Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química. / Made available in DSpace on 2012-10-23T15:42:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 245245.pdf: 4859754 bytes, checksum: a282253f9f9e6f01dd1621b1fac45aab (MD5) / O estudo das interações entre células e substrato na engenharia de tecidos é de grande importância para a determinação das propriedades biológicas dos implantes. A adesão das células ao substrato influencia na morfologia, proliferação e viabilidade celular. Neste trabalho foram avaliadas a adesão, proliferação e viabilidade de fibroblastos de camundongo, linhagem L929, em suporte biopolimérico. Dois tipos de celulose bacteriana foram utilizados: uma produzida em laboratório e outra comercial (BIONEXT®). Os fibroblastos foram cultivados sobre as membranas em meio DMEM, suplementado com 10% de SBF a 37°C, contendo 5%CO2, e diferentes parâmetros celulares foram escolhidos com o objetivo de monitorar e avaliar o comportamento das células em diferentes tempos de cultivo nas membranas. Foram observadas diferenças morfológicas significativas nas células. Os fibroblastos permaneceram com morfologia arredondada. A celulose bacteriana permitiu a adesão, crescimento, proliferação e viabilidade das células. The study of the dynamic behavior and adhesion between cells and substrates in tissue engineering is of major importance to predict the final biological properties of tissue implants. The adhesion of cells on the substrate influences morphology, proliferation and cellular viability. In this work, adhesion, proliferation and viability of L929 mouse fibroblasts on bacterial cellulose (BC) membranes were evaluated in vitro. Two kinds of cellulose membranes were used; a produced in the laboratory and a commercially available (BIONEXT®). Fibroblasts were cultivated on the membranes in a DMEM medium supplemented with 10% of SBF at 37°C, containing 5% of CO2, and different cellular parameters were chosen to evaluate the cell behavior on the membranes in function of time. Significant morphologic differences were observed in the cells. Although the fibroblasts were well adhered to the membrane, they maintained a round-shape. Bacterial cellulose membranes allowed cell adhesion, growth, proliferation and viability.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:58:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 413812.pdf: 2939251 bytes, checksum: 2d3f8accd8d398c256cab783e281fed7 (MD5) Previous issue date: 2009-03-30 / A utiliza??o de pol?meros sint?ticos na fabrica??o de biomateriais tem despertado a aten??o de muitos pesquisadores, visando a cria??o de implantes que possam auxiliar na regenera??o tecidual, atrav?s do contato de tipos celulares espec?ficos com os pol?meros sint?ticos biodegrad?veis. Os poliuretanos (PU) s?o considerados como um dos biomateriais mais vers?teis atualmente utilizados devido suas ?timas propriedades mec?nicas e sua compatibilidade tecidual. No presente trabalho, foi estudada a s?ntese de poliuretanos para uso como biomateriais utilizando hexametileno diisocianato e poli(e-caprolactona) (PCL). O pol?mero sintetizado foi caracterizado por Cromatografia de Permea??o em Gel (GPC), Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR) e Resson?ncia Magn?tica Nuclear (1H-RMN). A sua citotoxicidade foi avaliada utilizando o ensaio de redu??o do sal de tetraz?lio (MTT), tamb?m foi avaliado a ades?o celular in vitro com fibroblastos de camundongos. Os resultados obtidos no presente estudo confirmaram a citocompatibilidade do pol?mero de PU que n?o interferiu no processo de ades?o e prolifera??o celular.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 413419.pdf: 7548238 bytes, checksum: fb7df37e9d8df24acf3390709418323f (MD5) Previous issue date: 2009-03-31 / A engenharia tecidual tem se mostrado um campo promissor para a reabilita??o de pacientes com traumas ou deformidades faciais que necessitem de ?reas extensas de enxerto ?sseo. Seu princ?pio b?sico envolve a associa??o de um tipo apropriado de c?lula e de um arcabou?o biocompat?vel e bioabsorv?vel que mimetize funcional e estruturalmente determinado tipo de tecido. O Cimento de Fosfato de C?lcio (CFC) aparece como uma alternativa vi?vel de biomaterial a ser utilizado com esta finalidade em virtude de suas caracter?sticas como biocompatibilidade, bioatividade e osteocondutividade. Assim, o objetivo da presente pesquisa foi avaliar a capacidade de suportes tridimensionais macroporosos de CFC, confeccionados com mat?rias-primas brasileiras, de permitir a ades?o, prolifera??o e diferencia??o de c?lulas-tronco mesenquimais derivadas da medula ?ssea humana. Para isso, c?lulas obtidas da crista il?aca de um doador humano adulto foram rotineiramente processadas at? as condi??es experimentais e, a seguir, cultivadas sobre suportes de CFC, macroporosos, que tiveram como corpo gerador de poros, microesferas de parafina, com tamanho entre 100 e 250μm. Para indu??o das c?lulas em linhagem osteog?nica foi acrescentada Prote?na Morfog?nica ?ssea (BMP4) ao meio de cultura. Os per?odos de cultura estabelecidos foram de cinco, dez e 15 dias. Ap?s estes per?odos, o comportamento e a morfologia das c?lulas junto ao biomaterial foram avaliados por meio de Microscopia Eletr?nica de Varredura. Os n?veis de express?o dos genes BGLA e SSP1, que codificam as prote?nas osteocalcina (OC) e osteopontina (OP) respectivamente, bem como a atividade da Fosfatase Alcalina (ALP), outro marcador osteobl?stico importante, foram quantificados pela t?cnica de PCR em Tempo Real (QT-PCR) utilizando o fluor?foro SYBR Green?. O QT-PCR detectou a express?o dos genes BGLA e SSP1 e a atividade da fosfatase alcalina nos per?odos de 10 e 15 dias de cultura, o que nos permitiu constatar que houve prolifera??o celular e diferencia??o destas em c?lulas osteog?nicas. No per?odo de cinco dias, n?o foi observada a express?o de nenhum dos genes investigados. A partir destes resultados conclu?mos que o CFC, macroporoso, com tamanho de poros entre 100 e 250μm, criados por meio da utiliza??o de microesferas de parafina, permite a ades?o, prolifera??o e diferencia??o de c?lulas-tronco mesenquimais em c?lulas osteog?nicas, podendo ser utilizado como arcabou?o para engenharia de tecido ?sseo.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 417772.pdf: 8647052 bytes, checksum: ff0995a277ba9d1db6d58798d55822b1 (MD5) Previous issue date: 2009-08-13 / As c?lulas tronco mesenquimais origin?rias do estroma da medula ?ssea humana possuem grande capacidade de diferencia??o em diversos tecidos, inclusive osso. Culturas de c?lulas tronco mesenquimais in vitro podem sofrer osteoindu??o e produzir c?lulas dos diferentes est?gios da linhagem osteobl?stica. A busca de um arcabou?o adequado quanto a sua capacidade osteocondutora e osteoindutora vem sendo um dos grandes desafios da engenharia tecidual ?ssea. Neste estudo verificou-se o papel de um arcabou?o al?geno fresco congelado e do meio de cultura (DAG) sobre a osteog?nese de c?lulas tronco adultas. Os aspectos morfol?gicos das c?lulas osteog?nicas e do arcabou?o, al?m da express?o das prote?nas osteopontina, osteocalcina e fosfatase alcalina ?sseas foram analisadas em sete, quatorze e vinte e um dias de cultura, sem e com meio osteog?nico (DAG). Os resultados obtidos do s?timo dia at? o vig?simo primeiro dia da pesquisa demonstraram a presen?a de aumento na ades?o, migra??o, crescimento e diferencia??o celular ?ssea. O meio DAG foi um acelerador da osteog?nese, verificado principalmente, nas primeiras duas semanas. O arcabou?o de osso al?geno, in vitro, apresentou a capacidade de suportar a ostegen?se at? a mineraliza??o em todas as culturas. Assim, concluiu-se que as c?lulas derivadas da medula ?ssea humana podem: aderir, migrar, crescer, proliferar e se diferenciar sobre um arcabou?o de osso al?geno fresco congelado. O meio osteog?nico acelera a ades?o, migra??o, crescimento, prolifera??o e diferencia??o das c?lulas tronco adultas em osteoblastos principalmente nos primeiros quatorze dias de cultura. Os osteoblastos foram obtidos a partir de c?lulas de medula ?ssea humana sobre um arcabou?o de osso al?geno fresco congelado, mesmo sem adi??o de fatores osteoindutores. Finalmente, o arcabou?o de osso al?geno fresco congelado ? osteocondutor e osteoindutor quando associado com c?lulas tronco adultas.

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2007 / Bibliografia: p. 56-62 / A engenharia de tecidos, uma nova área da biotecnologia, tem proposto a produção de estruturas vivas funcionais, tais como vasos sanguíneos, valvas cardíacas, entre outras. Várias foram as tentativas de produzir um substituto valvar com capacidade de cres / Tissue engineering, a new area in biotechnology, has proposed the production of functional live structures, such as blood vessel, heart valves, among others. Several attempts have been made to create functional heart valve replacements with the ability to

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 418546.pdf: 3263858 bytes, checksum: 98405799e09a5518c35fdb38c15ba169 (MD5) Previous issue date: 2009-10-14 / A regenera??o e engenharia de tecidos passam pela aplica??o de c?lulas precursoras multipotentes associadas a biomateriais, os quais devem oferecer a elas um ambiente tridimensional an?logo ? matriz extracelular existente nos organismos vivos. Aprimorar um hidrogel de hidroxipropilmetilcelulose (HPMC), agregando a ele duas fun??es caracter?sticas de scaffolds, isto ?, ser mold?vel ou favor?vel ? ades?o celular tridimensional, para o uso em regenera??o e engenharia de tecidos foi a inten??o do presente estudo. O desenvolvimento de uma propriedade mold?vel foi obtido baseado em experi?ncias da literatura que citam a s?ntese de HPMC com silano (HPMC-Si). Esta s?ntese permitiu que o hidrogel assumisse o aspecto de gelatina, atrav?s de autorreticula??o em fun??o do pH, mold?vel de acordo com o defeito a ser corrigido. Paralelamente, seguindo outra tend?ncia no desenvolvimento de scaffolds compostos por hidrog?is, sintetizou-se HPMC com pept?deos R-G-D-S (arginina- glicina- ?cido asp?rtico- serina), atrav?s de rea??o por esterifica??o. Isto conferiu ao hidrogel s?tios de ades?o, visando a sua intera??o com c?lulas dentro de um contexto tridimensional. A partir das s?nteses, avaliou-se a viabilidade de c?lulas aderentes adiposoderivadas humanas (CAADh), cultivadas em 2D na presen?a dos hidrog?is HPMC pura, HPMC-Si e HPMC-RGDS, para se determinar a citotoxicidade dos mesmos (ensaio MTT de acordo com a ISO 10993-5), comparando-os entre si e com grupos-controle negativo (CN) e positivo (CP), em 24, 48 e 72h. Os tr?s hidrog?is presentes nas culturas n?o interferiram na viabilidade das c?lulas (% de atividade MTT), durante os 3 momentos observados, quando comparados com o grupo CP (P< 0,001). Ao mesmo tempo, as c?lulas cultivadas em contato com os g?is demonstraram viabilidade semelhante ao grupo CN. Entretanto, ainda que sejam at?xicos em contato com culturas de c?lulas em monocamada, testes de citotoxicidade em 3D devem confirmar a efetividade dos hidrog?is aprimorados HPMC-Si e HPMC-RGDS como scaffolds aplic?veis em regenera??o e engenharia de tecidos.