Dissertação(mestrado) - Universidade Federal do Rio Grande, Programa de Pós–Graduação em Oceanografia Biológica, Instituto de Oceanografia, 2006. / Submitted by Cristiane Gomides (cristiane_gomides@hotmail.com) on 2013-11-19T10:53:47Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Fernanda Caldeira.pdf: 2786616 bytes, checksum: 7d8912a4eb7053a789229e293eca615b (MD5) / Approved for entry into archive by Angelica Miranda (angelicacdm@gmail.com) on 2013-11-20T21:32:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao Fernanda Caldeira.pdf: 2786616 bytes, checksum: 7d8912a4eb7053a789229e293eca615b (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-20T21:32:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Fernanda Caldeira.pdf: 2786616 bytes, checksum: 7d8912a4eb7053a789229e293eca615b (MD5) Previous issue date: 2006 / O desenvolvimento da raia Sympterygia acuta foi descrito baseado em uma série completa de embriões do estágio 17, o primeiro estágio onde a forma do corpo e a primeira fenda branquial podem ser distinguidos, até a eclosão. Os embriões foram provenientes de cápsulas ovígeras coletadas na praia de Cassino, estado do Rio Grande do Sul, Brasil. As características externas destes espécimes foram usadas para estabelecer uma tabela de estágios de S. acuta. Cada estágio é definido por um conjunto de características morfológicas que inclui a abertura e a posição das sucessivas fendas branquiais, do tamanho e da forma das nadadeiras peitorais (disco) e pélvicas, da forma da boca e da posição dos espiráculos. A relação entre a massa de vitelo e o crescimento do embrião em massa está de acordo com o padrão conhecido para elasmobrânquios ovíparos e vivíparos lecitotróficos. O Estágio 30 é marcado por grandes mudanças, como a pré-eclosão, o início da entrada de vitelo no sistema digestivo do embrião, e início do real crescimento embrionário. O estudo fornece uma comparação com outros embriões de Chondrichthyes baseada nas características externas. O desenvolvimento das nadadeiras peitorais, que desde o começo ocupam toda a face lateral da região abdominal, é uma divergência importante entre esta raia e tubarões, exceto Squatinidae. Isto pode ser uma evidência de que filogenéticamente as Rajidae e Squatinidae são próximas, e que o desenvolvimento embrionário aporta informações relevantes para o estudo da filogenia. / The development of the skate Sympterygia acuta is describe based on a complete series of embryos from stage 17, the earliest stage in which the body forms and first visceral cleft can be distinguished, to hatching. The embryos were obtained from egg-cases caught at Cassino Beach, State of Rio Grande do Sul, Brasil. The external features of these specimens are used to establish a stage table of S. acuta. Each stage is defined by a suite of morphological characters including the opening and position of the successive visceral clefts, size and shape of pectoral (disc) and pelvic fins, shape of mouth and position of spiracles. The yolk-embryo weight relationship agrees with the pattern found in other elasmobranchs oviparous and viviparous lecithotrophic. The stage 30 is marked by great changes, as the pre-hatching, the beginning of the entrance of yolk in the digestive system of the embryo, and the beginning of the real embryonic growth. The study provides a comparison with other condrichthyan embryos based on external features. The development of the pectoral fins, which since the beginning occupies the whole side of the abdominal region, is the most important divergence between this skate and the sharks, except from Squatinidae. This might be an evidence that Rajidae and Squatinidae have a close phylogenetic relationship.

Orientador: Luis Antonio Violin Dias Pereira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-05T12:45:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moraes_SuzanaGuimaraes_D.pdf: 50010658 bytes, checksum: fd19532640ee16db1a01334371893f0f (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: As disciplinas tradicionais de embriologia humana exigem do aluno um rápido entendimento de uma série de mudanças que ocorrem simultaneamente em uma escala macro e microscópica no embrião. Os estudantes têm dificuldade em compreender os conceitos apresentados e criar mentalmente imagens tridimensionais dos processos envolvidos. O estudo do desenvolvimento humano normal e anormal é importante para facilitar o entendimento da anatomia humana e para fornecer a base fisiopatológica da correção cirúrgica ou tratamento clínico dos defeitos congênitos. No presente trabalho foi desenvolvida uma metodologia de ensino para ilustrar e aumentar a compreensão da embriologia humana normal e os defeitos congênitos. A estratégia elaborada envolve a produção e utilização de filmes de técnicas em reprodução assistida e de correção cirúrgica de malformações congênitas, animações desenvolvidas em Flash MX (Macromedia) e a documentação digital macro e microscópica de embriões, fetos e neonatos encaminhados para autópsia. Recém-nascidos e crianças portadores de defeitos congênitos, submetidos à tratamento clínico e cirúrgico também foram documentados. Todas estas imagens obtidas, incluindo os ultra-sons e radiografias, foram cuidadosamente descritas, editadas, catalogadas e organizadas em um banco digital de imagens e dados. Os achados da autópsia, história clínica e outras informações relevantes também foram inseridos no banco de dados. Estas ferramentas de ensino foram utilizadas nos módulos Morfofisiologia