Orientador: Roberto da Silva / Banca: Inês Conceição Roberto / Banca: Haghuvir Arni / Resumo: A glucoamilase é uma enzima importante na produção enzimática de xarope de glicose a partir do amido. Neste processo o amido é primeiramente dextrinizado pela ação da a-amilase a aproximadamente 100°C. Em seguida, a suspensão de dextrinas é resfriada a uma temperatura próxima de 55°C para a sacarificação, pela ação da glucoamilase. A característica de alta termoestabilidade para essa enzima é fundamental para agilizar o processo e reduzir custos operacionais. O presente estudo visou à obtenção, caracterização físico-química, bem como a cinética de termoinativação das glucoamilases mutantes de Aspergillus awamori expressa em Saccharomyces cerevisiae. O gene da glucoamilase sofreu alterações através da técnica de PCR mutagênico, e os clones expressando glucoamilases mais termoestáveis foram selecionados e avaliados. A glucoamilase selvagem apresentou temperatura ótima de atividade a 58°C, as enzimas mutantes apresentaram atividades ótimas a 68°C para a linhagem M1, e 65°C para a linhagem M2. As glucoamilases mutantes M1 e M2 também apresentaram maior termoestabilidade que a enzima selvagem. As temperaturas de desnaturação térmicas na ausência de substrato por 1 hora foram 45, 50 e 55°C para as enzimas, selvagem, M1 e M2, respectivamente. Todas as enzimas apresentaram atividade ótima no pH 3,5 - 4,0, sendo que os mutantes M1 e M2 também exibiram maior estabilidade à variação de pH, retendo acima de 80% da atividade na faixa de pH 5,5 a 10,0. A meia vida (t1/2) a 70°C foi de 8,1 minutos para a glucoamilase mutante M2, 3,8 minutos para o mutante M1 e 3 minutos para a glucoamilase selvagem. A termoinativação das enzimas seguiram uma cinética de primeira ordem. A energia de desnaturação foi de 262,8 e 252,9 KJ mol-1 para os mutantes M2 e M1 respectivamente, e de 234,3 KJ mol-1 para... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Glucoamylase is an important enzyme for the production of glucose syrup made from starch. In this process, starch is initially dextrinized by the action of a a-amylase at approximately 100ºC. Secondly, the dextrins suspension is cooled down to a temperature near 55ºC for the saccharification, by the action of an glucoamylase. High thermostability is a fundamental characteristic for this enzyme to accelerate the process and to reduce operational costs. This work had the purpose of studying physicochemical characteristics as well as thermoinactivation kinetics of mutants glucoamylases of Aspergillus awamori expressed in Saccharomyces cerevisiae. Glucoamylases gene was modified through mutagenic PCR technique and the clones which produced more thermostable glucoamylases were selected and evaluated. The wild glucoamilase exhibited optimum temperature at 58ºC, the mutants from strain M1 and M2 acted optimally at 68ºC and 65ºC, respectively. The mutants M1 and M2 also exhibited higher thermostability when compared to the wild enzyme. Thermic denaturation temperatures in the absence of substrate for 1 hour were 45, 50 and 55ºC for the wild, M1 and M2 enzymes, respectively. All enzymes showed optimum activity at pH 3.5 – 4.0, and the mutants M1 and M2 also exhibited higher stability towards pH variation, maintaining 80% of activity in pH from 5.5 to 10.0. Half life (t1/2) at 70ºC was 8.1 minutes for mutant M2, 3.8 minutes for mutant M1 and 3 minutes for wild glucoamylase. The enzymes thermoinactivation followed a first order kinetics. Denaturation energy was 262.8 and 252.9 KJ mol-1 for mutants M2 and M1 respectively, and 234.3 KJ mol-1 for the wild enzyme. Thermodynamic parameter of thermoinactivation, .G was lower for wild glucoamylase showing a higher denaturation for the enzyme. All enzymes revealed similar activity profile on different substrates, of which corn starch was the best substrate for hydrolysis for all glucoamylases tested. / Mestre

Orientador: Eleni Gomes / Coorientador: Gustavo O. Bonilla-Rodriguez / Banca: Heizir Ferreira de Castro / Banca: Ernandes Benedito Pereira / Banca: Humberto Márcio Santos Milagre / Banca: Teresa Cristina Zangirolami / Resumo: As enzimas são catalisadores muito eficientes e de grande interesse na aplicação industrial. As lipases (E.C. 3.1.1.3) são serina-hidrolases que agem na hidrólise, esterificação e transesterificação de acilgliceróis de cadeia longa. Lipases microbianas têm sido amplamente usadas devido à sua especificidade. Na transesterificação moléculas de triacilglicerol reagem com um álcool na presença de um catalisador formando uma mistura de glicerol e ésteres de ácidos graxos. O biodiesel, definido como ésteres metílicos ou etílicos, tem atraído crescente interesse como uma fonte de energia renovável, substituindo o diesel produzido a partir de combustíveis fósseis. O