O objetivo desse trabalho foi avaliar a influência da resistência de união de sistemas adesivos à dentina irrigada com substâncias endondônticas, após a degradação da interface adesiva e análise morfológica da interface adesiva por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV). Foram selecionados sessenta terceiros molares, que tiveram a porção oclusal removida e planificada expondo a dentina profunda. Os espécimes foram irrigados com hipoclorito de sódio a 2,5% por 30 minutos e em seguida em EDTA 17% por 5 minutos. Após a irrigação da superfície detinária os dentes foram divididos aleatoriamente em seis grupos (n = 10) de acordo com o sistema adesivo empregado: G1 e G2 - Clearfil (Kuraray); G3 e G4 - Single Bond 2 (3M) e G5 e G6 - XP Bond (Dentsply). Após a aplicação do sistema adesivo, foi confeccionado um platô de resina composta Z100 (3M). A degradação da interface adesiva foi realizada por meio de estocagem em água deionizada/ciclagem térmica: 24 horas de estocagem em água deionizada/nenhum ciclo (grupos G1, G3 e G5) e 6 meses de estocagem em água deionizada/12.000 ciclos (grupos G2, G4 e G6). Após os períodos pré-estabelecidos em cada grupo, os conjuntos dente/resina foram seccionados de forma a se obter 4 palitos de aproximadamente de 1mm2, que foram submetidos ao teste de microtração. A análise morfológica da interface foi realizada por meio de MEV. Os dados obtidos foram submetidos a ANOVA e teste de Tukey ao nível de 5%. Verificou-se que houve diferença significativa entre os adesivos (p<0,01). A durabilidade da adesão da resina composta a dentina irrigada com solução endodôntica não foi afetada após 6 meses de estocagem em água e 12.000 ciclos térmicos (p<0,05). A análise da interface adesiva evidenciou que os sistemas adesivos não alteraram o padrão de união mesmo após 6 meses de ciclagem térmica e degradação em água, exceto para o sistema adesivo XP Bond. Pode-se concluir que a dentina irrigada com NaOCl e EDTA apresentou menor resistência a microtração quando do emprego do sistema adesivo XP Bond. A degradação da interface por meio do armazenamento em água e ciclagem térmica não influenciou na resistência de união, independente do sistema adesivo empregado. / The aim of the present study was to survey the influence of endodontic irrigants on the adhesion resistance of adhesive systems to human dentin, after the degradation of adhesive interface and morphologic analysis of adhesive interface for Scanning Electronic Microscopy SEM. Sixty molar thirds were selected. The deep dentin was exposed removing and ground the oclusal portion. The specimens were irrigated with sodium hypochlorite 2,5% for 30 minutes followed by EDTA 17% for 5 minutes. Subsequently, teeth were divided randomly in six groups (n=10) accordingly to adhesive system applied: G1 and G2 Clearfil (Kuraray); G3 e G4 - Single Bond 2 (3M) e G5 e G6 - XP Bond (Dentsply). After adhesive system application, a composite resin Z100 (3M) was built up created. The degradation of the adhesive interface was realized by storage the specimens in deionized water and thermocycling: 24 hours of deionized water storage/no cycle (groups G1, G3 and G5) and 6 months storage in deionized water/12.000 cycles (groups G2, G4 and G6). After pre-established periods of each group, the systems tooth/resin were sectioned in order to obtain 4 sticks of approximately 1mm2, which were subjected to microtensile bond strength test. The morphologic analysis of interface was performed for SEM. Results were analyzed with ANOVA and Tukey test to level 5%. Significant difference between adhesives was verified (p<0,01). The water storage (6 months) coupled with thermocycling (12.000 cycles) did not affected significantly the resistance to microtensile bond strength of the dentin (p<0,05). The conclusion is that dentin irrigated with NaOCl and EDTA presented less resistance to microtensile bond strength when XP Bond Adhesive system was utilized. The interface degradation through water storage and thermocycling had no effect on the resistance of the dentin bond, independently of the adhesive system applied.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-03-26Bitstream added on 2014-06-13T20:56:47Z : No. of bitstreams: 1 nakazone_pa_me_arafo.pdf: 1385943 bytes, checksum: 18dd369a98d86e1915a7b9b3ea913332 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A radiografia periapical convencional é o método mais utilizado na detecção e controle de lesões periapicais após o tratamento endodôntico. Atualmente, a tomografia computadorizada de feixe cônico (TCFC) tem sido amplamente utilizada, não apenas para uso clínico como também para fins de pesquisa. Diferentes metodologias têm sido descritas com o propósito de avaliar a instrumentação dos canais radiculares. Em associação aos avanços nos softwares de imagem, a TCFC tem se mostrado importante no desenvolvimento de métodos de avaliação, especialmente na área de Endodontia, como por exemplo, para avaliações do preparo do canal radicular e do reparo periapical após o tratamento endodôntico. No entanto, a fim de se obter métodos de avaliação comparativa mais criteriosos, e que possibilitem o uso da técnica de subtração digital (SD), torna-se importante a padronização das imagens. Na primeira parte deste estudo foi realizada a avaliação comparativa da mensuração da lesão periapical por dois métodos: a tomografia computadorizada com aquisição volumétrica (de feixe cônico) e a radiografia periapical digitalizada, nos períodos final do tratamento endodôntico (T0) e três meses de proservação (T1). Os dados obtidos para as mensurações radiográficas e tomográficas foram submetidas aos testes T Pareado e ANOVA, com nível de significância de 5%. Os resultados