Humana I e II do curso de Medicina da Universidade Estadual de Campinas. As aulas de embriologia foram divididas em dois momentos. No primeiro foi descrito o desenvolvimento normal das estruturas corporais, utilizando-se dos esquemas e animações produzidas. No segundo momento, histórias clínicas, imagens de autópsias, de exames imaginológicos e cirurgias corretivas foram apresentadas aos alunos, encorajando-os a identificar as malformações e discutir as histórias clínicas, diagnóstico e terapêutica. O material didático também foi organizado e disponibilizado em um ambiente interativo, o qual foi usado pelos alunos como um complemento às aulas. No final do módulo tanto o material didático quanto a metodologia de ensino desenvolvidos neste trabalho foram avaliados através de instrumentos quantitativos e qualitativos. A maioria dos alunos aprovou a metodologia e enfatizaram a importância da integração entre as disciplinas básicas e clínicas. Esta metodologia se mostrou útil para solucionar uma dificuldade importante associada às metodologias de ensino em instituições médicas, ou seja, a falta de integração entre disciplinas básicas e clínicas / Abstract: Traditional human embryology courses are demanding in that they require students to rapidly understand the various changes that occur simultaneously on a macro and on a microscopic scale in embryos. Students have difficulty in grasping the concepts presented and in creating three-dimensional mental images of the processes invblved. Knowledge of normal and abnormal human development is important for understanding the pathophysiology, clinical treatment and surgical repair of malformations. In this study, we developed a teaching methodology to illustrate and enhance the comprehension of normal human embryology and of birth defects. The strategy involved movies of the assisted reproduction techniques, congenital malformations correction surgeries, the Flash MX (Macromedia) animation development and the macro- and microscopical digital documentation of embryos, fetuses and neonates following autopsy. Newborn babies were also photographed in a nursery. The ultrasound and macro- and microscopic images were carefully described, computer edited, catalogued and organized into a digital image database. The autopsy findings, clinical history and other relevant data were aiso stored in the database. These teaching tools were used in the Human Morpho-Physiology course of the medical curriculum at State University of Campinas. The embryology lectures were divided into two parts. During the first part, the development of the body's structures was explained, while in the second, images of selected autopsies were shown to the students, who were also encouraged to find and discuss the malformations and their clinical history, diagnosis and therapeutics. The teaching materiais were also organized on an educational software used by the students as a complement to the lectures. At the end of the course, research methodology was used aiming at evaluating the developed teaching material and method via an attitudinal measuring scale instrument. Most of the students approved of the method and emphasized the importance of integration between basic and clinical disciplines. This approach proved useful for solving an important difficulty associated with teaching methods in many medical institutions, namely, the lack of integration between basic and clinical disciplines / Doutorado / Histologia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Sergio Roberto Peres Line / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-13T02:01:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_CarolinaVieirade_M.pdf: 673929 bytes, checksum: de7a7d8f324324fae24215bb7eb7ed66 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O gene PAX9 pertence a uma família de fatores de transcrição denominada família Pax. Esse gene é expresso em tecidos embrionários como somitos, bolsa endodérmica da faringe, brotos distais dos membros e mesênquima derivado da crista neural. Alguns polimorfismos na região promotora desse gene em humanos vêm sendo associados a formas de agenesias não-sindrômicas autossômicas dominantes. No presente trabalho, nós verificamos a expressão gênica e a influência de duas seqüências da região promotora na transcrição do gene PAX9 em ensaios in vitro com células de tecido embrionário de ratos de 13.5 dias obtidas a partir de seus membros, face e regiões do mesencéfalo e romboencéfalo. Os fragmentos da região promotora foram clonados em plasmídios repórteres e transfectados nos três diferentes tecidos embrionários. Nossos resultados das análises de RT-PCR demonstraram que em culturas in vitro, as células dos membros e do SNC expressam o gene PAX9, porém, aquelas obtidas a partir da face não o expressaram. Além disso, os resultados dos ensaios de luciferase mostraram que a atividade dessa nos vetores construídos são mais fracas do que do vetor pGL3-Basic sozinho, sugerindo que essas regiões não são suficientes para guiar a transcrição gênica. / Abstract: PAX9 belongs to a transcriptional factor genes family named Pax. This gene is expressed in embryonic tissues like somites, pharyngeal pouch endoderm, distal limb buds and neural crest-derived mesenchyme. Some polymorphisms in the upstream promoter region of the human PAX9 have been associated with human non-syndromic forms of autossomal dominant agenesis. In the present study we verified the in vitro expression of this gene and the influence of two promoter sequences in the transcription of PAX9 gene, in embryo tissues obtained from digits, face and midbrain and hindbrain regions. These fragments were cloned on reporter plasmid and were transfected into the different cells cultures. Our RT-PCR results showed that in vitro E13.5 limb bud and CNS cells express PAX9, but not in derived facial region cells. Moreover, the luciferase activity of the Pax9 promoter vectors were weaker than pGL3-Basic alone, suggesting that the PAX9 sequences of promoter region are not sufficient to drive PAX9 gene transcription. / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia Buco-Dental

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-01-30T11:49:40Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação - Mayanny Carla de Carvalho Lima - 2014.pdf: 1796303 bytes, checksum: c0641cf70a66e7b2a235ae25a90eadf7 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-01-30T14:44:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação - Mayanny Carla de Carvalho Lima - 2014.pdf: 1796303 bytes, checksum: c0641cf70a66e7b2a235ae25a90eadf7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-30T14:44:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação - Mayanny Carla de Carvalho Lima - 2014.pdf: 1796303 bytes, checksum: c0641cf70a66e7b2a235ae25a90eadf7 (MD5) Previous issue date: 2014-08-28 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Knowing fish embryonic and larval development is essential to understand species biology, supply chain development and studies of breeding and reproduction of fish technology. This study aimed was to describe Tambaqui (Colossoma macropomum), pirapitinga (Piaractus brachypomus) and its hybrid tambatinga (♀C. Macropomum x ♂ P. brachypomus). embryonic and larval development. The experiment was conducted in Buritizal Fish Farm, located in Palmeiras de Goiás district. It was used three Tambaqui females, three pirapitinga females, five males tambaqui and five pirapitinga in reproductive age. Reproduction was performed by hormonal induction. Eggs were incubated in vertical incubators of 200L water capacity. Sampling took place at pre-determined time from the moment of extrusion of oocytes to 84 hours after fertilization. Samples were fixed in formalin buffered saline to 10% immediately after collection, and examined under a stereomicroscope. Tambaqui and pirapitinga females produced spherical, non-adhesive, translucent oocytes. During embryonic development stage of the zygote, cleavage, morula, blastula, gastrula, organogenesis and hatching were observed. The vegetative pole remained undivided throughout embryonic development, characterizing segmentation type meroblastic discoidal, typical egg yolk with large amounts. Pirapitinga and tambaqui eggs hatched 15 hours or 422 hours-degree after fertilization, tambatinga hybrid eggs hatched 14 hours or 394 hours-degree after fertilization, at an average temperature of 28.13 ± 0,06ºC. Parental species and hybrid under study showed characteristic embryonic and larval of telolecithal fish with eggs, wherein the newly hatched larvae, has not yet fully formed, all organic systems, limited to a few organs, and depending on the yolk for nourishment . No morphological difference in embryonic and larval development of hybrid tambatinga regarding parental species was observed. / O conhecimento do desenvolvimento embrionário e larval dos peixes é essencial para o entendimento da biologia das espécies, desenvolvimento da cadeia produtiva e estudos de melhoramento genético e de tecnologia da reprodução de peixes. Assim, objetivou-se descrever o desenvolvimento embrionário e larval do tambaqui (Colossoma macropomum), pirapitinga (Piaractus brachypomus) e do seu híbrido tambatinga (♀C. macropomum x ♂ P. brachypomus). O experimento foi realizado na Piscicultura Buritizal, localizada no município de Palmeiras de Goiás. Foram utilizados três fêmeas tambaqui, três fêmeas pirapitinga, cinco machos tambaqui e cinco machos pirapitinga em idade reprodutiva. A reprodução foi realizada através de indução hormonal. Os ovos foram incubados em incubadoras verticais, com capacidade para 200L d’água. As amostragens ocorreram em tempos pré-determinados, desde o momento da extrusão dos ovócitos até 84 horas após a fertilização. As amostras foram fixadas em solução formol salina tamponada a 10% imediatamente após a coleta e analisadas em estereomicróscopio. As fêmeas de tambaqui e pirapitinga produziram ovócitos esféricos, não adesivos e translúcidos. Durante o período de desenvolvimento embrionário foram observadas as fases de zigoto, clivagem, mórula, blástula, gástrula, organogênese e eclosão. O polo vegetativo permaneceu indivisível durante todo o desenvolvimento embrionário, caracterizando o tipo de segmentação meroblástica discoidal, típica de ovos com grandes quantidades de vitelo. Os ovos de tambaqui e pirapitinga eclodiram 15 horas ou 422 horas-grau após a fertilização, já os ovos do híbrido tambatinga eclodiram 14 horas ou 394 horas-grau após a fertilização, à temperatura média de 28,13±0,06ºC. As espécies parentais e o híbrido em estudo apresentaram desenvolvimento embrionário e larval característico dos peixes com ovos telolécitos, na qual a larva recém eclodida, ainda não apresenta todos os sistemas orgânicos completamente formados, limitada a poucos órgãos, e ainda dependente do vitelo para sua nutrição. Não foi observado nenhuma diferença morfológica no desenvolvimento embrionário e larval do híbrido tambatinga em relação as espécies parentais.