Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 448570.pdf: 1364329 bytes, checksum: 5593f748d6d81947aadd6c16a12bd266 (MD5) Previous issue date: 2013-03-21 / Endodontic aims to prevent and treat diseases of the pulp and periapical tissues. Although the maintenance of pulp vitality is of paramount importance, conservative treatments are not commonly recommended for teeth with pulp exposure by caries. In these situations, conservative treatment is usually indicated for young teeth with open apex. For all the other cases a radical treatment is indicated, the root canal treatment. The reluctance in performing a conservative treatment in a permanent tooth with exposed pulp by caries is due to the difficulty of an accurate diagnosis, as to the condition of pulp inflammation (reversible or irreversible) and in the absence of a compound that promote this tissue to return to homeostasis . Thus, the present study evaluated histologically the effects of Emdogain ? (EMD) and its vehicle, propylene glycol alginate (PGA), in rat infected dental pulp.For this, the pulp chambers of the right lower molars of 24 male Wistar rats were perforated and the cavities were left open to the oral environment for 24 h. Then, the exposed pulp surfaces were direct capped with either EMD or its carrier PGA (n=6), and the cavities were restored with glass-ionomer cement. After the experimental period of 48 hours and 30 days, the animals were euthanized and the dissected mandibles were histologically evaluated. The results showed that a hard tissue barrier was absent in the EMD and PGA groups in the two evaluation periods. At 48 h the groups exhibited similar pulp behavior. At 30 days, the group capped with EMD showed a reduced inflammatory process limited to the exposed area, and degenerative changes on the pulp tissue throughout the length of the root canals. Thus, our results suggest that EMD was not effective on the providing proper wound healing of infected rat molar pulp / A Endodontia tem como objetivo a preven??o e o tratamento das doen?as da polpa e dos tecidos periapicais. Embora a manuten??o da vitalidade pulpar seja de fundamental import?ncia, tratamentos conservadores n?o s?o comumente indicados para dentes com polpa exposta por c?rie. Nestas situa??es, o tratamento conservador costuma ser indicado somente para dentes jovens com ?pice aberto. Para os demais casos indica-se o tratamento radical, a endodontia. A relut?ncia em se realizar um tratamento conservador em um dente permanente com polpa exposta por cavidade profunda de c?rie est? na dificuldade de um diagn?stico preciso quanto ? condi??o pulpar de inflama??o revers?vel e irrevers?vel e na falta de uma subst?ncia que possa fazer esse tecido retornar a homeostase.Neste sentido, o presente estudo avaliou histologicamente os efeitos do Emdogain? (EMD) e o seu ve?culo, propileno glicol alginato (PGA) em polpas dent?rias infectadas de ratos. Para isto foram utilizados 24 molares inferiores de ratos Wistar machos com 8 semanas de idade. A c?mara pulpar foi perfurada e as cavidades ficaram expostas ? cavidade oral por um per?odo de 24 h. Ap?s, as superf?cies pulpares foram capeadas utilizando Emdogain? (n=6) ou PGA (n=6) como controle, e em seguida foram restauradas com cimento de ion?mero de vidro. Passados os tempos experimentais de 48 h e 30 dias, os animais foram eutanasiados e as mand?bulas foram dissecadas para avalia??o histol?gica.Os resultados encontrados mostraram que n?o houve forma??o de barreira de tecido duro em nenhum dos grupos e tempos experimentais avaliados. No per?odo experimental de 30 dias, o grupo EMD apresentou reduzido processo inflamat?rio, este sendo limitado ao s?tio de exposi??o, e altera??es degenerativas em toda a extens?o do canal radicular foram predominantes neste grupo. Sendo assim, estes resultados sugerem que o EMD n?o foi efetivo em promover adequado reparo tecidual em polpas infectadas de ratos