mostraram que as medidas obtidas nos métodos, radiográfico e tomográfico, foram semelhantes em ambos os períodos avaliados, demonstrando redução significativa da área de lesão aos três meses de proservação (p<0,05) e de forma semelhante nos dois métodos de avaliação (p>0,05). A partir dos resultados pode-se concluir que os métodos de avaliação por imagem, radiográfico e tomográfico, evidenciaram a regressão de lesões periapicais, três meses após o tratamento endodôntico... / Periapical conventional radiography is the most used method in detection and control of periapical lesions after endodontic treatment. Actually, cone beam computed tomography (CBCT) has been widely used, not only for clinical use as also for research ends. Different methods have been described with the proposal of evaluate root canal instrumentation. In association to image software development CBCT has revealed to be important in the evaluation methods development, especially in Endodontics, for example, in the evaluation of root canal preparation and in the evaluation of periapical repair after endodontic treatment. However, in order to obtain more criterious comparative evaluation methods, which enable the use of radiographic subtraction technique, images standardization becomes important. In the first part of this study, a comparative evaluation of periapical lesion measurement was realized by two methods: volumetric acquisition computed tomography (cone beam) and periapical digitalized radiography, in the periods at the end of endodontic treatment (T0) and at three months of follow up (T1). Data obtained were submitted to T and ANOVA tests, with 5% of significance. The results showed that the measurements obtained in radiographic and tomographic methods were similar in both of evaluated periods demonstrating significant decrease of lesion area after three months (p<0,05) and similarly in these two evaluation methods. From the results is concluded that radiographic and tomographic evaluation methods showed the regression of periapical lesions, at three months of follow up period (T1), providing similar measurements. In the following parts of this study, standardization techniques for images obtained from volumetric acquisition computed tomography or cone beam (CBCT) were proposed. Both the techniques used the Xoran software (Xoran Technologies – Ann Arbor – Michigan/USA)... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-09-26Bitstream added on 2014-06-13T18:20:51Z : No. of bitstreams: 1 rodrigues_vmt_me_arafo.pdf: 1828771 bytes, checksum: 5d0801654796b305a70aa54e7e47abc7 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A proposta do estudo foi avaliar a microbiota endodôntica de dentes de humanos sem vitalidade pulpar com ou sem lesão periapical visível radiograficamente por meio das técnicas de Checkerboard DNA-DNA Hybridization e cultura microbiológica. Foram utilizados 20 dentes unirradiculados, divididos em casos de necrose pulpar sem lesão periapical (Grupo I) e dentes com necrose pulpar e lesão periapical (Grupo II). A colheita do material do canal radicular foi realizada com lima K e cones de papel absorvente. Para a técnica de cultura, as amostras foram semeadas em meios As, Ask, Ms e Tio's, para avaliação da presença de microrganismos anaeróbios, aeróbios e facultativos. Para a técnica de Checkerboard DNA-DNA Hybridization, foi realizado o processamento do DNA extraído das amostras e das sondas de DNA de 33 microrganismos. Os resultados mostraram nas duas técnicas empregadas a presença de microrganismos. A técnica de hibridação DNA - DNA checkerboard permitiu a identificação de 31 espécies diferentes no Grupo I e de 32 espécies diferentes no Grupo II. Fusobacterium nucleatum spp polymorphum (80%), Porphyromonas gingivalis (80%), Prevotella melaninogenica (90%) predominaram no Grupo I. As sondas Streptococcus mitis e Selenomonas noxia não foram detectadas em nenhuma amostra deste grupo. No Grupo II, Fusobacterium nucleatum spp polymorphum, Neisseria mucosa e Porphyromonas gingivalis foram detectadas em todos os casos e Selenomonas noxia não foi encontrada em nenhuma das amostras deste grupo. Houve tendência para maior presença de bactérias anaeróbias obrigatórias moderadas no Grupo II, embora sem diferença significante (p>0,05), em relação ao Grupo I, de acordo com a cultura microbiológica. Foi observada maior freqüência de espécies bacterianas anaeróbias obrigatórias moderadas nos canais radiculares, tanto para o Grupo I como para o Grupo II, de acordo com a técnica de hibridação DNA-DNA checkerboard. / The purpose of this study was to evaluate the endodontic microbiota from human's teeth, with no pulp vitality, with or without radiographic chronic periapical lesion, using a culture microbiologic method and checkerboard DNA-DNA hybridization technique. The whole sample, with 20 single root's teeth, was collected and divided into: teeth with no pulp vitality without periapical lesion (Group I) and teeth with no pulp vitality with periapical lesion (Group II). The samples were obtained with K file and absorbent paper points. To the culture technique, the samples were grown by using media like As, Ask, Ms and Tio's. To checkerboard DNA-DNA hybridization technique, the samples of DNA extracted crossed with microorganisms' DNA obtained from ATCC. The results demonstrated in two techniques used that in all the samples identified microorganisms, at least 20 ufc/ml. The checkerboard DNA-DNA hybridization technique demonstrated the identification of 31 different species of microorganisms in Group I and 32 different species of microorganisms in Group II. Fusobacterium nucleatum spp polymorphum (80%), Porphyromonas gingivalis (80%), Prevotella melaninogenica (90%) predominated in Group I. The probes Streptococcus mitis and Selenomonas noxia were not detected in no sample in this group. At Group II, Fusobacterium nucleatum spp polymorphum, Neisseria mucosa and Porphyromonas gingivalis were detected in all cases, and Selenomonas noxia was not present in sample of this group. It was tendency to greater number strict anaerobe microorganisms in Group II, however without statistical significance (p>0.05), in relation Group I, in accord with culture microbiologic method. It was detected a greater frequency of anaerobe strict microorganisms species in root canal, in both Groups I and II, in accord with the checkerboard DNA-DNA hybridization technique.