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:47:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Anelise_Carradore_Lutz.pdf: 653471 bytes, checksum: 13b467a27a78c3b2a37a5189e6c50cfe (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / The catfish (Rhamdia branneri) is a native fish endemic to the Iguaçu River that has potential to grow due to their husbandry characteristics, due to this the present work aims to describe its initial development, with a view to commercial exploitation and management for conservation species. The study was conducted at the Experimental Station of Ichthyological Studies in Plant Ney Braga, reservoir Segredo, between January and February 2012. Spawnings were conducted, collected and analyzed 438 eggs, 394 individuals in the larval stage-yolk, 35 in pre-flexion, flexion 15 in, 13 in post-flexion and 1 juvenile. The eggs are yellow, non-adhesive and spherical, have a double membrane, diameter 1.13 mm, the perivitelline space has an average size of 0.21 mm during this period, there were four steps: initial cleavage, early embryo, and embryo free tail end. The larvae hatch after 26:00 hours at a temperature of 23.3 ° C, with mean standard length of 2.60 mm, are slightly pigmented and have a large yolk sac, being poorly developed. The complete absorption of the yolk sac occurs with 5.52 mm and exogenous feeding began with 39:00 hours, and can observe the presence of food in the digestive tract. It can be concluded that the characteristics of eggs, embryonic and larval development are essential for an understanding of the biology of R. branneri. Furthermore, the data constitute an information base for intensive species, and is considered of commercial interest and high potential for fish farming / O jundiá (Rhamdia branneri) é um peixe nativo endêmico do rio Iguaçu que tem potencial para cultivo devido às suas características zootécnicas, devido a isto o presente trabalho tem como objetivo descrever seu desenvolvimento inicial, com vistas ao aproveitamento comercial e manejo para a conservação da espécie. O estudo foi realizado na Estação Experimental de Estudos Ictiológicos, na Usina de Ney Braga, reservatório de Segredo, no período entre janeiro e fevereiro de 2012. Foram realizadas desovas, coletados e analisados 438 ovos, 394 indivíduos no estágio larval-vitelino, 35 em pré-flexão, 15 em flexão, 13 em pós-flexão e 1 juvenil. Os ovos são amarelos, não adesivos e esféricos, apresentam membrana dupla, diâmetro médio de 1,13 mm, o espaço perivitelino tem tamanho médio de 0,21 mm, durante este período, observaram-se quatro etapas: clivagem inicial, embrião inicial, cauda livre e embrião final. As larvas eclodem após 26:00 horas, à uma temperatura de 23,3°C, com comprimento padrão médio de 2,60 mm, são pouco pigmentadas e possuem um saco vitelino grande, sendo pouco desenvolvidas. A completa absorção do saco vitelino ocorre com 5,52 mm e a alimentação exógena iniciou com 39:00 horas, sendo possível observar a presença do alimento no trato digestório. Pode-se concluir que às características de ovos, desenvolvimento embrionário e larval são essenciais para uma melhor compreensão da biologia do R. branneri. Além disso, os dados obtidos constituem uma base de informações para a criação intensiva da espécie, sendo que é considerada de interesse comercial e com alto potencial para a piscicultura

Desenvolvimento e ciclo reprodutivo da bolacha-do-mar Clypeaster subdepressus (Echinodermata: Echinoidea) de São Sebastião, SP Resumo: Este trabalho descreve o desenvolvimento embrionário, larval e juvenil da bolacha-do-mar Clypeaster subdepressus sob microscopia de luz e eletrônica de varredura. Analisamos também o ciclo reprodutivo da espécie a partir de cortes histológicos das gônadas. A evolução morfológica da ordem Clypeasteroida (bolachas-do-mar), cerca de 55 milhões de anos atrás, esteve relacionada à ocupação de fundos arenosos. Dados morfológicos recentes e fósseis sugerem que durante a evolução das bolachas-do-mar houve retenção de características juvenis na fase adulta. Obtivemos gametas através da injeção de KCl em indivíduos adultos e fizemos a fecundação in vitro. Mantivemos os embriões e larvas em culturas a 26°C, e alimentamos as larvas com microalgas. Os óvulos (diâmetro médio de 160µm) são esféricos translúcidos e brancos. Após a entrada do espermatozóide, o envelope vitelínico endurece entre 2 e 6min; o pró-núcleo masculino inicia a migração da região periférica do óvulo até o centro 5min depois, levando 12min à 0,1µm/s para se fundir ao pró-núcleo feminino. As clivagens são holoblásticas, com a formação de macrômeros, mesômeros e micrômeros. A blástula forma-se entre 3,5 e 6,5h após a fecundação (hpf), desenvolve cílios e eclode da membrana de fertilização 7,5hpf. A gastrulação inicia-se na placa vegetativa com a ingressão unipolar das células mesenquimais primárias 10hpf. A extensão do arquêntero, ingressão das células mesenquimais secundárias e formação do esqueleto larval estendem-se até 30hpf. Em menos de 48hpf os espaços celômicos estão formados e no terceiro dia as larvas iniciam sua alimentação. O hidróporo abre-se na superfície abanal da larva e a invaginação do vestíbulo ocorre entre o braço pós-oral e o póstero-dorsal, do lado esquerdo, ao redor do quinto dia. O vestíbulo funde-se ao celoma esquerdo formando o rudimento, que desenvolve espinhos e pés ambulacrais ainda dentro da larva. As larvas tornam-se competentes ~20d após a fecundação e somente iniciam a metamorfose pela manhã, após contato com areia do habitat dos adultos ou microalgas. Após a eversão completa do rudimento, o epitélio larval regride por 1h30min. Jovens pós-metamórficos não têm boca ou ânus; possuem 15 espinhos e 15 pés ambulacrais (de 2 tipos); 5 esferídios na superfície oral; a superfície aboral ainda não possui esqueleto, exceto os remanescentes do esqueleto larval. Rudimentos do esqueleto da lanterna de Aristóteles estão organizados em 5 conjuntos com 1 dente, 2 hemipirâmides, 2 epífises cada; rudimento da rótula encontra-se intercalado entre os conjuntos. Hemipirâmides e dentes formam-se 2d após a metamorfose (dpm); dentes tornam-se mais robustos e as hemipirâmides se fundem formando as pirâmides 7dpm. O tubo digestório aparece e o ânus abre-se na superfície aboral 2dpm. A membrana peristomial torna-se funcional formando a boca 7dpm. Pedicelárias oficéfalas e tridentadas surgem na região posterior 14dpm e 30dpm, respectivamente. O crescimento dos jovens criados em laboratório foi lento: jovens pós-metamórficos tinham ~250µm de diâmetro e atingiram ~500µm de diâmetro 8 meses depois. Descrevemos 6 estágios de maturação gonadal para machos e fêmeas de C. subdepressus. Encontramos estágios de proliferação e gametas maduros com maior freqüência entre dezembro e março (verão), enquanto estágios de recuperação predominaram de maio a setembro (inverno). Fêmeas apresentaram um período de recuperação mais longo do que machos. A área ocupada pelo epitélio germinativo em um túbulo gonadal em corte transversal foi menor em indivíduos maduros. No estágio prematuro, as gônadas estiveram mais pesadas. Dados sugerem que exista um ciclo reprodutivo anual nas populações de C. subdepressus em São Sebastião, onde a recuperação das gônadas ocorre no inverno, o acúmulo de nutrientes a partir de outubro e a liberação de gametas entre fevereiro e março. / Embryonic, larval, and juvenile development of the sea biscuit Clypeaster subdepressus is described with light and scanning electron microscopy. The reproductive cycle of the species is analyzed based on histological sections of the gonads. The morphological evolution of the order Clypeasteroida (sand dollars and sea biscuits), about 55 million years ago, was associated with the occupation of sand beds. Data on morphology of living and fossil echinoids suggests that during the evolution of sea biscuits juvenile characters were retained into adulthood. We obtained ripe gametes by KCl injection into the perivisceral coelomic cavity of adults and fertilized the eggs in vitro. We kept embryos and larvae in cultures at 26 °C and fed larvae with microalgae. Eggs (mean diameter of 160 m) are spherical, translucent, and white. After sperm entry, the vitelline envelope hardens between 2 and 6 min; male pro-nucleus begins to migrate towards the center of the egg 5 min later, taking 12 min at 0.1 m/s to fuse with the female pronucleus. Cleavages are holoblastic with the formation of macromeres, mesomeres, and micromeres. Blastulae are formed between 3.5 and 6.5 h after fertilization (hpf), develop cilia, and hatch 7.5 hpf. Gastrulation begins on the vegetal plate with the unipolar ingression of primary mesenchyme cells 10 hpf. Archenteron extension, ingression of secondary mesenchyme cells, and the formation of larval skeleton occurs until 30 hpf. In less than 48 hpf the celomic pouches are formed and on day 3 larvae begin to feed. Hidropore opens on the abanal surface of larvae while vestibule invagination takes place between the post-oral and postero-dorsal arms on the left side 5 dpf. Vestibule fuses with the left celom forming a rudiment which develops spines and podia still inside the larvae. Larvae become competent _20 d after fertilization and only metamorphose in the morning, after contact with sand from adult populations or food. After complete eversion of the rudiment, the larval epidermis retraction takes 1 h 30 min. Post-metamorphic juveniles do not have anus or mouth; they have 15 spines and 15 podia (of 2 types); 5 sphaeridia on the oral surface; aboral surface does not have plates, except for the remnants of larval spicules. Rudiments of the Aristotles lantern are organized in 5 groups. Each group has 1 tooth, 2 hemipiramids, and 2 epiphysis; a rudiment rotula is placed between the groups. Hemipiramids are formed 2 d after metamorphosis (dpm); teeth become more robust and hemipiramids fuse into piramids 7 dpm. The digestive tract appears and the anus opens on the aboral surface 2 dpm. The peristomial membrane is functional and the mouth opens 7 dpm. Ophicephalous and tridentate pedicellariae appear on the posterior region 14 dpm and 30 dpm, respectively. Growth of juveniles reared in the laboratory was slow: post-metamorphic juveniles were _250 m in diameter and reached _500 m 8 months later. We described 6 stages of gonadal growth in males and females of C. subdepressus. We found premature stages and ripe gametes more frequently between December and March (summer), while recovery stages were dominant from May until September (winter). Females have a longer period of growing stage than males. The area occupied by the germinal epithelium on a transverse section of a gonadal lobe is lower in mature stage. Gonads are heavier during the premature stage. Data suggest that C. subdepressus from São Sebastião has an annual reproductive cycle where gonadal recovery occurs during winter, nutrient storage by October, and spawning between February and March.