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 434616.pdf: 1582052 bytes, checksum: cc637f53364c5652d47a360c1e06850b (MD5) Previous issue date: 2011-09-21 / Different approaches have been advocated for implementation of conservative treatment of the pulp tissue, usually employing inflammation control and the application of compounds with therapeutic potential on the pulp. The Resolvin E1 (RvE1) is a lipid mediator capable of regulating inflammatory routes that do not involve the blockage of enzymatic intermediates. The aim of this study was to evaluate the effect of the topical application of RvE1 on dental pulps exposed to the oral environment. To this end, 42 male Wistar rats (n=6 per group/period) had the pulps of the right mandibular first molars assessed and then left exposed to the oral environment for 24 hours. After this period, topical medication either with 0.1% ethanol (vehicle of RvE1), RvE1 or a corticosteroid was applied onto the pulp tissue, and the teeth were then sealed with silver amalgam. The effects of the tested protocols were assessed by histology after 24 and 72 hours. Untouched teeth were used as reference for relative analysis and grading of the alterations observed in test groups. RvE1 induced significant reduction and containment of pulp inflammation with less extensive damage compared to either 0.1% ethanol or corticosteroid (P<0.05). Within the conditions tested none of the tested drugs promoted identical pulp tissue features compared to the observed in untouched teeth (P<0.01). The results presented herein have uncovered protective roles for RvE1 in pulp inflammation, suggesting that it may be a candidate for a novel therapeutic strategy for preservation of its vitality. / Diferentes abordagens t?m sido advogadas para implementa??o do tratamento conservador do tecido pulpar, usualmente empregando o controle da inflama??o e a aplica??o de compostos com potencial terap?utico sobre a polpa. A Resolvina E1 (RvE1) ? um mediador lip?dico capaz de regular rotas inflamat?rias que n?o envolvem o bloqueio de intermedi?rios enzim?ticos. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito t?pico da RvE1 sobre polpas dentais expostas ao meio oral. Para esta finalidade, 42 ratos machos Wistar (n = 6 por grupo/per?odo), tiveram as polpas dos primeiros molares inferiores direitos acessadas e deixadas expostas ao meio oral por 24 horas. Ap?s este per?odo, medica??o t?pica com etanol 0.1% (ve?culo da RvE1), RvE1 ou corticoster?ide foi aplicada sobre o tecido pulpar e os dentes foram selados com am?lgama de prata. Os efeitos dos protocolos testados foram avaliados histologicamente ap?s 24 e 72 horas. Dentes intactos foram utilizados como refer?ncia para an?lise das altera??es verificadas nos grupos experimentais. RvE1 induziu significativa redu??o e conten??o da inflama??o com danos pulpares menos extensos em compara??o ao etanol 0.1% ou corticoster?ide (P<0.05). Nenhum dos f?rmacos testados promoveu caracter?sticas pulpares id?nticas ?s observadas nos dentes intactos (P<0.01). Os resultados apresentados revelaram a fun??o protetora da RvE1 na inflama??o da polpa, sugerindo que ela possa ser candidata para uma nova estrat?gia terap?utica para a preserva??o de sua vitalidade.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 456861.pdf: 2147908 bytes, checksum: b9bc5ecae0f349a191f0641931e9e7d7 (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / The effects on kinin B1 receptor (B1R) deletion were examined on bone regeneration in streptozotocin (STZ)-type-1 diabetic mice, subjected to a model of femoral critical-size defect. Diabetes induction in wild-type C57/BL6 (WT C57/BL6) mice was allied to decrease of body weight and hyperglycemia, in relation to the non-diabetic group of the same strain. The lack of B1R did not affect STZ-elicited body weight loss, although it partially prevented hyperglycemia. Type-1 diabetic mice presented a clear delay in bone regeneration, with large areas of loose connective tissue within the region corresponding to the defects, when compared to wide areas of newly-formed woven bone in non-diabetic WT C57/BL6 mice. Notably, either non-diabetic or diabetic B1R knockout (B1RKO) mice displayed bone regeneration levels comparable to that seen in control WT C57/BL6 mice. The improved bone regeneration in animals lacking B1R was further confirmed by analysis of collagen contents. WT C57/BL6 STZ-diabetic mice presented a marked reduction of collagen contents within the bone defect gap, whereas diabetic B1RKO displayed collagen levels comparable to those observed in non-diabetic WT C57/BL6 or B1RKO mice. The enhanced bone regeneration in diabetic mice lacking B1R does not seem to be associated to lessened osteoclast activity, as no prominent difference was detected in the levels of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) positivity, or even in the immunolabeling for the proteins of the RANK/RANKL/OPG system thoughout all the experimental groups. Data brings novel evidence on the relevance of B1R under type-1 diabetes, especially concerning its role in bone regeneration after surgical procedures / Os efeitos da dele??o g?nica do receptor B1 das cininas na regenera??o ?ssea foram avaliados em camundongos com diabetes tipo 1 induzida por estreptozotocina, submetidos a um modelo de defeito cr?tico no f?mur. Como resultado da indu??o de diabetes nos camundongos wild-type C57/BL6, houve um decr?scimo do peso corporal e hiperglicemia em rela??o ao grupo n?o-diab?tico da mesma cepa. Os animais diab?ticos, com aus?ncia do receptor B1 apresentaram perda do peso corporal e, uma preven??o parcial da hiperglicemia. Camundongos diab?ticos do tipo 1 tiveram um atraso na regenera??o ?ssea, apresentando um tecido conectivo desorganizado na regi?o correspondente ao defeito cr?tico, quando comparados a extensas ?reas de tecido ?sseo rec?m-formado em camundongos WT C57/BL6 n?o diab?ticos. Camundongos B1R nocaute, diab?ticos ou n?o diab?ticos, exibiram n?veis de regenera??o ?ssea semelhantes aos observados no grupo controle WT C57/BL6. A melhora na regenera??o ?ssea nos animais sem o receptor B1 foi confirmada pela an?lise da quantidade de col?geno. Camundongos WT C57/BL6 diab?ticos apresentaram uma redu??o acentuada da distribui??o de col?geno na regi?o do defeito ?sseo, enquanto que os animais B1RKO diab?ticos exibiram n?veis de col?geno similares ?queles observados nos camundongos n?o diab?ticos, tanto WT C57/BL6, quanto B1RKO. A melhora da regenera??o ?ssea nos camundongos diab?ticos sem o receptor B1 n?o parece estar associado ? atividade osteocl?stica diminu?da. Ademais, nenhuma diferen?a marcante foi encontrada nos n?veis de fosfatase ?cida resistente ao tartarato (TRAP) ou, na imunomarca??o para as prote?nas do sistema RANK/RANKL/OPG, em todos grupos experimentais avaliados. Os resultados deste trabalho fornecem novas evid?ncias a respeito da relev?ncia dos receptores B1 no diabetes do tipo 1, especialmente no que diz respeito ao seu papel na regenera??o ?ssea ap?s procedimentos cir?rgicos

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 458701.pdf: 1213511 bytes, checksum: 5c4a01085ee74091dcd6f5af755a1eca (MD5) Previous issue date: 2013-11-29 / Studies on dental caries demonstrate inflammation on dental pulp tissues following infection. Cytokines are able to activate those cells linked to inflammatory and immune response thus neutralizing potentially aggressive agents and allowing tissue repair. Some of those cytokines, denominated chemokines, could contribute to the establishment of an immunotherapy able to control those cytokines involved with the triggering of dental pulp inflammation. Research on chronic inflammation has provided some relevant insights. However, the role of certain chemokines on acute inflammation is yet not conclusive. This study attempts to unveil the role of the chemokines CCL5/RANTES, CCR5 and RANKL on initial and acute pulpal inflammation. Methods: 18 Wistar rats were subjected to anesthesia. Access was performed on their first lower molars until pulp exposure. They were divided into three experimental groups considering the solution administered: Saline, lipopolysaccharide (LPS) and lipoteichoic acid (LTA) (n=6 each group). Higid second lower molars were used as controls. The cavities were sealed with amalgam and euthanasia occurred after 48 h and the jaws were dissected for histologic evaluation. CCL5/RANTES is expressed in all groups, unlike CCR5, that was not expressed. RANKL appears only in inflammatory cells, including control group. Only RANKL could be expressed during initial pulpal inflammation, being able to detect inflammatory cell activity. / Estudos de c?rie demonstraram aspectos inflamat?rios nos tecidos pulpares decorrentes de infec??o estabelecida. Citocinas seriam capazes de ativar c?lulas ligadas ? resposta inflamat?ria e imune no sentido de neutralizar potenciais agentes invasores e permitir o reparo dos tecidos pulpares. Algumas destas, denominadas quimiocinas, poderiam contribuir no estabelecimento de uma imunoterapia capaz de bloquear aquelas citocinas respons?veis pelo processo inflamat?rio. Na inflama??o cr?nica estas pesquisas j? possuem resultados satisfat?rios. Na inflama??o aguda, os estudos ainda est?o inconclusivos. Este estudo teve como objetivo testar as quimiocinas CCL5/RANTES, CCR5 e RANKL na inflama??o pulpar aguda. M?todos: 18 Ratos Wistar foram anestesiados. Foram feitas cavidades at? a exposi??o pulpar nos primeiros molares inferiores. Eles foram divididos em tr?s grupos onde se administrou solu??o salina est?ril, lipopolissacar?deo (LPS) e ?cido lipoteic?ico (LTA) (n= 6 por grupo). Os segundos molares inferiores h?gidos foram utilizados como controle. As cavidades foram seladas com am?lgama e a eutan?sia foi realizada ap?s 48h. As mand?bulas foram dissecadas para exame histol?gico e da imunoexpress?o das quimiocinas em estudo. Obteve-se como resultados: CCL5/RANTES ? expressa em todos os grupos, ao contr?rio do CCR5, que n?o foi expressa. RANKL aparece apenas em c?lulas inflamat?rias. Somente a express?o de RANKL foi capaz de demonstrar atividade celular na inflama??o pulpar inicial.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 403719.pdf: 17195669 bytes, checksum: cc984e188e12746eaba79164edeea7e2 (MD5) Previous issue date: 2008-06-30 / Depois de adquiridas as mem?rias atravessam um per?odo de filtragem e fixa??o progressivo dependente de s?ntese prot?ica, o qual denomina-se consolida??o. Evid?ncias experimentais sugerem que as mem?rias consolidadas n?o s?o imut?veis sen?o que, ap?s serem evocadas, tornam-se novamente l?beis e para persistirem necessitam da ocorr?ncia de outro processo tamb?m dependente de s?ntese prot?ica, chamado reconsolida??o. No presente trabalho mostramos que, quando infundido na regi?o CA1 do hipocampo dorsal 0, 180 ou 360 mas n?o 540 minutos ap?s o treino na tarefa de reconhecimento de objetos, o inibidor de mTOR RAPA prejudica significativamente a mem?ria de longa dura??o sem afetar a reten??o da mem?ria de curta dura??o. A administra??o intra-hipocampal de RAPA 24 horas antes da respectiva sess?o comportamental n?o altera a atividade locomotora e explorat?ria nem o estado de ansiedade dos animais e n?o prejudica o aprendizado de tarefas espaciais e aversivas que dependem da integridade funcional do hipocampo. Isto sugere que o efeito que a RAPA tem sobre a reten??o da mem?ria de reconhecimento deve-se, efetivamente, ao bloqueio do processo de consolida??o e n?o a um dano irrevers?vel na funcionalidade do hipocampo nem a um preju?zo comportamental inespec?fico. Quando infundida na regi?o CA1 do hipocampo dorsal ap?s reativa??o da mem?ria de reconhecimento na presen?a de objetos familiares, a RAPA n?o afeta a reten??o ulterior do tra?o mnem?nico. No entanto, quando esta droga foi administrada ap?s exposi??o a um objeto familiar e um novo, prejudicou a reten??o da mem?ria de ambos os objetos. O efeito amn?sico da RAPA independe do tempo transcorrido entre as sess?es de reativa??o e teste, e n?o ocorre ap?s a simples exposi??o ao contexto ou a objetos desconhecidos. Nossos resultados indicam que a ativa??o de mTOR ? requerida na regi?o CA1 do hipocampo dorsal para a consolida??o da mem?ria de reconhecimento de objetos e sugerem que a inibi??o desta cinase ap?s a reativa??o da mem?ria em quest?o prejudica sua persist?ncia.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 455924.pdf: 866376 bytes, checksum: 11973f76ada2aeeeb6a5dcd6c7c51f89 (MD5) Previous issue date: 2014-01-02 / Paraquat (PQ) is an agrochemical agent commonly used worldwide, which is allied to potential risks of intoxication. This herbicide induces the formation of reactive oxygen species (ROS) that ends up compromising various organs, particularly the lungs (by the polyamine uptake system), and the brain (by dopaminergic neuronal cell loss). This study evaluated the deleterious effects of paraquat on the central nervous system (CNS) (changes in physiologic parameters, nociceptive responses, locomotor activity and motor coordination, and expression profile of some inflammatory markers), or peripherally (inflammatory cells in the blood and lungs), with special attempts to assess the putative protective effects of the selective CXCR2 receptor antagonist SB225002 on these parameters. PQ-toxicity was induced in male Wistar rats, in a total dose of 50 mg/kg, given by the intraperitoneal (i.p.) route (10 mg/kg each three days). Control animals received saline solution (10 ml/kg) at the same schedule of administration. Separate groups of animals were treated with the selective CXCR2 antagonist SB225002 (1 or 3 mg/kg, i.p.), administered 30 min before each paraquat injection. The major changes found in paraquat-treated animals were: decreased body weight and hypothermia, nociception behavior, impairment of locomotor and gait capabilities, enhanced TNF-&#945; and IL-1&#946; expression in the striatum, and cell migration to the lungs and blood. Some of these parameters were reversed when the antagonist SB225002 was administered, including recovery of physiological parameters, decreased nociception, improvement of gait abnormalities, modulation of striatal TNF-&#945; and IL-1&#946; expression, and decrease of neutrophil migration to the lungs and blood. Taken together, our results demonstrate that damage to the central and peripheral systems elicited by paraquat can be prevented by the pharmacological inhibition of CXCR2 chemokine receptors. The experimental evidence presented herein extends the comprehension on the toxicodynamic aspects of paraquat, and opens new avenues to treat intoxication induced by this herbicide. / O paraquat (PQ) ? um composto qu?mico bastante utilizado no mundo, o qual ? aliado a potenciais riscos de intoxica??o. Este herbicida induz a forma??o de esp?cies reativas de oxig?nio (ROS) que podem comprometer v?rios ?rg?os, especialmente os pulm?es (atrav?s da recapta??o de poliaminas), e o c?rebro (pela perda de neur?nios dopamin?rgicos). Este trabalho avaliou os efeitos delet?rios do paraquat frente ao Sistema Nervoso Central (SNC) (como mudan?as nos par?metros fisiol?gicos, respostas nociceptivas, atividade locomotora e coordena??o motora, e o perfil de express?o de alguns marcadores moleculares de inflama??o), e perif?rico (como c?lulas inflamat?rias no sangue e pulm?es), com o objetivo de avaliar o poss?vel papel protetor do antagonista de receptores de quimiocinas CXCR2, o SB225002, nestes par?metros. A toxicidade ao paraquat foi induzida em ratos machos Wistar, em uma dose total de 50 mg/kg, administrada intraperitonealmente (i.p.) (10 mg/kg a cada tr?s dias). Animais do grupo controle receberam solu??o salina (10 ml/kg) no mesmo protocolo de administra??o. Diferentes grupos de animais foram tratados com o antagonista SB225002 (1 ou 3 mg/kg, i.p.), administrado 30 minutos antes de cada aplica??o do paraquat. As prinicpais mudan?as encontradas nos animais tratados com paraquat foram: diminui??o do peso corporal e hipotermia, aumento da resposta nociceptiva, diminui??o da capacidade de marcha e locomo??o, aumento da express?o de TNF-&#945; e IL-1&#946; no estriado, e a migra??o de c?lulas inflamat?rias no sangue e pulm?es. Alguns destes par?metros foram revertidos quando administrado o antagonista SB225002, como recupera??o dos par?metros fisiol?gicos, diminui??o da nocicep??o, melhora na atividade de marcha, modula??o da express?o estriatal de TNF-&#945; e IL-1&#946;, e diminui??o da migra??o neutrof?lica para o sangue e pulm?es. Em conjunto, nossos resultados demonstram que os danos causados pelo paraquat ao sistema central e perif?rico podem ser prevenidos atrav?s da inibi??o farmacol?gica dos receptores de quimiocinas CXCR2. A evid?ncia experimental aqui apresentada extende a compreens?o dos efeitos toxicodin?micos do paraquat, e proporciona novas possibilidades para tratar a intoxica??o causada por este herbicida.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 455930.pdf: 2412584 bytes, checksum: f510a7887fb6fa3e2f006d9db557d511 (MD5) Previous issue date: 2014-01-24 / Spinal voltage-gated calcium channels (VGCC) are pivotal regulators of painful and inflammatory alterations, representing attractive therapeutic targets. We examined the effects of epidural administration of the selective P/Q- and N-type VGCC blockers Tx3-3 and Ph&#945;1&#946;, respectively, isolated from the spider P. nigriventer, on symptomatic, inflammatory and functional changes allied to cyclophosphamide (CPA)-induced hemorrhagic cystitis (HC) in mice. The effects of P. nigriventer-derived toxins were compared to those displayed by MVIIC and MVIIA, extracted from the cone snail C. magus. HC was induced by a single intraperitoneal injection of CPA (300 mg/kg). The spinal blockage of P/Q-type VGCC by Tx3-3 and MVIIC, or N-type VGCC by Ph&#945;1&#946; attenuated nociceptive and inflammatory events associated with HC, including bladder oxidative stress and cytokine production. Moreover, CPA produced an evident increase of bladder TRPV1 and TRPA1 mRNA expression, which was virtually reversed by all the tested toxins. Noteworthy, Ph&#945;1&#946; strongly prevented bladder neutrophil migration, besides HC-related functional alterations. Finally, the spinal co-administration of the selective NK1 receptor antagonist CP-96345 heightened Ph&#945;1&#946; antinociceptive effects. Our results shed new lights on the role of spinal P/Q and N-type VGCC in bladder dysfunctions, pointing out Ph&#945;1&#946; as a promising alternative for treating complications associated to CPA-induced HC. / Os canais de c?lcio voltagem-dependentes (CCVDs), ao n?vel medular, s?o um dos principais reguladores das altera??es inflamat?rias e dolorosas, representando um interessante alvo terap?utico. Com isso, avaliamos os efeitos da administra??o intratecal dos bloqueadores seletivos dos CCVD do subtipo P/Q e N, Tx3-3 e Ph&#945;1&#946;, respectivamente, isolados do veneno da aranha P. nigriventer, nas mudan?as sintom?ticas, inflamat?rias e funcionais, relacionadas com a cistite hemorr?gica (CH), induzido pelo quimioter?pico ciclofosfamida (CPA) em camundongos. Os efeitos dos pept?deos provenientes da aranha P. nigriventer foram comparados com os exibidos pelas toxinas MVIIC e MVIIA, obtidas do caramujo C. magus. A CH foi induzida por uma ?nica administra??o intraperitoneal de CPA (300 mg/kg). O bloqueio medular dos CCVD do subtipo P/Q atrav?s da Tx3-3 e MVIIC ou, o bloqueio dos CCVD do subtipo N pela toxina Ph&#945;1&#946; atenuou as respostas nociceptivas e inflamat?rias associadas ? CH, incluindo estresse oxidativo e produ??o de citocinas na bexiga. Al?m disso, a CPA produziu um aumento evidente na express?o do RNAm de TRPV1 e TRPA1 na bexiga, o qual foi virtualmente revertido por todas as toxinas. Notavelmente, a isoforma Ph&#945;1&#946; reduziu a migra??o de neutr?filos para a bexiga, al?m de reverter as disfun??es da bexiga relacionadas ? CH. Finalmente, a co-administra??o medular do antagonista seletivo dos receptores NK1, CP-96345, com o pept?deo Ph&#945;1&#946;, intensificou o efeito antinociceptivo do mesmo. Nossos resultados trazem novas evid?ncias da fun??o dos CCVD do subtipo P/Q e N ao n?vel medular na disfun??o da bexiga, apontando a Ph&#945;1&#946; como uma poss?vel alternativa de tratamento para complica??es associadas ? CH, induzida por CPA.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-06-22T19:27:40Z No. of bitstreams: 1 TES_TALITA_CARNEIRO_BRANDAO_PEREIRA_COMPLETO.pdf: 639031 bytes, checksum: 5fa4cd79fd277a716b47890fcca5b580 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-22T19:27:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_TALITA_CARNEIRO_BRANDAO_PEREIRA_COMPLETO.pdf: 639031 bytes, checksum: 5fa4cd79fd277a716b47890fcca5b580 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / First identified in Saccharomyces ceresvisie, the sirtuins (SIRTs) are a diverse family of histones deacilases that act as deacetilases, ADP-ribosil transferases, desuccinilases and demalonilases; using nicotinamide adenine dinucleotide (NAD+) as co-substrate. Their regulatory involvement targeting histones, structural proteins and transcription factors implicate them in a broad range of biological processes and raised promising roles as therapeutic targets in apoptosis, oxidative stress and inflammation, among many others. These processes in turn, can be easily modeled in zebrafish (Danio rerio), a model organism with great developmental, genetic and economical advantages. Despite growing interest in this fresh water teleost as model organism and the regulatory and therapeutical potential of sirtuins in inflammation and associated processes, next to nothing is known about sirtuins in zebrafish. In order to contribute to this scenario and accelerate zebrafish potential as screening platform for sirtuins modulators, this work aimed to characterize sirtuins roles in a copper-induced inflammation model in zebrafish larvae. Alterations in locomotor behavior, sirtuin-related genes expression pattern and gene expression of inflammation, oxidative stress and apoptosis markers were observed after copper exposure. In order to further evaluate SIRT1 contribution to this scenario, a SIRT1 knockout line was developed using CRISPR-Cas9 technology, which showed an exarcebated inflammatory response after copper exposures. Additional studies will help to elucidate sirtuin roles in inflammation and associated processes, taking advantage of zebrafish?s translational potential. / Inicialmente identificadas em Saccharomyces cerevisie como reguladores de silenciamento de informa??o, as sirtu?nas (SIRTs) s?o uma diversa fam?lia de histonas desacilases da classe III (HDACs) que atuam como desacetilases, mono-ADP-ribosil transferases, desuccinilases e demalonilases; todas dependentes de nicotinamida adenina dinucleot?deo (NAD+). Presentes em todos os dom?nios de vida e tamb?m em v?rus, as sirtu?nas se tornaram promissores alvos terap?uticos devido seu envolvimento em diversos processos biol?gicos, incluindo apoptose, estresse oxidativo e inflama??o. Estes por sua vez s?o considerados denominadores comuns de diversas patologias e podem ser facilmente estudados utilizando os transl?cidos embri?es e larvas do zebrafish (Danio rerio) como organismo modelo. Apesar do crescente uso deste pequeno tele?steo de ?gua doce em diversas ?reas de estudo, e das sirtu?nas terem um promissor, mas pouco esclarecido, papel em eventos de inflama??o, apoptose e estresse oxidativo, pouco se sabe sobre as sirtu?nas no zebrafish - retardando seu uso como ferramenta de screening de drogas potencialmente moduladoras das SIRTs. Sob este cen?rio, o objetivo deste trabalho foi caracterizar o papel das sirtu?nas em modelo de inflama??o induzido por sulfato de cobre em larva de zebrafish. Altera??es em comportamento explorat?rio da larva, express?o de genes associados a sirtu?nas, bem como em marcadores de inflama??o, estresse oxidativo e apostose foram observados ap?s a exposi??o ao cobre. Para investigar o papel do mais conhecido e abrangente membro das sirtu?nas, desenvolvemos uma linhagem nocaute para SIRT1 utilizando a tecnologia CRISPR/Cas9, a qual apresentou reposta inflamat?ria exarcebada quando exposta ao cobre. Estudos adicionais neste modelo podem contribuir com descobertas sobre a biologia e modula??o das SIRTs ao usufruir do potencial translacional do zebrafish.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-11-10T16:14:13Z No. of bitstreams: 1 TES_MARIA_DAS_GRACAS_VILLELA_RODRIGUES_COMPLETO.pdf: 3711034 bytes, checksum: 8599c9dfdb61b14f16b029441393ea84 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-10T16:14:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_MARIA_DAS_GRACAS_VILLELA_RODRIGUES_COMPLETO.pdf: 3711034 bytes, checksum: 8599c9dfdb61b14f16b029441393ea84 (MD5) Previous issue date: 2016-08-30 / The investigation stems from the realization of the importance that the computer science area exerts a process of integration with the Health Sciences in that it offers mimicry possibilities station bodily functions which provides technology to support scientific research. As these research in the areas of Health Sciences can not always be carried out with humans for ethical reasons and even the use of animals has been restricted, technological innovations make it ever more necessary to advance such research. Thus, this thesis aims to determine whether the image display as vector digital methodology results in more efficiency and wider use compared to the analog image. The methodology used, with the participation of 210 travel volunteer medical students of PUCRS three class members. In each class, students were randomized into two groups of 35 students, the control group was exposed to an analog image sciatic nerve in the rat division, while the test group was exposed to the same nerve imaging, but vectored in Inkscape program, compared to a division of the sciatic nerve photograph captured by a scanning electron microscope. Each group viewed the received image, comparing it with the electron microscope image, identifying this picture the names of the nerves that are part of the division of the sciatic nerve. Later the control group viewed digital images to a post-test and with the test group answered a questionnaire of receptivity of the methodology. We used the comparison and statistical method to perform the analyzes which confirmed the greater efficiency of digital images with respect to the analog images, validating the use of digital images and digital methods. / A investiga??o surge da constata??o da import?ncia que a ?rea de Ci?ncias da Computa??o exerce num processo de integra??o com as Ci?ncias da Sa?de na medida em que oferece possibilidades de mimetiza??o de fun??es org?nicas posto que propicia recursos tecnol?gicos para o apoio das pesquisas cient?ficas. Como estas pesquisas nas ?reas das Ci?ncias da Sa?de nem sempre podem ser realizadas com seres humanos por raz?es ?ticas e mesmo a utiliza??o de animais tem sido restringida, as inova??es tecnol?gicas fazem-se sempre mais necess?rias para o avan?o de tais pesquisas. Assim, esta tese tem por objetivo determinar se a visualiza??o de imagem vetorizada como metodologia digital resulta em mais efici?ncia e mais ampla utiliza??o em compara??o com a imagem anal?gica. A metodologia utilizada, contou com a participa??o de 210 alunos volunt?rios do curso de medicina da PUCRS, integrantes de tr?s turmas. Em cada turma, os alunos foram randomizados em dois grupos de 35 alunos, o grupo controle foi exposto a uma imagem anal?gica da divis?o do nervo ci?tico do rato, enquanto o grupo teste foi exposto a mesma imagem do nervo, vetorizada no programa Inkscape, em compara??o com uma fotografia da divis?o do nervo ci?tico, capturada por um microsc?pio eletr?nico. Cada grupo visualizou a imagem recebida, comparando-a com a imagem capturada do microsc?pio eletr?nico, identificando nesta imagem os nomes dos ramos do nervo ci?tico. Posteriormente o grupo controle visualizou imagens digitais para um p?s-teste e juntamente com o grupo teste responderam um question?rio de receptividade da metodologia. Utilizou-se o m?todo comparativo e estat?stico para efetuar as an?lises que comprovou a maior efici?ncia das imagens digitais em rela??o ?s imagens anal?gicas, validando-se a utiliza??o de imagens digitais e a metodologia digital.