Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Medicina Tropical, 2011. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2011-10-05T15:26:53Z No. of bitstreams: 1 2011_HendaAlinedaRosaeVasconcelos.pdf: 1304515 bytes, checksum: 3f6d70cefce2d2002f2bd3259c15a92f (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-10-14T12:08:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_HendaAlinedaRosaeVasconcelos.pdf: 1304515 bytes, checksum: 3f6d70cefce2d2002f2bd3259c15a92f (MD5) / Made available in DSpace on 2011-10-14T12:08:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_HendaAlinedaRosaeVasconcelos.pdf: 1304515 bytes, checksum: 3f6d70cefce2d2002f2bd3259c15a92f (MD5) / A malária é uma doença que acomete o homem desde a pré-história, com o quadro clínico extremamente complexo e pleotrófico que varia desde formas assintomáticas até diferentes manifestações clínicas da malária grave, como a anemia e malária cerebral. As formas graves são decorrentes, provavelmente, da hiperativação do sistema imunitário, com liberação aumentada de radicais de oxigênio e nitrogênio. Diferentes aproximações têm sido tentadas para modular a hiperatividade do sistema imunitário, incluindo o uso de drogas com ação sobre o sistema imunitário, como a talidomida. A talidomida é um composto imunomodulador que age diminuindo a produção de fator de necrose tumoral. Tem sido sugerido que a associação da talidomida com drogas antiparasitárias poderia diminuir as altas taxas de mortalidade da malária, pois foi demonstrado que o uso da talidomida em camundongos CBA e BALB/c infectados com o Plasmodium berghei Anka apresentaram maior produção de óxido nítrico e peróxido de hidrogênio paralelamente ao aumento a sobrevida. O alvo deste trabalho foi verificar a influência da talidomida sobre a parasitemia e sobre a produção dos radicais livres, óxido nítrico e peróxido de hidrogênio, em modelos animais susceptíveis ou não à malária cerebral. Camundongos BALB/c, C57BL/6 e CBA foram infectados com 106 eritrócitos parasitados com P. berghei ANKA e tratados ou não com talidomida 150mg/Kg/dia, por via oral, a partir do segundo ao oitavo dia de infecção. Outros dois grupos não infectados foram tratados da mesma forma com talidomida e cloreto de sódio 0,9%, respectivamente. No oitavo dia do tratamento foi mensurada a produção do óxido nítrico através da reação de Griess, e a produção do peróxido de hidrogênio pela oxidação do vermelho de fenol na presença de peroxidase. Houve diferença na resposta de produção de óxido nítrico e peróxido de hidrogênio à infecção e ao tratamento com a talidomida nos três modelos experimentais estudados. Houve diferença de resposta também entre as duas linhagens susceptíveis à malária cerebral. Enquanto os camundongos C57BL/6 diminuíram a produção tanto do NO como do H2O2 após a infecção e o tratamento, os camundongos CBA apresentaram resposta antagônica, aumentando a produção destes radicais, enquanto que, os camundongos BALB/c tiveram uma produção mais estável de NO e H2O2. Os camundongos C57BL/6 quando infectados pelo P. berghei ANKA apresentaram os maiores níveis basais de óxido nítrico, em relação aos outros dois modelos, enquanto a menor produção foi pelos camundongos CBA. Os camundongos BALB/c mostraram uma produção basal de óxido nítrico e de peróxido de hidrogênio intermediária entre os outros dois modelos. Não houve diferença entre os três modelos animais na parasitemia feita no oitavo dia da infecção. Nossos dados sugerem que, independentemente dos camundongos CBA e C57BL/6 produzirem quantidade maior ou menor de radicais de nitrogênio e oxigênio, a resposta desequilibrada de produção destas moléculas, e não necessariamente a quantidade, esteja envolvida na evolução para forma cerebral. Não houve modificação da parasitemia em nenhum dos três modelos animais, sugerindo igualmente que outros fatores são necessários para a defesa antiparasitária, além destes dois mecanismos microbicidas. Os nossos dados contribuem para a melhor compreensão de que ocorrem respostas diferentes, tanto à infecção como ao tratamento com a talidomida, em modelos murinos infectados pelo Plasmodium berghei ANKA, dependentes da base genética do indivíduo. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Malaria is a disease that affects human beings since ancient times, it has an extremely complex and pleotropic clinical picture, ranging from asymptomatic to severe clinical manifestations, such as anemia and cerebral malaria. Severe forms are probably caused by hyperactivation of the immune system with increased releasing of oxygen and nitrogen radicals. Different approaches have been tried to modulate the hyperactivity of the immune system, including the use of drugs that act on the immune system, such as thalidomide. Thalidomide is an immunomodulatory compound that acts by decreasing the production of tumor necrosis factor. It has been suggested that the association of thalidomide with antiparasitic drugs could reduce the high mortality rates of malaria, it was shown that the use of thalidomide in mice CBA and BALB / c infected with Plasmodium berghei Anka produced more nitric oxide and hydrogen peroxide to increase survival. The aim of this study was to assess the influence of thalidomide on the parasitemia and the production of free radicals, nitric oxide and hydrogen peroxide in susceptible or non-susceptible murine models to cerebral malaria. BALB/c, C57BL/6 and CBA mice were or were not inoculated with 106 P. berghei ANKA infected-erythrocytes and treated or not with 150mg/Kg/dia thalidomide, per os, from the second to eighth day of infection. Two other non-infected groups were treated similarly with thalidomide and sodium chloride 0.9%, respectively. On the eighth day of treatment, nitric oxide production was measured by Griess reaction, and hydrogen peroxide production was assessed by the oxidation of phenol red in presence of peroxidase. Different nitric oxide and hydrogen peroxide production to infection and treatment with thalidomide among the three experimental models were observed. NO and H2O2 production were also different between the two strains susceptible to cerebral malaria. While C57BL/6 mice decreased the production of NO and H2O2 both to infection and treatment, CBA mice increased these value, whereas the BALB/c mice showed more homogeneous production of NO and H2O2. The P. berghei ANKA infected-C57BL/6 mice showed the highest basal levels production of nitric oxide. While the P. berghei ANKA infected-CBA mice had the lowest. The P. berghei ANKA infected-BALB/c mice showed an intermediate basal production of nitric oxide and hydrogen peroxide related to the two other murine models. There was no difference in parasitemia on the eighth day of infection among the three animal models. Our data suggest that regardless the level of production of nitric oxide and hydrogen peroxide production, CBA and C57BL/6 mice show cerebral involvement, suggesting that the unbalanced production of these molecules, and not necessarily the amount of it, are involved in the evolution of cerebral disease. There was no change in parasitemia in anyone of the three animal models. These facts also suggest that other factors are required for parasite defense, besides these two microbicidal mechanisms. Our data contribute to a better understaning of that the different responses that occur both to infection and treatment with thalidomide in Plasmodium berghei Anka mice infection depends on the background genetic of each individual.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2011. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2012-03-08T14:21:26Z No. of bitstreams: 1 2011_PedroGoesMesquita.pdf: 3103350 bytes, checksum: 5f80214db9abd08147986bc7114c1cf5 (MD5) / Approved for entry into archive by Leila Fernandes (leilabiblio@yahoo.com.br) on 2012-03-16T15:55:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_PedroGoesMesquita.pdf: 3103350 bytes, checksum: 5f80214db9abd08147986bc7114c1cf5 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-16T15:55:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_PedroGoesMesquita.pdf: 3103350 bytes, checksum: 5f80214db9abd08147986bc7114c1cf5 (MD5) / O diabetes mellitus é uma desordem metabólica que acomete milhões de pessoas em todo o mundo e que está associada à disfunção de vários órgãos, à diminuição da expectativa de vida, além da produção de espécies reativas de oxigênio (EROs). Tiazolidinadionas são substâncias agonistas totais de receptores ativados por proliferadores peroxissomais (PPAR ), capazes de aumentar a sensibilidade à insulina e, por isso, utilizadas no tratamento do diabetes tipo 2. Porém, estas substâncias promovem o aparecimento de efeitos adversos durante o tratamento, como aumento no risco do infarto do miocárdio, hepatopatia e ganho de peso. Por causa dos efeitos indesejados, substâncias que possam substituir a terapia com tiazolidinadionas no tratamento do diabetes têm sido buscadas. Estudos recentes mostraram que extratos das folhas da Bauhinia variegata são capazes de ativar o PPAR e, ainda, que ligantes de PPARs podem regular a produção de EROs. Fungos endofíticos, microrganismos que colonizam os tecidos das plantas de forma simbiótica, são responsáveis pela produção de produtos naturais com efeitos biológicos importantes. Alguns deles são capazes de produzir os mesmos metabólitos do seu hospedeiro. O objetivo deste trabalho foi isolar das folhas de Bauhinia variegata fungos endofíticos que pudessem ser avaliados como fonte de compostos antioxidantes e agonistas a receptores nucleares PPAR . Nove extratos de cultura dos fungos endofíticos das folhas de Bauhinia variegata foram obtidos, todos apresentaram atividade antioxidante no ensaio sequestro do radical estável 2,2-difenil-1-picril-hidrazil (DPPHo) e um desses extratos, que apresentou a menor taxa de atividade antioxidante, apresentou atividade agonista parcial ao PPAR pelo ensaio de gene repórter. Além disso, todos os extratos apresentaram altos teores de polifenóis e flavonóides nas quantificações realizadas pelos métodos Folin-Ciocalteu e cloreto de alumínio, respectivamente. Estudos posteriores devem ser realizados para melhor elucidar esta relação PPAR/EROs. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Diabetes mellitus is a metabolic disorder that affects millions of people worldwide and it is associated with multiple organ diseases, decreased life expectancy, besides the production of reactive oxygen species (ROS). Thiazolidinediones, full agonists of peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR) are able to increase insulin sensitivity and, therefore, they are used in the treatment of type 2 diabetes. However, these substances can promote the coming out of adverse effects during the treatment, such as increased risk of myocardial infarction, liver disease and weight gain. Because of the unwanted effects, substances that could replace the thiazolidinedione therapy in diabetes care have been pursued. Recent studies have shown that extracts of the Bauhinia variegata leaves are able to activate the PPAR, and also that PPARs ligands can regulate the production of ROS. Endophytic fungi, microorganisms that colonize the tissues of plants in a symbiotic form, are responsible for the production of natural products with important biological effects. Some of them are capable of producing the same metabolites produced by their host plants. The objective of this study was to isolate endophytic fungi from the Bauhinia variegata leaves that could be evaluated as a source of antioxidant compounds and agonists of PPAR. Nine extracts were produced from cultures of endophytic fungi isolated from Bauhinia variegata leaves, and all of them showed antioxidant activity in the scavenge the stable radical 2,2-diphenyl-1-picril-hydrazyl (DPPH•). Among the extracts, the one showing the lowest rate of antioxidant activity, was the only one that showed partial agonist activity to PPAR, according to reporter gene assay. In addition, all extracts produced showed high levels of polyphenols and flavonoids in the measurements carried out by the methods of Folin-Ciocalteu and aluminum chloride, respectively. Further studies should be conducted to further elucidate this relationship PPAR/ROS.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-10-16T11:25:06Z No. of bitstreams: 1 2013_ManuelaSwertsBatistaLeite.pdf: 2017082 bytes, checksum: 291d02a0409cb1eb39172518522f9905 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-10-16T12:53:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_ManuelaSwertsBatistaLeite.pdf: 2017082 bytes, checksum: 291d02a0409cb1eb39172518522f9905 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-16T12:53:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_ManuelaSwertsBatistaLeite.pdf: 2017082 bytes, checksum: 291d02a0409cb1eb39172518522f9905 (MD5) / Em eucariotos, o DNA é organizado na forma de cromatina, cuja estrutura é formada por complexos nucleoproteicos chamados nucleossomos. Na porção proteica dos nucleossomos, há uma região superficial denominada patch acídico, que é alvo de interação de diversas proteínas, tanto oriundas de agentes infecciosos quanto endógenas. O patch acídico participa do mecanismo de compactação da cromatina, processo que dita desfechos de importantes eventos celulares por restringir o acesso de fatores de transcrição e outras proteínas reguladoras ao DNA. Desequilíbrios em modificações estruturais da cromatina são cada vez mais relacionados a doenças. Os objetivos deste trabalho foram: (i) buscar condições de maior estabilidade das longas fibras de cromatina visando futuros estudos estruturais, usando agentes desidratantes (detergentes); (ii) busca por um peptídeo ideal, ligante do patch acídico. Utilizando longas fibras de cromatina reconstituídas in vitro, verificamos distintas ações de detergentes sobre as fibras. A presença de Triton X-100 possibilitou uma melhor reconstituição e formação de diferentes arranjos de nucleossomo in vitro. Além disto, o Triton X-100 mostrou-se como um desestabilizador térmico das longas fibras de cromatina. O CHAPS, por sua vez, não afetou a estabilidade das fibras reconstituídas in vitro. Concluímos que o CHAPS pode ser um bom candidato para uso em futuros estudos estruturais. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / In eukaryotic cells, DNA is organized in the form of chromatin, which is formed by nucleoprotein complexes called nucleosomes. In the surface of the protein portion of the nucleosomes, there is a region known as acidic patch, which is the site of interaction of several proteins, both derived from infectious agents as endogenous. The acidic patch also participates in the mechanism of chromatin compaction, a process that dictates important outcomes of cellular events by restricting access of transcription factors and other regulatory proteins to DNA. Unbalances in chromatin structural modifications have been increasingly linked to diseases. The objectives of this study were: (i) find conditions under which long chromatin fibers gain stability, aiming future structural studies, using dehydrating agents (detergents); (ii) search for an ideal peptide, ligand of the acidic patch. Using long chromatin fibers reconstituted in vitro, we found distinct actions of detergents on the fibers. Triton X-100 led to an improved reconstitution and formation of different nucleosome arrays in vitro. Furthermore, Triton X-100 was a thermal destabilizing agent of the long chromatin fibers. CHAPS, in turn, did not affect the stability of the reconstituted fibers in vitro. We concluded that CHAPS might be a good candidate to be used in future structural studies.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2010. / Submitted by Raquel Viana (tempestade_b@hotmail.com) on 2011-05-30T16:39:24Z No. of bitstreams: 1 2010_SohaMohamadChabrawi.pdf: 3813921 bytes, checksum: 48ac0a31655190bb175f32435ac1ab89 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2011-05-31T02:07:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_SohaMohamadChabrawi.pdf: 3813921 bytes, checksum: 48ac0a31655190bb175f32435ac1ab89 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-05-31T02:07:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_SohaMohamadChabrawi.pdf: 3813921 bytes, checksum: 48ac0a31655190bb175f32435ac1ab89 (MD5) / A dependência é um padrão desadaptado caracterizado pelo uso recorrente de substâncias psicoativas que induzem alterações comportamentais e fisiológicas, além da perda do controle de tomada da droga, gerando importantes distúrbios familiares e sociais. Por este motivo, são crescentes os estudos nesta área para melhor entender os mecanismos que subsidiam a farmacodependência e desenvolver estratégias terapêuticas para o tratamento de usuários. Neste sentido, o teste de preferênciacondicionada- por-lugar (conditioned place preference, CPP) tem sido muito utilizada em estudos pré-clínicos, mas apenas com roedores. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o desenvolvimento de um efeito de preferência condicionada por lugar induzida pela administração repetida e sistêmica de cocaína em primatas não-humanos (micos-estrela; Callithrix penicillata). Para tanto, os animais foram divididos em dois grupos: cocaína (5 mg/kg, ip) ou controle (salina, ip). Todos os sujeitos foram inicialmente submetidos a oito sessões de habituação ao aparto. Em seguida, foram realizados três ciclos compostos de três sessões de condicionamento (C1-C3, C4-C6, C7-C9) e uma de teste (T1, T2, T3). Ao final do terceiro ciclo, os micos foram submetidos a duas sessões de extinção (E1-E2) e uma nova de teste (T4), e por fim, a uma sessão de recaída (RE) e uma última de teste (T5). Todas as sessões tiveram uma duração de 20-min. Foi observado um aumento significativo no tempo de permanência no compartimento condicionado, em resposta à administração de cocaína, assim como os níveis do comportamento de scan, indicando um efeito de preferência condicionada por lugar e hipervigilância, respectivamente. A fase de extinção reverteu ambos os efeitos, sendo que a administração posterior de uma única dose de cocaína só foi capaz de re-estabelecer a hipervigilância. Estes resultados estão em consonância com estudos prévios realizados em roedores e primatas não-humanos. Contudo, novos trabalhos são necessários para melhor elucidar os aspectos metodológicos desse procedimento em primatas não-humanos, visando estabelecer possíveis estratégias para o tratamento da dependência por cocaína. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Drug addiction is a chronic relapsing disorder characterized by compulsive drug intake of psychoactive substances. Behavioral and physiological changes are induced, as well as loss of control over intake, impairing social and occupational function. As such, studies in this field have increased to better elucidate the mechanisms underlying drug addiction and develop new therapeutic strategies to treat chronic drug users. In this sense, the conditioned-place-preference (CPP) test has been widely used in preclinical studies, albeit mainly in rodents. The present study, therefore, aimed at evaluating the development of a contextual conditioning effect in nonhuman primates (marmosets; Callithrix penicillata), induced by repeated and systemic cocaine administrations. Marmosets were divided into two groups: cocaine (5 mg/kg, ip) or control (saline, ip). All subjects were initially submitted to eight habituation trials in the apparatus. Then, three sequences of three conditioning sessions (C1-C3, C4-C6, C7-C9) and one test session (T1, T2, T3) were performed. After the third sequence, marmosets underwent two extinction trials (E1-E2) and a new test session (T4). Lastly, a re-instatement (RE) and a final test trial (T5) were held. All sessions lasted 20-min. It was shown a significant increase in the time spent in the conditioned compartment and the levels of scan behavior increased significantly in response to the cocaine injections, suggestive of a contextual conditioning and hypervigilance effect, respectively. While extinction reversed both effects, a subsequent cocaine challenge only re-established hypervigilance in the marmosets. These results are consistent with previous studies in rodents and nonhuman primates. However, further studies are needed to better elucidate several methodological aspects of this procedure in nonhuman primates, to then establish new possible strategies for treating cocaine dependence.

nÃo hà / Thymol (2-isopropyl-5-methyl-phenol) an isomer of Carvacrol. Present as large colorless crystals or white crystalline powder. It is a monoterpene essential oil extracted from various herbs, and the main component of the essential oil of rosemary-pepper (Lippia sidoides), constituting approximately 48% of its composition. This paper presents the behavioral actions of thymol in animal models of anxiety, depression, seizures and sedation, such as elevated plus maze (EPM), open field, rota rod, forced swim, tail suspension, seizure induced by pentylenetetrazol and pentobarbital-induced sleep time. Thymol was administered orally in male mice at doses of 25mg/kg and 50mg / kg. The results showed that thymol at both doses studied did cause muscula relaxament activits change locomotor activity on the test rota rod nor the number of crossings in the open field test, but reducedThe grooming was reduced with the administration of thymol in the open field test. At both doses studied LCE thymol increased all parameters observed suggesting a possible anxiolytic effect. Flumazenil, an antagonist of GABA / benzodiazepine, reversed this effect. In the test of sleep time induced by pentobarbital thymol not alter the latency but increased sleep duration. Although this test is sensitive to CNS depressant agents but is not specific for compounds which would interfere with the biotransformation of pentobarbital. In the test of pentylenetetrazol-induced seizures, thymol increased latency of seizure at the dose of 50mg/kg, however was not able to change the mortality of animals. Thymol showed antidepressant effect in the forced swim test and the tail suspension. This effect was reversed by pretreatment of animals with PCPA (a serotonin synthesis inhibitor), Prazosin and Yohimbine (adrenoreceptor antagonists), SCH23390 and Sulpiride (dopamine receptor antagonists). These results suggest that thymol shows anxiolytic effects probably associated with the GABAergic system and antidepressant effects associated with the serotonergic, noradrenergic and dopaminergic without causing sedation. / O Timol (2-isopropil-5-metil-fenol) um isÃmero do Carvacrol. Apresenta-se como cristal incolor grandes ou pà cristalino branco. à um monoterpeno extraÃdo do Ãleo essencial de diversas plantas aromÃticas, sendo o componente principal do Ãleo essencial do alecrim-pimenta (Lippia sidoides), constituindo aproximadamente 48% da sua composiÃÃo. Este trabalho avaliou as aÃÃes comportamentais do timol em modelos animais de ansiedade, depressÃo, convulsÃo e sedaÃÃo, tais como labirinto em cruz elevado (LCE), campo aberto, rota rod, nado forÃado, suspensÃo da cauda, convulsÃo induzida por pentilenotetrazol e tempo de sono induzido por pentobarbital. Timol foi administrado por via oral, em camundongos machos, em doses Ãnicas de 25mg/Kg ou 50 mg/Kg. Os resultados mostraram que o timol nas duas doses estudadas, nÃo causou efeito relaxante muscular no teste do rota Rod nem alterou o nÃmero de cruzamentos no teste do campo aberto, mas reduziu o grooming. No LCE ambas as doses estudadas do timol aumentaram todos os parÃmetros observados sugerindo um possÃvel efeito ansiolÃtico. O flumazenil, um antagonista dos receptores GABAA/BenzodiazepÃnico, reverteu este efeito. No teste do tempo de sono induzido por pentobarbital o timol nÃo alterou a latÃncia, mas aumentou a duraÃÃo do sono. Entretanto este teste embora sendo sensÃvel para agentes depressores do SNC nÃo à especÃfico pois compostos que possam interferir com a biotransformaÃÃo do pentobarbital. No teste da convulsÃo induzida por pentilenotetrazol, timol aumentou a latÃncia da convulsÃo na dose de 50mg/Kg, no entanto nÃo foi capaz de alterar a latÃncia de morte e a mortalidade dos animais. Timol apresentou efeito antidepressivo no teste do nado forÃado e da suspensÃo da cauda. Este efeito foi revertido pelo prÃ-tratamento dos animais com PCPA (um inibidor da sÃntese de serotonina), Prazosina e Ioimbina (antagonistas dos receptores adrenÃrgicos), SCH23390 e Sulpirida (antagonistas dos receptores dopaminÃrgicos). Estes resultados sugerem que o timol apresenta efeitos ansiolÃticos provavelmente relacionados com o sistema GABAÃrgico e efeitos antidepressivos associados aos sistemas serotonÃrgico, noradrenÃrgico e dopaminÃrgico sem causar sedaÃÃo.

nÃo hà / A exposiÃÃo ocupacional em ambientes de curtumes tem sido objeto de estudo e de investigaÃÃes cientÃficas. As informaÃÃes controversas sobre a toxicidade do cromo III e sua relaÃÃo com a epidemiologia do curtume serviram de subsÃdio para esta pesquisa. O objetivo deste estudo foi avaliar os possÃveis efeitos genotÃxicos e mutagÃnicos da exposiÃÃo de trabalhadores de curtume de Teresina (PI) à substÃncias quÃmicas contendo cromo III atravÃs do uso de biomarcadores de danos ao DNA e aos cromossomos.Trata-se de uma investigaÃÃo transversal, observacional e quantitativa. Foram coletadas amostras de mucosa, sangue e urina de 43 trabalhadores de curtume para anÃlise de micronÃcleo em mucosa (20 trabalhadores), micronÃcleo em linfÃcitos (30 trabalhadores), cometa em mucosa (20 trabalhadores), cometa em linfÃcitos (43 trabalhadores), aberraÃÃes cromossÃmicas (30 trabalhadores) e mensuraÃÃo de cromo na urina (27 trabalhadores) . As mesmas anÃlises foram realizadas em trabalhadores nÃo expostos ao ambiente do curtume, para fins de comparaÃÃo estatÃstica. AlÃm disso, foi aplicado um questionÃrio de saÃde pessoal recomendado pela International Comission for Protection Against Environmental Mutagens and Carcinogens-ICPEMC com intuito de correlacionar suas informaÃÃes aos dados obtidos nos testes. Os resultados indicaram aumentos significativos (p<0,05) do nÃmero (8,100  3,905 vs1,200 1,609) e frequÃncia de micronÃcleo em mucosa (0,403 0,1513vs 0,060 0,04887), do nÃmero (17,73  9,44vs10,90 7,092) e frequÃncia de micronÃcleos em linfÃcitos(0,886 0,472vs 0,306 0,202), para o total (16,3 3,38 vs 0,60  0,16) e frequÃncia (8,01  1,82 vs 0,403 0,09) de aberraÃÃes cromossÃmicas(teste T Student). AlÃm disso, foi observado aumento sigficativo (ANOVA p<0,05 ) para o todas as classes de danos e frequÃncia de danos no teste de cometa em mucosa e em linfÃcitos. O cromo na urina indicou que os trabalhadores estavam com maior concentraÃÃo deste metal na urina que os nÃo expostos (p<0,05 ) ( 1,108  1,277vs 0,089  0,027). As correlaÃÃes (Pearson) entre o cromo na urina e as anÃlises genotÃxicas indicaram forte relaÃÃo positiva com a frequÃncia de aberraÃÃes cromossÃmicas (r=0,841 p= 0,018 ) e frequÃncia de micronÃcleo em linfÃcitos (r=0,730 p < 0,0001).Conclui-se que os trabalhadores de curtume apresentam riscos de toxicidade e de instabilidade genÃtica associados à exposiÃÃo ocupacional a misturas quÃmicas contendo crmo III. / Occupational exposure in tannery environments has been the subject of study and scientific research. Controversial information about the toxicity of chromium III and its relationship with the epidemiology of the tannery employees served as a subsidy for this research. The objective of this study was to evaluate the possible genotoxic and mutagenic effects of the exposure of tannery workers in Teresina (PI) to chemicals containing chromium III through the use of biomarkers of DNA and chromosomal damage. This was a cross-sectional, observational and quantitative study. Samples were taken from the mucosa, blood and urine of 43 tannery workers to analyze mucosal micronuclei (20 workers), lymphocytic micronuclei (30 workers), mucosal comet assays (20 workers), lymphocytic comet assay (43 workers) and chromosomal aberrations (30 workers); the level of urinary chromium was also measured (27 employees).The same analyses were carried out in non-exposed workers of the tannery environment for statistical comparison. In addition, personal health questionnaires were administered as recommended by the International Commission for Protection Against Environmental Mutagens and Carcinogens-ICPEMC with the aim of correlating their information with data obtained in the tests. The results indicated significant increases (p <0.05) in: the number (8.100  3.905 vs 1.200  1.609) and frequency (0.403  0.060 vs. 0.1513  0.04887) of mucosal micronuclei; the number (17.73  9.44 vs 10.90  7.092) and frequency (0.886  0.472 vs 0.306  0.202) of lymphocytic micronuclei; and the total (16.3  3.38 vs 0.60  0.16) and frequency (8.01  1.82 vs 0.403  0.09) of chromosomal aberrations (Studentâs t test). There was a significant increase (ANOVA, p <0.05) for all types of damage and frequency of damage to the mucosal and lymphocytic COMET assay. Urine chromium levels was higher in exposed workers than in non-exposed workers (p <0.05) (1.108  1.277 vs 0.089  0.027).Pearson correlations between the level of chromium in the urine and genotoxic analyses indicated a strong positive correlation with the frequency of chromosomal aberrations (r = 0.841, p = 0.018) and frequency of lymphocytic micronuclei (r = 0.730, p <0.0001). It was concluded that the tannery workers are at risk of toxicity and genetic instability associated with occupational exposure to chemical mixtures containing chromium III.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O Transtorno Afetivo Bipolar (TAB) à uma doenÃa crÃnica, altamente incapacitante e associada a custo excessivo aos sistemas de saÃde. Atualmente, reconhece-se o papel importante da Angiotensina II em transtornos de ansiedade e humor. A desregulaÃÃo do Sistema renina-angiotensina (SRA) cerebral pela ativaÃÃo de receptores da angiotensina II subtipo 1 (AT1Rs) està associada à formaÃÃo de espÃcies reativas de oxigÃnio, ativaÃÃo de vias prÃ-inflamatÃrias, reduÃÃo da neuroplasticidade e disfunÃÃo mitocondrial, estando esses eventos relacionados com a fisiopatologia do TAB. Assim, objetivou-se avaliar a aÃÃo da candesartana (CDS) em um modelo animal de mania induzido por d-anfetamina (AMPH). Utilizou-se camundongos Swiss machos (peso: 20-25g) submetidos a dois protocolos de tratamento. No protocolo de prevenÃÃo (PP), os animais receberam CDS (0,1; 0,3; 1 ou 3 mg/Kg/dia), lÃtio (47,5 mg/Kg/dia) ou veÃculo por 14 dias e entre o 8 e o 14 dia receberam AMPH (2 mg/Kg/dia i.p) ou salina. No protocolo de reversÃo (PR), administrou-se AMPH ou salina por 14 dias e entre o 8 e o 14 dia os animais foram tratados com CDS, lÃtio ou veÃculo. No 14 dia, os animais foram submetidos aos testes comportamentais, campo aberto e Y Maze. Foram realizadas anÃlises neuroquÃmicos para avaliar o estresse oxidativo (TBARS e GSH) no vÃrmis cerebelar (VC), cÃrtex prÃ-frontal (PF), hipocampo (HPC) e corpo estriado (CE). AlÃm disso, foram avaliados os nÃveis de BDNF, TNF-&#945; e fosfo-Ser9-GSK-3&#946; para as doses de 0,3 e 1 mg/Kg de CDS. Os nÃveis de fosfo-Ser9-GSK-3&#946; e BDNF foram avaliados apenas no HPC e os nÃveis de TNF-&#945; no HPC e VC. Em ambos os protocolos de tratamento, observou-se aumento da atividade locomotora nos grupos que receberam apenas AMPH, que foi prevenida e revertida pela CDS. Os resultados obtidos nos animais tratados com CDS + AMPH foram semelhantes aos do grupo controle e dos animais que receberam LÃtio + AMPH. No teste de Y maze, a CDS conseguiu prevenir e reverter o prejuÃzo cognitivo causado pela AMPH e apenas as doses de CDS 0,1 no PP e 0,3 no PR nÃo tiveram efeito, assim como o tratamento com lÃtio em ambos os protocolos. A CDS aumentou os nÃveis de GSH no HPC e VC no PP e no PF, HPC e CE no PR. Os nÃveis de TBARS foram reduzidos pela CDS no PF, HPC e VC no PP e no PF, HPC e CE no PR. Em ambos os protocolos de tratamento, a AMPH reduziu os nÃveis hipocampais de BDNF e o lÃtio e ambas as doses de CDS avaliadas restauraram os nÃveis dessa neurotrofina. No PP, a AMPH e ambas as doses de CDS reduziram o nÃvel de fosfo-Ser9-GSK-3&#946; que foi expressivamente aumentado pelo lÃtio. Os nÃveis de TNF-&#945; foram aumentados pela AMPH e reduzidos pelo lÃtio no HPC e VC. Ambas as doses de CDS avaliadas tiveram efeito na prevenÃÃo do aumento de TNF-&#945; no HPC e preveniram e reverteram esse aumento no VC. Juntos, os dados mostraram que a CDS, semelhante ao Li, à efetiva na prevenÃÃo e reversÃo de alteraÃÃes comportamentais e neuroquÃmicas induzidas pela AMPH, com exceÃÃo da fosfo-Ser9-GSK-3&#946;, sugerindo que estudos sejam desenvolvidos para avaliaÃÃo da atividade antimanÃaca desse fÃrmaco em pacientes bipolares, porÃm mais estudos prÃ-clÃnicos sÃo necessÃrios. / The Bipolar Disorder (BD) is a highly prevalent and chronic psychiatric disorder, associated with functional disability and excessive cost to the health system. The pharmacological therapy of BD displays low efficacy due the complex and poorly understood etiology, which makes it imperative to find new therapeutic targets for this disorder. The renin-angiotensin system (RAS) has been studied concerning neurological diseases, and is currently recognized important role of angiotensin II in anxiety and mood disorders. The deregulation of SRA brain is associated with the formation of reactive oxygen species, activation of proinflammatory pathways, reduced neuroplasticity and mitochondrial dysfunction. It is noteworthy that all these events are related to the pathophysiology of BD. Thus, this study aimed to evaluate the effect of candesartan (CDS) in an animal model of mania induced by d-amphetamine (AMPH). The animals were submitted to two treatment protocols. In prevention protocol, animals received CDS (0.1; 0.3; 1 or 3 mg/kg/day), lithium (47.5 mg/kg/day) or vehicle for 14 days and between the 8th and 14th day received AMPH (2 mg/kg/day ip) or saline. In reversal protocol, was administered AMPH or saline for 14 days and between the 8th and 14th day the animals were treated with CDS, lithium or vehicle. The effect of CDS was evaluated on 14th day by exploratory behavior of animals in the open field test used for pre-clinical study of antimanic drugs. The working memory was also evaluated by Y Maze test. Neurochemical analisis of oxidative stress (TBARS and GSH), was assessed in cerebellar vÃrmix (CV), prefrontal cortex (PF), hippocampus (HPC) and striatum (ST). For evaluate the levels of BDNF, TNF-&#945; e fosfo-Ser9-GSK-3&#946;,we used CDS 0,3 and CDS 1. BDNF and fosfo-Ser9-GSK-3&#946; was assessed only in HPC and TNF-&#945; in HPC and CV. In both treatment protocols, there was an increase in locomotor activity in the animals that received only AMPH, which was prevented and reversed by CDS, whose results were similar to the control group and the animals that received AMPH and lithium. In the memory test, the CDS prevented and reversed the cognitive impairment caused by AMPH and only the CDS doses of 0.1 in prevention protocol and 0.3 in reversal protocol were not successful. Lithium treatment neither prevented nor reversed the cognitive impairment. The CDS increased GSH levels in HPC and CV in the prevention protocol and in PF, HPC and ST in the reversal protocol. The TBARS levels were reduced by CDS in PF, HPC and CV in the prevention protocol and in PF, HPC and ST in the reversal protocol. However, MDA level was increased by higher dose of CDS in ST in prevention protocol and by the two lower doses of CDS in CV in reversal protocol. In both treatment protocols, AMPH reduced BDNF and lithium and both doses of CDS restored the levels of this neurotrophin. In the prevention protocol, AMPH and both doses of CDS reduced the level of phospho-Ser9-GSK-3&#946; that was significantly increased by lithium. The levels of TNF-&#945; were increased by AMPH and reduced by lithium in HPC and VC. CDS prevented the increase of TNF-&#945; in HPC and prevented and reversed this increase in CV. Our findings showed that CDS, similarly to Li, is effective in reversing and preventing AMPH-induced behavioral and neurochemical alterations, providing a rationale for evaluating CDS as a novel antimanic agent, however new pre-clinical studies are necessary.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Artrite à uma doenÃa inflamatÃria que afeta as articulaÃÃes sinoviais. Os sintomas mais comuns sÃo o aumento da sensibilidade à dor nas articulaÃÃes (hiperalgesia ou hipernocicepÃÃo) e edema. Uma alternativa para o tratamento da doenÃa à a inclusÃo de plantas medicinais. O Ãleo extraÃdo dos frutos do pequi (Caryocar coriaceum Wittm), tem ampla aplicabilidade na medicina popular. Ensaios prÃ-clÃnicos demonstraram propriedades terapÃuticas do Ãleo, tais como anti-inflamatÃria, gastroprotetora e cicatrizante. Com base neste contexto, o objetivo do presente estudo foi investigar a atividade antinociceptiva e anti-inflamatÃria do Ãleo de pequi (OPCC) na artrite induzida por zymosan em ratos. O estudo foi aprovado pela ComissÃo de Ãtica em Pesquisa Animal da Universidade Federal do Cearà (n 83/11). A artrite foi induzida por uma injeÃÃo intrarticular, no joelho direito, de zymosan (1mg/50ÂL) e foram avaliados a incapacitaÃÃo articular (hipernocicepÃÃo), edema articular, migraÃÃo de leucÃcitos, liberaÃÃo de citocinas e expressÃo de mediadores inflamatÃrios. Os animais foram prÃ-tratados, por via oral, com OPCC (100, 200 e 400mg/kg) ou veÃculo durante 7 dias consecutivos ou em dose Ãnica, 45 minutos, antes da induÃÃo de artrite. Dexametasona, indometacina ou dipirona foram utilizadas como controles positivos. A incapacitaÃÃo articular foi avaliada durante 4 horas apÃs a injeÃÃo de zymosan. Em seguida os animais foram eutanasiados, procedendo-se a lavagem da cavidade articular com EDTA em PBS para avaliaÃÃo de infiltraÃÃo de leucÃcitos, atividade de mieloperoxidase e dosagem de citocinas. O tecido sinovial foi colhido para anÃlise imunohistoquimica de TNF-&#945; e COX-2. TambÃm foram avaliados o edema (diÃmetro transversal da articulaÃÃo) e o aumento da permeabilidade vascular pelo mÃtodo de extravasamento do Azul de Evans. O efeito antinociceptivo foi avaliado ainda atravÃs do teste de hiperalgesia mecÃnica plantar (Von Frey eletrÃnico) utilizando carraginia e PGE2. Os resultados demonstraram uma diminuiÃÃo significativa (p<0,05) da incapacitaÃÃo articular de todos os grupos tratados com OPCC durante 7 dias, no entanto com a dose Ãnica apenas as doses maiores foram eficazes. Em relaÃÃo à migraÃÃo de leucÃcitos para o lÃquido sinovial todos os grupos tratados com o OPCC (dose Ãnica e doses diÃrias) apresentaram significativa reduÃÃo (p<0,05) do nÃmero de leucÃcitos no lavado articular, acompanhada de uma diminuiÃÃo (p<0,05) na atividade da mieloperoxidase. Observou-se uma diminuiÃÃo (p<0,05) da liberaÃÃo de citocinas (TNF-&#945; e IL-1&#946;) no lÃquido sinovial, assim como expressÃo de TNF&#945; e COX-2 no tecido sinovial. O edema foi inibido (p<0,05) com o tratamento com OPCC em todas as doses administradas diariamente. AlÃm disso, os grupos tratados com 100 e 400mg/kg de OPCC apresentaram uma reduÃÃo significativa (p<0,05) da permeabilidade vascular. Os resultados mostraram ainda que a OPCC reduziu significativamente (p < 0,05) a hipernocicepÃÃo induzida pela carragenina e PGE2. Os dados sugerem que o OPCC exibe efeito anti-inflamatÃrio evidenciado pelo modelo de artrite induzida por zymosan em ratos, que pode ser associada com a inibiÃÃo da produÃÃo de citocinas prÃ-inflamatÃrias (TNF-&#945; e IL-1&#946;). Aparentemente essa aÃÃo pode estar envolvida com a inibiÃÃo da migraÃÃo de neutrÃfilos. Sugerimos ainda que o OPCC previne o desenvolvimento da hipernocicepÃÃo inflamatÃria mecÃnica evocada por carragenina e PGE2 (bloqueio direto da hipernocicepÃÃo) em ratos. / Arthritis is an inflammatory disease that affects synovial joints. The most common symptoms are increased sensitivity to joint pain (hyperalgesia or hypernociception) and edema. An alternative to treating the disease is the inclusion of medicinal plants. The oil extracted from the fruits of Pequi (Caryocar coriaceum Wittm) has wide applicability in popular medicine. Pre-clinical tests have demonstrated the therapeutic properties of the oil, such as anti-inflammatory, gastroprotective and healing. Based on this background, the objective of this study was to investigate the antinociceptive and anti-inflammatory oil Pequi (OPCC) in zymosan-induced arthritis in rats. The study was approved by the Ethics Committee on Animal Research of the Federal University of Cearà (n 83/11). Arthritis was induced by intraarticular injection in right knee of zymosan (1mg/50ÂL) and evaluated the articular incapacitation (hypernociception), joint swelling, leukocyte migration, cytokine release and expression of inflammatory mediators. The animals were pretreated orally with OPCC (100, 200 e 400mg/kg) or carrier for 7 consecutive days either as a single dose 45 minutes before the induction of arthritis. Dexamethasone, indomethacin or dipyrone were used as positive controls. The articular incapacitation was assessed 4 hours after injection of zymosan. Then the animals were euthanized, proceeding to wash the joint cavity EDTA in PBS for evaluation of leukocyte infiltration, myeloperoxidase activity and cytokine. The tissue synovial fluid was harvested for immunohistochemical analysis of TNF-&#945; and COX-2. We also evaluated edema (transverse diameter of the joint) and increased vascular permeability by the method of Evans blue extravasation. The antinociceptive effect was evaluated further by testing plant mechanical hyperalgesia (von Frey electronic). The results showed a significant decrease (p <0.05) joint of disability in all groups treated with OPCC for 7 days, but with only a single dose, higher doses were effective. Compared to the migration of leukocytes into the synovial fluid all groups treated with the OPCC (single dose and daily doses) showed a significant reduction p <0.05) in the number of leukocytes in the BAL joints, accompanied by a decrease (p <0.05) in myeloperoxidase activity. There was a decrease (p <0.05) cytokine release (TNF-&#945; and IL-1&#946;) in the synovial fluid as well as expression of TNF and COX-2 in synovial tissue. The edema was inhibited (p <0.05) treatment with all doses in OPCC. Moreover, the groups treated with 100 and 400mg/kg of OPCC showed a significant reduction (p <0.05) in vascular permeability. The results also showed that the OPCC significantly reduced (p <0.05) hypernociception and PGE2 induced by carrageenan. The data suggest that the OPCC exhibits anti-inflammatory effect evidenced by arthritis model in rats induced by zymosan, which can be associated with the inhibition of the production of proinflammatory cytokines (TNF-&#945; and IL-1&#946;). Apparently this action may be involved in the inhibition of neutrophil migration. We also suggest that the OPCC hypernociception prevents the development of carragenan-evoked inflammatory mechanical and PGE2 (direct blockade of hypernociception) in rats.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Em todo o mundo, sÃo registrados mais de 3 milhÃes de acidentes envolvendo picadas de animais peÃonhentos por ano, das quais 125 a 150 mil culminam em Ãbito. No Brasil, a maioria dos casos ocorre com serpentes dos gÃneros Bothrops e Bothropoides, provocando uma grande variedade de complicaÃÃes locais e sistÃmicas, dentre os quais se destacam efeito mionecrÃtico, coagulaÃÃo intravascular disseminada, citotoxicidade, insuficiÃncia renal aguda e sepse. A serpente Bothropoides insularis à uma espÃcie nativa da Ilha de Queimada Grande, cujo veneno apresenta efeito tÃxico acentuado em diversos modelos experimentais. Entretanto, pouco à conhecido a respeito do efeito dessa peÃonha sobre cÃlulas com funÃÃo de defesa, nem o quanto esse efeito pode influenciar na toxicidade observada in vivo. O presente trabalho teve como objetivo investigar as alteraÃÃes celulares induzidas pelo veneno total da serpente Bothropoides insularis (BinsVT) sobre macrÃfagos murinos da linhagem RAW 264.7. Nesse contexto, foi realizada a determinaÃÃo da atividade proteolÃtica e da produÃÃo de perÃxido de hidrogÃnio in vitro de BinsVT atravÃs de reaÃÃes colorimÃtricas. Os resultados demonstraram alta atividade catalÃtica em ambos os testes, sugerindo que os efeitos biolÃgicos desse veneno podem estar relacionados à presenÃa de enzimas como metaloproteinases (svMPs) e L-aminoÃcido oxidases (LAAOs) em concentraÃÃes relevantes nas condiÃÃes experimentais adotadas. A determinaÃÃo do potencial citotÃxico foi realizada pelo mÃtodo de reduÃÃo do MTT, um teste de avaliaÃÃo da capacidade oxirredutora das cÃlulas, apÃs 2, 6, 12 e 24 horas de incubaÃÃo. Foi observado efeito citotÃxico em altas concentraÃÃes de forma tempo-dependente, com morte celular mais pronunciada nas concentraÃÃes de 200 e 100 Âg/mL apÃs 12 e 24 horas de tratamento. Nas menores concentraÃÃes estudadas, ocorreu um aumento gradativo da viabilidade celular, com valores percentuais em torno de 200% em relaÃÃo ao grupo controle nos grupos tratados por 24 horas. Esse resultado sugere a presenÃa de efeito proliferativo de BinsVT sobre essa linhagem celular. Em seguida, a atividade da enzima lactato desidrogenase (LDH) no sobrenadante de cultivo dos grupos experimentais foi determinado para investigaÃÃo de lise celular induzida por BinsVT. Foi verificado aumento significativo da atividade dessa enzima em todos os grupos testados, sugerindo a coexistÃncia de fraÃÃes com efeito proliferativo e citotÃxico, e a concentraÃÃo e o tempo de exposiÃÃo do veneno determinam qual irà prevalecer. Para avaliaÃÃo morfolÃgica das cÃlulas RAW 264.7 apÃs exposiÃÃo à substÃncia em estudo, os experimentos foram realizados na superfÃcie de lamÃnulas, para coloraÃÃo com May-Grunwald Giemsa. Os grupos experimentais foram analisados por microscopia Ãptica e as caracterÃsticas morfolÃgicas mais representativas foram fotomicrografadas. Foram observadas diversas alteraÃÃes morfolÃgicas, tais como aparecimento de fragmentos celulares e nÃcleos desnudos, cÃlulas vacuolizadas, reduÃÃo do volume celular e aumento de projeÃÃes citoplasmÃticas. Por fim, o mecanismo de morte celular induzida por BinsVT foi avaliado por citometria de fluxo, pela marcaÃÃo com o iodeto de propÃdio (PI) e a anexina V-FITC. A anÃlise revelou a presenÃa de envolvimento necrÃtico e apoptÃtico no efeito citotÃxico da substÃncia, alÃm do aparecimento de cÃlulas marcadas duplamente com PI e anexina-FITC, indicando a ocorrÃncia de apoptose tardia. Em conclusÃo, BinsVT apresenta efeito citotÃxico sobre macrÃfagos RAW 264.7, com aparente envolvimento de necrose e apoptose, alÃm de provÃvel efeito estimulatÃrio sobre essas cÃlulas, de forma concentraÃÃo- e tempo-dependente. Esses efeitos podem estar relacionados Ãs atividades enzimÃticas encontradas in vitro. / Around the world, there are recorded over 3 million accident involving bites of venomous animals per year, of which 125 to 150 thousand culminate in death. In Brazil, most cases occur with snakes from Bothrops and Bothropoides genus, causing several local and systemic complications, such myotoxicity, disseminated intravascular coagulation, cytotoxicity, acute renal failure and sepsis. Bothropoides insularis is a snake from Queimada Grande Island, whose venom shows pronounced toxicity. However, its effect over cells with defense function remains unclear, as well as how these effects can influence the toxicity observed in vivo. The present study aimed to investigate the cellular changes induced by Bothropoides insularis whole venom (BinsVT) over murine macrophage from RAW 264.7 lineage. In this context, colorimetric tests were performed to determine proteolytic activity and the production of hydrogen peroxide in vitro. The results showed high catalytic activity in both tests, suggesting that the biological effects of this venom may be related to the presence of enzymes such metalloproteinases (svMPs) and L-amino acid oxidases (LAAOs) at concentrations relevant in these experimental conditions. The determination of the cytotoxic potential was conducted by MTT reduction assay, a method of assessing redox metabolism, after 2, 6, 12 and 24 hours of incubation. It was observed cytotoxic effect at high concentrations in a time-dependent way, with cell death more evident at 200 and 100 Âg/mL after 12 and 24 hours of treatment. In lower concentrations, there was a gradual increase in cell viability, reaching around 200% of cell viability in groups treated for 24 hours. This result suggests that BinsVT possess proliferative effect over these cells. Then, lactate dehydrogenase (LDH) activity was determined in culture supernatants from experimental groups for investigation of cell lysis induced by BinsVT. It was observed a significant increase in enzymatic activity in all groups, suggesting the coexistence of fractions with cytotoxic and proliferative effect and that concentration and exposure time determine its outcomes. For morphological evaluation of RAW 264.7 cells after exposure to BinsVT, the experiments were performed on the surface of coverslips for staining with May-Grunwald Giemsa method. The experimental groups were analyzed by optical microscopy and the most representative morphological characteristics were photographed. Various morphological changes were observed, such as appearance of cellular debris and bare nuclei, vacuolated cells, reduced cell volume and increased cytoplasmic projections. Finally, the mechanism of cell death induced by BinsVT was assessed by flow cytometry, by staining with propidium iodide (PI) and annexin V-FITC. The analysis revealed the presence of apoptosis and necrosis, and the appearance of doubly labeled cells with Annexin-FITC and PI, indicating the occurrence of late apoptosis. In conclusion, BinsVT has a cytotoxic effect on RAW 264.7 cell, which necrotic and apoptotic mechanisms, besides stimulatory effect on these cells in dose-and time-dependent ways. These effects may be related to the enzymatic activities found in vitro.

FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / O gengibre possui em sua composiÃÃo inÃmeras substÃncias volÃteis e nÃo volÃteis. Dentre as substÃncias nÃo-volÃteis destacam-se, principalmente, os gingerols, sendo o 6-gingerol o composto mais abundante e o responsÃvel pela grande maioria das atividades farmacolÃgicas descritas, como a anti-hipertensiva. Neste trabalho, foram investigados os efeitos renais, vasculares e em cultura de cÃlulas tubulares renais do tipo MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) causados pelo 6-gingerol. Foram utilizados ratos Wistar machos pesando entre 250 e 300g, cujos rins foram isolados e perfundidos com SoluÃÃo de Krebs-Hanseleit contendo 6%p/v de albumina bovina previamente dialisada. Foram investigados os efeitos do 6-gingerol (3 &#956;M, 10 &#956;M, 30 &#956;M; n=6) sobre a PressÃo de PerfusÃo (PP), ResistÃncia Vascular Renal (RVR), Fluxo UrinÃrio (FU), Ritmo de FiltraÃÃo Glomerular (RFG), Percentual de Transporte Tubular de SÃdio (%TNa+), de PotÃssio (%TK+) e de Cloreto (%TCl-). O 6-gingerol foi adicionado apÃs 30 minutos de controle interno. As cÃlulas MDCK foram cultivadas em meio de cultura RPMI 1640 suplementado com 10% v/v de Soro Bovino Fetal e entÃo avaliadas na presenÃa do composto em diversas concentraÃÃes em dois perÃodos de incubaÃÃo, 6 (seis) e 24 (vinte e quatro) horas. ApÃs esses perÃodos, foram realizados ensaios de viabilidade celular. Foi avaliada a resposta do 6-gingerol em diversas concentraÃÃes na pressÃo arterial mÃdia de ratos wistar normotensos anestesiados. Os resultados encontrados na pressÃo arterial dos animais foi uma queda acentuada de maneira dose-dependente na pressÃo arterial destes animais. Em relaÃÃo à perfusÃo renal, o 6-gingerol mostrou-se um potente diurÃtico e com baixÃssimos danos renais tanto nos dados encontrados no perfil histolÃgico, como nos experimentos de avaliaÃÃo de viabilidade celular em cÃlulas MDCK o que està em consonÃncia com o conhecimento da medicina tradicional. Os resultados encontrados nÃo foram totalmente abolidos pelo inibidor especÃfico do receptor TRPV1 utilizado no estudo, demonstrando que o 6-gingerol possui outras vias renais a serem exploradas em estudos posteriores.