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-03-24Bitstream added on 2014-06-13T19:52:06Z : No. of bitstreams: 1 carvalho_fb_me_arafo.pdf: 565333 bytes, checksum: 1218d203c1a346abccf56852aac282d9 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo desse estudo foi avaliar as alterações radiográficas de lesões periapicais, nos períodos de proservação de 0, 2, 4 e 6 meses após o tratamento endodôntico, por meio da subtração radiográfica digital realizada pelo programa Adobe Photoshop 6.0, e da demarcação de seus limites externos na tela do computador utilizando o programa VixWin 2000. E em seguida, fazer uma comparação entre as áreas de reparação ou perda óssea visualizadas nos dois programas. Foram utilizados 13 dentes anteriores de humanos com necrose pulpar e lesão periapical crônica, que foram tratados endodonticamente. Após o tratamento endodôntico, para realização da radiografia final, foi utilizada uma técnica para padronização das imagens que consistiu no uso de um posicionador para filmes radiográficos, o qual foi estabilizado com material de impressão (silicona) colocado sobre os bordos incisais dos dentes radiografados. Para as radiografias de proservação realizadas 2, 4 e 6 meses após o tratamento endodôntico foi utilizado o mesmo método. Os filmes radiográficos foram processados automaticamente, digitalizados por meio de um scanner, e em seguida feita a subtração digital. As imagens digitalizadas de 0, 2, 4 e 6 meses, foram importadas para o programa VixWin 2000 para que os limites externos das lesões periapicais nos diferentes períodos de proservação fossem delimitados por dois examinadores. As imagens geradas pela subtração digital também foram levadas para o programa VixWin 2000 para que as áreas das alterações radiográficas fossem delimitadas pelos examinadores. Os resultados mostraram uma correlação não significante entre as medidas das áreas de reparação ou perda óssea detectadas pelos dois programas (o coeficiente de correlação intraclasse variou de 0,02 a 0,45)... / The aim of this study was to evaluate the radiographics changes of periapical lesions in the follow-up periods of 0, 2, 4 and 6 months after endodontic treatment using digital subtracted radiography in the software Adobe Photoshop 6.0 and by delimiting yours edges with a pointing device in the software VixWin 2000. The comparison of the areas of repair or bone loss visualized in the two softwares was also evaluated. It were used 13 human teeth with no pulp vitality and chronic periapical lesion that were root canal treated. After the root canal treatment standardized periapical radiographs were obtained immediately postoperatively and at 2, 4, and 6 months using individualized silicone bit blocks and Rinn XCP film holder. Each periapical radiographs were automatic processing, digitized by a scanner and then subtracted. The digitized radiographic images of 0, 2, 4 and 6 months after root canal treatment were imported to the software VixWin 2000 in order to the edges of the periapical lesions were drawn with a pointing device for two examiners. The subtracted digital images were also imported to the software VixWin 2000 in order to the areas of repair or bone loss were drawn by the examiners. The results showed no significant correlation between the measure of the areas of repair or bone loss visualized in the two softwares (the intraclass correlation coefficient varied from 0,02 to 0,45). The results of interexaminer assessment demonstrated a significant correlation between the measure of the areas of repair or bone loss detected by the two examiners in the softwares (the intraclass correlation coefficient varied from 0,82 to 0,99). The bone repair was detected in all periodos of follow-up, been more evident in the period from the final of root canal tretament and two months of follow-up.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-07-13Bitstream added on 2014-06-13T20:52:12Z : No. of bitstreams: 1 pappen_fg_me_arafo.pdf: 1887339 bytes, checksum: f51c44a03f5190774551d9c8c66ee62b (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste estudo foi a avaliação da microbiota dos canais radiculares de dentes de cães sem vitalidade pulpar, com e sem reação periapical crônica por meio dos métodos de cultura microbiológica e hibridação DNA-DNA checkerboard, além da análise da reparação dos tecidos apicais e periapicais após o tratamento endodôntico de dentes sem vitalidade pulpar sem ou com lesão periapical e dentes com vitalidade pulpar. Foram utilizados 60 pré-molares de 3 cães. No grupo I foram realizados os casos de biopulpectomia; no grupo II, após a abertura coronária, os canais radiculares permaneceram expostos por 30 dias, visando a contaminação dos mesmos (necropulpectomia I); e no grupo III, os canais radiculares permaneceram expostos ao meio bucal por 7 dias, sendo a seguir, selados por 60 dias, quando as lesões periapicais foram evidenciadas radiograficamente (necropulpectomia II). Anteriormente ao preparo biomecânico foi realizada a colheita de material dos canais radiculares para análise microbiológica dos dentes sem vitalidade pulpar. O tratamento endodôntico foi realizado em todos os grupos, em uma única sessão, e após 180 dias os cães foram mortos e as peças preparadas para análise histopatológica. Os resultados da análise microbiológica por meio da técnica de cultura demonstraram o predomínio de anaeróbios estritos e aeróbios em relação aos microrganismos facultativos. A técnica de checkerboard demonstrou o predomínio de anaeróbios estritos nas duas situações avaliadas. Nos dois métodos de análise microbiológica foi possível observar maior número de células bacterianas no Grupo II, onde os canais radiculares permaneceram expostos ao meio bucal por 30 dias. Os resultados histopatológicos demonstraram presença de infiltrado inflamatório severo, reabsorção apical e óssea nos grupos II e III, com aspectos semelhantes para... . / The aim of this study was to evaluate the microbiota of root canals from dog's teeth, with no pulp vitality, with or without radiographic chronic periapical lesion, using a culture microbiologic method and checkerboard DNA-DNA hybridization technique. The repair of apical and periapical tissues was evaluated after the endodontic treatment of root canals, with no pulp vitality, with or without chronic periapical lesion and with vital pulp. It were used dog's premolars from 3 animals, divided into three groups: group I, treatment of teeth with vital pulps; group II, after coronal opening the root canals were exposed to oral environment during 30 days (teeth with no pulp vitality without chronic periapical lesion); and in group III, the root canals were exposed to oral environment during 7 days, and after this, sealed during 60 days, until the radiographic observation of the presence of periapical lesion. Before the biomechanical preparation, the microbiologic samples were obtained from groups II and III. Endodontic therapy was conducted in three groups, in one-visit treatment, and after 180 days, the dogs were killed and the obtained histological sections were stained with hematoxylin-eosin for optical microscopic analysis of the apical and periapical repairing. The results of microbiologic evaluation using culture technique, showed the predominance of obligate anaerobic and aerobic bacteria in both groups, when compared to facultative species. The method checkerboard demonstrated the predominant occurrence of obligate anaerobes in the both clinical situations that were evaluated. For the two microbiological methods used it was possible to observe a greater number of cells in group II, where the root canals were kept exposed to oral environment during 30 days. The histhological results showed inflammatory... (Complete abstract, click electronic address below).

Submitted by MARIANE MAFFEI AZUMA null (mariane_azuma@hotmail.com) on 2017-10-17T00:34:59Z No. of bitstreams: 1 16-10-17 TESE-Mariane.pdf: 56309410 bytes, checksum: 029a387b6b6982b449c514285f1d5efc (MD5) / Approved for entry into archive by Monique Sasaki (sayumi_sasaki@hotmail.com) on 2017-10-18T19:09:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 azuma_mm_dr_araca.pdf: 56309410 bytes, checksum: 029a387b6b6982b449c514285f1d5efc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-18T19:09:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 azuma_mm_dr_araca.pdf: 56309410 bytes, checksum: 029a387b6b6982b449c514285f1d5efc (MD5) Previous issue date: 2017-08-25 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência da suplementação alimentar com os ácidos graxos ômega-3 no processo inflamatório local e sistêmico de ratos com periodontite apical (PA). Foram utilizados 40 ratos da linhagem Wistar distribuídos em quatro grupos (n= 10): ratos controle (C); ratos suplementados com ômega-3 (C-O); ratos com PA induzida (PA); ratos com PA induzida suplementados com ômega-3 (PA-O). Para a indução da PA, as polpas dentárias foram expostas ao meio bucal durante 30 dias. O ômega-3 foi administrado pelo método gavage, uma vez ao dia, 15 dias antes da exposição pulpar e 30 dias depois da exposição pulpar. Após este período, o sangue foi coletado, por meio de punção cardíaca, para a realização do hemograma e quantificação sérica das citocinas pró-inflamatórias fator de necrose tumoral alfa (TNF-), Interleucina 6 (IL-6) e Interleucina 17 (IL-17), pelo método ELISA. Após a coleta sanguínea, os ratos foram eutanasiados e as maxilas e mandíbulas foram coletadas e submetidas a processamento para análise histológica, em hematoxilina e eosina, bem como análise imunoistoquímica para os marcadores fosfatase ácida resistente ao tartrato (TRAP), osteocalcina (OCN), TNF-, IL-6, IL-17, Interleucina 1 (IL-1) e Interleucina 10 (IL-10). Os resultados foram analisados por testes estatísticos específicos para cada caso (p<0,05). O grupo PA apresentou infiltrado inflamatório mais intenso, bem como maior área de reabsorção óssea na região periapical quando comparado ao grupo PA-O (p<0,05). Além disso, observou-se maior número de osteoclastos e citocinas pró-inflamatórias, representadas por TNF-, IL-1, IL-6 e IL-17, bem como menor número de osteoblastos e da citocina anti-inflamatória IL-10 no grupo PA quando comparado ao grupo PA-O (p<0,05). Em relação às alterações sistêmicas, a presença de quatro focos de PA aumentou os níveis séricos de leucócitos, linfócitos, monócitos, TNF- e IL-6 (p<0,05) e a suplementação alimentar com os ácidos graxos ômega-3 diminuiu os níveis séricos de leucócitos e linfócitos de ratos com PA (p<0,05). Conclui-se que a suplementação alimentar com os ácidos graxos ômega-3 reduz o processo inflamatório e a reabsorção óssea da região periapical, bem como as células inflamatórias do sangue, de