Les catécholamines induisent la synthèse d’AMPc par une stimulation des récepteurs β-adrénergiques et contrôlent ainsi la fonction cardiaque en activant une pléiade de voies de signalisation intracellulaires. Les protéines Epac sont des facteurs d’échange pour les petites protéines G et sont directement activés par l’AMPc. Devant l’importance de la voie β-adrénergique dans la physiopathologie cardiaque et dans le but de mieux comprendre la régulation des processus cellulaires dépendants de l’AMPc dans le cœur, il apparaît essentiel de caractériser le rôle des facteurs d’échange Epac dans le myocarde. Dans une première partie, cette étude démontre que les effets de Epac sur l’hypertrophie des cardiomyocytes ventriculaires de rats nouveaux nés requièrent les GTPases H-Ras et Rap2B. Epac active la voie PLC/IP3/Ca2+ qui est nécessaire pour l’activation de H-Ras. Au niveau transcriptionnel, Epac induit l’export nucléaire de HDAC4 permettant l’activation d’un programme génique d’hypertrophie. Dans une deuxième partie, cette étude révèle l’implication de Epac1 dans l’hypertrophie des cardiomyocytes in vivo, chez la souris. La délétion de Epac1 protège du remodelage cardiaque induit par l’activation prolongée des récepteurs β-adrénergiques et améliore la fonction cardiaque. La surexpression de Epac1 spécifiquement dans le myocarde entraîne une hypertrophie des cardiomyocytes. Par ailleurs, la voie β-AR/Epac1 induit l’accumulation de protéines ubiquitinylées et provoque l’activation du processus d’autophagie in vitro et in vivo. L’autophagie protège des effets délétères de la voie β-adrénergique/Epac en participant à l’élimination des agrégats protéiques et en contrant les effets hypertrophiques de Epac1. Ces résultats ouvrent de nouvelles perspectives pour le traitement de l’hypertrophie et de l’insuffisance cardiaque. / Catecholamines regulate cardiac function by stimulating β-adrenergic receptors (β-AR), leading to cAMP production and activation of a multiplicity of signaling pathways. Epac proteins are exchange factors for small G proteins which are directly activated by cAMP. Given the importance of the β-adrenergic pathway in cardiac physiopathology, it becomes essential to characterize functions of Epac protein in myocardium. In a first part, this study shows that H-Ras and Rap2B GTPases are involved in Epac-induced neonatal rat cardiac myocytes hypertrophy. Epac induces activation of the PLC/IP3/Ca2+ pathway which is necessary for H-Ras activation. At the transcriptional level, Epac causes HDAC4 nuclear export leading to activation of a hypertrophic gene program. In a second part, this study reveals implication of Epac1 in cardiac hypertrophy in vivo. Deletion of Epac1 in mice protects from cardiac remodeling induced by chronic isoproterenol infusion and enhances cardiac function. Cardiac specific overexpression of Epac1 in mice induces cardiac myocytes hypertrophy. Interestingly, β-AR/Epac1 pathway triggers ubiquitinated proteins accumulation and activation of autophagy both in vitro and in vivo. By eliminating aggregates and by counteracting hypertrophic effects of Epac, autophagy protects from deleterious effects of the β-AR/Epac pathway. These results open news insights into the treatment of cardiac hypertrophy and heart failure.

Les β2-agonistes sont couramment utilisés pour prévenir et réduire les symptômes de l'asthme et de la bronchoconstriction induite par l'exercice. Mais, pris en quantités supérieures aux doses thérapeutiques, les β2-agonistes ont un effet anabolisant qui a été clairement démontré in vivo. Un certain nombre d’acteurs sont mis en jeu dans la réponse biologique du tissu musculaire aux β2-agonistes. L’un de ces acteurs est la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR, voie d’initiation de la traduction, ayant un rôle majeur dans la synthèse protéique. Dans ce contexte, notre première étude avait pour objectif de déterminer la cinétique des événements moléculaires responsables de l’hypertrophie du muscle squelettique de rat après administration de formotérol pendant 1 jour (J1), 3 jours (J3) et 10 jours (J10). Nous avons montré que l’administration de formotérol induisait une hypertrophie musculaire à J3 et J10 associée à l’activation transitoire de la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR (J1 et J3), et à une diminution de l’expression de l’E3 ubiquitine ligase MAFbx/Atrogin-1 (J3). La voie autophagie lysosome ne semblait pas être affectée. Ainsi, l’ensemble de ces résultats suggère que l’activation de la voie PI3K/Akt/mTOR est associée à la voie ubiquitine-protéasome mais pas à la voie autophagie-lysosome. La régulation transitoire de la voie PI3K/Akt/mTOR suggère que d’autres voies de signalisation sont impliquées dans l’hypertrophie musculaire induite par le formotérol. Le 007-AM, analogue de l’AMPc, a été décrit comme pouvant stimuler la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR via l’activation de la protéine Epac, suggérant que le 007-AM puisse constituer une molécule de substitution à l’utilisation des β2-agonistes. Notre seconde étude avait pour but de déterminer si le 007-AM avait une action anabolisante sur le tissu musculaire, mais également de déterminer si la 007-AM était une molécule stable permettant d’envisager son usage dans un cadre pharmacologique. L’administration de 007-AM pendant 7 jours chez des souris n’engendrait pas d’hypertrophie musculaire. En revanche, in vitro sur cellules C2C12, le 007-AM activait la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR comme en témoignait l’augmentation de la phosphorylation des protéines rpS6 et 4E-BP1. Nos résultats montraient également que le 007-AM était instable dans le plasma alors que son produit de dégradation, le 007 était plus stable. Pris ensembles, ces résultats suggèrent qu’un traitement de 7 jours au 007-AM n’est pas suffisant pour induire une hypertrophie musculaire et que l’absence d’hypertrophie musculaire pourrait provenir de l’instabilité du 007-AM dans le plasma. Toutefois, des études supplémentaires seront nécessaires pour confirmer ces résultats / Β2-agonists are traditionally used to prevent and reduce asthma symptoms and bronchoconstriction induced by exercise. Nevertheless, when administrated in vivo, at relatively high, far away from therapeutic doses, β2-agonists induce anabolic effects. Numerous actors are involved in biological response of the skeletal muscle, induced by β2-agonists. PI3K/Akt/mTOR signaling pathway, which initiates translation, is one of these actors. In this context, our first study aimed at determined the kinetic of molecular events responsible for skeletal muscle hypertrophy after 1 day (D1), 3 days (D3) and 10 days (D10) of formoterol administration. We have shown that formoterol administration induced skeletal muscle hypertrophy at D3 and D10 associated with a transient activation of PI3K/Akt/mTOR signaling pathway (D1 and D3), and, with a decrease in E3 ubiquitin ligase MAFbx/atrogin-1 expression (D3). The autophagy-lysosome pathway seems not to be regulated by formoterol administration. Taken together, these results suggest that PI3K/Akt/mTOR activation is temporally associated with the regulation of ubiquitin-proteasome but not the autophagy-lysosome pathway. The transient nature of the regulation of PI3K/Akt/mTOR signaling pathway also indicates that other unidentified pathways are probably activated to sustain the increase in skeletal muscle mass. Recently, 007-AM synthetic molecule has been described to stimulate PI3K/Akt/mTOR signaling pathway through Epac protein activation, suggesting that 007-AM could be an alternative to the use of β2-agonists. The purpose of our second study was to determine whether 007-AM had an anabolic action on skeletal muscle and if 007-AM was stable allowing considering its use in pharmacology. 007-AM administration for 7 days to mice does not lead to muscle hypertrophy. Nonetheless, in vitro on C2C12 cells, 007-AM activated PI3K/Akt/mTOR signaling pathway by increasing phosphorylation of rpS6 and 4E-BP1. Our results showed that contrary to 007, 007-AM was instable in plasma. Altogether, these results suggest that a 7-day 007-AM treatment is not sufficient to induce skeletal muscle hypertrophy. This lack of hypertrophy could be due to 007-AM instability in plasma. However, supplemental studies are needed to confirm these results

L’hypertrophie cardiaque est un mécanisme adaptatif qui se développe en réponse à une surcharge de travail hémodynamique. Lors d’un stress chronique, elle peut mener à l’insuffisance cardiaque (IC), l’une des principales causes de mortalité dans les pays industrialisés. Les voies de signalisation hypertrophiques induites par les récepteurs α et β-adrénergiques font intervenir la petite protéine G Ras et des protéines calcium-dépendantes telles que la calcineurine (CaN) et la Ca2+/calmoduline-dépendante kinase de type II (CaMKII), ainsi que leurs facteurs de transcription respectifs NFAT et MEF2. Dans les cellules immunitaires, la protéine Carabine a été mise en évidence comme inhibant la CaN et de Ras. L’objectif de cette thèse et de caractériser son rôle dans le cardiomyocyte.In vitro, nous montrons que Carabine est exprimée dans le cardiomyocyte de rat nouveau-né et adulte et inhibe par l’intermédiaire de ses domaines fonctionnels les voies de signalisation de Ras/ERK, CaN/NFAT et CaMKII/MEF2. Sous stimulation chronique adrénergique, la surexpression de Carabine prévient le remodelage cardiaque en bloquant le développement des marqueurs de l’hypertrophie : la croissance cellulaire, la réexpression des gènes foetaux etla réorganisation des protéines contractiles. Enfin, dans un modèle d’hypertrophie cardiaque induite par surcharge de pression chez le rat, l’injection intramyocardiaque d’un adénovirus codant pour Carabine inhibe l’hypertrophie des cardiomyocytes. Ce travail ouvre ainsi de nouvelles perspectives thérapeutiques pour le traitement de l’IC. / Cardiac hypertrophy is an adaptative mechanism developed in response to hemodynamic overload. During chronic stress, it can lead to heart failure (HF), one of the most important causes of mortality in industrialized countries. Hypertrophic signaling pathway induced under α and β-adrenergic receptor involve small G protein Ras and calcium dependent proteins suchas the calcineurine (CaN) and the Ca2+/calmodulin-dependent protein kinases II (CaMKII), as well as their respective transcription factors NFAT and MEF2. In immune cells Carabin protein has been shown to inhibit CaN and Ras. The purpose of my thesis was to determine the role of Carabin in the cardiomyocyte.In vitro, we showed that Carabin is expressed in neonatal and adult rat cardiomyocyte and inhibits via its functional domains the Ras/ERK, CaN/NFAT and CaMKII/MEF2 signaling pathways. Under adrenergic chronic stimulation, Carabin overexpression blocks the development of hypertrophic markers (cell size increase, re-expression of embryonic genesand contractile protein reorganisation) preventing thus cardiac remodeling. Finally, in a rat model pressure overload cardiac hypertrophy, intra-cardiac injection of Carabin adenovirus inhibits cardiomyocyte growth. This study opens new insights into the treatment of HF.

cAMP and Ca2+ are key regulators of exocytosis in many cells, including insulin-secreting pancreatic β-cells. Glucose-stimulated insulin secretion from β-cells is pulsatile and driven by oscillations of the cytoplasmic Ca2+ concentration ([Ca2+]i), but little is known about the kinetics of cAMP signaling and the mechanisms of cAMP action. Evanescent wave microscopy and fluorescent translocation biosensors were used to monitor plasma membrane-related signaling events in single MIN6-cells and primary mouse β-cells. Glucose stimulation of insulin secretion resulted in pronounced oscillations of the membrane phospholipid PIP3 caused by autocrine activation of insulin receptors. Glucose also triggered oscillations of the sub-plasma membrane cAMP concentration ([cAMP]pm). These oscillations were preceded and enhanced by elevations of [Ca2+]i, but conditions raising cytoplasmic ATP triggered [cAMP]pm elevations without accompanying changes in [Ca2+]i. The [cAMP]pm oscillations were also synchronized with PIP3 oscillations and both signals were suppressed after inhibition of adenylyl cyclases. Protein kinase A (PKA) was important for promoting concomitant initial elevations of [cAMP]pm and [Ca2+]i, and PKA inhibitors diminished the PIP3 response when applied before glucose stimulation, but did not affect already manifested PIP3 oscillations. The glucose-induced PIP3 oscillations were markedly suppressed in cells treated with siRNA against the cAMP-dependent guanine nucleotide exchange factor Epac2. Pharmacological activation of Epac restored PIP3 responses after adenylyl cyclase or PKA inhibition. Glucose and other cAMP-elevating stimuli induced redistribution of fluorescence-tagged Epac2 from the cytoplasm to the plasma membrane. This translocation was modulated by [Ca2+]i and depended on intact cyclic nucleotide-binding and Ras-association domains. In conclusion, glucose generates cAMP oscillations in β-cells via a concerted action of Ca2+ and metabolically generated ATP. The oscillations are important for the magnitude and kinetics of insulin secretion. While both protein kinase A and Epac is required for initiation of insulin secretion the cAMP-dependence of established pulsatility is mediated by Epac2.

Type II diabetes mellitus is associated with many detrimental health situations including heart complications. The purpose of this study was to identify a role for PKA-dependent Rap1a signaling in the AGE-RAGE cascade. My hypothesis was Rap1a GTPase increased the downstream effects of AGE-RAGE signaling in diabetes via a PKA-dependent pathway leading to elevated ECM remodeling in the heart. Cardiac fibroblasts were isolated from heterozygous (Het) and diabetic (db/db) mice. To test the hypothesis, gain-ofunction and loss-ofunction treatments were used. PKC-Zeta is known as a major signaling hub that potentially links PKA-dependent and AGE-RAGE signaling cascades so PKC-Zeta inhibition to downregulate PKA-dependent cascade at PKC-Zeta was also used. Results showed a downregulation of signaling markers in the AGE-RAGE cascade when disrupting Rap1a crosstalk at PKC-Zeta. By understanding where the PKA-dependent and AGE-RAGE signaling cascades crosstalk, a new molecular mechanism is understood possibly leading to decreasing remodeling in a diabetic heart.

Despite a steady decrease in fatality rates across European nations,Vulnerable Road User (VRU) continue to face significant risks in traffic incidents. Pedestrians, cyclists, and motorcyclists make up the majority of fatalities. Vision Zero sets a global standard for road safety,and its implementation complements broader European Union (EU)initiatives in prioritizing a zero-tolerance stance on road fatalities.This thesis underscores the transformative potential of VehicularAd hoc Networks (VANETs) by introducing a protocol to enhance roadsafety through intention sharing, particularly for micro-mobility vehicles such as E-bikes and E-scooters. By integrating this protocolwith Vehicle-to-Anything (V2X) technology, this thesis aims to redefine VRUs’ role in traffic safety from passive to active participants. Theprotocol aims to complement the quality of information and improving energy efficiency while maintaining safety metrics for cooperativetransportation systems. We achieved this by transmitting a reservedarea where the rider intends to be in the near future.Results from simulations demonstrate the efficacy of intention sharing in improving message reliability and efficiency compared to intention detection methods.While preliminary results show promise, further research is necessary to validate real-world applicability fully. Nonetheless, this thesiscontributes to the ongoing efforts to achieve Vision Zero by harnessing technological innovations to protect VRUs and create safer roadenvironments. / Trots en minskning av antalet dödsolyckor i europeiska länder fortsätter oskyddade trafikanter (VRU:er) att möta risker i trafiken. Fotgängare, cyklister och motorcyklister utgör majoriteten av dödsfall. Nollvisionen sätter en global standard för trafiksäkerhet, och dess implementering kompletterar bredare EU-initiativ som prioriterar nolltolerans mot dödsfall i trafiken. Denna avhandling understryker den transformativa potentialen hos Fordons ad-hoc-nätverk (VANETs) genom att introducera ett protokoll för att förbättra trafiksäkerheten genom delning av avsikter, särskilt för mikromobilitetsfordon såsom elcyklar och elsparkcyklar. Genom att integrera detta protokoll med Fordon till allt (V2X)-teknologi strävar detta arbete mot att omdefiniera VRU:ers roll i trafiksäkerhet från passiva till aktiva deltagare. Protokollet fungerar som så att den skickar meddelanden för VRU:ers intentioner till de andra deltagarna inom nätverket. Dessa meddelanden innehåller de framtida förutsägbara positionerna av VRU:n. Dessa positioner är sedan transformerade till en reserverad ellips där VRU:n kan tänkas befinna sig i framtiden.  Resultat från simuleringar visar effektiviteten i metoder som genom att dela avsikter förbättrar meddelandens pålitlighet och effektivitet i jämförelse med metoder som istället försöker detektera avsikter, vilket banar väg för säkrare transportsystem.  Det visade sig att tillförlitligheten bland meddelanden med intentioner var högre, störst skillnad var inom 100 meter från avsändaren. I denna grupp hade detekteringsmetoden en förlust av meddelanden på ungefär 20%, medans intentionsdelning endast hade en förlust på 5%. Dessutom var meddelandestorleken betydligt mindre, en minsking på 64%. De preliminära resultaten ser lovande ut, men vidare forskning är nödvändig för att fullt utvärdera den verkliga tillämpbarheten. Denna masteruppsats bidrar till den pågående eftersträvan att uppnå nollvisionen genom att utnyttja teknologiska innovationer för att skydda VRU:er genom samarbete och att skapa en säkrare trafikmiljö. Dessa resultat har potential att påverka standardiseringen på europeisk nivå och bana väg för framtidens mobilitet. / Trafikverket Skyltfonden 2023/104170

Reward-related learning occurs when previously neutral stimuli acquires an enhanced ability to elicit approach and other responses. Studies in the past have shown that dopamine receptor-mediated 3’,5’-cyclic adenosine monophosphate (cAMP)-dependent intracellular signalling is important for reward-related learning. Until recently, cAMP-dependent protein kinase (PKA) was the only known signalling molecule that was activated by cAMP. However, it has been discovered that another enzyme, exchange protein directly activated by cAMP (Epac), is also activated by cAMP. Thus, it is possible that cAMP mediates reward-related learning by an Epac-dependent signalling pathway. The present study used a conditioned place preference (CPP) paradigm to investigate whether Epac is involved in the acquisition of reward-related learning. Bilateral injections of amphetamine (20 µg/0.5μl/side) into the nucleus accumbens (NAc) have been shown in previous studies to reliably produce a CPP. Thus, amphetamine (20 µg) and Sp-adenosine 3’,5’-cyclic monophosphorothioate triethylamanine (Sp-cAMPS) (0.1, 1.0, 10, 15, 20 µg), an agent that activates both PKA and Epac, or amphetamine (20 µg) and 8-(4-chlorophenylthio)-2’-O-methyladenosine-3’,5’-cyclic monophosphate (8-pCPT) (0.73, 1.27, 1.45, 2.89, 5.78, 11.56 µg), an agent that selectively activates Epac, were co-injected into NAc to determine their effects on the acquisition of CPP. Results showed that 8-pCPT (1.45 µg), but not lower or higher doses, inhibited CPP. Sp-cAMPS (0.1, 15, 20 µg) also inhibited CPP, replicating the results of previous studies. The results implicate Epac in the acquisition of reward-related learning. / Thesis (Master, Neuroscience Studies) -- Queen's University, 2008-04-25 13:29:37.857

Les β2-agonistes sont couramment utilisés pour prévenir et réduire les symptômes de l'asthme et de la bronchoconstriction induite par l'exercice. Mais, pris en quantités supérieures aux doses thérapeutiques, les β2-agonistes ont un effet anabolisant qui a été clairement démontré in vivo. Un certain nombre d'acteurs sont mis en jeu dans la réponse biologique du tissu musculaire aux β2-agonistes. L'un de ces acteurs est la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR, voie d'initiation de la traduction, ayant un rôle majeur dans la synthèse protéique. Dans ce contexte, notre première étude avait pour objectif de déterminer la cinétique des événements moléculaires responsables de l'hypertrophie du muscle squelettique de rat après administration de formotérol pendant 1 jour (J1), 3 jours (J3) et 10 jours (J10). Nous avons montré que l'administration de formotérol induisait une hypertrophie musculaire à J3 et J10 associée à l'activation transitoire de la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR (J1 et J3), et à une diminution de l'expression de l'E3 ubiquitine ligase MAFbx/Atrogin-1 (J3). La voie autophagie lysosome ne semblait pas être affectée. Ainsi, l'ensemble de ces résultats suggère que l'activation de la voie PI3K/Akt/mTOR est associée à la voie ubiquitine-protéasome mais pas à la voie autophagie-lysosome. La régulation transitoire de la voie PI3K/Akt/mTOR suggère que d'autres voies de signalisation sont impliquées dans l'hypertrophie musculaire induite par le formotérol. Le 007-AM, analogue de l'AMPc, a été décrit comme pouvant stimuler la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR via l'activation de la protéine Epac, suggérant que le 007-AM puisse constituer une molécule de substitution à l'utilisation des β2-agonistes. Notre seconde étude avait pour but de déterminer si le 007-AM avait une action anabolisante sur le tissu musculaire, mais également de déterminer si la 007-AM était une molécule stable permettant d'envisager son usage dans un cadre pharmacologique. L'administration de 007-AM pendant 7 jours chez des souris n'engendrait pas d'hypertrophie musculaire. En revanche, in vitro sur cellules C2C12, le 007-AM activait la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR comme en témoignait l'augmentation de la phosphorylation des protéines rpS6 et 4E-BP1. Nos résultats montraient également que le 007-AM était instable dans le plasma alors que son produit de dégradation, le 007 était plus stable. Pris ensembles, ces résultats suggèrent qu'un traitement de 7 jours au 007-AM n'est pas suffisant pour induire une hypertrophie musculaire et que l'absence d'hypertrophie musculaire pourrait provenir de l'instabilité du 007-AM dans le plasma. Toutefois, des études supplémentaires seront nécessaires pour confirmer ces résultats

<p>Exchange proteins directly activated by cAMP (EPAC) are guanine nucleotide exchange factors for the small GTPases, Rap1 and Rap2. The central regulatory module of EPAC is a cAMP binding domain (CBD), which in the absence of cAMP provides auto-inhibition of the catalytic guanine nucleotide exchange activity. Binding of the allosteric effector, cAMP, removes the auto-inhibition exerted by the CBD of EPAC. Herein, we investigate through NMR spectroscopy the structural and dynamical basis of auto-inhibition and cAMP-dependent allosteric activation in the CBD of EPAC. Specifically, the work described in this dissertation proposes novel methods that utilize NMR chemical shifts to define the network of residues that mediates long-range intra-molecular signalling, <em>i.e.</em> the chemical shift covariance analysis (CHESCA) and the chemical shift projection analysis (CHESPA). Using CHESCA as explained in Chapter 2, we identified an allosteric network that bridges the sites of cAMP-binding and cAMP-dependent structural changes to those of cAMP-dependent dynamical changes, which are critical for the release of auto-inhibition. The CHESCA results therefore rationalize how cAMP leads to activation through modulation of both structure and dynamics. In order to dissect the determinants of auto-inhibition in the absence of cAMP, several mutations along the signaling pathways identified by CHESCA were implemented and their effect on the auto-inhibitory conformational equilibrium of the apo-CBD was assessed through CHESPA, as outlined in Chapters 3 and 4. Overall, we have shown how CHESCA and CHESPA provide unprecedented insight into the allosteric networks underlying auto-inhibition and cAMP dependent activation in the CBD of EPAC. In addition, the methods employed here to map EPAC allostery are likely to be generally applicable to other systems.</p> / Doctor of Philosophy (PhD)

Les antidépresseurs actuels sont très similaires au niveau de leur mécanisme d’action et sont plus ou moins efficaces. Un des problèmes majeurs est leur long temps de latence à fournir une action thérapeutique dû aux adaptations des sites pré et post synaptiques. Dans un modèle animal, nous avons récemment découvert que l’agoniste RS67333 des récepteurs 5-HT4 était en mesure de produire en trois jours les mêmes effets antidépresseurs qui normalement prennent de deux à trois semaines à apparaître avec les antidépresseurs actuellement disponibles. De plus, nous avons constaté que les effets antidépresseurs de cet agoniste possédaient une résistance à la tolérance. Il y a d’autres agonistes du même récepteur, tel que le prucalopride qui ne produit pas d’effets antidépresseurs comme RS67333. Étant donné que l’efficacité du Prucalopride à stimuler les 5-HT4Rs est similaire sinon plus grande que celle de RS67333, nous avons énoncé l’hypothèse que le récepteur 5-HT4 pourrait adopter différentes conformations actives suite à son activation par différents agonistes. Nous avons ainsi décidé d’explorer les principales réponses fonctionnelles des récepteurs 5-HT4B en observant leurs propriétés de régulation et de signalisation. Nous avons montré que l’isoforme B du récepteur 5-HT4, étant hautement exprimé dans le système limbique, détient une signalisation et une régulation différentes dépendant du ligand activateur. Nos résultats indiquent que chacun des agonistes testés (5-HT, RS67333, ML10302, Zacopride, Prucalopride) modulent distinctivement la production d’AMPc et l’internalisation du récepteur. Les résultats nous ont clairement permis de déterminer que les agonistes possèdent une efficacité et ou puissance différentes les uns par rapport aux autres. De plus, l’ordre d’efficacité des agonistes à moduler la voie de l’AMPc était (Prucalopride > Zacopride = ML10302 = 5-HT > RS67333) et est différente de leur ordre d’efficacité à induire la régulation du récepteur par internalisation (5-HT > Zacopride > Prucalopride > ML10302 = RS67333). Ainsi, nous avons montré que les 5-HT4Rs adoptent des conformations qui sont ligand-spécifiques. Cela implique que la sélectivité fonctionnelle serait un facteur important à considérer dans les mécanismes d’action antidépresseur des agonistes de ce récepteur. / Antidepressants currently available are very similar toward their mechanism of action and are more or less effective. One major problem is their long latency to provide a therapeutic effect due to adaptations of pre and post synaptic locations. In an animal model, we recently discovered that the agonist RS67333 of the 5-HT4 receptors was able to produce in three days the same antidepressant effects that normally take two to three weeks to appear with the currently available antidepressants. In addition, we found that the antidepressant effects of this agonist had a resistance to tolerance. There are others agonists of the same receptor such as prucalopride, which does not produce antidepressant effects as RS67333. Since the effectiveness of prucalopride to stimulate 5-HT4Rs is similar if not greater than RS67333, we stated the hypothesis that the 5-HT4 receptor could adopt different active conformations following its activation by various agonists. We decided to explore the major functional responses of 5-HT4B by observing their regulatory and signaling properties. We showed that the B isoform of the 5-HT4, being highly expressed in the limbic system, has a different signaling and regulation depending on the ligand. Our results indicate that each of the agonists tested (5-HT, RS67333, ML10302, Zacopride, Prucalopride) distinctively modulate cAMP production and receptor internalization. The results have clearly identified that agonists differed in potency and efficacy. Moreover, the order of effectiveness of agonists to modulate the cAMP pathway was (prucalopride> zacopride = 5-HT = ML10302> RS67333) different from their order of effectiveness in inducing receptor regulation by internalization (5-HT> Zacopride> Prucalopride> RS67333 = ML10302). Thus, we have shown that 5-HT4Rs adopt conformations that are ligand-specific. This implies that functional selectivity is an important factor in the mechanisms of antidepressant action of this receptor agonists.