Objetivo: Contribuir para a ampliação do conhecimento das fissuras orais, descrevendo, sob o aspecto genético-clínico, uma amostra de indivíduos com fissura pré-forame incisivo uni/bilateral incompleta e fissura pós-forame incisivo associadas. Casuística e metodologia: Foram selecionados 356 indivíduos com fissura pré-forame incisivo uni/bilateral incompleta, sem acometimento do arco alveolar, associada à fissura pós-forame incisivo, cadastrados e em tratamento no Hospital de Reabilitação de Anomalias Craniofaciais da Universidade de São Paulo, Bauru, SP. Dados de razão sexual, idade parental na época da concepção, consanguinidade parental, recorrência familial, lateralidade da fissura e presença de anomalias associadas à fissura foram investigados. Para análise dos resultados foram destacados dois grupos (Grupos I e Grupo II) da amostra total. No Grupo I foram incluídos os indivíduos que apresentaram fissura pré-forame incisivo cicatricial, independentemente do tipo de acometimento pós-forame. Indivíduos do Grupo I, que, além de apresentarem fissura pré-forame incisivo cicatricial apresentaram também algum tipo de microforma de fissura pós-forame incisivo, foram destacados para formarem também o Grupo II. Testes estatísticos de comparação foram realizados entre os Grupos e o restante da amostra e entre a amostra total e dados da literatura pertinente. Resultados e Discussão: Observou-se diferença estatisticamente significativa entre a amostra total e os dados da literatura em relação à lateralidade da fissura, razão sexual, consanguinidade, recorrência familial e presença de anomalias associadas. Observou-se, ainda, diferença estatisticamente significativa entre o Grupo II e o restante da amostra total quanto à idade paterna e, entre os Grupos I e II e a amostra total, em relação à ocorrência de múltiplas anomalias associadas à fissura. A amostra estudada apresentou, em geral, as mesmas características genético-clínicas do grupo das fissuras pré e transforame incisivo (FL/P). As diferenças encontradas não permitiram afirmar a distinção da fissura pré-forame associada à fissura pós-forame incisivo, sem acometimento do arco alveolar (FL+FP) das FL/P. Da mesma forma não foi possível afirmar, pelos resultados obtidos, que os Grupos I e II eram distintos da amostra total. Conclusão: Embora não se possa afirmar que FL+FP seja distinta das FL/P, suas características peculiares apontam para essa diferenciação. Os indivíduos com quadros de microformas de fissura constituem um grupo alvo de investigações sobre possíveis mecanismos genéticos que levam à gravidade variável dessas malformações. / Purpose: To contribute to the expansion of knowledge about oral clefts, describing the clinical and genetic aspect of a sample of individuals with cleft lip associated with cleft palate, without alveolar arch involvement, showing or not other abnormalities. Patients and methods: We selected 356 patients with incomplete cleft lip uni/bilateral associated with cleft palate, without alveolar arch involvement, registered and in treatment at the Hospital de Reabilitação de Anomalias Craniofaciais da Universidade de São Paulo, Bauru, SP. Data for sexual ratio, parental age at the time of conception, parental consanguinity, familial recurrence, laterality of cleft and presence of associated anomalies were investigated. Regarding the analysis of the results two groups were detached (Group I and Group II) from the total sample. In Group I it was included individuals who had healed cleft lip, regardless of the type of palate involvement. Individuals in Group I, which, besides having had healed cleft lip also had some type of microform cleft palate were also detached to form Group II. Statistical tests were performed for comparison between groups and remainder of the sample, and between the total sample and literature data. Results and Discussion: There was a statistically significant difference between the total sample and literature data regarding laterality of the cleft, sexual ratio, consanguinity, familial recurrence and presence of associated anomalies. There was also a statistically significant difference between Group II and the remainder of the sample regarding paternal age, and between Groups I and II and the total sample in relation to the occurrence of multiple anomalies associated with cleft. The sample has, in general, the same genetic and clinical characteristics of the group of cleft lip with or without cleft palate (CL/P). The differences did not allow distinction between cleft lip associated cleft palate without involvement of the alveolar arch (CL+CP) and CL/P. Likewise it is not possible to affirm, from the results obtained, that Groups I and II are distinct from the total sample. Conclusion: Although we can not say that CL+CP is distinct from the CL/P, its peculiar features indicate to this differentiation. Individuals with microforms of cleft constitute a target group for research on possible genetic mechanisms that lead to varying severity of these malformations.

