A síndrome dos ovários policísticos atinge 5 - 10% das mulheres em idade fértil e mais de 40% destas pacientes apresenta obesidade e resistência insulínica, o que aumenta o risco para o desenvolvimento do diabetes mellitus tipo 2 (DM2). Numerosos genes poderiam contribuir para o desenvolvimento do DM2 e outras alterações metabólicas. Dentre estes o gene da calpaína-10 (CAPN-10), tem sido associado com DM2 em populações mexicanosamericanos, e em duas populações do Norte da Europa (Finlândia e Alemanha). No presente estudo analisamos o genótipo de 96 pacientes hiperandrogênicas reunidas em dois grupos: Síndrome dos ovários policísticos (PCOS) e Hirsutismo idiopático (HI), com relação à freqüência de quatro polimorfismos do gene da CAPN-10 (SNP-44, 43, 19 e 63). Foram ainda realizadas análises de associação entre a freqüência alélica dos polimorfismos e características clínicas das pacientes, com ênfase na obesidade e resistência insulínica A variação genética da CAPN-10 foi avaliada a partir do DNA genômico por amplificação pela Polimerase Chain Reaction (PCR) e PCR-aleloespecífico (Teste de AMRS) dos fragmentos que contém os polimorfismos do gene da CAPN-10. Nossos resultados mostraram que não houve diferença entre as freqüências genotípicas e alélicas dos SNPs 44, 43, 19 e 63 entre os grupos PCOS e HI. Por outro lado, a comparação das características clínicas dos dois grupos mostrou que o alelo Ins do SNP-19 da CAPN-10 tendeu a ser mais freqüente entre as pacientes PCOS estratificadas para sobrepeso e obesas (p≤0,05). Não houve diferença na comparação das características clínicas avaliadas e a freqüência alélica para os SNPs 43 e 63. A análise da amostra total de pacientes hirsutas, ou seja, pacientes com PCOS e HI agrupadas não evidenciou diferença entre a freqüência alélica das variantes genéticas estudadas para a CAPN-10 e a presença de resistência insulínica. Tendo em vista o efeito modesto dos SNPs 44, 43, 19 e 63 avaliados isoladamente nestas pacientes, estudos adicionais serão necessários avaliando a freqüência desses polimorfismos na população do Sul do Brasil.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Considerando que nos tempos atuais o hábito de fumar atingiu uma parcela significativa das adolescentes brasileiras e apesar de seus conhecidos efeitos deletérios sobre diversos órgãos, pouco se sabe da sua ação sobre os ovários. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da exposição à fumaça de cigarro sobre o ciclo estral e a morfologia ovariana. Para tal, foram utilizados camundongos da linhagem Swiss, cujo estudo teve início com o estudo do perfil das características da maturação sexual. Após o desmame, aos 21 dias de idade, a partir da abertura vaginal, o 1 estro e o início da ciclicidade foram acompanhados através da citologia vaginal. As características do ciclo estral foram determinadas no decorrer de doze semanas. O efeito da exposição à fumaça de cigarro 3R4F utilizou fêmeas Swiss de 35 dias de idade que foram subdivididos em dois grupos expostos à fumaça de cigarro (grupo 15E) e animais controles livres de fumaça (grupo 15C). A exposição ocorreu por 15 dias e ao final deste período, metade dos animais de cada grupo foi sacrificada e ovários direitos foram coletados. A outra metade permaneceu em observação durante 30 dias, sem exposição à fumaça, originando os grupos 45Ex e 45C. A citologia vaginal foi avaliada durante todo o período experimental. Ao final dos 30 dias, sangue e ovários direitos foram coletados. Estes foram pesados e processados por técnica de rotina histológica para análise morfológica. A caracterização dos eventos da puberdade estabeleceu o tempo de abertura vaginal com média de 33,60,24 de idade, o primeiro estro 39,42,58 dias de idade e o início da ciclicidade, com média de 39,51,19 dias de idade, concomitante com o primeiro estro. Além disso, os ciclos estrais apresentaram períodos de cinco dias com freqüência baixa da fase diestro. Com relação à exposição da fumaça de cigarro ocorreu aumento significativo na extensão dos ciclos estrais e uma forte tendência ao aumento de estros nos animais 45Ex, apesar de não ser significativa. O número e o diâmetro de folículos grandes foram maiores no 15E, enquanto o de corpos lúteos foi menor. Em relação ao grupo 45C, o 45Ex não se alterou, porém, mostrou uma discreta redução da massa ovariana, do número de folículos pequenos, do número e do diâmetro dos folículos médios, dos corpos lúteos e aumento de folículos atrésicos. A comparação entre controles, 15C e 45C e expostos, 15E e 45Ex, mostrou uma redução no diâmetro de folículos médios e grandes. O estudo do perfil das características reprodutivas de fêmeas Swiss é indispensável para modelos experimentais em pesquisa que fazem uso desta linhagem. Permitiu verificar que a exposição à fumaça de cigarro promove alteração do ciclo estral, da massa ovariana e antecipa alterações morfológicas tempo dependente que sinaliza a finalização da vida reprodutiva / Nowadays greater number of Brazilian young women are smokers, and it is troubling because in their reproductive prime are the fastest growing population of smokers. Despite the fact that cigarette smoke is a well established health hazard, and systemic diseases are already well recognized, the potential deleterious effects on ovaries must be more investigated. Therefore, the aim of this study was to evaluate the effects of exposure to cigarette smoke on the estrous cycle and ovarian morphology. To this end, female Swiss mice were used, whose protocols were previously provided for the timing of three pubertal events and determination of the estrous cycle phases in this strain. Weanlings were examined daily and the date of vaginal opening was recorded. Daily vaginal lavages were begun on the day of vaginal opening and continued for the duration of the study. The onset of first cornification and cyclicity were measured. Animals were then observed for a total of 12 weeks. The ovarian effects of smoke exposure from cigarette 3R4F were studied in female Swiss mice (35 days old) for 15 day - 15E group. The control group (15C) stead in absence of smoke. At the end of this time, part of the animals in each group was sacrificed and right ovaries were collected. The others remained under observation for 30 days without exposure to smoke (45Ex group). The vaginal smear was determined throughout the experimental period. Ovaries were weighed and fixed for standard histology. The protocol provided a vaginal opening at 33,60,24 days old, the onset of first cornification at 39,42,58 days of age and the onset of cyclicity at 39,51,19 days old, concomitant with the appearance of first estrus. Furthermore, the estrous cycles were equal to 5 days in length. The less predominant smear type was diestrus. The length of estrous cycles increased significantly in mice exposed to cigarette smoke and estrus smear was more frequent. The number and diameter of large follicles were higher in 15E, while the corpora lutea was less frequent. The 45Ex group showed a decreasing trend of the ovarian weight, number of small follicles, the number and mean diameter of follicles, corpora lutea and the increase of atretic follicles. Comparison between controls and exposed animals throughout the time, showed a reduction in mean diameter of medium and large follicles. The protocols provided in this unit are indispensable for experimental research involving the reproductive system and the influence of the estrous cycle on non-reproductive functions in Swiss mice. The findings show that exposure to cigarette smoke results in alteration of the estrous cycle, ovarian weight and predict time dependent morphological changes that are signals of the end of reproductive life

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A superalimentação pós-natal é um fator de risco para a obesidade, assim como para distúrbios cardiovasculares e metabólicos associados. Sabe-se que ratos criados em ninhadas reduzidas desenvolvem sobrepeso, hiperfagia, hiperleptinemia e hipertensão arterial quando adultos. Como o exercício físico crônico tem efeito benéfico em indivíduos obesos, propomos avaliar o efeito do treinamento em esteira em animais adultos obesos programados pela superalimentação pós-natal. No 3 dia de lactação, dividimos as ratas lactantes em 2 grupos: Controle (C) - ninhada composta por 10 filhotes (6 machos e 4 fêmeas) e Supernutrido (S) - ninhada ajustada para 3 filhotes machos. Após o desmame, os filhotes de ambos os grupos foram alimentados com ração comercial. Aos 75 dias de vida, as proles foram subdivididas em 4 grupos: 1) Controle Sedentário (CS), 2) Controle Exercício (CE), 3) Supernutrido Sedentário (SS) e 4) Supernutrido Exercício (SE), quando realizamos um teste máximo em esteira para a prescrição do treinamento. A partir dos 90 dias de vida, os ratos CE e SE foram treinados na esteira (60 min/dia, 5 dias/semana, velocidade média de 50 a 65 % do teste agudo máximo feito em esteira) até os 180 dias. Aos 90 e 180 dias, realizamos o teste agudo de natação nos 4 grupos experimentais. Em comparação ao grupo SS, o grupo SE aos 180 dias de idade apresentou menor MCT, adiposidade corporal (central e total), leptinemia e corticosteronemia. Estes animais apresentaram normalização da ingestão alimentar, do conteúdo de proteína corporal total, do HDL-c e da pressão arterial, além de aumento do glicogênio hepático, da CAT e da capacidade física no teste exaustivo de nado. Assim, sugerimos que o exercício físico crônico em esteira foi capaz de alterar diversos parâmetros deletérios associados à síndrome metabólica observados nos animais adultos obesos neste modelo de programação. / Postnatal early overnutrition is a risk factor for future obesity and metabolic disorders. Rats raised in small litters develop overweight, hyperphagia, hyperleptinemia and hypertension when adults. As chronic exercise brings well-known benefits to obese individuals, we studied the effects of training on a treadmill in adult obese rats programmed by overfeeding during lactation. To induce postnatal early overnutrition, litter size was reduced to 3 pups/litter (SL: small litter) and the groups with normal litter size (10 pups/litter) were used as control. Rats had free access to standard diet and water post weaning. At 75 days-old, animals were divided into: sedentary control (SC), trained control (TC), sedentary overfed (SO) and trained overfed (TO). We performed a test of speed to obtain the physical training prescription. From 90 until 180 days-old, TC and TO rats were trained (60min/day, 5days/week with mean speed from 50 to 65% of the acute test on a treadmill). At 90 and 180 days-old, the four experimental groups were tested for physical performance in swimming. Compared to SO, TO group at 180 days-old showed lower body weight, body adiposity (central and total), leptinaemia and corticosteronaemia. These rats presented normal values for food intake, body total protein content, HDL-c and systolic blood pressure. In addition, TO offspring displayed higher liver glycogen, total antioxidant capacity and physical capacity in the acute swimming test. Thus, we evidenced that the physical training on a treadmill was useful for revert or improve some deleterious parameters associated with metabolic syndrome observed in obese rats programmed by early postnatal overfeeding.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A Linhaça (Linum Usitatissimum) apresenta diversas substâncias com alegados efeitos benéficos que diminuem a obesidade, glicemia e corrigem a dislipidemia, protegendo o sistema cardiovascular. Neste trabalho objetivamos avaliar o efeito da suplementação materna com linhaça durante a lactação sobre a composição corporal, a homeostase glicêmica, lipídica e protéica, a leptinemia, adiponectinemia e insulinemia, a função tireoideana e a via de sinalização da leptina no eixo hipotálamo-hipófise-tireóide da prole aos 21 e 180 dias de vida. As ratas lactantes foram separadas em dois grupos: controle (C) - recebendo ração a base de caseína (20%) e linhaça (L) recebendo ração suplementada com 25% de linhaça, contendo 18,9% de proteína (sendo 13,9% de caseína e 5% de linhaça) durante a lactação. O sacrifício das proles ocorreu aos 21 e 180 dias de idade, para determinação de: glicemia, albuminemia, proteínas totais, hematócrito, hemoglobina, colesterol total e triglicerídeos, insulina, leptina, adiponectina, TSH, T4 livre e T3 total. Os animais foram completamente eviscerados para obtenção da carcaça e análise da composição corporal. O consumo alimentar e a massa corporal (MC) foram aferidos diariamente durante a lactação e de 4 em 4 dias após a lactação até a idade adulta. As ratas lactantes do grupo L não apresentaram diferença na massa corporal e consumo alimentar. Durante a lactação a prole L apresentou maior ganho de peso corporal e após ao desmame observamos um aumento transitório de massa corporal até a idade adulta. Aos 21 dias, observamos na prole do grupo L menor gordura total e subcutanea, colesterol total, triglicerideo, albumina, insulina, T3 total e atividade de D1 no fígado; e aumento da área dos adipocitos no tecido subcutaneo, leptina, TSH e expressão de Ob-R, STAT3 e p-STAT3 na hipofise (p<0,05). Aos 180 dias, o grupo L apresentou menor glicemia, adiponectina, T4 livre, atividade de D1 e D2 na tireóide; e aumento da área dos adipocitos no tecido adiposo visceral e subcutâneo, insulinemia, expressão de Ob-R na tireóide e atividade de D2 no tecido adiposo marrom (p<0,05). Concluímos, a partir destes dados, que o uso de linhaça durante a lactação afeta a composição corporal, perfil lipídico, a homeostase glicêmica e a função tireóidea. Esta impressão metabólica e hormonal, na lactação, programa para alterações na adiposidade, possível resistência insulínica e disfunção tireóidea. Desta forma, seu uso deve ser visto com cautela durante o período de amamentação. / Flaxseed (Linum usitatissimum) presents high number of substances with beneficial effects that reduce obsesity, blood glucose and dyslipidemia, protecting the cardiovascular system. We aimed to evaluate the maternal flaxseed diet during lactating upon body composition, glucose homeostase, lipid and protein, leptinemia, adiponectinemia and insulinemia, thyroid function, and leptin signaling pathway in the hypothalamus-pituitary-thyroid axis in the offspring at 21 and 180 days old. Lactating rats were divided into: (1) Controls (C), diet containing 20% casein; (2) Flaxseed (F), diet with additional 25% of flaxseed, containing 18.9% protein (13.9% from casein and 5% from flaxseed). The offspring were sacrificed at 21 and 180 days of age to determinate: glycemia, albumin, leptin, adiponectin, TSH, free T4 and total T3. The animals were completely eviscerated to obtain the carcass by body composition analysis. The maternal food intake and body mass were measured daily during the lactation, and after weaning were monitored once every 4 days until they were 180 days old. The dams of F group presented no changes in body mass and food intake. During the lactation the F offspring showed higher body mass and after weaning they presented a higher transitory body mass until 180 days old. At 21 days old, F group showed lower total and subcutaneous fat mass, total cholesterol, triacylglycerol, albumin, insulin, total T3 and D1 liver activity; and higher subcutaneous adipocytes area, leptin, TSH and Ob-R, STAT3 and p-STAT expression in pituitary (p<0,05). At 180 days old, F group presented lower glycemia, adiponectin, free T4 and D1 and D2 activity in thyroid; and higher visceral and subcutaneous adipocytes area, insulin, Ob-R expression in thyroid and D2 activity in brown adipose tissue (p<0,05). In conclusion, maternal flaxseed diet during lactation affects body composition, lipid profile, glucose homeostasis and thyroid function. The metabolic and hormonal impression in lactation programs for changes in adiposity, insulin resistance and possible thyroid dysfunction. Thus, flaxseed use should be viewed with caution during breastfeeding.

Os benefícios à saúde relacionados ao consumo moderado de vinho incluem diferentes mecanismos, nos quais estão envolvidos tanto etanol quanto compostos fenólicos que são constituintes do mesmo. Com o objetivo de avaliar variações glicêmicas, ponderais e o depósito de triglicérides, colesterol e glicogênio hepáticos com uso regular de vinho tinto em camundongo ApoE Knockout, foram utilizados 60 camundongos machos adultos ApoE Knockout de peso médio de 30 gramas, distribuídos em três grupos de 20 animais: grupo vinho, grupo etanol e grupo água, os quais receberam 50 mL de vinho e 50 mL água, 6mL de etanol e 94mL de água e somente água respectivamente por quatro meses. Os parâmetros avaliados foram: variações glicêmicas, ponderais, acúmulo de triglicerídeos, colesterol e glicogênio hepáticos. O grupo vinho teve em relação a sua massa corporal uma área sob a curva maior que a dos outros dois grupos, mas com um percentual pequeno de aumento. A concentração do triglicerídeo hepático foi maior no grupo vinho 57% em relação ao grupo etanol, que foi 31,6% menor que o controle (p<0,01%). A concentração do colesterol hepático foi menor no grupo vinho (23,6%), assim como no grupo etanol (24,5%), (p<0,05%). A concentração do glicogênio hepático foi maior no grupo vinho (16%), porém não alcançando significado estatístico. A glicemia em jejum no dia da eutanásia foi maior no grupo etanol em relação aos demais grupos, porém não demonstrou diferença estatisticamente significante. Na análise histológica não foi observada diferença significativa entre os grupos, embora o peso médio em gramas nas gorduras, retroperitoneal e subcutâneas tenha sido aproximadamente duas vezes maior no grupo vinho. Concluiu-se que neste estudo o uso regular e crônico de vinho tinto aumentou triglicerídeo hepático, porém o álcool diminui o colesterol hepático. O aumento do triglicerídeo pode ser devido ao alto valor calórico do vinho ou alguma propriedade lipogênica desconhecida que levou ao aumento importante das gorduras retroperitoneais e subcutâneas em camundongos ApoE Knockout. / The benefits to health related to regular consume of red wine includes different mechanisms in which are involved both ethanol and fenolics compounds of the wine. With the objective to evaluate glycemia, lipid profile and weight variations with regular use of red wine by ApoE Knockout mices, sixty adults ApoE Knockout mices weighing around 30g were distributed into 3 groups of 20 animals each: 1.Wine that received 50mL of wine plus 50mL of water, 2. Ethanol and Water groups, 6mL of ethanol plus 94mL of water and just water respectively for 4 months. We evaluate glycemia, weight variations and liver glycogen, triglycerides and cholesterol. The wine group had in relation to its mass body an area under the curve larger than the other two groups, but with a small percentage of increase. The concentration of liver triglycerides was higher in the wine 57% compared to ethanol group, which was 31.6% lower than the control (p<0.01%). The concentration of liver cholesterol was lower in wine (23.6%) and in ethanol group (24.5%) (p<0.05%). The liver glycogen concentration was higher in the wine (16%), although not reaching statistical significance. The fasting glicemia on the day of euthanasia was higher in the ethanol group compared to other groups, but not statistically significant difference. In histological analysis was not significantly different between groups, although the average weight in grams fat, retroperitoneal and subcutaneous was approximately two times higher in the wine group. It was concluded that in this study the regular and chronic use of red wine increased liver triglyceride, however alcohol decreases liver cholesterol. The increase of the triglyceride may be due to the high caloric value of wine or some lipogenic unknown property that led to an important increase in retroperitoneal and subcutaneous fat tissue in ApoE Knockout mice.

Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / Crianças de mães fumantes são mais suscetíveis a se tornarem adultos obesos e se viciarem em drogas ou alimentos palatáveis. Drogas e alimentos ativam a via mesolímbica de recompensa, causando sensação de prazer que induz ainda mais o consumo. Assim, avaliamos a relação entre a exposição apenas à nicotina ou à fumaça do cigarro durante a lactação com a preferência alimentar e sistema dopaminérgico de recompensa cerebral das proles, em dois modelos de programação: Modelo I: no 2o dia pós-natal (PN), lactantes receberam implante de minibombas osmóticas que liberam nicotina (NIC) ou salina (C), durante 14 dias. Em PN150 e novamente em PN160, as proles foram divididas em 4 grupos para um desafio alimentar: N-SC e C-SC que receberam ração padrão; N-SSD e C-SSD que podiam escolher livremente entre as dietas hiperlipídica e hiperglicídica. A ingestão alimentar foi avaliada após 12 h. As mães foram sacrificadas apenas na 21 da lactação (desmame) e as proles em PN15 (com nicotina), PN21 e PN170 (ausência da NIC). Ao desmame, as ratas lactantes NIC apresentaram menor conteúdo de tirosina hidroxilase (TH), maior OBRb e SOCS3 na area tegmentar ventral (VTA); menor TH, maior receptor de dopamina 1 (D1R), receptor de dopamina 2 (D2R) e transportador de dopamina (DAT) no núcleo accumbens (NAc); maior conteúdo de TH no estriado dorsal (DS); e maior D2R e SOCS3 no núcleo arqueado (ARC). Em PN15, os filhotes NIC apresentaram maior conteúdo de D1R, D2R e menor DAT no NAc, enquanto em PN21, apresentaram apenas menor DAT no DS, e menor conteúdo de pSTAT3 em ARC. Aos 170 dias, as proles SSD demonstraram maior preferência para a ração hiperlipídica. No entanto, os animais N-SSD consumiram mais ração hiperglicidica do que as proles C-SSD. A prole N apresentou menor conteúdo de D2R e DAT no NAc e menor D2R no ARC. Modelo II: as mães e suas proles foram divididas em: expostos à fumaça do cigarro (grupo S: 4 vezes / dia, do 3 ao 21 dia de lactação), e expostos ao ar filtrado (grupo C). Em PN175, as proles foram divididas em 4 grupos para o desafio alimentar S-SC, C-SC, S-SSD e C-SSD. A ingestão alimentar foi avaliada após 30 min e 12 h. Em PN180, as proles foram sacrificadas. O grupo S-SSD ingeriu mais das rações palatáveis do que o grupo C-SSD em 30 min e 12 h. Ambos os grupos preferiram a ração hiperlipídica. No entanto, os animais S-SSD consumiram mais ração hiperlipídica do que C-SSD em 30 min. A prole S apresentou menor conteúdo de TH no VTA, menor conteúdo de TH, D2R e maior conteúdo de D1R no NAc e menor OBRb no ARC. Demonstramos que tanto a nicotina isolada como a exposição à fumaça do cigarro durante a lactação resultaram em mudanças no sistema dopaminérgico das proles, programando o comportamento alimentar devido à diminuição da dopamina no NAc. / Children from smoking mothers are more susceptible to become obese adults and to become drug or food addicts. Drugs and food activate the mesolimbic reward pathway, causing a sense of pleasure that induces further consumption.Thus, we studied the relationship between only nicotine or tobacco smoke exposure during lactation with feeding behavior and brain dopaminergic reward system at adulthood, in two programming models: Model I, on the postnatal day (PN) 2, lactating rats were implanted with minipumps releasing nicotine (NIC) or saline (C) for 14 days. On PN150 and again on PN160, offspring were divided into 4 groups for a food challenge: N-SC and C-SC received standard chow; N-SSD and C-SSD could freely select between hyperlipidic and hyperglicidic diets. Mothers were euthanized only in 21 of lactation and offspring were euthanized in PN15 (with nicotine), PN21 and PN170 (withdraw). At weaning (PN21), NIC dams had: lower tyrosine hydroxylase (TH), higher OBRb and SOCS3 contents in ventral tegmental area (VTA); lower TH, higher dopamine receptor 1 (D1R), dopamine receptor 2 (D2R) and dopamine transporter (DAT) contents in nucleus accumbens (NAc); higher TH content in dorsal striatum (DS); and higher D2R and SOCS3 contents in arcuate nucleus (ARC). On PN15, NIC pups had higher D1R, D2R and lower DAT contents in NAc, while on PN21 they had lower DAT in DS, and lower pSTAT3 content in ARC. On PN170, SSD animals showed an increased food intake compared with SC ones and a preference for the hyperlipidic chow. However, N-SSD animals consumed relatively more hyperglicidic chow than C-SSD ones. N offspring presented lower D2R and DAT contents in the NAc, and lower D2R in the ARC. Model II, nursing rats and their pups were divided into: tobacco smoke-exposed (S group: 4 times/day, from the 3rd to the 21th day of lactation), and ambient air-exposed (C group). On PN175, offspring were divided into 4 groups for a food challenge: S-SC and C-SC received standard chow; S-SSD and C-SSD could select between hyperlipidic and hyperglicidic diets. Food intake was recorded after 30 min and 12 h. On PN180, offspring were euthanized. SSD animals presented a higher food intake compared with SC ones. S-SSD animals ate more than C-SSD ones at 30 min and 12 h. Both groups preferred the hyperlipidic chow. However, S-SSD animals consumed relatively more hyperlipidic chow than C-SSD at 30 min. S animals presented lower TH content in the ventral tegmental area, lower TH, D2R, higher D1R contents in the NAc and lower OBRb in the ARC. We showed that both nicotine alone as well as cigarette smoke exposure during the lactation resulted in changes in the dopaminergic system of the offspring, programming the eating behavior due to decreased dopamine in the NAc.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Considerando que nos tempos atuais o hábito de fumar atingiu uma parcela significativa das adolescentes brasileiras e apesar de seus conhecidos efeitos deletérios sobre diversos órgãos, pouco se sabe da sua ação sobre os ovários. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da exposição à fumaça de cigarro sobre o ciclo estral e a morfologia ovariana. Para tal, foram utilizados camundongos da linhagem Swiss, cujo estudo teve início com o estudo do perfil das características da maturação sexual. Após o desmame, aos 21 dias de idade, a partir da abertura vaginal, o 1 estro e o início da ciclicidade foram acompanhados através da citologia vaginal. As características do ciclo estral foram determinadas no decorrer de doze semanas. O efeito da exposição à fumaça de cigarro 3R4F utilizou fêmeas Swiss de 35 dias de idade que foram subdivididos em dois grupos expostos à fumaça de cigarro (grupo 15E) e animais controles livres de fumaça (grupo 15C). A exposição ocorreu por 15 dias e ao final deste período, metade dos animais de cada grupo foi sacrificada e ovários direitos foram coletados. A outra metade permaneceu em observação durante 30 dias, sem exposição à fumaça, originando os grupos 45Ex e 45C. A citologia vaginal foi avaliada durante todo o período experimental. Ao final dos 30 dias, sangue e ovários direitos foram coletados. Estes foram pesados e processados por técnica de rotina histológica para análise morfológica. A caracterização dos eventos da puberdade estabeleceu o tempo de abertura vaginal com média de 33,60,24 de idade, o primeiro estro 39,42,58 dias de idade e o início da ciclicidade, com média de 39,51,19 dias de idade, concomitante com o primeiro estro. Além disso, os ciclos estrais apresentaram períodos de cinco dias com freqüência baixa da fase diestro. Com relação à exposição da fumaça de cigarro ocorreu aumento significativo na extensão dos ciclos estrais e uma forte tendência ao aumento de estros nos animais 45Ex, apesar de não ser significativa. O número e o diâmetro de folículos grandes foram maiores no 15E, enquanto o de corpos lúteos foi menor. Em relação ao grupo 45C, o 45Ex não se alterou, porém, mostrou uma discreta redução da massa ovariana, do número de folículos pequenos, do número e do diâmetro dos folículos médios, dos corpos lúteos e aumento de folículos atrésicos. A comparação entre controles, 15C e 45C e expostos, 15E e 45Ex, mostrou uma redução no diâmetro de folículos médios e grandes. O estudo do perfil das características reprodutivas de fêmeas Swiss é indispensável para modelos experimentais em pesquisa que fazem uso desta linhagem. Permitiu verificar que a exposição à fumaça de cigarro promove alteração do ciclo estral, da massa ovariana e antecipa alterações morfológicas tempo dependente que sinaliza a finalização da vida reprodutiva / Nowadays greater number of Brazilian young women are smokers, and it is troubling because in their reproductive prime are the fastest growing population of smokers. Despite the fact that cigarette smoke is a well established health hazard, and systemic diseases are already well recognized, the potential deleterious effects on ovaries must be more investigated. Therefore, the aim of this study was to evaluate the effects of exposure to cigarette smoke on the estrous cycle and ovarian morphology. To this end, female Swiss mice were used, whose protocols were previously provided for the timing of three pubertal events and determination of the estrous cycle phases in this strain. Weanlings were examined daily and the date of vaginal opening was recorded. Daily vaginal lavages were begun on the day of vaginal opening and continued for the duration of the study. The onset of first cornification and cyclicity were measured. Animals were then observed for a total of 12 weeks. The ovarian effects of smoke exposure from cigarette 3R4F were studied in female Swiss mice (35 days old) for 15 day - 15E group. The control group (15C) stead in absence of smoke. At the end of this time, part of the animals in each group was sacrificed and right ovaries were collected. The others remained under observation for 30 days without exposure to smoke (45Ex group). The vaginal smear was determined throughout the experimental period. Ovaries were weighed and fixed for standard histology. The protocol provided a vaginal opening at 33,60,24 days old, the onset of first cornification at 39,42,58 days of age and the onset of cyclicity at 39,51,19 days old, concomitant with the appearance of first estrus. Furthermore, the estrous cycles were equal to 5 days in length. The less predominant smear type was diestrus. The length of estrous cycles increased significantly in mice exposed to cigarette smoke and estrus smear was more frequent. The number and diameter of large follicles were higher in 15E, while the corpora lutea was less frequent. The 45Ex group showed a decreasing trend of the ovarian weight, number of small follicles, the number and mean diameter of follicles, corpora lutea and the increase of atretic follicles. Comparison between controls and exposed animals throughout the time, showed a reduction in mean diameter of medium and large follicles. The protocols provided in this unit are indispensable for experimental research involving the reproductive system and the influence of the estrous cycle on non-reproductive functions in Swiss mice. The findings show that exposure to cigarette smoke results in alteration of the estrous cycle, ovarian weight and predict time dependent morphological changes that are signals of the end of reproductive life

Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / Crianças de mães fumantes são mais suscetíveis a se tornarem adultos obesos e se viciarem em drogas ou alimentos palatáveis. Drogas e alimentos ativam a via mesolímbica de recompensa, causando sensação de prazer que induz ainda mais o consumo. Assim, avaliamos a relação entre a exposição apenas à nicotina ou à fumaça do cigarro durante a lactação com a preferência alimentar e sistema dopaminérgico de recompensa cerebral das proles, em dois modelos de programação: Modelo I: no 2o dia pós-natal (PN), lactantes receberam implante de minibombas osmóticas que liberam nicotina (NIC) ou salina (C), durante 14 dias. Em PN150 e novamente em PN160, as proles foram divididas em 4 grupos para um desafio alimentar: N-SC e C-SC que receberam ração padrão; N-SSD e C-SSD que podiam escolher livremente entre as dietas hiperlipídica e hiperglicídica. A ingestão alimentar foi avaliada após 12 h. As mães foram sacrificadas apenas na 21 da lactação (desmame) e as proles em PN15 (com nicotina), PN21 e PN170 (ausência da NIC). Ao desmame, as ratas lactantes NIC apresentaram menor conteúdo de tirosina hidroxilase (TH), maior OBRb e SOCS3 na area tegmentar ventral (VTA); menor TH, maior receptor de dopamina 1 (D1R), receptor de dopamina 2 (D2R) e transportador de dopamina (DAT) no núcleo accumbens (NAc); maior conteúdo de TH no estriado dorsal (DS); e maior D2R e SOCS3 no núcleo arqueado (ARC). Em PN15, os filhotes NIC apresentaram maior conteúdo de D1R, D2R e menor DAT no NAc, enquanto em PN21, apresentaram apenas menor DAT no DS, e menor conteúdo de pSTAT3 em ARC. Aos 170 dias, as proles SSD demonstraram maior preferência para a ração hiperlipídica. No entanto, os animais N-SSD consumiram mais ração hiperglicidica do que as proles C-SSD. A prole N apresentou menor conteúdo de D2R e DAT no NAc e menor D2R no ARC. Modelo II: as mães e suas proles foram divididas em: expostos à fumaça do cigarro (grupo S: 4 vezes / dia, do 3 ao 21 dia de lactação), e expostos ao ar filtrado (grupo C). Em PN175, as proles foram divididas em 4 grupos para o desafio alimentar S-SC, C-SC, S-SSD e C-SSD. A ingestão alimentar foi avaliada após 30 min e 12 h. Em PN180, as proles foram sacrificadas. O grupo S-SSD ingeriu mais das rações palatáveis do que o grupo C-SSD em 30 min e 12 h. Ambos os grupos preferiram a ração hiperlipídica. No entanto, os animais S-SSD consumiram mais ração hiperlipídica do que C-SSD em 30 min. A prole S apresentou menor conteúdo de TH no VTA, menor conteúdo de TH, D2R e maior conteúdo de D1R no NAc e menor OBRb no ARC. Demonstramos que tanto a nicotina isolada como a exposição à fumaça do cigarro durante a lactação resultaram em mudanças no sistema dopaminérgico das proles, programando o comportamento alimentar devido à diminuição da dopamina no NAc. / Children from smoking mothers are more susceptible to become obese adults and to become drug or food addicts. Drugs and food activate the mesolimbic reward pathway, causing a sense of pleasure that induces further consumption.Thus, we studied the relationship between only nicotine or tobacco smoke exposure during lactation with feeding behavior and brain dopaminergic reward system at adulthood, in two programming models: Model I, on the postnatal day (PN) 2, lactating rats were implanted with minipumps releasing nicotine (NIC) or saline (C) for 14 days. On PN150 and again on PN160, offspring were divided into 4 groups for a food challenge: N-SC and C-SC received standard chow; N-SSD and C-SSD could freely select between hyperlipidic and hyperglicidic diets. Mothers were euthanized only in 21 of lactation and offspring were euthanized in PN15 (with nicotine), PN21 and PN170 (withdraw). At weaning (PN21), NIC dams had: lower tyrosine hydroxylase (TH), higher OBRb and SOCS3 contents in ventral tegmental area (VTA); lower TH, higher dopamine receptor 1 (D1R), dopamine receptor 2 (D2R) and dopamine transporter (DAT) contents in nucleus accumbens (NAc); higher TH content in dorsal striatum (DS); and higher D2R and SOCS3 contents in arcuate nucleus (ARC). On PN15, NIC pups had higher D1R, D2R and lower DAT contents in NAc, while on PN21 they had lower DAT in DS, and lower pSTAT3 content in ARC. On PN170, SSD animals showed an increased food intake compared with SC ones and a preference for the hyperlipidic chow. However, N-SSD animals consumed relatively more hyperglicidic chow than C-SSD ones. N offspring presented lower D2R and DAT contents in the NAc, and lower D2R in the ARC. Model II, nursing rats and their pups were divided into: tobacco smoke-exposed (S group: 4 times/day, from the 3rd to the 21th day of lactation), and ambient air-exposed (C group). On PN175, offspring were divided into 4 groups for a food challenge: S-SC and C-SC received standard chow; S-SSD and C-SSD could select between hyperlipidic and hyperglicidic diets. Food intake was recorded after 30 min and 12 h. On PN180, offspring were euthanized. SSD animals presented a higher food intake compared with SC ones. S-SSD animals ate more than C-SSD ones at 30 min and 12 h. Both groups preferred the hyperlipidic chow. However, S-SSD animals consumed relatively more hyperlipidic chow than C-SSD at 30 min. S animals presented lower TH content in the ventral tegmental area, lower TH, D2R, higher D1R contents in the NAc and lower OBRb in the ARC. We showed that both nicotine alone as well as cigarette smoke exposure during the lactation resulted in changes in the dopaminergic system of the offspring, programming the eating behavior due to decreased dopamine in the NAc.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A superalimentação pós-natal é um fator de risco para a obesidade, assim como para distúrbios cardiovasculares e metabólicos associados. Sabe-se que ratos criados em ninhadas reduzidas desenvolvem sobrepeso, hiperfagia, hiperleptinemia e hipertensão arterial quando adultos. Como o exercício físico crônico tem efeito benéfico em indivíduos obesos, propomos avaliar o efeito do treinamento em esteira em animais adultos obesos programados pela superalimentação pós-natal. No 3 dia de lactação, dividimos as ratas lactantes em 2 grupos: Controle (C) - ninhada composta por 10 filhotes (6 machos e 4 fêmeas) e Supernutrido (S) - ninhada ajustada para 3 filhotes machos. Após o desmame, os filhotes de ambos os grupos foram alimentados com ração comercial. Aos 75 dias de vida, as proles foram subdivididas em 4 grupos: 1) Controle Sedentário (CS), 2) Controle Exercício (CE), 3) Supernutrido Sedentário (SS) e 4) Supernutrido Exercício (SE), quando realizamos um teste máximo em esteira para a prescrição do treinamento. A partir dos 90 dias de vida, os ratos CE e SE foram treinados na esteira (60 min/dia, 5 dias/semana, velocidade média de 50 a 65 % do teste agudo máximo feito em esteira) até os 180 dias. Aos 90 e 180 dias, realizamos o teste agudo de natação nos 4 grupos experimentais. Em comparação ao grupo SS, o grupo SE aos 180 dias de idade apresentou menor MCT, adiposidade corporal (central e total), leptinemia e corticosteronemia. Estes animais apresentaram normalização da ingestão alimentar, do conteúdo de proteína corporal total, do HDL-c e da pressão arterial, além de aumento do glicogênio hepático, da CAT e da capacidade física no teste exaustivo de nado. Assim, sugerimos que o exercício físico crônico em esteira foi capaz de alterar diversos parâmetros deletérios associados à síndrome metabólica observados nos animais adultos obesos neste modelo de programação. / Postnatal early overnutrition is a risk factor for future obesity and metabolic disorders. Rats raised in small litters develop overweight, hyperphagia, hyperleptinemia and hypertension when adults. As chronic exercise brings well-known benefits to obese individuals, we studied the effects of training on a treadmill in adult obese rats programmed by overfeeding during lactation. To induce postnatal early overnutrition, litter size was reduced to 3 pups/litter (SL: small litter) and the groups with normal litter size (10 pups/litter) were used as control. Rats had free access to standard diet and water post weaning. At 75 days-old, animals were divided into: sedentary control (SC), trained control (TC), sedentary overfed (SO) and trained overfed (TO). We performed a test of speed to obtain the physical training prescription. From 90 until 180 days-old, TC and TO rats were trained (60min/day, 5days/week with mean speed from 50 to 65% of the acute test on a treadmill). At 90 and 180 days-old, the four experimental groups were tested for physical performance in swimming. Compared to SO, TO group at 180 days-old showed lower body weight, body adiposity (central and total), leptinaemia and corticosteronaemia. These rats presented normal values for food intake, body total protein content, HDL-c and systolic blood pressure. In addition, TO offspring displayed higher liver glycogen, total antioxidant capacity and physical capacity in the acute swimming test. Thus, we evidenced that the physical training on a treadmill was useful for revert or improve some deleterious parameters associated with metabolic syndrome observed in obese rats programmed by early postnatal overfeeding.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A Linhaça (Linum Usitatissimum) apresenta diversas substâncias com alegados efeitos benéficos que diminuem a obesidade, glicemia e corrigem a dislipidemia, protegendo o sistema cardiovascular. Neste trabalho objetivamos avaliar o efeito da suplementação materna com linhaça durante a lactação sobre a composição corporal, a homeostase glicêmica, lipídica e protéica, a leptinemia, adiponectinemia e insulinemia, a função tireoideana e a via de sinalização da leptina no eixo hipotálamo-hipófise-tireóide da prole aos 21 e 180 dias de vida. As ratas lactantes foram separadas em dois grupos: controle (C) - recebendo ração a base de caseína (20%) e linhaça (L) recebendo ração suplementada com 25% de linhaça, contendo 18,9% de proteína (sendo 13,9% de caseína e 5% de linhaça) durante a lactação. O sacrifício das proles ocorreu aos 21 e 180 dias de idade, para determinação de: glicemia, albuminemia, proteínas totais, hematócrito, hemoglobina, colesterol total e triglicerídeos, insulina, leptina, adiponectina, TSH, T4 livre e T3 total. Os animais foram completamente eviscerados para obtenção da carcaça e análise da composição corporal. O consumo alimentar e a massa corporal (MC) foram aferidos diariamente durante a lactação e de 4 em 4 dias após a lactação até a idade adulta. As ratas lactantes do grupo L não apresentaram diferença na massa corporal e consumo alimentar. Durante a lactação a prole L apresentou maior ganho de peso corporal e após ao desmame observamos um aumento transitório de massa corporal até a idade adulta. Aos 21 dias, observamos na prole do grupo L menor gordura total e subcutanea, colesterol total, triglicerideo, albumina, insulina, T3 total e atividade de D1 no fígado; e aumento da área dos adipocitos no tecido subcutaneo, leptina, TSH e expressão de Ob-R, STAT3 e p-STAT3 na hipofise (p<0,05). Aos 180 dias, o grupo L apresentou menor glicemia, adiponectina, T4 livre, atividade de D1 e D2 na tireóide; e aumento da área dos adipocitos no tecido adiposo visceral e subcutâneo, insulinemia, expressão de Ob-R na tireóide e atividade de D2 no tecido adiposo marrom (p<0,05). Concluímos, a partir destes dados, que o uso de linhaça durante a lactação afeta a composição corporal, perfil lipídico, a homeostase glicêmica e a função tireóidea. Esta impressão metabólica e hormonal, na lactação, programa para alterações na adiposidade, possível resistência insulínica e disfunção tireóidea. Desta forma, seu uso deve ser visto com cautela durante o período de amamentação. / Flaxseed (Linum usitatissimum) presents high number of substances with beneficial effects that reduce obsesity, blood glucose and dyslipidemia, protecting the cardiovascular system. We aimed to evaluate the maternal flaxseed diet during lactating upon body composition, glucose homeostase, lipid and protein, leptinemia, adiponectinemia and insulinemia, thyroid function, and leptin signaling pathway in the hypothalamus-pituitary-thyroid axis in the offspring at 21 and 180 days old. Lactating rats were divided into: (1) Controls (C), diet containing 20% casein; (2) Flaxseed (F), diet with additional 25% of flaxseed, containing 18.9% protein (13.9% from casein and 5% from flaxseed). The offspring were sacrificed at 21 and 180 days of age to determinate: glycemia, albumin, leptin, adiponectin, TSH, free T4 and total T3. The animals were completely eviscerated to obtain the carcass by body composition analysis. The maternal food intake and body mass were measured daily during the lactation, and after weaning were monitored once every 4 days until they were 180 days old. The dams of F group presented no changes in body mass and food intake. During the lactation the F offspring showed higher body mass and after weaning they presented a higher transitory body mass until 180 days old. At 21 days old, F group showed lower total and subcutaneous fat mass, total cholesterol, triacylglycerol, albumin, insulin, total T3 and D1 liver activity; and higher subcutaneous adipocytes area, leptin, TSH and Ob-R, STAT3 and p-STAT expression in pituitary (p<0,05). At 180 days old, F group presented lower glycemia, adiponectin, free T4 and D1 and D2 activity in thyroid; and higher visceral and subcutaneous adipocytes area, insulin, Ob-R expression in thyroid and D2 activity in brown adipose tissue (p<0,05). In conclusion, maternal flaxseed diet during lactation affects body composition, lipid profile, glucose homeostasis and thyroid function. The metabolic and hormonal impression in lactation programs for changes in adiposity, insulin resistance and possible thyroid dysfunction. Thus, flaxseed use should be viewed with caution during breastfeeding.