Utilizaram-se 27 ratos Wistar, machos com 98 dias de idade, originados do Biotério da FMVZ-USP, com o objetivo de avaliar os possíveis efeitos do diabetes mellitus, sobre a função reprodutiva relacionada ao macho.Os animais foram divididos em três grupos, grupo A (GA) constituído de 10 animais sadios, grupo B (GB) constituído de oito ratos Wistar, com diabetes mellitus induzida quimicamente através da administração intraperitonial de estreptozotocina (65mg/Kg) e grupo C (GC) constituído por nove animais com diabetes mellitus induzida quimicamente pela administração intraperitonial de estreptozotocina (65mg/Kg), associada a insulinoterapia (3UI/rato por dia). Após quatro dias da administração da droga (GB e GC), os animais pertencentes ao grupo C (GC) receberam insulinoterapia (três IU/rato/dia) durante 42 dias. No final do experimento (46 dias após a administração da estreptozotocina), os animais foram sacrificados e foram observados os seguintes resultados; O diabetes mellitus leva ao aumento da glicemia, diminuição do peso corpóreo, diminuição do peso e tamanho testicular, diminuição das concentrações séricas de testosterona e FSH. Porém através da avaliação dos níveis séricos de inibina B, foi constatado que o diabetes não promove nem redução, nem aumento das concentrações séricas desse hormônio. Conclui-se também que a reposição exógena de insulina foi capaz de impedir a diminuição do peso corporal, redução do peso testicular, diminuição dos níveis de testosterona e FSH, porém apesar da insulinoterapia ter impedido a diminuição do peso corpóreo, não foi capaz de proporcionar o mesmo desenvolvimento corporal observado nos animais controle. / The objective of the present experiment was to evaluate the possible effect of diabetes mellitus, on the reproductive function in male rats. Towards this end, 27 male Wistar rats (98 days old), housed at the FMVZ-USP animal holding facility, were randomly assigned into three groups: Group A (GA) consisting of 10 healthy animals; Group B(GB) consisting of eight Wistar rats, with diabetes mellitus chemically induced through the intraperitoneal administration of estreptozotocin (65mg/Kg); and C group (GC) constituted by nine animals with diabetes mellitus chemically induced by the intraperitoneal administration of estreptozotocin (65mg/Kg), associate to an insulin treatment (3IU/rat per day for 42 days) that begun 4 days after the streptozotocin administration. Animals were euthanized 46 days after the administration of the estreptozotocin and the following results were obtained: diabetes mellitus led to an increase of the glicemia, reduction of the corporeal weight, decreased testicular wheight, serum concentrations of testosterone and FSH. No effect of diabeted were found for the serum levels of inhibin B. Results suggested that the exogen replacement of insulin was capable of hindering the reduction on corporal weight, reduction of testicular weight and reduction of the testosterone levels and FSH. On the other hand despite the fact that insulin treatament was capable of avoiding the reduction on bofy weight, it was not capable to provide similar body development observed in the normal animals.

Utilizaram-se 27 ratos Wistar, machos com 98 dias de idade, originados do Biotério da FMVZ-USP, com o objetivo de avaliar os possíveis efeitos do diabetes mellitus, sobre a função reprodutiva relacionada ao macho.Os animais foram divididos em três grupos, grupo A (GA) constituído de 10 animais sadios, grupo B (GB) constituído de oito ratos Wistar, com diabetes mellitus induzida quimicamente através da administração intraperitonial de estreptozotocina (65mg/Kg) e grupo C (GC) constituído por nove animais com diabetes mellitus induzida quimicamente pela administração intraperitonial de estreptozotocina (65mg/Kg), associada a insulinoterapia (3UI/rato por dia). Após quatro dias da administração da droga (GB e GC), os animais pertencentes ao grupo C (GC) receberam insulinoterapia (três IU/rato/dia) durante 42 dias. No final do experimento (46 dias após a administração da estreptozotocina), os animais foram sacrificados e foram observados os seguintes resultados; O diabetes mellitus leva ao aumento da glicemia, diminuição do peso corpóreo, diminuição do peso e tamanho testicular, diminuição das concentrações séricas de testosterona e FSH. Porém através da avaliação dos níveis séricos de inibina B, foi constatado que o diabetes não promove nem redução, nem aumento das concentrações séricas desse hormônio. Conclui-se também que a reposição exógena de insulina foi capaz de impedir a diminuição do peso corporal, redução do peso testicular, diminuição dos níveis de testosterona e FSH, porém apesar da insulinoterapia ter impedido a diminuição do peso corpóreo, não foi capaz de proporcionar o mesmo desenvolvimento corporal observado nos animais controle. / The objective of the present experiment was to evaluate the possible effect of diabetes mellitus, on the reproductive function in male rats. Towards this end, 27 male Wistar rats (98 days old), housed at the FMVZ-USP animal holding facility, were randomly assigned into three groups: Group A (GA) consisting of 10 healthy animals; Group B(GB) consisting of eight Wistar rats, with diabetes mellitus chemically induced through the intraperitoneal administration of estreptozotocin (65mg/Kg); and C group (GC) constituted by nine animals with diabetes mellitus chemically induced by the intraperitoneal administration of estreptozotocin (65mg/Kg), associate to an insulin treatment (3IU/rat per day for 42 days) that begun 4 days after the streptozotocin administration. Animals were euthanized 46 days after the administration of the estreptozotocin and the following results were obtained: diabetes mellitus led to an increase of the glicemia, reduction of the corporeal weight, decreased testicular wheight, serum concentrations of testosterone and FSH. No effect of diabeted were found for the serum levels of inhibin B. Results suggested that the exogen replacement of insulin was capable of hindering the reduction on corporal weight, reduction of testicular weight and reduction of the testosterone levels and FSH. On the other hand despite the fact that insulin treatament was capable of avoiding the reduction on bofy weight, it was not capable to provide similar body development observed in the normal animals.

Resumo não disponível

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-03-27T12:24:44Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2307694 bytes, checksum: dba8ee71e2af5e8cbb7f19d83f9c4044 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-27T12:24:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2307694 bytes, checksum: dba8ee71e2af5e8cbb7f19d83f9c4044 (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O cádmio (Cd) é um metal pesado tóxico aos organismos vivos. Alterações das funções reprodutivas após a exposição ao Cd tem sido foco de constantes pesquisas. Deste modo, tem-se buscado estratégias seguras e eficazes contra toxicidade do Cd, dentre estas, a avaliação de extratos vegetais. A polpa do fruto de Euterpe edulis, conhecida popularmente por açaí da Mata Atlântica ou por juçara, apresenta propriedades antioxidante e anti-inflamatória, in vitro e in vivo, devido principalmente ao seu alto conteúdo de antocianinas. Contudo, pouco se sabe da ação deste extrato sobre parâmetros reprodutivos masculinos. Neste trabalho foram avaliados os efeitos de diferentes doses do extrato hidroalcoólico da polpa de juçara (EJ) sobre túbulo seminífero, intertúbulo, atividade de enzimas antioxidantes e produtos de peroxidação lipídica de ratos Wistar sadios e submetidos ao cádmio. O experimento inicial testou os efeitos de três doses do extrato de juçara, 300 mg/kg, 600 mg/kg e 900 mg/kg sobre os parâmetros testiculares dos ratos sadios. No segundo experimento, o extrato de juçara foi dado após 48 horas após a exposição à dose única de 1,2 mg/kg de cloreto de cádmio. Os parâmetros biométricos, tubulares e intertubulares dos grupos que receberam somente o EJ não apresentaram variação significativa em relação ao grupo controle. Também não houve diferença significativa para a atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa S-transferase (GST), e para o marcador de peroxidação lipídica, malondialdeído. Os animais expostos ao Cd apresentaram danos morfológicos como necrose e calcificação tubular, aumento do percentual de fibras colágenas no intertúbulo, redução da testosterona sérica, aumento da peroxidação lipídica e aumento da atividade das enzimas antioxidantes SOD e CAT. O extrato hidroalcoólico da polpa de juçara, por sua vez, não promoveu recuperação testicular nos grupos expostos ao Cd. Além disto, o uso do EJ após a exposição ao Cd agravou os danos testiculares como observado pela redução do peso testicular e seu parênquima e pelo aumento da atividade de enzimas antioxidantes SOD e CAT. / Cadmium (Cd) is a toxic heavy metal to living organisms. Changes in reproductive functions after Cd exposure have been the focus of constant research. In that sense, safe and effective strategies against Cd toxicity have been sought, for instance, by evaluating plant extracts. Euterpe edulis, which is commonly known as ‘Atlantic Rainforest açaí’ or ‘juçara palm’, yields fruits whose pulp extract has antioxidant and anti-inflammatory properties both in vitro and in vivo, due mainly to its high content of anthocyanins. However, little is still known about the effect of this extract on male reproductive parameters. In this work, the effects of different doses of the hydroalcoholic extract of juçara palm pulp (JE) on the seminiferous tubule, intertubular space, activity of antioxidant enzymes, and lipid peroxidation products were evaluated in healthy and Cd-exposed Wistar rats. The initial experiment tested the effects of three JE doses, namely 300, 600, and 900 mg/kg, on the testicular parameters of healthy rats. In the second experiment, rats were fed on JE 48 hours after exposure to a single dose of 1.2 mg/kg body weight of cadmium chloride. The biometric, tubular, and intertubular parameters of groups that were only fed on JE showed no significant variation in relation to the control group. Neither was there any significant difference in the activity of enzymes superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), and glutathione S-transferase (GST), or in contents of the lipid peroxidation marker, malondialdehyde. The Cd-exposed animals showed morphological damage such as tubular necrosis and calcification, increased percentage of collagen fibers in the intertubular space, decreased serum testosterone, and increased lipid peroxidation and SOD and CAT activities. Hydroalcoholic extract of juçara palm pulp, on the other hand, promoted no testicular recovery in Cd-exposed groups. In addition, the use of JE after Cd exposure aggravated testicular damage, as observed by the reduction in testicular weight and in its parenchyma as well as by the increased SOD and CAT activities.

SOUZA, A. C. B. L. Estudos sobre as interações das proteínas seminais com as células espermáticas e componentes dos diluidores usados na criopreservação do sêmen e sobre marcadores moleculares de parâmetros do sêmen em animais de produção. 2014. 142 f. Tese (Doutorado em Zootecnia) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2015-01-14T18:46:12Z No. of bitstreams: 1 2014_tese_acblsouza.pdf: 2376080 bytes, checksum: 9fc05cc53b72acae6b4e63d3ee08281a (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-11-25T12:26:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_tese_acblsouza.pdf: 2376080 bytes, checksum: 9fc05cc53b72acae6b4e63d3ee08281a (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-25T12:26:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_tese_acblsouza.pdf: 2376080 bytes, checksum: 9fc05cc53b72acae6b4e63d3ee08281a (MD5) Previous issue date: 2014 / This thesis presents two chapters. In the first chapter, its objective was to investigate the potential use of correlative microarray-based transcript pairs as candidate markers for male fertility using dysplasia of the fibrous sheath (DFS) as an affected model. It is widely recognized that microarray technology may be limited by cost and that the quality of the transcript remains relatively unknown. To address these issues, we analyzed the stable transcript pairs by qPCR with a systematic primer design process. On this experimental study, we used men with proven fertility and men with a diagnosis of DFS. Our approach was based on primer sequences for six genes of interest were designed using Oligo7 and Primer3Plus. Primer specificity was initially assessed in silico by searching the ENSEMBL, University of California Santa Cruz, and National Center for Biotechnology Information databases for nontarget complementary sequences throughout the genome. The ability of transcript pairs to classify samples from males of proven fertility away from DFS was assessed. Our results showed that in conjunction with identifying four new stable transcript pairs, comparison of the DFS qPCR C(t) correlation coefficients revealed the disruption of four stable fertile sample transcript pairs. This suite of transcript pairs resolves DFS. In conclusion, the results show that with effectively designed primers, qPCR may provide an affordable molecular assay to assess male fertility status. Second chapter includes two studies regarding evaluations of ram feeded with supplemented diet with cashew nut. On the frist study, our goal was detect transcripts for Heat Shock Protein (HSP70), Clusterin (CLU), Ovis aries T-complex protein 1 alfa subunit-like protein (TCP1) e Ovis aries chaperonin containing TCP1, subunit 8 (theta) (CCT8) on ram sperm by. For primer designing we used published ESTs from NCBI and manually annotated by us using Primer3Plus and OligoAnalizer. PRM2 was used as internal qPCR control. Semen samples from mature Morada Nova ram were collected by eletroejaculator, washed in PBS and prepared for further RNA extraction. Selected samples followed quality recommendatios from Colégio Brasileiro de Reprodução Animal regarding motility, vigor and concentration. Our results showed presence of mRNA HSP70 on ram sperm and they can possible be envolved in early embryo development, oocyte activation and post fertilization events. Further analyses will be necessary to confirm presence of TCP1 and CCT8 on ram sperm. Our findings indicate new perpectives about the effects of these chaperones during embryo development mesuring if its expression reflects male fertility on the early embryo development. On the second study the the main goal is to evaluate the effects of a lipid-enriched diet containing cashew nut brain on the expression of genes related to lipid metabolism in the longissimus dorsi muscle of Morada Nova rams. Twenty sexually mature and reproductively sound rams were divided in two groups based on ram live weight, and each ram was kept on individual pens. During three months, group 1 (G1) rams were fed with a lipid-rich diet, containing cashew nut bran (CNB), while group 2 (G2) was fed with a meal based on corn and soy. Both diets were isocaloric and isoproteic, and had a mineral mix added-in. The rams also were offered Tifton grass hay and had free access to water. The amount of diet offered (ration plus hay) was adjusted everyday to a maximum waste of 10%. Seven genes coding for proteins directly or indirectly involved in lipid metabolism were initially selected as targets, incluiding GH, ACACA, CAST, CAPN3, LPL, SCD, and FASN. Also, five genes were selected as reference genes, ACTB, GAPDH, RPL4, RPS18 and TBP. From the seven genes originally selected as targets, GH, ACACA and CAST were removed, leaving the final list with four targets. The first two genes were removed due to alternative pairing of the primers (low specificity), while CAST showed low amplification efficiency during PCR reaction. From the final target list, the expression of only two genes was affected by diet, SCD (p<0.01) and FASN (p<0.05), while LPL (p=0,1022) and CAPN3 (p=0,0939) were not different at the p<0.05 level. Both SCD and FASN genes were down-regulated in G1 (lipid-rich diet containing CNB) compared to G2. These genes are involved in lipogenic pathways, related to tissue lipid deposition; therefore, these results were expected. This is the first time that a fat-rich diet based on CNB was shown to affect gene expression of proteins involved in fat deposition in carcass muscles of rams. Longissimus dorsi is one of the finest meat cuts. Considering that human diets rich in poli-unsaturated fatty acids (PUFA) can decrease the risk of heart and other chronic diseases, a change in the fatty acid profile of this muscle could contribute to a healthier diet, aggregating value to the end-product of the lamb meat market. The effects of CNB-based diet on the gene expression of SCD and FASN support the notion that such diet, as previously shown for other sources of lipid in ruminants, can potentially change the fatty acid composition of L. dorsi, but this hypothesis needs to be experimentally verified by profiling fatty acids in animals fed CNB versus carbohydrate-based diets. CNB use as an ingredient in animal feeding is environmentally-friendly, since it contributes to by-product recycling from the agroindustrial plants in Northeast Brazil. Also, considering that CNB-based diet changes lipogenic gene expression without affecting weight gain or reproductive status of the rams, as shown in another work from our team, makes CNB a very important alternative food in ram production systems in tropical regions. / A tese é composta por dois capítulos. O primeiro capítulo inclui o trabalho cujo objetivo foi investigar o potencial uso de pares de transcritos correlativos baseados em microarranjos como marcadores de fertilidade masculina usando a displasia da bainha fibrosa (DFS) como modelo afetado. Atualmente é bastante reconhecido que a tecnologia de microarranjos pode ser limitada pelos custos e que a qualidade dos transcritos permanece relativamente desconhecida. Para responder essas questões, nós analizamos pares de transcritos estáveis por qPCR com um processo sistemático de desenho de primers sistemático. Nesse estudo experimental, nós utilizamos amostras de homens com fertilidade comprovada e de homens com diagnótico de DFS. Nossa abordagem foi baseada nas sequências de primers dos seis genes de interesse, os quais foram desenhados utilizando os programas Oligo7 e Primer3Plus. A especificidade do primer foi inicialmente analisada in silico através de pesquisas nos bancos de dados ENSEMBL, University of California Santa Cruz (UCSC), e National Center for Biotechnology Information (NCBI) para uso de sequências específicas aos genes alvos. A habilidade dos pares de transcritos em classificar as amostras de homens de fertilidade comprovada das amostras de DFS foi avaliada. Nossos resultados mostraram que em conjunção com a identificação de quatro novos pares estáveis, a comparação dos coeficientes de correlação dos valores de C(t) dos DSF revelou a interrupção de quatro pares estáveis identificados nas amostras de homens normais. Esta seleção de pares estáveis resolve a questão sobre a DSF. Em conclusão, os resultados mostram efetivamente que o desenho de primers e qPCR podem fornecer um ensaio molecular de baixo custo para avaliar a fertilidade masculina. O segundo capítulo divide-se em dois estudos e avalia em carneiros os efeitos de uma dieta suplementada com farelo de castanha de caju. No estudo 1, nosso objetivo foi detectar a presença de transcritos para Heat Shock Protein (HSP70), clusterina (CLU), proteína semelhante à subunidade alfa do complexo T (TCP1) e proteína do complexo T subunidade 8 (CCT8) no espermatozóide de ovinos, seguindo a mesma metodologia para qPCR utilizada no capitulo 1. As sequências de primers foram desenhadas utilizando os programas Primer3Plus e Oligo Analyzer. Gene para protamina 2 (PRM2) foi usado como controle interno de reação. O sêmen foi coletado de machos púberes Morada Nova utlizando eletroejaculador. As amostras selecionadas para extração de RNA espermático seguiram as recomendações do Colégio Brasileiro de Reprodução Animal quanto aos parâmetros de motilidade, vigor e concentração. Nossos resultados mostraram a presença de mRNA para a HSP70 nos espermatozóides de ovinos. Maiores estudos são necessários a fim de confirmar ou refutar a presença das chaperonas TCP1 e CCT8 no espermatozóide ovino. A presença do transcrito da HSP70 no espermatozóide de ovinos abre perspectivas para estudos futuros sobre os efeitos do mRNA HSP70 no desenvolvimento embrionário, de modo a avaliar se essa expressão ocorre de modo espontâneo, programado e seqüencial, e se esses mecanismos se refletem na fertilidade e no desenvolvimento embrionário. O segundo estudo tem como principal objetivo avaliar os efeitos de uma dieta contendo farelo de castanha de caju (FCC) na expressão de genes relacionados ao metabolismo dos lipídios no músculo Longissimus dorsi de carneiros Morada Nova. Vinte carneiros maduros sexualmente foram divididos em dois grupos baseando-se no peso vivo. Os animais foram mantidos em baias individuais. Durante três meses, o grupo castanha (GCA) foi alimentado com ração contendo FCC, enquanto o grupo controle (GCO) recebeu ração à base de milho e soja. As duas dietas eram isocalóricas e isoprotéicas, adicionadas de suplemento mineral. Os carneiros também receberam feno de Tifton e água à vontade. A quantidade de alimento ofertado (ração e feno) foi ajustada diariamente para sobra de 10%. Sete genes codificantes de proteínas envolvidas direta ou indiretamente foram selecionados como alvos, incluindo: GH, ACACA, CAST, CAPN3, LPL, SCD e FASN. Para normalização, foram selecionados cinco genes candidatos: ACTB, GAPDH, RPL4, RPS18 e TBP. Dentre os sete genes alvos selecionados anteriormente, os alvos GH, ACACA e CAST foram removidos. Os dois primeiros foram removidos devido amplificação de alinhamento múltiplo (baixa especificidade do primers), enquanto CAST apresentou baixa eficiência de amplificação. Da lista de gene alvo final, a expressão de somente dois genes foi afetada pela dieta, SCD (p<0.01) e FASN (p<0.05), enquanto LPL (p=0,1022) e CAPN3 (p=0,0939) não apresentaram diferença significativa (p<0.05). Os genes SCD e FASN foram reprimidos no GCA comparada ao GCO. Este é o primeiro relato de que uma ração contendo FCC afetou a expressão gênica de proteínas envolvidas na deposição de lipídios no músculo em ovinos. Considerando que uma dieta contendo FCC altera a expressão de genes lipogênicos sem afetar o ganho de peso nem a eficiência reprodutiva de ovinos, faz da castanha de caju uma importante alternativa para o sistema de produção de ovinos criados em regiões tropicais.

O objetivo deste trabalho foi o de avaliar o efeito da suplementação da dieta de Tilápias (Oreochromis niloticus) utilizando sal comercial composto dos microminerais cobre, manganês e zinco, sobre a histologia e o desenvolvimento das gônadas dos machos. Foram utilizados 1200 machos masculinizados de tilápia, com média de peso de 120g, suplementadas com níveis crescentes (0,00; 0,35; 0,70; 1,05; 1,40 e 1,75 mg/kg) de um produto comercial composto por Cu 13,40 g/kg; Mn 26,70 g/kg e Zn 66,70 g/kg. O experimento foi conduzido em um sistema de recirculação de água, composto por 24 tanques divididos ao meio totalizando 48 unidades experimentais. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com medidas repetidas no tempo. As biometrias e coletas foram realizadas em 16 e 32 semanas de experimento, para avaliar o desenvolvimento dos peixes. As gônadas coletadas foram preparadas e cortadas para confecção de lamina histológica, após coradas com hematoxilina e eosina, e posteriormente fotografadas, utilizando microscópio com câmera acoplada. A contagem das fotos foi realizada manualmente, e avaliou-se o número de células por mm3, para espermatogônias, espermatócitos, espermátides e espermatozoides. As correlações entre número de espermatozoides, espermatócitos, espermátides e tratamentos foi de -0,30, -0,20 e -0,30, respectivamente, demonstrando que o efeito da suplementação crescente com o sal, é prejudicial para o desenvolvimento das células reprodutivas masculinas. Foi observado que os tratamentos com adição igual ou superior a 0,70 mg/kg do sal comercial causaram danos as gônadas para os parâmetros da gametogênese de número de espermatócitos, espermátides e espermatozoides. Sendo assim, a utilização de sais que contenham combinação de Cu 13,40 g/kg; Mn 26,70 g/kg e Zn 66,70 g/kg reprodutores machos de tilápia, não é recomendada em função dos danos causados nas etapas da gametogênese, reduzindo a produção de espermatozoides. / The objective of this study was to evaluate the effect of supplementing the diet of tilapia (Oreochromis niloticus) using commercial salt compound of micro minerals copper, manganese and zinc, on the histology and gonadal development of males. A total of 1200 masculinized male tilapia were used, with 120 g average weight, supplemented with increasing levels (0.00, 0.35, 0.70, 1.05, 1.40 and 1.75 mg / kg) of a product commercial composed of Cu 13,40 g/kg; Mn 26,70 g/kg e Zn 66,70 g/kg. The trial was conducted in a water recirculation system, consisting of 24 tanks divided in half, totaling 48 experimental units. The experimental design was completely randomized with repeated measures over time. The biometry and samples were taken at 16 and 32 weeks of experiment, to evaluate the fish development. The collected gonads were prepared and sliced for making histological slide, after stained with hematoxylin and eosin, and then photographed using a microscope with attached camera. The count of the photos was performed manually, and was rated the number of cells per mm3 to spermatogonia, spermatocytes, spermatids and sperm cell. The correlations between the number of spermatozoa, spermatocytes, spermatids and treatments was of -0.30, -0.20 and -0.30, respectively, demonstrating that the effect of increasing supplementation of the salt is detrimental to the development of male reproductive cells. It was observed that the addition equal or superior to 0.70 mg / kg of commercial salt caused damage in the gonads for gametogenesis parameters number of spermatocytes, spermatids and sperma cell. Thus, the use of combination of salts containing 13.40 g Cu / kg; Mn 26.70 g / kg Zn and 66.70 g / kg breeding male tilapia is not recommended due to the damage caused in the stages of gametogenesis, reducing the sperm production.

A prática de exercício físico de mulheres nos períodos de preconcepção e gestação causa uma série de efeitos benéficos no desenvolvimento da prole. Pouco se sabe, no entanto, sobre a influência do exercício físico masculino sobre seus descendentes. Como a espermatogênese é um processo contínuo, as experiências de vida dos pais poderiam reprogramar o genoma dos espermatozoides por meio de processos epigenéticos, por exemplo, que poderiam interferir no desenvolvimento da prole. A presente dissertação tem como objetivo estudar essa hipótese. Examinamos os efeitos do exercício físico paterno sobre os seguintes parâmetros de desenvolvimento da prole: maturação corporal, desempenho cognitivo, expressão do BDNF muscular, no hipocampo e córtex frontal; e metilação global do DNA no hipocampo. Para tanto, ratos Wistar machos foram divididos em dois grupos: sedentários e exercitados. O protocolo de exercício físico consistiu de corrida na esteira por um período de 8 semanas. Após, os animais foram expostos às fêmeas em período fértil e não-treinadas. Os filhotes de ambos os grupos de pais foram submetidos a testes para avaliação do ganho de peso e medidas de crescimento, do primeiro dia pós-natal (P1) até o P21 A partir do P46, foram realizadas a medida indireta do consumo máximo de oxigênio e a avaliação da aprendizagem espacial e memória, até o P52. Os animais foram submetidos à eutanásia; os músculos dos membros posteriores, os testículos, as glândulas adrenais e a gordura gonadal foram pesados. Os resultados mostram que a prole de pais treinados e de não-treinados não diferem quanto às medidas físicas, desempenho físico, avaliação cognitiva e expressão do fator trófico. No entanto, houve uma diminuição significativa no peso dos testículos e da gordura gonadal na prole de pais treinados. O nível de metilação do DNA no hipocampo de filhos de pais exercitados apresentou uma diminuição, comparada ao grupo de filhos de pais sedentários. Esse resultado aponta para uma maior expressão gênica no grupo exercitado. Embora no presente estudo os mecanismos pelos quais o exercício paterno influencia o desenvolvimento da prole não tenham sido estabelecidos, reforça-se o papel essencial que a atividade física tem em um estilo de vida saudável e na prevenção de doenças, além de não gerar prejuízos ao desenvolvimento dos descendentes. / The physical exercise of women in the pre-conception and gestation periods causes a series of beneficial effects on offspring development. Little is known, however, about the influence of male physical exercise on their offspring. As spermatogenesis is a continuous process, the life experiences of the fathers could reprogram the sperm genome by means of epigenetic processes, for example, which could interfere in the development of the offspring. The present dissertation aims to study this hypothesis. We examined the effects of paternal physical exercise on the following parameters of offspring development: body maturation, cognitive performance, hippocampus, cortex and muscle BDNF expression, and global DNA methylation in the hippocampus. Thus, male Wistar rats were divided into two groups: sedentary and exercised. The physical exercise protocol consisted of running on the treadmill for a period of 8 weeks. Afterwards, the animals were exposed to females at a fertile and untrained. The pups of both groups of parents were submitted to tests to evaluate the weight gain and growth measures from the first postnatal day (P1) to P21. From P46, the indirect measurement of maximum oxygen consumption and the evaluation of spatial learning and memory were made until P52 The animals were submitted to euthanasia; the muscles of the hindlimbs, the testicles, the adrenal glands and the gonadal fat were weighed. The results showed that the offspring of trained and untrained fathers did not differ in physical measures, physical performance, cognitive evaluation and trophic factor expression. However, there was a significant decrease in testicles weight and gonadal fat in the offspring of trained parents. The level of DNA methylation in the hippocampus of pups of exercised fathers presented a decrease, compared to the group of pups of sedentary fathers. This result points to a greater gene expression in the exercised group. Although in the present study the mechanisms by which paternal exercise influences the development of the offspring have not been established, the essential role that physical activity has in a healthy lifestyle and in the prevention of diseases is reinforced, and it does not cause the offspring development any harm as well.

Submitted by Emi Rosane Silistino de Souza null (emi.rosane@hotmail.com) on 2016-03-10T05:51:12Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO EMI 2016 OK.pdf: 3134204 bytes, checksum: c2496577f07709557fe6c8ab1c101ffb (MD5) / Approved for entry into archive by Sandra Manzano de Almeida (smanzano@marilia.unesp.br) on 2016-03-10T18:53:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 souza_ers_me_sjrp.pdf: 3134204 bytes, checksum: c2496577f07709557fe6c8ab1c101ffb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-10T18:53:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 souza_ers_me_sjrp.pdf: 3134204 bytes, checksum: c2496577f07709557fe6c8ab1c101ffb (MD5) Previous issue date: 2016-03-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A Subordem Heteroptera contém cerca de 75 famílias, incluindo Coreidae, na qual pertencem as espécies Corecoris fuscus, Leptoglossus gonagra, L. zonatus e Sphictyrtus fasciatus, analisadas no presente trabalho. Os indivíduos dessa família são conhecidos por serem exclusivamente fitófagos e alimentam-se de plantas de valor comercial. Apesar da grande diversidade desta subordem, há poucos estudos relacionados com a ultraestrutura da espermátide dessas espécies. Assim, nesse trabalho, por meio da microscopia eletrônica de transmissão, foi analisado o desenvolvimento da espermiogênese na cabeça e no flagelo, com ênfase na formação do acrossomo, do adjunto do centríolo e dos derivados mitocondriais. O acrossomo tem origem a partir do complexo de Golgi, por meio da formação de uma vesícula pró-acrossomal e concomitante a esse processo é formado o adjunto do centríolo. O acrossomo determina o polo anterior do espermatozoide e o adjunto do centríolo determina o polo posterior. Observou-se também que no início do processo espermiogênico, as mitocôndrias encontram-se espalhadas no citoplasma, então gradualmente se fundem e dão origem ao complexo mitocondrial, o qual se divide, posteriormente, em duas subestruturas, denominadas derivados mitocondriais. Essas se posicionam bilateralmente ao axonema, o qual possui o padrão típico de disposição dos microtúbulos de 9 + 9 + 2. O processo de formação do acrossomo e dos derivados e a conformação dos microtúbulos do axonema são típicos de insetos. Além do padrão de microtúbulos do axonema, foram encontradas características sinapomórficas de Heteroptera, como a presença de duas estruturas paracristalinas em cada derivado mitocondrial e a presença de pontes que ligam os derivados mitocondriais ao microtúbulos axonemais, os quais são ferramentas importantes para auxiliar análises filogenéticas e taxonômicas. / The suborder Heteroptera contains about 75 families, including Coreidae, to which the species Corecoris fuscus, Leptoglossus gonagra, L. zonatus and Sphictyrtus fasciatus belong. Individuals of this family are known for being exclusively phytophagous and feeding on commercially valuable plants. Despite this suborder great diversity, there are only few studies on the ultrastructure of these species spermatid. Thus, in this study, through transmission electron microscopy, we analyzed the development of spermiogenesis in the head and the flagellum of C. fuscus, L. gonagra, L. zonatus and S. fasciatus, with emphasis on the formation of the acrosome, of the centriole adjunct and on development of mitochondrial derivatives. The acrosome originates from the Golgi complex through the formation of a pro-acrosomal vesicle and concomitant to this process, is formed the centriole adjunct. The acrosome determines the anterior pole of the sperm and the centriole adjunct determines the posterior pole. It was also observed that at the beginning of the spermiogenic process, the mitochondria are scattered within the cytoplasm, then gradually fusing and originating the mitochondrial complex, which is subsequently divided into two substructures, called mitochondrial derivatives. They are positioned bilaterally to the axoneme, having the typical pattern arrangement of the microtubule, which is 9 + 9 + 2. The process of acrosomes and derivatives formation and the conformation of axoneme’s microtubules are typical of insects. Besides the pattern of axoneme’s microtubules, synapomorphic features of Heteroptera were found, as the presence of two paracrystalline structures in each mitochondrial derivative and the presence of bridges connecting derivatives mitochondrial to the axonemal microtubules, which are important tools to assist in phylogenetic and taxonomic analyzes. / FAPESP: 2013/19864-5

Resumo não disponível

A prática de exercício físico de mulheres nos períodos de preconcepção e gestação causa uma série de efeitos benéficos no desenvolvimento da prole. Pouco se sabe, no entanto, sobre a influência do exercício físico masculino sobre seus descendentes. Como a espermatogênese é um processo contínuo, as experiências de vida dos pais poderiam reprogramar o genoma dos espermatozoides por meio de processos epigenéticos, por exemplo, que poderiam interferir no desenvolvimento da prole. A presente dissertação tem como objetivo estudar essa hipótese. Examinamos os efeitos do exercício físico paterno sobre os seguintes parâmetros de desenvolvimento da prole: maturação corporal, desempenho cognitivo, expressão do BDNF muscular, no hipocampo e córtex frontal; e metilação global do DNA no hipocampo. Para tanto, ratos Wistar machos foram divididos em dois grupos: sedentários e exercitados. O protocolo de exercício físico consistiu de corrida na esteira por um período de 8 semanas. Após, os animais foram expostos às fêmeas em período fértil e não-treinadas. Os filhotes de ambos os grupos de pais foram submetidos a testes para avaliação do ganho de peso e medidas de crescimento, do primeiro dia pós-natal (P1) até o P21 A partir do P46, foram realizadas a medida indireta do consumo máximo de oxigênio e a avaliação da aprendizagem espacial e memória, até o P52. Os animais foram submetidos à eutanásia; os músculos dos membros posteriores, os testículos, as glândulas adrenais e a gordura gonadal foram pesados. Os resultados mostram que a prole de pais treinados e de não-treinados não diferem quanto às medidas físicas, desempenho físico, avaliação cognitiva e expressão do fator trófico. No entanto, houve uma diminuição significativa no peso dos testículos e da gordura gonadal na prole de pais treinados. O nível de metilação do DNA no hipocampo de filhos de pais exercitados apresentou uma diminuição, comparada ao grupo de filhos de pais sedentários. Esse resultado aponta para uma maior expressão gênica no grupo exercitado. Embora no presente estudo os mecanismos pelos quais o exercício paterno influencia o desenvolvimento da prole não tenham sido estabelecidos, reforça-se o papel essencial que a atividade física tem em um estilo de vida saudável e na prevenção de doenças, além de não gerar prejuízos ao desenvolvimento dos descendentes. / The physical exercise of women in the pre-conception and gestation periods causes a series of beneficial effects on offspring development. Little is known, however, about the influence of male physical exercise on their offspring. As spermatogenesis is a continuous process, the life experiences of the fathers could reprogram the sperm genome by means of epigenetic processes, for example, which could interfere in the development of the offspring. The present dissertation aims to study this hypothesis. We examined the effects of paternal physical exercise on the following parameters of offspring development: body maturation, cognitive performance, hippocampus, cortex and muscle BDNF expression, and global DNA methylation in the hippocampus. Thus, male Wistar rats were divided into two groups: sedentary and exercised. The physical exercise protocol consisted of running on the treadmill for a period of 8 weeks. Afterwards, the animals were exposed to females at a fertile and untrained. The pups of both groups of parents were submitted to tests to evaluate the weight gain and growth measures from the first postnatal day (P1) to P21. From P46, the indirect measurement of maximum oxygen consumption and the evaluation of spatial learning and memory were made until P52 The animals were submitted to euthanasia; the muscles of the hindlimbs, the testicles, the adrenal glands and the gonadal fat were weighed. The results showed that the offspring of trained and untrained fathers did not differ in physical measures, physical performance, cognitive evaluation and trophic factor expression. However, there was a significant decrease in testicles weight and gonadal fat in the offspring of trained parents. The level of DNA methylation in the hippocampus of pups of exercised fathers presented a decrease, compared to the group of pups of sedentary fathers. This result points to a greater gene expression in the exercised group. Although in the present study the mechanisms by which paternal exercise influences the development of the offspring have not been established, the essential role that physical activity has in a healthy lifestyle and in the prevention of diseases is reinforced, and it does not cause the offspring development any harm as well.