Made available in DSpace on 2014-06-12T23:14:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4102_1.pdf: 1336083 bytes, checksum: fb38c5622b6ab24221ea648c2d58c6c9 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / A pré-eclâmpsia é uma doença específica da gravidez, de etiologia multifatorial, que acomete 5 a 10% das gestantes, cujos efeitos e complicações são a maior causa de morbimortalidade materno-infantil. A identificação de fatores de riscos é importante para a compreensão da patogênese, estabelecimento de estratégias de prevenção e controle da préeclâmpsia. Recentemente estudos clínicos e laboratoriais apontam para a hipótese de associação entre a periodontite materna e pré-eclâmpsia, como parte do esforço para o conhecimento da complexidade desta doença. Objetivos: Verificar se a periodontite é um fator de risco para a ocorrência de pré-eclâmpsia e identificar outros possíveis fatores de risco. Métodos: Estudo do tipo caso-controle em 574 mulheres assistidas na maternidade do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Pernambuco. Foram coletados dados biológicos, sócioeconômicos, intercorrência e assistência médica-odontológica durante o pré-natal, tabagismo e parâmetros periodontais. A pré-eclâmpsia foi definida de acordo com o critério da Sociedade Internacional para Estudo da Hipertensão na Gravidez e para a definição de periodontite foi adotado o critério diagnóstico de López. Os fatores de confusão foram controlados e odds ratio ajustado com as variáveis socioeconômicas, usando-se análise multivariada de regressão logística. Para a revisão bibliográfica foram utilizados artigos específicos sobre o tema. Resultados: As mulheres com periodontite tiveram nove vezes mais chance de ter pré-eclâmpsia do que àquelas com o periodonto saudável. Após o ajuste, a periodontite materna permaneceu como variável independente associada à pré-eclâmpsia. A pré-eclâmpsia mostrou-se associada a fatores biológicos, socioeconômicos e de assistência médico-odontológica. Conclusão: A pré-eclâmpsia é uma doença de etiologia multifatorial, associada a fatores socioeconômicos, biológicos e de assistência médico-odontológica, dentre os quais a infecção crônica, como a periodontite materna

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:15:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8399_1.pdf: 1948074 bytes, checksum: d52325048cf193c9fb438a2273db2ed8 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Introdução: A pré-eclampsia é a complicação mais freqüente da clínica obstétrica e ocorre em uma média de 6 a 10% das gestações. A causa da pré-eclampsia ainda está por ser descrita, com conseqüências na eficácia do seu tratamento. A doença é uma importante causa de prematuridade, motivada pela interrupção eletiva da gravidez para a diminuição de riscos maternos e fetais. Em decorrência desta peculiaridade o estudo deste tipo específico de prematuridade deve ser feito através do estudo do seu nexo determinístico com a pré-eclampsia. Objetivos: Revisar os conhecimentos atuais sobre a Pré-eclampsia e verificar os fatores de risco para a prematuridade em recém-nascidos de mães com pré-eclampsia. Métodos: Foi realizada uma revisão da literatura médica através das bases dados do MEDLINE, SCIELO e LILACS com as palavras chave: Préeclampsia, pré-termo, baixo peso ao nascer. Foram incluídos artigos originais, revisões sistemáticas, dissertações de mestrado e teses de doutorado e livros texto de obstetrícia de um período entre 1940 a 2007. Esse capítulo de revisão foi intitulado Prematuridade na Pré-eclampsia : abordagem obstétrica. Realizou-se também um estudo caso-controle em uma amostra de 609 mulheres, admitidas no Centro Obstétrico Universidade Federal de Pernambuco com o diagnóstico de Pré-eclampsia no período de fevereiro de 2006 a maio 2007, observando-se os riscos associados ao nascimento pré-termo, sendo este artigo original intitulado Fatores de Risco para a Prematuridade em Recém-Nascidos de Mães com Pré-Eclampsia . Resultados: A literatura consultada não demonstra consenso sobre a etiologia da Préeclampsia apesar de toda pesquisa cientifica no tema. Não existem exames que possam prever com níveis adequados de segurança sua ocorrência ou medidas terapêuticas para prevení-la efetivamente, porém é possível melhorar resultados perinatais quanto à morbimortalidade. Além