O capim annoni-2, Eragrostis plana Nees, é uma espécie vegetal africana conhecida por sua capacidade invasora e, por este motivo, classificada como planta daninha, sendo considerada a mais agressiva e de mais difícil controle nos campos sulinos. Esta espécie ativa mecanismos de inibição de crescimento e germinação de outras espécies vizinhas no fenômeno denominado alelopatia. O estudo fitoquímico de E. plana Nees, justifica-se por se tratar de uma espécie com suposta atividade alelopática, bem como, em função de suas características e do impacto biológico e econômico causado por ela. Com o objetivo de identificar e caracterizar moléculas bioativas e avaliar seus efeitos alelopáticos, foram realizados os experimentos. As folhas de E. plana Nees, foram coletadas no inverno e verão, para análise fitoquímica, e a obtenção do óleo essencial das amostras foi feita por hidrodestilação e, posteriormente, filtrados e refrigerados até a análise cromatográfica gasosa acoplada a espectrometria de massas. Para os metabólitos secundários não voláteis, o material botânico foi submetido a extração exaustiva a frio, com éter de petróleo e acetato de etila. Os extratos foram submetidos à técnica de Infravermelho. Na identificação alelopática foram utilizadas sementes da espécie Ipomoea grandifolia em dois bioensaios comumente realizados em estudos alelopáticos. Os testes, de germinação e alongamento de radícula e hipocótilo foram monitorados diariamente por 7 dias, em condições controladas e realizados em câmaras BOD (Demanda Bioquímica de Oxigênio). Para os dois testes foram empregados 5 doses com diferentes concentrações de cada extrato em volume de 5 mL em cada placa de Petri. O delineamento utilizado foi o inteiramente casualizado com 4 repetições, sendo água destilada e Tween 80 + solvente extratores como testemunhas. Os dados foram submetidos ao teste de homogeneidade de variâncias, pelo teste de Cochran C e à análise de normalidade pelo teste de Shapiro–Wilk, com posterior análise de variância, ANOVA e teste de Tukey a 5% de significância para as variáveis homogêneas. O efeito alelopático apresentado pelas folhas de E. plana Nees, pode estar relacionado com os teores de terpenos observados na análise do óleo essencial, uma vez que os mesmos, possuem propriedades alelopáticas, conforme relatos da literatura. Os extratos brutos expressaram o potencial alelopático da E. plana Nees, interferindo no desenvolvimento da espécie receptora. A utilização destes extratos de forma direta ou como fonte de moléculas químicas, pode colaborar no desenvolvimento de novos bio-herbicidas. / The grass - 2 lovegrass , Eragrostis plana Nees , is an African plant species known for its invasive capacity and , therefore , classified as a weed , and is considered the most aggressive and more difficult to control in the southern fields . This species active mechanisms of inhibition of germination and growth of neighboring species in the phenomenon called allelopathy . The phytochemical study of E. plana Nees , is justified because it is a species with alleged allelopathic activity and, depending on its characteristics and the biological and economic impact caused by it . In order to identify and characterize bioactive molecules and evaluate their allelopathic effects , the experiments were performed . The leaves of E. plana Nees were collected in winter and summer , for phytochemical analysis , and obtain the essential oil sample was taken by hydrodistillation and subsequently filtered and chilled to the gas chromatographic analysis coupled with mass spectrometry . For non- volatile secondary metabolites , the plant material was subjected to exhaustive cold extraction with petroleum ether and ethyl acetate . The extracts were subjected to IR technique . In allelopathic identification seeds of Ipomoea grandifolia species commonly performed in two bioassays in allelopathic studies were used . The tests , germination and radicle and hypocotyl elongation were monitored daily for 7 days under controlled and conducted in chambers BOD ( Biochemical Oxygen Demand ) conditions . For both tests 5 doses with different concentrations of each extract volume of 5 mL in each Petri dish were used. The experimental design was completely randomized with 4 replications, with distilled water and Tween 80 + solvent extractors as witnesses . The data were submitted to variance homogeneity test, the Cochran C and analysis of normality by the Shapiro - Wilk test, with subsequent analysis of variance , ANOVA and Tukey test at 5 % significance level for the homogeneous variables. The allelopathic effect exhibited by the leaves of E. Nees plane can be related to the levels observed in the analysis of terpenes of essential oil , since they possess allelopathic effects , as reported in the literature. The extracts expressed the allelopathic potential of E. plana Nees , interfering with the development of the receiving species . The use of these extracts directly or as a source of chemical molecules , can collaborate in developing new bio - herbicides.

