LEAL, Luzia Kalyne Almeida Moreira. Contribuição para a validação do uso medicinal de Amburana cearencis (CUMARU) : estudo farmacológico com o isocampferídeo e o ambrosídio. 2006. 179 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2006. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-06-14T12:39:54Z No. of bitstreams: 1 2006_tese_lkamleal.pdf: 2086498 bytes, checksum: 3d9452dbe6772eba7ab78b8230111953 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-06-14T12:53:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_tese_lkamleal.pdf: 2086498 bytes, checksum: 3d9452dbe6772eba7ab78b8230111953 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-06-14T12:53:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_tese_lkamleal.pdf: 2086498 bytes, checksum: 3d9452dbe6772eba7ab78b8230111953 (MD5) Previous issue date: 2006 / Amburana cearensis (Fabaceae) é uma árvore da caatinga nordestina, mais conhecida popularmente como cumaru. Suas cascas (caule) possuem um cheiro característico pela presença de cumarina, e são principalmente utilizadas no tratamento da bronquite, tosse e asma. O presente estudo procurou investigar os efeitos tóxicos e as atividades antiinflamatória, antioxidante e relaxante muscular do isocampferídio (ICPF, 3-metilflavonol) e/ou do amburosídio A (AMB, glucosídio fenólico) isolados das cascas do caule de A. cearensis. A administração intraperitoneal (i.p.) do ICPF ou do AMB em dose única (50 – 200 mg/kg) mostrou baixa toxicidade em camundongos. Na cultura primária de hepatócitos apenas o ICPF (100 µg/ml) reduziu significativamente a viabilidade celular, determinada pelo teste do MTT. O ICPF e o AMB (12,5 – 50 mg/kg, i.p.) apresentaram atividade antiinflamatória, observada inicialmente pela inibição do edema de pata induzido por carragenina-Cg, prostaglandina E2, dextrano-Dx, histamina ou serotonina e pela redução em 39 e 50% respectivamente do infiltrado de neutrófilos verificada pela análise histopatológica/morfométrica do edema induzido por Cg. O aumento da permeabilidade vascular induzido pelo Dx em camundongos, foi também significativamente inibido pelo ICPF ou AMB. O pré-tratamento (oral ou i.p.) dos animais com ICPF ou AMB (25 e 50mg/kg) causaram reduções tanto na migração de leucócitos quanto neutrófilos induzida por Cg ou fMLP no peritônio de camundongos. O ICPF e o AMB preveniram parcialmente a degranulação de neutrófilos humano induzida pelo fMLP, determinada pela redução das atividades das enzimas mieloperoxidase e elastase em até 66 e 52% respectivamente. Os compostos fenólicos em estudo não foram citotóxicos para neutrófilos (teste do MTT). O AMB mostrou uma ação hepatoprotetora/antioxidante no modelo de hepatotoxicidade induzida pelo CCl4 em ratos, determinada pelas enzimas hepáticas (ALT e AST) e pela catalase, além de TBARS, glutationa reduzida e análise histopatológica. Na traquéia isolada de cobaia o ICPF (10 – 1000 µM) e o AMB (10 – 3000 µM) relaxaram de maneira concentração-dependente o músculo pré-contraído pelo CCh ou KCl. A remoção do epitélio traqueal favoreceu o efeito relaxante do ICPF, mas não modificou o efeito do AMB. O relaxamento induzido pelo ICPF foi inibido em 41% pelo L-NAME; 31 e 50% pelo ODQ (3 e 33 µM); 31 % pelo propranolol e 37 % pela capsaicina. Na traquéia pré-contraida pelo KCl (40 mM) a glibenclamida (GLB) ou iberiotoxina reduziram o efeito relaxante do ICPF, enquanto no músculo pré-contraído pelo KCL 120mM o efeito do ICPF foi reduzido e não foi afetado pela GLB. Portanto, os resultados apresentados mostram que o ICPF e o AMB possuem atividades antiinflamatória, relaxante muscular e antioxidante, o que justifica pelo menos em parte o uso tradicional de A. cearensis no tratamento de doenças respiratórias onde as características fisiopatológicas incluem inflamação, estresse oxidativo e broncoconstrição. / Amburana cearensis is a medicinal plant from Northeast Brazil popularly known as “cumaru”. Its stem bark has an odor characteristic of the presence of coumarin, being used in alternative medicine for the treatment of bronchitis and asthma. The present study investigated the toxicity, as well as the anti-inflammatory, antioxidant and smooth muscle relaxant activities of isokaempferide (IKPF, 3-metylflavonol) and amburoside A (AMB, phenolic glucoside), bioactive constituents of the plant. The intraperitoneal administration (ip) of IKPF or AMB, in single doses (50-200 mg/kg), showed low toxicity in mice. In primary hepatocyte cultures, only IKPF (100 ug/ml) reduced significantly the cellular viability, as assessed by the MTT test. ICPF and AMB (12.5- 50 mg/kg, ip) presented anti-inflammatory activities, observed initially by inhibitions of the carrageenan (Cg), prostraglandin E2 (PGE2), dextran (Dx), histamine or serotonin-induced paw edemas. Besides, IKPF and AMB (12.5 – 50 mg/kg) produced 39 and 50% reductions, respectively, of neutrophil migration as assessed by histopathological/morphometric analyses of the Cg-induced paw edema. The increase of vascular permeability induced by Dx in mice was also significantly inhibited by IKPF or AMB. Mice pretreatments (oral or ip) with IKPF or AMB (25 and 50 mg/kg) reduced peritoneal Cg or fMLP-induced leucocytes and neutrophil migrations. Also, IKPF and AMB partially prevented fMlP-induced neutrophil degranulation in human blood, as determined by the decrease in 66 and 52% of activities of the enzymes myeloperoxidase and elastase, respectively. The two compounds were not cytotoxic for neutrophil, as assessed by the MTT test. AMB showed hepatoprotective and antioxidant actions in the model of CCl4-induced liver toxicity in rats, as determined by the liver enzymes activity (AST and ALT), catalase, lipoperoxidation (TBARS assay), reduced glutathione, and histological analysis. In the isolated guinea pig trachea, IKPF (10-1000 µg/ml) and AMB (10- 3000 µg/ml) produced a concentration-dependent relaxation of the muscle precontracted by carbacol or KCl. The epithelium removal improved IKPF-induced relaxation, but did not alter the AMB effect. IKPF-induced relaxation was inhibited in 41% by L-NAME; 31 and 50% by ODQ (3 and 33 uM); 31% by propranolol and 37% by capsaicin. In the trachea pre-contracted by KCl (40 mM), the pre-incubation with glibenclamide or iberiotoxin, inhibited the IKPF-induced relaxation by 39% and 38%, respectively. On the other hand, 4-aminopyridine did not significantly influence the effect of IKPF. However, in the muscle pre-contracted with 120mM KCl the relaxant effect of IKPF was significantly reduced and not affected by glibenclamide. In conclusion, results showed that IKPF and AMB present anti-inflammatory, muscular relaxant and/or antioxidant activities, justifying the traditional use of Amburana cearensis in the treatment of respiratory tract diseases that present inflammation, oxidative stress, and bronchoconstriction as pathophysiological characteristics.

PONTES, A. G. O. Estudo farmacognóstico das raízes de ipeca-da-praia (Pombalia calceolaria (L.) Paula-Souza): aspectos botânicos, químicos e farmacológicos. 2015. 94 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-04-25T12:26:47Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_agopontes.pdf: 2975261 bytes, checksum: 0843937174f8031307e673ab5f72a3f0 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-04-25T12:26:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_agopontes.pdf: 2975261 bytes, checksum: 0843937174f8031307e673ab5f72a3f0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-25T12:26:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_agopontes.pdf: 2975261 bytes, checksum: 0843937174f8031307e673ab5f72a3f0 (MD5) Previous issue date: 2015-12-14 / Pombalia calceolaria L., Violaceae, popularly known as ipecac-the-beach, ipecabranca, ipecacunha of healers is a perennial, herbaceous predominant in the northeastern backlands. Although there are no data in the literature proving their pharmacological activity, for decades, its roots are prepared in the form of decoction, licker and maceration, the main indications are popular cough, expectoration, as anthelmintic, antidiarrheal and dentition. This study aimed to carry out the Pharmacognostic characterization of P. roots calceolaria the botanical, chemical and pharmacological aspects. The importance of morphoanatomical is the fact that there is no record in the literature describing the botanical profile of this plant species. Thus, the roots of P. recémcoletadas calceolaria were characterized morphologically with the naked eye and then held the anatomical characterization by histological section, immunohistochemical reaction photomicrographic record in clear light field, where it was shown that the root study presents the secondary xylem originating exchange with dimorphism in the size of vessels and phloem consists of few layers surrounding the xylem. In cortical parenchyma was visualized and fotomicrografado under polarized light, RESENCE inulin crystals. The phytochemical study was preceded by preliminary tests to establish the plant drug, where the quality specifications were obtained, as the determination of yield from plant drugs, residual moisture, the content of total ash, followed by phytochemical screening has resulted mainly in presence of saponins, reducing sugars and steroids. Then, the aqueous extract obtained from the decoction was divided into two samples where one was lyophilized and through the other, was obtained by precipitation in the presence of methanol, a polysaccharide with a content of 13.0% w / w, and this subjected to analysis by chromatographic techniques such as HPLC and GPC, which indicated the presence of fructose and glucose, and the molecular weight of 4.0 x 10³ Da, respectively. Subsequently, after obtaining uni- and two-dimensional NMR spectra of ¹H, ¹³C, DEPT, HSQC and 135, the chemical structure of the polysaccharide was identified as inulin. The pharmacological tests were performed on isolated rat trachea with both the polysaccharide and with the lyophilized aqueous extract of the roots of P. calceolaria (EALPC) to measure the relaxant activity on the contractility of the body. After addition of CCh 1μM to induce sustained contraction in isolated organ in vats system in test with polysaccharide there was no significant relaxation in the sustained contraction. Testing conducted EALPC was observed relaxation of contraction, which showed an effective reduction of the contractile response of EALPC of approximately 20% compared to control, featuring a mild bronchodilator activity. / Pombalia calceolaria L., Violaceae, popularmente conhecida por ipeca-da-praia, ipecabranca, ipecacunha dos raizeiros é uma herbácea perene, predominante no sertão nordestino. Embora não existam dados na literatura comprovando sua atividade farmacológica, por décadas, suas raízes são preparadas na forma de decocto, lambedor e maceração, cujas principais indicações populares são para tosse, expectoração, como vermífugo, antidiarréico e para dentição. O presente estudo teve por objetivo realizar a caracterização farmacognóstica das raízes de P. calceolaria nos aspectos botânicos, químicos e farmacológicos. A importância da caracterização morfoanatômica está no fato de que não há registro em literatura descrevendo o perfil botânico desta espécie vegetal. Assim, as raízes recémcoletadas de P. calceolaria foram caracterizadas morfologicamente com vista desarmada e em seguida realizada a caracterização anatômica através de secção histológica, reação histoquímica, registro fotomicrográfico em campo de luz claro, onde foi evidenciado que a raiz em estudo apresenta o xilema secundário oriundo do câmbio com dimorfismo no tamanho dos vasos e floema secundário constituído de poucas camadas circundando o xilema. No parênquima cortical foi visualizado e fotomicrografado, sob luz polarizada, a resença de cristais de inulina. O estudo fitoquímico foi precedido por ensaios preliminares para a obtenção da droga vegetal, onde foram obtidos as especificações de qualidade, como a determinação do rendimento da droga vegetal, da umidade residual, do teor de cinzas totais, seguida da prospecção fitoquímica que resultou majoritariamente em presença de saponinas, açúcares redutores e esteróides. Em seguida, o extrato aquoso obtido por decocção foi dividido em duas amostras, onde uma foi liofilizada e por meio da outra, foi obtido por precipitação na presença de metanol, um polissacarídeo, com teor de 13,0% p/p, sendo este submetido a análises por técnicas cromatográficas como CLAE e GPC, as quais indicaram a presença de frutose e glicose, e o peso molecular de 4,0 x 10³ Da, respectivamente. Posteriormente, após a obtenção de espectros uni- e bidimensionais de RMN de ¹H, ¹³C, DEPT-135 e HSQC, a estrutura química do polissacarídeo foi identificada como sendo inulina. Os testes farmacológicos foram realizados em traqueia isolada de rato tanto com o polissacarídeo quanto com o extrato aquoso liofilizado das raízes de P. calceolaria (EALPC) para avaliar a atividade miorrelaxante sobre a contratilidade do órgão. Após adição de CCh 1µM, para induzir contração sustentada no órgão isolado no sistema de cubas, em ensaio com o polissacarídeo houve ausência de relaxamento significativo na contração sustentada. No teste realizado com EALPC foi observado relaxamento da contração, o qual apresentou uma redução efetiva da resposta contrátil do EALPC de aproximadamente 20% em relação ao controle, caracterizando uma leve atividade broncodilatadora.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2014-11-18T18:04:29Z No. of bitstreams: 1 2014_CamilaMirandaMoura.pdf: 3899556 bytes, checksum: 84a9fb39e5724c74288152f91a7500df (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2014-11-19T10:06:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_CamilaMirandaMoura.pdf: 3899556 bytes, checksum: 84a9fb39e5724c74288152f91a7500df (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-19T10:06:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_CamilaMirandaMoura.pdf: 3899556 bytes, checksum: 84a9fb39e5724c74288152f91a7500df (MD5) / As infecções fúngicas são agravos persistentes à saúde pública. O atual quadro das micoses revela o aumento de sua incidência mundial e o surgimento de espécies com resistência intrínseca a antifúngicos disponíveis. Diante disso, a comunidade científica tem se empenhado na busca de alternativas terapêuticas. Os produtos naturais têm sido intensamente investigados quanto à atividade biológica. No Brasil, o bioma Cerrado se destaca pela rica diversidade química, sendo fonte promissora para o isolamento de metabólitos secundários ativos. Assim, este trabalho avaliou a atividade de extratos e substâncias da espécie do Cerrado, Astronium fraxinifolium Schott (Anacardiaceae), em leveduras, dermatófitos e células tumorais. Em uma triagem de atividade de extratos dos órgãos de A. fraxinifolium em diferentes polaridades, o extrato acetato de etila da casca da raiz foi o mais ativo, apresentando amplo espectro de ação em todos os fungos testados com valores de CIM de 0,24 a 125 ?g/mL. A partir desse extrato foram isolados dois triterpenos do tipo cicloartano: 3-?-cicloartenol (1) e 3-?-cicloeucalenol (2). Com interesse em contribuir para a quimiotaxonomia de Anacardiaceae, o extrato acetato de etila das folhas também foi submetido ao fracionamento cromatográfico devido ao seu perfil químico e ao interesse na fitoquímica da espécie. Desse extrato foram identificados uma cetona esteroidal - tremulona (3) - e dois triterpenos pentacíclicos - ?-amirina (4) e lupeol (5). Os compostos 1 e 2 apresentaram efeito citotóxico em células leucêmicas da linhagem HL-60 com valores de CI50 de 10,8 ?g/mL e 9,2 ?g/mL, respectivamente. __________________________________________________________________________ ABSTRACT / Fungal infections are persistent public health issues. The current picture of mycoses reveals an increase in their global incidence and an arise of species with intrinsic resistance to available antifungal agents. Seeing that, the scientific community has been searching for therapeutic alternatives. The natural products have been thoroughly investigated for their biological activity. In Brazil, the Cerrado biome stands out for its rich chemical diversity, being a promising source for the isolation of active secondary metabolites. Therefore, the present work evaluated the activity of extracts and substances from the Cerrado’s species, Astronium fraxinifolium Schott (Anacardiaceae), in yeasts, dermatophytes and tumoral cells. In a triage of activity from A. fraxinifolium organs’ extracts in different polarities, the ethyl acetate extract from the root’s bark was the most active, presenting broad-spectrum action in all the fungi tested with MIC values from 0.24 to 125 μg/ml. From this extract two cycloartane-type triterpenes were isolated: 3-β-cycloartenol (1) and 3-β-cycloeucalenol (2). In order to contribute to the chemotaxonomy of Anacardiaceae, the ethyl acetate extract from the leaves was also submitted to chromatographic fractionation due to its chemical profile and to the interest in the species’ phytochemistry. From this extract were identified a steroidal ketone – tremulone (3) – and two pentacyclic triterpenes – β-amyrin (4) and lupeol (5). The compounds 1 and 2 showed cytotoxic effect on leukemic cells line HL-60 with IC50 values of 10.8 μg/ml and 9.2 μg/ml, respectively.

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / La murtilla es un arbusto autóctono que crece en el centro y sur de Chile. Se caracteriza por producir frutos globosos y pequeños con agradable aroma y sabor, atributo que los ha transformado en una fuente de comercio y exportación. Sus hojas han sido utilizadas por la medicina tradicional por sus propiedades antiinflamatorias y analgésicas, actividades que han sido confirmadas por investigaciones realizadas en nuestro laboratorio. Asimismo, estudios han determinado en los extractos de sus hojas, actividades antioxidante y antimicrobiana, asociadas a la presencia de compuestos fenólicos. Entre los compuestos fenólicos presentes en murtilla, los taninos, derivados de ácido gálico, ácido elágico y catequina, generaron interés por su variedad de propiedades que presentan, entre las que destacan antiinflamatorias, antioxidantes, antivirales, antimicrobianas, entre otras. Además de ser metabolitos secundarios cuya cuantificación en diez genotipos de murtilla no se había determinado en estudios previos en nuestro laboratorio. Existen varios factores que pueden determinar la composición química presente en la murtilla, entre los que se encuentra el genotipo. Debido a esta influencia, se determinó en forma comparativa el contenido de taninos de extractos etanólicos de hojas de diez genotipos de Ugni molinae Turcz, cultivadas bajo las mismas condiciones edafoclimáticas y manejo agronómico. Por otra parte, por sus propiedades antiinflamatorias in vivo, determinadas en estudios previos en murtilla. Se evaluó si los extractos tenían además efecto sobre la disminución de la infiltración celular a diferentes dosis. Se seleccionaron y evaluaron dos extractos: uno de acetato de etilo (genotipo 19-1) y otro etanólico (genotipo 31-1). Los resultados obtenidos mostraron diferencias significativas (p < 0,05), respecto al contenido de taninos entre los diez genotipos estudiados, el genotipo ZF-18 es el que presentó mayor cantidad con 201,0 ± 1,6 EAT (mg/g ES). En el ensayo de disminución del infiltrado celular, el mayor efecto se obtuvo en el extracto etanólico 31-1, a una dosis de 100 mg/kg con un 38,7%. Los resultados obtenidos en esta investigación aportaron información relevante respecto a la influencia del genotipo en relación al contenido de taninos. Así como también a que los extractos a diferentes dosis, se encuentran influyendo en la disminución de las células que llegan a la zona de inflamación / Murtilla is a native shrub that grows in central and southern Chile. It is characterized by produce small and globose fruits with pleasant aroma and flavor, attribute that has become a source of trade and export. Its leaves have been used by traditional medicine for its anti-inflammatory and analgesic properties, activities that have been confirmed by investigations in our laboratory. Also, studies have determined their antioxidant and antimicrobial activity, which have been associated with the presence of phenolic compounds. Among the phenolic compounds present in murtilla, tannins, derivatives of gallic acid, ellagic acid and catechin, generated interest for its variety of properties presented, among which we highlight anti-inflammatory, antioxidant, antiviral, and antimicrobial, among others. Besides being secondary metabolites which quantification in ten genotypes of murtilla there was been determined in previous studies in our laboratory. Several factors can determine the chemical composition present in the murtilla, including the genotype. Based on this, the tannin content was determined comparatively between the ethanolic extracts of Ugni molinae Turcz leaves from ten genotypes, grown under the same soil and climate conditions and agronomic management. Moreover, for its anti-inflammatory properties in vivo as determined in previous studies in murtilla. It was assessed whether extracts also had influence on decreasing cell infiltration at different doses. Selecting and evaluating two extracts: one of ethyl acetate (19-1 genotype) and another ethanol (31-1 genotype). The results showed significant differences (p < 0.05), compared to tannin content among the ten genotypes studied, genotype ZF-18 is the highest estimated amount to 201.0 ± 1.6 EAT (mg /g DE). In the assay decreased cellular infiltrate, the greatest effect was obtained in ethanolic extract 31-1, at a dose of 100 mg/kg with 38.7%. The results obtained in this research provided relevant information regarding the influence of genotype in relation to the content of tannins. As well as extracts at different doses, are influencing the decrease of cells that reach the site of inflammation / FONDECYT N°1130155

Doutoramento em Ciências Farmacêuticas / PhD in Pharmaceutical Sciences

Doutoramento em Ciências Farmacêuticas / PhD in Pharmaceutical Sciences

No description available.

VASCONCELLOS, Marne Carvalho de. Estudo de toxicologia clínica e genotoxicidade do fitoterápico tamaril cápsula, em voluntários sadios. 2004. 159 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2007. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-05-07T12:54:19Z No. of bitstreams: 1 2004_dis_mcvasconcellos.pdf: 895108 bytes, checksum: 935784afbf93c26d42e05fccd89e50b4 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-05-08T16:52:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2004_dis_mcvasconcellos.pdf: 895108 bytes, checksum: 935784afbf93c26d42e05fccd89e50b4 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-08T16:52:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2004_dis_mcvasconcellos.pdf: 895108 bytes, checksum: 935784afbf93c26d42e05fccd89e50b4 (MD5) Previous issue date: 2004 / Tamaril® is a phytomedicine constituded of 5 medicinal plants well known for their laxative proprieties: Cassia fistula (soft extract), Cassia angustifolia (Senna), Coriandrum sativum L. e Glycyrrhiza glabra L. (Alcaçuz) and Tamarindus indicus L. (soft extract). Every medication to be launched on the market must succeed in a series of research steps, where clinical toxicology evaluation is an important one among them. Genotoxic assessment, which aims on the processes altering DNA integrity, is a relatively recent field in drug development and stands on the interface between toxicology and genetics. This study consisted on the evaluation of clinical safety and genotoxic potential of Tamaril® capsules in healthy volunteers. The clinical evaluation consisted of an open study with 25 healthy volunteers of both sexes (13 males and 12 females) who received a daily oral dose of two capsules Tamaril® for 28 consecutive days. The volunteers were selected for the study if considered in good health after criterious clinical, physical and laboratorial evaluations. At the end of the 28 study days, blood samples (5 mL) were collected from each volunteer for the genotoxic assessment of Tamaril® on peripheral lymphocytes through the comet assay. The mean age of the volunteers was of 30.1± 6.9 years and the body mass index was of 24.21±3.00 Kg/cm2 on the pre-study evaluation and 24.26±3.05 Kg/cm2 on the post-study. Hematological, hepatic, renal and metabolic functions, as well as sodium and potassium did not show signs of abnormality in any volunteer throughout the weeks of the study. Soften faces, abdominal pain and flatulence were the adverse events regularly observed. Through the comet assay, score 1 DNA damage was most frequently registered on peripheral lymphocytes of volunteers treated with Tamaril® (p<0.05). Clinical and genotoxic evaluation of healthy volunteers receiving Tamaril® for 28 uninterrupted days did not show signs of toxicity related to the treatment. / O Tamaril® é um fitoterápico composto de cinco plantas medicinais: Cassia fistula (extrato mole), Cassia angustifolia (Sene), Coriandrum sativum L., Glycyrrhiza glabra L. (Alcaçuz), e Tamarindus indicus L. (extrato mole); todas com conhecida ação laxativa. Todo medicamento que vai ser registrado pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa), passa por diversas etapas de pesquisa sendo uma delas a toxicologia clínica. A genotoxicidade é uma especialidade relativamente recente, e se situa na interface entre a toxicologia e a genética. Esta visa o estudo dos processos que alteram o DNA (ácido desoxirribonucléico). O objetivo desse estudo foi avaliar a segurança e o potencial genotóxico da formulação de Tamaril® cápsulas em voluntários saudáveis. O ensaio clínico consistiu de um estudo aberto com 25 voluntários de ambos os sexos, (13 homens e 12 mulheres), que receberam diariamente duas cápsulas de Tamaril® v.o. por 28 dias ininterruptos. Os voluntários foram incluídos no estudo após avaliação clínica, exames físicos e laboratoriais. Ao final de 28 dias, amostras de sangue (5mL) foram coletadas de cada voluntário, para avaliar o efeito genotóxico do Tamaril® em linfócitos periféricos humanos através do teste do cometa. A idade média dos voluntários foi de 30,1 ± 6,9 anos e o índice de massa corpórea foi de 24,21 ± 3,00 Kg/ cm2 no pré-estudo e 24,26 ± 3,05 Kg/ cm2 no pós-estudo. As funções hematológica, hepática, renal e metabólica, bem como os eletrólitos sódio e potássio foram analisados semanalmente através dos exames laboratoriais, os quais não evidenciaram sinal de toxicidade, estando todos os resultados dentro da faixa de normalidade. Fezes pastosas, dor abdominal e flatulência foram os eventos adversos mais observados. Pelo teste do cometa, foram observados danos tipo 1 (p<0,05) nos linfócitos periféricos dos voluntários tratados com Tamaril®. Os estudos de Toxicologia Clínica e genotoxicidade não evidenciaram nenhuma toxicidade nos voluntários tratados com Tamaril® por 28 dias ininterruptos 2 cápsulas por dia v.o.

Séculos de relatos históricos dedicados à reverência por distintas civilizações emergem dos últimos 25 anos de estudos científicos sobre abelhas sem ferrão, espécies nativas eusociais de habitat tropical e subtropical, em contraste com a extensão das pesquisas voltadas aos atributos comerciais de Apis mellifera. Diferenças das abelhas melíferas incluem arquiteturas de ninhos peculiares, contendo a estrutura comum em cera e resinas vegetais, reforçadas com amálgamas de pólen, sementes ou so lo para produzir o geoprópolis, que compartilha a mesma atividade prevalente de própolis contra bactérias gram- positivas, atribuível a derivados terpênicos. O trabalho teve como objetivo empregar um esquema de técnicas aplicadas ao fracionamento bioguiado, para obtenção de compostos ativos contra Staphylococcus aureus de geoprópolis da abelha sem ferrão Melipona scutellaris. Entre os extratos etanólicos de seis lotes de geoprópolis coletados, aleatoriamente, de um meliponário da Bahia durante um ano, a variedade “marrom-escura” destacou-se pelo poder antiestafilocócico com a mesma atividade apresentada por sua fração acetato de etila (C IM 62,5-31,25 µg/mL), a qual revelou 6 compostos-alvo através da bioautografia, na medida em que conservou o perfil cromatográfico por CLAE-FR-DAD durante a etapa de purificação, motivando o fracionamento do extrato por cromatografia em coluna de sílica, que levou, em vista da baixa eficiência de separação verificada para a fração F1 selecionada (C IM 1,95- 0,98 μg/mL), às sub-frações SF2 (3,90-1,95 µg/mL) e SF3 (7,81-3,90 µg/mL) por CLAE-FR-DAD semi-preparativa. Apesar da resistência ao isolamento, os perfis de fragmentação dos compostos em frações, sub-frações e extratos de geoprópolis, determinados por CLAE-FR-ESI-TQ-EMn, revelaram componentes intimamente relacionados à estrutura comum de um núcleo diterpênico ligado a um resíduo de ácido cinâmico, coerente com as varreduras espectrais no UV homólogas e ao espectro de 1H-RMN da fração F2 (7,81-3,90 µg/mL), relativamente mais purificada. Amostras de geoprópolis consistiram, ao contrário, na variabilidade dos espectros de massas, ressaltando características das abelhas nativas, ao mimetizar as Apis mellifera, quanto aos comportamentos de coleta heterogêneos relacionados às fontes de resi nas disponíveis. Ensaios antibacterianos envolvendo bioautografias e determinações da concentração inibitória/bactericida mínima (CIM/CBM) por microdiluição e revelação com resazuri na biomonitoraram as etapas do fracionamento, enquanto triagens por CIM/CBM comporam o perfil antimicrobiano do extrato “marrom-escuro” e seus derivados mais ativos contra S. aureus, em que um painel de linhagens bacterianas patogênicas padronizadas delineou espécies gram- positivas, em especial de Micrococcus, Bacillus e Staphylococcus, inclusive MRSA, como altamente susceptíveis, em detrimento das gram-negativas, demonstrando o potencial promissor de geoprópolis como repositório de produtos naturais indeléveis aos desafios precursores de fármacos na terapêutica. / Long historical records of reverence by distinct ci vilizations emerge from the last 25 years of scientific studies on stingless bees, native eusocial species inhabiting the tropical and subtropical areas of the world, over extensive documentation devoted to the globally widespread Apis mellifera. Differences from the honeybees include peculiar nest strengthened arquictetures built in beeswax and plant resi ns, amalgamated with pollen, seeds or soil material to produce geopropolis, compositionally dissociated of traditional propolis, even sharing a prevailing activity against gram-positi ve bacteria, attributable to terpenic derivatives. A bioassay-guided fractionation technique was aimed to separate active compounds against Staphylococcus aureus in geopropolis from Melipona scutellaris, concerni ng its potential biological relevance. Among the ethanolic extracts of the six lots of geopropolis ramdomly collected from a meliponary settled in the Bahia State of Brazil, during a year, the “dark-brown” variety was highlighted by the same antistaphylococcal acti vity of ethyl acetate fraction (MIC 62,5-31,25µg/mL), which unveiled at least si x target compounds from bioautography in the purification step, even because their chromatographic profiles by RP-HPLC-PDA remained equivalent to the original extract, motivating its chromatographic fractionation by Low-Pressure Silica Gel Column Chromatography, followed by preparative RP-HPLC-PDA of the poorly resolved fraction F1 (MIC 1,95 – 0,98 μg/mL), yelding sub-fractions SF2 (3,90- 1,95 µg/mL) and SF3 (7,81-3,90 µg/mL). Although escaping from the isolation purpose, the fragmentation profiles of compounds in fractions, sub-fractions and extracts, determined by RP-HPLC-ESI-TQ-MSn, allowed propositions of components closely related to the structure of a diterpenic core bonded to a cinnamic acid group, consistent with the homologous UV spectral scans, associated to the 1H-NMR spectra of fraction F2 (7,81-3,90 µg/mL), relatively the most purified one available. Differing extracts consisted, in contrast, of the variability of mass spectra, suggesting mimics of Apis mellifera heterogeneous collecting behavior in the choice for resin sources by native bees. Antibacterial assays involving bioautography and resazurin microtitre plate-based minimum inhibitory, followed by bactericidal, concentrations (MIC/MBC) methods conducted the fractionation process, whilst the screening by MIC/MBC composed the antimicrobial profile of “dark brown” extract and its most active derivatives against S. aureus, displaying a panel of standardized human pathogenic bacterial strains, recongni zed as highly susceptible gram-positive species, in particular Micrococcus, Bacillus and Staphylococcus, includi ng the selected MRSA isolate, over the gram-negative ones, demonstrating the promising potential of geopropolis as a repository of natural products candidates to the challenges of drugs development in the course of health claims. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

O objetivo do presente estudo foi determinar o efeito antioxidante e antigenotóxico de extratos de folhas de Styphnodendron adstringens (“barbatimão”). Foram obtidos o extrato aquoso (AEB), a fração aquosa (WFB) e o extrato etanólico (EEB) de folhas de barbatimão. Foram analisadas as atividades antioxidante in vitro e in vivo e o efeito dos extratos contra o agente genotóxico, ciclofosfamida (CP). O conteúdo de compostos fenólicos variou de 23,93 a 34,94%, os flavonóides de 3,63 a 5,02% e as proantocianidinas de 23,32 a 35,4 mM. Todos os extratos testados exibiram atividade antioxidante. A capacidade antioxidante total dos extratos foi de: 147,85±12,68, 124,36 ± 7,18 e 148,64 ± 8,41 mg ácido ascórbico/g extrato, para o AEB, WFB e EEB respectivamente. A atividade seqüestrante de DPPH dos extratos foi dependente da concentração e a atividade máxima foi obtida com 62 μg/mL dos extratos. Estes apresentaram capacidade similar ao ácido ascórbico e maior que o BHT para reduzir o Fe3+ e esta atividade foi também dependente da concentração. O poder redutor máximo foi obtido com 250 mg/mL dos extratos. Nos ensaios in vivo o AEB e EEB foram mais eficientes no cérebro, reduzindo a formação de TBARS, enquanto o WFB foi mais ativo no fígado, diminuindo a oxidação de proteínas. Em relação à fragmentação do DNA, foi visto que a CP induziu apoptose, confirmada pelo padrão de DNA escada. O AEB não produziu apoptose, mas também não protegeu as células contra o efeito da CP. O WFB foi antigenotóxico, pois não induziu apoptose e protegeu as células dos efeitos apoptóticos da CP. O EEB induziu necrose, evidenciada pela intensa lesão do DNA (arraste). Em conclusão, todos os extratos apresentaram atividade antioxidante e o WFB é antigenotóxico. / The aim of the present study was to determine the antioxidant and antigenotoxic effect of leaf extracts of Styphnodendron adstringens (“barbatimão”). The aqueous (AEB), water fraction (WFB) and ethanolic (EEB) extracts of leaves were obtained. We analyzed the antioxidant activity in vitro and in vivo and the effect against a genotoxic agent, cyclophosphamide (CP), of the extracts. The extracts presented high content of phenolic compounds, flavonoids and proanthocyanidins. All of the extracts tested exhibit antioxidant activity. The total antioxidant capacity of the extracts was: 147.85±12.68, 124.36 ± 7.18 and 148.64 ± 8.41 mg ascorbic acid/g extract, for AEB, WFB and EEB respectively. The free radical DPPH scavenging activity of the extracts was concentration-dependent and the maximum activity was achieved with 62 μg/mL. The extracts presented Fe3+reducing capacity similar to ascorbic acid and higher than BHT and it was also concentration-dependent. The maximum reducing power was achieved with 250 mg/mL. The AEB and EEB were most efficient in brain, reducing TBARS formation while the WFB was most active in liver, decreasing protein oxidation. As for DNA fragmentation, it can be seen that CP induced apoptosis, confirmed by the DNA ladder pattern. The AEB neither induce apoptosis nor protected cells from the effects of CP. The WFB was antigenotoxic, as it did not induce apoptosis and protected cells from the apoptotic effect of CP. The EEB induced necrosis, as seen by the intense DNA lesion (smear). In conclusion all extracts presented antioxidant activity and WFB was antigenotoxic. WFB may be useful as cancer chemopreventive and/or anticarcinogenic agent. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG