CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A prospecÃÃo de agentes antibacterianos pode fornecer alternativa terapÃutica para epizootias de etiologia bacteriana que representam risco para o desenvolvimento de atividades aqÃÃcolas. Considerando essa assertiva, o presente estudo teve como objetivo a avaliaÃÃo da bioatividade in vitro de extratos de sementes de Moringa oleifera contra vÃbrios isolados da hemolinfa do camarÃo Litopenaeus vannamei. Como critÃrios de seleÃÃo para os testes de atividade antibacteriana, foram determinados perfis relacionados à resistÃncia a antimicrobianos e à expressÃo de exoenzimas associadas a fatores virulentos. Foram isoladas e identificadas fenotipicamente 100 cepas de Vibrio, verificando-se predominÃncia das espÃcies de V. navarrensis (53%), V. brasiliensis (15%) e V. parahaemolyticus (10%). Todas as cepas testadas (n = 100) foram capazes de expressar pelo menos uma exoenzima. As atividades fosfolipolÃtica e lipolÃtica foram verificadas em 94% e 58% das cepas, respectivamente. Trinta e oito estirpes produziram βâhemÃlise em sangue de ovelha. A habilidade em hidrolisar caseÃna, gelatina e elastina foi observada em 96%, 80% e 35% dos vÃbrios, respectivamente. O perfil fenotÃpico de susceptibilidade a antimicrobianos revelou um elevado Ãndice de resistÃncia (75%). Foram observados perfis de monoresistÃncia (n = 42), resistÃncia cruzada a β-lactÃmicos (n = 20) e multiresistÃncia (n = 13). No que se refere à atividade antibacteriana, os extratos obtidos por extraÃÃo com etanol a frio (MOS-E) e a quente (MOS-ES) mostraram-se bioativos contra 92% e 90% das cepas testadas, respectivamente. A ConcentraÃÃo InibitÃria MÃmima (CIM) de MOS-E e MOS-ES mais eficiente contra o maior percentual de estirpes foi a de 32 Âg mL-1. A triagem bioguiada de compostos bioativos revelou que a fraÃÃo acetato de etila de ambos os extratos foi à Ãnica que apresentou atividade antibacteriana. A partir do fracionamento cromatogrÃfico da fraÃÃo supracitada, isolaram-se as substÃncias vibriocidas niazirina e niazimicina. / The search for antibacterial agents may provide alternative therapy for outbreaks of bacterial etiology that represents a risk to the development of aquaculture activities. Thus, the research aimed to evaluate the in vitro bioactivity of the Moringa oleifera seeds extracts against isolated vibrios from the Litopenaeus vannamei hemolymph. The profiles related to antibiotic resistance and exoenzyme expression associated to virulence factors were determined as criteria for antibacterial activity assays. One hundred strains of Vibrio were isolated and phenotypically identified, with the predominance of V. navarrensis (53%), V. brasiliensis (15%) and V. parahaemolyticus (10%). The expression of at least one exoenzyme was detected in all isolates (n = 100). It was found a percentage of phospholipase and lipase positive strains of 94 and 58%, respectively. Thirty-eight strains produced β-hemolysis on sheep blood. The ability to hydrolyze casein, gelatin and elastin was observed in 96%, 80% and 35% of vibrios, respectively. It was observed a high antibiotic resistance index (75%), with following phenotypic profiles: monoresistance (n = 42), cross-resistance to β-lactams (n = 20) and multiple resistance (n = 13). The antibacterial activity tests indicated bioactivity from the MOS-E and MOS-ES against 92% and 90% of strains tested, respectively. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of MOS and MOS-E-ES able to inhibit the growth of most strains was of 32 Âg mL-1. The screening of bioactive compounds revealed that only a fraction of ethyl acetate from both extracts demonstrated antibacterial effect, which made possible the isolation of the vibriocidal substances niazirine and niazimicine.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O estudo trata da induÃÃo anestÃsica, caracterizaÃÃo do lÃquido seminal, refrigeraÃÃo e congelaÃÃo do sÃmen de tilÃpia-do-Nilo, Oreochromis niloticus. No primeiro capÃtulo foram testados os anestÃsicos naturais mentol e eugenol em espÃcimes adultos objetivando determinar a concentraÃÃo ideal para manejo de tilÃpia-do-Nilo. No segundo capÃtulo, o lÃquido seminal da tilÃpia-do-Nilo foi caracterizado de acordo com os seguintes parÃmetros: volume coletado, que revelou a viabilidade de coleta em volumes suficientes, sem a necessidade de sacrificar o peixe; concentraÃÃo espermÃtica, que mostrou relevante variaÃÃo entre espÃcimes; pH e osmolaridade, que ratificam as informaÃÃes presentes na literatura; tempo de motilidade, que comprovou ser o espermatozoide de tilÃpia diferenciado quanto à energia acumulada quando comparado a outras espÃcies de Ãgua doce; e morfometria da cabeÃa do espermatozoide por meio das seguintes medidas: comprimento, largura, perÃmetro e Ãrea. TambÃm foram registrados quatro parÃmetros derivados do formato da cabeÃa: elipticidade, rugosidade, elongaÃÃo e regularidade. No terceiro capÃtulo foi avaliada a viabilidade do sÃmen de tilÃpia-do-Nilo submetido a diferentes diluentes e refrigerado a 4ÂC. A avaliaÃÃo foi realizada por meio da taxa de motilidade espermÃtica determinada pelo sistema CASA (Computer Assisted Sperm Analysis). Neste, o ACP-104, diluente à base de Ãgua de coco em pÃ, ofereceu melhor taxa de motilidade dos espermatozoides por atà 