ratos com infecção endodôntica. / The aim of this study was to evaluate the effects of the dietary supplement omega 3 polyunsaturated fatty acids on the local and systemic inflammatory response of rats with apical periodontitis (AP). Forty male rats were divided into groups: control untreated rats (C), control rats treated with omega 3 alone (C-O), rats with pulp exposure-induced apical periodontitis (AP), and rats with pulp exposure-induced AP treated with omega 3 (AP-O). The pulps were exposed to the oral environment during 30 days for the development of AP. Omega 3 was administered by gavage method, once a day, for 15 days before pulp exposure and, subsequently, 30 days after pulp exposure. After 30 days, blood samples were collected by cardiac puncture and subjected to blood count and the serum levels of the proinflammatory cytokines tumor necrosis factor alpha (TNF-), Interleukin 6 (IL-6), and Interleukin 17 (IL-17) were measured using ELISA method. Subsequently, rats were killed and maxillae and jaws were collected and subjected to histologic analysis, using hematoxylin and eosin staining. Immunohistochemistry was performed in order to detect TRAP-positive osteoclast cells (TRAP), Osteocalcin-positive osteoblasts cells (OCN), TNF-, IL-6, IL-17, Interleukin 1 (IL-1) and Interleukin 10 (IL-10). Results from the different analysis were subjected to statistical analysis, using specific statistical methods according to each analysis (p<0.05). AP group showed more severe inflammatory infiltrate as well as higher area of bone resorption in the periapical region compared to AP-O group (p<0.05). Moreover, the number of TRAP-positive cells as well as proinflammatory cytokines, such as TNF-, IL-1, IL-6, and IL-17 were higher in AP group compared to AP-O group (p <0.05). In addition, the number of OCN-positive cells and the anti-inflammatory cytokine IL-10 decreased in AP group compared to AP-O group (p<0.05). Regarding systemic alterations, the presence of four AP focus increased the serum levels of leukocytes, lymphocytes, monocytes, TNF-, and IL-6 (p<0.05). The dietary supplement with omega 3 decreased the serum levels of leukocytes and lymphocytes of rats with AP (p<0.05). It may be concluded that the dietary supplement with omega 3 fatty acids decrease the inflammatory process and the pathological bone resorption in the periapical region, as well as serum inflammatory cells of rats with apical periodontitis. / FAPESP: 2013/26390-0 / FAPESP: 2015/07107-0

Orientador: Mário Tanomaru Filho / Banca: Mario Roberto Leonardo / Banca: Ana Paula Vieira Colombo / Resumo: O objetivo deste estudo foi a avaliação da microbiota dos canais radiculares de dentes de cães sem vitalidade pulpar, com e sem reação periapical crônica por meio dos métodos de cultura microbiológica e hibridação DNA-DNA checkerboard, além da análise da reparação dos tecidos apicais e periapicais após o tratamento endodôntico de dentes sem vitalidade pulpar sem ou com lesão periapical e dentes com vitalidade pulpar. Foram utilizados 60 pré-molares de 3 cães. No grupo I foram realizados os casos de biopulpectomia; no grupo II, após a abertura coronária, os canais radiculares permaneceram expostos por 30 dias, visando a contaminação dos mesmos (necropulpectomia I); e no grupo III, os canais radiculares permaneceram expostos ao meio bucal por 7 dias, sendo a seguir, selados por 60 dias, quando as lesões periapicais foram evidenciadas radiograficamente (necropulpectomia II). Anteriormente ao preparo biomecânico foi realizada a colheita de material dos canais radiculares para análise microbiológica dos dentes sem vitalidade pulpar. O tratamento endodôntico foi realizado em todos os grupos, em uma única sessão, e após 180 dias os cães foram mortos e as peças preparadas para análise histopatológica. Os resultados da análise microbiológica por meio da técnica de cultura demonstraram o predomínio de anaeróbios estritos e aeróbios em relação aos microrganismos facultativos. A técnica de checkerboard demonstrou o predomínio de anaeróbios estritos nas duas situações avaliadas. Nos dois métodos de análise microbiológica foi possível observar maior número de células bacterianas no Grupo II, onde os canais radiculares permaneceram expostos ao meio bucal por 30 dias. Os resultados histopatológicos demonstraram presença de infiltrado inflamatório severo, reabsorção apical e óssea nos grupos II e III, com aspectos semelhantes para... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The aim of this study was to evaluate the microbiota of root canals from dog's teeth, with no pulp vitality, with or without radiographic chronic periapical lesion, using a culture microbiologic method and checkerboard DNA-DNA hybridization technique. The repair of apical and periapical tissues was evaluated after the endodontic treatment of root canals, with no pulp vitality, with or without chronic periapical lesion and with vital pulp. It were used dog's premolars from 3 animals, divided into three groups: group I, treatment of teeth with vital pulps; group II, after coronal opening the root canals were exposed to oral environment during 30 days (teeth with no pulp vitality without chronic periapical lesion); and in group III, the root canals were exposed to oral environment during 7 days, and after this, sealed during 60 days, until the radiographic observation of the presence of periapical lesion. Before the biomechanical preparation, the microbiologic samples were obtained from groups II and III. Endodontic therapy was conducted in three groups, in one-visit treatment, and after 180 days, the dogs were killed and the obtained histological sections were stained with hematoxylin-eosin for optical microscopic analysis of the apical and periapical repairing. The results of microbiologic evaluation using culture technique, showed the predominance of obligate anaerobic and aerobic bacteria in both groups, when compared to facultative species. The method checkerboard demonstrated the predominant occurrence of obligate anaerobes in the both clinical situations that were evaluated. For the two microbiological methods used it was possible to observe a greater number of cells in group II, where the root canals were kept exposed to oral environment during 30 days. The histhological results showed inflammatory... (Complete abstract, click electronic address below). / Mestre

Orientador: Marcelo Gonçalves / Banca: Mário Tanomaru Filho / Banca: Eduardo Kazuo Sannomiya / Resumo: O objetivo desse estudo foi avaliar as alterações radiográficas de lesões periapicais, nos períodos de proservação de 0, 2, 4 e 6 meses após o tratamento endodôntico, por meio da subtração radiográfica digital realizada pelo programa Adobe Photoshop 6.0, e da demarcação de seus limites externos na tela do computador utilizando o programa VixWin 2000. E em seguida, fazer uma comparação entre as áreas de reparação ou perda óssea visualizadas nos dois programas. Foram utilizados 13 dentes anteriores de humanos com necrose pulpar e lesão periapical crônica, que foram tratados endodonticamente. Após o tratamento endodôntico, para realização da radiografia final, foi utilizada uma técnica para padronização das imagens que consistiu no uso de um posicionador para filmes radiográficos, o qual foi estabilizado com material de impressão (silicona) colocado sobre os bordos incisais dos dentes radiografados. Para as radiografias de proservação realizadas 2, 4 e 6 meses após o tratamento endodôntico foi utilizado o mesmo método. Os filmes radiográficos foram processados automaticamente, digitalizados por meio de um scanner, e em seguida feita a subtração digital. As imagens digitalizadas de 0, 2, 4 e 6 meses, foram importadas para o programa VixWin 2000 para que os limites externos das lesões periapicais nos diferentes períodos de proservação fossem delimitados por dois examinadores. As imagens geradas pela subtração digital também foram levadas para o programa VixWin 2000 para que as áreas das alterações radiográficas fossem delimitadas pelos examinadores. Os resultados mostraram uma correlação não significante entre as medidas das áreas de reparação ou perda óssea detectadas pelos dois programas (o coeficiente de correlação intraclasse variou de 0,02 a 0,45)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the radiographics changes of periapical lesions in the follow-up periods of 0, 2, 4 and 6 months after endodontic treatment using digital subtracted radiography in the software Adobe Photoshop 6.0 and by delimiting yours edges with a pointing device in the software VixWin 2000. The comparison of the areas of repair or bone loss visualized in the two softwares was also evaluated. It were used 13 human teeth with no pulp vitality and chronic periapical lesion that were root canal treated. After the root canal treatment standardized periapical radiographs were obtained immediately postoperatively and at 2, 4, and 6 months using individualized silicone bit blocks and Rinn XCP film holder. Each periapical radiographs were automatic processing, digitized by a scanner and then subtracted. The digitized radiographic images of 0, 2, 4 and 6 months after root canal treatment were imported to the software VixWin 2000 in order to the edges of the periapical lesions were drawn with a pointing device for two examiners. The subtracted digital images were also imported to the software VixWin 2000 in order to the areas of repair or bone loss were drawn by the examiners. The results showed no significant correlation between the measure of the areas of repair or bone loss visualized in the two softwares (the intraclass correlation coefficient varied from 0,02 to 0,45). The results of interexaminer assessment demonstrated a significant correlation between the measure of the areas of repair or bone loss detected by the two examiners in the softwares (the intraclass correlation coefficient varied from 0,82 to 0,99). The bone repair was detected in all periodos of follow-up, been more evident in the period from the final of root canal tretament and two months of follow-up. / Mestre

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente estudo teve como objetivo comparar a qualidade do selamento promovido por 3 cimentos reparadores endodônticos: Ceramicrete, iRoot-BP Plus e BioAggregate, com o ProRoot MTA branco, utilizando o modelo de infiltração de glicose sob pressão. 64 incisivos centrais superiores, recém-extraídos e sem tratamento endodôntico foram selecionados. A instrumentação do canal radicular foi realizada em todos os dentes com brocas Gates-Glidden e limas K-Flexofile (Dentsply Maillefer, Ballaigues Suíça), 1mm aquém do ápice. A patência foraminal foi confirmada a cada instrumento usado. Os dentes tiveram suas coroas removidas padronizando-os em 15mm de comprimento. Foi realizada apicetomia a 3mm do ápice e o preparo da cavidade retrógrada com o auxílio do ultrassom Various 350 (NSKNakanishi Inc., Tóquio, Japão) e da ponta E32D (NSKNakanishi Inc., Tóquio, Japão). As raízes foram distribuídas, randomicamente, em quatro grupos experimentais (n=15): G1Ceramicrete, G2iRoot BP Plus, G3BioAggregate e G4ProRoot MTA branco. Como controle negativo (n=2) foram utilizados dentes hígidos, e como controle positivo (n=2), dentes acessados e com patência confirmada. Os cimentos reparadores foram manipulados seguindo as recomendações do fabricante e inseridos na cavidade retrógrada utilizando a mesma ponta ultrassônica usada no preparo. As amostras foram mantidas na presença de umidade por 72h para o completo endurecimento dos materiais. As raízes foram montadas em um dispositivo de dupla-câmara selada para a infiltração da glicose. Foram utilizados 0,75ml de solução de glicose a 1Mol/L na câmara superior e 0,75ml de água destilada na câmara inferior. Os dispositivos foram conectados a um sistema de distribuição de pressão, que permitiu a infiltração de 32 amostras em uma mesma etapa. A solução de glicose foi forçada apicalmente sob uma pressão de 15psi durante 1 hora. Uma alíquota de 10l foi coletada da câmara inferior para quantificar a glicose infiltrada. A concentração de glicose foi determinada com o auxílio do Kit GlucoseHK (Megazyme, Wicklow, Irlanda) e de um espectrofotômetro de luz visível (Campsec M330, Cambridge, Reino Unido) em um comprimento de onda de 340nm. O teste não-paramétrico Kruskal-Wallis e o teste Dunns foram utilizados na análise estatística. Os resultados encontrados demonstraram que houve diferença significativa entre os grupos experimentais (p=0,0036). O BioAggregate apresentou a maior concentração de glicose-1,85(g/L), seguido do ProRoot MTA-1,2; IRoot BP-0,85 e Ceramicrete-0,75. Não houve diferença entre os três novos cimentos reparadores e o material padrão-ouro (p>0,05). Não houve diferença entre Ceramicrete e iRoot BP Plus (p>0,05), porém estes foram estatisticamente diferentes do BioAggregate (p<0,05). Diante dos resultados obtidos, pode-se concluir que: nenhum dos cimentos testados foi capaz de promover selamento hermético; os três novos cimentos testados não revelaram o mesmo padrão de selamento; os três novos cimentos testados revelaram um padrão de selamento semelhante a do ProRoot MTA branco; e o Ceramicrete e o iRoot BP Plus apresentaram padrão de selamento superior em comparação com o BioAggregate. / The present study sought to compare the sealing ability of three new reparative endodontic cements Ceramicrete, iRoot-BP Plus, BioAggregate and compared to white ProRoot MTA, using the glucose leakage model under pressure. Sixty-four recently extracted maxillary incisors, without previous endodontic treatment, were selected. A crown-down root canal instrumentation was performed using Gates-Glidden burns and Kerr Flexofile (Dentsply Maillefer, Ballaigues Switzerland), 1mm short of the apical foramen (working length). The apical patency was confirmed after the use of each instrument, with a Kerr file #10, 1mm beyond the foramen. The teeth had their crowns removed, leaving roots 15mm in length. After that, apicetomy was carried out at 3mm from the apex. The retrograde preparation was performed using the E32D ultrasonic tip (NSK Nakanishi Inc., Tokyo, Japan). Roots were randomly distributed in four experimental groups (n=15): G1 - Ceramicrete, G2 - iRoot BP Plus, G3 - BioAggregate and G4 - white ProRoot MTA as gold-standard for comparisons. For the negative control group (n=2) teeth with intact crowns were used, and for the positive control (n=2), teeth with access and apical patency. The root-end filling material was manipulated as recommended by the manufacturer and inserted into the retrograde cavity using the same ultrasonic tip. The samples were stored at 100% humidity for three days to allow setting of the material. After that, the roots were mounted in a double-chamber apparatus where 0,75ml of 1Mol/L glucose solution was placed into the superior chamber and 0,75ml of distilled water was placed into the inferior chamber. The devices were connected to a pressure distribution system that was developed to allow the leakage of 32 samples at a single stage. The glucose solution was forced apically under a pressure of 15psi during 1 hour. A sample of 10l was taken from the inferior chamber and the glucose concentration was measured following an enzymatic reaction using the Glucose HK Kit (Megazyme, Wicklow, Ireland) and a spectrophotometer (Campsec M 330, Cambridge, UK) at a wave-length of 340nm. The Kruskal-Wallis and the Dunns test were used for statistical analyses. The results demonstrated that there was significant difference between experimental groups (p=0,0036). BioAggregate displayed the highest glucose concentration - 1.85(g/L), followed by ProRoot MTA - 1.2; iRoot BP Plus - 0.85; Ceramicrete - 0.75. No significant difference was observed between the three new reparative cements and the gold-standard (p>0.05). There was no difference between Ceramicrete and iRoot BP Plus (p>0.05), however both materials were significantly different fromBioAggregate (p<0.05). Considering the results, it can be concluded that none of the tested cements was able to prevent glucose leakage, the 3 new tested cements do not presented a similar quality of sealing, and the three new tested cements presented a similar sealing pattern of ProRoot MTA and both Ceramicrete and iRoot BP Plus presented better quality of sealing than BioAggregate.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Enterococcus faecalis (E. faecalis), conhecidamente patógeno oportunista, tem sido frequentemente associado a infecções sistêmicas graves. É também encontrado na cavidade oral, com destaque em infecção endodôntica refratária. O objetivo deste estudo foi avaliar características moleculares de E. faecalis isolados de infecção endodôntica primária no Brasil e comparar com isolados orais e não orais de pacientes do Reino Unido e do Japão, assim como E. faecalis resistentes à vancomicina. O presente estudo também investigou o relacionamento entre E. faecalis de diferentes origens (oral e não oral) e de diferentes áreas geográficas para obter uma melhor compreensão do envolvimento dos diferentes reservatórios no surgimento e propagação de clones virulentos, aqueles que possuem genes que conferem infectividade e virulência, assim como resistência aos antibióticos. Para tal, foram estudados E. faecalis isolados em infecções endodônticas no Brasil (n = 20) e orais no Reino Unido (n = 10), e em infecções não orais no Japão (n = 9). Além disso, 20 E. faecalis isolados ambientais do Hospital Universitário de Gales (Cardiff, Reino Unido), classificados como Enterococcus resistentes à vancomicina (VRE) também foram examinados. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) dos isolados do Brasil foi obtida pelo método de diluição em agar de acordo com as recomendações do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Reação em cadeia da polimerase (inglês - PCR) foi a técnica empregada para detectar os genes de virulência e aqueles associados à resistência aos antibióticos, enquanto Reação de Amplificação Aleatória de DNA Polimórfico (inglês - RAPD-PCR) foi escolhida para a tipagem molecular. Dentre os genes de virulência examinados, o gene que codifica a gelatinase gelE foi o mais prevalente entre os isolados (77-100%). Entre isolados orais, foram detectados os genes agg de substâncias de agregação, esp de proteína de evasão imune, cylB de citolisina, genes de resistência à tetraciclina tetM e tetL e à eritromicina ermB com diferentes prevalências. Os isolados clínicos hospitalares do Japão apresentaram perfil genético similar aos isolados orais, mas com maior prevalência de ermB e cylB. Todas as amostras de VRE foram positivas para os genes gelE, esp, agg, vanA, ermB e tetM, 95% foram positivos para cylB e 17% positivo para tetL. Todas as amostras foram negativas para ermA, asa373, vanB, vanC1 e vanC2/3. RAPD-PCR revelou agrupamento de VRE em comparação com outros isolados. Neste estudo, os isolados de E. faecalis de infecções orais apresentaram genes de resistência à tetraciclina, um antimicrobiano frequentemente usado no tratamento local de infecções dentárias, abrindo um debate muito importante sobre o papel e a eficácia desta droga para infecções orais. Claramente, são necessários mais estudos nesta área principalmente em relação à expressão de fatores de virulência entre isolados endodônticos para melhor nortear as estratégias de tratamento. As pressões externas no microambiente dos canais radiculares podem ser responsáveis pela seleção de espécies mais resistentes e virulentas. Por fim, embora isolados orais apresentem genes de virulência fundamentais para a patogenicidade, estes foram detectados em menor incidência em comparação com os isolados não-orais e VRE. / Enterococcus faecalis is an opportunistic pathogen known to cause serious systemic infection. It is also encountered in the oral cavity and has been implicated in persistent root canal infection. The aim of this study was to evaluate a range of molecular characteristics of E. faecalis isolated from primary endondontic infections in Brazil and compare to isolates from oral and non-oral infections in patients from UK and Japan, as well as isolates of vancomycin resistant E. faecalis, VRE, from a hospital environment. The present study was undertaken to explore the relatedness of E. faecalis from different origins, oral and non oral, and from different geographic areas to gain a better understanding of the involvement of the different reservoirs in the emergence and spread of virulent clones, those that acquired a number of genes conferring infectivity and virulence and in addition antibiotic resistance. To do this, E. faecalis from oral infections in Brazilian (n=20) and UK patients (n=10), and non-oral infection in japanese patients (n=9) were studied. In addition, 20 environmental VRE isolates from the University Hospital of Wales (Cardiff, UK) were also examined. For braziliam isolates, antimicrobial susceptibility was ascertained by agar dilution, using the recommendations of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). For all isolates, PCR with validated primers was used to detect genes associated with antibiotic resistance and virulence, whilst RAPD-PCR was used to fingerprint isolates. Of the virulence genes examined, gelatinase gene gelE was most prevalent amongst isolates (77-100%). In the case of oral isolates, the genes of aggregation substances agg, immune evasion protein esp, cytolysin cylB, tetracycline resistance tetM and tetL and erythromycin resistance ermB were detected with varying prevalence. Japanese hospital isolates had a similar genetic profile to oral isolates but with higher prevalence of ermB and cylB. All VRE strains were positive for gelE, esp, agg, vanA, ermB and tetM, 95% were positive for cylB and 17% positive for tetL. All isolates were negative for ermA, asa373 vanB, vanC1 and vanC2/3. RAPD-PCR revealed clustering of VRE compared with other isolates. In this study, isolates of E. faecalis from oral infections showed antibiotic resistance genes for tetracycline, an agent used in the local treatment of dental infection. This opens up a much-needed debate on the role and efficacy of this antibiotic for oral infections. Clearly, more research in this area is required particularly in relation to the possession and expression of virulence factors in the root canal environment, to better inform our management strategies. Environmental pressures in root canals may be responsible for the selection of more resistant species and the possession of virulence determinants. This knowledge is important in guiding procedures for controlling the increasing problem of antibiotic resistance amongst clinically relevant bacteria. Furthermore, whilst oral isolates had genes that could contribute to pathogenicity, these were detected at lower incidence compared with non-oral and VRE isolates.