Orientador: Isabel Cristina Sales Fontes Jardim / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-06T15:47:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lourenco_Josimara_M.pdf: 719895 bytes, checksum: c0f8473e3a648286f7a03cc8d8056bc9 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Em cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), a coluna é freqüentemente considerada como o "coração do sistema cromatográfico", pois é nela que ocorre a separação. Dessa forma, a busca por fases estacionárias capazes de realizar separações com alta eficiência e desempenho tem sido uma constante em muitos laboratórios de pesquisa. Polissiloxanos fenil substituídos têm sido extensivamente utilizados em cromatografia gasosa, mas a sua aplicação em CLAE tem despertado pouca atenção. Neste trabalho foram preparadas fases estacionárias para CLAE, com grupos fenil, a partir da sorção e subseqüente imobilização por tratamento térmico do copolímero de dimetil(52-48%)-metil-fenil(48-52%) siloxano sobre a sílica (Kromasil, 5 mm). Medidas da quantidade de carbono, volume de poro, área superficial específica, espectroscopia no infravermelho e RMN de C e Si foram realizadas para caracterizar físico-quimicamente as fases estacionárias. Também foram feitas avaliações cromatográficas utilizando misturas teste de compostos orgânicos de diferentes polaridades. As fases estacionárias preparadas a partir do copolímero de dimetil(52-48%)-metil-fenil(48-52%) siloxano sobre a sílica e imobilizadas termicamente a 150 °C, por 4,5 horas apresentaram alta eficiência (77000 N m), picos simétricos (As = 0,9) e bom desempenho cromatográfico. Os parâmetros cromatográficos indicaram que o tratamento térmico melhorou o desempenho das fases estacionárias e proporcionou um aumento da estabilidade frente a fases móveis neutras e alcalinas / Abstract: In high-performance liquid chromatography (HPLC), the column is frequently considered as the "heart of the chromatographic system", because is in the column that the separation occurs. In this way, the search for stationary phases able to achieve separations with high efficiency and performance has been a constant in many research laboratories. Phenyl substituted polysiloxanes have been used extensively in gas chromatography, but their application in HPLC has received little attention. In this work were prepared stationary phases for HPLC, with phenyl groups, using sorption and subsequent thermal immobilization of the copolymer of dimethyl(52-48%)-methyl-phenyl(48-52%) siloxane on silica (Kromasil, 5 mm). Measurement of amount of carbon, pore volume, specific surface area, infrared spectrum and NMR of C and Si were used to physical-chemically characterize the stationary phases. Chromatographic evaluations using test mixtures of organic compounds of different polarity were also carried out. The stationary phases prepared from the copolymer of dimethyl(52-48%)-methyl-phenyl(48-52%) siloxane on silica gel and thermally immobilized for 4.5 h at 150 °C show high efficience (77000 N m), symmetrical peaks (As = 0.9) and good chromatography performance. The chromatographic parameters show that the thermal treatment improved the performance of stationary phases and provided an increase of stability in neutral and basic mobile phases / Mestrado / Quimica Analitica / Mestre em Química

Orientador: Sônia Maria Alves Bueno / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Química / Made available in DSpace on 2018-08-26T10:22:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_LuanaCristinaAndradeda_D.pdf: 3401459 bytes, checksum: 94b29258ef88b106fed9841a38d11161 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: As imunoglobulinas do tipo G humana (IgG) são amplamente empregadas em tratamentos terapêuticos contra câncer, doenças auto-imunes e imunodeficiência adquirida e na área analítica, em testes diagnósticos. Os fragmentos Fab podem ser obtidos por clivagem enzimática da molécula de IgG nativa ou por tecnologia de DNA recombinante. O fragmento Fab é composto por regiões constantes e variáveis, sendo que as regiões variáveis de cadeias leve e pesada compõem o fragmento Fv. Tanto os fragmentos Fab quanto os fragmentos Fv foram citados como segunda e terceira geração de anticorpos, respectivamente, e têm sido crescente o interesse em empregá-los em tratamentos terapêuticos, visto que ambos possuem menor massa molar em relação a IgG intacta e preservam a capacidade de se ligar ao antígeno. Como a utilização destas proteínas nas áreas terapêutica e analítica requer um alto grau de pureza, estratégias de purificação vêm sendo desenvolvidas. No intuito de contribuir para o desenvolvimento de processos de purificação de fragmento Fab, estudou-se o emprego de ligantes alternativos aos bioespecíficos proteínas A, G e L, comumente empregados para este fim. Neste trabalho, a purificação dos fragmentos Fab foi realizada por cromatografia de afinidade com íons metálicos imobilizados (IMAC) e fenil boronato (FB). Quanto a IMAC, avaliou-se o efeito dos agentes quelantes IDA (ácido iminodiacético) e TREN (Tris 2(aminoetil) amina), os íons metálicos Cu2+, Ni2+ e Co2+ e os tampões Tris-HCl, fosfato de sódio e HEPES na ausência e na presença de NaCl para a purificação de Fab a partir de solução de clivagem enzimática de IgG humana policlonal. Os resultados foram analisados conjuntamente por Western blot e imunodifusão radial. No que se refere à pureza dos fragmentos Fab obtidos na etapa de flowthrough, a ordem crescente obtida foi TREN-Ni2+ (100%) > IDA-Ni2 (88,6%) > IDA-Co2+ (71,1%) > IDA-Cu2+ (63,9%). Em relação ao rendimento, obteve-se a seguinte ordem: TREN-Ni2+ (86,2%) = IDA-Co2+ (86,2%) > IDA-Ni2+ (74,3%) = IDA-Cu2+ (73,7%). No tocante à capacidade de adsorção de proteína total por mL de gel, obteve-se a ordem 14,3 mg mL-1 ( TREN-Ni2+) > 11,2 mg mL-1 (IDA-Ni2+) > 5,65 mg mL-1 (IDA-Cu2+) > 4,3 mg mL-1 (IDA-Co2+). O ligante FB adsorveu os fragmentos Fab e Fc e não promoveu a separação destes. Este trabalho possibilitou concluir que os agentes quelantes IDA e TREN com os íons metálicos empregados, possibilitam separar os fragmentos Fab de fragmentos Fc e obtê-los com grau de pureza satisfatório / Abstract: Polyclonal human G immunoglobulins are widely applied in therapeutic treatments for cancer, autoimmune diseases and immunodeficiency and in the analytical area of diagnostic testing. The human IgG Fab fragments can be obtained via enzymatic cleavage of the native molecule or recombinant DNA technology. The Fab is composed of constant regions (CL and CH) and variable (VL and VH). The variable regions of the light and heavy chains comprise the Fv fragment. Fab fragments and Fv fragments were cited as second and third generation of antibodies, respectively, and has been an increasing interest in employing them in therapeutic treatments, as both have molecular weight less than the intact IgG and preserve the affinity for the antigen. The applied these proteins in therapy and analytical investigation require a high degree of purity, so, different purification strategies have been developed. In order to contribute to the development of Fab fragment purification processes, we studied the use of alternative biospecific binding to proteins A, G and L, commonly applied for this purpose. In this work, the purification of the Fab fragments was performed by affinity chromatography with chelated metals (IMAC) and phenyl and boronate (PB) ligand immobilized on agarose gel. In this investigation, the metal chelates Cu 2+, Ni 2+ and Co 2+ were studied when tested in IDA (iminodiacetic acid) and TREN (Tris 2 (aminoethyl) amine) and buffer system Tris-HCl, sodium phosphate and HEPES with or without NaCl for purification of Fab fragments from enzymatic cleavage solution of polyclonal human IgG. The results of Western blot and radial immunodiffusion were analyzed together. For the purity of the Fab fragments obtained in flowthrough, the increasing order was obtained TREN-Ni2+ (100%) > IDA-Ni2+ (88.6%) > IDA-Co2+ (71.1%) > IDA-Cu2+ (63.9%). In relation to yield, we obtained the following order: TREN-Ni2+ (86.2%) = IDA-Co2+ (86.2%) > IDA-Ni2+ (74.3%) = IDA-Cu2+ (73.7% ). With regard to the total capacity protein adsorption per ml of gel, was obtained the order 14.3 mg mL-1 (TREN-Ni2+) > 11.2 mg mL-1 (IDA-Ni2+) > 5.65 mg ml -1 (IDA-Cu2+) > 4.3 mg ml-1 (IDA-Co2+). The binder FB adsorbed Fab and Fc did not cause separation thereof. This work led us to conclude that the chelating agents IDA and TREN with the metal ions used, enable separate the Fab fragments of Fc fragments and get them with satisfactory degree of purity / Doutorado / Desenvolvimento de Processos Biotecnologicos / Doutora em Engenharia Quimica

Nos últimos anos, a busca por materiais com altas não linearidades ópticas tem crescido rapidamente devido as suas potencias aplicações em diversas áreas das ciências, que vão de biologia até fotônica. O processo de absorção de dois fótons, por exemplo, têm sido usado em limitação óptica, micro-fabricação tridimensional, armazenamento óptico e microscopia por fluorescência. Neste trabalho, investigamos o processo de absorção de dois fótons em moléculas orgânicas e organometálicas, buscando colaborar com os esforços que vêm sendo feitos para aprofundar a compreensão dos aspectos envolvidos na absorção não linear. Os espectros de absorção de dois fótons de derivados de perilenos tetracarboxílicos, derivados de fenil-bifenilamina e complexos acetilados de platina foram determinados através da técnica de Varredura Z com pulsos ultracurtos. Para os derivados de perilenos, utilizando a técnica de Varredura Z com luz branca, observamos sutis estruturas no espectro não linear, as quais estão relacionadas a estados permitidos por dois fótons na região do ultra-violeta. A existência de tais estados foi confirmada através de cálculos usando teoria do funcional da densidade. O espectro de absorção de dois fótons para os complexos acetilados de platina apresentam bandas em torno de 600 nm, com seções de choque relativamente altas, da ordem de 640 GM. A ampla janela de transparência desses compostos na região do visível os torna interessantes candidatos para dispositivos de limitação óptica assistida por dois fótons. Por fim, as amostras da família fenil-bifenilamina mostraram uma combinação entre os efeitos não lineares do grupo fenil-bifenilamina e do grupo azoaromático, a qual pode ser explorada em dispositivos de armazenamento óptico tri-dimensional. / In the last few years, the design and characterization of novel materials exhibiting high optical nonlinearities is the subject of a fast-growing interest because of their potential application in various fields, from biology to photonics. Two-photon absorption processes, for example, have been used for optical limiting, three-dimensional microfabrication, optical data storage and fluorescence imaging. In this work we investigate the two-photon absorption in organic and organometallic molecules, aiming at the understanding of aspects related to the nonlinear absorption. The two-photon absorption spectra of perylene derivatives, phenyl-diphenylamine derivatives and Platinum Acetylide Complexes were measured using the Z-scan technique with ultrashort pulses. For perylene derivatives, using the white-light continuum Z-scan, we were able to observe subtle structures in nonlinear spectra, which are related to two-photon allowed states in the UV region. Such transitions were confirmed using density functional theory. The two-photon absorption spectrum of Pt-acetylene complexes revealed bands around 600 nm, with relatively high two-photon absorption cross-section in the order of 1000 GM. The broad transparence windows exhibited by these compounds in the visible make them promising candidates for optical limiting devices assisted by two-photon absorption. Finally, the phenyl-biphenylamine samples exhibited a combination between effects from the phenyl-biphenylamine group and the azoaromatic groups, which can be explored in tri-dimensional optical storage devices.

Nos últimos anos, a busca por materiais com altas não linearidades ópticas tem crescido rapidamente devido as suas potencias aplicações em diversas áreas das ciências, que vão de biologia até fotônica. O processo de absorção de dois fótons, por exemplo, têm sido usado em limitação óptica, micro-fabricação tridimensional, armazenamento óptico e microscopia por fluorescência. Neste trabalho, investigamos o processo de absorção de dois fótons em moléculas orgânicas e organometálicas, buscando colaborar com os esforços que vêm sendo feitos para aprofundar a compreensão dos aspectos envolvidos na absorção não linear. Os espectros de absorção de dois fótons de derivados de perilenos tetracarboxílicos, derivados de fenil-bifenilamina e complexos acetilados de platina foram determinados através da técnica de Varredura Z com pulsos ultracurtos. Para os derivados de perilenos, utilizando a técnica de Varredura Z com luz branca, observamos sutis estruturas no espectro não linear, as quais estão relacionadas a estados permitidos por dois fótons na região do ultra-violeta. A existência de tais estados foi confirmada através de cálculos usando teoria do funcional da densidade. O espectro de absorção de dois fótons para os complexos acetilados de platina apresentam bandas em torno de 600 nm, com seções de choque relativamente altas, da ordem de 640 GM. A ampla janela de transparência desses compostos na região do visível os torna interessantes candidatos para dispositivos de limitação óptica assistida por dois fótons. Por fim, as amostras da família fenil-bifenilamina mostraram uma combinação entre os efeitos não lineares do grupo fenil-bifenilamina e do grupo azoaromático, a qual pode ser explorada em dispositivos de armazenamento óptico tri-dimensional. / In the last few years, the design and characterization of novel materials exhibiting high optical nonlinearities is the subject of a fast-growing interest because of their potential application in various fields, from biology to photonics. Two-photon absorption processes, for example, have been used for optical limiting, three-dimensional microfabrication, optical data storage and fluorescence imaging. In this work we investigate the two-photon absorption in organic and organometallic molecules, aiming at the understanding of aspects related to the nonlinear absorption. The two-photon absorption spectra of perylene derivatives, phenyl-diphenylamine derivatives and Platinum Acetylide Complexes were measured using the Z-scan technique with ultrashort pulses. For perylene derivatives, using the white-light continuum Z-scan, we were able to observe subtle structures in nonlinear spectra, which are related to two-photon allowed states in the UV region. Such transitions were confirmed using density functional theory. The two-photon absorption spectrum of Pt-acetylene complexes revealed bands around 600 nm, with relatively high two-photon absorption cross-section in the order of 1000 GM. The broad transparence windows exhibited by these compounds in the visible make them promising candidates for optical limiting devices assisted by two-photon absorption. Finally, the phenyl-biphenylamine samples exhibited a combination between effects from the phenyl-biphenylamine group and the azoaromatic groups, which can be explored in tri-dimensional optical storage devices.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:45:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013 / Associação Fundo de Incentivo à Psicofarmacologia (AFIP) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A cocaina produz potentes efeitos reforcadores devido ao bloqueio de transportadores dopaminergicos, causando um grande e rapido aumento de dopamina na fenda sinaptica. Este aumento de dopamina no sistema mesolimbico e provavelmente o maior responsavel pelo abuso da droga, que pode levar a dependencia. No entanto, ate o momento, nao foi estabelecido nenhum tratamento para a dependencia de cocaina. Neste sentido, este estudo foi proposto a fim de avaliar o efeito de duas drogas sobre a preferencia condicionada por lugar (PCL) induzida por cocaina, o agonista parcial de receptores D1, SKF 38393, e o inibidor da sintese de dopamina, α-metil-p-tirosina (AMPT). Camundongos machos adultos C57BL/6J foram condicionados a um ambiente com administracao de cocaina (10 mg/kg) via intraperitoneal (i.p.) em dias alternados em um procedimento obiasedo. Apos o teste de preferencia pos-condicionamento, os animais foram submetidos a tres dias de tratamento com SKF 38393 (10 mg/kg) ou AMPT (250 mg/kg) ou com a associacao das duas drogas. O tratamento com SKF 38393 foi capaz de reverter a PCL induzida pela cocaina. Contrariamente, a administracao repetida de AMPT potencializou este comportamento. A associacao de SKF 38393 e AMPT bloqueou o comportamento previamente estabelecido pela cocaina. Adicionalmente, foi avaliado o efeito do SKF 38393 sobre os niveis de BDNF no nucleo accumbens (NAcc) e na area tegmental ventral (ATV) apos o procedimento de PCL induzido por cocaina. Houve aumento de BDNF na ATV tanto pela administracao repetida de cocaina quanto de SKF 38393, sendo que a associacao destas duas drogas potencializou o aumento de BDNF nesta regiao. No entanto, nao foram verificadas alteracoes nos niveis de BDNF no NAcc em nenhum grupo. Este estudo fornece indicios de que os receptores D1 participam diretamente do mecanismo de reforco condicionado no modelo de PCL induzida por cocaina; e que a ativacao parcial destes receptores concomitante ao uso da cocaina desencadeia alteracoes neurobiologicas que podem ser a chave para o desenvolvimento de medicamentos para a dependencia de cocaina / Cocaine produces potent reward effects by the block age of dopamine transporters. This blockage triggers a fast and large increase of dopamine levels in the synaptic cleft. This increase of dopamine in the mesolimbic system is probably the major responsible for the drug abuse that may lead to add iction. However, until now, it was not yet established a treatment for cocaine addicti on. Therefore, the aims of this study were to evaluate the effects of the partial D 1 agonist SKF 38393 and of the dopamine synthesis inhibitor α -metil- p -tyrosine (AMPT) on cocaine-conditioned place preference (CPP). Male adult C57BL/6J mice were con ditioned with cocaine (10 mg/kg; i.p.) each other day in a biased procedure. After the post-conditioning test, the mice were submitted to three consecutive days of tr eatment with SKF 38393 (10 mg/kg; i.p.) or AMPT (250 mg/kg; i.p.), or the asso ciation of the two drugs. After the post-treatment preference test, it was demonstrated that the SKF 38393 reversed the CPP; while conversely, AMPT potentiated it. The ass ociation of the two drugs was able to block the effects of cocaine-induced CPP. A dditionally, we investigated the effects of the three days of treatment with SKF 383 93 (10 mg/kg) on the BDNF levels in the ventral tegmental area (VTA) and nucleus acc umbens (NAcc) after the cocaine-induced CPP procedure. Both cocaine and SKF 38393 treatments increased the BDNF levels in the VTA. The increase of BDNF wa s potentialized with the association of cocaine and SKF 38393 in this area. However there were no changes in BDNF levels in the NAcc in any experimental grou p. This study provides evidences that D1 receptors are directly involved with the co nditioned reward mechanism in cocaine-induced CPP. Moreover, the partial activati on of D1 receptors concomitant with cocaine use triggers neurobiological changes t hat may be the key role for the development of a treatment for cocaine addiction / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Foram determinadas as estruturas cristalinas de três 3-fenil-2- izoxazolin-5-ona-4-benzilideno substituídas com potencial atividade antiinflamatória, a partir dos dados difratométricos de raios-X, usando os Métodos Diretos. O refinamento foi obtido pelo método dos Mínimos Quadrados. O composto C16H11NO2 cristalizou no sistema cristalino monoclínico, grupo espacial P21/a, a = 11,786(5) Å, b = 5,745(1) Å, c = 17,862(5) Å, ß = 95,988(5)º, Z = 4, V = 1202,8(12) Å3 . O composto C17H13NO3 cristalizou no sistema cristalino ortorrômbico, grupo espacial Pna21, a = 11,652(5) Å, b = 6,000(5) Å, c = 19,542(5) Å, Z = 4, V = 1366,2(13) Å3. O composto C17H13NO4 cristalizou no sistema cristalino ortorrômbico, grupo espacial Pcab, a = 10,6983(9) Å, b = 12,6111(8) Å, c = 20,926(2) Å, Z = 8, V = 2823,3(4) Å3. Em todas as estruturas verificou-se semelhança estrutural para com a fenilbutazona. / The crystal structures of three substituted 3-phenyl-2- isoxazolin-5-one-4-benzilidene with potential biological activities have been determined from diffractometric X ray data using the Direct Method. The refinement has been obtained through the least squares method. The compound C16H11NO2 crystallized in the monoclinic crystal system, space group P21/a, a = 11,786(5) Å, b = 5,745(1) Å, c = 17,862(5) Å, ß = 5,988(5)º, Z = 4, V = 1202,8(12) Å3. The compound C17H13NO3 belongs to the orthorhombic crystal system, space group Pna21, a = 11,652(5) Å, b = 6,000(5) Å, c = 19,542(5) Å, Z = 4, V = 1366,2(13) Å3. The compound C17H13NO4 crystallized in the orthorhombic crystal system, space group Pcab, a = 10,6983(9) Å, b = 12,6111(8) Å, c = 20,926(2) Å, Z = 8, V = 2823,3(4) Å3. All these structures show structural similarities to the phenylbutazone.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Despite the growing use of organotellurium compounds in chemical and biochemical fields, there is no great concern about their toxicity until now. Diethyl-2-phenyl-2-tellurophenyl vinylphospnonate is a β-organochalcogenyl vinylphosphonate that is a usefull tool for organic synthesis, but no toxicological and pharmacological studies about it are described in the literature. In this study, we investigated, in vitro, the possible antioxidant activity and toxic properties of this compound, and evaluated its putative toxicological effects through biochemical parameters, ex vivo, after subchronic administration by the subcutaneous and intraperitoneal vias. As other organotellurium compounds, the diethyl-2-phenyl-2-tellurophenyl vinylphosphonate also was able to oxidize SH groups from DTT, as well as to inhibit hepatic, renal and cerebral δ- ALA-D in vitro, however, at relatively high concentrations. The antioxidant activity was also observed in brain, liver and kidney, at very low concentrations, and its ability to reduce the lipid peroxidation- induced by Fe+2 was comparable to the antioxidant organotellurium compound diphenyl ditelluride. In vivo, diethyl-2-phenyl-2-tellurophenyl vinylphosphonate was very low toxic to mice that received twelve daily injections through subcutaneous and intraperitoneal via, different from the animals that received diphenyl ditelluride s.c, which died after the fourth day of treatment. Ex vivo, the δ- ALA-D activity in liver, kidney and brain were not affected by these treatments with diethyl-2-phenyl-2-tellurophenyl vinylphosphonate, In addition, the i.p. treatment did not affect the survival of the treated mice. The body weight of treated mice did not change; however, the liver weight was increased in the animals that received the major doses, probably due to the increase in the metabolization; in fact, no tissue damage was detected, since plasmatic activities of AST and ALT were not altered. The biochemical parameters of oxidative stress that were evaluated, TBARS formation, Vitamin E levels, GSH/GSSG ratio, SOD and catalase activities, were not changed in liver and kidney, nevertheless, in brain, SOD activity significantly increase, whereas catalase activity tended to increase, at the intermediary doses, indicating that this tissue would be suffering some alteration due to the administration of the organotellurium compound. Taken together, these data suggest that this organotellurium compound is promising for further pharmacological studies, once that it does not has pronounced toxic effects, but has antioxidant properties. / Apesar do crescente uso dos compostos orgânicos de telúrio na química e na bioquímica, não há um grande conhecimento sobre sua toxicidade até agora. O Dietil-2-fenil-2-telurofenil vinilfosfonato é um β-organocalcogenil vinilfosfonato, uma útil ferramenta na síntese orgânica, mas nenhum estudo toxicológico e farmacológico estão ainda descritos na literatura. Neste estudo, nós investigamos, in vitro, a possível atividade antioxidante e as propriedades tóxicas deste composto, e avaliamos os prováveis efeitos tóxicos através de parâmetros bioquímicos, ex vivo, após administração pelas vias subcutânea ou intraperitoneal. Como outros compostos orgânicos de telúrio, o dietil-2-fenil-2-telurofenil vinilfosfonato também foi capaz de oxidar grupamentos SH do DTT, bem como de inibir a atividade da δ- ALA-D de fígado, cérebro e rim, in vitro, entretanto, em relativamente baixas concentrações. A atividade antioxidante foi também observada em cérebro, fígado e rim, em concentrações muito baixas, e sua habilidade de reduzir a peroxidação lipídica induzida por Fe+2 foi comparável ao do composto orgânico de telúrio com atividade antioxidante bem conhecida, o ditelureto de difenila. In vivo, o dietil-2-fenil-2-telurofenil vinilfosfonato foi muito pouco tóxico a camundongos que receberam doze injeções diárias pelas vias subcutânea e intraperitoneal, diferente dos animais que receberam ditelureto de difenila s.c., que morreram após o quarto dia de tratamento. Ex vivo, a atividade da δ- ALA-D no fígado, rim e cérebro não foi afetada pelos tratamentos com dietil-2-fenil-2-telurofenil vinilfosfonato. O peso corporal dos camundongos tratados não mudou, contudo, o peso do fígado aumentou nos animais que receberam as doses maiores pela via i.p., provavelmente devido à metabolização. De fato, nenhum dano ao tecido hepático foi detectado, visto que as atividades plasmáticas da AST e da ALT não foram alteradas. Os parâmetros bioquímicos de estresse oxidativo que foram avaliados, não foram alterados em rim e fígado, porém, em cérebro a atividade da SOD aumento significativamente, enquanto a atividade da catalase aumentou nas doses intermediárias, indicando que este tecido estaria sofrendo alguma alteração devido à administração deste composto de telúrio orgânico. Juntos, estes dados sugerem que este composto é promissor para maiores estudos farmacológicos, uma vez que não possui efeitos tóxicos pronunciados e possui uma atividade antioxidante considerável.

Os produtos naturais desempenham fundamental importância na descoberta de novos fármacos. Muitos destes fármacos originaram-se de produtos naturais microbianos o que demonstra uma extrema eficiência na habilidade dos micro-organismos de sintetizar substâncias químicas com elevado potencial biológico. Sabe-se que os insetos sociais estão sujeitos a condições climáticas e populacionais que aumentam sua susceptibilidade a parasitas. Assim, estes insetos desenvolveram um mecanismo de defesa evolutivo que consiste na associação simbiótica a bactérias capazes de biossintetizar produtos antimicrobianos contra os patógenos. Dispondo dessas informações, o presente trabalho contribuiu com o estudo dos produtos naturais biossintetizados pela bactéria Paenibacillus polymyxa ALLI-03-01, provável simbionte da espécie de abelha sem ferrão Melipona scutellaris. Os micro-organismos foram isolados de colônias mantidas no Departamento de Biologia da FFCLRP-USP. Todas as linhagens foram testadas contra dois fungos entomopatogênicos - Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae; os que apresentaram atividade antifúngica tiveram seus extratos em acetato de etila e metanol preparados e foram avaliados em ensaios antiparasitários contra Trypanosoma cruzi e Leishmania donovani. A bactéria ALLI-03-01, isolada do alimento larval, foi escolhida para os estudos químicos, pois apresentou satisfatória atividade antifúngica e proeminente atividade antiparasitária. Este micro-organismo foi identificado pelo sequenciamento do gene 16S rRNA como sendo a bactéria Paenibacillus polymyxa, conhecida pela alta capacidade de produção de metabólitos secundários. Para conhecer seu metabolismo, esta bactéria foi cultivada em meio ISP-2 ágar e líquido e do extrato em acetato de etila do cultivo fermentativo de P. polymyxa ALLI-03-01 foi isolado o ácido L-3-fenil lático. As atividades antifúngicas dos padrões comerciais dos ácidos D-(+)- e L-(-)- 3-fenil lático foram testadas frente ao fungo entomopatogênico B. bassiana e apenas o enantiômero L apresentou atividade antifúngica. Do extrato em metanol do cultivo em meio sólido do mesmo micro-organismo foram identificados em mistura, principalmente por MALDI-TOF MS/MS, nove diferentes ciclolipodepsipeptídeos, da classe das Fusaricidinas. As fusaricidinas são conhecidas por apresentarem alta atividade anti-microbiana, que foi comprovada quando duas frações compostas por diferentes fusaricidinas foram testadas frente ao fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae e contra a bactéria patogênica Paenibacillus larvae. As frações apresentaram resultados satisfatórios de inibição contra ambos os patógenos, dessa maneira as fusaricidinas e a produção seletiva do ácido L-3-fenil lático por esta bactéria podem ser vias de proteção da colônia, evitando que patógenos destruam-na e permitindo o desenvolvimento sadio de larvas. Sendo assim, este trabalho relata pela primeira vez a possível relação simbiótica existente entre o micro-organismo Paenibacillus polymyxa ALLI-03-01 e a colônia de abelhas Melipona scutellaris, bem como a produção por este micro-organismo de compostos com alta atividade antimicrobiana que podem exercer o controle de parasitas dentro da colônia, estabelecendo assim, uma possível relação ecológica entre o micro-organismo destacado e as abelhas Melipona scutellaris. / Natural products play an important role in drug discovery. Several drugs have been discovered or developed from microbial natural products hits and leads showing a great efficiency of microorganisms to synthesize compounds with high biological potential. It is known that social insects are subjected to climate and population conditions that increase their susceptibility to parasites. Therefore, these insects have developed an evolutionary defense mechanism consisting in symbiotic association with bacteria capable of biosynthesize antimicrobial products against pathogens. In this context, this study contributed to the knowledge of natural products biosynthesized by the bacterium Paenibacillus polymyxa ALLI-03-01, a probable symbiont of the stingless bee Melipona scutellaris. Microorganisms were isolated from colonies maintained at the Department of Biology of FFCLRP-USP. All strains were tested against two entomopathogenic fungi - Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae; strains that showed antifungal activity had their ethyl acetate and methanol extracts prepared and evaluated against the parasites Trypanosoma cruzi and Leishmania donovani. The bacterium ALLI-03-01, isolated from larval food, was selected for chemical studies, due to its satisfactory antifungal activity and outstanding antiparasitic activity. This microorganism was identified by gene 16S rRNA sequencing as Paenibacillus polymyxa, a bacterium recognized for its ability of biosynthesize secondary metabolities. This bacterium was cultivated in ISP-2 agar and liquid medium and from the ethyl acetate extract of P. polymyxa ALLI-03-01 cultivated in liquid medium L-3-phenyllactic acid was isolated. The antifungal activity of comercial standards of D-(+)- and L-(-)-phenyllactic acid were tested against entomopathogenic fungus B. bassiana and only the L enantiomer presented antifungal activity. Nine cyclo lipodepsipeptides known as fusaricidins were identified in mixture using MALDI-TOF-MS/MS from the methanol extract of ALLI-03-01. The fusaricidins are recognized for their high antimicrobial activity, which was confirmed when two fractions composed by different fusaricidins were tested against the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae and the pathogenic bacterium Paenibacillus larvae. The fractions showed satisfactory inhibition against both pathogens. Therefore, fusaricidins and selective production of L-3-phenyllactic acid by the bacterium may be colony protection resources, preventing the action of pathogens and allowing healthy larvae development. Therefore, this study reports for the first time a possible symbiotic relationship between Paenibacillus polymyxa ALLI-03-01 and the colony of M. scutellaris bees, as well as production of compounds with high antimicrobial activity by this microorganism that might act as parasite control agents within the colony, establishing a possible ecological relationship between the bacterium and M. scutellaris bees.

Foram determinadas as estruturas cristalinas de três 3-fenil-2- izoxazolin-5-ona-4-benzilideno substituídas com potencial atividade antiinflamatória, a partir dos dados difratométricos de raios-X, usando os Métodos Diretos. O refinamento foi obtido pelo método dos Mínimos Quadrados. O composto C16H11NO2 cristalizou no sistema cristalino monoclínico, grupo espacial P21/a, a = 11,786(5) Å, b = 5,745(1) Å, c = 17,862(5) Å, ß = 95,988(5)º, Z = 4, V = 1202,8(12) Å3 . O composto C17H13NO3 cristalizou no sistema cristalino ortorrômbico, grupo espacial Pna21, a = 11,652(5) Å, b = 6,000(5) Å, c = 19,542(5) Å, Z = 4, V = 1366,2(13) Å3. O composto C17H13NO4 cristalizou no sistema cristalino ortorrômbico, grupo espacial Pcab, a = 10,6983(9) Å, b = 12,6111(8) Å, c = 20,926(2) Å, Z = 8, V = 2823,3(4) Å3. Em todas as estruturas verificou-se semelhança estrutural para com a fenilbutazona. / The crystal structures of three substituted 3-phenyl-2- isoxazolin-5-one-4-benzilidene with potential biological activities have been determined from diffractometric X ray data using the Direct Method. The refinement has been obtained through the least squares method. The compound C16H11NO2 crystallized in the monoclinic crystal system, space group P21/a, a = 11,786(5) Å, b = 5,745(1) Å, c = 17,862(5) Å, ß = 5,988(5)º, Z = 4, V = 1202,8(12) Å3. The compound C17H13NO3 belongs to the orthorhombic crystal system, space group Pna21, a = 11,652(5) Å, b = 6,000(5) Å, c = 19,542(5) Å, Z = 4, V = 1366,2(13) Å3. The compound C17H13NO4 crystallized in the orthorhombic crystal system, space group Pcab, a = 10,6983(9) Å, b = 12,6111(8) Å, c = 20,926(2) Å, Z = 8, V = 2823,3(4) Å3. All these structures show structural similarities to the phenylbutazone.

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