presente trabalho tem como objetivo principal efetuar a prospecção de fungos termofílicos que apresentem produção significativa de lipase e, concomitantemente, atividade transesterificante. As linhagens foram selecionadas por detecção de atividade lipolítica em placas de ágar contendo Rodamina B, por fermentação submersa (FSm) e fermentação em estado sólido (FES). Foram testadas linhagens de fungos termofílicos da coleção do laboratório de Bioquímica e Microbiologia Aplicada, sendo Thermomucor indicae-seudaticae N31, Rhizomucor pusillus Myceliophtora sp F2.1.4, Myceliophtora sp M7.7, F2.1.1, F2.1.3 e Thermomyces lanuginosus TO-05 os que mostraram um maior potencial hidrolítico. Estudos adicionais avaliaram a produção de lipase através da modificação da fonte de componentes nutricionais e algumas propriedades físicas na produção de lipase por T. indicae-seudaricae N31 em FSm, e por R. pusillus e T. indicae-seudaticae N31 em FES. Os estudos dos processos fermentativos foram bem sucedidos, havendo um aumento de 16 vezes na produção de lipase de R. pusillus e de 36 vezes na lipase de T indicae-seudaticae... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Enzymes are efficient catalysts and interesting for industrial applications. Lipases (EC 3.1.1.3) constitute a group of serine hydrolases that catalyze the hydrolysis, esterification and transesterification reactions of long chain acylglycerols. Microbial lipases have been widely used for biotechnological applications due to their specificity. In transesterification, molecule of a tryacylglicerol react with an alcohol in the presence of catalyst, producing a mixture of fatty esters and glycerol, Biodiesel, defined as methyl or ethyl fatty esters and has attracted considerable attention as a renewable source of energy, in substitution of fossil fuels. The main goal of the present work is the screening of thermophilic fungi that present outstanding lipase production and in parallel able to perform transesterification reaction. Strains were screened for lipase activity on agar plates containing Rhodamine B, for submerged fermentation (SmF) and solid state fermentation (SSF). The tested thermophilic strains were from the collections of the Biochemistry and Applied Microbiology Laboratory, where Thermomucor indicae-seudancae N31, Rhizomucor pusillus Myceliophtora sp F2.1.4, Myceliophtora sp M7.7, F2.1.1, F2.1.3 and Thermomyces lanuginosus TO-O5 had the highest lipase production. Additional studies attempted to improve lipase production by nutrient source modifications and physicals conditions in FmS by T. indicae-seudaticae N31 and in FSS by T. indicae-seudaticae N31 and R. pusillus. The fermentations studies were successful, with a 16 fold enhancement in lipase yield compared to the initial medim from lipase R. pusillus and 36 fold for the lipase T. indicae-seudaticae N31, both in FES. The lipase from T. indicae-seudaticae N31 cultured in SSF and SmF, exhibited maximum lipolytic activity at 40°C and stability for the pH range from 4 to 8. The enzyme produced by FmS presented maximum activity... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Gustavo Orlando Bonilla Rodriguez / Banca: Maria de Lourdes Teixeira de Morais Polizeli / Banca: Valéria Marta Gomes de Lima / Banca: Roberto da Silva / Banca: Márcio José Tiera / Resumo: Uma nova lipase extraída de sementes oleaginosas de Pachira aquatica foi purificada por SDS-PAGE obtendo-se uma enzima com massa molecular de aproximadamente 55 kDa. Esta exibiu atividade máxima a 40°C e pH 8,0 e foi estável na faixa de 4 a 50°C e a pH 9.0 mostrando estabilidade em pH alcalino. A atividade enzimática aumentou na presença de Ca++ e Mg++, mas foi inibida por Hg++, Mn++, Zn++, Al+++ e por vários agentes oxidantes e redutores, principalmente DTT e β-mercaptoetanol. Na presença de solventes orgânicos a atividade foi estimulada por metanol. Os valores de KM e Vmax, foram 1,65 mM e 37,3 μmol.mL-1.min-1, respectivamente usando p-nitrofenil acetato como substrato. A enzima mostrou preferência por ácidos graxos de cadeias longas, mas demonstrou atividade contra uma grande faixa de substratos. O extrato enzimático bruto foi testado para a hidrólise de óleo de soja e resíduos de frigorífico avícola. A condição ideal é 40°C e pH no valor de 7,0-9,0 para óleo de soja e o resíduo, respectivamente. A enzima foi estável na presença de várias formulações de detergentes comerciais, mas instável na presença de H2O2. A lipase não foi eficiente em reduzir o tamanho médio de partículas de gordura; altas doses foram requeridas para obter-se uma redução de 13 % após 72 horas de tratamento. A atividade enzimática foi aumentada na presença do surfactante catiônico brometo de cetiltrimetilamonio (CTAB) e sais biliares, onde surfactantes aniônicos e não-iônicos mostraram efeito inibitório. A incubação da enzima com soluções aquosas de PEG 12.000, 8.000 e 200, ativou a lipase e a máxima ativação (61%) ocorreu com PEG 12.000. Este efeito pode ser devido à exposição de alguns resíduos hidrofóbicos localizados na vizinhança do sitio ativo ou por agregação enzimática. No processo de imobilização da lipase em esferas de alginato de cálcio... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: A new lipase from seeds of Pachira aquatica was purified to homogeneity by SDSPAGE obtaining an enzyme with a molecular weight of approximately 55 kDa. The lipase exhibited maximum activity at 40°C and pH 8.0, and was stable at the range from 4 to 50°C and pH 9.0 showed good stability in the alkaline pH. The enzyme activity increased in the presence of Ca++ and Mg++, but was inhibited by Hg++, Mn++, Zn++, Al+++ and various oxidizing and reducing agents, mainly DTT and β-mercaptoethanol. In the presence of organic solvents its activity was stimulated by methanol. The values of KM and Vmax, were 1.65 mM and 37.3 μmol.mL-1.min-1, respectively using pnitrophenylacetate as substrate. The enzyme showed preference for esters of long chain fatty acids, but demonstrated significant activity against a wide range of substrates. The enzymatic extract was tested for the hydrolysis of soybean oil and wastewater from a poultry processing plant. It was determined that it should be carried out at a temperature of 40°C and an optimum pH 7.0-9.0 for soybean oil and poultry processing plant, respectively. The enzyme was stable in the presence of some commercial detergent formulations but unstable in the presence of H2O2. The lipase was not efficient in reducing average fat particle weight; high doses were required to obtain a reduction of 13% after 72 hours of treatment. The activity was enhanced by the cationic surfactant, CTAB and bile salts, whereas anionic and nonionic surfactants showed an inhibitory effect. Aqueous solutions of PEG, 12,000, 8,000 e 200, activated the lipase and maximum activation (61%) occurred in PEG 12,000. This effect on lipase that can be due to exposition of some hydrophobic residues located in the vicinity of the active site... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: José Fernando Durigan / Banca: Rogério Lopes Vieites / Banca: Juliana Sanches / Banca: José Carlos Barbosa / Banca: Terezinha de Jesus Déleo Rodrigues / Resumo: Um dos objetivos deste trabalho foi determinar as combinações entre temperatura e tempo capazes de ocasionar alterações no metabolismo de abacates 'Hass', 'Geada', 'Quintal' e 'Fortuna'. Os outros objetivos foram: avaliar a influência deste distúrbio na qualidade dos frutos, assim como avaliar o uso de tratamentos hidrotérmicos para minimizar seus efeitos. Abacates colhidos no ponto de maturação "de vez", da cv Hass, foram armazenados a 5ºC, 10ºC e 15ºC por 7, 14 e 21 dias, no Experimento I, e a 1±0,5°C e 4ºC por 15, 30 e 45 dias, no Experimento II. Os frutos das cvs. Geada, Quintal e Fortuna foram armazenados a 4ºC e 11ºC, por 7, 14, 21 e 28 dias. Ao final de cada período, eles foram transferidos para ambiente a 22ºC. Os frutos foram avaliados durante o armazenamento refrigerado, assim como depois de transferidos ao ambiente. Avaliou-se a aparência, a coloração da casca e da polpa, a perda de massa fresca, a resistência da polpa e os teores de óleo, sólidos solúveis (SS) e acidez titulável (AT). Os frutos armazenados sob refrigeração, quando transferidos ao ambiente, foram comparados com aqueles armazenados a 22ºC (Tratamento testemunha). Depois de amadurecidos, eles foram avaliados quanto ao escurecimento interno e por analistas, quanto a aparência e odor. Nos abacates 'Hass', os sintomas de injúria por frio, na forma de manchas escuras, apareceram nos armazenados a 1±0,5°C por 15 ou mais dias, e em frutos armazenados a 4ºC, por 30 ou mais dias. Em abacates 'Geada' e 'Quintal', essas injúrias ocorreram em frutos armazenados a 4ºC, por períodos superiores a 14 dias, e em 'Fortuna', nos armazenados a 4ºC, por 21 dias ou mais. O armazenamento a 10ºC ou acima, somente retardou o amadurecimento. A vida útil dos abacates 'Hass', depois de transferidos ao ambiente, foi de 8 - 12 dias, quando armazenados... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: One of the objectives of this study was to determine either temperature and time able to cause metabolic modifications of the avocados 'Hass', 'Geada', 'Quintal' and 'Fortuna'. The other objectives were to evaluate the influence of these disturbances on fruit quality as well as to test the use of hydrothermical treatments in order to minimize their effects. In the Experiment I avocados of cv Hass were harvested at maturity state breaker and stored at 5ºC, 10ºC and 15ºC for 7, 14 and 21 days. In the Experiment II, they were stored at 1±0,5°C and 4ºC for 15, 30 and 45 days. Fruits of cvs. Geada, Quintal and Fortuna were stored at 4ºC and 11ºC, for 7, 14, 21 and 28 days. At the end of each period fruits were transferred to ambient at 22ºC. Fruits were evaluated during cold storage as well as after transference to ambient. The appearance, skin and pulp color, weight loss, firmness and the contents of fat, solid solids (SS) and titratable acidity (TA) were determined. Cold stored fruits when transferred to ambient were compared with control fruits and those stored at 22ºC. After getting ripe, fruit internal browning was determined and the appearance and odor were evaluated by untrained personnel. The symptoms of chilling injury, black spots, of 'Hass' avocados appeared when fruits were stored at 1±0,5°C for 15 or more days, and after 30 days when they were stored at 4ºC. The same symptoms occurred in 'Geada' and 'Quintal' avocados when the fruits were stored at 4ºC for more than 14 days, and on 'Fortuna' avocados stored at 4ºC, chilling injury appeared after 21 days. The storage at 10ºC or higher temperatures just retard ripening. The shelf-life of 'Hass' avocados, after transference to ambient, was of 8-12 days, when stored at 1±0,5°C or at 4ºC, for up to 30 days. These fruits maintained in good conditions for up to 20 days... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Elizabeth Orika Ono / Banca: Rumy Goto / Banca: Carmen Silvia Fernandes Boaro / Banca: Marcos Antonio Bacarin / Banca: Roberto Botelho Ferraz Branco / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo avaliar se o cultivo de pepineiro em porta enxertos recomendado e não recomendado para a cultura poderiam diferenciar-se entre si em relação aos processos bioquímicos de lignificação, conferindo assim, mudanças na atividade de enzimas marcadoras de estresse, crescimento, produtividade e qualidade dos frutos em relação ao cultivo de pepineiro não enxertado. Para alcançar os objetivos propostos, o trabalho foi dividido em três experimentos: no primeiro experimento foi avaliada a atividade enzimática durante o pegamento da enxertia. Já no segundo, foi estudado o efeito dos porta enxertos no crescimento das plantas e na atividade das enzimas antioxidantes durante o desenvolvimento. E no terceiro foi estudado o efeito dos porta enxertos na produtividade, número de frutos comercializáveis e qualidade de frutos. Durante o pegamento da enxertia observou-se que as partes inferiores e superiores à região da enxertia mantiveram atividade semelhante às plantas não enxertadas, exceto para a parte inferior à enxertia no híbrido Shelper, o qual apresentou aumento similar à região da enxertia. O porta enxerto 'Shelper' proporcionou maior crescimento e menor estresse às plantas, conforme a análise das enzimas antioxidantes, assim como maior produtividade, maior número de frutos comercializáveis, além de influenciar na coloração e brilho dos mesmos. Concluí-se que há diferença na atividade enzimática dos porta enxertos estudados e que o porta enxerto recomendado ('Shelper') proporcionou menor estresse às plantas durante o ciclo da cultura e, consequentemente, maior produtividade / Abstract: This study aimed to evaluate whether the cultivation of cucumber in rootstocks recommended and not recommended for cucumber could differentiate between them in relation to the biochemical processes of lignification, giving thus, changes in the antioxidant enzymes, growth, productivity and fruit quality in relation to the cultivation of cucumber ungrafted. To achieve the proposed objectives, the work was divided in three experiments. In the first experiment, were evaluated biochemical characteristics during grafting. In the second, were studied the rootstock effect on plant growth and antioxidant enzymes activity during development. And in the third, were studied the rootstock effect on yield, commercial fruit number and fruit quality. During tissue union, was observed that enzyme activity below and above the grafting site remained similar to non-grafted plants, except above grafting site in Shelper hybrid, which was similar to the grafted site. The rootstock 'Shelper' provided greater growth and less stress to the plants, considering the antioxidant enzymes analysis, higher productivity, higher commercial fruits number, and even changed fruit color and brightness. According to the results, it was concluded that occurred difference in enzyme activity of the studied rootstocks and the recommended rootstock ('Shelper') provided the lowest stress to plants during the crop cycle and hence greater productivity / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-02Bitstream added on 2014-06-13T18:20:53Z : No. of bitstreams: 1 pilon_c_me_botfca.pdf: 343563 bytes, checksum: 3b2995bc0619e6e3cda513ab4c8b5969 