Orientadores: Sergio Roberto Peres Line, Marcelo Rocha Marques / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-20T05:35:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrade_SimoneCaixetade_D.pdf: 127365203 bytes, checksum: 4736aaa809aadf03b1ad27e52dbb8b30 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A dentição não é somente o maior componente do complexo crânio facial dos mamíferos, mas um modelo útil de desenvolvimento, combinado em um sistema de um único órgão, onde ocorrem fenômenos de organização espacial, simetria, aquisição de formas complexas e citodiferenciação órgão-específica. Durante os primeiros estágios do desenvolvimento do dente ocorre uma série de interações entre o epitélio oral e mesênquima, por meio de diferentes moléculas sinalizadoras ao longo do futuro processo alveolar. Bmp4 atua ativando Msx1 na região de incisivos e molares e restringe a ação de Barx1 apenas na região dos molares. A interação entre o sinal mesenquimal Bmp4 e o sinal epitelial Shh faz parte dos primeiros eventos da formação do germe dentário no estágio botão. As fases seguintes são os estágios capuz e sino. Mutações nos genes Msx1 e Barx1 impedem o desenvolvimento do germe dentário além do estágio botão. Para o gene Msx1 essa condição é permanente, enquanto para Barx1 é temporal e o crescimento do germe dentário é retomado após o estágio E14.5 em camundongos. O objetivo desse trabalho é investigar a interação genética entre Msx1 e Barx1 no desenvolvimento do primeiro molar inferior na fase sino (E16.5) e qual a influência da ausência do gene Msx1 na dimensão das estruturas vestigiais MS, R2 e do primeiro molar inferior nas fases botão (E13.5) e sino (E16.5). Esse estudo também se propôs a avaliar se genes Barx2, Barhl1 e Barhl2 estariam expressos em botões de molares inferiores (E13.5). Os resultados indicaram que na ausência completa de Barx1, um único alelo de Msx1 não é suficiente para promover a evolução do botão dentário a capuz em camundongos E16.5 Barx1;Msx1 e não houve expressão de Bmp4 nesses camundongos. A expressão nula dos genes Barx2, Barhl1 e Barhl2 em botões de molares inferiores em camundongos wild-type E13.5 indica que genes da família Bar não possuem nenhum papel no desenvolvimento de molares inferiores. Ainda, dados alométricos de Msx1-/- (E13.5 e E16.5) indicam que a mutação no gene Msx1 e consequente ausência de expressão de Smad1-5-8 e Shh não impede o crescimento no sentido proximal-distal. Conclui-se que existe interação entre Barx1 e Msx1. Barx1 é necessário para controlar os níveis de expressão de Bmp4. Barx2 possivelmente desempenha um papel importante na morfogênese de pré-molares e incisivos inferiores. O atraso no desenvolvimento dos molares inferiores de camundongos Msx1-/- é permanente ao estágio botão, contudo, os botões dentários destes camundongos continuam a exibir um crescimento no sentido proximal-distal no estágio E16.5 / Abstract: The dentition is not only the largest component of the craniofacial complex of mammals, but a useful model of development, combined in a single organ system, where phenomena of spatial organization, symmetry, complex shape acquisition and organ-specific cytodifferentiation occur. During the early stages of tooth development, series interactions take place between oral epithelial and mesenchyme by different signalling molecules along the future alveolar process. Bmp4 acts by activating Msx1 in the region of incisors and molars and it restricts the action of Barx1 only to the molars' region. The interaction between mesenchymal Bmp4 signal and Shh epithelial signal is part of the first events of tooth germ formation at the bud stage. The next stages are cap and bell. Mutations in Msx1 and Barx1 genes inhibit the development of the tooth germ beyond the bud stage. For the Msx1 gene, this condition is permanent, while for Barx1 is temporal and the growth of tooth germ is retaken after stage E14.5 in mice. This study investigates the genetic interaction between Msx1 and Barx1 in the first lower molar development at the bell stage (E16.5), the effect of the absence of Msx1 gene in the size of the vestigial structures MS, R2 and first lower molar bud (E13.5) and bell (E16.5). This study also aimed to assess whether Barx2, Barhl1 and Barhl2 genes were expressed in lower molars buds (E13.5). The results indicated that in the complete absence of Barx1, a single allele of Msx1 is not sufficient to promote the development of tooth bud to cap in E16.5 Barx1;Msx1 mice, and there was no expression of Bmp4 in these mice. The null expression of Barx2, Barhl1 and Barhl2 genes in lower molar buds in E13.5 wild-type mice indicates that genes of the Bar family do not exert any role in the development of lower molars. Still, allometric data on Msx1-/- (E13.5 and E16.5) indicates that Msx1 gene mutation and consequently the absence of Shh and SMAD1-5-8 expression do not prevent growth towards proximal-distal. It is concluded that there is interaction between Barx1 and Msx1. Barx1 is necessary to control the expression levels of Bmp4. Barx2 might play a role in the lower premolars and incisors morphogenesis. The delayed development of Msx1-/- lower molars is permanent at the bud stage, however, the tooth buds of these mice continue to exhibit growth towards proximal-distal at E16.5 stage / Doutorado / Histologia e Embriologia / Doutor em Biologia Buco-Dental

Orientador: William Jose da Silva / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T22:26:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Prioli_LaudenirMaria_D.pdf: 19062163 bytes, checksum: 03b4b0ec7b380705cc9c5044fb32b089 (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: Cultura de tecidos, controle genético da embriogênese somática e variação somacional em milho (Zea mays L.). Trinta e quatro linhagens homozigóticas de milho foram avaliadas quanto à capacidade de regeneração de plantas "in vitro". A maioria dessas linhagens é originada a partir de três germoplasmas: Cateto, uma raça de milho flint adaptada à Costa Atlântica da região sul da América do Sul, Tuxpeno, uma raça de milho dente adaptada a baixas altitudes do Golfo do México e uma população de geração avançada de milho Tuxpeno x Teoslnte. Foram realizados três experimentos Independentes, Iniciados em fevereiro e maio de 1985 e fevereiro de 1986. , Embriões Imaturos foram utilizados para a Indução de calos em meio N6 suplementado com 2,4-D (2,5 uM e 10 uM) e sacarose (3% e 6%). Regeneração de plantas a partir de calos embriogênicos compactos (Tipo I) foi obtida para vinte linhagens. A freqüência de Indução de calos embriogênicos foi significativamente diferente entre os genótipos utilizados. As linhagens Cateto foram as que melhor responderam para a capacidade de regeneração em todos os experimentos. Diferenças significativas para efeito de época na freqüência de produção de calos embriogênicos foram também encontradas. O meio contendo 2,4-D (10 uM) e sacarose (6%) foi o melhor para a indução de calos embriogênicos compactos. Por outro lado, o meio contendo 2,4-D (10 uM) e sacarose 3%) foi o mais adequado para a manutenção dos calos. PIântulas foram regeneradas a partir dos calos em meio sem 2,4- D, transferidas para vaso e, posteriormente, para o campo ou casa de vegetação. Calos embriogênicos friáveis (Tipo II) foram obtidos para cinco linhagens e mantidos em cultura, sem perder a capacidade de regeneração, por mais de dois anos. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Tissue culture, genetic control of somatic embryogenesis and somacional variation in maize ( Zea mays L.) Thirty-four Brazilian maize inbred lines were tested for "in vitro" plant regeneration capacity. Most in breds were derived from three gene pools: Cateto, a flint autochthonous race adapted to Southern Atlantic Coast of South America, Tuxpeno a dent race adapted to low altitude of Gulf of Mexico, and a Tuxpeno x Teosinte advanced generation population. Three Independent experiments, initiated In February 1985, May 1985, and February 1986 were made. Immature embryos were used for callus induction on N6 medium supplemented with 2,4-D (2,5uM and 10 uM) and sucrose (3% and 6%). Plant regeneration from compact embryogenic callus (Type I) was obtained for twenty inbreds. Frequency of embryogenic callus induction was significantly different among the genotypes. The Cateto inbreds were the most responsive in yielding embryogenic callus in alI experiments. Significant effect of growth seasons on the production frequency of embryogenic callus was also observed. The medium containing higher levels of 2,4-D (10 uM) and sucrose (6%) was the best for embryogenic callus (Type I) induction. On the other hand, the medium containing 2,4-D (10uM) and sucrose (3%) was the most appropriate for callus maintenance. Plantlets were obtained from embryogenic cal 11 on medium without 2,4-D and transferred to greenhouse or to the field. Embryogenic friable calli (Type II) were obtained for five maize inbreds and have been maintained in culture, with regeneration capacity, for more than two years. ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Genetica / Doutor em Ciências Biológicas

A sinalização pelo ácido retinóico (AR) é fundamental para o correto desenvolvimento embrionário. A principal enzima responsável pela síntese do AR durante o desenvolvimento é a Raldh2 (Aldh1a2), cujo padrão de expressão é bastante dinâmico. Apesar dos padrões de expressão da raldh2 e seus papéis durante o desenvolvimento já estarem bem estabelecidos, pouco se conhece sobre sua regulação. Estudos de bioinformática identificaram no gene raldh2 um elemento não-codante conservado (CNE), presente de anfíbios até humanos, denominado Raldh2.2. Utilizando ensaios de eletroporação e análise de camundongos transgênicos, nós mostramos que o CNE Raldh2.2 é um enhancer responsável por ativar a expressão da raldh2 na medula espinhal dorsal de tetrápodes e que seu padrão de atividade coincide em aves e camundongos. Através de ensaios de deleções e mutações sítio-direcionadas desse enhancer, identificamos quatro elementos cis regulatórios responsáveis por ativá-lo na placa do teto e em interneurônios dorsais da medula espinhal. A regulação positiva da atividade desse enhancer ocorre de maneira redundante por três sítios Tcf-homeobox, enquanto sua inibição nos interneurônios ventrais da medula espinhal se dá por dois sítos repressores, um Lim-homeodomínio e um Tgif. Neste trabalho, utilizando hibridação in situ dupla para raldh2 e math1/cath1, descrevemos um novo território transiente de expressão da raldh2, os interneurônios dorsais 1. Esses interneurônios dão origem a circuitos ascendentes e a interneurônios comissurais intraespinhais, sugerindo papéis para a sinalização pelo ácido retinóico na ontogenia dos circuitos proprioceptivos espinocerebelar e intraespinhal. / Retinoic acid (RA) signaling is crucial for correct embryonic development. Raldh2 is the major enzyme involved in retinoic acid synthesis during early development and its expression pattern is dynamic. Raldh2 expression patterns and its roles during development are well known, but little is known about its regulation. Bioinformatic analysis identified a conserved non-coding element (CNE) in the raldh2 gene conserved from amphibians to humans, called Raldh2. Using electroporation assays and transgenic mice analysis we showed that CNE Raldh2.2 is an enhancer that activates raldh2 in the dorsal spinal cord in tetrapods and that its activity pattern is the same in chicken and mice. Using deletions assays and site-directed mutagenesis, we identified four cis regulatory elements that activate this enhancer in the roof plate and dorsal interneurons of the spinal cord. This enhancer is activated by a redundant mechanism through three predicted Tcf-homeobox biding sites and it is repressed in ventral interneurons via two repressors sites, a Lim-homeodomain and a Tgif. In this thesis, using in situ hybridization, we described a new transient territory of raldh2 expression, the dorsal interneurons 1. These interneurons give rise to ascending circuits and intraspinal commissural interneurons, suggesting roles for retinoic acid signaling in the ontogeny of spinocerebellar and intraspinal proprioceptive circuits.