CAPES / Artemisia annua L. (Asteraceae) é uma herbácea anual altamente aromática, nativa da Ásia e aclimatada no Brasil. As folhas são fontes abundantes de artemisinina, uma lactona sesquiterpênica utilizada no preparo de drogas para o tratamento de malária, e também de óleo essencial, utilizado na composição de cosméticos e produtos higiênicos. O presente estudo objetivou estimar a variabilidade genética e as correlações existentes entre caracteres agronômicos, fisiológicos e fitoquímicos em variedades de A. annua, além de caracterizar o teor, o rendimento e a composição de seu óleo essencial. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado e os tratamentos foram as variedades Artemis, 2/39x5x3M e 2/39x1V de A. annua, submetidas a avaliações agronômicas, fisiológicas e fitoquímicas. Para a realização das estimativas de distância genética foram geradas matrizes de dissimilaridade utilizando a distância Euclidiana e os métodos de agrupamento de Tocher e UPGMA. Além disso, avaliou-se a importância relativa dos caracteres para divergência genética pelo método de Singh. A relação existente entre os caracteres estudados foi estimada por meio do coeficiente de correlação de Pearson e o nível de significância analisado pelo teste t. As análises foram realizadas pelo software Genes e os dendrogramas obtidos pelo NTSYS. A separação e quantificação das substâncias presentes no óleo essencial foram realizadas em cromatógrafo gasoso com detector de ionização de chama e a identificação das mesmas foi feita em cromatógrafo a gás acoplado a espectrômetro de massas. Os métodos de Tocher e UPGMA foram concordantes entre si na formação dos grupos e a presença de variabilidade genética dentro das variedades permitiu a identificação de acessos dissimilares e com média elevada para as características estudadas. O número de ramificações, concentração intracelular de CO2 e rendimento de óleo essencial foram os caracteres que mais contribuíram para a dissimilaridade genética de A. annua. Os acessos B24, C5 e C32 foram os mais promissores dentro das variedades e devem ser conservados para futuras hibridações, sendo que as hibridações mais promissoras na obtenção de populações segregantes desejadas são B24 x C5, B24 x C32 e C5 x C32. Encontrou-se correlação positiva e significativa entre os caracteres volume de dossel e rendimento de óleo essencial na variedade 2/39x5x3M, porém, esta correlação não foi encontrada na variedade 2/39x1V. Em ambas as variedades, observouse correlação negativa e significativa entre volume de dossel e teor de artemisinina. A variedade 2/39x1V produziu a maior massa seca de folhas, maior teor e o maior rendimento de óleo essencial. Cânfora, γ-muuroleno e 1,8 cineol foram os constituintes químicos encontrados em maiores teores no óleo essencial das variedades 2/39x5x3M e 2/39x1V de A. annua. / Artemisia annua L. (Asteraceae) is a highly aromatic annual herb, native from Asia and acclimated in Brazil. The leaves are a rich source of artemisinin, a sesquiterpene lactone used in the preparation of drugs for the treatment of malaria, and also of essential oil used in cosmetics and hygienic products. This study aimed to estimate the genetic variability and correlation between agronomic, physiological and phytochemicals traits in varieties of A. annua, also to characterize the content, yield and essential oil composition. The design was completely randomized and treatments were the varieties Artemis, 2/39x5x3M and 2/39x1V of A. annua, submitted to agronomic, physiological and phytochemical evaluations. For the accomplishment of the genetic distance estimates dissimilarity matrices had been generated using the Euclidean distance and Tocher’s and UPGMA’s grouping methods. Moreover, relative importance of the characters for genetic divergence for the method of Singh was evaluated. The relationship between the studied characters was estimated using Pearson’s correlation coefficient and the significance level was analyzed by test t. The analyses were performed in the Genes software and the dendrograms obtained from the NTSYS program. The separation and quantification of substances present in the essential oil were performed by gas chromatography with flame ionization detector and the identification of them were made in a gas chromatography coupled with mass spectrometer. Tocher’s and UPGMA’s methods agreed among themselves in the formation of groups and the presence of genetic variability within varieties allowed the identification of dissimilar individuals with high average for all traits. The number of branches, the intracellular concentration of CO2 and oil yield were the traits that contribuited most to the genetic dissimilarity of A. annua. The accesses B24, C5 and C32 were the most promising within populations and must be conserved for future crossings, and the most promising crosses for obtaining desired segregant populations B24 x C5, B24 x C32 e C5 x C32. Correlation met positive and significant between canopy volume of characters and essential oil yield in the variety 2/39x5x3M, however, this correlation was not found in the variety 2/39x1V. In both varieties, there was a negative and significant correlation between canopy volume and content of artemisinin. The variety 2/39x1V produced the greatest dry mass of leaves and consequently achieved the highest level and the highest yield of essential oil. Camphor, ymuuroleno and 1.8 cineole were the compounds found in higher concentrations in the essential oil of varieties 2/39x5x3M and 2/39x1V of A. annua.

The essential oils from the aerial parts of leaves and flowers of Poiretia latifolia and Poiretia tetraphylla, were analysed by GC, GC/MS and Enantioselective Gas Chromatography (EGC). Forty five constituents were identified from the essential oils. The major constituents of the essential oils of P. latifolia, dominated by monoterpenos, were carvone (50-69%), limonene (13-24%) and trans-dihidrocarvone (8- 18%). The essential oil from leaves of P. tetraphylla was dominated by sesquiterpenes, where nerolidol-E (17-30%), β-cariofilene (5-16%) and germacrene-D (3-9%) were the major constituents. The essential oils from P. latifolia shows activity against brine shrimp assay (LC50 = 67 - 85 μg mL-1), and exhibited antimicrobial activity against some gram-positive and gram-negative bacteria, and some yeasts, while the essential oil from leaves of P. tetraphylla was inactive. / Os óleos essenciais das partes aéreas de folhas e flores de Poiretia latifolia e Poiretia tetraphylla foram analisados por CG, CG/EM e Cromatografia Gasosa Enantiosseletiva (CGE), sendo que foram identificados quarenta e cinco componentes destes óleos voláteis. Os componentes principais dos óleos voláteis de P. latifolia, ricos em monoterpenos, foram a carvona (50-69%), o limoneno (13-24%) e a trans-dihidrocarvona (8-18%). O óleo volátil das folhas de P. tetraphylla teve uma composição dominada por sesquiterpenos, onde o nerolidol-E (17-30%), o β-cariofileno (5-16%) e o germacreno-D (3-9%) foram os componentes principais. Os óleos voláteis de P. latifolia mostraram uma atividade frente a Artemia salina bastante significativa (LC50 = 67 - 85 μg mL-1), exibindo também atividade antimicrobiana contra algumas bactérias gram-positivas e gram-negativas, e alguns fungos, enquanto o óleo volátil de folhas de P. tetraphylla foi inativos para estes ensaios.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-01-04Bitstream added on 2014-06-13T18:35:01Z : No. of bitstreams: 1 souza_rrs_me_botfca.pdf: 4134398 bytes, checksum: 35160af55248a162df54256d389a6408 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Na natureza, a maioria das plantas é resistente aos diferentes patógenos, e essa resistência pode estar relacionada à existência de substâncias tóxicas aos microrganismos. As reações bioquímicas, que ocorrem nas células do hospedeiro, produzem substâncias que se mostram tóxicas ao patógeno ou criam condições adversas para o seu crescimento no interior da planta, contribuindo significativamente para a resistência. Além dos fatores bioquímicos existem mecanismos estruturais de defesa que atuam conferindo resistência ao hospedeiro à infecção por patógenos. O presente trabalho procurou quantificar os caracteres anatômicos foliares, em três estágios (E1, E3 e E5) de desenvolvimento; analisar a patogênese de Puccinia psidii pela micromorfologia da folha e caracterizar a composição dos óleos essenciais de clones de eucalipto, a fim de relacionar esses fatores com a resistência à ferrugem, causada pelo fungo Puccinia psidii. Para o estudo anatômico e dos óleos essenciais, foram selecionados clones com diferentes graus de resistência, sendo o clone A resistente, o clone B suscetível e o clone C altamente suscetível. Para a microscopia eletrônica de varredura foram selecionados os clones A e C. Através da anatomia quantitativa da região internervural da folha, o clone A apresentou diferenças estruturais que podem estar ligadas à resistência desse material, como: maior espessura das cutículas abaxial e adaxial, maior espessura do parênquima paliçádico adaxial, maior % de parênquima paliçádico, maior número e área de cavidades oleíferas, menor espessura da epiderme abaxial e menor espessura e % de parênquima lacunoso. Estes parâmetros podem dificultar a penetração do patógeno e a sua colonização nos tecidos do hospedeiro. Além disso, o estudo anatômico... / resistance could be related to the existence of substances that are toxic to microorganisms. The biochemical reactions that take place in cells of the host produce substances that are toxic to the pathogen or create adverse conditions for their growth inside the plant, significantly contributing toward resistance. In addition to biochemical factors, there are structural defense mechanisms that act by conferring resistance to the host against infection by pathogens. This work's objective was to quantify leaf anatomical characters at three developmental stages (E1, E3, and E5); analyze Puccinia psidii pathogenesis via leaf micromorphology; and characterize the essential oils composition of eucalyptus clones, in order to establish a relationship between essential oils study, clones with different degrees of resistance were selected as follows: clone A was considered resistant, clone B susceptible, and clone C highly susceptible. Clones A and C were selected for scanning electron microscopy. By quantitative anatomy of the leaf interveinal region, clone A exhibited structural differences that could be linked to resistance in this material, such as: greater thickness of the abaxial and adaxial cuticles, greater thickness of the adaxial palisade parenchyma, greater palisade parenchyma percentage, higher number and area of oleiferous receptacles, smaller thickness of the abaxial epidermis, and smaller thickness and percentage of spongy parenchyma. These parameters can make it difficult for the pathogen to penetrate and colonize host tissues. In addition, the anatomical study allowed the discrimination of the first leaf stage in the highly susceptible clone in relation to the others, indicating a relationship between these characters and rust, since the disease occurs preferably on young leaves and organs at...(Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4925052 bytes, checksum: 9613713ae92eb5982fc11682f850883a (MD5) Previous issue date: 2013-01-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Fusarium species have emerged as one of the more clinically important groups of filamentous fungi, causing localized and invasive infections with high morbidity and mortality in immunocompromised patients. Due to increasing clinical relevance of Fusarium and because the antimicrobial properties of essential oils have been known for many centuries this study aimed to evaluate the effectiveness of essential oils in inhibiting the growth of Fusarium solani and Fusarium oxysporum. In this study, the following methods have been used: microbiological screening; determination of minimum inhibitory concentration (MIC) and minimal fungicidal concentration (MFC); kinetics of microbial death; inhibition of coinidia germination and evaluation of morphological changes. The analysis of the oil chemical composition was performed by gas chromatography-mass scpectrometry (GC-MS). Among seven essential oils tested, Ocimum gratissimum Blume and Origanum vulgare L. essential oils exhibited potent antifungal activity, noted by the large growth inhibition zones with the average diameter of 29 and 42mm, respectively. The phytochemical analysis of O. vulgare showed that the main constituents of the essential oil are carvacrol (67,97 %), pcymene (11,67 %), -terpinene (7,92 %), thymol (7,84 %) and linalool (3,44 %). The essential oil from O. vulgare had a significant inhibitory effect on all assayed fungi. The values of MIC were 128 and 256 μg/mL, while MFC were in the range of 256 to values over 1.024 μg/mL, for the essential oil of O. vulgare. The essential oil from O. vulgare at 128, 256, 512 and 1.024 μg/mL strongly prevented mycelial growth. In these same concentrations, the oil was effective in inhibited the conidia germination of both species. Determination of the essential oil s effect over Fusarium strains morphogenesis demonstrated the essential oil was able to cause decreased conidiation, leakage of cytoplasm (empty hyphae) and distorted development hyphae. Given this, it is concluded that the essential oil from O. vulgare showed a strong inhibitory activity against Fusarium species and can be regarded as a potential product with antifungal properties, especially for the treatment of mycoses caused by Fusarium spp. / As espécies de Fusarium têm emergido como um dos grupos clinicamente mais importantes de fungos filamentosos, causando infecções localizadas e invasivas com alta morbidade e mortalidade em pacientes imunocomprometidos. Devido à crescente relevância clínica dos fungos do gênero Fusarium e porque as propriedades antimicrobianas de óleos essenciais são conhecidas há muitos séculos, este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia dos óleos essenciais na inibição do crescimento de Fusarium solani e Fusarium oxysporum. Neste estudo, os seguintes métodos foram utilizados: triagem microbiológica; determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM); cinética de morte microbiana; inibição da germinação de conídios e avaliação de alterações morfológicas. A análise da composição química do óleo foi realizada por cromatografia a gás acoplada ao espectrômetro de massas (CG-EM). Dentre os sete óleos essenciais testados, os óleos essenciais de Ocimum gratissimum e de Origanum vulgare exibiram potente atividade antifúngica, produzindo grandes zonas de inibição de crescimento, com o diâmetro médio de 29 e 42 mm, respectivamente. A análise fitoquímica do O. vulgare mostrou que os principais constituintes do óleo essencial são carvacrol (67,97%), p-cimeno (11,67%), -terpinemo (7,92%), timol (7,84%) e linalol (3,44%). O óleo essencial de O. vulgare teve um efeito inibidor significativo sobre o crescimento de todos os fungos ensaiados. Os valores de CIM foram de 128 e 256 μg/mL, enquanto os valores de CFM variaram de 256 a valores acima de 1.024 μg/mL, para o óleo essencial de O. vulgare. O óleo essencial de O. vulgare a 128, 256, 512 e 1.024 μg/mL impediu fortemente o crescimento micelial. Nestas mesmas concentrações, o óleo foi eficaz na inibição da germinação de conídios de ambas as espécies. A determinação do efeito do óleo essencial sobre a morfogênese de cepas de Fusarium demonstrou que o óleo essencial foi capaz de causar redução da conidiação, perda de citoplasma (hifas vazias) e desenvolvimento distorcidos das hifas. Diante disso, conclui-se que o óleo essencial de O. vulgare mostrou uma forte atividade inibidora contra espécies de Fusarium e pode ser considerado como um potencial produto com propriedades antifúngicas, especialmente para o tratamento de micoses causadas por Fusarium spp.

Orientador: Ary Fernandes Junior / Banca: Rosemeire C. L. R. Pietro / Banca: Maria de Lourdes Ribeiro da Cunha / Resumo: Esta dissertação encontra-se dividida em introdução geral e 3 capítulos, sendo estes no formato de manuscritos a serem enviados para publicação em 3 periódicos distintos. Considerando a crescente utilização dos produtos naturais, especialmente dos obtidos a partir de plantas, objetivou-se estudar a ação antibacteriana de 27 óleos essenciais de uso em aromaterapia, sobre linhagens de Staphylococcus aureus (n=10), Escherichia coli (n=9), e Pseudomonas aeruginosa (n=9), isoladas de casos clínicos humanos, utilizando a metodologia dos discos (difusão) e determinação da concentração inibitória mínima (CIM) (diluição) em Mueller Hinton Ágar (Capítulo I). Verificou-se que as linhagens de S. aureus foram mais susceptíveis que as de Gram negativas, sendo que os valores de CIM90% foi de 0,21mg/mL para os óleos de pimenta negra (Piper nigrum) e tea tree (Melaleuca alternifolia) e 26,52mg/mL para o óleo de copaíba (Copaíba officinalis). Para E. coli, o óleo de canela (Cinnamomum cassia) foi o mais efetivo, com 2,0 mg/mL para CIM90% enquanto para P. aeruginosa o valor foi de 8,29 mg/mL com cravo da índia (Syzigium aromaticum). Utilizando valores de CIM obtidos in vitro foram selecionados 5 óleos (cravo da índia-Syzygium aromaticum, gerânio-Pelargonium graveolens, lavanda -Lavandula angustifolia, palmarosa-Cymbopogon martini e tea tree-Melaleuca alternifolia) e novamente sobre linhagens de Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa, foi verificada a ação antibacteriana através da diluição individual de cada óleo em água e salina visando redução na contagem bacteriana em função do tempo (Capítulo II). Tanto nos ensaios em água quanto salina, verificou-se que o perfil de sensibilidade das linhagens bacterianas aos óleos essenciais foram próximos entre si, porém significativamente distintos comparados aos ensaios controles... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This thesis is divided into general introduction and three chapters, which are in the format of manuscripts to be submitted for publication in three separate journals. Considering the increasing use of natural products, especially those obtained from plants, aimed to study the antibacterial activity of 27 essential oils used in aromatherapy, on Staphylococcus aureus (n=10), Escherichia coli (n=9), and Pseudomonas aeruginosa (n=9), isolated from human clinical cases, using the methodology of the disks (diffusion) and determination of minimum inhibitory concentration (MIC) (dilution) on Mueller Hinton Agar (Chapter I). It was found that the strains of S. aureus were more susceptible than the Gram negative, and the values of MIC90% was 0.21 mg/mL for the oils of black pepper (Piper nigrum) and tea tree (Melaleuca alternifolia) and 26.52 mg/mL for oil Copaiba (Copaiba officinalis). For E. coli strains, the oil of cinnamon (Cinnamomum cassia) was the most effective, with 2.0 mg/mL for MIC 90% while for P. aeruginosa, the value was 8.29 mg/mL with clove (Syzigium aromaticum). Using MIC values obtained in vitro were selected five oils (cloves-Syzygium aromaticum, geranium-Pelargonium graveolens, lavender- Lavandula angustifolia, palmarosa-Cymbopogon martini and tea tree-Melaleuca alternifolia) and the bacteria Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa, antibacterial activity was checked by dilution of individual oil and saline water in order to reduce the bacterial count in function of time (Chapter II). Both tests in saline and water, it was found that the sensitivity of bacterial strains to essential oils were close together, but were significantly different compared to control tests. Essential oils have demonstrated the potential inhibitor of the three bacterial strains, and the results were different from those obtained in vitro-ágar with Gram negative... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Lin Chau Ming / Banca: Marcos Roberto Furlan / Banca: Marcia Ortiz Mayo Marques / Banca: Giuseppina Pace Pereira Lima / Banca: Sandra Maria Pereira da Silva / Resumo: Este trabalho investigou pela primeira vez as respostas agronômicas e fitoquímicas das inflorescências e dos ramos de Achyrocline satureioides (Lam.) DC. cv. CPQBA 2 (macela) submetida a cinco doses de adubo orgânico (0, 30, 60, 90 e 120 t ha-1) e dois espaçamentos (50 e 100 cm entre plantas e entre linhas). Procedeu-se, 457 dias após o transplantio (DAT), a colheita e análise dos dados de altura, biomassa seca (ramos e inflorescências), seguidas das análises laboratoriais: extração (p/p%) e análise das substancias químicas do óleo essencial (%) bem como sua atividade antibacteriana; teores de luteolina, 3-O-metilquercetina, quercetina, ácido cafeico, rutina e trans-ferúlico (mg/100g) do extrato hidroalcoólico, além das análises do teor de flavonoides e fenóis totais (mg/100g) durante quatro idades de coleta (150, 240, 320 e 457 DAT). Os dados de altura das plantas demonstram que o tratamento 30 t ha-1 se destacou (110,89 cm). O teor de biomassa seca das inflorescências apresentou diferença estatística significativa apenas para o menor espaçamento (1.267,33 kg ha-1). Em relação ao teor de óleo essencial das inflorescências houve destaque significativo apenas para o tratamento controle (0,2935%) e para os ramos houve diferença significativa o tratamento 30 t ha-1 (0,1086%). A correlação entre o acúmulo de óleo (L.ha-1) com o total de biomassa seca atingida (Kg.ha-1) foi calculada, sendo os teores de óleo dos ramos (19,33 L ha-1) maiores que os das inflorescências (3,34 L ha-1)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work has investigated for the first time the agronomic and phytochemical responses from inflorescences and branches of Achyrocline satureioides (Lam.) DC. cv. CPQBA 2 (macela) over five doses of organic fertilizer (0, 30, 60, 90 and 120 t ha-1) and two spacings (50 and 100 cm between plants and between rows). Harvest time were carried out, 457 days after transplanting (DAT), followed by laboratory analysis: extraction (w/w%) and analysis of chemicals substances from essential oil (%) as well as its antibacterial activity; luteolin, 3-O-methylquercetin, quercetin, caffeic acid, rutin and trans-ferulic acid (mg/100g) of the hydroalcoholic extract further the analyzes of the flavonoid and phenolic acid content (mg/100g) during four moments (150, 240, 320 and 457 DAT). Plant height data demonstrate that the 30 t ha-1 treatment stood out (110.89 cm). The dry biomass content of the inflorescences presented significant statistical difference only for the smallest spacing (1,267.33 kg ha-1). Regarding the essential oil content of the inflorescences, there was a significant difference only for the control treatment (0.2935%) and for the branches there was a significant difference in the treatment 30 t ha-1 (0.1086%). The correlation between the accumulation of oil (L.ha-1) and total dry biomass (Kg.ha-1) was calculated, with the oil contents of the branches (19,33 L ha-1) being higher than the inflorescences (3.34 L ha-1). Thirty chemicals substances were identified in the essent... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

178f. / Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2013-04-04T13:24:58Z No. of bitstreams: 1 tese.pdf: 15661047 bytes, checksum: 9435bab8097a40b18b43d8b2013f7457 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Hilda Fonseca(anahilda@ufba.br) on 2013-04-29T15:20:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 tese.pdf: 15661047 bytes, checksum: 9435bab8097a40b18b43d8b2013f7457 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-29T15:20:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese.pdf: 15661047 bytes, checksum: 9435bab8097a40b18b43d8b2013f7457 (MD5) Previous issue date: 2011 / CNPq / Este trabalho descreve o estudo químico dos constituintes fixos das raízes de Piper klotzschianum Kunth, o estudo da composição e atividade biológicas (citotóxicas, larvicidas, antimicrobianas e antioxidantes) dos voláteis de Piper klotzschianum e Croton grewioides. A partir dos extratos orgânicos das raízes de Piper klotzschianum foram isoladas 46 substâncias naturais utilizando técnicas usuais de separação cromatográfica. As estruturas foram elucidadas baseadas em dados de CG-EM, IV, RMN de 1H e 13C (empregando técnicas uni e bidimensionais). Dentre elas, os compostos (2S,3S)-5-hidroxi-7-metoxi-2,3- dimetilcroman-4-ona e tetra-hidropiperlonguminina estão sendo relatados pela primeira vez como componentes do metabolismo secundário de plantas; as substâncias 1-(2'-metoxi- 4',5'-metilenodioxifenil)-ciclopropil-cetona, (2S,3S)-5,7-dimetoxi-2,3-dimetilcroman-4-ona e (2S,3R)-6,7-dimetoxi-2,3-dimetilcroman-4-ona são inéditas na literatura. Os demais compostos isolados foram identificados como -sitosterol, estigmasterol, daucosterol, estigmasterol D-glicosilado, ácido 4-metoxibenzóico, metileugenol, isoasarona, 1-butil-3,4- metilenodioxi-benzeno, piperovatina, piperlonguminina, 4,5-di-hidropiperlonguminina, isopiperlonguminina, hoffmannseggiamida A, (2E,4E)-N-isobutilocta-2,4-dienamida, (2E,4E)- N-isobutildeca-2,4-dienamida, (2E,4E)-N-isobutilundeca-2,4-dienamida, (2E,4E)-Nisobutildodeca- 2,4-dienamida, (2E,4E)-N-isobutiltrideca-2,4-dienamida, (2E,4E)-Nisobutiltetradeca- 2,4-dienamida, (2E,4E)-N-isobutilhexadeca-2,4-dienamida, (2E)-Nisobutilhexadeca- 2-enamida; além dos ácidos trans-feruloiloxidocosanóico, tetracosanóico e hexacosanóico. Foi também identificado o conteúdo dos ácidos graxos, tendo como componentes majoritários os ácidos palmítico, heptadecanóico, oléico e esteárico. Os principais constituintes voláteis identificados em Piper klotzschianum foram determinados como sendo: 1-butil-3,4-metilenodioxibenzeno e 2,4,5-trimetoxi-1-propenilbenzeno nas raízes, caules e folhas e, 1-butil-3,4-metilenodioxibenzeno, limoneno, -felandreno, ocimeno e -trans-bergamoteno nos óleos das sementes. Já para Croton grewioides os componentes majoritários nas folhas e caules foram metilchavicol, eugenol e trans-anetol. Nos ensaios contra náuplios de Artemia salina todas as amostras testadas apresentaram altamente ativas, com destaque para os valores de CL50 = 7,06, 7,07 e 7,62 μg mL-1 para 1- butil-3,4-metilenodioxibenzeno e óleos dos caules e folhas de Piper klotzschianum respectivamente. Atividades larvicidas contra o terceiro instar do Aedes aegypty foram constatadas para os óleos essenciais presentes nas raízes e sementes de Piper klotzschianum, folhas e caules de Croton grewioides e para as substâncias 1-butil-3,4- metilenodioxi-benzeno, piperovantina, tetra-hidropiperlonguminina e (2S,3S)-5-hidroxi-7- metoxi-2,3-dimetilcroman-4-ona. Destaque para a alta atividade apresentada pelas piperamidas piperovatina (CL50 = 1,50 μg mL-1) e tetra-hidropiperlonguminina (CL50 = 10,43 μg mL-1). Dos óleos de Piper klotzschianum foram observadas atividades antimicrobianas para o óleo das raízes contra Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Escherichia coli (ATCC 25922) e Cândida albicans (UMP), e para o óleo das sementes, apenas contra Cândida albicans; já para os óleos de Croton grewioides foi observada atividade para os três microorganismos testados. Para a substância (2S,3S)-5-hidroxi-7-metoxi-2,3-dimetilcroman- 4-ona foi encontrada uma CIM de 400 μg mL-1 para Staphylococcus aureus e Escherichia coli. Atividades antioxidantes frente ao radical DPPH foram apenas constatadas nos óleos essenciais de Croton grewioides aroma “cravo da Índia”; o EC50 = 64,77 μg mL-1 (folhas) e o EC50 = 57,72 μg.mL-1 (caules) mostrou resultado similar ao ácido gálico (EC50 = 16,48 μg mL-1) utilizado como padrão. / Salvador

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L’ochratoxine A (OTA) est une mycotoxine issue du métabolisme secondaire des champignons filamenteux appartenant aux genres Penicillium et Aspergillus. Cependant, Aspergillus carbonarius est le majeur producteur de l’OTA sur les raisins. L’OTA a été retrouvée dans différents types de denrées alimentaires ainsi que lesurs produits dérivés. Le profil toxicologique de l’OTA due aux effets néfastes qu’elle présente sur la santé humaine et animale (effets hépatotoxiques, immunotoxiques, génotoxiques, tératogènes et cancérogènes) a conféré à cette mycotoxine une attention majeure auprès des instances internationales afin de limiter son occurrence. Ce projet est dédié pour trouver un moyen de lutte biologique, pouvant réduire l’OTA produite par A. carbonarius d’une part, et détoxifier les matrices alimentaires non conformes aux normes d’une autre part. La première stratégie était d’employer des huiles essentielles (cardamome, céleri, cannelle, taramira, origan, feuille de laurier, cumin, fenugrec, mélisse, menthe, sauge, anis, camomille, fenouil, romarin, romarin et thym) ainsi que des composés phénoliques extraits de plantes médicinales (feuille de laurier, cumin, fenugrec, mélisse, menthe, sauge, anis, camomille, fenouil, romarin et thym) afin d’évaluer leur effet sur la production de l’OTA dans le milieu SGM. Cette approche a été complétée par une étude moléculaire dans le but d’évaluer l’expression des gènes de biosynthèse de l’OTA (acpks, acOTApks et acOTAnrps) ainsi que les gènes de régulation (veA et laeA) chez A. carbonarius. Les résultats ont décelé que les huiles essentielles ont une activité fongicide plus élevée que celle des extraits phénoliques. Effectivement, les huiles essentielles du thym, de l’origan, du taramira, et de la cannelle ont bloqué complètement la croissance d’A. carbonarius. Cependant, les huiles essentielles du fenouil, de la cardamome, de l’anise, de la camomille, du céleri et du romarin ont réduit l’OTA sans autant affecter la croissance fongique. Le mode d’action de ces dernières a été mis en évidence en suivant l’expression des gènes acpks, acOTApks, acOTAnrps, veA et laeA, impliqués dans la biosynthèse de l’OTA chez A. carbonarius. Le gène acpks a été réprimée le plus (99.2%) quand A. carbonarius a été mis en culture avec 5 µL/mL du fenouil, entrainant ainsi une réduction de 88.9% de l’OTA. La deuxième stratégie était de développer un moyen de lutte biologique pouvant détoxifier les matrices alimentaires contaminées. Cette méthodologie a été développée suite à l’utilisation de sept souches d’actinobactéries (AT10, AT8, SN7, MS1, ML5, G10 et PT1), en évaluant leur capacité à métaboliser l’OTA, adhérer cette toxine à leur paroi membranaire ainsi que leur effet sur l’expression des gènes impliqués dans la biosynthèse de l’OTA chez A. carbonarius (acpks, acOTApks, acOTAnrps, veA et laeA). Les résultats ont montré que toutes les souches possèdent la capacité d’adhérer l’OTA à leur surface, notamment la souche SN7 qui a réduit 33% de l’OTA après 60 minutes d’incubation dans une solution PBS (Phosphate Buffer Solution) non nutritive. Les souches AT10 et SN7 ont métabolisé 51.94 et 52.68% de l’OTA ajoutée au milieu ISP2 (International Streptomyces Project-2) après 5 jours de culture à 28 °C. Cependant, les souches MS1, ML5 et G10 étaient les seules à avoir un effet sur l’expression des gènes de biosynthèse de l’OTA chez A. carbonarius. Effectivement les gènes acpks, acOTApks et acOTAnrps ont été réprimé respectivement de 37.1, 23.9 et 21% par MS1, de 39, 23 et 11.1% par ML5 et de 39, 18.3 et 11.1% par la souche G10. Ce projet a mis en valeur la capacité des extraits naturels (composés phénoliques et huiles essentielles) et des actinobactéries à prévenir d’une part la production de l’OTA et d’autre part réduire ses taux, sans pourtant affecter l’équilibre naturel ni engendrer l’apparition des débris toxiques dans les aliments traités. / Ochratoxin A (OTA) is a mycotoxin derived from the secondary metabolism of filamentous fungi belonging to the Penicillium and Aspergillus genera. However, Aspergillus carbonarius is the major producer of OTA on grapes. OTA has been detected in different types of foodstuffs as well as several products derived from these commodities. The toxicological profile of OTA and its adverse effects on human and animal health (hepatotoxic, immunotoxic, genotoxic, teratogenic and carcinogenic effects) has given this mycotoxin a major attention of international committees in order to limit its occurrence. The aim of this project was to develop biological techniques that can reduce OTA produced by A. carbonarius and detoxify non-compliant food matrices. The first strategy was achieved by using essential oils (cardamom, celery, cinnamon, taramira, oregano, bay leaf, cumin, fenugreek, melissa, mint, sage, anise, chamomile, fennel, rosemary and thyme) and phenolic compounds extracted from medicinal plants (bay leaf, cumin, fenugreek, melissa, mint, sage, anise, chamomile, fennel, rosemary, and thyme) to evaluate their effect on OTA production in SGM medium. This approach was complemented by a molecular study to evaluate the expression of the OTA biosynthesis genes (acpks, acOTApks and acOTAnrps) as well as the regulatory genes (veA and laeA) in A. carbonarius. The results revealed that essential oils had more significant fungicidal activity than phenolic extracts. Indeed, the essential oils of thyme, oregano, taramira, and cinnamon completely blocked the growth of A. carbonarius. However, essential oils of fennel, cardamom, anise, chamomile, celery and rosemary reduced OTA without affecting fungal growth. The mode of action of these essential oils has been demonstrated by evaluating the expression of acpks, acOTApks, acOTAnrps, veA and laeA genes in A. carbonarius. The expression of acpks was repressed the most (up to 99.2%) when A. carbonarius was cultured with 5 L / mL of fennel essential oil, resulting in a 88.9% of reduction in the OTA produced by this fungus. The second strategy was developed in order to detoxify contaminated food matrices. This methodology was achieved by using seven strains of actinobacteria (AT10, AT8, SN7, MS1, ML5, G10 and PT1), and evaluating their ability to metabolize OTA, adhere this toxin to their membrane walls and their effect on the expression of the genes involved in the biosynthesis of OTA in A. carbonarius (acpks, acOTApks, acOTAnrps, veA and laeA). The results showed that all strains were able to bind OTA to their surfaces, specially the SN7 strain which reduced 33% of OTA after incubation for 60 minutes in PBS (Phosphate Buffer Solution). The strains AT10 and SN7 metabolized 51.94 and 52.68% of the OTA added to the ISP2 medium (International Streptomyces Project-2) after 5 days of culture at 28° C. However, MS1, ML5 and G10 were the only strains to have an effect on the expression of the OTA biosynthesis genes in A. carbonarius. Indeed, acpks, acOTApks and acOTAnrps genes were repressed respectively by 37.1, 23.9 and 21% by MS1, 39, 23 and 11.1% by ML5 and 39, 18.3 and 11.1% by the strain G10. This project highlighted the power of natural extracts (phenolic compounds and essential oils) as well as strains of actinobacteria to prevent OTA production on one hand and to detoxify contaminated commodities on the other hand without altering the natural microbial balance.