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Efeitos benéficos do silício (Si) têm sido demonstrados em muitas culturas, principalmente sob condições de estresses. Sendo a cultura da batata muito sensível à deficiência hídrica, é possível que o fornecimento de Si, via solo ou foliar, possa minimizar o efeito do estresse hídrico em processos bioquímicos da planta e, consequentemente, promover aumento de produtividade da cultura. Contudo, o efeito do fornecimento de Si à cultura da batata e sua relação com a resposta da cultura à deficiência hídrica ainda não são bem entendidos. Desta forma, o presente trabalho teve por objetivo avaliar o efeito do fornecimento de Si, via solo e via foliar, no teor de nutrientes, Si e prolina, na atividade de enzimas ligadas ao sistema de respostas antioxidativas, no crescimento e na produtividade de plantas de batata (cv. Ágata) cultivadas com e sem deficiência hídrica. Para tanto, foi conduzido um experimento em casa de vegetação. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, num arranjo fatorial de 3x2, com quatro repetições. Os tratamentos foram constituídos por: testemunha (sem aplicação de Si), aplicação de Si via solo e aplicação de Si via foliar, combinados com duas tensões de água no solo: 0,020 MPa (sem deficiência hídrica) e 0,060 MPa (com deficiência hídrica). A deficiência hídrica reduziu o teor relativo de água na folha, o teor de clorofila a e carotenóides nas folhas mais velhas, a área foliar, o acúmulo de matéria seca, o acúmulo de Si e nutrientes e a produtividade e o tamanho de tubérculos e aumentou o acamamento das hastes e o teor de prolina. Independente da disponibilidade hídrica, a aplicação de Si via solo ou via foliar aumentou o número de folhas por planta, o teor de clorofila... / Research has indicated that silicon (Si) has beneficial effects on many crops, mainly under stress conditions. Potato plants have been reported to be quite sensitive to water-deficit stress. However, the effect of Si supply on potato crop and its response to drought stress are not well understood. Therefore, the objective of this study was to determine the effect of Si application, soil and foliar, on plant nutrients concentrations, Si and proline concentration, antioxidant enzyme activities, as well as growth and yield of potato plants (cv. Ágata) either exposed or not to water-deficit stress. It was hypothesized that Si application, soil or foliar, would alleviate the negative effects of drought on plant biochemical functions and consequently, increase potato yield. To test this hypothesis, a greenhouse experiment was conducted. The experimental design was a 3x2 factorial completely randomized block design, with four replications. The treatments consisted of control (no Si application), Soil Si application and Foliar Si application, in combination with two water tension on soil: 0.020 MPa (absence of water stress) and 0.060 MPa (presence of water stress). The results indicated that water-deficit stress resulted in significant decreases in the water relative content of leaves as well as in chlorophyll a and carotenoids concentration of older leaves. Total leaf area and dry matter as well as yield and tuber size were also decreased compared to the well-watered condition. In addition water-deficit stress resulted in lower Si and nutrients accumulation and increased the stem lodging and proline concentration compared to the control. Regardless of water availability, soil or foliar Si application increased the number of leaves per plant, chlorophyll (a and b) and carotenoids concentration... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Rogério Lopes Vieites / Banca: Giuseppina Pace Pereira Lima / Banca: José Fernando Durigan / Banca: Eliane Aparecida Benato Rodrigues da Silva / Banca: Atila Francisco Mogor / Resumo: O tomate é uma hortaliça de grande importância econômica e fonte de vitaminas e vários compostos com propriedades antioxidantes benéficas para a saúde. Em alguns produtos hortifrutícolas colhidos, a aplicação da irradiação gama, irradiação ultravioleta C (UV-C) ou de atmosferas controladas (AC) tem inibido o desenvolvimento de podridões. Mas até agora se desconhece o efeito da radiação UV-C, sozinha ou combinada com AC, sobre atributos básicos do amadurecimento e qualidade do tomate colhido. O presente trabalho teve por objetivos avaliar o efeito da irradiação gama, irradiação ultravioleta C (UV-C) e atmosfera controlada (AC) na conservação do tomate 'Débora plus' e 'Pitenza', verificando as variáveis de qualidade: físicos, físico-químicos, químicos, bioativos e enzimáticos. Foram utilizados os tomates 'Débora plus' e 'Pitenza', sendo provenientes da região de Botucatu/SP - Brasil e da região de Cartagena - Espanha, respectivamente. Após a colheita, os tomates de Botucatu foram transportados para o laboratório de frutas e hortaliças, pertencente ao Departamento de Gestão e Tecnologia Agroindustrial, da Faculdade de Ciências Agronômicas - UNESP - Campus de Botucatu, SP; enquanto os de Cartagena foram imediatamente transportados ao Laboratório de Postrecolección e Refrigeración (Planta Piloto) do Departamento de Ciencia y Tecnologia Agrária da Escuela Técnica Superior de Ingenieria Agronomica - Universidad Politécnica de Cartagena/Espanha, aonde se mantiveram a 12ºC até a manhã seguinte. Posteriormente em cada Laboratório, os tomates foram selecionados quanto ao tamanho, injúrias, defeitos, aparência, visando uniformizar o lote...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Tomato is a great economic importance vegetable and source of vitamins and several compounds with antioxidant properties favorable for health. In some harvested products, the application of gamma irradiation, ultraviolet irradiation C (UV-C) or controlled atmospheres (CA) has inhibited the rotten development. But so far, the radiation UV-C is unknown alone or with CA on ripeness basic attributes and quality of the harvested tomato. This work has as aim, to evaluate the effect of gamma irradiation, ultraviolet irradiation C (UV-C) and controlled atmospheres (CA) in the conservation of 'Débora Plus' and 'Pitenza' tomato verifying the quality variables: physical, physic-chemical, chemical, bioactive and enzymatic. 'Débora Plus' and 'Pitenza' tomatoes from the region of Botucatu, SP, Brazil and the region of Cartagena, Spain, were used, respectively. After the crop, the tomatoes from Botucatu were transported to the vegetable and fruit laboratory of the Department Gestão e Tecnologia Agroindustrial, da Faculdade de Ciências Agronômicas - UNESP - Campus de Botucatu, SP; while the tomatoes from Cartagena were immediately transported to the Laboratório de Postrecolección y Refrigeración (Planta Piloto) of the Departament de Ciencia y Tecnologia Agrária da Escuela Técnica Superior de Ingenieria Agronomica - Universidad Politécnica de Cartagena, Spain, where they were kept in 12ºC until the following morning. Afterwards, in each laboratory, the tomatoes were selected by the size, injuries, defects, appearance, aiming to uniform the portion. To quantify better the isolated effect of the different techniques of conservation: gamma irradiation, ultraviolet irradiation C (UV-C) and controlled atmosphere...(Complete abstract, click electronic access below) / Doutor

Resumo: A escória de aciaria como um material corretivo, fonte de silício e sua interação com a adubação nitrogenada poderá beneficiar a nutrição e a produção da cultura do arroz. Entretanto, poderá afetar a atividade biológica do solo, devido à presença de metais pesados na sua composição química. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a escória de aciaria como material corretivo e como fonte de silício e a sua interação com a adubação nitrogenada na nutrição e na produção da cultura do arroz. Para isso instalou-se experimento em casa de vegetação na UNESP/Campus Jaboticabal, com a cultura do arroz (cv IAC 202) em vasos, preenchidos com um Latossolo Vermelho distrófico. Os tratamentos foram constituídos por duas fontes de material corretivo (calcário dolomítico e escória de aciaria), três doses em ECaCO3 (1,3; 2,6 e 5,2 g dm-3) e três doses de N (80, 160 e 320 mg dm-3). O delineamento experimental foi em blocos casualizados, analisado em esquema fatorial 2x3x3+1, com quatro repetições. Após 90 dias de incubação do solo avaliaram-se as características químicas do solo e após 120 dias do transplantio das plântulas de arroz, a atividade enzimática e teor de Si do solo, o estado nutricional (teores de nutrientes e de silício na planta) e o crescimento e a produção do arroz. Os resultados indicaram que a maior produção de grãos ocorreu com a aplicação de calcário na dose de 2,6 ECaCO3 (V= 50%) e de nitrogênio na dose de 160 mg dm-3. O uso da escória de aciaria foi semelhante ao do calcário na neutralização da acidez do solo e, ainda, aumentou a disponibilidade de silício no solo. As doses de nitrogênio diminuíram o teor de Si na parte aérea (colmo+folhas) do arroz. A adubação nitrogenada aumentou a absorção de nitrogênio, favoreceu o acúmulo de silício e nitrogênio na planta e promoveu maior produção de massa seca... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Slag as a corrective material and silicon source could benefit the nutrition and yield in rice cultivation due to its interaction with nitrogen fertilization. However, the slag could affect the biologic activity of the soil because of the presence of heavy metals in its chemical composition. Thus, the objective of this work was to evaluate slag as a corrective material and as silicon source as well as its interaction with nitrogen fertilization in the nutrition and the production of rice crops. For this reason an experiment with the culture of rice (cv IAC 202) in pots filled with acid dystrophic Red Latosol was carried out in a greenhouse in UNESP/Jaboticabal. The treatments which were applied were constituted of two corrective sources (dolomitic limestone and slag), three doses of correctives in ECaCO3 (1,3; 2,6 and 5,2 g dm-3) and three doses of nitrogen (80, 160 e 320 mg dm-3). The experimental design was in randomized blocks with a factorial scheme 2x3x3+1 with four replications. Ninety days after incubation, the characteristics of the fertility of the soil were evaluated and one hundred and twenty (120) days after planting the rice, the enzymatic activity and the silicon content of the soil, the nutritional status (content of the nutrients and silicon in plants) and the growth and the production of the rice were also evaluated. The results show that the greatest production of grains occurred with the application of limestone in the dose of 2,6 ECaCO3 (V= 50%) and of nitrogen in the 160 doses of mg dm-3. The result of the application of the slag was similar to that of the limestone in the neutralization of the acidity of the soil, moreover, it increased silicon availability. The doses of nitrogen diminished the content of Si in the rice (stem and leaf). Nitrogen fertilization also increased the absorption of nitrogen, favored the accumulation of silicon and nitrogen in the plants... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Renato de Mello Prado / Coorientadora: William Natale / Banca: Dirceu Maximino Fernandes / Banca: Gaspar Henrique Korndörfer / Banca: Arthur Bernardes Cecílio Filho / Banca: Jairo Osvaldo Cazetta / Doutor

Orientador: Luis Henrique Souza Guimarães / Banca: Rosimeire Cristina Linhari Rodrigues Pietro / Banca: Douglas Chodi Masui / Resumo: Os microrganismos, de modo especial os fungos filamentosos, possuem papel fundamental na decomposição de matéria orgânica, sendo interessantes como modelos para realização de diferentes estudos biológicos. Além disso, são de fácil manejo e as condições de cultivo podem ser facilmente adaptadas em laboratório. Outra vantagem é, geralmente, o baixo custo e o fácil acesso aos nutrientes necessários para o crescimento dos mesmos. Entre os microrganismos, os fungos filamentosos têm se destacado na obtenção de enzimas de interesse biotecnológico, como é o caso das invertases, as quais podem ser empregadas nas indústrias de alimentos e bebidas. As invertases (EC 3.2.1.26) são hidrolases que podem ser encontradas em uma grande variedade de organismos, realizando a hidrólise da ligação - D-frutofuranosídica, agindo sobre a sacarose, gerando como produtos D-glicose e D-frutose, em quantidades equimolares. Essa mistura é conhecida como açúcar invertido e é geralmente utilizada pelas indústrias de alimentos. Desta maneira, o objetivo deste trabalho foi estudar a produção de invertase extracelular pelo fungo filamentoso Aspergillus terreus, em fermentação submersa e em fermentação em substrato sólido, bem como purificar e caracterizar a enzima bioquimicamente. Entre os diversos meios de cultura testados em FSbm, a maior produção invertásica foi obtida em meio M5 mantido em agitação orbital (100 rpm) a uma temperatura de 30ºC, por um período de 48 horas de incubação. Já na FSS, o melhor período de incubação foi de 72 horas, também a 30ºC. Entre todas as fontes de carbono testadas, a maior produção invertásica foi obtida utilizandose farinha de centeio para a FSbm e soja moída para FSS. A enzima iv extracelular obtida em FSbm foi purificada 139 vezes com uma recuperação de 11%. A invertase extracelular... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The microorganisms, especially filamentous fungi, have a fundamental role in the decomposition of organic matter, and they are interesting as models for carrying out different biological studies. Moreover, they are easy to handle, and their growing conditions can be easily adapted in the laboratory. Another advantage is, generally, the low cost and easy access to the nutrients needed for their growth. Among the microorganisms, filamentous fungi have been essential in obtaining enzymes of biotechnological interest, such as invertase, which may be employed in the food and beverage industries. The invertases (EC 3.2.1.26) are hydrolases that can be found in a great variety of organisms, performing the hydrolysis of the -D fructofuranosidic bond acting on sucrose, generating products such as D-glucose and D-fructose, in equimolar amounts. This mixture is known as inverted sugar and it is commonly used by food industries. This way, the aim of this work was to study the production of extracellular invertase by the filamentous fungus Aspergillus terreus in submerged fermentation and solid state fermentation, as well as its purification and biochemical characterization. Among the various media tested in FSbm, the highest yield of invertase was obtained by using M5 medium under orbital agitation (100 rpm) at 30°C for 48 hours of incubation. In the FSS, the best incubation period was 72 hours, also at 30°C. Among all carbon sources tested, the highest invertase production was obtained using rye flour for FSbm and soybean meal for FSS. The extracellular enzyme obtained from FSbm was purified 139 fold with 11% recovery. The extracellular invertase of A. terreus is a heterodimer of native vi molecular mass of 74.67 kDa consisting of two subunits, one of 46.77 kDa and another of 26.92 kDa determined... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Maria Alice Rostom de Mello / Banca: Eliane Stevanato / Banca: Cláudio Alexandre Gobatto / Resumo: São raros os estudos que associam variáveis metabólicas à intensidade de esforço em ratos. O presente estudo visou analisar os efeitos do treinamento físico em diferentes intensidades sobre biomarcadores de condicionamento aeróbio e de estresse oxidativo em ratos. Foram utilizados ratos da linhagem Wistar (90 dias), que tiveram a transição metabólica aeróbia / anaeróbia determinada pelo teste de Máxima Fase Estável de Lactato (MFEL). O teste para determinação da MFEL foi composto de series de 25 minutos de exercício de corrida em esteira, com diferentes velocidades, fixas em cada série, com intervalos de 48 horas entre elas e coleta de sangue a cada 5 minutos para dosagem de lactato. Em seguida, os ratos foram treinados 40 minutos por dia, 5 dias por semana, na velocidade equivalente à MFEL (TT) ou 25% superior essa (TS), por 8 semanas. Como controles, foram usados ratos mantidos sedentários (S). Ao final, todos os animais foram sacrificados para análise de biomarcadores de ataque oxidativo: produtos que reagem ao ácido tiobarbitúrico - TBARs, do sistema de defesa antioxidante: atividade da enzima catalase e de atividade celular: atividade da enzima fosfatase alcalina em diferentes órgãos: músculo sóleo, fígado, cérebro e sangue assim como aspectos do metabolismo da glicose (captação e oxidação da glicose, síntese de glicogênio e produção de lactato) pelo músculo sóleo. Os principais resultados foram: No inicio do experimento, considerando todo o lote de animais avaliados, a maior parte dos animais (82%) obtiveram a MFEL na velocidade de 25m/min à concentração de 4,38+0,22mmol/L sangüínea de lactato. Ao final do experimento, a maior parte dos ratos treinados na TT (63,63%) apresentou MFEL na velocidade de 25m/min, à concentração sanguínea de lactato 3,10+0,27 mmol/L. A maioria (54,54%) dos treinados TS teve MFEL na velocidade de 25m/min à ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: There are few the studies that associate metabolic variables to the intensity of the effort in rats. The present study aim to analyze the effects of physical training in different intensities on biomarkers of aerobic conditioning and of oxidative stress in rats. Wistar rats (80 days) that had the aerobic / anaerobic metabolic transition determined by Maximal Lactate Steady State test (MLSS) were used. The test for determination of MLSS was composed of 25 minutes treadmill running, with different speeds, fixed in each series, with intervals of 48 hours between them and collection of blood every 5 minutes for lactate dosage. Soon afterwards, the rats were trained 40 minutes a day, 5 days a week, in the speed equivalent to MLSS (MT) or 25% above it (AT), for 8 weeks. As controls, rats maintained sedentary (S) were used. At the end, all rats were sacrificed for analysis of biomarkers of oxidative attack: amount of substances that react with thiobarbituric acid - TBARs, of the antioxidant defense system: activity of the enzyme catalase and of cellular activity: activity of the enzyme alkaline phosphatase in different organs: muscle soleus, liver, brain and blood. Aspects of glucose metabolism (glucose uptake and oxidation, glycogen synthesis and lactate production) by the soleus muscle were also evaluated. The main results were: in beginnig of the experiment, considering the whole lot of animals, in most of them (82%) the MLSS was obtained in the speed of 25m/min, to the concentration of 4.38+0.22mmol/L of blood lactate. At the end of the experiment, most of the rats training at the MLSS intensity (63,63%) presented MLSS in the speed of 25m/min, to the concentration of 3.10+0.27 mmol/L of blood lactate. Most (54,54%) of those animals trained above-MLSS they had MLSS in the speed of 25m/min, to the concentration of 3.36+0.62 mmol/L of blood lactate. The sedentary ones (72,72%) showed MLSS in... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre