or even predisposes this gland to develop lesions during adulthood. These aspects are of great interest because a growing number of reports in the literature has shown that the hormonal imbalance during the early stages of prostate development may predispose this organ to manifest disease during adulthood and senescence. / Mestrado / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Wilma De Grava Kempinas / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T22:18:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guerra_MarinaTrevizan_D.pdf: 6009222 bytes, checksum: 1ca90ae1ef82035a0e6930b277dac172 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Os desreguladores endócrinos são substâncias químicas que podem mimetizar ou antagonizar os hormônios endógenos, alterando o equilíbrio hormonal necessário para o desenvolvimento correto. Sabe-se que a exposição de organismos a agentes hormonalmente ativos durante períodos críticos do desenvolvimento pode levar a alterações permanentes detectadas somente na vida adulta. Em várias espécies animais estes compostos podem atingir o feto via placenta ou a prole, pelo leite materno. Embora pesquisas iniciais tenham focado em estrógenos e antiandrógenos ambientais, a presença de compostos com atividade androgênica tem sido descrita como contaminante em rios e animais destinados a alimentação. Vários estudos demonstraram que a exposição de animais a altos níveis de andrógenos durante o período perinatal pode causar alterações morfológicas, bioquímicas e funcionais permanentes em vários órgãos e sistemas. A exposição perinatal a andrógenos exógenos pode causar masculinização fisiológica e comportamental em fêmeas e levar a alterações reprodutivas em machos. O objetivo deste trabalho foi avaliar os possíveis efeitos da exposição a um agente androgênico sobre o sistema genital e a função reprodutiva de animais expostos durante períodos críticos de desenvolvimento. Para tanto, ratas prenhes foram alocadas em quatro grupos experimentais: controle, que recebeu somente óleo de milho (veículo), e tratados com propionato de testosterona nas doses de 0,05mg/kg, 0,1mg/kg, ou 0,2mg/kg. Os tratamentos foram realizados por via subcutânea, do dia gestacional 12 ao final da lactação. A prole feminina foi avaliada quanto ao número de células germinativas fetais, peso corpóreo e distância anogenital no dia pós-natal 1, número de mamilos, idade de instalação da puberdade, histologia uterina e ovariana, dosagens hormonais, comportamento sexual, fertilidade, níveis de receptores esteroides uterinos através de imunohistoquímica, assim como taxa de proliferação/morte celular uterina e testes uterotróficos. Nos filhotes do sexo masculino foram avaliados, na idade adulta e meia idade, a histologia testicular e epididimária, contagens, morfologia e motilidade espermáticas, dosagens hormonais, comportamento sexual e fertilidade. Os resultados demonstraram que em fêmeas, a exposição perinatal ao propionato de testosterona ocasionou alteração na intensidade de marcação dos receptores esteroides uterinos em todas as doses testadas, diminuição nos índices de proliferação e morte celular no tecido uterino nas doses de 0,1 e 0,2mg/kg e aumentou a predisposição uterina a responder a estímulos estrogênicos na dose de 0,1mg/kg e 0,2mg/kg. Entretanto, estas alterações não foram capazes de prejudicar a diferenciação sexual feminina e a fisiologia normal do sistema genital feminino. Em relação aos filhotes do sexo masculino, a exposição perinatal a andrógenos provocou redução na produção e nas reservas espermáticas na idade adulta, sem, contudo, alterar a fertilidade destes animais após acasalamentos naturais. Podemos concluir que a exposição perinatal a andrógenos, nas doses utilizadas neste experimento, provocou o aparecimento de alterações tardias no sistema genital feminino como modificações nos receptores esteroides uterinos e anormalidade na resposta a estímulos estrogênicos e, no sistema genital masculino, alterações na produção espermática. Estas repercussões, entretanto, não foram capazes de alterar o desempenho geral de fertilidade em ambos os sexos / Abstract: Endocrine disruptors are chemicals that may mimic or antagonize endogenous hormones, altering the critical hormonal balance required for proper health and development. It is well known that exposure of organisms to some hormonally active agents during critical periods of development imprints permanent changes that can be detected later in adulthood. In many animal species these substances reach the fetus via placenta and/or the offspring via the mother's milk. Although first researches have focused on environmental estrogens and antiandrogens, androgenic activity has been described as contaminant in rivers and beef cattle. Previous studies demonstrated that exposure of experimental animals to high levels of androgens during perinatal age causes permanent morphological, biochemical, and functional alterations in several organs and systems. Perinatal exposure of female rodents to exogenous androgens results in both physiological and behavioral masculinization and causes reproductive disruption in male rodents. The aim of this study was to assess the possible effects of an androgenic compound on genital system and reproductive function of animals exposed during critical periods of development. Pregnant female rats were allocated into four experimental groups: control, which received corn oil (vehicle), and treated with testosterone propionate at doses of 0.05mg/kg, 0.1mg/kg and 0.2mg/kg. Treatments were performed subcutaneously, from gestational day 12 until the end of lactation. The female offspring was evaluated for fetal germ cell number, body weight and anogenital distance at post-natal day 1, number of nipples, puberty onset, histology of reproductive organs, hormonal levels, sexual behavior, fertility test, immunohistochemistry of steroid receptors, proliferation/apoptotic index, uterotrophic test and uterine stimulation with estrogens. On male offspring, at adult age and middle-age, histology of testis and epididymis, sperm counts, morphology and motility, hormonal levels, sexual behavior and fertility test were evaluated. Results demonstrated that, in females, the perinatal testosterone propionate exposure caused an alteration in the pattern of uterine steroidal receptors imunostaining in all tested doses, a decreased proliferation/apoptotic index in the uterine tissue at 0.1 and 0.2mg/kg and a greater predisposition from uterus in responding to estrogens stimulation at dose of 0.2mg/kg. However, these alterations were not capable of impairing female sexual differentiation and normal physiology of female genital tract. On male offspring, the perinatal androgenization provoked a reduction in sperm production and reserves at adult age, without altering fertility after natural mating. We can conclude that perinatal exposure to androgens, at doses used in this experiment, provoked the appearance of late alterations in the female genital system as modifications in the uterine steroidal receptors and abnormalities in uterine response to estrogenic stimulation, and in male genital system, as spermatic production impairment. These repercussions, however, were not capable to alter the general fertility performance in both sexes / Doutorado / Biologia Celular / Doutora em Biologia Celular e Estrutural

O objetivo deste trabalho foi avaliar a liberação de Bisfenol A (BPA) de sistemas adesivos resinosos ortodônticos in vitro e in vivo. No estudo in vitro foram testadas 5 marcas comerciais de sistemas adesivos resinosos ortodônticos (Eagle Spectrum, Enlight, Light Bond, Mono Lok II e Transbond XT). Por meio da simulação de exposição intraoral, os corpos de prova foram imersos numa solução água/etanol e a liberação de BPA foi medida nos tempos de 30 minutos, 24 horas, 1 dia, 1 semana e 1 mês. No estudo in vivo utilizou-se amostra composta por 20 pacientes com indicação para tratamento ortodôntico com aparelhos fixos. Foram coletadas amostras de saliva em 5 tempos: antes, 30 minutos, 24 horas, 1 dia, 1 semana e 1 mês após a colagem dos bráquetes e as de urina em 4 tempos: antes, 1 dia, 1 semana e 1 mês após a colagem. Todos os compósitos avaliados liberaram pequena quantidade de BPA, sendo que o compósito Enlight-ORMCOR foi o que apresentou maior liberação,1020 ng/g no tempo de 1 mês. Os maiores níveis de BPA na saliva, foram encontrados no tempo de 30 minutos (1,0445 ng/mL) e na urina, 24 horas (5,035 ng/mL) após a colagem dos bráquetes. Mesmo que as quantidades de BPA liberadas fossem pequenas, houve diferença significativa quando esses valores foram comparados com os níveis iniciais, sugerindo aumento da quantidade de BPA no organismo com a colagem dos bráquetes ortodônticos. Como a literatura especializada têm destacado os potenciais tóxicos do BPA e têm sugerido alterações celulares \"com baixas\" doses, mais estudos são necessários para se chegar a um consenso no sentido de propiciar segurança no uso desses materiais. / The purpose of this study was measure the release of Bisphenol A (BPA) from the orthodontic resinous adhesive systems in vitro and in vivo. The study was divided into two stages: At in vitro study, five trademarks of Resinous Adhesive Systems (Eagle Spectrum, Enlight, Light Bond, Mono Lok II and Transbond XT) was tested. The samples were immersed in a water/ethanol solution simulating the intraoral exposition and the release of BPA was measured at times of 30 minutes, 24 hours, 1 day, 1 week and 1 month. At in vivo study, 20 patients with indication to fixed orthodontic appliances were used. Samples of saliva and urine were collected in these patients at previously determined time. To the saliva, it was collected 5 times ( before bonding the orthodontic brackets and 30 minutes, 24 hours, 1 day, 1 week and 1 month after this procedure); to the urine, it was collected 4 times ( before, 1 day, 1 week, 1 month, after bonding the orthodontic brackets). All the tested resinous adhesives released a small quantity of BPA, with peack at 1 month, with Enlight resinous presenting the highest level (1020 ng/g). The peack level in saliva (130445 ng/ml) and urine (5.035 ng/ml) were found in 30 minutes and 24 hours after the bonding of fixed appliances, respectively. However the quantities of released BPA are small which validate the security of the procedure. A significant difference was observed when these values were compared to the initial levels, suggesting a correlation of the increase of the quantity of BPA in the body and the bonding of the orthodontic appliances. As several studies have reported, the probable toxic effect of BPA and cellular changes in \"low doses\", more studies are necessary to reach a consensus. to provide security in the use of such materials.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a liberação de Bisfenol A (BPA) de sistemas adesivos resinosos ortodônticos in vitro e in vivo. No estudo in vitro foram testadas 5 marcas comerciais de sistemas adesivos resinosos ortodônticos (Eagle Spectrum, Enlight, Light Bond, Mono Lok II e Transbond XT). Por meio da simulação de exposição intraoral, os corpos de prova foram imersos numa solução água/etanol e a liberação de BPA foi medida nos tempos de 30 minutos, 24 horas, 1 dia, 1 semana e 1 mês. No estudo in vivo utilizou-se amostra composta por 20 pacientes com indicação para tratamento ortodôntico com aparelhos fixos. Foram coletadas amostras de saliva em 5 tempos: antes, 30 minutos, 24 horas, 1 dia, 1 semana e 1 mês após a colagem dos bráquetes e as de urina em 4 tempos: antes, 1 dia, 1 semana e 1 mês após a colagem. Todos os compósitos avaliados liberaram pequena quantidade de BPA, sendo que o compósito Enlight-ORMCOR foi o que apresentou maior liberação,1020 ng/g no tempo de 1 mês. Os maiores níveis de BPA na saliva, foram encontrados no tempo de 30 minutos (1,0445 ng/mL) e na urina, 24 horas (5,035 ng/mL) após a colagem dos bráquetes. Mesmo que as quantidades de BPA liberadas fossem pequenas, houve diferença significativa quando esses valores foram comparados com os níveis iniciais, sugerindo aumento da quantidade de BPA no organismo com a colagem dos bráquetes ortodônticos. Como a literatura especializada têm destacado os potenciais tóxicos do BPA e têm sugerido alterações celulares \"com baixas\" doses, mais estudos são necessários para se chegar a um consenso no sentido de propiciar segurança no uso desses materiais. / The purpose of this study was measure the release of Bisphenol A (BPA) from the orthodontic resinous adhesive systems in vitro and in vivo. The study was divided into two stages: At in vitro study, five trademarks of Resinous Adhesive Systems (Eagle Spectrum, Enlight, Light Bond, Mono Lok II and Transbond XT) was tested. The samples were immersed in a water/ethanol solution simulating the intraoral exposition and the release of BPA was measured at times of 30 minutes, 24 hours, 1 day, 1 week and 1 month. At in vivo study, 20 patients with indication to fixed orthodontic appliances were used. Samples of saliva and urine were collected in these patients at previously determined time. To the saliva, it was collected 5 times ( before bonding the orthodontic brackets and 30 minutes, 24 hours, 1 day, 1 week and 1 month after this procedure); to the urine, it was collected 4 times ( before, 1 day, 1 week, 1 month, after bonding the orthodontic brackets). All the tested resinous adhesives released a small quantity of BPA, with peack at 1 month, with Enlight resinous presenting the highest level (1020 ng/g). The peack level in saliva (130445 ng/ml) and urine (5.035 ng/ml) were found in 30 minutes and 24 hours after the bonding of fixed appliances, respectively. However the quantities of released BPA are small which validate the security of the procedure. A significant difference was observed when these values were compared to the initial levels, suggesting a correlation of the increase of the quantity of BPA in the body and the bonding of the orthodontic appliances. As several studies have reported, the probable toxic effect of BPA and cellular changes in \"low doses\", more studies are necessary to reach a consensus. to provide security in the use of such materials.

