Orientador: Ranulfo Monte Alegre / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-28T14:47:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sampaio_RomildoMartins_D.pdf: 3919745 bytes, checksum: 716e0ca6a5f49638e524df0464557d83 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O presente trabalho trata do estudo da produção de vitamina B12, consistindo das seguintes etapas: seleção do melhor microrganismo produtor; seleção da melhor fonte de substrato, e do meia de cultura, avaliação, modelagem e otimização, das variáveis experimentais e fermentação em reator de bancada, para a obtenção das condições de operação e parâmetros cinéticos que influenciam no rendimento de produção da vitamina. A primeira fase consistiu da seleção do melhor microrganismo produtor a ser utilizado, nos estudos posteriores. Partiu-se das seguintes culturas tidas como boas produtoras de B12: Propionibacterium jensenii DSM 20274, Propionibacterium freudenreichii ATCC 9614, Propionibacterium shermanii ATCC 62Q1, Pseudomonas sp. ATCC 13867 e mais três mutantes isolados. Aqui como nas duas próximas etapas, os ensaios, foram realizados em frascos agitados, com base nos resultados, obtidos, decidiu-se pela seleção do mutante Pseudomonas P3, que chegou a uma produção máxima de 3,86 mg B12/1. A escolha da melhor fonte de substrato e do meio de cultura com composição mais indicada ocorreu paralelamente à escolha do microrganismo. Foram testadas lactose e sacarose e mais três composições de meio: meio 1, meio 2, e meio 3. A sacarose e o meio 1, associados ao mutante selecionado, proporcionaram os melhores rendimentos de B12, produção de biomassa e consumo de substrato. As culturas de. Propionibacterium mostraram maior um maior consumo de lactose do que as Pseudomonas. Na terceira etapa, estudou-se a influência de sete variáveis experimentais, previamente pesquisadas e selecionadas, na produção de B12. Foram elas: idade do inoculo, tempo de fermentação, temperatura, pH, concentração de substrato, de 5,6 DMI e de cobalto. Até a etapa de otimização, foram efetuados um planejamento fracionário, dois planejamentos com composto central e um caminho de ascendência máxima. As variáveis com seus respectivos níveis otimizados, que mais influenciaram a resposta, foram: concentração de 5,6 DMI (98,8 mg/l), temperatura (34,6 °C) e pH (7,14). O planejamento experimental permitiu um aumento de quase. 100% na produção de vitamina, alcançando um máximo de 7,57 mg BI2/1. Os ensaios no fermentador de bancada objetivaram verificar a influência do tempo de adição de 5,6 DMI, KLa e controle de pH no rendimento da vitamina. Concluiu-se que o tempo, ótima de adição, do precursor e a nível de Kls mais, indicado, foram respectivamente, 48 h e 36,8 h-1. Por outro lado, percebeu-se que o controle do pH não melhorou, a produção de vitamina nem aumentou, a velocidade de crescimento do microrganismo / Abstract: The present deals with the study of the production of vitamin B12, consisting of the following stages: selection of the best producing microorganism, selection of the best substrate, source, and the more, suitable medium of culture; evaluation, modeling and optimization of the experimental variables and; fermentation in a bench-fermentor for the obtaining of the operation, conditions and. kinetic parameters that, influence, the yield of the vitamin. The first phase consisted of the selection of the best producer microorganism to be used during the work. The following strains were used: Propionibacterium freudenreichii AICC 9614, Propiombacleruan jensenii. DSM 20274, Propianibacterium shermanii ATCC 6207, Pseudomonas sp. ATCC 13867 and more three mutants isolated. Here as in o stages, the experiments were, conducted in shake-flasks Based on the obtained results, the mutant Pseudomonas P3 was selected, producing a maximum of 3.86 mg BJ2/L. The selection of the best, substrate source, and medium composition was done parallelly to the microorganism selection. Were tested sucrose, lactose and three compositions of medium: medium 1 medium 2 and medium 3. The sucrose and medium 1, associated to the mutant P. P3, provided the best yields of B12, biomass production and substrate consumption. The strains of Propionibacterium showed larger ability in the lactose degradation than Pseudomonas and its mutants. In the third stage it was studied the influence of seven experimental variables in the production of vitamin B12: age of inoculum, time of fermentation, temperature, pH, substrate concentration, 5,6 Dimethylbenzimidazole (DMT> concentration and cobalt concentration. Up to the optimization step were realized a fractional factorial design, a steepest ascent path and two central composite design The most significant parameters, with respective optimized levels, were: 5,6 DMI (98.8 mg/L), temperature (34.6 °C) and pH (7-14)-. The experimental design allowed an. increase of almost 100% in. the Vitamin production, reaching a maximum of 7.57 mg B12/L. The experiments in the bench-fermentor were done to verify, the influence of the time of addition of 5,6 DMI, Kla and pH control in the yield of vitamin B12. The better time of addition and level of KLa, were respectively 48 hr and 36.8 hr-1. The control of pH did not improve the vitamin production / Doutorado / Doutor em Engenharia de Alimentos

Tesis para optar al grado de Doctor en Química / Las enzimas son capaces de acelerar reacciones químicas con una gran selectividad, permitiendo que la vida sea posible como la conocemos. Glutamato mutasa (GM) es una enzima dependiente de adenosilcobalamina (AdoCbl), la cual cataliza la isomerización reversible de glutamato (glm) a metilaspartato (masp). AdoCbl es un cofactor que consiste en un macrociclo ubicado en el plano ecuatorial denominado corrina, el cual tiene como átomo central un Co+3. Este metal está axialmente coordinado por un ligando desoxiadenosina e intramolecularmente por un grupo 5,6-dimetilbenzimidazol. El mecanismo propuesto para la reacción de isomerización comienza con la unión del sustrato al sitio catalítico, la cual induce la ruptura homolítica del enlace cobalto-carbono (Co-C) del cofactor. Como producto de esta disociación homolítica se forma el radical desoxiadenosilo (Ado•) que luego abstrae un hidrógeno desde el sustrato, formando un radical derivado del sustrato y AdoH. Este radical sufre un reordenamiento que da origen al radical relacionado con el producto, el cual reabstrae el hidrógeno desde AdoH, regenerando Ado•. El ciclo catalítico termina con la formación del enlace Co-C. La generación de intermediarios radicalarios altamente reactivos hace que esta reacción sea muy difícil de llevar a cabo sin reacciones secundarias. Es así que la necesidad de una maquinaria catalítica capaz de controlar los caminos de reacción sea indispensable. Una interesante pregunta en química bioinorgánica es cómo luego de la unión del sustrato, el complejo cofactor-enzima es capaz de modificar su estructura electrónica debilitando el enlace Co-C hasta su disociación homolítica. Además, el camino de reacción exacto que conecta el rompimiento del enlace Co-C con el proceso de abstracción del hidrógeno desde el sustrato permanece incierto. Finalmente, el papel exacto que cumple el entorno enzimático en el mecanismo de isomerización está lejos de ser completamente comprendido. La necesidad de una mayor comprensión del mecanismo catalítico de GM, especialmente el proceso de control de la ruptura del enlace Co-C y el mecanismo para controlar la transformación química catalizada por GM son interesantes problemas para ser resueltos por métodos químico computacionales. En este trabajo presentamos un conjunto de modelos químico-cuánticos obtenidos con el propósito de responder a las preguntar presentadas anteriormente. Primero, exploramos la naturaleza del enlace Co-C mediante en estudio comparativo de AdoCbl y un cofactor análogo conocido como MeCbl, ambos en sus formas libres. Segundo, obtuvimos un conjunto de modelos del cofactor unido a GM para explorar las fuerzas involucradas en el proceso de ruptura catalítica del enlace Co-C, junto con la influencia del sustrato en esta. Tercero, con el fin de comprender las fuerzas que manejan el ciclo catalítico, llevamos a cabo el estudio del estado fundamental, intermediarios clave y estados de transición del ciclo catalítico usando modelos del complejo GM-Ado-glm obtenidos a partir de cálculos de estructura electrónica. Los estudios de la disociación del enlace Co-C en complejo con la enzima y del ciclo catalítico fueron enfocados en el efecto del entorno enzimático cercano. La aproximación de cluster fue usando en todos los cálculos que involucraron a GM como parte del modelo. Nuestros principales resultados revelaron que el enlace Co-C es debilitado por el reemplazo de base axial que sufre luego de unirse a la enzima por el par histidina-aspartato. Además existe un efecto electrostático ejercido por el par lisina-glutamato de la enzima que estabiliza al radical Ado•. La presencia de glm tiene un papel importante luego de la formación del radical Ado• ya que permite la formación del radical un radical glm• que es más estable, propagando el ciclo catalítico hacia la formación del producto. Finalmente, nuestros hallazgos revelaron que el entorno enzimático conduce la reacción de isomerización mediante una estabilización diferencial de los intermediarios y estados de transición asociados a la reacción. Además provee de un importante soporte estructural. Los antecedentes entregados en este trabajo permitirán en el futuro el diseño de bio-miméticos capaces de catalizar reacciones químicas extremadamente complejas / Enzymes accelerate chemical reactions with exceptional selectivity making life itself possible. Glutamate Mutase (GM) is an adenosylcobalamin (AdoCbl)-dependent enzyme that catalyzes the reversible isomerization of glutamate (glm) to methylaspartate (masp). The AdoCbl cofactor consists of an equatorial corrin ring, which has a Co+3 as the metal center axially coordinated by a deoxyadenosyl moiety and intramolecularly by a 5,6-dimethylbenzimidazole group. The accepted mechanism for the isomerization reaction begins with substrate binding to the catalytic site, which induces the homolytic cleavage of the cobalt carbon bond (Co-C) of AdoCbl, being this the first catalytic event. This generates an adenosyl radical (Ado•) that subsequently abstracts a hydrogen atom from the substrate, forming a substrate-derived radical and AdoH. The newly formed radical rearranges to a product-related radical, which eventually re-abstracts the hydrogen from AdoH, leading into Ado• regeneration. Finally, the catalytic cycle ends by Co-C bond formation. The generation of highly reactive radical intermediaries makes this reaction very difficult to occur without side reactions. Thus, the need of proper catalytic machinery able to control the reaction pathway is mandatory. An intriguing question in bioinorganic chemistry is how upon substrate binding, the cofactorenzyme complex modifies its electronic structure weakening the Co-C bond strength until its homolytic dissociation. In addition, the exact reaction pathway that connects the Co-C bond breaking with the hydrogen abstraction from the substrate remains uncertain. Finally, the exact role of the enzymatic environment on the isomerization reaction mechanism is far from been completely understood. The need of deeper insights about the GM catalytic reaction, especially the control of the Co- C bond dissociation process and the mechanism to manage the chemical transformation are interesting challenges to be solved by computational chemistry approaches. Here we present a large set of quantum chemical models obtained to answer the questions above presented. First, we explored the nature of the Co-C bond by the comparative study of AdoCbl and an analogous cofactor known as methylcobalamin (MeCbl), both in their free forms. Second, a set of models of AdoCbl in complex with GM were obtained to explore the forces involved in the catalytic Co-C bond dissociation process and the influence of the substrate on it. Third, in order to shed light into the driving forces of the catalytic cycle, we performed the study of models of ground state, key intermediates and transition states of the catalytic cycle using GM-Ado-glm complexes by means of modern electronic structure calculations. In all the calculation involving the GM as part of the model, the cluster approach was used. The studies of the Co-C bond dissociation in complex with the enzyme and the study of the catalytic cycle were focused on the effect of the nearby enzymatic environment. Our main results revealed that the Co-C bond is weakened in part by the axial ligand replacement involving a histidine-aspartate pair, and the electrostatic effect exerted by the lysine-glutamate pair from the enzyme which stabilizes the Ado• radical. After the formation of the Ado•, the presence of glm leads to the formation of glm• radical, which is largely more stable than Ado•. Thus, glm has an important role on the propagation of the catalytic cycle toward the product formation. Finally, our findings revealed that the near enzymatic environment provides differential stabilization of the reaction intermediaries and transition state mediated by the properties of the interactions with the catalytic site. Additionally, it provides of an important structural support. This understanding would allow in the future the design of bio-mimetic able to catalyze highly complex reactions

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T03:40:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 280145.pdf: 1169418 bytes, checksum: 017f34565736c2dcb78673c0a53f6bee (MD5) / O cloridrato de buclizina (BCZ) está entre os fármacos mais utilizados como estimulantes do apetite e apresenta-se geralmente em associação com vitaminas e aminoácidos, para atender às necessidades nutricionais do paciente. Apesar do seu amplo consumo, não existe método oficial para determinar a BCZ em associação com vitaminas e aminoácidos, e há poucos métodos descritos na literatura para quantificação deste fármaco. Também não há relatos de métodos para avaliar a dissolução in vitro da BCZ nas formas farmacêuticas disponíveis. No presente trabalho foram desenvolvidos e validados métodos por cromatografia líquida para quantificação e avaliação da dissolução do fármaco em comprimidos e suspensão oral. A determinação simultânea de BCZ, piridoxina, triptofano e cianocobalamina foi realizada em coluna C18, utilizando sistema de eluição gradiente, com fase móvel composta de metanol, tampão fosfato 15 mM e solução de ácido fosfórico 30 mM, e detecção no ultravioleta. O método mostrou boa linearidade (r>0,99), precisão (DPR<2%) e exatidão (>99%). Foram estabelecidas, também, as condições para o teste de dissolução in vitro da BCZ em comprimidos e suspensão oral. As condições que forneceram resultados satisfatórios para as formulações testadas foram 900 mL de solução aquosa contendo 1,5% de lauril sulfato de sódio, mantida a 37,0 ± 0,5 ºC, utilizando, para comprimidos, o aparato cesta com rotação de 100 rpm e, para a suspensão oral, aparato pá com rotação de 25 rpm. Nestas condições, a liberação da BCZ foi superior a 80%, e as diferentes formulações analisadas demonstraram boa eficiência de dissolução (>85%). O método desenvolvido para avaliar a % dissolvida utilizou coluna C18, com fase móvel composta por metanol:solução de ácido fosfórico 30mM (80:20, v/v; pH 2,6) e detecção em 230 nm. Este método também permitiu a quantificação apenas da buclizina nas formas avaliadas. O método foi validado e mostrou ser específico, não havendo interferência de excipientes na quantificação de BCZ; linear (0,5 - 24 ?g/mL; r>0,99); preciso (DPR<5%) e exato (% de recuperação>99%). O fármaco mostrou estabilidade satisfatória no meio de dissolução selecionado.

Orientador : Carmen Silvia Bertuzzo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T04:23:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_Kelly_M.pdf: 15332993 bytes, checksum: 39bff3e0afd6a69cc924f944b9927971 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A Síndrome de Turner (ST), descrita por Henry Turner em 1938, caracteriza-se classicamente por um fenótipo feminino associado à baixa estatura, infantilismo sexual, esterilidade, além de diversas malfonnações. Há evidências de que mutações na enzima metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR), ligada ao metabolismo do ácido fólico, levariam a aberrações cromossômicas devido a fenômenos de hipometilação. No presente estudo nós avaliamos a freqüência das mutações C677T e A1298C no gene da MTHFR em 49 portadoras de ST e em 200 indivíduos controles. O método de análise foi a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) seguida de digestão enzimática específica. Encontramos 26% de pacientes heterozigotas para a mutação C677T, 18% de homozigotas mutantes para a mutação C677T, 22% de pacientes heterozigotas A1298C, 10% de homozigotas mutante 1298C e 14% de heterozigotas para ambas as mutações C677T/A1298C. Nossos resultados indicam uma incidência elevada de indivíduos mutantes C677T (p<0,001) em nossa amostra. Sugerindo que a deficiência da MTHFR pode ser identificada como um fator de risco para nascimentos de crianças com ST / Abstract: Henry Tumer described Turner's syndrome (TS) in 1938 and characterized it as a classicaI female phenotype associated with a short stature, sexual irmnaturity,sterility and other maIformations. Evidences exist that methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) enzyme mutations related to folic acid metabolism lead to chromosomal aberrations due to the hypomethylation phenomenon. This study evaIuates the frequency of C677T and A1298C mutations of the MTHFR gene among 49 individuais with TS and 200 control individuais. An analysisof the results was obtained using the polymerase chain reaction (PCR), which was followed by specific enzymatic digestion. In this study, 26% of patients were heterozygous for the C677T mutation, 18% were homozygous for the C677T mutation, 22% ofthe patients were heterozygous for the A1298C mutation and 14% were heterozygous for both C677T/A1298C mutations. Our results demonstrated a higher incidence of C677T mutant individuais (p<0.001) in this sample. Suggesting that MTHFR deficiency can be defined as a risk factor for the birth of TS children / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Foram estudadas 363 gestantes de primeira consulta, que não faziam uso de medicamentos que continham ferro, ácido fólico, vitamina B12 ou associação destes, na ocasião da coleta do material, em Centros de Saúde do Estado, no Subdistrito de Paz do Butantã, município de São Paulo. A prevalência de anemia (concentração de hemoglobina inferior a 11,6 g/dl) foi de 12,4%. As médias das concentrações de hemoglobina e as prevalências de anemia, segundo o trimestre de gestação, foram respectivamente: 13,47 g/dl e 3,57% no primeiro, 12,47 g/dl e 20,86% no segundo e 12,25 g/dl e 32,14% no terceiro trimestre. Não encontramos diferença. estatisticamente significativa entre as médias das concentrações de hemoglobina e entre as prevalências de anemia nas gestantes primigestas e multigestas. O mesmo aconteceu com as médias e as prevalências das gestantes multigestas com intervalo do último parto até dois anos e maior que dois anos. Na amostra estudada, encontramos maior prevalência de anemia naquelas gestantes que pertenciam às famílias que tinham renda per capita até 0,5 SMPC (salário mínimo per capita). As prevalências de verminose e de ancilostomídeos nas 300 gestantes foram respectivamente: 64,7% e 14,0%. Nas gestantes anêmicas foram respectivamente: 73,7% e 7,9%. Nas gestantes anêmicas, a prevalência de deficiência de ferro foi de 42,2% (concentração de ferro sérico <50 &#181;g/dl) ou 46,7% (saturação da transferrina <15% ou 40,0% (concentração de ferro sérico <50 &#181;g/dl e saturação de transferrina <15%). A prevalência de deficiência de ácido fólico foi 44,4%. A prevalência de deficiência de ferro e ácido fólico foi de 17,8%. Não encontramos deficiência de vitamina B<SUB<12 nas gestantes anêmicas. / Abstract not available

Submitted by Giovanna Brasil (1154060@mackenzie.br) on 2017-09-28T17:05:08Z No. of bitstreams: 2 Adriana Brito.pdf: 679131 bytes, checksum: 11bec179ab16d3f624479be7d25c6758 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Paola Damato (repositorio@mackenzie.br) on 2017-10-02T14:19:00Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Adriana Brito.pdf: 679131 bytes, checksum: 11bec179ab16d3f624479be7d25c6758 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-02T14:19:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Adriana Brito.pdf: 679131 bytes, checksum: 11bec179ab16d3f624479be7d25c6758 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-08-24 / Depression affects 13% to 20% of the world's population. Vitamin B12 deficiency is related to depression. The lack of this vitamin can be induced in rats by the addition of pectin to the diet. This depletion generates aberrations in base substitutions and DNA methylation. Given the need for animal models with neurobiological fundamentals that best represent depression, the objective of this paper was to validate and characterize an experimental model of depression induced by vitamin B12 deficiency in female rats fed with an added diet pectin. The project was elaborated in two phases and involved 40 Wistar rats, monitored from their weaning to their 133th day of life. In the first phase, the animals were randomly separated into two groups, which differed by the feed offered (ration with or without pectin). At the end of this phase, the animals were submitted to a blood count and tests of positive contrast of sucrose, open field and high cross labyrinth, to evaluate if the vitamin deficiency had altered hematological and behavioral variables. In the second phase, the pectin group was divided into three groups: one group continued with the same diet, another group continued with the same diet but also received antidepressant in the water and a third group started to be fed with the regular feed. The pectin-free fed group was divided into two groups: one continued with the same feed and the other fed with increased pectin feed. At the end of this phase the animals were submitted to the same tests listed above and, after their euthanasia, the brains were removed for analysis of the expression of genes involved in depression in rats in the hippocampus and prefrontal cortex. The dropout times obtained by the groups in the forced swim test (pectin = 108 seconds and standard group = 77 seconds, with p = 0.03), applied at the end of the first phase, indicate that the pectin-fed group was behavior-induced of the depressive type. The output of the other tests confirm that this result did not occur due to locomotor and/ or anxiogenic problems. In the second phase, there was no difference between the times, which indicates that this behavior was not observed at this time of the lives of the animals. It is concluded, then, that pectin intake can induces rats to depression but possibly only within a time window that goes until 11 weeks of age. There are three other hypotheses that may justify the results found: there was a physiological adaptation to pectin consumption; older animals may require increased fiber intake to decrease vitamin uptake or perhaps more intense exhaustion at this stage of life is required to lead to this behavior. / A depressão acomete de 13 a 20% da população mundial. A deficiência de vitamina B12 está relacionada com a depressão. A falta dessa vitamina pode ser induzida em ratos pela adição de pectina à dieta. Esta depleção gera aberrações em substituições de base e metilação de DNA. Dada a necessidade de modelos animais com fundamentos neurobiológicos que melhor representem a depressão, o objetivo deste trabalho foi o de validar e caracterizar um modelo experimental de depressão induzido pela deficiência de vitamina B12 em ratas alimentadas com dieta adicionada de pectina. O projeto foi elaborado em duas fases e contou com 40 ratas Wistar, acompanhadas desde seu desmame até 133 dias de vida. Na primeira, os animais foram separados aleatoriamente em dois grupos, que se diferenciaram pela alimentação oferecida (ração com ou sem pectina). Ao final desta fase os animais foram submetidos a hemograma e aos testes de contraste positivo de sacarose, campo aberto e labirinto em cruz elevado, para avaliar se a ingestão de pectina alterou variáveis hematológicas e comportamentais. Na segunda fase, o grupo com pectina foi dividido em três grupos: um grupo continuou com a mesma alimentação, outro continuou com a mesma alimentação mas passou também a receber antidepressivo na água e um terceiro grupo iniciou alimentação com ração comercial. O grupo com ração sem pectina foi dividido em dois: um continuou com a mesma alimentação e o outro passou a alimentar-se com ração acrescida de pectina. Ao final dessa fase os animais foram submetidos aos mesmos testes elencados acima e, após eutanásia, tiveram o cérebro removido para análise da expressão de genes do hipocampo e do córtex pré-frontal envolvidos em depressão em ratas. Os tempos de desistência obtidos pelos grupos no teste do nado forçado (pectina=108 segundos e grupo padrão=77 segundos, com p=0,03), aplicado no final da primeira fase, indicam que o grupo alimentado com pectina foi induzido a comportamento do tipo depressivo. Os resultados dos outros testes confirmam que esse resultado não ocorreu por problemas de locomotores e/ou ansiogênicos. Na segunda fase não houve diferença entre os tempos, o que indica que esse comportamento não foi observado nessa época da vida dos animais. Conclui-se, então, que a depleção de vitamina B12 pode induzir ratos à depressão mas, possivelmente, apenas dentro de uma janela temporal que vai até a juventude desses animais. Há três outras hipóteses que podem justificar o resultado encontrado: houve uma adaptação fisiológica ao consumo de pectina; animais com mais idade podem necessitar de maior ingestão da fibra para diminuir a absorção da vitamina ou talvez seja necessária uma depleção mais intensa nessa fase da vida para levar a esse comportamento.

Foram estudadas 363 gestantes de primeira consulta, que não faziam uso de medicamentos que continham ferro, ácido fólico, vitamina B12 ou associação destes, na ocasião da coleta do material, em Centros de Saúde do Estado, no Subdistrito de Paz do Butantã, município de São Paulo. A prevalência de anemia (concentração de hemoglobina inferior a 11,6 g/dl) foi de 12,4%. As médias das concentrações de hemoglobina e as prevalências de anemia, segundo o trimestre de gestação, foram respectivamente: 13,47 g/dl e 3,57% no primeiro, 12,47 g/dl e 20,86% no segundo e 12,25 g/dl e 32,14% no terceiro trimestre. Não encontramos diferença. estatisticamente significativa entre as médias das concentrações de hemoglobina e entre as prevalências de anemia nas gestantes primigestas e multigestas. O mesmo aconteceu com as médias e as prevalências das gestantes multigestas com intervalo do último parto até dois anos e maior que dois anos. Na amostra estudada, encontramos maior prevalência de anemia naquelas gestantes que pertenciam às famílias que tinham renda per capita até 0,5 SMPC (salário mínimo per capita). As prevalências de verminose e de ancilostomídeos nas 300 gestantes foram respectivamente: 64,7% e 14,0%. Nas gestantes anêmicas foram respectivamente: 73,7% e 7,9%. Nas gestantes anêmicas, a prevalência de deficiência de ferro foi de 42,2% (concentração de ferro sérico <50 &#181;g/dl) ou 46,7% (saturação da transferrina <15% ou 40,0% (concentração de ferro sérico <50 &#181;g/dl e saturação de transferrina <15%). A prevalência de deficiência de ácido fólico foi 44,4%. A prevalência de deficiência de ferro e ácido fólico foi de 17,8%. Não encontramos deficiência de vitamina B<SUB<12 nas gestantes anêmicas. / Abstract not available

Orientador: Flávia Lombardi Lopes / Resumo: A meningite se caracteriza pela inflamação da aracnóide, pia-máter e líquor; causando danos às estruturas corticais e subcorticais. As meningites bacterianas estão intimamente relacionadas ao nível de desenvolvimento socioeconômico do país e são consideradas endêmicas no Brasil. Apesar dos esforços para o desenvolvimento de medicamentos e vacinas, a doença ainda possui altos índices de morbidade. Ela ocorre quando bactérias atravessam barreiras de proteção do corpo e alcançam o sistema nervoso central, desencadeando uma resposta imunológica. Sabe-se que durante o curso da doença os níveis de homocisteína do líquor aumentam, promovendo desmielinização e danos neuronais, e que a vitamina B12 é um tratamento utilizado para diminuir danos. Os microRNAs (miRNAs) são instrumentos de resposta fisiológica, tendo sua expressão modificada em diferentes tecidos, em decorrência de diferentes estímulos fisiológicos e patológicos. Estão associados ao controle da expressão de diferentes mediadores inflamatórios e sua ausência é capaz de causar danos severos a resposta imune. Considerando a importância dos miRNAs para regulação de processos imunes o presente estudo visou elucidar os padrões de expressão dos miRNAs durante o processo inflamatório da meningite pneumocócica (MP), bem como observar esses padrões em resposta ao tratamento adjuvante da doença com vitamina B12. Observamos um total de 37 miRNAs diferencialmente expressos, a infecção regulou positivamente 22 deles, e outros 7 negativ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Meningitis is characterized by an arachnoid, pia mater and cerebrospinal fluid inflammation; causing damage to the cortical and subcortical structures. Bacterial meningitis is closely related to the level of socioeconomic development of country and is considered endemic in Brazil. Despite efforts to develop drugs and vaccines, the disease still has high rates of morbidity and mortality. Occurring when bacteria cross body protection barriers and reach the central nervous system, triggering immune response. It is known that during disease course the the levels of homocysteine increase in cerebrospinal fluid, leading to demyelination and neuronal damage, and that vitamin B12 is a treatment used to reduce those damages. MicroRNAs (miRNAs) are instruments of physiological response, having their expression modified in different tissues, due to different physiological and pathological stimuli. They are associated with expression control of different inflammatory mediators and their absence is capable of causing severe damage to the immune response. Considering the importance of miRNAs in regulation of immune processes, the present study aimed to elucidate miRNA expression patterns during the inflammatory process resulting from pneumococcal meningitis (PM), and to observe these patterns in response to adjuvant treatment of vitamin B12 in infected rats. We observed a total of 37 differentially expressed miRNAs; the infection positively regulated 22 and negatively regulated 7 of them, ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Ângelo Berchieri Junior / Banca: Manoel Victor Franco Lemos / Banca: Gerson Nakazato / Resumo: Salmonella enterica sorotipo Typhimurium sintetiza cobalamina (Vitamina B12) apenas sobre condições anaeróbicas. Dois porcento do genoma da S. Typhimurium é dedicado a reações dependentes de vitamina B12 como cofator, sua síntese e absorção. Neste estudo nós preparamos mutantes de Salmonella sorotipos Enteritidis, Gallinarum e Pullorum duplo defectivos na biossintese de cobalamina, cepas ΔcobSΔcbiA. A virulência destes mutantes foi comparada com as respectivas cepas selvagens e, nenhuma deficiência na capacidade de causar doença foi observada para as cepas de S. Enteritidis ΔcobSΔcbiA e S. Pullorum ΔcobSΔcbiA. S. Gallinarum ΔcobSΔcbiA por sua vez, mostrou atenuação total. Posteriormente nós testamos a produção de B12 pelas cepas mutantes e selvagens já descritas, e incluímos neste estudo a cepa de S. Typhimurium ΔcobSΔcbiA, e sua respectiva cepa selvagem. Todas as cepas mutantes não tiveram produção de B12 detectada. As cepas selvagens mostraram produção de vitamina B12 em ambos os ensaios utilizados, com exceção da S. Gallinarum que não apresentou produção de cobalamina in vitro. Como conclusão, a produção de vitamina B12 in vitro diferiu entre os sorotipos de Salmonella testados, a deleção dos genes cbiA e cobS produziu alteração na relação parasita hospedeiro em diferentes níveis entre os sorotipos de Salmonella estudados, sendo que esta foi muito maior entre o sorotipo Gallinarum e as aves. / Abstract: Salmonella enterica serovar Typhimurium only synthesizes cobalamin (Vitamin B12) during anaerobiosis. Two-percent of the S. Typhimurium genome is devoted to the synthesis and uptake of Vitamin B12 and to B12-dependent reactions. In order to understand the requirement from cobalamin synthesis better, we constructed Salmonella serovar Gallinarum, Salmonella serovar Enteritidis and Salmonella serovar Pullorum mutants that are double-defective in cobalamin biosynthesis (ΔcobSΔcbiA). We compared the virulence of these mutants to that of their respective wild type strains and found no impairment in S. Enteritidis ΔcobSΔcbiA and S. Pullorum ΔcobSΔcbiA ability to cause disease in chickens. S. Gallinarum ΔcobSΔcbiA mutant showed attenuated for chickens. We then assessed B12 production by these mutants and their respective wild type strains, as well as S. Typhimurium ΔcobSΔcbiA, and their respective wild type strain. All mutants were unable to produce detectable B12. B12 was detectable in wild type strains, but, S. Gallinarum demonstrated no in vitro cobalamin production. In conclusion, the production of vitamin B12 in vitro differed across the Salmonella serotypes that were tested. Furthermore, the deletion of the cbiA and cobS genes resulted in an alteration in the relationship between the serotype Gallinarum and the birds more stronger than did to the others serotypes. / Mestre

Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-08-25T16:39:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_marcelo_moreira_antunes.pdf: 492507 bytes, checksum: 41f643876649cd9c16f704b84a4e0fae (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-08-28T20:59:07Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_marcelo_moreira_antunes.pdf: 492507 bytes, checksum: 41f643876649cd9c16f704b84a4e0fae (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-08-28T20:59:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_marcelo_moreira_antunes.pdf: 492507 bytes, checksum: 41f643876649cd9c16f704b84a4e0fae (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-28T20:59:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertacao_marcelo_moreira_antunes.pdf: 492507 bytes, checksum: 41f643876649cd9c16f704b84a4e0fae (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-03-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da aplicação de fósforo orgânico (butafosfan) e vitamina B12 (cianocobalamina) sobre marcadores do metabolismo energético, mineral e inflamatório, produção de leite e sobre o índice de funcionalidade hepática de vacas leiteiras primíparas. Vinte e três vacas da raça Holandês foram aleatoriamente separadas em três grupos experimentais: Catosal (CAT, n = 8), que receberam total de 100 mL de Catosal®; Butafosfan (BUT, n = 8), que receberam total de 100 mL de solução aquosa de Butafosfan; e Controle (CTL, n = 7), que receberam total de 100 mL de solução fisiológica 0,9%. Todos os animais receberam os 100 mL divididos em 5 aplicações de 20 mL, em intervalos de 24 horas, por via subcutânea, iniciando logo após o parto. Os animais do grupo BUT apresentaram menores concentrações (P<0,05) de beta hidroxibutirato que os animais do grupo CTL. Os demais parâmetros metabólicos, o escore de condição corporal e a produção de leite não foram influenciados pelos tratamentos (P>0,05). O índice de funcionalidade hepática não foi influenciado pelos tratamentos (P>0,05). Após a separação dos animais em grupos de alto e baixo índice de função hepática, os animais do grupo com melhor função hepática (alto) apresentaram menores concentrações de beta hidroxibutirato (P<0,05) e tendência de menores concentrações de ácidos graxos não esterificados (P<0,10), enquanto que os animais com pior função hepática (baixo) apresentaram tendência de menores concentrações de albumina (P<0,10). Em conclusão, neste estudo o índice de funcionalidade hepática não foi influenciado pelos tratamentos. / The objective of this study was to evaluate the effects of organic phosphorus (butafosfan) and vitamin B12 (cyanocobalamin) on markers of energy, mineral and inflammatory metabolism, milk production and the liver functionality index of primiparous dairy cows. Twenty-three Holstein dairy cows were randomly allocated into three groups: Catosal (CAT, n = 8), receiving total of 100 mL of Catosal®; Butafosfan (BUT, n = 8) that received a total of 100 mL of aqueous Butafosfan; and Control (CTL, n = 7), receiving total of 100 mL of 0.9% saline. All the animals received the 100 mL divided in five 20 mL applications at 24-hour intervals, subcutaneously, beginning soon after birth. The animals in the group BUT showed lower beta-hydroxybutyrate concentrations (P<0.05) than animals in the CTL group. The other metabolic parameters, body condition score and milk production were not affected by treatments (P>0.05). The liver functionality index was not affected by treatments (P> 0.05). After the separation of the animals in groups of high and low index of liver function, the animals of the group with better liver function (high) had lower concentrations of beta-hydroxybutyrate (P<0.05) and a trend of lower concentrations of non-esterified fatty acids (P<0.10), whereas the animals with poor liver function (low) showed a tendency to have lower concentrations of albumin (P <0.10). In conclusion, in this study the liver functionality index was not affected by treatments.