O projeto teve por finalidade isolar e identificar fungos, avaliar o potencial toxigênico dos isolados de Aspergillus spp. e Fusarium spp., detectar e quantificar aflatoxinas B1, B2, G1, G2 e fumonisinas B1 e B2 em amostras de misturas de cereais. Foram analisadas 15 marcas de misturas de cereais, prontas para o consumo, adquiridas de supermercados e de empresas que comercializam o produto nacionalmente via internet. Foram adquiridas amostras por sete meses, totalizando 105 amostras ao final do experimento. A contagem de bolores nas amostras variou de 1,0 x 101 a 2 x 105 unidades formadoras de colônias (UFC)/g, com isolamento de sete cepas de Aspergillus flavus. As aflatoxinas B1 e G1 foram detectadas em poucas amostras e em baixos níveis, sendo que estes resultados podem ser devidos à baixa atividade de água nos produtos avaliados, a qual foi inferior a 0,63. A fumonisina B1 foi detectada em 84,8% das amostras, no entanto, a ingestão diária provável calculada para as fumonisinas esteve abaixo da recomendação do JECFA. Apenas uma amostra apresentou níveis de fumonisinas acima do limite esperado para 2016. Adicionalmente, foi observado que 21% das amostras apresentaram mais de um tipo de micotoxina, o que poderia conduzir à potencialização de efeitos tóxicos. / The project aimed to isolate and identify fungi, evaluate the toxigenic potential of isolates of Aspergillus spp. and Fusarium spp. detect and quantify aflatoxins B1, B2, G1, G2 and fumonisins B1 and B2 in samples of cereal mixtures. We analyzed 15 brands of cereal mixtures ready to eat adding up to 105 samples at the end of the experiment. Samples were acquired in supermarkets and from companies that market the product nationally by internet. The mold count in the samples ranged from 1.0 x 101 to 2 × 105 colonies forming units (CFU)/ g, with isolation of seven strains of Aspergillus flavus. Aflatoxin B1 and G1 were detected in a few samples and at low levels, what might be due to the low water activity in the product reviews, which was less than 0.63. Fumonisin B1 was detected in 84.8% of the samples, however, the probable daily intake calculated for fumonisin was bellow the JECFA recommendation. Only one sample showed fumonisin levels above the expected limit for 2016. Additionally, it was observed that 21% of the samples presented more than one type of mycotoxin, which could lead to enhancement of toxic effects.

O projeto teve por finalidade isolar e identificar fungos, avaliar o potencial toxigênico dos isolados de Aspergillus spp. e Fusarium spp., detectar e quantificar aflatoxinas B1, B2, G1, G2 e fumonisinas B1 e B2 em amostras de misturas de cereais. Foram analisadas 15 marcas de misturas de cereais, prontas para o consumo, adquiridas de supermercados e de empresas que comercializam o produto nacionalmente via internet. Foram adquiridas amostras por sete meses, totalizando 105 amostras ao final do experimento. A contagem de bolores nas amostras variou de 1,0 x 101 a 2 x 105 unidades formadoras de colônias (UFC)/g, com isolamento de sete cepas de Aspergillus flavus. As aflatoxinas B1 e G1 foram detectadas em poucas amostras e em baixos níveis, sendo que estes resultados podem ser devidos à baixa atividade de água nos produtos avaliados, a qual foi inferior a 0,63. A fumonisina B1 foi detectada em 84,8% das amostras, no entanto, a ingestão diária provável calculada para as fumonisinas esteve abaixo da recomendação do JECFA. Apenas uma amostra apresentou níveis de fumonisinas acima do limite esperado para 2016. Adicionalmente, foi observado que 21% das amostras apresentaram mais de um tipo de micotoxina, o que poderia conduzir à potencialização de efeitos tóxicos. / The project aimed to isolate and identify fungi, evaluate the toxigenic potential of isolates of Aspergillus spp. and Fusarium spp. detect and quantify aflatoxins B1, B2, G1, G2 and fumonisins B1 and B2 in samples of cereal mixtures. We analyzed 15 brands of cereal mixtures ready to eat adding up to 105 samples at the end of the experiment. Samples were acquired in supermarkets and from companies that market the product nationally by internet. The mold count in the samples ranged from 1.0 x 101 to 2 × 105 colonies forming units (CFU)/ g, with isolation of seven strains of Aspergillus flavus. Aflatoxin B1 and G1 were detected in a few samples and at low levels, what might be due to the low water activity in the product reviews, which was less than 0.63. Fumonisin B1 was detected in 84.8% of the samples, however, the probable daily intake calculated for fumonisin was bellow the JECFA recommendation. Only one sample showed fumonisin levels above the expected limit for 2016. Additionally, it was observed that 21% of the samples presented more than one type of mycotoxin, which could lead to enhancement of toxic effects.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:17:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006 - Rodrigo Alcantara de Carvalho.pdf: 803403 bytes, checksum: 7a35f34784a3f9cb58b545f52959a6a0 (MD5) Previous issue date: 2006-09-22 / The world wide contamination of foods and byproducts with mycotoxins is a problem of extreme importance. Mycotoxins are secondary metabolites produced by fungi that have adverse effects to human and animal health. The fumonisins and aflatoxins are the mycotoxins of greatest agro-economic importance due to the damage brought to animal production. Important steps in the synthesis of these mycotoxins are described, as such as their metabolism and adverse effects. This work evaluates the determination of the biomarkers sphinganin (Sa) and sphingosin (So) in poultry serum as a diagnose method for fumonisin exposition, and compares the obtained data with ration analysis. Of the evaluated animals only 49% exhibited 2 sphingolipids (Sa and So), 53,04% exhibited only So and 2,04% exhibited only Sa. It was detected at ration the presence of fumonisin B1 at concentration of 374,92μg.kg-1 and aflatoxins B1, B2, and G1 at concentrations of 440,99μg.kg-1, 169,92μg.kg-1 and 494,58μg.kg-1, respectively. It was possible to partially establish the grade of intoxication of the poultry and to verify that the sensibility of the biomarker can be affected by the presence of fumonisin such as aflatoxins. / A contamina??o mundial de alimentos e subprodutos com micotoxinas ? um problema de extrema import?ncia. As micotoxinas s?o metab?litos secund?rios produzidos por fungos, que possuem efeitos adversos ? sa?de humana e animal. As fumonisinas e aflatoxinas s?o as micotoxinas de maior import?ncia agro-econ?mica pelos preju?zos acarretados ? produ??o animal. Passos importantes na s?ntese destas micotoxinas s?o descritos, assim como seu metabolismo e efeitos adversos. Este trabalho avalia a determina??o dos biomarcadores esfinganina (Sa) e esfingosina (So) no soro de frangos de corte como m?todo de diagn?stico para exposi??o ?s fumonisinas e compara os dados obtidos com a an?lise da ra??o. Dos animais avaliados apenas 49% exibiram quantidades detect?veis de esfingolip?deos no soro, dentre estes, apenas 44,9% exibiram os 2 esfingolip?deos (Sa e So), 53,06% exibiram somente So e 2,04% exibiram somente Sa. Foi detectada na ra??o a presen?a de fumonisina B1 na concentra??o de 374,92μg.kg-1 e de aflatoxinas B1, B2 e G1 nas concentra??es de 440,99μg.kg-1, 169,92μg.kg-1 e 494,58μg.kg-1, respectivamente. Foi poss?vel estabelecer parcialmente o grau de intoxica??o dos frangos e verificar que a sensibilidade do biomarcador pode ser afetada tanto pela presen?a de fumonisina quanto de aflatoxina.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos / Made available in DSpace on 2012-10-20T12:53:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 199723.pdf: 490476 bytes, checksum: ea11e9db486efe97f679260ba42f8926 (MD5) / Fumonisinas ocorrem amplamente em milho e produtos derivados provocando distúrbios em diferentes espécies animais e estando associada ao câncer de esôfago em algumas regiões do mundo. Com base nos dados acima o presente trabalho teve por objetivo: (i) avaliar a ocorrência de fumonisinas em produtos derivados de milho destinados a consumo humano comercializados no Estado Santa Catarina. Das 82 amostras analisadas (farinha de milho, canjica, flocos de milho e milho de pipoca), 92,68 % apresentaram níveis detectáveis de fumonisinas, sendo a farinha de milho o produto com maior contaminação. Foram analisadas farinha de milho artesanais e industrializadas e os resultados demonstraram níveis detectáveis de FBs em 91,5 % das amostras, sendo que os níveis médios foram de 3,81 e 5,73 mg/g, respectivamente; (ii) analisar as alterações morfológicas em fígado de channel catfish (Ictalurus punctatus) tratados intraperitonealmente com FB1, em doses de 1,0; 5,0 and 10,0 mg FB1/kg p.c./dia, respectivamente, durante 21 dias. Os fígados dos animais tratados apresentaram alterações de leves à drásticas, dependendo da dose e tempo de tratamento a que foram submetidos. Verificaram-se alterações e desestruturação generalizada das estruturas membranosas, dilatação e desenvolvimento anormal do REG, aumento de ribossomos e alterações mitocondriais. Pôde-se constatar ao nível morfológico a ocorrência de processos envolvendo necrose e apoptose. Ao final do tratamento figuras de mielina elétron-densas estavam bem caracterizadas; (iii) considerando-se que o sul do Brasil apresenta alta incidência de câncer de esôfago foi desenvolvido um levantamento de casos desta doença, através de registro hospitalar em Santa Catarina, determinando a prevalência por idade, sexo, atividade profissional e região do Estado, bem como dos hábitos alimentares, tabagismo e álcool. Sendo o câncer uma doença multifatorial, a contaminação por fumonisinas em produtos de milho consumidos por estas populações pode ser um dos fatores relacionados.

Propomos avaliar a influência da rotação de culturas na infecção de milho transgênico (Bt) e cobertura morta por F. verticillioides e na presença de fumonisinas em amostras provenientes de Palmital e Capão Bonito. O isolamento fúngico da cobertura morta e do milho foi realizado em DG18 e DRBC, respectivamente. Os fungos isolados pertencentes ao gênero Fusarium foram identificados até espécie. Utilizamos, para análise de fumonisinas, Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. Micobiota da cobertura morta revelou maior frequência de Cladosporium spp. Nas amostras de milho, F. verticillioides foi o fungo mais isolado. Dentro do gênero Fusarium, a espécie F. verticillioides foi a mais frequente. Análise micotoxicológica do milho revelou a presença de fumonisinas em 88,9% das amostras provenientes de Palmital e em 86,1% de Capão Bonito. Dos isolados de F. verticillioides 84,6% foram produtores de FB1 + FB2. A presença de F. verticillioides e fumonisinas nos grãos de milho estabelece um problema econômico e de saúde pública. / The objective of this study was to evaluate the influence of crop rotation systems on the infection of maize grains and mulch by F. verticillioides and on the presence of fumonisins in maize samples collected in Palmital and Capão Bonito. Surface seeding (DG18) and direct seeding (DRBC) were employed for fungal isolations from mulch and maize, respectively. Identified isolates belonging to the genus Fusarium were further classified at the species level. Analysis of the mulch mycobiota revealed a higher frequency of Cladosporium spp., whereas in maize samples, F. verticillioides was the most frequently isolated fungus. High-performance liquid chromatography (HPLC) was used for mycotoxicological analysis of the grain samples. Maize from Palmital and Capão Bonito presented fumonisins in 88.9% and 86.1% of the samples, respectively. From the F. verticillioides isolates, 84.6% were producing FB1 + FB2. The high incidence of F. verticillioides in maize grains represents a serious problem, due to its potential in causing diseases in humans and animals.

Propomos avaliar a influência da rotação de culturas na infecção de milho transgênico (Bt) e cobertura morta por F. verticillioides e na presença de fumonisinas em amostras provenientes de Palmital e Capão Bonito. O isolamento fúngico da cobertura morta e do milho foi realizado em DG18 e DRBC, respectivamente. Os fungos isolados pertencentes ao gênero Fusarium foram identificados até espécie. Utilizamos, para análise de fumonisinas, Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. Micobiota da cobertura morta revelou maior frequência de Cladosporium spp. Nas amostras de milho, F. verticillioides foi o fungo mais isolado. Dentro do gênero Fusarium, a espécie F. verticillioides foi a mais frequente. Análise micotoxicológica do milho revelou a presença de fumonisinas em 88,9% das amostras provenientes de Palmital e em 86,1% de Capão Bonito. Dos isolados de F. verticillioides 84,6% foram produtores de FB1 + FB2. A presença de F. verticillioides e fumonisinas nos grãos de milho estabelece um problema econômico e de saúde pública. / The objective of this study was to evaluate the influence of crop rotation systems on the infection of maize grains and mulch by F. verticillioides and on the presence of fumonisins in maize samples collected in Palmital and Capão Bonito. Surface seeding (DG18) and direct seeding (DRBC) were employed for fungal isolations from mulch and maize, respectively. Identified isolates belonging to the genus Fusarium were further classified at the species level. Analysis of the mulch mycobiota revealed a higher frequency of Cladosporium spp., whereas in maize samples, F. verticillioides was the most frequently isolated fungus. High-performance liquid chromatography (HPLC) was used for mycotoxicological analysis of the grain samples. Maize from Palmital and Capão Bonito presented fumonisins in 88.9% and 86.1% of the samples, respectively. From the F. verticillioides isolates, 84.6% were producing FB1 + FB2. The high incidence of F. verticillioides in maize grains represents a serious problem, due to its potential in causing diseases in humans and animals.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of this research was to evaluate variability and performance of two maize sampling plans for mycotoxins quantification. Eleven maize lots were sampled using two distinct sampling methods: manual, using a sampling spear, and automatic, using a continuous flow sampling. Total variability and variability from each step of the analysis procedure (sampling, sample preparation, and analysis) for results of aflatoxins, fumonisin, and zearalenone were determined in 8, 11, and 5 lots respectively for each sampling plan. Those variances were compared, for each mycotoxin, between the two sampling plans using a multifactor analysis of variance. Distribution of the quantification results for aflatoxins and zearalenone were compared among four theoretical distribution models. The acceptance/rejection probabilities of a lot with determined aflatoxins or zearalenone concentration were determined using calculated variances and the information on the selected distribution to plot an operation characteristic curve (OC). Sampling and total variances were lower on the automatic sampling plan for aflatoxins, fumonisins, and zearalenone quantification. The OC curve from automatic sampling plan for aflatoxins and zearalenone quantification reduces the consumer end seller risks when compared with the OC curve from the manual sampling plan. The automatic sampling plan is more efficient than the manual one for mycotoxins quantification in maize, reducing lot classification error, and providing more safety in commercial transactions. / O objetivo deste trabalho foi avaliar a variabilidade e o desempenho de dois planos de amostragem de milho para quantificação de micotoxinas. Amostraram-se 11 lotes de milho, através de dois planos de amostragem: o manual, utilizando-se o calador graneleiro e o automático, utilizando-se a amostragem em fluxo contínuo. De cada plano amostral determinaram-se a variabilidade total e as variabilidades das etapas de amostragem, preparação e análise dos resultados de aflatoxinas, fumonisinas e zearalenona em 8, 11 e 5 lotes, respectivamente. Essas variâncias foram comparadas, para cada micotoxina, entre os dois planos de amostragem utilizando a análise de variância multifatorial. As distribuições dos resultados de quantificação das aflatoxinas e zearalenona foram comparadas entre quatro modelos de distribuições teóricas. Determinaram-se as probabilidades de aceitação e rejeição de um lote com determinadas concentrações de aflatoxinas ou zearalenona, utilizando-se a variância e as informações da distribuição selecionada para montar as curvas características de operação (CO). A variância da amostragem e a variância total foram menores no plano de amostragem automático para quantificação de aflatoxinas, fumonisinas e zearalenona. A curva CO do plano de amostragem automático, para quantificação de aflatoxinas e zearalenona reduz os riscos do consumidor e do produtor em relação à curva CO do plano de amostragem manual. O plano de amostragem automático é mais eficiente que o plano de amostragem manual para quantificação de micotoxinas em milho diminuindo, portanto, o erro na classificação de lotes significando, pois, maior segurança nas relações comerciais.

O objetivo foi avaliar a expressão dos genes FUM como indicativo da contaminação por Fusarium verticillioides e por fumonisinas nos grãos de milho transgênico durante todo o amadurecimento dos grãos. Constatou-se contaminação fúngica em 100% das amostras. As frequências de Fusarium foram de 3,85% a 100%, sendo 97% F. verticillioides. Foi detectada FB1 em 100% das amostras e FB2 em 18,41%. Os níveis de FB1 variaram de 0,02 mg/g a 5,12 mg/g e FB2 de níveis não detectáveis a 1,74 mg/g. Todos os genes FUM foram amplificados em 33,8% das amostras, e as expressões foram em média entre 3,88 e 7,65 (valores obtidos considerando a amostra calibradora). Não houve correlação positiva entre a porcentagem de F. verticillioides, FB1 e FB2 e os fatores abióticos (p>0,05), o mesmo ocorreu entre a expressão relativa dos genes FUM e os percentuais de isolamento de F. verticillioides e os níveis de FB1 e FB2 (p>0,05), e constatou-se correlação positiva entre a probabilidade de amplificação dos genes FUM e a fase de amadurecimento do grão (p<0,05). / This study evaluated the FUM gene expression in corn grains from sowing to harvest as evidence of Fusarium verticillioides contamination and fumonisins production. All samples (100%) were contaminated with fungi. The isolation frequencies of Fusarium genre ranged from 3,85 % to 100 % and 97 % were F. verticillioides. FB1 was detected in 100% of the samples and FB2 in 18,41 %. The levels of FB1 ranged from 0,02 mg/g to 5,12 mg/g, while FB2 ranged from undetectable levels to 1,74 mg/g. All FUM genes were amplified in 33,8 % of the samples, with average ranging from 3.88 to 7,65, when compared to the calibrator sample. Positive correlation among the F. verticillioides isolation percentage, FB1 e FB2 production and the abiotic factors was not detected (p>0,05), positive correlation was also not detected among the FUM gene cluster relative expressions, F. verticillioides isolation percentage and FB1 and FB2 production (p>0,05). However, a positive correlation was detected between the probability of FUM genes expression and the kernel maturity (p<0,05).

O objetivo foi avaliar a expressão dos genes FUM como indicativo da contaminação por Fusarium verticillioides e por fumonisinas nos grãos de milho transgênico durante todo o amadurecimento dos grãos. Constatou-se contaminação fúngica em 100% das amostras. As frequências de Fusarium foram de 3,85% a 100%, sendo 97% F. verticillioides. Foi detectada FB1 em 100% das amostras e FB2 em 18,41%. Os níveis de FB1 variaram de 0,02 mg/g a 5,12 mg/g e FB2 de níveis não detectáveis a 1,74 mg/g. Todos os genes FUM foram amplificados em 33,8% das amostras, e as expressões foram em média entre 3,88 e 7,65 (valores obtidos considerando a amostra calibradora). Não houve correlação positiva entre a porcentagem de F. verticillioides, FB1 e FB2 e os fatores abióticos (p>0,05), o mesmo ocorreu entre a expressão relativa dos genes FUM e os percentuais de isolamento de F. verticillioides e os níveis de FB1 e FB2 (p>0,05), e constatou-se correlação positiva entre a probabilidade de amplificação dos genes FUM e a fase de amadurecimento do grão (p<0,05). / This study evaluated the FUM gene expression in corn grains from sowing to harvest as evidence of Fusarium verticillioides contamination and fumonisins production. All samples (100%) were contaminated with fungi. The isolation frequencies of Fusarium genre ranged from 3,85 % to 100 % and 97 % were F. verticillioides. FB1 was detected in 100% of the samples and FB2 in 18,41 %. The levels of FB1 ranged from 0,02 mg/g to 5,12 mg/g, while FB2 ranged from undetectable levels to 1,74 mg/g. All FUM genes were amplified in 33,8 % of the samples, with average ranging from 3.88 to 7,65, when compared to the calibrator sample. Positive correlation among the F. verticillioides isolation percentage, FB1 e FB2 production and the abiotic factors was not detected (p>0,05), positive correlation was also not detected among the FUM gene cluster relative expressions, F. verticillioides isolation percentage and FB1 and FB2 production (p>0,05). However, a positive correlation was detected between the probability of FUM genes expression and the kernel maturity (p<0,05).