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Potencial alelopático de extratos aquosos de duas espécies de Gleicheniaceae sobre espécies infestantes de culturas e da bioindicadora Lactuca sativa L

Voltarelli, Valquíria Marin 05 May 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T19:31:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3035.pdf: 892381 bytes, checksum: ff6a3130c36121f43baf1fa3313e9b53 (MD5) Previous issue date: 2010-05-05 / Financiadora de Estudos e Projetos / This work aims to determine through bioassays the allelopathic potential of aqueous extracts Gleichenella pectinata and Dicranopteris flexuosa adult and mature fronds in two physiological stages (fertile and sterile) over the percentage and average time of germination, besides initial growth of three species of crop weeds (Echinochloa crus-galli, Ipomoea grandifolia, Euphorbia heterophylla). Four aqueous treatments were made (0, 2,5 , 5 and 10%), with five replications. Each plot consisted of 30 seeds for germination tests and 10 seedlings for initial growth of root and hypocotyl / coleoptile. Root growth was the most sensitive parameter to G. pectinata and D. flexuosa allelochemicals, for the three target species. All extracts damaged root growth of target species, excepting the lower concentration of sterile fronds extracts over E. heterophylla. Sterile frond extracts caused a delay on E. crusgalli and E. heterophylla germination under concentrations 5 and 10%. The higher concentration of fertile frond extract decreased germination percentage of the three target species. All D. flexuosa extracts decreased root length of all target species. I. grandifolia was the most sensitive species due to D. flexuosa extracts, having showed decrease in all morphologic parameters. Both other target species also had their shoot part length growth suppressed under 5% and 10% concentrations. A soil experiment was also performed in order to verify the role of different treatments of D. flexuosa fronds on Lactuca sativa germination in presence or absence of microorganisms. Each treatment was tested with 4 lettuce seeds per vase, by 10 days with 6 replications. Treatments were tested in 6 periods of ten days each, related to the 1st, 2nd, 4th, 8th, 16th and 32nd days after treatments application. Light, moisture and temperature conditions were controlled. In general, non-sterilized substrates presented higher allelopathic effects over analyzed parameters. Among treatments, the pre-occupied soil exerted stronger effects, with inhibition of germination in non-sterilized, during the whole period of experiment. That must be an indicative of accumulated allelopathic substances under environmental conditions, and their prolonged effects. / No presente trabalho foram feitos bioensaios para determinar o potencial alelopático dos extratos aquosos de frondes adultas de Gleichenella pectinata e de Dicranopteris flexuosa em dois estágios fisiológicos (fértil e estéril) sobre a porcentagem e o tempo médio de germinação, e crescimento inicial de três espécies de plantas infestantes de culturas (Echinochloa crus-galli, Ipomoea grandifolia, Euphorbia heterophylla). Foram feitos quatro tratamentos aquosos (0, 2,5 , 5 e 10%), com cinco repetições. Cada tratamento consistiu de 30 sementes para os experimentos de germinação e 10 plântulas para crescimento da radícula e do hipocótilo/coleóptilo. O crescimento das raízes foi o parâmetro mais sensível aos aleloquímicos de frondes de G. pectinata e de D. flexuosa, para as três espécies estudadas. Todos os extratos prejudicaram o crescimento da raiz das três espécies alvo, exceto a concentração 2,5% do extrato de frondes estéreis de G. pectinata sobre E. heterophylla. Os extratos de frondes estéreis de G. pectinata atrasaram a germinação de E. heterophylla e E. crus-galli nas concentrações 5 e 10%. A concentração 10% do extrato de fronde férteis reduziu a porcentagem de germinação das três espécies-alvo. Todos os extratos de D. flexuosa reduziram o sistema radicular de todas as espécies alvo. I. grandifolia foi a espécie mais sensível aos extratos de D. flexuosa, apresentando redução de todos os parâmetros morfológicos. As demais espécies alvo tiveram suas partes aéreas diminuídas pelas concentrações 5 e 10%. Foi realizado um experimento em solo para verificar o desempenho de diferentes tratamentos de D. flexuosa na germinação de Lactuca sativa, na presença e ausência de microrganismos. Cada um dos tratamentos foi testado com 4 sementes de alface /vaso durante seis períodos distintos de dez dias, referentes ao 1º, 2º, 4º, 8º, 16º e 32º dias após a aplicação dos tratamentos, com 6 réplicas. As condições de luminosidade, umidade e temperatura foram controladas. Em geral, os substratos não esterilizados apresentaram maiores efeitos alelopáticos sobre os parâmetros analisados. Dentre os tratamentos, o solo pré ocupado por D. flexuosa, inibindo a germinação quando não esterilizado, durante todo e tempo de experimento. Isso comprova o acúmulo de substâncias alelopáticas em condições ambientais, e seu efeito prolongado.
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Resistência de Euphorbia heterophylla L. aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase (ALS/AHAS) / Resistance of Euphorbia heterophylla L. to acetolactate syntase (ALS/AHAS) inhibitor herbicides

Vargas, Leandro 24 August 2000 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-04-26T13:22:22Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 386408 bytes, checksum: 1d07ce98be2c52bdc785ddfdff577fa1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-26T13:22:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 386408 bytes, checksum: 1d07ce98be2c52bdc785ddfdff577fa1 (MD5) Previous issue date: 2000-08-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A ocorrência de plantas daninhas resistentes a herbicidas é um fato novo no Brasil. A caracterização da resistência é importante para embasar previsões e eleger métodos de manejo e controle. Desse modo, foram realizados na Universidade Federal de Viçosa, de março de 1997 a julho de 1999, quatro experimentos, objetivando de identificar biótipos resistentes e caracterizar a resistência. O primeiro experimento objetivou identificar e estudar os mecanismos envolvidos na resistência, cujos resultados indicaram resistência cruzada aos herbicidas inibidores da enzima ALS. Estudos com ALS, extraída de plantas resistentes de leiteiro, indicaram I50 superior a 3.000 μM para o imazapyr e 2.000 μM para o imazethapyr, contrastando com valores de I50 de 2 μM para aquele e 0,7 μM para este em plantas sensíveis. No segundo experimento, investigou-se a resposta dos biótipos resistentes a herbicidas com diferentes mecanismos de ação. Constatou-se que os herbicidas inibidores da ALS controlaram com eficiência o biótipo sensível, à exceção do flumetsulan; já sobre o biótipo resistente, somente o herbicida imazapyr, na maior dose, apresentou controle. Os herbicidas com mecanismos de ação distintos daqueles dos inibidores da ALS apresentaram-se altamente eficientes no controle dos biótipos resistentes e sensíveis quando aplicados de forma isolada ou em mistura. O terceiro experimento objetivou descrever uma técnica de cruzamento controlado em Euphorbia heterophylla L. Os resultados evidenciaram que as polinizações e emasculações realizadas no estádio 1 produzem grande número de ciátios com uma ou duas sementes e raramente com três. As realizadas no estádio 2, ou acima deste, garantiram o sucesso dos cruzamentos com boa produção de sementes. No quarto experimento, estudaram-se a herança, o número de genes que conferem a resistência e o grau de resistência dos biótipos homozigotos e heterozigotos resistentes. As plantas F1 mostraram-se totalmente resistentes ao herbicida, indicando que a resistência é nuclear e dominante. As plantas F2 apresentaram alta probabilidade para segregação 3:1, evidenciando que a resistência é codificada por um gene dominante. Pela aplicação de doses crescentes de imazethapyr sobre as plantas F1, calculou-se que os biótipos homozigotos resistentes e os heterozigotos apresentaram o mesmo grau de resistência para doses de até 1.600 g ha-1 desse herbicida. Os resultados permitiram concluir que a insensibilidade da enzima ALS aos herbicidas que a inibem é o principal mecanismo responsável pela resistência das plantas de Euphorbia heterophylla L. a tais produtos. Os biótipos resistentes são controlados com eficiência com herbicidas com mecanismos de ação distintos daqueles dos inibidores da ALS. A resistência é codificada por um gene dominante nuclear com dominância completa. / The occurrence of herbicide-resistant weeds is a new fact in Brazil. The characterization of the resistance is important to provide a base for previsions and select methods of management and control. Therefore, four experiments were carried out at the Universidade Federal de Viçosa, from March,1997, to July, 1999, to identify resistant biotypes and to study the mechanisms involved in resistance. The first experiment, aimed to identify and study the mechanisms involved in the resistance, had the results indicating cross resistance to ALS inhibitory herbicides. Studies with ALS, extracted from resistant plants, showed l50 superior to 3000 μM for imazapyr and 2000 μM for imazethapyr, which contrasted with l50 values of 2 μM for the former and 0.7 μM for the latter in susceptible plants. The second experiment analyzed the response of the resistant biotypes to herbicides with different modes of action. It was verified that the ALS inhibitory herbicides had efficient control over the susceptible biotypes, apart from flumetsulan; as for the resistant biotype, only the herbicide imazapyr at its highest dose, showed control. The herbicides with modes of action distinct from those ALS inhibitors were shown highly efficient on controlling susceptible and resistant biotypes when applied separately or in mixture. The third experiment aimed to describe a technique of controlled crossings in Euphorbia heterophylla L. The results showed evidence that pollination and emasculation performed at stage 1 produce a great number of ciatios with one or two seeds and rarely with three. Those performed at stage 2, or above this stage, assured the success of the crossings with a good production of seeds. In the fourth experiment, the inheritance, the number of genes that confer resistance and the degree of resistance in resistant homozygote and heterozygote biotypes, were studied. The F1 plants were shown totally resistant to the herbicide, indicating that the resistance is nuclear and dominant. The F2 plants presented a high probability for 3:1 segregation, making evident that the resistance is codified by a dominant gene. It was calculated that the biotypes resistant homozygote and heterozygote showed the -1 same degree of resistance for doses up to 1600 g ha , by means of the application of increasing doses of imazethapyr on F1 plants. The results obtained permit the conclusion that the insensitivity of the ALS enzyme to the herbicides is the primary mechanism responsible for the resistance of Euphorbia heterophylla L. to such products. The resistant biotypes are efficiently controlled by herbicides with mechanism of action distinct from those of the ALS inhibitors. The resistance is codified by a nuclear dominant gene with complete dominance.
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Caracterização química, atividade fitotóxica e antibacteriana de extratos de Euphorbia Heterophylla L / Chemical characterization, phytotoxic and antibacterial activities of extracts from Euphorbia heterophylla L

Silva, Ueveton Pimentel da 18 July 2017 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2018-04-03T13:05:15Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 5419324 bytes, checksum: ff9b97430289d82b50193e2249e5aa92 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-03T13:05:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 5419324 bytes, checksum: ff9b97430289d82b50193e2249e5aa92 (MD5) Previous issue date: 2017-07-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Metabólitos secundários obtidos a partir de extratos botânicos podem ser úteis para a descoberta e desenvolvimento de novos produtos com aplicação tanto na medicina quanto na agricultura. Na agricultura, os extratos botânicos e os metabólitos secundários representam uma das principais alternativas ao uso de pesticidas sintéticos, podendo apresentar baixa toxidade e o menor impacto ambiental. Euphorbia heterophylla L. é considerada uma das principais plantas daninhas em importantes culturas como a soja e o milho. Sua alta competitividade em ecossistemas agrícolas pode ser devida, pelo menos em parte, à produção de compostos aleloquímicos. Por outro lado, essa espécie é utilizada na medicina popular em diferentes partes do mundo, por exemplo, como anti-inflamatória e antimicrobiana. Apesar dessas propriedades, o conhecimento sobre seus constituintes químicos é escasso. Assim, o presente trabalho teve por finalidade avaliar as atividades fitotóxica e antibacteriana de extratos das folhas e raízes de E. heterophylla e identificar os compostos químicos presentes nesses extratos. Os extratos das folhas foram obtidos por meio de extrações sucessivas, por maceração, utilizando os solventes hexano, acetato de etila e metanol. Os extratos das raízes foram obtidos por extração em Soxhlet usando hexano e metanol, sucessivamente. As atividades alelopática dos extratos foram avaliadas utilizando sementes de sorgo, pepino e alface. Os extratos foram submetidos a marcha fitoquímica para análise das principais classes de metabólitos presentes e os resultados mostraram a presença de triterpenos como metabólitos principais. Os extratos em metanol de folhas e raízes foram submetidos a procedimentos de extrações visando o isolamento de alcaloides, e as frações obtidas foram submetidas a análises por CG-EM após hidrólise e derivatização. Os extratos em hexano e em acetato de etila foram submetidos a fracionamentos cromatográficos para isolamento de seus constituintes químicos majoritários, que foram caracterizados por RMN de 1 H e 13 C. As análises por CG-EM mostraram a presença de diferentes ácidos graxos nos extratos em acetato de etila e metanol, sendo os principais os ácidos palmítico, linoleico, α-linolênico e esteárico. A partir do extrato ERH foram isolados os compostos β-sitosterol, hexanoato de germanicol, acetato de lupeol, acetato de taraxasterol, acetato de pseudo-taraxasterol e duas misturas, uma contendo β-sitosterol + estigmaterol e outra com acetato de α-amirina + acetato de β-amirina. Foi obtido do extrato EFH, uma mistura contendo os compostos acetato de lupeol, acetato de α- amirina e acetato de β-amirina. Foram isolados do extrato EFAC o acetato de lupeol e uma mistura de acetato de α-amirina + acetato de β-amirina. Os extratos hexânicos das folhas e raízes apresentaram pequena atividade fitotóxica sobre as plantas testadas e os extratos em acetato de etila e metanol apresentaram atividade moderada, particularmente contra sementes de sorgo e alface. A atividade antibacteriana dos extratos e seus derivados foram avaliados através dos testes por diluição e difusão com os micro-organismos: Staphylococcus aureus ATCC 29213, S. aureus ATCC 25923 e Escherichia coli ATCC 29214. Os extratos e compostos não apresentaram efeito sobre os micro-organismos testados e nas condições avaliada concentrações avaliadas. Embora os extratos tenham apresentado pequenas atividades fitotóxicas para serem explorados como herbicidas naturais, a capacidade de interferir na germinação e crescimento de outras espécies, embora discreta, pode ser um fator contribuinte para a elevada competitividade da espécie E. heterophylla em ambientes agrícolas. / Secondary metabolites from botanic extracts can be useful sources for the discovering and development of new products for application in both medicine and agriculture. In agriculture, botanic extracts and their metabolites represent one of the most promising alternative to synthetic herbicides, mainly because of their lower toxicity and environmental impact. Euphorbia heteriphylla L. is plant species considered as a major weed in important cultures, including soy and corn. Its high competitiveness in agricultural ecosystems may be related, at least in part, to the production of allelochemicals. Besides, this species is used in traditional medicine in different parts of the world, for example, as anti-inflamatory, and antimicrobial. Despite these properties, the knowledge about its chemical constitutes remains scarce. Thus, the aim of the present work was to investigate the phytotoxic and antibacterial properties of extracts and metabolites from leaves and roots of E. heterophylla. Leaf extracts were obtained by maceration using hexane, ethyl acetate, and methanol, successively. Root extracts were produced in a Soxhlet apparatus using hexane and methanol, successively. Allelophatic properties of extracts and metabolites were accessed using seeds of sorghum, cucumber, and lettuce. A phytochemical screening was used to a preliminary detection of the major classes of metabolites present in the extracts, and these test revealed the presence of riterpenes as major metabolites. Methanolic extracts from leaves and roots were subjected to hydrolysis and derivatization prior to GC-MS analysis. Hexane and ethyl acetate extracts were fractionated by column and preparative thin layer chromatography and the isolated metabolites were purified and identified by 1 H and 13 C NMR methods. The GC- MS analysis showed the presence of different long chain fatty acids in the methanol and ethyl acetate extracts, with palmitic, linoleic, α-linolênic, and esteáric acids being identified as the major constituents. Fractionation of the hexane extracts from roots lead to the isolation of the triterpenes identified as β-sitosterol, germanicol hexanoate, lupeol acetate, taraxasterol acetate, and pseuto taraxasterol acetate, a mixture constituted by β- sitosterol and stigmaterol, and a mixture of α- and β-amyrin acetates. Fractionation of the hexane extracts from leaves led to a mixture of lupeol, α-amyrin and β-amyrin acetates. Fractionation of ethyl acetate extracts from leaves led to the isolation of lupeol acetate and to a mixture of α-amyrin and β-amyrin acetates. Hexane extracts from leaves and roots showed only a discrete phytotoxic activity, while ethyl acetate and methanol extracts showed moderated phytotoxicity for sorgum and lettuce seeds. The antibacterial activities of extracts and metabolites were accessed on Staphylococcus aureus ATCC 29213, S. aureus ATCC 25923 e Escherichia coli ATCC 29214 using the dilution and diffusion tests. No antibacterial activity was observed for the assayed microorganisms at the concentrations tested. Despite presenting low phytotoxic activity to be used as natural herbicides, the ability of their chemical constituents to interfere on germination and growth of other plant species may contribute to the high competitiveness of E. heterophylla in agricultural environments.
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Isolamento, caracterização química e avaliação da atividade fitotóxica de metabólitos produzidos pelo fungo Alternaria euphorbiicola / Isolation, chemical characterization and evaluation of the phytotoxic activity of metabolites produced by the fungus Alternaria euphorbiicola

Varejão, Eduardo Vinícius Vieira 02 April 2012 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-09-06T17:45:49Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3005523 bytes, checksum: 55080e7cc13a34e94047adc722f4b917 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-06T17:45:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3005523 bytes, checksum: 55080e7cc13a34e94047adc722f4b917 (MD5) Previous issue date: 2012-04-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A espécie fúngica Alternaria euphorbiicola foi isolada a partir de tecidos severamente infectados de Euphorbia heterophylla, uma das plantas daninhas mais nocivas à agricultura brasileira. A rapidez e a severidade dos sintomas produzidos pela inoculação de A. euphorbiicola em E. heterophylla levaram à suspeita de produção de compostos fitotóxicos pelo fungo, despertando o interesse pela identificação de tais compostos em busca de novas moléculas que possam ser utilizadas como modelos para o desenvolvimento de novos herbicidas. Em investigação preliminar, a atividade fitotóxidade de filtrados de culturas em meio líquido do fungo foi evidenciada, bem como a influência de diferentes condições de cultivo sobre a fitotoxicidade de filtrados de cultura. As condições de cultivo que resultaram na produção de filtrados de cultura apresentando fitotoxicidade elevada foram utilizadas para fins de isolamento e identificação de metabólitos fitotóxicos. Filtrados de cultura formada em meio de Jenkis-Prior foram submetidos a isolamento guiado por bioensanio, levando à caracterização de fração cromatográfica composta por diferentes ácidos graxos com atividade fitotóxica comprovada e à identificação do composto fitotóxico tirosol. Através de ensaio com punctura de folhas, tirosol, foi capaz de causar despigmentação e necroses severas sobre folhas de E. heterophylla (ED50 36,9 mM). O composto foi aplicado sobre folhas de soja, milho e de diferentes espécies daninhas. Mesmo em concentração elevada (100 mM), o composto apresentou baixa toxicidade contra as diferentes espécies, demonstrando, assim, atividade seletiva para a planta hospedeira do fungo. O potencial de tirosol como herbicida natural para o controle de E. heterophylla foi avaliado através de ensaio por aspersão. A concentração mínima de tirosol capaz de provocar a morte de 100% das plantas de E. heterophylla foi de 40 mM. Posteriormente, o fracionamento guiado por bioensaio de filtrados de cultura em meio de Fries levou ao isolamento dos compostos anidromevalonolactona, (R)-(–)-mevalonolactona e cicloglicilprolina. Estes compostos foram capazes de produzir, em curtos intervalos de tempo, sintomas similares aos produzidos pela inoculação do fungo na planta hospedeira, o que sugere a participação destes compostos nos estágios iniciais da interação planta-patógeno. Os resultados obtidos no trabalho indicam que os metabólitos fitotóxicos isolados de culturas do fungo Alternaria euphorbiicola podem constituir-se em modelos promissores para a síntese de análogos com atividade herbicida para o manejo de Euphorbia heterophylla. / The fungal specie Alternaria euphorbiicola was isolated from severely infected tissues of Euphorbia heterophylla, regarded as one of the most nocive weed in the Brazilian agriculture. The aggressiveness and rapid development of symptoms produced by inoculation of A. euphorbiicola on E. heterophylla sparked the interest in investigating the production of phytotoxins by this fungus in the search for new molecules that can be used as models for the development of new herbicides. In a preliminary investigation, the phytotoxicity of culture filtrates of the fungus and the influence of different growing conditions on the in vitro production of phytotoxic metabolites were proved. The growing conditions resulting in highly phytotoxic culture filtrates were selected to the isolation and identification of phytotoxic metabolites. Filtrates of cultures formed in Jenkins-Prior medium were subjected to bioassay-guided isolation procedures, leading to the characterization of a phytotoxic chromatographic fraction constituted mainly by middle chain fatty acids and to the isolation of the phytotoxin known as tyrosol. Through a puncture leaf assay, tyrosol was able to cause severe depigmentation and necrosis on leaves of E. heterophylla (ED50 36.9 mM). The compound was also applied on the leaves of soybean, corn and different weed species. Even at high concentration (100 mM), the compound showed low toxicity against these different species, thereby demonstrating selective activity for the fungal host plant. The potential of tyrosol as a natural herbicide for chemical control of E. heterophylla was assessed by a leaf spray assay. The minimum concentration of tyrosol capable of causing the death of 100% of the plants was 40 mM. Subsequently, a bioassay-guided fractionation of filtrates from cultures formed in Fries medium lead to the identification of the compounds anhydromevalonolactone, (R)-(–)-mevalonolactone and cycloglycilproline. All these compounds were able to produce symptoms similar to those produced by inoculation of the fungus on the host plant, in short time intervals, suggesting the possible involvement of these compounds in the early stages of plant-pathogen interaction. The results obtained in this work indicate that the phytotoxic metabolites produced by Alternaria euphorbiicola may constitute promising start points to the synthesis of analogues with herbicide activity for the management of Euphorbia heterophylla.
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Alelopatia de extratos de adubos verdes no controle de plantas daninhas

Barbosa, Jaqueline de Araújo 28 February 2018 (has links)
Submitted by Helena Bejio (helena.bejio@unioeste.br) on 2018-06-09T00:30:28Z No. of bitstreams: 2 Jaqueline_Barbosa_2018.pdf: 754013 bytes, checksum: 0dd83e656c2f8d6bfc0e9ea67999e134 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-09T00:30:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Jaqueline_Barbosa_2018.pdf: 754013 bytes, checksum: 0dd83e656c2f8d6bfc0e9ea67999e134 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The substances present in the plant material of green manures can act in the suppression of weeds by the release of allelopathic compounds. The objective of this study was to evaluate the allelopathic effect of the extracts of Dolichos lab lab, Pachyrhizus sp. and Sorghum bicolor, isolated and mixed, under different preparation method, in the weed species Bidens pilosa, Euphorbia heterophylla and Digitaria insularis. The experiment was realized in four stages, the collection of the vegetal material and the preparation of the aqueous extracts; influence of aqueous extracts on germination and initial development of B. pilosa, E. heterophylla and D. insularis, at completely randomized design was used, with factorial 7x4+T, and four replications; the effect of the aqueous extract were evaluated in post-emergence of B. pilosa, E. heterophylla and D. insularis, at completely randomized design was used, with six trataments and four replications, ermination and initial development of B. pilosa after the application of different fractions of aqueous extracts of D. lab lab, with dried plant material submitted to water bath, was used a completely randomized design with 14 trataments, ad four replications. In pre-emergence, the extract Pachyrhizus sp.+S. bicolor with freeze-dried plant material submitted to the water bath, reduced germination percentage, hypocotyl length and root length by 87%, 30% and 61%, respectively. For the E. heterophylla, the mixture Pachyrhizus sp.+S. bicolor, with freeze-dried plant material, caused the reduction of germianation percentage b 23%. For D. insularis, the extract Pachyrhizus sp.+S. bicolor, with freeze-dried plant material submitted to the water bath, reduced the percentage of germinations in 83%, and in 52% the length of the root. In post-emergence, the D. lab lab+Pachyrhizus sp. With freeze-dried plant material submitted to the water bath, reduced the dry mass of roots of B. pilosa plants by 21%, and by 18% the dry mass of roots of D. insularis, however, stimulated in 14% same variable in E. heterophylla. The fractionation of the D. lab lab extract with dried plant material, did not affect the germination percentage and dry mass of B. pilosa, but interfered the hypocotyl and the root. The fractionation of the D. lab lab + Pachyrhizus sp. + S.bicolor, with freeze—dried plant material submitted to the water bath, interfered in all variables. Is conclude that there is allelopathic effect of extracts of S. bicolor, D. lab lab, and Pachyrhizus sp. Isolated or in mixture, in different preparation method, on the germinability and development of B. pilosa, E. heterophylla and D. insularis, this stimulus os inhibition effect being according to the extract used and the method of preparation. Also, that the allelopathic effect happened by the action of several substances of different polarities. / As substâncias presentes no material vegetal podem atuar na supressão de plantas daninhas pela liberação de compostos alelopáticos. Objetivou-se avaliar o efeito alelopático de extratos de Dolichos lab lab, Pachyrhizus sp. e Sorghum bicolor, isolados e em mistura, submetidos a diferentes modos de preparo, nas espécies de plantas daninhas Bidens pilosa, Euphorbia heterophylla e Digitaria insularis. O experimento foi realizado em quatro etapas, sendo, elas, a coleta do material vegetal e o preparo dos extratos aquosos; influência dos extratos aquosos na germinação e desenvolvimento inicial de B. pilosa, E. heterophylla e D. insularis, em delineamento inteiramente casualizado e fatorial 7x4+T, com quatro repetições; efeito alelopático dos extratos de adubos verdes em pós-emergência nas plantas daninhas B. pilosa, E. heterophylla e D. insularis, em delineamento inteiramente casualizado, com seis tratamentos e seis repetições; germinação e desenvolvimento inicial de B. pilosa após a aplicação de diferentes frações dos extratos aquosos de D. lab lab, preparado com material vegetal seco e da mistura D. lab lab+Pachyrhizus sp.+S.bicolor, preparado com material vegetal liofilizado e submetido a banho-maria, em delineamento inteiramente casualizado, com 14 tratamentos e quatro repetições. Em pré-emergência, o extrato Pachyrhizus sp.+S. bicolor preparado com material vegetal liofilizado e submetido a banho-maria reduziu a porcentagem de germinação, o comprimento do hipocótilo e o comprimento da raiz primária em 87%, 30% e 61%, respectivamente. Para E. heterophylla, a mistura Pachyrhizus sp.+S. bicolor, preparado com material vegetal liofilizado, causou a redução em 23% da porcentagem de germinação. Para D. insularis, o extrato Pachyrhizus sp.+S. bicolor, preparado com material vegetal liofilizado e submetido a banho-maria, reduziu a porcentagem de germinação em 83%, e o comprimento da raiz primária em 52%. Em pós-emergência, o extrato de D. lab lab+Pachyrhizus sp., preparado com material vegetal liofilizado e submetido a banho-maria, reduziu em 21% a massa seca das raízes das plantas B. pilosa, e em 18% a massa seca das raízes de D. insularis, contudo, estimulou em 14% a mesma variável em E. heterophylla. O fracionamento do extrato de D. lab lab, preparado com material vegetal seco, não afetou a porcentagem de germinação e a biomassa de B. pilosa, mas interferiu no comprimento do hipocótilo e no comprimento da raiz primária. As frações do extrato D. lab lab+Pachyrhizus sp.+S. bicolor, preparado com material vegetal liofilizado e submetido a banho-maria, interferiu em todas as variáveis avaliadas. Conclui-se que existe efeito alelopático de extratos de S. bicolor, D. lab lab, e P. Pachyrhizus sp. isolados ou em mistura, em diferentes modos de preparo, sobre a germinação e o desenvolvimento de B. pilosa, E. heterophylla, e D. insularis, sendo este efeito de estímulo ou de inibição, de acordo com o extrato utilizado e o modo de preparo. Ainda, que o efeito alelopático ocorre pela ação de várias substâncias de diferentes polaridades.
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Sistemas de produção com rotação de culturas, coberturas e herbicidas para redução e prevenção do desenvolvimento de plantas daninhas resistentes ao Glifosato / Agricultural production systems with crop rotation, cover crops and herbicides for reduction and prevention of development of weeds resistant to Glyphosate

Alexandrino, Sergio Antonio 22 April 2015 (has links)
O aparecimento de plantas daninhas resistentes ao glifosato tem colocado em risco a utilização de culturas que têm a tecnologia RR. A fim de verificar o desenvolvimento de plantas daninhas resistentes ao glifosato, um experimento de campo foi realizado na estação experimental AgroMarochi localizada em Ponta Grossa, estado do Paraná, de 2009 a 2012, com o objetivo de avaliar diferentes sistemas de produção, incluindo a rotação de culturas, culturas de cobertura e aplicação de herbicidas com diferentes mecanismos de ação. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, com dezesseis tratamentos e três repetições. Em função dos resultados, conclui-se que: (i) a rotação de culturas e de ingredientes ativos de herbicidas proporcionam melhor desempenho agronômico e econômico (menor risco de aparecimento de plantas daninhas resistentes e maiores produtividades), (ii) os sistemas 3 (soja/ trigo/ soja/ aveia /milho /trigo) e 4 (soja/ azevém/ soja/ azevém/ milho/ aveia), com 33% da área com rotação de cultura com milho na safra de verão, são os mais rentáveis independentemente dos cenários 1 e 2 do VPL (Valor Presente Líquido), (iii) os tratamentos com manejo padrão de herbicidas contribuíram no aumento da população das plantas daninhas (leiteiro, guanxuma, erva-quente, azevém - resistente e não resistente ao Glifosato e buva - resistente e não resistente ao Glifosato), e apresentaram menor rentabilidade, (iv) os manejos com rotação de herbicidas propiciaram a redução da população de plantas daninhas, (v) a cultura de aveia contribui para a redução de plantas daninhas, como azevém e buva resistentes e não resistentes ao glifosato, principalmente, (vi) área em pousio contribui para o aumento da população de plantas daninhas, como azevém e buva resistentes e não resistentes ao glifosato, principalmente, e (vii) a aplicação de Glifosato associado a Atrazina em pós emergência (tratamentos 6, 7, 11 e 14: sistemas de rotação de culturas 2, 3, 4 e 5, respectivamente) não diferiu da aplicação de Tembotrione associado a Atrazina (tratamentos 8, 9, 12 e 15: sistemas de rotação de culturas 2, 3, 4 e 5, respectivamente) na cultura de Milho RR sobre a população de azevém e buva resistente e não resistente ao glifosato. / The emergence of weeds resistant to Glyphosate has been putting at risk the use of crops that have the RR technology. In order to check the development of weeds resistant to Glyphosate, a field experiment was carried out at AgroMarochi experimental station located in \'Ponta Grossa\', State of Paraná, from 2009 to 2012, with the purpose of evaluating different agricultural production systems, including crop rotation, cover crops and application of herbicides with different mechanisms of action. The experimental design was a randomized blocks, with sixteen treatments and three replications. In light of the results, it is concluded that: (i) rotation of crops and of active ingredients of herbicide provides better agronomic and economic performance (lower risk of emergence of resistant weeds and higher yields), (ii) the systems 3 (soybean/ wheat/ soybean/ oat/ maize/ wheat) and 4 (Soybean/ ryegrass/ soybean/ ryegrass/ maize/ oat), with 33% of the area with crop rotation with maize in the summer season, are the most profitable regardless of the scenarios 1 and 2 of the NPV (Net Present Value), (iii) treatment with standard management of herbicides contributed in increasing the population of weeds (Euphorbia heterophylla, Sida sp., Spermacoce latifolia, Lolium multiflorum - resistant and not resistant to Glyphosate, Conyza spp. - resistant and not resistant to Glyphosate), and had lower profitability, (iv) the management with rotation of herbicides favored reducing weed populations, (v) the oat crop helps in reducing weeds, as ryegrass (Lolium multiflorum) and Conyza spp. resistant and not resistant to Glyphosate, mainly, (vi) fallow area contributes to the increasing population of weeds, as ryegrass and Conyza spp. resistant and not resistant to Glyphosate, mainly, and (vii) the application of Glyphosate associate to atrazine in post emergency (treatments 6, 7, 11 and 14: crop rotation systems 2, 3, 4 and 5, respectively) not differ from application of Tembotrione associate to Atrazine (treatments 8, 9, 12 and 15: crop rotation systems 2, 3, 4 and 5, respectively) in RR maize crop over weed population of ryegrass and Conyza spp. resistant and not resistant to Glyphosate.
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Sistemas de produção com rotação de culturas, coberturas e herbicidas para redução e prevenção do desenvolvimento de plantas daninhas resistentes ao Glifosato / Agricultural production systems with crop rotation, cover crops and herbicides for reduction and prevention of development of weeds resistant to Glyphosate

Sergio Antonio Alexandrino 22 April 2015 (has links)
O aparecimento de plantas daninhas resistentes ao glifosato tem colocado em risco a utilização de culturas que têm a tecnologia RR. A fim de verificar o desenvolvimento de plantas daninhas resistentes ao glifosato, um experimento de campo foi realizado na estação experimental AgroMarochi localizada em Ponta Grossa, estado do Paraná, de 2009 a 2012, com o objetivo de avaliar diferentes sistemas de produção, incluindo a rotação de culturas, culturas de cobertura e aplicação de herbicidas com diferentes mecanismos de ação. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, com dezesseis tratamentos e três repetições. Em função dos resultados, conclui-se que: (i) a rotação de culturas e de ingredientes ativos de herbicidas proporcionam melhor desempenho agronômico e econômico (menor risco de aparecimento de plantas daninhas resistentes e maiores produtividades), (ii) os sistemas 3 (soja/ trigo/ soja/ aveia /milho /trigo) e 4 (soja/ azevém/ soja/ azevém/ milho/ aveia), com 33% da área com rotação de cultura com milho na safra de verão, são os mais rentáveis independentemente dos cenários 1 e 2 do VPL (Valor Presente Líquido), (iii) os tratamentos com manejo padrão de herbicidas contribuíram no aumento da população das plantas daninhas (leiteiro, guanxuma, erva-quente, azevém - resistente e não resistente ao Glifosato e buva - resistente e não resistente ao Glifosato), e apresentaram menor rentabilidade, (iv) os manejos com rotação de herbicidas propiciaram a redução da população de plantas daninhas, (v) a cultura de aveia contribui para a redução de plantas daninhas, como azevém e buva resistentes e não resistentes ao glifosato, principalmente, (vi) área em pousio contribui para o aumento da população de plantas daninhas, como azevém e buva resistentes e não resistentes ao glifosato, principalmente, e (vii) a aplicação de Glifosato associado a Atrazina em pós emergência (tratamentos 6, 7, 11 e 14: sistemas de rotação de culturas 2, 3, 4 e 5, respectivamente) não diferiu da aplicação de Tembotrione associado a Atrazina (tratamentos 8, 9, 12 e 15: sistemas de rotação de culturas 2, 3, 4 e 5, respectivamente) na cultura de Milho RR sobre a população de azevém e buva resistente e não resistente ao glifosato. / The emergence of weeds resistant to Glyphosate has been putting at risk the use of crops that have the RR technology. In order to check the development of weeds resistant to Glyphosate, a field experiment was carried out at AgroMarochi experimental station located in \'Ponta Grossa\', State of Paraná, from 2009 to 2012, with the purpose of evaluating different agricultural production systems, including crop rotation, cover crops and application of herbicides with different mechanisms of action. The experimental design was a randomized blocks, with sixteen treatments and three replications. In light of the results, it is concluded that: (i) rotation of crops and of active ingredients of herbicide provides better agronomic and economic performance (lower risk of emergence of resistant weeds and higher yields), (ii) the systems 3 (soybean/ wheat/ soybean/ oat/ maize/ wheat) and 4 (Soybean/ ryegrass/ soybean/ ryegrass/ maize/ oat), with 33% of the area with crop rotation with maize in the summer season, are the most profitable regardless of the scenarios 1 and 2 of the NPV (Net Present Value), (iii) treatment with standard management of herbicides contributed in increasing the population of weeds (Euphorbia heterophylla, Sida sp., Spermacoce latifolia, Lolium multiflorum - resistant and not resistant to Glyphosate, Conyza spp. - resistant and not resistant to Glyphosate), and had lower profitability, (iv) the management with rotation of herbicides favored reducing weed populations, (v) the oat crop helps in reducing weeds, as ryegrass (Lolium multiflorum) and Conyza spp. resistant and not resistant to Glyphosate, mainly, (vi) fallow area contributes to the increasing population of weeds, as ryegrass and Conyza spp. resistant and not resistant to Glyphosate, mainly, and (vii) the application of Glyphosate associate to atrazine in post emergency (treatments 6, 7, 11 and 14: crop rotation systems 2, 3, 4 and 5, respectively) not differ from application of Tembotrione associate to Atrazine (treatments 8, 9, 12 and 15: crop rotation systems 2, 3, 4 and 5, respectively) in RR maize crop over weed population of ryegrass and Conyza spp. resistant and not resistant to Glyphosate.
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Hidrolases da parede celular em sementes de Euphorbia heterophylla L. durante a germinação e desenvolvimento inicial da plântula. / Cell wall hydrolases in the seeds of Euphorbia heterophylla L. during germination and early seedling development.

Suda, Cecilia Nahomi Kawagoe 11 December 2001 (has links)
Na maioria das sementes a emergência da radícula caracteriza o término da germinação e marca o início do desenvolvimento da plântula. A atividade das hidrolases da parede celular durante a pré-emergência pode estar associada ao amolecimento do tecido que circunda o embrião, principalmente na região micropilar, onde ocorre a protrusão da radícula. A atividade dessas enzimas após a emergência é associada à degradação de reservas polissacarídicas da parede celular, mobilizadas para suprir a plântula de açúcares antes que se torne autotrófica. No presente trabalho foram investigadas várias hidrolases da parede celular no endosperma de Euphorbia heterophylla durante a germinação e o desenvolvimento inicial pós-germinativo da plântula. Foi também realizada a purificação parcial de endo-b-1,4-glucanases da semente dessa espécie. As atividades da xiloglucano endotransglicosilase (XET), endo-b-mananase e b-manosidase são maiores no período de pré-emergência da semente de E. heterophylla, comparando-se com o período de pós-emergência. Por outro lado, as atividades da b-galactosidase, b-glucosidase, a-xilosidase, b-xilosidase e das glucanases que hidrolisam CMC, xiloglucanos de Hymenaea courbaril ou de Copaifera langsdorffii, xilano, Avicel e liquenano são elevadas no período de pós-emergência. A atividade sobre a laminarina ocorre durante ambos os períodos, de pré- e pós-emergência da radícula. A atividade da poligalacturonase não foi detectada nessa semente. Os resultados sugerem que XET, endo-b-mananase e b-manosidase podem estar envolvidas no processo de germinação, enquanto que as demais enzimas podem estar relacionadas ao processo de mobilização de reservas da semente. Em E. heterophylla o embrião está encerrado num endosperma rico em lipídios e proteínas, cujos produtos da degradação são absorvidos pelos cotilédones que iniciam a expansão 24 horas após o início da embebição. É possível que a hidrólise da parede celular do endosperma diminua a resistência contra a expansão em área do cotilédone facilitando, ao mesmo tempo, a rápida difusão dos produtos da degradação para os cotilédones. A purificação parcial das endoglucanases foi realizada utilizando-se colunas de Sephacryl S-100-HR numa primeira etapa, resultando em 2 grupos com atividade sobre CMC denominados I e II. Em uma segunda etapa, as endoglucanases do grupo I foram sequencialmente purificadas em coluna DEAE-Sephadex e de CF11-Celulose (afinidade). Através da focalização isoelétrica em gel de poliacrilamida e técnicas de sobreposição em gel de ágar para a determinação de atividade, foram detectadas endoglucanases de pIs de aproximadamente 3,0, 3,3, 3,8, 4,4, 4,9, 5,4 e 5,7 e um outro grupo de enzimas cujos pIs variam entre 8,5 e 10,0. As enzimas de pIs 3,0, 3,3 e 3,8 hidrolisam CMC e xiloglucano de C. langsdorffii; as de pIs entre 8,5 e 10,0 hidrolisam CMC e o xiloglucano de H. courbaril, mas não hidrolisam o de C. langsdorffii; as enzimas de pIs 4,4, 4,9 e 5,7 hidrolisam somente CMC; a de pI 5,4 hidrolisa somente xiloglucano de H. courbaril. As endoglucanases do grupo II foram purificadas em coluna de CM-celulose, tendo sido detectada uma enzima de pI 3,2 que degrada CMC bem como xiloglucano de C. langsdorffii e de H. courbaril. Foi também detectada uma xiloglucanase de pI 4,2 que hidrolisa somente xiloglucano de H. courbaril e um grupo de isozimas cujos pIs variam entre 8,5 e 10,0, que hidrolisa somente CMC. As xiloglucanases têm sido investigadas em sementes cujo xiloglucano é armazenado no cotilédone. O presente trabalho é o primeiro a relatar a ocorrência de xiloglucanases em uma semente endospérmica. / In most seeds radicle protrusion characterizes the termination of germination and the beginning of seedling development. The activity of cell wall hydrolases during the pre-emergence stage may be related to the softening of the tissue which involves the embryo, notably in the micropylar region where the radicle protrusion occurs. The activity of these enzymes following radicle emergence is related to the reserve degradation which may be cell wall polysaccharides mobilized to supply the seedling with sugars before it becomes autotrophic. In the present work it was investigated several cell wall hydrolases from the endosperm of Euphorbia heterophylla during germination and initial seedling development of this species. A partial purification of endo-b-1,4-glucanase was also performed. The activities of xyloglucan endotransglycosylase (XET), endo-b-mannanase and b-manosidase in E. heterophylla seeds are higher over the pre-emergence when compared to the post-emergence period. On the other hand the activities of b-galactosidase, b-glucosidase, a-xylosidase, b-xylosidase and glucanases which hydrolise CMC, xyloglucans from Hymenaea courbaril and Copaifera langsdorffii, xylan, Avicel and liquenan are higher over the post-emergence period. Activity on laminarin occurs over both periods. Polygalacturonase activity has not been detected in this seed. These results suggest that XET, endo-b-mannanase and b-manosidase may be involved in the process of germination whereas the other enzymes may be more related to reserve mobilization. In E. heterophylla the endosperm contains high contents of lipids and proteins and the degradation products of these reserves are absorbed by the cotyledons which expansion begins 24 hours since the start of imbibition. Probably endosperm cell wall hydrolysis facilitates cotyledon expansion by lowering endosperm resistance and at the same time the diffusion of degradation products into cotyledons. Partial purification of endoglucanases was carried out on Sephacryl S-100-HR as a first step resulting 2 active fractions (I and II) on CMC. Fraction I was further purified on DEAE-Sephadex and CF11-Cellulose (affinity) columns. Polyacrylamide gel isoelectric focusing followed by gel-overlay assay technique indicated several endoglucanases with pIs around 3.0, 3.3, 3.8, 4.4, 4.9, 5.4 and 5.7 and another group between 8.5 and 10.0. The pI 3.0, 3.3 and 3.8 enzymes hydrolyse both CMC and xyloglucan from Copaifera langsdorffii; the group between 8.5 and 10.0 hydrolyse both CMC and xyloglucan from Hymenaea courbaril but not from C. langsdorffii; pIs 4.4, 4.9 and 5.7 enzymes hydrolyse only CMC; pI 5.4 enzyme hydrolyse only xyloglucan from H. courbaril. Fraction II was further purified on CM-celullose column. It was detected a pI 3.2 endoglucanase which degrades CMC and xyloglucan from both C. langsdorfii and H. courbaril, a pI 4.2 xyloglucanase which hydrolyses only xyloglucan from H. courbaril, and a group of isozymes (pI 8.5 to 10.0) which hydrolyses only CMC. Xyloglucanases have been investigated only in seeds that have stored xyloglucan in the cotyledon. The present work is the first one to report the occurrence of xyloglucanases in an endospermic seed.
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Aspectos da interação entre o begomovírus Euphorbia yellow mosaic virus (EuYMV) e o DNA satélite Euphorbia yellow mosaic alphasatellite (EuYMA) em Euphorbia heterophylla: efeitos na infecção e transmissão por Bemisia tabaci / Aspects of the interaction between the begomovirus Euphorbia yellow mosaic virus (EuYMV) and the DNA satellite Euphorbia yellow mosaic alphasatellite (EuYMA) in Euphorbia heterophylla: effects on infection and transmission by Bemisia tabaci

Mendes, Igor Rodrigues 25 February 2016 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-06-20T18:12:54Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1756399 bytes, checksum: 4cd93ccd34ab97ff3909ee83598fa241 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-20T18:12:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1756399 bytes, checksum: 4cd93ccd34ab97ff3909ee83598fa241 (MD5) Previous issue date: 2016-02-25 / A maioria dos begomovírus monossegmenados do Velho Mundo (família Geminiviridae) estão associados a DNAs satélites, classificados como alfa- e betassatélites. Os alfassatélites são capazes de replicar-se de forma autônoma, mas dependem do vírus auxiliar para o movimento, encapsidação e transmissão pelo inseto vetor (Bemisia tabaci). Recentemente, o Euphorbia yellow mosaic alphasatellite (EuYMA) foi encontrado em associação com o begomovírus Euphorbia yellow mosaic virus (EuYMV), infectando plantas de Euphorbia heterophylla no Brasil. Compreender a dinâmica da interação entre begomovírus e DNAs satélite em plantas não cultivadas, tais como E. heterophylla, é importante porque eles podem ser transferidos para plantas cultivadas, dado o hábito polífago de B. tabaci. Este estudo teve como objetivos: (i) analisar as diferenças fenotípicas da infecção pelo EuYMV na presença e na ausência do EuYMA; (ii) avaliar se a proteína alfa-Rep do EuYMA possui atividade supressora de silenciamento de RNA; (iii) comparar a transmissão do EuYMV por B. tabaci MEAM1, na ausência e na presença do EuYMA. Foram coletadas amostras (n=165) de E. heterophylla em diversos estados do Brasil. Clones infecciosos foram gerados para realizar-se a caracterização biológica e inoculação das plantas. EuYMV foi detectado em 126 amostras e EuYMA foi detectado em apenas seis amostras. Isoladamente, o EuYMV causa clorose internerval e mosaico amarelo. Em associação com o EuYMA, os sintomas são mais severos, caracterizados por mosaico amarelo muito mais intenso, encarquilhamento foliar e redução do crescimento. O DNA-A do EuYMV pode infectar E. heterophylla na ausência do DNA-B, provocando ou não um mosaico amarelo atenuado. A sequência codificadora completa do gene alfa-Rep do EuYMA foi clonada em vetor binário e transformada em células de Agrobacterium tumefaciens. Um ensaio de supressão de silenciamento de RNA foi realizado com esta construção em plantas de Nicotiana benthamiana. Os resultados indicam que a proteína alfa-Rep do EuYMA não atua como supressora de silenciamento de RNA. Foi realizado um ensaio de transmissão do EuYMV por B. tabaci, na presença e ausência de EuYMA, em duas repetições biológicas. Vinte plantas foram utilizadas para cada tratamento. Isoladamente, o EuYMV foi transmitido para 17 e 18 plantas na primeira e segunda repetição, respectivamente. Em associação com EuYMA, o vírus foi transmitido para 15 e 14 plantas na primeira e segunda repetição, respectivamente, uma diferença estatisticamente significativa. Assim, os resultados indicam que o EuYMA afeta negativamente a transmissão do EuYMV pelo vetor, consequentemente afetando a disseminação do vírus no campo. / The majority of Old World monopartite begomoviruses (family Geminiviridae) are associated with satellite DNAs, classified as alpha- and betasatellites. Alphasatellites are capable of autonomous replication, but depend on the helper virus for movement, encapsidation and transmission by the insect vector (Bemisia tabaci). Recently, Euphorbia yellow mosaic alphasattelite (EuYMA) was found in association with Euphorbia yellow mosaic virus (EuYMV), infecting Euphorbia heterophylla plants in Brazil. Understanding the dynamics of the interaction between begomoviruses and satellite DNAs in non-cultivated plants, such as E. heterophylla, is important as they can be transferred to cultivated plants, given the polyphagous habit of B. tabaci. The objectives of this study were: (i) to analyze phenotypic differences of EuYMV infection in the presence and absence of EuYMA; (ii) to evaluate whether the alpha-Rep protein of EuYMA possesses RNA silencing suppressor activity; (iii) to compare the transmission of EuYMV by B. tabaci MEAM1 in the absence and presence of EuYMA. Samples (n=165) of E. heterophylla were collected in several states of Brazil. Infectious clones were generated to perform the biological characterization and inoculation. EuYMV was detected in 126 samples and EuYMA was detected only in six samples,. Alone, EuYMV causes interveinal chlorosis and yellow mosaic. In combination with EuYMA, the symptoms are more severe, characterized by a more intense yellow mosaic, leaf shriveling and stunting. The DNA-A of EuYMV can infect E. heterophylla in the absence of the DNA-B, causing attenuated yellow mosaic or no symptoms at all. The complete coding sequence of the alpha-Rep gene of EuYMA was cloned in a binary vector and transformed in Agrobacterium tumefaciens. An RNA silencing supression assay was performed with this construct in Nicotiana benthamiana plants. The results indicate that the alpha-Rep protein of EuYMA does not act as an RNA silencing suppressor. A transmission assay of EuYMV by B. tabaci, in the presence and absence of EuYMA, was performed in two biological replications. Twenty plants were used for each treatment. Alone, EuYMV was transmitted to 17 and 18 plants, in the first and second replication respectively. In association with EuYMA, the virus was transmitted to 15 and 14 plants, in the first and second replication respectively, a difference which was statistically significant. Thus, our results indicate that EuYMA negatively affects the transmission of EuYMV by the vector, consequently affecting the spread of the virus in the field.
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Hidrolases da parede celular em sementes de Euphorbia heterophylla L. durante a germinação e desenvolvimento inicial da plântula. / Cell wall hydrolases in the seeds of Euphorbia heterophylla L. during germination and early seedling development.

Cecilia Nahomi Kawagoe Suda 11 December 2001 (has links)
Na maioria das sementes a emergência da radícula caracteriza o término da germinação e marca o início do desenvolvimento da plântula. A atividade das hidrolases da parede celular durante a pré-emergência pode estar associada ao amolecimento do tecido que circunda o embrião, principalmente na região micropilar, onde ocorre a protrusão da radícula. A atividade dessas enzimas após a emergência é associada à degradação de reservas polissacarídicas da parede celular, mobilizadas para suprir a plântula de açúcares antes que se torne autotrófica. No presente trabalho foram investigadas várias hidrolases da parede celular no endosperma de Euphorbia heterophylla durante a germinação e o desenvolvimento inicial pós-germinativo da plântula. Foi também realizada a purificação parcial de endo-b-1,4-glucanases da semente dessa espécie. As atividades da xiloglucano endotransglicosilase (XET), endo-b-mananase e b-manosidase são maiores no período de pré-emergência da semente de E. heterophylla, comparando-se com o período de pós-emergência. Por outro lado, as atividades da b-galactosidase, b-glucosidase, a-xilosidase, b-xilosidase e das glucanases que hidrolisam CMC, xiloglucanos de Hymenaea courbaril ou de Copaifera langsdorffii, xilano, Avicel e liquenano são elevadas no período de pós-emergência. A atividade sobre a laminarina ocorre durante ambos os períodos, de pré- e pós-emergência da radícula. A atividade da poligalacturonase não foi detectada nessa semente. Os resultados sugerem que XET, endo-b-mananase e b-manosidase podem estar envolvidas no processo de germinação, enquanto que as demais enzimas podem estar relacionadas ao processo de mobilização de reservas da semente. Em E. heterophylla o embrião está encerrado num endosperma rico em lipídios e proteínas, cujos produtos da degradação são absorvidos pelos cotilédones que iniciam a expansão 24 horas após o início da embebição. É possível que a hidrólise da parede celular do endosperma diminua a resistência contra a expansão em área do cotilédone facilitando, ao mesmo tempo, a rápida difusão dos produtos da degradação para os cotilédones. A purificação parcial das endoglucanases foi realizada utilizando-se colunas de Sephacryl S-100-HR numa primeira etapa, resultando em 2 grupos com atividade sobre CMC denominados I e II. Em uma segunda etapa, as endoglucanases do grupo I foram sequencialmente purificadas em coluna DEAE-Sephadex e de CF11-Celulose (afinidade). Através da focalização isoelétrica em gel de poliacrilamida e técnicas de sobreposição em gel de ágar para a determinação de atividade, foram detectadas endoglucanases de pIs de aproximadamente 3,0, 3,3, 3,8, 4,4, 4,9, 5,4 e 5,7 e um outro grupo de enzimas cujos pIs variam entre 8,5 e 10,0. As enzimas de pIs 3,0, 3,3 e 3,8 hidrolisam CMC e xiloglucano de C. langsdorffii; as de pIs entre 8,5 e 10,0 hidrolisam CMC e o xiloglucano de H. courbaril, mas não hidrolisam o de C. langsdorffii; as enzimas de pIs 4,4, 4,9 e 5,7 hidrolisam somente CMC; a de pI 5,4 hidrolisa somente xiloglucano de H. courbaril. As endoglucanases do grupo II foram purificadas em coluna de CM-celulose, tendo sido detectada uma enzima de pI 3,2 que degrada CMC bem como xiloglucano de C. langsdorffii e de H. courbaril. Foi também detectada uma xiloglucanase de pI 4,2 que hidrolisa somente xiloglucano de H. courbaril e um grupo de isozimas cujos pIs variam entre 8,5 e 10,0, que hidrolisa somente CMC. As xiloglucanases têm sido investigadas em sementes cujo xiloglucano é armazenado no cotilédone. O presente trabalho é o primeiro a relatar a ocorrência de xiloglucanases em uma semente endospérmica. / In most seeds radicle protrusion characterizes the termination of germination and the beginning of seedling development. The activity of cell wall hydrolases during the pre-emergence stage may be related to the softening of the tissue which involves the embryo, notably in the micropylar region where the radicle protrusion occurs. The activity of these enzymes following radicle emergence is related to the reserve degradation which may be cell wall polysaccharides mobilized to supply the seedling with sugars before it becomes autotrophic. In the present work it was investigated several cell wall hydrolases from the endosperm of Euphorbia heterophylla during germination and initial seedling development of this species. A partial purification of endo-b-1,4-glucanase was also performed. The activities of xyloglucan endotransglycosylase (XET), endo-b-mannanase and b-manosidase in E. heterophylla seeds are higher over the pre-emergence when compared to the post-emergence period. On the other hand the activities of b-galactosidase, b-glucosidase, a-xylosidase, b-xylosidase and glucanases which hydrolise CMC, xyloglucans from Hymenaea courbaril and Copaifera langsdorffii, xylan, Avicel and liquenan are higher over the post-emergence period. Activity on laminarin occurs over both periods. Polygalacturonase activity has not been detected in this seed. These results suggest that XET, endo-b-mannanase and b-manosidase may be involved in the process of germination whereas the other enzymes may be more related to reserve mobilization. In E. heterophylla the endosperm contains high contents of lipids and proteins and the degradation products of these reserves are absorbed by the cotyledons which expansion begins 24 hours since the start of imbibition. Probably endosperm cell wall hydrolysis facilitates cotyledon expansion by lowering endosperm resistance and at the same time the diffusion of degradation products into cotyledons. Partial purification of endoglucanases was carried out on Sephacryl S-100-HR as a first step resulting 2 active fractions (I and II) on CMC. Fraction I was further purified on DEAE-Sephadex and CF11-Cellulose (affinity) columns. Polyacrylamide gel isoelectric focusing followed by gel-overlay assay technique indicated several endoglucanases with pIs around 3.0, 3.3, 3.8, 4.4, 4.9, 5.4 and 5.7 and another group between 8.5 and 10.0. The pI 3.0, 3.3 and 3.8 enzymes hydrolyse both CMC and xyloglucan from Copaifera langsdorffii; the group between 8.5 and 10.0 hydrolyse both CMC and xyloglucan from Hymenaea courbaril but not from C. langsdorffii; pIs 4.4, 4.9 and 5.7 enzymes hydrolyse only CMC; pI 5.4 enzyme hydrolyse only xyloglucan from H. courbaril. Fraction II was further purified on CM-celullose column. It was detected a pI 3.2 endoglucanase which degrades CMC and xyloglucan from both C. langsdorfii and H. courbaril, a pI 4.2 xyloglucanase which hydrolyses only xyloglucan from H. courbaril, and a group of isozymes (pI 8.5 to 10.0) which hydrolyses only CMC. Xyloglucanases have been investigated only in seeds that have stored xyloglucan in the cotyledon. The present work is the first one to report the occurrence of xyloglucanases in an endospermic seed.

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