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 457610.pdf: 991749 bytes, checksum: d91843d27688e0357561bae1a127e7a1 (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / This study investigated whether the spinal or systemic treatment with the lipid resolution mediators resolvin D1 (RvD1), aspirin-triggered resolvin D1 (AT-RvD1) and resolvin D2 (RvD2) might interfere with behavioral and neurochemical changes in the mouse fibromyalgia-like model induced by reserpine. Acute administration of AT-RvD1 and RvD2 produced a significant inhibition of mechanical allodynia and thermal sensitization in reserpine-treated mice, whereas RvD1 was devoid of effects. A similar antinociceptive effect was obtained by acutely treating animals with the reference drug pregabalin. Noteworthy, the repeated administration of AT-RvD1 and RvD2 also prevented the depressive-like behavior in reserpine-treated animals, according to assessment of immobility time, although the chronic administration of pregabalin failed to affect this parameter. The induction of fibromyalgia by reserpine triggered a marked decrease of dopamine and serotonin (5-HT) levels, as examined in total brain, spinal cord, cortex and thalamus. Reserpine also elicited a reduction of glutamate levels in total brain, and a significant increase in the spinal cord and thalamus. Chronic treatment with RvD2 prevented 5-HT reduction in total brain, and reversed the glutamate increases in total brain and spinal cord. Otherwise, AT-RvD1 led to a recovery of dopamine levels in cortex, and 5-HT in thalamus, whilst it diminished brain glutamate contents. Concerning pregabalin, this drug prevented dopamine reduction in total brain, and inhibited glutamate increase in brain and spinal cord of reserpine-treated animals. Our data provide novel evidence, showing the ability of D-series resolvins AT-RvD1, and mainly RvD2, in reducing painful and depressive symptoms allied to fibromyalgia in mice. / O presente estudo investigou o poss?vel efeito do tratamento central ou sist?mico com os mediadores lip?dicos de resolu??o da inflama??o, Resolvina D1 (RvD1), RvD1 ativada pela aspirina (AT-RvD1) e Resolvina D2 (RvD2) sobre mudan?as comportamentais e neuroqu?micas em um model de fibromialgia induzido por reserpina em camundongos. A administra??o aguda de AT-RvD1 e RvD2 produziu um efeito inibit?rio significativo sobre a alod?nia mec?nica e a hipersensibiliza??o t?rmica nos animais tratados com reserpina, sendo que nenhum efeito foi observado quando os animais foram tratados com RvD1. A administra??o aguda de pregabalina, f?rmaco de refer?ncia para o tratamento da fibromialgia, apresentou um efeito antinociceptivo similar ?quele observado para AT-RvD1 e RvD2. Interessante, a administra??o repetida e sist?mica de AT-RvD1 e RvD2 tamb?m preveniu o comportamento depressivo nos animais que receberam reserpina, de acordo com a avalia??o do tempo de imobilidade, enquanto que a administra??o cr?nica de pregabalina n?o apresentou efeito sobre esse par?metro. A indu??o de fibromialgia pela reserpina produziu uma redu??o marcante dos n?veis de dopamina e serotonina (5-HT), quando avaliados no c?rebro total, medula espinhal, c?rtex e t?lamo. A reserpina tamb?m promoveu uma redu??o nos n?veis de glutamato no c?rebro total e, um aumento significativo na medula espinhal e no t?lamo. O tratamento cr?nico com RvD2 preveniu a redu??o de 5-HT no c?rebro total e, reverteu o aumento do glutamato no c?rebro total e medula espinhal. Por outro lado, AT-RvD1 restaurou os n?veis de dopamina no c?rtex e de 5-HT no t?lamo, ao mesmo tempo em que, reduziu os n?veis de glutamato no c?rebro. Em rela??o ? pregabalina, ela preveniu a redu??o de dopamina no c?rebro total e inibiu o aumento do glutamato no c?rebro e na medula espinhal dos animais tratados com reserpina. Nossos resultados fornecem novas evid?ncias quanto aos efeitos da AT-RvD1 e, principalmente RvD2 na redu??o da dor e, ainda, da depress?o, no modelo de fibromialgia induzida por em camundongos.