de baixa vitalidade neonatal, as principais características para o recém-nascido de mães com pré-eclampsia são a prematuridade, baixo peso ao nascer, e restrição ao crescimento intra-uterino. Mulheres que tiveram a gravidez complicada por pré-eclampsia e seus filhos, têm um risco aumentado de desenvolverem no futuro doenças cardiovasculares, em especial hipertensão. A prematuridade na pré-eclampsia ocorre na maioria das vezes por indicação eletiva do término da gravidez com objetivo de evitar riscos maternos e fetais. No artigo original verificou-se uma freqüência de prematuridade de 18,7% (114/495), e os fatores de risco identificados foram: idade materna acima de 30 anos, menos de três consultas pré-natal, gravidez gemelar e apresentação pélvica. O fator de proteção identificado foi a nuliparidade. Como características dos prematuros destacaram-se Apgar menor que sete no primeiro e quinto minutos, baixo peso ao nascer, pequenos para idade gestacional. Conclusão: Apesar de todas as pesquisas, a Pré-eclampsia continua sendo a maior complicação da gravidez com alto risco de morte para as mães e seus filhos. A teoria vascular explica as manifestações clínicas da doença, mas não a doença per se . Em concordância com a literatura especializada, de modo geral, os fatores de risco no estudo apontam para necessidade de medidas de atenção à saúde de gestantes e parturientes mais eficazes para diminuir, na Pré-eclampsia, os desfechos indesejáveis para o recém-nascido, em especial a prematuridade

Pre-eclampsia and intrauterine growth restriction (IUGR) are common complications of pregnancy with significant implications for mother and fetus. The exact cause is unknown, but current theories suggest that abnormal trophoblast invasion leads to placental under perfusion and hypoxia with the generation of reactive oxygen species (ROS). A result of this insult is increased trophoblast apoptosis. The cell cycle regulator p53 has been identified in increased amounts in the trophoblast in pre-eclampsia and IUGR. It is possible that modulation of this potent apoptotic signal could improve placental function, potentially offering a therapy for these presently untreatable conditions.In these studies, trophoblast apoptosis was induced with Nutlin-3, a synthetic compound which inhibits the binding of p53 to its inhibitor, Mdm2, therefore acting as a p53 activator. Treatment with Nutlin-3 induced apoptotic cell death in BeWo choriocarcinoma cells, primary trophoblast cells and placental villous explants, suggesting that p53 is intrinsic to trophoblast survival. This increase in apoptosis was associated with an increase in p53, Mdm2, p21 and Puma protein expression in BeWo cells and p21 and Puma mRNA in placental villous explants. No effect was observed in Bax expression. Co-treatment with Nutlin-3 and the p53 inhibitor Pifithrin-α reduced apoptosis to the level of control tissue in BeWo cells, primary trophoblast cells and villous explants, suggesting that reducing p53 activity improves trophoblast function.The use of hypoxia and ROS was associated with an increase in apoptosis and p21 and Puma in placental villous explants. Furthermore, the extent of apoptosis and p21 and Puma expression was reduced by co-treatment with Pifithrin-α, suggesting that the ameliorating effects of Pifithrin-α on trophoblast apoptosis are maintained following an insult from a less specific p53 activating mechanism, further supporting the continued investigation of p53 modulation as a therapeutic manipulation of placental function.Pregnant mice were exposed to Nutlin-3 to ascertain the effect of p53 over-activity on pregnancy outcome. The establishment of a model of placental dysfunction in the mouse would have allowed investigation into the effect of p53 inhibition with Pifithrin-α. Despite clear evidence of p53 modulation in maternal tissues, the decidua, no effect was observed upon pregnancy outcome or upon fetal or placental tissue. These findings suggest that the mouse placenta may not be a good model of p53 over-activity, although the exact mechanism of resistance remains unclear.In conclusion, p53 exaggeration is inducible in trophoblast with Nutlin-3, hypoxia and ROS. Furthermore, Pifithrin-α is able to reduce this effect, suggesting that the p53 pathway may be a realistic target for modulation in the placenta.

Foram estudadas 456 gestantes adolescentes « 18 anos) atendidas em pré-natal multiprofissional no Hospital das Clínicas da FMUSP entre agosto de 1997 e maio de 2002, sem patologias clínicas e com início do pré-natal antes da 283 -semana, Investigou-se retrospectivamente fatores que pudessem estar associados com o alto risco descrito de pré-eclâmpsia para esse grupo etário. A incidência de pré-eclâmpsia (PA ~ 140x90 em duas ocasiões e proteinúria significativa) foi de 6,14%, embora em adicionais 13% tenha ocorrido hipertensão sem confirmação da doença em questão, perfazendo a taxa de 19,74% para a presença de qualquer tipo de hipertensão na gravidez. As pacientes com pré-eclâmpsia receberam dieta hipossódica em 59% das vezes e medicação hipotensora, em 43% , sendo a média de proteinúria de 1,27g em 24 h. Tais pacientes apresentaram mais parto cesárea, principalmente por desproporção céfalo-pélvica e distocia funcional, que estava associada com maior risco para indução do parto. O tempo de intemação e de analgesia foi significantemente maior, assim como o uso de anestesia tipo bloqueio (raqui ou peridural). A gravidez resultou em mais recém nascidos grandes para a idade gestacional (GIG), assim como mais recém-nascidos pequenos para a idade gestacional, com os demais dados neonatais equivalentes com o resto das adolescentes. Na análise univariada, estiveram associadas com o diagnóstico de pré- eclâmpsia as seguintes variáveis: estado conjugal solteira ao final da gravidez, a raça negra, o antecedente familiar de pré-eclâmpsia, o peso matemo ao início do pré- natal, o ácido úrico com 32 e 36 semanas, a hipocalciúria com 36 semanas e a placenta localizada lateralmente com 26 e 30 semanas, assim como o ganho de peso semanal a partir da 213 semana e a pressão arterial sistólica e diastólica a partir da 253 semana. Na análise multivariada, permaneceram independentes e significativos apenas as variáveis antecedente familiar (OR=3,85), estado civil solteira (OR=2,80) e o ácido úrico com 32 sem (OR=I,76). Assim, parece que o mecanismo fisiopatológico associado a pré-eclâmpsia comporta não somente dados biológicos e genéticos, como também questões psicossociais e nutricionais, que necessitam ser melhor estudadas / They were studied 456 adolescent pregnant woman «18 years) assisted in comprehensive prenatal care in the Hospital das Clinicas of the College of Medicine of the São Paulo University between August of 1997 and May of 2002, without clinical pathologies and with beginning of the prenatal before for 28th week. It was investigated in retrospective study factors that could be associated with the high described risk of preeclampsia for that age group. The preeclampsia (~140x90 in two occasions and significant proteinuria) incidence it was of 6,14%, although in additional 13% have happened hypertension without confirmation of the disease, with the global rate of 19,74% for the presence of any hypertension type in the pregnancy. The patients with preeclampsia received low sodium diet in 59% of the times and medication, in 43%, being the average of proteinuria of 1,27g in 24 h. These patients had more Cesarean section, mainly for cefalo-pelvic disproportion and functional distocia, that was associated with larger risk for induction of the labor. The time of intemment and of analgesia it were larger, as well as the use of block anesthesia. The pregnancy resulted in more newborn big for the gestational age (010), as well as newborn small for the gestational age, with the other neonatal data equivalent with the general population of teenagers. In the univariate analysis, It was associated with the preeclampsia diagnosis the following variables: unmarried woman at the end ofthe pregnancy, the black race, the antecedent ofpreeclampsia in the relatives, the maternal weight at the beginning of the prenatal care, the uric acid with 32 and 36 weeks, the hipocalciuria with 36 weeks and the lateral placenta with 26 and 30 weeks, as well as the weekly gain of weight after the 21 st week and the systolic and diastolic blood pressure after the 25th week. ln the multivariate analysis , the following variables were independent and significant: family antecedent (OR=3,85), unmarried woman (OR=2,80) and the uric acid with 32 weeks (OR=1,76). Thus, it seems that the mechanism associated with preeclampsia behaves not only biological and genetic data, as well as subjects psychosocial and nutritional issues, that need to be studied better

Introdução: A CALPAIN5faz parte da família das cisteínas proteases e está relacionada com a regulação de inúmeras funções celulares, entre elas a diferenciação e a apoptose. Estudos com microarrays identificaram a CALPAIN5como um alvo da açãotranscripcional do HOXA10em úteros de camundongos. Objetivos: No presente estudo avaliou-se a regulação da CALPAIN5pelo HOXA10 em células endometriais, a expressão da CALPAIN5no endométrio durante todo o ciclo menstrual, e na decídua do primeiro e terceiro trimestres de gestações normais, e o padrão de expressão anormal desse gene na pré-eclampsia e endometriose. Material e Métodos: Foram obtidas dez biópsias endometriais (cinco na fase proliferativa e cinco na fase secretora) depacientes férteis. Biópsias de lesões de endometriose, confirmadas por histopatologia,foram retiradas de dez mulheres durante procedimento vídeo-laparoscópico. Amostras de decídua foram coletadas em três diferentes ocasiões: três amostras do primeiro trimestre,cinco amostras no terceiro trimestre e cinco amostras de pacientes com pré-clâmpsia no terceiro trimestre. Identificou-se a proteína da CALPAIN5utilizando imunohistoquimica (IHC) no endométrio eutópico, ectópico e na decídua. Os resultados da IHC foram quantificados, a partir dedois diferentes observadores, utilizando-se Hscorepara células estromais, epiteliais e deciduais. Transfeccionou-se 4,0µg de pcDNA/HOXA10e 20µM siRNA/HOXA10em cultura de células estromais endometriais humanas (HESC) e células epiteliais endometriais humanas (Ishikawa), assim como os seus respectivos controles. A transfecção foi realizada em quadruplicata quando a cultura de células apresentava confluência de 60-70%. Após 48 horas do procedimento o RNA foi extraído, que deu origem a DNA complementar e após uma reação de cadeia da polimerase em tempo real (PCR em tempo real) foi realizada, em triplicata, para determinar o padrão de expressão do HOXA10e CALPAIN5. A análise estatística foi realizada utilizando-se os testes ANOVA com test pos-hocpara o Hscoree teste tpara os resultados da PCR em tempo real. Resultados: CALPAIN5 é expressadurante todo o ciclo menstrual tanto nas células estromais como epiteliais glandulares, e está mais expressa na decídua do primeiro trimestre. Na endometriose CALPAIN5 se mostrou pouco evidente em ambas as células endometriais (estromais e glandulares), quando comparadas de forma geral com as células endometriais eutópicas das pacientes controles, sendo que sua expressão reduziu em 50% (p<0,05). Nas decíduas de pacientes com pré-eclampsia CALPAIN5 apresentou-se mais expressa que no grupo controle (p<0,05). Nas célulasestromais endometriais o pcDNA/HOXA10aumentou a expressão da CALPAIN5em 11 vezes (p<0,05) e a transfecção com siRNA/HOXA10reduziu a expressão da CALPAIN5em 23 vezes (p<0,05). Conclusão: O HOXA10regula a expressão genética da CALPAIN5nas células endometriais. CALPAIN5 é expressa no endométrio normal e tem sua expressão aumentada nas células deciduais do primeiro trimestre em relação àsfases do ciclo menstrual. CALPAIN5 está pouco expressa no endométrio ectópico na endometriose e mais expressa nas células deciduais na pré-eclampsia grave quando comparados com seus respectivos controles. / BACKGROUND: CALPAIN5is member of the calpain-like cystein protease family and has been implicated in the regulation of a variety of cellular functions, including differentiation and apoptosis. Research with microarray screen identified CALPAIN5as target of HOXA10 transcriptional control in murine endometrium. OBJECTIVES: We propose in this study to demonstrate regulated CALPAIN5expression in endometrium, and 3rd trimester deciduas and an abnormal expression pattern of this gene in pre eclampsia and endometriosis . MATERIALS & METHODS: Ten endometrial biopsies (5 proliferative phase and 5 secretory phase) were obtained from fertile controls. Histologically confirmed biopsies of endometriosis were obtained from 10 women atthe time of laparoscopy. Five third trimester decidual samples and 3 first trimester deciduas samples from controls, and five 3rd trimester decidual samples from women with pre-eclampsia were obtained at the time of labor. Immunohistochemistry (IHC) was used to identify CALPAIN5protein in eutopic and ectopic endometrium as well as in decidua. IHC was performed with CALPAIN5polyclonal antibody. IHC results were assessed by 2 evaluators blinded to the study groups, and H-SCORES were determined for the stroma, glands and decidua. The human endometrial stromal cell line, HESC, the human endometrial epithelial cell line, Ishikawa were transfected with either 4.0µg pcDNA/HOXA10or 20µM HOXA10siRNA; transfection with empty pcDNA vector or nonspecific siRNA served as respective controls. Cells were transfected in quadruplicate at 60-70% confluence. Forty eight hours after the transfection total RNA was isolated. qRT-PCR was performed in duplicated to determine expression levels of HOXA10and CALPAIN5in each group. Statistical analysis was performed with ANOVA test pos-hocto Hscoreand ttest for real time PCRRESULTS: CALPAIN5was expressed in endometrial stromal and glandular cells throughout the menstrual cycle, and increased expression was noted in the first trimester decidua phase. There was a decrease in CALPAIN5expression in both stromal and glandular cells in endometriosis to 50% ofthat seen in fertile controls (p<0.05). CALPAIN 5 was also expressed in 3rd trimester decidua obtained from pre-eclamptics at higher levels than 3rd trimester control decidua (p<0.05). The regulatory relationship between HOXA10 and CALPAIN5was established by transient transfection analysis. CALPAIN5 gene expression increased 11-fold (p<0.05) after pcDNA/HOXA10transfection of the HESC, and decreased 23-fold (p<0.05) after HOXA10siRNA treatment. CONCLUSIONS: CALPAIN5 expression is regulated by HOXA10. CALPAIN5is expressed in normal endometrium and at upregulated in the decidua ofwomen with pre-eclampsia. CALPAIN5 expression is decreased in endometriosis compared to eutopic endometrium.

Foram estudadas 456 gestantes adolescentes « 18 anos) atendidas em pré-natal multiprofissional no Hospital das Clínicas da FMUSP entre agosto de 1997 e maio de 2002, sem patologias clínicas e com início do pré-natal antes da 283 -semana, Investigou-se retrospectivamente fatores que pudessem estar associados com o alto risco descrito de pré-eclâmpsia para esse grupo etário. A incidência de pré-eclâmpsia (PA ~ 140x90 em duas ocasiões e proteinúria significativa) foi de 6,14%, embora em adicionais 13% tenha ocorrido hipertensão sem confirmação da doença em questão, perfazendo a taxa de 19,74% para a presença de qualquer tipo de hipertensão na gravidez. As pacientes com pré-eclâmpsia receberam dieta hipossódica em 59% das vezes e medicação hipotensora, em 43% , sendo a média de proteinúria de 1,27g em 24 h. Tais pacientes apresentaram mais parto cesárea, principalmente por desproporção céfalo-pélvica e distocia funcional, que estava associada com maior risco para indução do parto. O tempo de intemação e de analgesia foi significantemente maior, assim como o uso de anestesia tipo bloqueio (raqui ou peridural). A gravidez resultou em mais recém nascidos grandes para a idade gestacional (GIG), assim como mais recém-nascidos pequenos para a idade gestacional, com os demais dados neonatais equivalentes com o resto das adolescentes. Na análise univariada, estiveram associadas com o diagnóstico de pré- eclâmpsia as seguintes variáveis: estado conjugal solteira ao final da gravidez, a raça negra, o antecedente familiar de pré-eclâmpsia, o peso matemo ao início do pré- natal, o ácido úrico com 32 e 36 semanas, a hipocalciúria com 36 semanas e a placenta localizada lateralmente com 26 e 30 semanas, assim como o ganho de peso semanal a partir da 213 semana e a pressão arterial sistólica e diastólica a partir da 253 semana. Na análise multivariada, permaneceram independentes e significativos apenas as variáveis antecedente familiar (OR=3,85), estado civil solteira (OR=2,80) e o ácido úrico com 32 sem (OR=I,76). Assim, parece que o mecanismo fisiopatológico associado a pré-eclâmpsia comporta não somente dados biológicos e genéticos, como também questões psicossociais e nutricionais, que necessitam ser melhor estudadas / They were studied 456 adolescent pregnant woman «18 years) assisted in comprehensive prenatal care in the Hospital das Clinicas of the College of Medicine of the São Paulo University between August of 1997 and May of 2002, without clinical pathologies and with beginning of the prenatal before for 28th week. It was investigated in retrospective study factors that could be associated with the high described risk of preeclampsia for that age group. The preeclampsia (~140x90 in two occasions and significant proteinuria) incidence it was of 6,14%, although in additional 13% have happened hypertension without confirmation of the disease, with the global rate of 19,74% for the presence of any hypertension type in the pregnancy. The patients with preeclampsia received low sodium diet in 59% of the times and medication, in 43%, being the average of proteinuria of 1,27g in 24 h. These patients had more Cesarean section, mainly for cefalo-pelvic disproportion and functional distocia, that was associated with larger risk for induction of the labor. The time of intemment and of analgesia it were larger, as well as the use of block anesthesia. The pregnancy resulted in more newborn big for the gestational age (010), as well as newborn small for the gestational age, with the other neonatal data equivalent with the general population of teenagers. In the univariate analysis, It was associated with the preeclampsia diagnosis the following variables: unmarried woman at the end ofthe pregnancy, the black race, the antecedent ofpreeclampsia in the relatives, the maternal weight at the beginning of the prenatal care, the uric acid with 32 and 36 weeks, the hipocalciuria with 36 weeks and the lateral placenta with 26 and 30 weeks, as well as the weekly gain of weight after the 21 st week and the systolic and diastolic blood pressure after the 25th week. ln the multivariate analysis , the following variables were independent and significant: family antecedent (OR=3,85), unmarried woman (OR=2,80) and the uric acid with 32 weeks (OR=1,76). Thus, it seems that the mechanism associated with preeclampsia behaves not only biological and genetic data, as well as subjects psychosocial and nutritional issues, that need to be studied better

Thesis (Ph. D.)--Virginia Commonwealth University, 2007. / Prepared for: Dept. of Obstetrics and Gynecology. Bibliography: leaves 166-192. Also available online via the Internet.

Introdução: A CALPAIN5faz parte da família das cisteínas proteases e está relacionada com a regulação de inúmeras funções celulares, entre elas a diferenciação e a apoptose. Estudos com microarrays identificaram a CALPAIN5como um alvo da açãotranscripcional do HOXA10em úteros de camundongos. Objetivos: No presente estudo avaliou-se a regulação da CALPAIN5pelo HOXA10 em células endometriais, a expressão da CALPAIN5no endométrio durante todo o ciclo menstrual, e na decídua do primeiro e terceiro trimestres de gestações normais, e o padrão de expressão anormal desse gene na pré-eclampsia e endometriose. Material e Métodos: Foram obtidas dez biópsias endometriais (cinco na fase proliferativa e cinco na fase secretora) depacientes férteis. Biópsias de lesões de endometriose, confirmadas por histopatologia,foram retiradas de dez mulheres durante procedimento vídeo-laparoscópico. Amostras de decídua foram coletadas em três diferentes ocasiões: três amostras do primeiro trimestre,cinco amostras no terceiro trimestre e cinco amostras de pacientes com pré-clâmpsia no terceiro trimestre. Identificou-se a proteína da CALPAIN5utilizando imunohistoquimica (IHC) no endométrio eutópico, ectópico e na decídua. Os resultados da IHC foram quantificados, a partir dedois diferentes observadores, utilizando-se Hscorepara células estromais, epiteliais e deciduais. Transfeccionou-se 4,0µg de pcDNA/HOXA10e 20µM siRNA/HOXA10em cultura de células estromais endometriais humanas (HESC) e células epiteliais endometriais humanas (Ishikawa), assim como os seus respectivos controles. A transfecção foi realizada em quadruplicata quando a cultura de células apresentava confluência de 60-70%. Após 48 horas do procedimento o RNA foi extraído, que deu origem a DNA complementar e após uma reação de cadeia da polimerase em tempo real (PCR em tempo real) foi realizada, em triplicata, para determinar o padrão de expressão do HOXA10e CALPAIN5. A análise estatística foi realizada utilizando-se os testes ANOVA com test pos-hocpara o Hscoree teste tpara os resultados da PCR em tempo real. Resultados: CALPAIN5 é expressadurante todo o ciclo menstrual tanto nas células estromais como epiteliais glandulares, e está mais expressa na decídua do primeiro trimestre. Na endometriose CALPAIN5 se mostrou pouco evidente em ambas as células endometriais (estromais e glandulares), quando comparadas de forma geral com as células endometriais eutópicas das pacientes controles, sendo que sua expressão reduziu em 50% (p<0,05). Nas decíduas de pacientes com pré-eclampsia CALPAIN5 apresentou-se mais expressa que no grupo controle (p<0,05). Nas célulasestromais endometriais o pcDNA/HOXA10aumentou a expressão da CALPAIN5em 11 vezes (p<0,05) e a transfecção com siRNA/HOXA10reduziu a expressão da CALPAIN5em 23 vezes (p<0,05). Conclusão: O HOXA10regula a expressão genética da CALPAIN5nas células endometriais. CALPAIN5 é expressa no endométrio normal e tem sua expressão aumentada nas células deciduais do primeiro trimestre em relação àsfases do ciclo menstrual. CALPAIN5 está pouco expressa no endométrio ectópico na endometriose e mais expressa nas células deciduais na pré-eclampsia grave quando comparados com seus respectivos controles. / BACKGROUND: CALPAIN5is member of the calpain-like cystein protease family and has been implicated in the regulation of a variety of cellular functions, including differentiation and apoptosis. Research with microarray screen identified CALPAIN5as target of HOXA10 transcriptional control in murine endometrium. OBJECTIVES: We propose in this study to demonstrate regulated CALPAIN5expression in endometrium, and 3rd trimester deciduas and an abnormal expression pattern of this gene in pre eclampsia and endometriosis . MATERIALS & METHODS: Ten endometrial biopsies (5 proliferative phase and 5 secretory phase) were obtained from fertile controls. Histologically confirmed biopsies of endometriosis were obtained from 10 women atthe time of laparoscopy. Five third trimester decidual samples and 3 first trimester deciduas samples from controls, and five 3rd trimester decidual samples from women with pre-eclampsia were obtained at the time of labor. Immunohistochemistry (IHC) was used to identify CALPAIN5protein in eutopic and ectopic endometrium as well as in decidua. IHC was performed with CALPAIN5polyclonal antibody. IHC results were assessed by 2 evaluators blinded to the study groups, and H-SCORES were determined for the stroma, glands and decidua. The human endometrial stromal cell line, HESC, the human endometrial epithelial cell line, Ishikawa were transfected with either 4.0µg pcDNA/HOXA10or 20µM HOXA10siRNA; transfection with empty pcDNA vector or nonspecific siRNA served as respective controls. Cells were transfected in quadruplicate at 60-70% confluence. Forty eight hours after the transfection total RNA was isolated. qRT-PCR was performed in duplicated to determine expression levels of HOXA10and CALPAIN5in each group. Statistical analysis was performed with ANOVA test pos-hocto Hscoreand ttest for real time PCRRESULTS: CALPAIN5was expressed in endometrial stromal and glandular cells throughout the menstrual cycle, and increased expression was noted in the first trimester decidua phase. There was a decrease in CALPAIN5expression in both stromal and glandular cells in endometriosis to 50% ofthat seen in fertile controls (p<0.05). CALPAIN 5 was also expressed in 3rd trimester decidua obtained from pre-eclamptics at higher levels than 3rd trimester control decidua (p<0.05). The regulatory relationship between HOXA10 and CALPAIN5was established by transient transfection analysis. CALPAIN5 gene expression increased 11-fold (p<0.05) after pcDNA/HOXA10transfection of the HESC, and decreased 23-fold (p<0.05) after HOXA10siRNA treatment. CONCLUSIONS: CALPAIN5 expression is regulated by HOXA10. CALPAIN5is expressed in normal endometrium and at upregulated in the decidua ofwomen with pre-eclampsia. CALPAIN5 expression is decreased in endometriosis compared to eutopic endometrium.

Background: Hypertension during pregnancy is a leading cause of birthing parent mortality and adverse pregnancy outcomes. Since non-metropolitan communities face higher rates of several risk factors for hypertension in pregnancy and shortages in obstetrical services, persons residing in non-metropolitan areas may be at increased risk for adverse outcomes compared to those living in metropolitan areas. Our study objectives were to examine by county of birthing parent residence (1) the prevalence of chronic hypertension (cHTN) and hypertensive disorders of pregnancy (HDP), and (2) the prevalence of adverse birthing parent and neonatal outcomes associated with hypertension. Methods: Using U.S. birth certificate data from 2016 to 2018, we described the prevalence of cHTN and HDP and the association of each with several birthing parent and neonatal outcomes, stratified by non-metropolitan versus metropolitan county of birthing parent residence. Multivariable Poisson regression models were used to calculate adjusted prevalence ratios for birthing parent and neonatal outcomes among individuals with cHTN or HDP who lived in non-metropolitan versus metropolitan U.S. counties. Results: The prevalence of cHTN and HDP for US live births was 2.2% and 7.4%, respectively, among non-metropolitan pregnant individuals and 1.8% and 6.6%, respectively, among metropolitan pregnant individuals. After adjusting for several sociodemographic characteristics among those with HDP, the prevalence ratio for an APGAR score < 7 at 5 minutes (aPR 1.34, 95% CI 1.29-1.38) and neonatal death (aPR 1.36, 95% CI 1.15-1.62) was increased among offspring born to women who resided in non-metropolitan counties. Similar results were seen among those with cHTN. Conclusion: The prevalence of cHTN and HDP is modestly more prevalent in non-metropolitan areas, but most pregnancy outcomes were similar among those residing in non-metropolitan areas compared to metropolitan areas. Further research should investigate the robustness of these findings using alternate definitions of rural and urban areas and the possible link between low APGAR score, low NICU admission, and neonatal death in non-metropolitan counties.

Indiana University-Purdue University Indianapolis (IUPUI) Indiana University School of Dentistry / Background: Pre-eclampsia a potentially life threatening hypertensive disorder occurring in 3-14% of pregnancies. Its etiology is multifactorial involving the placenta. The only “cure” that currently exists is the delivery of the baby, which is often pre-term. There is no early pregnancy screening test to recognize those at risk. Recently, an altered immune-inflammatory responses at the placental level in response to infectious agents (eg., periodontal pathogens) have been proposed to be etiological for this pregnancy complication. A new class of Pattern Recognition Receptors called Peptidoglycan Recognition Proteins (PGRPs) constituting 4 distinct molecules PGRP 1-4 is emerging as a key player in modulating host responses to peptidoglycan and its breakdown products. A critical knowledge gap exists on the role of PGRPs in the innate immune responses that occur at the maternal-fetal interface in response to pathogens and their components that may be present in maternal circulation secondary to chronic infections. Aim: The aim of this pilot study is to investigate the expression PGRPs in the placenta of pre-eclamptic women. The overall goal is to better understand the association of periodontal disease and adverse pregnancy outcomes. Methods and Materials: This case control study consisted of subjects with: (1) normal term pregnancies (n=7) (2) pre-eclampsia (n=7). Preeclampsia was defined as hypertension (systolic blood pressure of ≥ 140 mm Hg or diastolic blood pressure of ≥ 90 mm Hg on at least 2 occasions, 4 hours to 1 week apart) and proteinuria (≥ 300 mg in a 24-hour urine collection or one dipstick measurement of ≥ 2+). A real time quantitative PCR array was used to analyze the relative mRNA expression of TLR2, TLR4, NOD1, NOD2, PGRP1, PGRP2, PGRP3, and PGRP4. Immunohistochemistry was performed to determine the cell type(s) expressing the PGRP proteins in the placental tissue. Summary statistics (mean, standard deviation, range, 95% confidence interval for the mean) were calculated for PGRP 1-4 expression for each group. Results and conclusions: The PCR data showed the expression of PGRPs 1, 3 and 4 in the placental samples. There was an up-regulation of PGRP-1 (1.4 fold) and down regulation of PGRP-3 (1.3 fold) and PGRP-4 (1.6 fold). TLR2, TLR4 and NOD2 mRNA were also elevated in the placental samples. Immunohistochemistry demonstrated positive staining for PGRPs 3 and 4 in the trophoblasts. The results from this novel research could lead to development of salivary and/or plasmatic biomarkers for early detection of PE and warrants further investigation.