72 horas de estocagem. Esta resposta mostrou que o ACP-104 à um diluente promissor para o sÃmen da referida espÃcie. No quarto capÃtulo foi avaliado o efeito de diferentes criodiluentes sobre do sÃmen de tilÃpia-do-Nilo pÃs-descongelaÃÃo, utilizando o software (Sperm Class Analyser, SCA). Os resultados de motilidade espermÃtica e de parÃmetros de velocidade do espermatozoide revelaram que o ACP-104 combinado ao dimetilsulfÃxido apresenta-se como um criodiluente promissor para a criopreservaÃÃo do sÃmen de tilÃpia-do-Nilo em longo prazo. / The present study deals with anesthetic induction, characterization of sperm fluid, cooling and freezing of sperm of the Nile tilapia Oreochromis niloticus. In the first chapter the natural anesthetics menthol and eugenol were tested in adult specimens aiming to determine the ideal concentration for handling the Nile tilapia. In the second chapter the sperm fluid of the Nile tilapia was characterized according to the following parameters: collected volume, which showed the feasibility of collect in sufficient volume without the need of sacrificing the fish; sperm concentration, which showed significant variation between specimens; pH and osmolarity, which confirm the information of the literature; sperm motility time, which proved that the spermatozoa of tilapia are differentiated concerning accumulated energy when compared to other freshwater species; and sperm head morphometry, characterized by size (length, width, perimeter and area) and head shape (ellipticity, rugosity, elongation and regularity). In the third chapter we evaluated the feasibility of preservation of tilapia sperm using different extenders and cooled at 4ÂC. The sperm motility rate was evaluated with the aid of the Computer-assisted Sperm Analyzer (CASA) System. In this, the ACP-104, media based on powdered coconut water, showed best sperm motility rate for up to 72 hours after storage. In the fourth chapter was evaluated the effects of different cryoprotectants on the post-thaw Nile tilapia sperm, using the software Sperm Class Analyzer (SCA). The results of the sperm motility rate and sperm velocity parameters revealed that ACP-104 in combination with dimethylsulfoxide is a promising cryodiluent for Nile tilapia sperm in long-term conservation.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Lectins are ubiquitous proteins or glycoproteins with at least one non-catalytic domain binding reversibly to a specific mono- or oligosaccharide. Lectins are ubiquitously distributed in plants, animals and microorganisms. Marine algal lectins have been isolated and characterized from only a few species and at a much slower pace since the first report, more than 40 years ago, of the haemagglutinating activity in these organisms. This paucity is mainly due to difficulties in obtaining sufficient material for study. However, among characterized lectins, proteins observed with different biochemical characteristics. Lectins from genus Codium have been isolated and characterized in some detail. In general, have specificity for GalNAc and/or GlcNAc and glycoproteins mucin, fetuin and thyroglobulin, have no requirement for metal ions and were composed by low molecular subunits and may present oligomerization. The present work deals with the purification and characterization of two lectins (CiL-1 and CiL-2) from green marine alga Codium isthmocladum, compare their characteristics and evaluate the ability in agglutinate bacterial cells and toxicity against Artemia. The lectins was purified by a combination of ammonium sulphate precipitation and ion-exchange chromatography on a DEAE-Sephacel column. The main differences observed were the metal dependence, oligomerization state and thermostability. The amino acid sequence of CiL-2 showed no similarity with CiL-1 or other lectins from protein data bank. Only CiL-1 was able to agglutinate bacterial cells whereas CiL-2 showed toxicity against Artemia after 48 hours. In the evaluation of lectin interaction, the data suggest that the CiL-2 recognizes the glycoproteins present in the microcrustacean digest tract. The work has shown that the marine green alga has at least two different lectins with differences in amino acid sequences, biochemical characteristics and biological response. / Lectinas sÃo (glico) proteÃnas com pelo menos um domÃnio nÃo catalÃtico que podem se ligar especÃfica e reversivelmente a carboidratos aglutinando cÃlulas e/ou glicoconjugados. SÃo ubÃquas na natureza, presentes em todos os organismos. Comparando com lectinas de plantas terrestres, poucas lectinas de algas marinhas tÃm sido isoladas e caracterizadas, principalmente devido à dificuldade de obtenÃÃo de material suficiente para estudo. Entretanto, entre as lectinas de algas caracterizadas, observam-se proteÃnas com caracterÃsticas bioquÃmicas diferentes. VÃrias lectinas do gÃnero Codium jà foram isoladas e caracterizadas em algum detalhe. Em geral, possuem especificidade para GalNAc e/ou GlcNAc e glicoproteÃnas, mucina, fetuÃna e tiroglobulina, nÃo dependem de cÃtions divalentes para exibir sua atividade e sÃo compostas de subunidades de baixo peso molecular podendo apresentar formas oligomÃricas. Neste trabalho objetivou-se isolar e caracterizar bioquimicamente duas lectinas isoladas da alga marinha verde Codium isthmocladum (CiL-1 e CiL-2), comparar suas caracterÃsticas e avaliar a capacidade das duas lectinas de aglutinar cÃlulas bacterianas e a toxicidade contra Artemia sp. As lectinas foram purificadas atravÃs da combinaÃÃo de precipitaÃÃo com sulfato de amÃnio e cromatografia de troca iÃnica. Entre as principais diferenÃas bioquÃmicas observadas foram: dependÃncia de metais, oligomerizaÃÃo e estabilidade tÃrmica. No entanto, ambas foram inibidas por Mucina e nÃo por carboidratos simples. Quando comparada a sequÃncia de aminoÃcidos de CiL-2, nÃo houve similaridade com a sequÃncia parcial da CiL-1 ou de qualquer outra sequÃncia de lectinas de algas disponÃveis nos bancos de dados. Somente CiL-1 foi capaz de aglutinar cÃlulas bacterianas enquanto que a CiL-2 apresentou toxicidade contra Artemia sp. apÃs 48 horas de contato. Na avaliaÃÃo da interaÃÃo da lectina, os dados sugerem que a proteÃna reconhece as glicoproteÃnas presentes no trato digestÃrio do microcrustÃceo. O trabalho evidenciou que alga marinha verde C. isthmocladum Vickers possui pelo menos duas lectinas com sequÃncia de aminoÃcidos distinta, mostrando respostas biolÃgicas diferentes, onde a CiL-1 teve capacidade de aglutinar cÃlulas bacterianas e a foi CiL-2 tÃxica contra Artemia sp.

Os MÃtodos da DiluiÃÃo de Uso (MDU) e da SuspensÃo da AOAC sÃo oficialmente aceitos no Brasil na avaliaÃÃo da eficiÃncia antimicrobiana de desinfetantes, para fim de registro comercial. O estudo teve como objetivo determinar a eficiÃncia antimicrobiana das soluÃÃes de hipoclorito de sÃdio nas concentraÃÃes 5, 100 e 200mg/L e de cloreto de benzalcÃnio a 77 e 10.000mg/L e avaliar os processos de higienizaÃÃo das mÃos e botas dos manipuladores e das caudas de lagosta, como matÃria-prima, em um Entreposto de Pescado na cidade de Fortaleza-CE. Os testes aplicados aos desinfetantes foram MDU (INCQS/POP No65.3210.007) que utiliza as cepas padrÃo Staphylococcus aureus, Salmonella Choleraesuis e Escherichia coli e SuspensÃo (AOAC 960.09) que testa os desinfetantes contra S. aureus e E.coli. Foi verificada a eficÃcia dos procedimentos de higienizaÃÃo das mÃos e botas dos manipuladores e das caudas de lagostas atravÃs da reduÃÃo decimal (RD) das bactÃrias heterotrÃficas cultivÃveis (BHC), de amostras colhidas durante o processamento. Procedeu-se a contagem bacteriana atravÃs do mÃtodo de Contagem PadrÃo em Placas (CPP) pelas tÃcnicas pour plate (mÃos e botas) e spreadplate (caudas), utilizando-se Ãgar Extrato Glicose Triptona (TGEA), e os resultados foram expressos em UFC/mÃo, UFC/cm2 e UFC/cauda. As soluÃÃes de hipoclorito de sÃdio foram reprovadas pelo MDU nas concentraÃÃes 5, 100 e 200 mg/L e aprovadas (RD > 5 ciclos logarÃtmicos) em pelo menos uma repetiÃÃo para o teste da SuspensÃo. As soluÃÃes do cloreto de benzalcÃnio foram aprovadas nos dois testes apresentando melhor eficiÃncia microbiolÃgica para o teste de suspensÃo (RD >5 ciclos logarÃtmicos) na concentraÃÃo 10.000 mg/L. As RD das mÃos e das botas dos manipuladores e das caudas de lagosta foram respectivamente < 0,8,< 0,6 e < 0,6 ciclo logarÃtmico. O MDU e o MÃtodo da SuspensÃo mostraram concordÃncia parcial na aprovaÃÃo antimicrobiana das soluÃÃes tendo esse Ãltimo maior nÃmero de aprovaÃÃes. A carga microbiana inicial definiu a boa eficiÃncia do processo de higienizaÃÃo para a matÃria-prima e mÃos e a ineficiÃncia para as botas no Entreposto de Pescado. As RD encontradas para as cepas padrÃo (Staphylococcus aureus e Escherichia coli), analisadas pelo mÃtodo da SuspensÃo testando hipoclorito de sÃdio e cloreto de benzalcÃnio foram maiores do que aquelas RD encontradas para BHC apÃs o processo de higienizaÃÃo das mÃos, botas e caudas de lagosta. / The AOAC use-dilution method (UDM) and suspension method are officially accepted in Brazil for the evaluation of the antibacterial efficiency of disinfectants when applying for product registration. The purpose of this study was to determine the antibacterial efficiency of solutions of sodium hypochlorite at 5, 100 and 200mg/L and benzalkonium chloride at 77 and 10,000mg/L, and to evaluate the procedures employed to disinfect raw material (lobster tails) and the hands and boots of handlers at a seafood processing facility in Fortaleza city. The disinfectants were tested with UDM (INCQS/POP No65.3210.007) using standard strains of Staphylococcus aureus, Salmonella Choleraesuis and Escherichia coli, and with the suspension method (AOAC 960.09) using S. aureus and E. coli. The hygienization procedures for hands, boots and raw material were evaluated by decimal reduction (DR) of aerobic mesophiles in samples collected during processing. The bacteria were quantified by standard plate count (pour platefor hands and boots; spread plate for tails) in Tryptone Glucose Extract agar, and results were expressed as CFU/hand, CFU/cm2 and CFU/tail. The sodium hypochlorite solutions failed the UDM test at all concentrations, but were approved (DR >5) in the suspension test for at least one repetition. The benzalkonium chloride solutions were approved with both methods, with the best performance observed for the suspension method (DR >5log) at 10.000 mg/L. DR values were <0.8 (hands), <0.6 (boots) and <0.6 (tails). The two methods (UDM and Suspension) were in partial agreement regarding the approval of solutions, but the latter method yielded a greater number of approvals. Due to differences in the initial bacterial load, the hygienization procedures were efficient for hands and lobster tails but inefficient for boots. DR values were significantly higher for standard strains (S. aureus and E. coli) tested with the suspension method using sodium hypochlorite and benzalkonium chloride than for aerobic mesophiles following the hygienization of hands, boots and lobster tails sampled at the seafood processing facility.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O pescado à um alimento susceptÃvel à deterioraÃÃo devido Ãs suas caracterÃsticas intrÃnsecas, sendo necessÃrio o monitoramento bacteriano no armazenamento pÃs-morte. Dessa forma, objetivou-se quantificar bactÃrias, psicrotrÃficas, psicrÃfilas e mesÃfilas em tilÃpias do Nilo (Oreochromis niloticus) durante 21 dias de estocagem sob aÃÃo do gelo. Foram realizados quatro experimentos, separados em dois grupos, nÃo eviscerados e eviscerados, cada um com oito amostras perfazendo um total de 32 amostras. A cada trÃs dias era retirado um exemplar de tilÃpia para as anÃlises do experimento: sensorialmente, conforme a avaliaÃÃo do MÃtodo do Ãndice de Qualidade (MIQ), adaptado à tilÃpia do Nilo e microbiologicamente. Na anÃlise sensorial do peixe cru foram avaliados os atributos: aspecto geral, olhos, brÃnquias, textura e musculatura dos peixes, segundo os somatÃrios dos caracteres sensoriais (S.C.S). De cada exemplar foram quantificados os grupos bacterianos: psicrotrÃficos (7ÂC), psicrÃfilos (23ÂC), e mesÃfilos (35ÂC), na superfÃcie e no mÃsculo, pelo mÃtodo de Contagem PadrÃo em Placas (CPP). NÃo houve diferenÃa estatÃstica entre os trÃs grupos bacterianos analisados à um nÃvel de significÃncia de 5% dentro dos mesmos tratamentos e entre os grupos. O tempo de estocagem apresentou alta correlaÃÃo com a contagem dos grupos bacterianos e o aumento do MIQ, tanto para os peixes eviscerados, quanto para os nÃo eviscerados. Foi considerado que o processo de evisceraÃÃo no local de venda dos peixes nÃo aumentou sua vida Ãtil. Sugere-se, portanto, uma maior atenÃÃo no processo de evisceraÃÃo em peixarias que comercializam peixes vivos, pois esse processo nÃo foi realizado de forma eficaz para seguranÃa e valorizaÃÃo do produto. / Fish is a food susceptible to deterioration due their intrinsic characteristics, requiring bacterial monitoring in postmortem storage. Thus, the objective was to quantify mesophilic, psychrotrophic, psychrophilic bacteria in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) during to 21 days of storage under the action of ice at temperature refrigeration. Four experiments were conducted, separated to two groups, gutted and ungutted, with eight samples totaling 32 samples. Every three days was taken a exemplar of tilapia for analyzes of the trial: sensory evaluation according to the Quality Index Method (QIM) adapted to the Nile tilapia and heterotrophic bacterial count of cultivable. In sensory analysis of raw fish attributes were assessed: general appearance, eyes, gills, muscles and texture of the fish, according to the Sensory Characters Sum (S.C.S). To each specimen were quantified bacterial groups: psychrophilic (23 ÂC), psychrotrophic (7 ÂC) and mesophilic (35 ÂC), the surface and the muscle, using the method of standard plate count (SPC). There was no statistical difference between the three bacterial groups analyzed the significance level of 5% within the same treatments and between groups. The storage time was highly correlated with the counting of bacterial groups and increased QIM for both eviscerated fish, and for those not drawn. It was considered that the process of evisceration on the premises of the fish did not increase its useful life. It is suggested, therefore, greater attention in the process of gutting fish markets that sell live fish, because this process was not carried out effectively to security and recovery product.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / The marketing of fish has shown substantial increase; however, their place of origin and ways of handling and storage may pose health risk. The microorganisms in the food chain and in capture environments cause concern over the risk of disease transmission and the multiple resistance to several drugs. This study aimed at characterizing the antimicrobial resistance of 191 strains of Escherichia coli isolated from 20 fish samples, ten saltwater samples: (5) mackerel (S. cavalla) and (5) snapper (L. purpureus) and ten freshwater samples: (5) curimatà (P. cearenses) and (5) tilapia (O. niloticus), sold in street markets of the city of Fortaleza (Cearà State), Brazil. The strains were isolated, identified and then subjected to susceptibility testing (20 antibiotics) in order to provide the resistance profile. Moreover, it was also performed: Multiple Resistance Index (MRI), the Antimicrobial Resistance Index (ARI), Minimum Inhibitory Concentration (MIC), plasmid "cure" and analysis of plasmid profile through DNA extraction. Strains isolated from marine and freshwater fish species showed distinct multidrug resistance profiles, but with broad resistance to penicillins and tetracyclines. There was high frequency of saltwater isolates resistant to chloramphenicol. Overall, low resistance to betalactamase inhibitors (ampicillin/sulbactam, and piperacillin/tazobactam) and aminoglycosides was observed, excepting streptomycin. The MRI has shown that about 50% of the isolates were resistant to five of the twenty tested antimicrobials, highlighting the strains from mackerel (55.5%). As for MIC, the percentage of isolates resistant to NAL, CIP, MFX, SUT and AMO stood out in saltwater fish strains. For bacteria from freshwater, greater resistance to high concentrations of antimicrobials were most significant for AMO, SUL and NAL. Chromosomal profiles in freshwater isolates were mostly composed of amoxicillin, ampicillin, streptomycin, and sulfametazol/trimethoprim. For saltwater fish, there was predominance of quinolones. Analysis of the plasmid DNA showed the occurrence of a heterogeneous population of small plasmids distributed in various profiles. The greater diversity and lower molecular weight were observed in strains of marine fish samples. Thus, it is emphasized that the circulation of pathogenic E. coli with antimicrobial resistance characteristics poses a risk to the aquatic ecosystem and the marketing environment, there being need for continued vigilance to contaminant bacterial to fish so that the safety of these foods is guaranteed. / A comercializaÃÃo de pescado tem indicado aumento substancial, contudo, seu local de origem e formas de manipulaÃÃo e armazenamento, podem representar risco sanitÃrio. Os micro-organismos presentes na cadeia produtiva de alimentos e nos ambientes de captura ocasionam preocupaÃÃo pelo risco de transmissÃo de doenÃas e pela mÃltipla resistÃncia apresentada a diversos fÃrmacos. Este trabalho objetivou caracterizar a resistÃncia antimicrobiana de 191 cepas de Escherichia coli isoladas de 20 amostras de pescado, sendo dez amostras de pescado de Ãgua salgada: (5) cavala (S. cavalla) e (5) pargo (L. purpureus) e dez amostras de Ãgua doce: (5) curimatà (P. cearenses) e (5) tilÃpia (O.niloticus), comercializadas em feiras livres da cidade de Fortaleza, CE. As cepas foram isoladas, identificadas e posteriormente submetidas a testes de susceptibilidade (20 antimicrobianos) a fim de conferir o perfil de resistÃncia. AlÃm disso, foram realizados: Ãndice de MÃltipla ResistÃncia (IMR), Ãndice de ResistÃncia a Antimicrobianos (IRA), ConcentraÃÃo InibitÃria MÃnina (CIM), âcuraâ plasmidial e anÃlise de perfil plasmidial, atravÃs de extraÃÃo de DNA. As cepas isoladas das espÃcies de pescado marinho e de Ãgua doce apresentaram perfis de multirresistÃncia distintos, porÃm com ampla resistÃncia Ãs penicilinas e Ãs tetraciclinas. Houve elevada frequÃncia de isolados de pescado marinho resistentes ao cloranfenicol. Foi observada, de forma geral, baixa resistÃncia para inibidores de betalactamases (ampicilina/ sulbactam e piperacilina/ tazobactam) e aminoglicosÃdeos, excetuando, estreptomicina. O IMR demonstrou que cerca de 50% dos isolados foram resistentes a cinco dos vinte antimicrobianos testados, destacando as cepas provenientes de cavala (55,5%). Nos testes de CIM observou-se que, cepas isoladas de pescados de Ãgua salgada apresentaram maiores percentuais de isolados resistentes a NAL, CIP, MFX, SUT e AMO. Maiores resistÃncias a elevadas concentraÃÃes de antimicrobianos, quando testadas bactÃrias oriundas de Ãgua doce, foram observadas para AMO, SUL e NAL. Os perfis cromossomiais em isolados de Ãgua doce foram na maioria compostos por amoxicilina, ampicilina, estreptomicina e sulfametazol &#8725; trimetropim. Para o pescado de Ãgua salgada, foi verificado a predominÃncia de quinolonas. A anÃlise do DNA plasmidial mostrou a ocorrÃncia de uma populaÃÃo heterogÃnea de pequenos plasmÃdios distribuÃdos em vÃrios perfis. A maior diversidade e menor peso molecular foram observados em cepas de amostras de pescado de origem marinha. Dessa forma, destaca-se que a circulaÃÃo de E. coli patogÃnicas com caracterÃsticas de resistÃncia antimicrobiana representa um risco ao ecossistema aquÃtico e ao ambiente de comercializaÃÃo, havendo necessidade de vigilÃncia contÃnua a bactÃrias contaminantes do pescado, para que a seguranÃa desses alimentos seja garantida.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Esta tese aborda o ordenamento da pesca da lagosta do gÃnero Panulirus, o principal produto de exportaÃÃo da pesca do Brasil, desde meados da dÃcada de 1950, propondo um conjunto de medidas inovadoras para implantaÃÃo a partir de 2015. Està dividida em trÃs CapÃtulos. O CapÃtulo 1 trata do Ordenamento da pesca da lagosta no Brasil, com o histÃrico das medidas de ordenamento, base cientÃfica e uma discussÃo dos sucessos, frustraÃÃes e os desafios para uma pescaria sustentÃvel de lagostas no nosso paÃs. O CapÃtulo 2 apresenta uma anÃlise comparativa do ordenamento da pesca de lagosta no Oceano AtlÃntico Centro-Ocidental. Desenvol uma anÃlise comparativa das medidas de ordenamento da pesca de lagosta adotadas no Brasil e aquelas existentes nos paÃses dessa regiÃo, seus Ãxitos e os insucessos na busca de pescarias responsÃveis, com sustentabilidade ambiental, social e econÃmica. Discute o ordenamento da pesca de lagosta, do Plano de GestÃo da Pesca de Lagosta no Golfo do MÃxico e no Litoral Sul dos Estados Unidos; o ordenamento da pesca de lagosta nos paÃses que integram a oganizaÃÃo da Pesca e Aquicultura da America Central â OSPESCA; o ordenamento da pesca de lagosta em Cuba e nos 15 paÃses da Comunidade do Caribe â CARICOM; o ordenamento da pesca de lagosta no MÃxico, ColÃmbia e Venezuela. O CapÃtulo 3 apresenta as propostas inovadoras como a implementaÃÃo do programa de tolerÃncia zero; de quotas individuais transferÃveis; do desembarque compulsÃrio de lagosta viva e do tamanho mÃximo de desembarque, alÃm do retorno da proibiÃÃo de desembarque de lagostas ovadas, como estratÃgia de ordenamento da pesca; alÃm de propor a manutenÃÃo das medidas de defeso; tamanho mÃnimo de desembarque; restriÃÃo Ãs artes de pesca predatÃrias; acesso limitado; rastreamento remoto de embarcaÃÃes de pesca; proteÃÃo dos criadouros naturais; documento de origem da lagosta. Finalmente sÃo relatadas as conclusÃes. / This thesis addresses the spiny lobster (genus Panulirus) fisheries management, the main export fishery product in Brazil, since the mid-1950, proposing at the end a set of innovative measures for implementation from 2015. It is divided into three chapters. Chapter 1 deals with the history of the spiny lobster fisheries management in Brazil, itâs scientific basis and a discussion of the successes, frustrations and challenges for sustainable fishing of lobsters in this country. Chapter 2 presents a comparative analysis of the spiny lobster fishery management in Western Central-Atlantic Area. Develop a comparative analysis of measures for the lobster fishing adopted in Brazil and those existing in the countries of this region, its successes and failures in the search for responsible fisheries, concerning the environmental, social and economic sustainability. Discusses the spiny lobster fisheries management within the Fisheries Management Plan for Lobster in the Gulf of Mexico and the South Coast of the United States, the management of lobster fishing in the countries of the Organization of Fisheries and Aquaculture in Central America â OSPESCA; the lobster fishery management in Cuba and the in the 15 countries of the Caribbean Community â CARICOM, the spiny lobster fisheries management in Mexico, Colombia and Venezuela. Chapter 3 presents innovative proposals such as the implementation of the Zero Tolerance Program, Individual Transferable Quotas, compulsory landing of live lobster and a maximum landing size, plus the return of the ban on lobsters ovate landings, as a strategy planning fishing, besides proposing the continuation of measures of closure, minimum landing size, restriction on predatory fishing gear; limited access; remote tracking of fishing vessels; protection of natural breeding areas and the Lobster Origin Document. Finally the conclusions are reported.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A prospecÃÃo de agentes antibacterianos pode fornecer alternativa terapÃutica para epizootias de etiologia bacteriana que representam risco para o desenvolvimento de atividades aqÃÃcolas. Considerando essa assertiva, o presente estudo teve como objetivo a avaliaÃÃo da bioatividade in vitro de extratos de sementes de Moringa oleifera contra vÃbrios isolados da hemolinfa do camarÃo Litopenaeus vannamei. Como critÃrios de seleÃÃo para os testes de atividade antibacteriana, foram determinados perfis relacionados à resistÃncia a antimicrobianos e à expressÃo de exoenzimas associadas a fatores virulentos. Foram isoladas e identificadas fenotipicamente 100 cepas de Vibrio, verificando-se predominÃncia das espÃcies de V. navarrensis (53%), V. brasiliensis (15%) e V. parahaemolyticus (10%). Todas as cepas testadas (n = 100) foram capazes de expressar pelo menos uma exoenzima. As atividades fosfolipolÃtica e lipolÃtica foram verificadas em 94% e 58% das cepas, respectivamente. Trinta e oito estirpes produziram &#946;âhemÃlise em sangue de ovelha. A habilidade em hidrolisar caseÃna, gelatina e elastina foi observada em 96%, 80% e 35% dos vÃbrios, respectivamente. O perfil fenotÃpico de susceptibilidade a antimicrobianos revelou um elevado Ãndice de resistÃncia (75%). Foram observados perfis de monoresistÃncia (n = 42), resistÃncia cruzada a &#946;-lactÃmicos (n = 20) e multiresistÃncia (n = 13). No que se refere à atividade antibacteriana, os extratos obtidos por extraÃÃo com etanol a frio (MOS-E) e a quente (MOS-ES) mostram-se bioativos contra 92% e 90% das cepas testadas, respectivamente. A ConcentraÃÃo InibitÃria MÃmima (CIM) de MOS-E e MOS-ES mais eficiente contra o maior percentual de estirpes foi a de 32 Âg mL-1. A triagem bioguiada de compostos bioativos revelou que a fraÃÃo acetato de etila de ambos os extratos foi à Ãnica que apresentou atividade antibacteriana. A partir do fracionamento cromatogrÃfico da fraÃÃo supracitada, isolaram se as substÃncias vibriocidas niazirina e niazimicina. / The search for antibacterial agents may provide alternative therapy for outbreaks of bacterial etiology that represents a risk to the development of aquaculture activities. Thus, the research aimed to evaluate the in vitro bioactivity of the Moringa oleifera seeds extracts against isolated vibrios from the Litopenaeus vannamei hemolymph. The profiles related to antibiotic resistance and exoenzyme expression associated to virulence factors were determined as criteria for antibacterial activity assays. One hundred strains of Vibrio were isolated and phenotypically identified, with the predominance of V. navarrensis (53%), V. brasiliensis (15%) and V. parahaemolyticus (10%). The expression of at least one exoenzyme was detected in all isolates (n = 100). It was found a percentage of phospholipase and lipase positive strains of 94 and 58%, respectively. Thirty-eight strains produced &#946;-hemolysis on sheep blood. The ability to hydrolyze casein, gelatin and elastin was observed in 96%, 80% and 35% of vibrios, respectively. It was observed a high antibiotic resistance index (75%), with following phenotypic profiles: monoresistance (n = 42), cross-resistance to &#946;-lactams (n = 20) and multiple resistance (n = 13). The antibacterial activity tests indicated bioactivity from the MOS-E and MOS-ES against 92% and 90% of strains tested, respectively. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of MOS and MOS-E-ES able to inhibit the growth of most strains was of 32 &#956;g mL-1. The screening of bioactive compounds revealed that only a fraction of ethyl acetate from both extracts demonstrated antibacterial effect, which made possible the isolation of the vibriocidal substances niazirine and niazimicine.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Nile tilapia, Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758), is one of the most cultivated species in our country. The fish processing industries generate large amounts of waste. In the tilapia processing waste materials represent more than 60%. Collagen is the main protein of connective tissue and is the most abundant protein in mammals, birds and fish. A commercial use of the collagen is gelatin, obtained by partial hydrolysis of collagen. Edible coatings and films are types of protection that can be applied in a food. The proteins are among the major macromolecules found in edible films. Seafood is very susceptible to deterioration process mainly because there are some specific factors. Any skin as mechanically separated meat residues (CMS) tilapia have been used for the extraction of gelatin, as well the scale was also used for this allocation. Closing a production cycle with the full use of fish and product innovation. The objective of this work is to extract gelatin from the scales of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) and applied as a coating on cold fish fillet to evaluate their performance as the deterioration process. For the extraction of gelatin were performed essentially five steps (demineralization, acid and alkali treatments alternately and extraction in distilled water under heating). The extracted gelatin was characterized as the chemical composition, minerals, water activity (Aw), pH, gel strength, color, extraction yield, differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetric (TGA), infrared spectroscopy (FTIR) and electrophoresis. We were prepared two coating solutions of gelatin (1% and 1.5%) both with 0.2% (v / v) glycerol. The steaks were subjected to spray application of coating solution, placed in plastic bags and stored in refrigerator at temperature 2.6  C  0.8 for 18 days. Physical and chemical analysis (Determination of pH, volatile nitrogenous bases (TVB-N), Determination of reactive substances tiobabitÃrico acid) and microbiological (psychrotrophic bacteria) of fillets coated every three days during the 18 days of storage . The extraction of gelatin from this residue may be a new alternative, since it presents a favorable caracterisiticas gelatin quality, mainly due to good gel strength (461.640 g); low water activity (Aw 0.461); Low moisture and ash content (15.16% and 5.39%, respectively), high protein content (86.86%); next to the white color (L =; 88.711; a = -0.295 b = 2.851) and good thermal properties for uses up to 200  C. The application of gelatin as coating tilapia fillet to a possible inhibition in the deterioration process not proved to be completely effective. This result can probably be attributed to initial quality of the fillet which showed initial bacterial count of 6.0 log CFU / g. / A tilÃpia do Nilo, Oreochromis niloticus (LINNAEUS,1758), à uma das espÃcies mais cultivadas no nosso paÃs. As indÃstrias de beneficiamento de pescado geram grandes quantidades de resÃduos. No beneficiamento de tilÃpias seus resÃduos representam mais de 60%. O colÃgeno à a principal proteÃna do tecido conjuntivo, sendo a proteÃna mais abundante em mamÃferos, aves e peixes. Uma utilizaÃÃo comercial do colÃgeno à a gelatina, obtida pela hidrÃlise parcial do colÃgeno. Revestimentos e filmes comestÃveis sÃo tipos de proteÃÃo que podem ser aplicadas em um alimento. As proteÃnas estÃo entre as principais macromolÃculas encontradas em filmes comestÃveis. O pescado à muito susceptÃvel ao processo de deterioraÃÃo principalmente devido hà alguns fatores prÃprios. Tanto a pele como o resÃduo de carne mecanicamente separada (CMS) de tilÃpia jà foram utilizados para a extraÃÃo de gelatina, assim a escama tambÃm foi utilizada para essa destinaÃÃo. Fechando um ciclo de produÃÃo com o aproveitamento integral do pescado e inovaÃÃo de produtos. O objetivo desse trabalho à extrair gelatina a partir das escamas de tilÃpia do Nilo (Oreochromis niloticus) e aplicar como revestimento em filà de peixe resfriado para avaliar seu desempenho quanto ao processo de deterioraÃÃo. Para a extraÃÃo da gelatina foram realizadas basicamente cinco etapas (desmineralizaÃÃo, tratamentos Ãcidos e alcalinos alternadamente e extraÃÃo em Ãgua destilada sob aquecimento). A gelatina extraÃda foi caracterizada quanto a composiÃÃo centesimal, minerais, atividade de Ãgua (Aw), pH, forÃa de gel, cor, rendimento de extraÃÃo, calorimetria diferencial de varredura (DSC), termogravimÃtrica (TGA), espectroscopia no infravermelho (FTIR) e eletroforese. Foram preparadas duas soluÃÃes de revestimento a base de gelatina (1% e 1,5%), ambas com 0,2% (v/v) de glicerol. Os filÃs foram submetidos à aplicaÃÃo da soluÃÃo de revestimento por aspersÃo, acondicionados em sacos plÃsticos e armazenados em refrigerador a temperatura 2,6ÂC  0,8 durante 18 dias. Foram realizadas anÃlises fÃsico-quÃmicas (DeterminaÃÃo do pH, Bases nitrogenadas volÃteis totais (BVT-N), DeterminaÃÃo de substÃncias reativas ao Ãcido tiobabitÃrico) e microbiolÃgicas (bactÃrias psicrotrÃficas) dos filÃs revestido a cada trÃs dias durante o perÃodo de 18 dias de armazenamento. A extraÃÃo de gelatina a partir desse resÃduo pode ser uma nova alternativa, jà que a mesma apresenta caracterisiticas favorÃveis a uma gelatina de boa qualidade, principalmente devido a boa forÃa de gel (461,640 g); baixa atividade de Ãgua (Aw 0,461); Baixos teores de umidade e cinzas (15,16% e 5,39%, respectivamente), alto teor de proteÃnas (86,86%); cor prÃxima ao branco (L =;88,711; a= -0,295; b= 2,851) e boas propriedades tÃrmicas para usos atà 200ÂC. A aplicaÃÃo da gelatina como revestimento em filà de tilÃpia para uma possÃvel inibiÃÃo no processo de deterioraÃÃo nÃo mostrou-se completamente efetiva. Esse resultado provavelmente pode-se atribuir a qualidade inicial do filà que apresentou contagem bacteriana inicial de 6,0 log UFC/g.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-08-08T12:35:49Z No. of bitstreams: 1 Elias Welengane.pdf: 1031704 bytes, checksum: 71a2e70ae309925654accf702410bc2f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-08T12:35:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Elias Welengane.pdf: 1031704 bytes, checksum: 71a2e70ae309925654accf702410bc2f (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Protein is a high-cost nutrient essential for fish growth and its use as an energy source is undesirable. In this study, crude protein levels (200, 250, 300 and 350 g kg-1) and lipids (110 and 140 g kg-1) were evaluated in diets for tambatinga juveniles (Colossoma macropomum x Piaractus brachypomum) during 63 days. A total of 264 juveniles (15.2 ± 0.2 g) were distributed in aquariums of 160 liters (11 fish/aquarium), in a completely randomized 4x2 factorial design (n = 3). Diets were given three times daily until apparent satiety. The survival rate was 100% at the end of the experiment. The weight gain and the specific growth rate were influenced (p< 0.05) by crude protein and crude lipid and through the interaction between both. Feed intake was influenced by the lipid (p< 0.05) and protein (p< 0.05) concentrations in their feed, although the interaction between them was not significant (p> 0.05). The maximum feed efficiency was observed with 308 g kg-1 crude protein. Protein retention was inversely proportional (P< 0.05) to the dietary protein increment in diets with lower lipid concentration (110 g kg-1). The increase in dietary lipids decreased the demand for CP for maximum protein retention, estimated at 292.7 g kg-1 CP. Lipid concentrations affected (p<0.05) the concentration of moisture, protein, and body lipids. The minimum requirement for the mean final weight of juvenile tambatinga is 253 g kg-1 in diets with 140 g kg-1 of lipids and an energy: protein ratio of 13.8 g kcal ED g-1 CP. / A proteína é um nutriente de elevado custo e essencial para o crescimento dos peixes e o seu uso como fonte de energia é indesejável. No presente estudo avaliaram-se níveis de proteína bruta (200, 250, 300 e 350 g kg-1) e lipídios (110 e 140 g kg-1) em dietas para juvenis de tambatinga (Colossoma macropomum x Piaractus brachypomum) durante 63 dias. Foram distribuídos 264 juvenis (15,2 ± 0,2 g) em aquários de 160 litros (11 peixes/aquário), em um delineamento fatorial inteiramente casualizado 4×2 (n=3). As dietas foram fornecidas três vezes ao dia até a aparente saciedade. A taxa de sobrevivência foi de 100% ao final do experimento. O ganho de peso e a taxa de crescimento específico foram influenciados (p<0,05) pela proteína bruta e lipídios, e pela interação entre ambos. O consumo de ração foi influenciado pela concentração de lipídios (p<0,05) e proteína (p<0,05) das rações, embora a interação entre estes não tenha sido significativa (p>0,05). A máxima eficiência alimentar foi observada com 308 g kg-1 de proteína bruta. A retenção de proteína foi inversamente proporcional (P< 0,05) ao incremento da proteína dietética nas dietas com menor concentração lipídica (110 g kg-1). O aumento do lipídio das rações diminuiu a exigência de PB para a máxima retenção proteica, estimada em 292,7 g kg-1 PB. As concentrações de lipídios afetaram (p<0,05) a concentração de umidade, proteína, lipídio corporal. A exigência de proteína para peso médio final de juvenis de tambatinga é de 253 g kg-1 em dietas com 140 g kg-1 de lipidios e uma relação energia: proteína de 13,8 g kcal ED g-1 PB.