Há evidências crescentes de que os desreguladores endócrinos (DE) podem afetar negativamente os seres humanos. Águas superficiais e subterrâneas são as principais fontes de obter a sua potabilidade, no entanto, podem ser contaminadas por DE, que não são totalmente removidos pelos processos convencionais de tratamento de água e esgoto. Alguns problemas de saúde estão relacionados à exposição dos seres humanos aos DE, sendo a obesidade um deles. Atualmente vive-se um aumento da prevalência da obesidade em todo o mundo, fato considerado preocupante, considerando-se seu potencial impacto no sistema de saúde, pois, as principais doenças crônicas como diabetes e doenças cardiovasculares, tem a obesidade como grande fator de risco. Por meio de revisão de literatura, este artigo buscou reunir publicações científicas relacionando a exposição aos DE com a obesidade, com o objetivo de verificar a importância de sua remoção dos corpos hídricos, preservando a saúde da população e da biota aquática. A maioria dos estudos selecionados sugere associação entre DE e obesidade em humanos. / There is growing evidence that endocrine disrupters (ED) may adversely affect humans. Surface and ground water are the main sources to get their potability however, can be contaminated by ED, which are not completely removed by conventional processes of water and sewage treatment. Some health problems are related to the exposure of humans to ED, obesity being one of them. Currently lives an increase in obesity prevalence worldwide, a fact considered worrying, considering its potential impact on the health care system, for major chronic diseases like diabetes and cardiovascular diseases have obesity as a major risk factor. Through literature review, this paper aims to gather scientific publications relating to exposure to ED with obesity, in order to verify the importance of their removal from water bodies, preserving the population\'s health and aquatic biota. Most of the selected studies suggest an association between ED and obesity in humans.

Orientador: Flávia Karina Delella / Resumo: Células tronco mesenquimais (CTMs) possuem papel relevante na manutenção da homeostase e reparação em casos de lesão tecidual através da renovação do estoque celular. Tais células são implicadas na medicina regenerativa e terapia celular como fontes promissoras, sendo o tecido adiposo uma rica e relevante fonte dessas células. Nesse sentido, as células tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo (CTMs- TA) surgem como alternativa segura em estudos pré-clínicos e clínicos. As chamadas “Boas Práticas em Cultura Celular” (do inglês Good Manufacturing Practices - GMPs) tem sido utilizadas como uma nova abordagem para obtenção de controle de qualidade para fins terapêuticos. Neste contexto, o controle toxicológico dessas células surgem como uma questão relevante. Considera-se que os disruptores endócrinos mimetizam a ação de certos hormônios endógenos. Dessa forma, o BPA é conhecido por mimetizar o receptor de estrógeno e também causar alterações no processo de adipogênese. Já o TCDD possui afinidade com o receptor aril hidrocarboneto (AhR), assim como interfere através das vias de sinalização de estrógenos e andrógenos. Desta maneira, o presente estudo teve como objetivo geral testar o potencial de diferenciação das CTMs- TA humanas e de rato na presença dos compostos BPA e TCDD. Os objetivos específicos foram: a quantificação de proteínas relacionadas ao fenótipo de células- tronco, bem como de receptores específicos de ligação desses compostos, testes para verificação do po... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Mesenchymal stem cells (CTMs) plays a relevant role in the maintenance of homeostasis and repair in cases of tissue injury through cell stock renovation. Such cells are implicated in regenerative medicine and cell therapy as promising sources, been the adipose tissue a rich and relevant source. In this sense, mesenchymal stem cells derived from adipose tissue (ASCs) appears to be a safe alternative in preclinical and clinical studies. The so- called Good Manufacturing Practices (GMPs) have been used as a new approach to obtaining quality control for therapeutic purposes. In this context, the toxicological control approach becomes a relevant issue. Endocrine disrupting chemicals are thought to mimic the action of certain endogenous hormones. Thus, BPA is known to mimic the estrogen receptor and also cause changes in the process of adipogenesis. TCDD, on the other hand, has affinity with the aryl hydrocarbon receptor (AhR), as well as interfering with the estrogen and androgen signaling pathways. In this way, the present study had the rationale to test the differentiation potencial of human and rat MSCs in the presence of BPA and TCDD. The specific objectives were: quantification of proteins related to the stem cell phenotype, as well as specific binding receptors of these compounds, verification of apoptotic and genotoxic profile of these substances and also the quantification of the potential of adipogenic and osteogenic differentiation of these cells when exposed. First, ASC... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor