Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-10-22Bitstream added on 2014-06-13T19:04:48Z : No. of bitstreams: 1 gratieri_la_dr_jabo.pdf: 1473193 bytes, checksum: 64b0dce65db8a3753f1491e9eb06f033 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Instituto Federal de Ensino Superior de Muzambinho / Com o objetivo de avaliar nitrogênio e potássio para meloeiro cultivado em fibra de coco, sem drenagem, foi conduzido um experimento em estufa agrícola no período de 21-9-2011 a 3-1-2012, no Instituto Federal Sul de Minas Gerais em Muzambinho, Minas Gerais. O híbrido de melão Bônus no 2 foi cultivado no espaçamento de 1,10 x 0,40 m. O delineamento experimental foi o de blocos ao acaso, com dezesseis tratamentos, em esquema fatorial 4 x 4 caracterizados por quatro concentrações de nitrogênio na solução nutritiva (8, 12, 16 e 20 mmol L-1) e quatro de potássio (4, 6, 8 e 10 mmol L-1) com três repetições. A parcela experimental foi constituída por 8 plantas. Foram avaliadas características de crescimento, nutrição mineral, produção do meloeiro, qualidade dos frutos e atributos químicos do substrato. Fertirrigações com 20 e 10 mmol L-1 de N e K, respectivamente, sem drenagem de solução nutritiva, não causam salinização do substrato. A máxima produtividade do meloeiro Bônus no 2, cultivado em fibra de coco, sem drenagem, é obtida com concentrações de N e K maiores do que 20 e 10 mmol L-1 / In order to evaluate the effect of nitrogen and potassium concentrations in the nutrient solution for melons grown on coconut fiber, without drainage, an experiment was conducted in a greenhouse at the period of 09-21-2011 to 01-03-2012, at the Instituto Federal Sul de Minas Gerais, in Muzambinho, Minas Gerais. The melon hybrid 'Bonus 2' was grown in a spacing of 1.1 x 0.4 m. The experimental design consisted of randomized blocks, with sixteen treatments, in a 4 x 4 factorial design characterized by four nitrogen concentrations in the nutrient solution (8, 12, 16 and 20 mmol L-1) and four potassium concentrations (4, 6 , 8 and 10 mmol L-1) with three replicates. The experimental plot consisted of 8 plants. It was evaluated the characteristics of growth, mineral nutrition, melon production, fruit quality and chemical properties of the substrate. Fertirrigation with the concentrations of 20 and 10 mmol L-1 of N and K, respectively, without the drainage of the nutritive solution, does not lead to substrate salinization. Themaximum productivity of melon “Bonus 2” cultivated on coconut fiber, without drainage, is obtained with concentrations of N and K higher than 20 and 10 mmolL-1

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-06-15Bitstream added on 2014-06-13T19:44:32Z : No. of bitstreams: 1 silva_gs_dr_jabo.pdf: 239730 bytes, checksum: 9d4321121c4e13a505bb061c3df312d1 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Na UNESP, Câmpus de Jaboticabal, SP, no período de 17 de fevereiro a 6 de maio de 2009, foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar doses de fósforo e de potássio na adubação de repolho ’Fuyutoyo’ cultivado em Latossolo com alto teor dos nutrientes. No primeiro experimento foram avaliadas as doses de fósforo: 0, 120, 240, 360, 480, 600 e 720 kg ha-1 de P2O5, e no segundo experimento foram avaliadas as doses de potássio: 0, 60, 120, 180, 240, 300 e 360 kg ha-1 de K2O. Para cada experimento, o delineamento utilizado foi o de blocos casualizados, com sete tratamentos e três repetições. As doses de fósforo influenciaram a massa seca de folha, teor de P na folha diagnóstica, o acúmulo de P no caule e o teor de P no solo após a colheita. Houve ajuste polinomial quadrático para área foliar, massa da cabeça de repolho e produtividade, às doses de fósforo. As doses de potássio influenciaram o teor de K na folha diagnóstica, acúmulo de K na folha e o teor de K no solo após a colheita. Em Latossolo com teor alto de P disponível, a adubação com este nutriente influencia o crescimento e a produção do repolho ’Fuyutoyo’, enquanto em Latossolo com teor alto de K disponível, a adubação com este nutriente não influencia o crescimento e a produção do repolho / At UNESP, Jaboticabal, SP, from February 17 to May 6, 2009, two experiments were conducted with the objective of evaluating the levels of phosphorus and potassium fertilization on 'Fuyutoyo' cabbage grown in Oxisol with high content of nutrients. In the first experiment were evaluated the phosphorus doses: 0, 120, 240, 360, 480, 600 and 720 kg ha-1 P2O5, and in the second experiment assessed the potassium levels: 0, 60, 120, 180, 240, 300 and 360 kg ha-1 of K2O. For each experiment, the experimental design was randomized blocks with seven treatments and three replications. The phosphorus levels influenced the dry leaf weight, P concentration in diagnostic leaf, the accumulation of P in the stem and also the P content in the soil after harvest. There was a quadratic polynomial fit to leaf area, head cabbage and productivity, at doses of phosphorus. The doses of potassium influenced the content of K in the diagnostic leaf, the leaf K accumulation and K content in the soil after harvest. In Oxisol with high content of available P fertilization with this nutrient influences growth and production of 'Fuyutoyo’ cabbage while in Oxisol with high content of available K fertilization with this nutrient does not influence the growth and production of cabbage

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-16Bitstream added on 2014-06-13T19:24:32Z : No. of bitstreams: 1 ferreira_mbd_dr_jabo.pdf: 786611 bytes, checksum: 3c4c4423ce0ad7536fd2c581e6e11536 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / Raças zebuínas (Bos taurus indicus) e seus cruzamentos têm papel fundamental na pecuária brasileira, e a raça Gir, em especial, acrescenta rusticidade e produtividade nas suas descendentes leiteiras. A produção in vitro de embriões bovinos é uma biotécnica de alto valor econômico, que, aliada à utilização de sêmen sexado para cromossoma X, possibilita a multiplicação com fêmeas de valor genético superior. Foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar a produção in vitro (PIV) de embriões de doadoras da raça Gir na Fazenda Experimental da EPAMIG, em Uberaba, MG. O experimento 1 (EXP 1) visou verificar o efeito da ablação do folículo dominante sobre os resultados da PIV. No experimento 2 (EXP 2) os efeitos da estação do ano, idade da doadora, DNA mitocondrial materno e efeito do touro sobre a PIV foram estudados. No EXP 1, 42 multíparas e primíparas foram submetidas à aspiração de oócitos (OPU) a partir dos 15 dias pós-parto e a intervalos de 21 dias, sendo efetuada (65 sessões de OPU) ou não (115 sessões de OPU) a ablação do folículo dominante 3 dias antes da aspiração. Das 198 aspirações realizadas foram coletados 3.884 oócitos viáveis, que resultaram em 1.114 blastocistos. O número médio de oócitos viáveis aspirados e de blastocistos por sessão foi de 20,0 ± 10,6 e de 5,70 ± 4,9, respectivamente. Não foram identificados efeito da ordem de parto e aspiração, do dia após o parto para início da coleta e da condição corporal da doadora nos resultados da PIV. No entanto, a produção de blastocistos por sessão foi superior (5,65±1,02 vs. 3,78±0,97) nas vacas que sofreram ablação do folículo dominante (p<0,05). No EXP 2 foram avaliadas 363 aspirações de 85 doadoras fertilizadas com 23 touros diferentes que geraram 6.084 oócitos viáveis, 2.537 embriões, 1.105 gestações... / Zebu breeds (Bos taurus indicus) and its crosses have an essential role on the Brazilian cattle industry, and the Gyr breed, especially, incorporates hardiness and productivity onto its dairy descendants. The in vitro production of bovine embryos is a biotechnique of high economic value, which, combined to the use of sex-sorted semen bearing X chromosomes, allows for the multiplication of superior genetic value dams. Two experiments were conducted to evaluate the in vitro production (IVP) of embryos from Gyr donor cows at the EPAMIG Research Farm in Uberaba, MG, Brazil. Experiment 1 (EXP 1) aimed to verify the effect of ablation of the dominant follicle on IVP results. In experiment 2 (EXP 2), the effects of season, donor age, mitochondrial DNA and sire on IVP were studied. In EXP 1, 42 multiparous and primiparous cows underwent ovum pick up (OPU) after removal (65 OPU sessions- DFR) or non removal (115 OPU sessions- Control) of the dominant follicle 3 days before aspiration, starting from 15 days postpartum at approximately 21 day-intervals. Of the 180 OPU sessions performed, 3,884 viable oocytes were collected, which resulted in 1,114 blastocysts. The overall average numbers of oocytes aspirated and viable blastocysts per session were 20.0 ± 10.6 ± 4.9 and 5.70, respectively. OPU session, parity, calving to OPU interval and donor body condition did not influence IVP results. However, the production of blastocysts per session was higher (5.65 ± 1.02 vs. 3.78 ± 0.97) in DFR-cows (P <0.05). In EXP 2, a total of 363 OPU sessions from 85 donors was studied. Semen from 23 different bulls was used for in vitro fertilization, yielding 6,084 viable oocytes, 2,537 embryos and 1,105 pregnancies overall. Thirty and sixty-day day pregnancy rates after embryo transfer were 41.7% and 39.5%, respectively... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-01-11Bitstream added on 2014-06-13T19:05:28Z : No. of bitstreams: 1 motheo_tf_dr_jabo.pdf: 1420704 bytes, checksum: de5c6be1107a0e6fcda8a993e1569d8c (MD5) / Relativamente ao uso de técnicas de reprodução assistida em canídeos, a maturação e a fertilização in vitro (MIV) e (FIV), tem como principal objetivo a preservação do genoma dos canídeos ameaçados de extinção. Entretanto, os meios de cultivo empregados para maturação são adaptações de metodologias adotadas para outras espécies. Inúmeros estudos avaliaram a suplementação dos meios com gonadotrofinas, estrógeno, progesterona, antioxidantes, proteínas e entre outros, porém, nenhum deles releva a ação seriada de hormônios sobre a maturação de oócitos caninos. Deste modo, o objetivo do presente estudo foi o de avaliar os efeitos da suplementação seriada do meio de maturação com gonadotrofina coriônica humana (hCG) e progesterona (P4), em diferentes momentos do processo de MIV de oócitos caninos. Vinte e três cadelas, com idades entre 1 a 7 foram selecionadas por meio de citologia vaginal, dosagem de progesterona e agrupadas em dois grupos: Fase Folicular (n=12) e Fase Não FolicularDiestro (n=11). Os ovários foram obtidos durante o procedimento de ovariohisterectomia (OH) e somente complexos cumulus-oócito (COCs) grau 1 e diâmetro superior a 120 μm foram selecionados. A avaliação foi feita por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV) e transmissão (MET), antes e após o período de cultivo in vitro por 96h em 5 meios: I (hCG + P4 durante 96 h), II (hCG nas primeiras 48 h de MIV), III (hCG nas primeiras 48h e P4 após 48h), IV (P4 após 48h de MIV) e V (sem suplementação durante 96h de MIV). Os resultados revelaram que a morfologia, assim como a ultraestrutura oocitárias não são afetadas pela fase do ciclo estral. Entretanto, oócitos da fase folicular quando submetidos ao processo de MIV em meios suplementados com hormônios são mais sensíveis e responsivos a sua ação, quando comparados... / On the use of assisted reproduction techniques in dogs, in vitro, maturation (IVM) and fertilization (IVF) has the main goal to preserve the genome of endangered canids. However, the culture media used for maturation are adapted from those used in other species. Numerous studies evaluated the supplementation with gonadotropins, estrogens, progesterone, antioxidants and proteins on the IVM media, however none of them assessed the effects of a bi-phasic human chorionic gonadotropin (hCG) and progesterone (P4) supplementation on in vitro maturation media of canine oocytes. Thus, the aim of the present study was to evaluate the effects of a bi-phasic system using human chorionic gonadotrophin (hCG) and progesterone (P4) on IVM media of canine oocytes. Twenty-three female dogs, including 12 from follicular phase (FF) and 11 from non-folicular phase (FN) aged 1-7 years underwent ovariohysterectomy (OH). After the procedure, the ovaries were sliced and cumulus-oocyte complexes (COCs) released. Only COCs grade 1, with diameter greater than 120 μm were selected. Scanning electron microscopy (SEM) and transmission (TEM) were carried out before and after 96h of in vitro maturation (IVM) in 5 different culture media: I (TCM-199 + hCG + P4 for 96 h), II (TCM -199 + hCG within 48h of IVM), III (TCM-199 + hCG in the first 48h and after 48h P4), IV (TCM-199 + P4 after 48h of IVM) and V (no hormone supplementation during 96h of IVM. The results revealed that the oocyte morphology and ultrastructure are not affected by the phase of the estrous cycle. However, follicular phase oocytes undergoing IVM are more sensitive and responsive to hormonal supplementation of the IVM media when compared to oocytes from the non-follicular phase. The association or the bi-phasic human chorionic gonadotropin (hCG) and... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-08-15Bitstream added on 2014-06-13T19:05:29Z : No. of bitstreams: 1 assaf_ss_dr_botfmvz.pdf: 407133 bytes, checksum: 8fe91af8256db3240cd15b87f06d8c5f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Uma variedade de fatores extrinsecos como ions organicos, tampoes, composicao atmosferica gasosa, aminoacidos, fatores de crescimento, vitaminas, a acao de proteinas e macromoleculas desconhecidas podem afetar a viabilidade embrionaria. A implantacao de um sistema artificial de manutencao e desenvolvimento embrionario que simule um ambiente compativel com o fisiologico ainda e o objetivo de diversos grupos de pesquisa. O tamponamento dos meios e dependente da composicao gasosa da atmosfera de cultivo e o desenvolvimento embrionario, principalmente na fase de cultivo, sofre com as variacoes de pH verificadas durante as manipulacoes realizadas fora da estufa. Os experimentos desenvolvidos tiveram como objetivo avaliar diferentes sistemas de tamponamento para os meios de cultivo, comparando-os entre si quanto a capacidade de proporcionarem maior estabilidade de pH aos embrioes produzidos in vitro. As modificacoes propostas na composicao dos meios de cultivo foram avaliadas em duas atmosferas gasosas. Um total de 3200 ovocitos foram maturados em gotas de 100 ÊL cobertas com oleo mineral por periodo de 24 horas, agrupados em numero de 20 ovocitos por gota de meio TCM-199 com sais de Hankfs (Sigma Aldrich.), acrescido de 0,5 Êg/mL de FSH e 0,03 UI/mL de LH, 10% SFB, 20mM HEPES e antibioticos. Apos a fertilizacao, os possiveis zigotos foram submetidos ao cultivo e distribuidos de acordo com os seguintes tratamentos (T): T1: grupo controle com sistema tampao de bicarbonato de sodio do meio HTF Irvine Scientific. acrescido de aminoacidos; T2: meio SOFaa com sistema tampao composto de 25 mM de bicarbonato de sodio; T3: meio SOFaa modificado pela associacao do sistema tampao com 9 mM de bicarbonato de sodio e 4 mM de HEPES e T4: meio SOFaa modificado pela associacao do sistema tampao com 9 mM de bicarbonato de sodio e 12 mM de fosfato de sodio. Os embrioes dispostos nos / A variable interation of intrinsic and extrinsic factors such as organics ions, buffers, atmosphere composition, aminoacids, growth factors, vitamins, proteins and other unknown components may play an important role increasing the developmental potential of in vitro produced bovine embryos. The importance of the development of an artificial system to maintain embryo viability, similar and comparable with physiologic environment, has been the objective of several studies. Therefore, the majority of those studies that focus on culture media formulations were based on the physiology of in vivo produced embryo. However, the development of commercial protocols that ensure embryo quality after in vitro production (IVP) demands some adaptations while considering the differences between in vivo and in vitro produced embryos. Media buffering depends on the gaseous atmosphere utilized during culture and embryo development is sensitive to pH variation during culture, especially in manipulations in the bench. The aim of the present study was to investigate the effect of different buffer systems in the pH stability of culture medium and in the developmental capacity of IVP embryos. 3200 COCs were cultured for 24h, using 20 oocytes per 100£gL droplet in TCM 199 (with HanksLOEsalts: Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA), containing 10% fetal bovine serum, 20mM HEPES and antibiotics under sterile paraffin oil. After fertilization, the zygotes were cultivated according with treatments (T): T1- control group with NaHCO3 (sodium bicarbonate) in medium HTF Irvine ScientificãÊ; T2- group with 25 mM NaHCO3 in medium SOFaa; T3 LV group with 9mM NaHCO3 and 4 mM HEPES in medium SOFaa and T4 LV group with 9mM NaHCO3 and 12 mM sodium phosphate in medium SOFaa. The embryos were exposed in two ambient: atmosphere with 5% CO2 + 5% O2 + 90% N2 at 39ØX C ...(Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-17Bitstream added on 2014-06-13T19:05:47Z : No. of bitstreams: 1 costa_cgpr_dr_botfm.pdf: 1744933 bytes, checksum: d90abe2ebd4b5e05246936b2f56031cd (MD5) / Nas últimas décadas, alguns parâmetros laboratoriais têm sido propostos para identificar o potencial de saúde oocitária em Reprodução Assistida: 1. Maturidade nuclear e citoplasmática (pesquisa); 2. Dismorfismo (anomalias intracitoplasmáticas); 3. Fertilizaçao. Habitualmente, esses parâmetros (exceto a maturação citoplasmática) são avaliados pelo simples emprego de sistemas de microscopia de luz convencional. Nos últimos oito anos, foram relatados diversos estudos em oócitos humanos sobre a birrefringência da zona pelúcida (BF-ZP), a espessura da ZP, e a visualização do fuso meiótico (FM). Entretanto, ainda é discutível o poder desses novos parâmetros na seleção de óvulos com o pontecial de originar embriões com taxas de implantação elevadas, além disso, seu sistema de visualização e quantificação é complexo e dispendioso. O objetivo deste estudo foi investigar uma possível correlação entre esses parâmetros tradicionais com a BF-ZP, espessura da ZP e o FM. Dessa forma, um total de 73 pacientes que participaram do programa de injeção intracitoplasmática de espermatozóide (ICSI) no Centro de Reprodução Humana “Prof Franco Júnior” tiveram seus óvulos avaliados quanto a maturação nuclear (n=83), maturação citoplasmática (n=29), dismorfismo (n=280) e fertilização (n=216) sendo os resultados correlacionados com a imagem do FM (presença ou ausência), a intensidade da BF-ZP (positiva ou negativa) e a espessura da ZP. Os dados finais revelaram uma fraca correlação entre a maturação, o dismorfismo e a fertilização oocitária com a imagem do FM, a intensidade da BF-ZP, e a espessura da ZP. Entretanto, esses parâmetros poderiam ser responsáveis por identificar pontos biológicos diferentes do potencial de qualidade oocitária. Assim sendo, seria uma medida coerente, a utilização desses parâmetros, em forma conjunta, através de um escore de qualidade oocitária. / During the last decades, three laboratorial parameters have been proposed to identify the potential of the oocyte quality in ART: 1- Nuclear and cytoplasmic maturation; 2-Dysmorphims (intracytoplasmic abnormalities); 3 - Fertilization. These parameters (except the cytoplasmic maturation) are assessed by a simple system of conventional light microscopy. In the last eight years, numerous studies about zona pellucida birefringence (BF-ZP), zona pellucida thickness and meiotic spindle visualization have been reported. However, it is still controversial the power of these parameters in selecting oocyte with potential to develop into implantation-competent embryos. Furthermore, the microscopy system is complex and expensive. The present study aims to evaluate whether there is any correlation between the classical parameters with BF-ZP, ZP thickness and spindle image. A total of 73 patients who participated in an ICSI program had their oocytes evaluated such nuclear maturation (n=83), cytoplasmic maturation (n=29), dysmorphism (n=280) and fertilization (n=216) being its results correlated to the spindle image (presence or absence), BF-ZP intensity (positive or negative) and ZP thickness. The final results showed a low correlation between maturation, dysmorphism and fertilization compared to spindle image and ZP characteristics (BF-ZP, ZP thickness). However, these factors can be responsible to identify specific biological differ from the oocyte potential. Concluding, the use of these factors in association, as a score (oocyte quality score), could be the correct evaluation.

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-07-28Bitstream added on 2015-05-14T16:59:08Z : No. of bitstreams: 1 000823842_20160728.pdf: 48543 bytes, checksum: 0a0e4c6e3217335eb5c3eedceb8b2a73 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-07-29T12:53:53Z: 000823842_20160728.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-29T12:54:47Z : No. of bitstreams: 1 000823842.pdf: 2103625 bytes, checksum: bf645c43dd091bc121630fa032a1e708 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Objetivou-se com este estudo comparar os efeitos da congelação lenta vs vitrificação sobre a viabilidade, ultraestrutura e expressão gênica de blastocistos caninos produzidos in vivo. A coleta dos embriões foi realizada por lavagem uterina 12 dias após a primeira IA. A congelação lenta foi realizada em máquina programável e a vitrificação pela técnica do cryotop. O cultivo in vitro (CIV) foi realizado por 24 horas, em meio SOFaa acrescido de 20% de soro fetal bovino. A reexpansão embrionária foi avaliada 24 horas após a CIV e a viabilidade embrionária avaliada com o uso das sondas Hoscht 33342 e Iodeto de propídeo. A extração e amplificação do RNA foram realizadas segundo recomendações do fabricante. Foram utilizados 70 blastocistos separados nos grupos Co, Co24, Cg, Cg24, Vi e Vi24. No experimento I foram utilizados 34 embriões. Não foi evidenciada reexpansão da blastocele após 24 horas de CIV nos grupos Cg24 e Vi24, já no grupo Co24, 100% dos embriões reexpandiram. Não foi verificada diferença na intensidade da fluorescência do Hoescht entre os grupos Co, Cg e Vi, em ambos os momentos de avaliação, 0 e 24 horas. Quando comparada a intensidade do iodeto de propídeo (IP) foi observada diferença significativa entre o grupo Co em relação aos grupos Cg e Vi, independente da metodologia de criopreservação. Observou-se uma redução na quantidade de gotas lipídicas após 24 horas de CIV comparando-se os grupos Co e Co24. No grupo Vi foram observadas mitocôndrias alongadas, integridade da membrana dos blastômeros e nuclear, reticulo endoplasmático liso, vesículas de digestão, microvilosidades, junções do tipo tight e desmossomas. No Experimento II, foram utilizados 36 embriões para a avaliação da expressão gênica. Todos os genes estudados, com excessão do LIF, foram expressos. Entretanto, não houve diferença na expressão dos genes BAX, Bcl2, AQP3, Na+/K+-ATPases α1, Na+/K+-ATPases β1 e ... / The purpose of this study was to compare the effects of slow freezing versus vitrification in canine embryo produced in vitro: viability, ultra structure and gene expression. Embryos collection was performed using uterus flush technique 12 days after the first AI. For slow freezing protocol we used a programmed machine and vitrification was performed using cryotop. In vitro culture (IVC) was conducted for 24 hours using SOFaa added with 20% of fetal bovine serum. Embryo expansion was evaluated 24 hours after in vitro culture (IVC) and embryo viability was evaluated using Hoscht 33342 and iodine propidium (PI). Extraction and amplification of the RNA was performed according to manufacturer recommendations. We used 70 blastocysts divided in groups: Co, Co24, Cg24, Vi and Vi24. In experiment I 34 embryos were used. No blastocoele expansion was observed after 24 hr of IVC in groups Cg24 and Vi24, however 100% of embryos expanded in Co24. No difference was observed in Hoescht staining intensity between Co, Cg and Vi groups, which were observed at the 0 and 24 hr periods. The iodine propidium (PI) intensity in Co was different when compared to Cg and Vi, independent of the cryopreservation method used. A reduction in the quantity of lipid drops was observed after 24 hr of IVC when comparing groups Co and Co24. In group Vi, elongated mitochondria, membrane and nuclear integrity of blastomere, smooth endoplasmic reticulum, vesicle digestion, microvilli, tight junctions and types of desmosomes were observed. In experiment II, 36 dog embryos were used for gene expression evaluation. All studied genes, except LIF were expressed. However no difference between gene expression of BAX, Bcl2, AQP3, Na+/K+-ATPases α1, Na+/K+-ATPases β1 and LIFr were observed at 0 and 24h in all groups. We concluded that the vitrification technique was the best method to cryopreserve canine embryo when we observe ultrastructure. However, it was not possible ... / FAPESP: 11/08798-6

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-19Bitstream added on 2015-05-14T16:59:08Z : No. of bitstreams: 1 000828398_20151120.pdf: 49172 bytes, checksum: 37877bd4281c51b89052cc8b1594b906 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-11-27T16:10:05Z: 000828398_20151120.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-11-27T16:10:44Z : No. of bitstreams: 1 000828398.pdf: 549205 bytes, checksum: c1d0695fe73602a07a20eab8411b29e4 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / BEPE-Itália / Esta pesquisa visou avaliar o perfil de expressão de determinados genes e o potencial de desenvolvimento in vitro de complexos cumulus-oócitos (COCs) de ovinos temporariamente bloqueados no estadio de vesícula germinativa (GV) com uso da roscovitina. Neste contexto, diferentes composições de meio (com e sem soro fetal bovino e gonadotrofinas), tempos (0, 6, 12 e 20 horas) e métodos de cultivo (com e sem cobertura de óleo mineral) foram testados com intuito de garantir a máxima eficiência de inibição meiótica promovida pela roscovitina a 75μM. A avaliação do grau de expansão das células do cumulus, em estereomicroscópio, e do estadio da maturação nuclear, por meio da coloração com Hoescht 33342, revelou que a presença ou ausência de LH, FSH e soro fetal bovino não interferiu no potencial de ação da roscovitina. No entanto, máxima eficiência inibitória foi observada em meio suplementado apenas com soro fetal bovino. Foi constatado ainda que, na ausência de óleo mineral, quantidade significativamente maior de oócitos tratados com roscovitina foi mantida em GV o que reforça a hipótese de lipossolubilidade do referido inibidor. Embora o potencial de inibição meiótica da roscovitina tenha se mantido nos diferentes tempos de cultivo, a exposição prolongada dos COCs ao inibidor afetou de maneira irreversível a expansão do cumulus. Em todas as situações, a inibição meiótica foi completamente reversível após cultivo por 18 horas em meio de maturação livre de inibidor. Sendo assim, para análise da expressão gênica e desenvolvimento embrionário in vitro, foi preconizado o tratamento com roscovitina a 75μM por 6 horas na presença de soro e sem óleo mineral. Nestas condições assim como após a reversibilidade por 18 h, a quantidade relativa da maioria dos genes investigados nas células do cumulus e nos oócitos foi similar ao observado nos COCs não inibidos (controle). Do mesmo modo, não foi ... / This study aimed to evaluate the expression profile of certain genes and the potential of in vitro development of sheep cumulus-oocytes complexes (COCs) temporarily arrested at germinal vesicle (GV) stage using roscovitine. In this context, different medium compositions (with and without fetal bovine serum and gonadotropins), times (0, 6, 12 and 20 hours) and methods of culture (with and without mineral oil overlay) were tested in order to ensure maximum efficiency of meiotic inhibition promoted by 75μM roscovitine. The evaluation of cumulus expansion degree, under stereomicroscope, and nuclear maturation stage, by staining with Hoechst 33342, revealed that the presence or absence of LH, FSH and fetal bovine serum did not influence the action potential of roscovitine. However, maximum efficiency of meiotic inhibition was observed in medium supplemented with fetal bovine serum. It was also found that, in the absence of mineral oil overlay, significantly higher quantity of oocytes treated with roscovitine was kept at GV, which reinforces the hypothesis of liposolubility of this inhibitor. Although the potential of meiotic inhibition of roscovitine had remained at different culture times, the prolonged exposure of COCs to inhibitor irreversibly affect the cumulus expansion. In all cases, the meiotic arrest was completely reversible after culture for a further 18 h in inhibitor-free medium. Therefore, for analysis of gene expression and in vitro embryo development, it was chosen the treatment with 75μM roscovitine for 6 h under serum-supplemented medium and without mineral oil overlay. Under these conditions as well as after the reversibility for 18 h, the relative amount of most investigated genes in cumulus cells and oocytes was similar to that observed in the uninhibited COCs (control). Similarly, no difference was found between roscovitine treatment and control with respect to blastocyst rate and quality of embryos obtained. Therefore, ... / FAPESP: 2011/14041-5 / BEPE-Itália: 2013/05564-0

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:33:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-01-31. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:41Z : No. of bitstreams: 1 000825978.pdf: 1105303 bytes, checksum: 69de883b09fa7b7a10620c4e1972b8d6 (MD5)

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-22. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:46:51Z : No. of bitstreams: 1 000829142.pdf: 545936 bytes, checksum: 8445029d31c7d5b839978c68eea25bd2 (MD5) / A adubação de implantação florestal pode favorecer o crescimento inicial e o estabelecimento das árvores em um reflorestamento. Corymbia citriodora é uma das espécies madeiráveis mais plantadas no Brasil para diversos fins comerciais. Foram conduzidos experimentos em condições de campo com objetivo de verificar os efeitos de doses de fósforo e potássio no crescimento, concentração dos nutrientes nas folhas e produção de biomassa de madeira de C. citriodora na fase de implantação. No experimento de fósforo foram aplicados 0, 10, 20, 30, 40 e 50 kg ha-1 de P2O5 no plantio e no experimento de potássio foram aplicados 0, 30, 60, 90, 120 e 150 kg ha-1 de K2O em três etapas, plantio, 3 e 6 meses de idade. Os experimentos foram realizados em Argissolo Vermelho Amarelo textura arenosa. As mudas foram plantadas no espaçamento de 3 x 2 m e o delineamento experimental foi de blocos ao acaso, com seis tratamentos e quatro repetições. Os resultados indicam que, após um ano da implantação, a aplicação de 30 kg ha-1 de P2O5 promoveu o maior crescimento das plantas e a maior produção de biomassa de madeira, possibilitando um incremento de 65% na produção de madeira em relação ao tratamento controle. No experimento de potássio, a aplicação de 90 kg ha-1 de K2O resultou em incremento de 75% na produção de madeira no primeiro ano / The forest fertilization at implementation can promote early growth and the establishment of trees in a reforestation. Corymbia citriodora is one of the most timber species planted in Brazil for several commercial purposes. Experiments were conducted under field conditions in order to verify the effects of phosphorus and potassium on growth, nutrient concentration of leaves, and production of C. citriodora wood biomass at the implementation phase. At the phosphorus experiment 0, 10, 20, 30, 40, and 50 kg ha-1 of P2O5 were applied at planting and at the potassium experiment 0, 30, 60, 90, 120, and 150 kg ha-1 of K2O were applied in three times: planting, 3 and 6 months of age. The experiments were performed in Argissolo Vermelho Amarelo (Ultisol). The seedlings were planted in 3 x 2 m spacing. The experimental design was the randomized block, with six treatments and four replications. The results indicated that after a year of implementation, the application of 30 kg ha-1 of P2O5 promoted greater plant growth and it increased the wood biomass production, allowing a wood increase of 65% when compared to the control. In the potassium experiment, the application of 90 kg ha-1 of K2O promoted an increase of 75% in wood production in the first year