Orientador: Irene Bastos Franceschini Vicentini / Coorientador: Karina Ribeiro / Banca: Maíra Aparecida Stefanini / Banca: Bruno César Schimming / Resumo: A carcinicultura de água doce é uma forma de produção de crustáceos com baixo impacto ambiental. A espécie brasileira Macrobrachium amazonicum tem grande potencial de cultivo e alguns aspectos da sua biologia vêm sendo estudados na última década. O hepatoâncreas (HP) é um órgão chave na digestão de crustáceos. Este órgão está composto por túbulos hepatopancreáticos, cujo epitélio apresenta 5 tipos celulares envolvidos na digestão do alimento. O estômago, por sua vez, apresenta associação íntima ao hepatopâncreas no processo de digestão. Assim o objetivo desse estudo foi avaliar a dinâmica celular do epitélio hepatopancreático nos diferentes períodos de pós alimentação (PA), assim como avaliar as relações de peso relativo ao corpo entre estômago e hepatopâncreas. Para tanto o hepatopâncreas e o estômago de juvenis foram coletados nos tempos de PA de 1h, 7h, 13h, e assim sucessivamente somando-se 6 horas a cada intervalo de coleta, até 121h. O Índice Hepatossomático (IHS) e o Índice Gastrossomático (IGaS) foram aferidos. Os fragmentos de HP foram fixados em Bouin, processados para rotina de inclusão em historresina, e corados com Hematoxilina/Eosina. Após análise, foram observados períodos com elevado IHS seguidos de períodos com baixo IHS ocorridos em todos os 5 dias de observação, assim como foram observados ciclos imediatamente inversos no estômago, com relação ao hepatopâncreas. Nos momentos que correspondem ao elevado IHS é possível observar grande acúmulo de células B, com extrema vacuolização, o que indica digestão intracelular. Nos momentos com baixo IHS é evidente o grande número de células F que produzem enzimas digestivas, e células R que estocam reservas, sugerindo baixa atividade digestiva. Após 24 h de PA, provavelmente os restos não... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Freshwater shrimp farming is a form of shellfish production with low environmental impact. Macrobrachium amazonicum, brazilian native species, has great potential for cultivation and some aspects of its biology, especially the digestive system, have been studied in the last decade. The hepatpncreas (HP) is a key organ in the digestion of crustaceans. This organ is composed of hepatopancreatic tubules, which present 5 epithelial cell types involved in the digestion of food. The stomach, in turn, presents intimate association with hepatopancreas in the digestion process. Thus the aim of this study was to evaluate the dynamics of the hepatopancreatic cells in different periods after feeding (AF), as well as evaluate the relationships between stomachsomatic and hepatossomatic indeces. For both the hepatopancreas and stomach of juveniles were collected in times of AF 1h, 7h, 13h, and so adding six hours to each collection interval until 121h. Hepatosomatic (HSI) and gastrossomatic (GaSI) indices were measured. HP fragments were fixed in Bouin, processed for inclusion in hystoresin, and stained with hematoxylin/eosin. After analysis, it were observed periods with high HIS followed by periods of low HIS in all five days of observation. IGaS and HIS presented opposing curves. In moments which correspond to the high HIS is possible to observe accumulation of B cells with extreme vacuolization, indicating intracellular digestion according to the literature. In moments of low HIS is evident the large number of F cells that produce digestive enzymes, and cells that accumulate reserves, suggesting low digestive activity. After 24h AF, probably undigested food in HP returns to stomach, and are then distributed to HP again. Thus, the morphological characteristics did not differ at different times of elevated HIS, and the same... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Adriana Camargo Ferrasi / Coorientador: Maria Inês de Moura Campos Pardini / Banca: Patrícia Pintor dos Reis / Banca: Marcelo Lima Ribeiro / Resumo: O câncer gástrico é mundialmente a segunda causa de morte por câncer. No Brasil está entre os cinco neoplasias mais incidentes, mostrando-se como um grave problema de saúde pública. O conhecimento do padrão de expressão gênica de genes supressores tumorais e protooncogenes é fundamental para o esclarecimento dos mecanismos desta carcinogênese. O gene FOXE1 (forkhead box E1) pertence a uma grande família de fatores de transcrição envolvidos em processos de crescimento e diferenciação celular. Pesquisas recentes têm demonstrado o papel determinante de FOXE1 na gênese de certos tipos de neoplasias. Assim, a análise da expressão gênica de FOXE1 em amostras de tumores gástricos faz-se necessária para esclarecer seu possível envolvimento neste carcinogênese. O DNA foi extraído de 89 amostras de tumores gástricos, com seus respectivos tecidos normais adjacentes. Após o tratamento com bissulfito de sódio, o padrão de metilação foi determinado por PCR específica para metilação (MSP-PCR) com a visualização dos resultados em poliacrilamida 6% corado com nitrato de prata. 86,5% das amostras apresentaram metilação em FOXE1, sendo o mesmo padrão encontrado em tecidos normais adjacentes 74,2%. Não houve significância estatística quando os resultados foram agrupados de acordo com o sexo, tipo histológico e estadiamento. A expressão gênica foi avaliada através de qPCR para 13 dos 89 pacientes incluídos no estudo. Obteve-se para cada paciente a razão (T/N) comparando a expressão gênica da amostra de tecido tumoral (T) em relação à expressão do tecido normal adjacente ao tumor (N). 8 amostras (61,5%) apresentaram um aumento da expressão do FOXE1, com uma média de 1,6. Dentre as 5 (38,5%) amostras com QR abaixo de 1, isto é, com expressão do FOXE1 abaixo do tecido normal, a média foi de 0,7. Quanto à concordância entre o estado de metilação em FOXE1 e a sua expressão ... / Abstract: Not available / Mestre

Orientador: Giovanni Faria Silva / Banca: Pedro Achilles / Banca: Luiza Maria Filomena Romanello / Banca: José Luiz Pimenta Modena / Banca: Ciro Garcia Montes / Resumo: A Hemorragia Digestiva Alta (HDA) é uma das desordens digestivas mais comumente diagnosticadas no mundo. As principais causas são a úlcera peptica gastroduodenal (UPGD) e a lesão aguda da mucosa gastroduodenal (LAMGD). Apesar dos avanços tecnológicos ocorridos nas últimas décadas, não se observou um declínio das taxas de mortalidade, que variam entre 11% e 33%. Esforços consideráveis tem sido realizados para a identificação precoce dos preditores de mau prognóstico, possibilitando à equipe médica a identificação dos grupos de alto risco e, com isso, uma intervenção mais agressiva e precoce. Análise comparativa dos preditores de recidiva hemorrágica ou óbito nos pacientes com HDA por UPGD ou LAMGD e análise de sobrevida dos grupos. Análise retrospectiva dos pacientes adultos com HDA por UPGD ou LAMGD submetidos a endoscopia digestiva alta (EDA) no período de jan/01 a dez/04 no HC da Faculdade de Medicina de Botucatu - UNESP. Critérios de inclusao: pacientes com HDA por UPGD ou LAMGD submetidos à EDA. Critérios de exclusão: HDA de outra etiologia. Análise estatística: testes de associação (Qui- Quadrado e teste exato de Fisher), testes de comparação entre os grupos, regressão logística múltipla, teste de Log Rank e regressão de Cox. 255 casas de HDA, sendo 57 por LAMGD e 198 por UPGD. Os grupos foram homogêneos com relação à idade, gênero, uso de anti-inflamatórios não esteroides (AINES), presença de comorbidades, níveis de hematócrito e hemoglobina e índices de recidiva hemorragica e óbito. No grupo com LAMGD,a idade media foi 60,4 anos (±18,7) e 64% dos doentes eram homens. O uso de AINES foi relatado por 46% dos doentes e 58% apresentavam comorbidades. Recidiva hemorrágica ocorreu em 3,5% dos pacientes e óbito em 10%. O preditor de ressangramento foi a necessidade de grande volume de transfusão sanguínea (OR: 2,03; IC:1,07-3,83)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The upper gastrointestinal bleeding (UGIB) is one of the most commonly diagnosed digestive disorders in the world. The main causes are the peptic ulcer disease (PUD) and erosive disease. Despite technological advances occurring in recent decades there was not a decline in mortality rates, ranging between 11% and 33%. Considerable efforts have been made to identify early predictors of poor prognosis, allowing the medical team to identify high risk patients and, thus, a more aggressive and early intervention. Comparative analysis of predictors of rebleeding or death in patients with UGIB by PUD or erosive disease and analysis of survival of groups. Retrospective analysis of adult patients with UGIB by PUD or erosive disease underwent endoscopy from January 2001 to December 2004 in the Botucatu Medical School - UNESP. Inclusion criteria: patients with UGIB by PUD or erosive disease underwent endoscopy. Exclusion Criteria: UGIB by another etiology. Statistical analysis: chisquare and Fisher exact test, tests for comparison between groups, multivariate logistic regression models, Log Rank test and Cox proportional hazards regression. 255 cases of UGIB, being 57 by erosive disease and 198 by PUD. The groups were homogeneous with respect to age, gender, use of nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDS)... Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Magda Cristina Queiroz Dell'Acqua / Coorientador: Silvia Justina Papini / Banca: Cleide Carolina da Silva Demoro Mondini / Banca: Janete Pessuto / Resumo: Pacientes com desnutrição e paralisia cerebral atendidos no ambulatório AIPEG (Ambulatório Interdisciplinar para Paciente Infantil Portador de Encefalopatia e Gastrostomia) do HEB (Hospital Estadual Bauru), necessitam de gastrostomia para auxiliar na alimentação pela disfagia e são acompanhados por uma equipe multiprofissional e interdisciplinar. Neste estudo quantitativo, transversal, descritivo e exploratório, verificou-se o perfil dos cuidadores e pacientes deste ambulatório e descreveu-se as dificuldades encontradas por esses familiares/cuidadores em domicílio. Após aprovação do comitê de ética em pesquisa e a assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido os familiares/cuidadores dos pacientes do AIPEG (Ambulatório Interdisciplinar para Paciente Infantil Portador de Encefalopatia e Gastrostomia) foram abordados com um questionário e responderam questões abertas e fechadas. Utilizou-se também, como fonte de dados, a análise dos prontuários dos pacientes. Os dados foram coletados no período de janeiro a junho de 2012. A amostra foi composta de 50 pacientes e seus respectivos familiares/cuidadores, sendo 60,00% dos pacientes eram do sexo feminino, 70,00% etnia branca e com média de idade de 11,43 anos. O diagnóstico médico de todos os pacientes (100,00%) era de paralisia cerebral e 91,17% apresentava desnutrição. A maioria dos pacientes, em 92,00%, realizou gastrostomia cirúrgica. Com relação aos cuidadores, 98,00% eram do sexo feminino, com média de idade em 40,82 anos de idade, 70,00% de etnia branca, 86,00% dos familiares/cuidadores são as próprias mães dos pacientes e a renda com média de 2,32 salários mínimos. Quanto às dificuldades mais relatadas, pelos familiares/cuidadores, verificou-se o relato da saída da sonda de ostomia com prevalência de 84,00% e 68,00% dos familiares/cuidadores relatou a ocorrência de lesão na pele. A gastrostomia é um procedimento ... / Abstract: Patients with malnutrition and cerebral palsy attended in the ambulatory AIPEG (Interdisciplinary Ambulatory for Child Patient with encephalopathy and gastrostomy) of BSH (Bauru State Hospital), need of gastrostomy for help feeding by dysphagia and are accompanied by a multidisciplinary team and interdisciplinary. In this quantitative, transversal, descriptive and exploratory study, it was verified a profile of caregivers and patients in this ambulatory and described the difficulties found by these families / caregivers at home. After approval of the research ethics committee and signing the free and informed consent families/carers of patients AIPEG (Interdisciplinary Ambulatory for Child Patient with encephalopathy and gastrostomy) were approached with a questionnaire and answered open and closed questions. We used also, as a source of data, analysis of the patients' records. Data were collected from January to June 2012. The sample was composed of 50 patients and their family/caregivers, 60,00% of patients were female, 70,00% Caucasian, with a mean age of 11.43 years. The medical diagnostic of all patients (100,00%) was cerebral palsy and 91,17% presented malnutrition. Most patients, 92,00% made surgical gastrostomy. With respect to caregivers 98,00% were female, with mean age of 40.82 years old, 70,00% were Caucasian, 86,00% of families / caregivers are mothers themselves and the patients income with mean of 2.32 minimum salaries. About the difficulties most reported, by family / caregivers, there was the account of output of the tube ostomy with prevalence of 84,00% and 68,00% of family / caregivers told the occurrence of skin lesion. A gastrostomy is a procedure that assists in the patient's condition, helping the family care in homes, which has a preference for silicone tube at skin level (button). Becomes evident that although the service offers an appropriate structure, with a multidisciplinary team and ... / Mestre

Orientador: Marco Antônio Zanini / Banca: Luiz Antonio de Lima Resende / Banca: Rodrigo Bazan / Banca: Silvana Bommarito Monteiro / Banca: Sthela Zanchetta / Resumo: A deficiência de vitamina B12 no ser humano, frequentemente associada a deficiência de fator intrínseco, produzido no estômago, leva a múltiplas alterações neurológicas e hematológicas. A mais conhecida alteração do sistema nervoso central é a desmielinização e degeneração dos fascículos grácil e cuneiforme da medula cervical. Este trabalho teve por objetivo tentar obter um modelo experimental da afecção, através da gastrectomia total em ratos. Animais foram gastrectomizados, submetidos à suplementação polivitamínica via oral, e 2 a 3 meses depois submetidos a estudos de condução nervosa, com estímulos elétricos na extremidade da cauda, e captação de potenciais elétricos em 3 pontos, com distâncias iguais entre si: próximo ao ânus (potencial caudal), região inferior da coluna (potencial lombar) e região da protuberância cervical (potencial cortical). A velocidade de condução pela região inferior da medula espinhal foi denominada segmento V1, pela região torácica alta e cervical até o córtex, segmento V2. Após obtenções de registros de boa qualidade técnica em 15 gastrectomizados, os segmentos V1 e V2 foram comparados com dados de 20 controles pelo teste "t" de Student para amostras independentes, análise de variância (ANOVA) e teste de comparação múltipla de Tukey. Os animais gastrectomizados apresentaram reduções de velocidades estatisticamente significativas para o segmento V2. Os autores pensam ter conseguido modelo experimental da afecção em ratos, o que abre amplas perspectivas para testes terapêuticos em laboratório, com possibilidades para benefícios futuros ao homem / Abstract: The B12 Vitamin deficiency in man, often associated with deficiency of intrinsic factor produced in the stomach, leading to several neurological and hematological disturbances. The best known alteration of the central nervous system is the demyelination and degeneration of the gracilis and cuneiform fascicles in the cervical spinal cord. This study aimed to try an experimental model of the disease, through total gastrectomy in rats. Animals were gastrectomized, submitted to oral polivitaminic supplementation, and 2-3 months later underwent nerve conduction studies. Electrical stimulation was done on the tail end, and electrical potentials were obtained at 3 points with equal distances from each other: near the anus (tail potential), lower spinal cord (lumbar potential) and the region of cervical spinal cord (cortical potential). The conduction velocity of the lower region of the spinal cord segment was named V1, the high spinal cord to the cortex was named V2 segment. After good quality records from 15 gastrectomized animals, the V1 and V2 segments were compared with data from 20 controls by the "t" Student test for independent samples, analysis of variance (ANOVA) and Tukey's multiple comparison test. Gastrectomized animals presented statistically significant reductions in the velocities for the V2 segment. The authors think they have obtained an experimental model of the disease in rats, which opens up broad prospects for therapeutic tests in the laboratory, with possibilities for future benefits to the man / Mestre

O Callithrix penicillata (sagui-de-tufo-preto) mesmo sendo utilizado em algumas pesquisas e também mantido tanto em zoológicos como animal de estimação, possui ainda diversas lacunas acerca de sua anatomia. Assim, utilizamos 10 animais somente para o estudo da topografia, do padrão de irrigação vascular e de alguns índices biométricos do estômago, e outros cinco animais para estudos microscópicos. Ambos tendo com o objetivo caracterizar a anatomia do estômago e comparar as variações entre os sexos e eventualmente com outras espécies. Para o padrão vascular realizamos injeção de neoprene látex corado na aorta torácica com posterior dissecação dos ramos abdominais e no caso do estudo biométrico o mesmo foi realizado com o uso de um paquímetro digital, fita métrica e transferidor. E procedimentos tanto para a microscopia de luz com colorações de Hematoxilina-Eosina e Tricrômio de Masson quanto para a microscopia eletrônica de varredura foram efetuados. Com base no estudo ora realizado verificamos que o estômago localizava-se medialmente da 9° a 12° costelas e os aspectos biométricos revelam os padrões primários para este órgão, não se registrando diferenças entre machos e fêmeas. A artéria celíaca surge como o primeiro ramo da aorta abdominal, ocorrendo maior prevalência (70%) de trifurcação a partir desta artéria, com a emissão da artéria lienal, artéria gástrica esquerda e artéria hepática. A artéria lienal acompanhou a curvatura maior do estômago dando origem à artéria gastroepiplóica esquerda. A artéria gástrica esquerda no seu trajeto acompanhava a região da cárdia e do esôfago abdominal, cedendo-lhes contribuições. Já a artéria hepática originava a artéria gástrica direita e a artéria gastroduodenal. E esta por sua vez fornecia a artéria gastroepiplóica direita e a artéria pancreático-duodenal. Quanto aos aspectos microscópicos observamos a presença de quatro camadas: mucosa, submucosa, muscular e serosa e a presença de pregas da mucosa. Desta forma nesta oportunidade visamos contribuir para o estudo da anatomia comparativa, o que procuramos por vezes realizar neste trabalho, a fim também de oferecer subsídios indispensáveis em procedimentos clínico-cirúrgicos nesta espécie. / The Callithrix penicillata (black-tufted-ear-marmoset), have being used in some research and also kept both in zoos and pet. There are still many questions to be answered about their anatomy. Then to study the topography, the vascular pattern of irrigation and some biometric indices of the stomach, we used 10 animals and five other animals to microscopic studies. Both group of animals were studied in order to characterize the anatomy of the stomach and compare the variations between the sexes and possibly other species. To perform the vascular standard thoracic aorta was stained with injection of neoprene latex. Subsequently, we performed the dissection of the abdominal branches and in the case of the same biometric study was conducted using a digital caliper, tape measure and protractor. Procedures for both light microscopy with hematoxylin-eosin staining and Massons Trichrome as for scanning electron microscopy were perfomed. Based on our study we verified that the stomach was located medially from 9° to 12° ribs and biometric aspects reveal the primary standards body for this, not registering differences between males and females. The celiac artery arises as the first branch of the abdominal aorta, causing a higher prevalence (70%) from the trifurcation of the artery, originating the lienal artery, left gastric artery and the hepatic artery. Lienal artery accompanied the greater curvature of the stomach giving rise to the left gastroepiploic artery. The left gastric artery in its course follow and irrigate the region of the abdominal esophagus and cardia, originating new branches for that region. In its turn the hepatic artery originated the right gastric artery and gastroduodenal artery which gives rise to the right gastroepiploic artery and pancreatic-duodenal artery. In regards to the microscopic aspects we observed the presence of four layers: mucosa, submucosa, muscle and serosa and the presence of mucosal folds. Thus we aim to contribute to the study of comparative anatomy, in order to offer indispensable subsidies in clinical and surgical procedures in this specie.

Orientador: Ana Elizabete Silva / Banca: Patrícia Matos Biselli Chicote / Banca: Marília de Freitas Calmon Saiki / Resumo: Introdução: A inflamação crônica desencadeada pela bactéria Helicobacter pylori (H. pylori), a qual é considerada o principal fator ambiental relacionado ao câncer gástrico, está associada ao desenvolvimento e progressão de lesões gástricas pré-cancerosas, desencadeando diversas modificações histológicas e moleculares que promovem a transformação maligna do estômago. Para isso, conta com fatores de virulência que promovem alterações superficiais e em vias de sinalização das células epiteliais gástricas. Consequentemente pode levar a alterações no padrão de expressão de genes supressores tumorais e da atividade de enzimas DNA metil transferases (DNMTs), responsáveis pela metilação do DNA e silenciamento gênico. Objetivos: O presente estudo avaliou se a infecção pela bactéria H. pylori, bem como sua erradicação, altera a expressão do RNAm dos genes supressores SOCS1, RPRM, RUNX3 e dos genes de DNMTs (DNMT1, DNMT3A e DNMT3B) em pacientes com gastrite crônica infectados (Hp+) em comparação com indivíduos com gastrite crônica sem infecção (Hp-). Além disso, investigou a ocorrência de correlação negativa entre a expressão do RNAm dos genes supressores tumorais com a dos genes das DNMTs, assim como a associação dos níveis de expressão gênica em relação aos fatores de risco idade, sexo, tabagismo, etilismo e genótipo bacteriano cagA. Material e Métodos: A quantificação relativa (RQ) do RNAm foi realizada por PCR (polymerase chain reaction) quantitativa em tempo real (qPCR) utilizando ensaios TaqMan® em 9 pacientes com gastrite crônica Hp- e 19 Hp+, sendo estes também avaliados três meses depois da terapia de erradicação bacteriana. O diagnóstico molecular e genotipagem do fator de virulência cagA foram realizados por PCR convencional. Resultados: Os resultados mostraram que a infecção pela H. pylori e sua erradicação... / Abstract: Introduction: Chronic inflammation caused by Helicobacter pylori (H. pylori), which is considered the main environmental factor related to gastric cancer, is associated with the development and progression of precancerous gastric lesions, triggering several histological and molecular changes that promote stomach malignant transformation. For this, it has virulence factors promoting superficial and signaling pathways of gastric epithelial cells changes. Consequently, it can lead to alterations in the expression of tumor suppressor genes and DNA enzyme activity methyl transferases (DNMTs), responsible for DNA methylation and gene silencing. Objectives: This study evaluated whether the infection by the bacterium H. pylori and its eradication change the mRNA expression of suppressor genes SOCS1, RPRM, RUNX3 and DNMTs (DNMT1, DNMT3A and DNMT3B) genes in patients with chronic gastritis infected (Hp+) compared to individuals with chronic gastritis without infection (Hp-). In addition, we investigated the occurrence of negative correlation between mRNA expression of tumor suppressor genes with the ones of DNMTs, as well as the association of gene expression levels in relation to the risk factors age, sex, smoking, drinking and bacterial genotype cagA. Methods: The relative quantification (RQ) mRNA was performed by PCR (polymerase chain reaction) quantitative real-time (qPCR) using TaqMan® assays in 9 patients with chronic gastritis Hp- and 19 Hp+, which are also evaluated three months after bacterial eradication therapy. The molecular diagnostics and genotyping of the virulence factors CagA were performed by standard PCR. Results: The results showed that the infection by H. pylori and eradication did not significantly alter the gene expression of SOCS1, RPRM, RUNX3 and DNMTs, which presented, in general, reduced expression (RQ <1.0); on the other hand, higher expression of SOCS1 and ... / Mestre

Orientador: Ana Elizabete Silva / Coorientador: Sonia Maria Oliani / Banca: Henrique César Santejo Silveira / Banca: Patricia Maluf Cury / Banca: Dorotéia Rossi S. Souza / Banca: Debora Ap. Pires de C. Zuccari / Resumo: Apesar do declínio da incidência, o câncer gástrico ocupa ainda a terceira posição em causa de morte por câncer no mundo, tendo como principal fator de risco a bactéria Helicobacter pylori. Esta bactéria pode levar a uma inflamação persistente através da produção de citocinas pró-inflamatórias e de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio, estimulando a proliferação celular bem como outros processos envolvidos na carcinogênese. Ainda envolvidos nestes processos tem sido observada a participação de microRNAs, que exercem papel importante na regulação pós-transcricional, influenciando processos fisiológicos normais da célula bem como aqueles ligados às doenças, como por exemplo o câncer gástrico. Alguns miRNAs podem atuar como oncogenes, genes supressores de tumor e biomarcadores para diversas patologias, podendo alvejar genes relacionados com inflamação e câncer como o gene ANXA1 (Anexina-A1). A Anexina-A1 é uma proteína anti-inflamatória e com ação anti-proliferativa, que se liga à receptores do tipo formil peptídeo como por exemplo FPR1 e FPR2, ambos sabidamente relacionados com a progressão de doenças como o câncer. Desta forma o presente trabalho teve como objetivos avaliar a expressão da proteína Anexina A1 e seus receptores FPR1 e FPR2, bem como avaliar a expressão do RNAm da ANXA1 e de miRNAs que possam modular a expressão desse gene (hsa-mir-27a, hsa-mir-196a e hsa-mir-222) em adenocarcinoma gástrico e correlacionar estes resultados com os aspectos clínico-patológicos. Foram avaliadas 31 amostras de adenocarcinoma gástrico, assim como as regiões metaplásica ou normal adjacentes ao tumor. A quantificação relativa (RQ) do RNAm da ANXA1 e miRNAs foi realizada por PCR quantitativo em tempo real utilizando ensaio TaqMan, e a expressão proteica da AnxA1, FPR1 e FPR2 por imuno-histoquímica e análise densitométrica. Em... / Abstract:Gastric cancer still ranks third in cause of cancer death worldwide, despite the decline in its incidence, being Helicobacter pylori the main risk factor for this disease. This bacterium can lead to persistent inflammation via the production of proinflammatory cytokines and reactive oxygen and nitrogen species, stimulating cell proliferation and other processes involved in carcinogenesis. Still involved in this process, it has been observed the participation of miRNAs, which play an important role in post- transcriptional regulation, influencing normal physiological processes of the cell as well as those linked to diseases such as gastric cancer. Some miRNAs can act as oncogenes, tumor suppressor genes and biomarkers for various diseases, can targetting genes linked to inflammation and cancer such as ANXA1 gene (Annexin A1). Annexin A1 is an anti-inflammatory protein with anti-proliferative action that binds to formyl peptide receptors such as, FPR1 and FPR2, both known to be related to the progression of diseases such as cancer. Thus, the present study aimed to evaluate the expression of Annexin A1, FPR1 and FPR2 receptors, and the expression of mRNA ANXA1 and miRNAs (hsa-mir-27a, hsa-mir-196a and hsa-miR 222) in gastric adenocarcinoma, also correlate these results to the clinicopathological features. 31 adenocarcinoma samples were evaluated, as well as normal or metaplastic region adjacent to the tumor. Relative quantification (RQ) of miRNA and mRNA ANXA1 was evaluated by TaqMan assay and protein expression AnxA1, FPR1 and FPR2 by immunohistochemistry and densitometry analysis. Regarding the relative expression the following results were observed, increased expression in tumors of ANXA1 (RQ = 1.374; p < 0.001) and miR- 196a that showed increased expression it he metaplastic tissue (RQ = 4.784; p = 0.0016) and tumor (RQ = 16.99; p < 0.001) compared to normal tissue. The miR- 27a did not appear differentially expressed in different tissues ... / Doutor

Na mucosa gástrica, cinco tipos compõe o epitélio gástrico: mucosas superficiais, parietais (CP), mucosas do colo (CMC), endócrinas e zimogênicas (CZ). As CMC originam as células CZ por transdiferenciação e a população de CP é importante para que o processo ocorra.Durante a transdiferenciação observamos células com características de CMCs e CZs, denominadas células em transição (CT) que ocupam o segmento entre o colo e a base da glândula. Essa transição entre células e a presença de CP são essenciais para a homeostase da base da glândula. Porém, estudos mostram que alterações no padrão alimentar influenciam a organização do epitélio gástrico de ratos, e o desmame precoce (DP) modifica a dinâmica de proliferação, migração e maturação das células. Nosso objetivo foi avaliar os efeitos imediatos do DP sobre as populações de CMC, CZ, CT e CP, e investigar se tais efeitos são mantidos até a vida adulta. Para isso, ratos Wistar (CEUA ICB USP 18/2015) foram divididos em dois grupos: amamentado controle (A) (permaneceram com a mãe até 21 dias), e DP (separados das mães aos 15 dias). O estômago foi coletado aos 18, 30 e 60 dias de vida pósnatal. Em cortes histológicos, verificamos que o índice de CP não foi alterado pelo DP, porém a distribuição dessa célula na glândula foi modificada aos 18 e 30 dias. Sob microscopia de fluorescência e confocal, observamos que o DP aumentou a população de CMC (GSIIFITC+) aos 18 dias (A vs DP; P<0,01), e de CZ (Mist1-Cy3+) aos 18 e 60 dias (A vs DP; P<0,05). O número de CT/campo (GSII-FITC+Mist1-Cy3) não se alterou após o DP, evidenciando que o segmento de transição entre o colo e a base da glândula representa um importante controle de tamanho populacional. Para avaliar o comportamento de CT em relação ao seu destino (CZ) e sua origem (CMC), analisamos o índice de CT sobre essas populações. Sobre o destino, devido à ausência de resposta no número de CT/campo e ao aumento de CZ nos animais DP, o índice CT/CZs variou aos 18 e 30 dias. No entanto, o índice de CT/CMC (origem) não foi alterado pelos tratamentos nas diferentes idades. Sob microscopia eletrônica de transmissão, avaliamos as características ultraestruturais das CMC, CT e CZ aos 18 dias, e observamos principalmente as organelas envolvidas na reorganização das células durante a transdiferenciação. Nosso estudo mostrou que o desmame precoce acelera a diferenciação celular e muda a distribuição de células mucosas do colo e zimogênicas na glândula gástrica, porém esse processo ocorre com preservação do tamanho compartimento de transição e do número de células parietais. Assim, podemos sugerir que o desmame precoce aumenta a população de células zimogênicas por meio de uma passagem mais rápida entre a região do colo e da base, na presença de células parietais, e esse mecanismo seria acionado logo após a transição da dieta, podendo manter-se ativo até a vida adulta. / Five epithelial cell types are found in the gastric mucosa: surface mucous, parietal (PC), mucous neck (MNC), endocrine, and zymogenic (ZC). The MNC originates ZC through transdifferentiation, and the presence of PC is important for the process. During transdifferentiation, we observe cells that present characteristics from MNC and ZC that are identified as transition cells (TC). They occupy the area between the neck and base of the gastric gland. The transition between these cells and the presence PC are essential for homeostasis at the base of the gland. However, studies show that changes in dietary pattern influence the organization of rat gastric epithelium, and early weaning (EW) modifies the proliferation, migration and maturation dynamics of these cells. Our aim was to evaluate the immediate effects of EW on the populations of MNC, ZC, TC and PC, and to investigate if such effects are maintained until adult life. To that, Wistar rats (CEUA ICB USP 18/2015) were divided into two groups: suckling control (S) (pups remained with the mother until 21 days), and EW (pups were separated from mother at 15 days). The stomach was collected at 18, 30 and 60 postnatal days. After analyses of histological sections, we verified that PC indices were not altered by EW, but the distribution of this cell was modified at the 18 and 30 days. By fluorescence and confocal microscopy, we determined that EW increased MNC population at 18 days (A vs PD, P <0.01), and ZC at 18 and 60 day (A vs DP; P <0.05). TC number/field did not change after EW, indicating that the transition between neck and gland base is under an important population control. In order to evaluate the behavior of TC regarding its final differentiation (ZC) and origin (MNC), we calculated TC index on these populations. In relation to ZC, we found a variation in TC index at 18 and 30 days, specially because TC number did not change, whereas ZC population increased. However, the TC index on GSII + cells (origin) was not altered by treatments throughout growth and ageing. Finally, under electron microscopy, we studied the ultra structure of MNC, TC and ZC and observed the reorganization of secretory apparatus during transdifferentiation at 18 days. Thus, we can suggest that EW increases ZC population through a rapid traffic through transition compartment between neck and base, in the presence of parietal cells, and such mechanism would be triggered soon after dietary transition and be kept activated until adult life.

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-19Bitstream added on 2014-08-13T18:01:35Z : No. of bitstreams: 1 000742882.pdf: 1109001 bytes, checksum: 8541a66a007dafecd4081452f2930cc6 (MD5) / O câncer gástrico é mundialmente a segunda causa de morte por câncer. No Brasil está entre os cinco neoplasias mais incidentes, mostrando-se como um grave problema de saúde pública. O conhecimento do padrão de expressão gênica de genes supressores tumorais e protooncogenes é fundamental para o esclarecimento dos mecanismos desta carcinogênese. O gene FOXE1 (forkhead box E1) pertence a uma grande família de fatores de transcrição envolvidos em processos de crescimento e diferenciação celular. Pesquisas recentes têm demonstrado o papel determinante de FOXE1 na gênese de certos tipos de neoplasias. Assim, a análise da expressão gênica de FOXE1 em amostras de tumores gástricos faz-se necessária para esclarecer seu possível envolvimento neste carcinogênese. O DNA foi extraído de 89 amostras de tumores gástricos, com seus respectivos tecidos normais adjacentes. Após o tratamento com bissulfito de sódio, o padrão de metilação foi determinado por PCR específica para metilação (MSP-PCR) com a visualização dos resultados em poliacrilamida 6% corado com nitrato de prata. 86,5% das amostras apresentaram metilação em FOXE1, sendo o mesmo padrão encontrado em tecidos normais adjacentes 74,2%. Não houve significância estatística quando os resultados foram agrupados de acordo com o sexo, tipo histológico e estadiamento. A expressão gênica foi avaliada através de qPCR para 13 dos 89 pacientes incluídos no estudo. Obteve-se para cada paciente a razão (T/N) comparando a expressão gênica da amostra de tecido tumoral (T) em relação à expressão do tecido normal adjacente ao tumor (N). 8 amostras (61,5%) apresentaram um aumento da expressão do FOXE1, com uma média de 1,6. Dentre as 5 (38,5%) amostras com QR abaixo de 1, isto é, com expressão do FOXE1 abaixo do tecido normal, a média foi de 0,7. Quanto à concordância entre o estado de metilação em FOXE1 e a sua expressão ...