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Análise molecular de papilomavírus canino identificado em cães naturalmente infectados no estado de Sergipe - Brasil / Molecular analysis of canine papillomavirus identified in naturally infected dogs from Sergipe state - BrazilReis, Jordana Dantas Rodrigues 27 June 2017 (has links)
The papillomatosis is an infectious disease caused by papillomaviruses which
belongs to the Papillomaviridae family. In dogs, Canis familiaris papillomavirus
(CPV) species is the causative agent of the disease and it has so far twenty
identified types. These viruses can lead to benign neoplastic lesions of the skin
and mucosal epithelium that are exophytic and endophytic papilloma and
pigmented plaques which may occur progression to carcinoma squamous cell
(SCCs) cancer. The pathogenicity of the virus related to the types, subtypes and
variants can influence deafferents lesions on the animal. Thus, there is a need to
identify and characterize the existing virus to a better understanding of the disease
and adoptions of both preventive measures as treatment. In this study, the general
objective is to analyze the genetic diversity of canine papillomavirus present in
infected dogs in the state of Sergipe - Brazil. We used diagnostic strategies for the
identification of canine papillomavirus; wherein the histopathology was used to the
characterization of the lesion as papilloma and the PCR with electrophoresis for
confirm the viral DNA, then sequencing performed for subsequent genotyping of
samples and bioinformatics tools was used for analysis of the nucleotide and
amino acid sequences of the L1 gene. As a result, eighteen samples of possible
papillomatous lesions were collected and nine samples had the presence of CPV
DNA with oral and cutaneous exophytic lesions confirmed by histopathology. It
was possible observe in one sample the presence of oral SCCs. The Canine
papillomavirus type 1 (CPV1) was identified in nine samples of this study. Eight
samples were CPV1 variants with 100% identity with the already described
variants and one sample was identified as a new CPV1 variant having a difference
of 0.8% when compared with the reference sequence of the CPV1 L1 gene and a
difference of 0.2% with the existing CPV1 variant. The mutations of the variants
and the change in stability of the protein structure were analyzed and it was
observed that the V204A mutation of the new variant of isolate eight is highly
destabilizing with alteration of protein function. This study corroborates the
characterization of CPV1 as the main cause of oral papillomatosis in dogs,
observing the genetic variability of CPV1 with variants of different pathogenic
potentials, with a putative new variant associated with cancer with a mutation that
can destabilize the L1 protein structure of CPV1 altering its function. / A papilomatose é uma doença infecciosa causada pelos papilomavírus
pertencentes a família Papillomaviridae. Em cães, a espécie Canis familiaris
papilomavírus (CPV) é o agente etiológico da doença e possui até o momento
vinte tipos identificados. Estes vírus podem levar a lesões neoplásicas benignas
na pele e epitélio da mucosa, que são os papilomas exofíticos, endofíticos e as
placas pigmentadas, podendo ocorrer a progressão para o câncer carcinoma de
células escamosas (CCEs). A patogenicidade do vírus relacionada aos tipos,
subtipos e variantes pode influenciar diferentes tipos de lesões nos animais. Com
isso, percebe-se que há uma necessidade de identificar e caracterizar os vírus
existentes para um melhor entendimento da doença e adoções de medidas tanto
preventivas quanto de tratamento. Nesse estudo o objetivo geral é analisar a
diversidade genética de papilomavírus canino presentes em cães infectados no
estado de Sergipe - Brasil. Estratégias de diagnóstico foram utilizadas para a
identificação de papilomavírus canino, em que o exame histopatológico foi
utilizado para a caracterização da lesão e o PCR juntamente com a eletroforese
para a confirmação da presença do DNA viral, depois foi realizado o
sequenciamento para subsequente genotipagem das amostras e ferramentas de
bioinformática foram utilizadas para análise das sequências de nucleotídeos e
aminoácidos do gene L1. Como resultado, dezoito amostras de possíveis lesões
papilomatosas foram coletadas, nove amostras tiveram a presença do DNA de
CPV, com lesões exofíticas orais e uma cutânea, confirmadas pelo
histopatológico. Foi possível observar na amostra oito a presença de CCEs oral.
O CPV1 foi identificado em nove amostras deste estudo. Oito amostras eram
variantes de CPV1 com 100% de identidade com uma variante já descrita e uma
amostra foi identificada como uma nova variante de CPV1, possuindo uma
diferença de 0,8% quando comparada com a sequência do gene L1 de referência
de CPV1 e uma diferença de 0,2% com a variante já existente de CPV1. As
mutações das variantes e a alteração na estabilidade da estrutura proteína foram
analisadas e pôde-se observar que a mutação V204A da nova variante do isolado
oito é altamente desestabilizadora com alteração de função da proteína. Esse
estudo corrobora com a caracterização do CPV1 como o principal causador da
papilomatose oral em cães, observando-se a variabilidade genética de CPV1 com
variantes de diferentes potenciais patogênicos, com uma putativa nova variante
associada ao câncer com uma mutação que pode desestabilizar a estrutura
proteica de L1 de CPV1 alterando sua função. / São Cristóvão, SE
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