L’objectif de cette thèse était d’isoler de nouveaux Mimiviridae dans l’environnement marin à l’aide d’amibes, hôtes potentiels de ces derniers et surtout organismes ubiquistes phagocytaires et connus pour être parasités par des microorganismes pathogènes. Après la mise en place et la validation de protocoles d’échantillonnages et de mise en culture de prélèvements environnementaux, plusieurs échantillons ont été analysés. Un nouveau membre de la famille des Mimiviridae a été isolé à partir d’un échantillon marin côtier provenant du Chili, stocké dans un milieu enrichi en amidon (milieu riz, propice à la conservation voire à la production de virus) puis mis en coculture dans une souche d’amibe Acanthamoeba griffini. Le séquençage de son génome révèle 1260 kb, codant pour 1120 protéines putatives, ce qui en fait le plus grand génome viral connu. Nommé megavirus chiliensis, sa capside est icosaédrique et possède également des fibrilles comme Acanthamoeba polyphaga mimivirus tout en étant plus grande (diamètre apparent 520 nm vs 450 nm). Bien que les morphologies des deux virus soient similaires et que de nombreuses particularités de mimivirus soient conservées chez megavirus (stargate), 23 % des protéines de megavirus n’ont pas d’homologues chez mimivirus, et les 594 gènes orthologues partagés présentent une identité résiduelle moyenne de 50 %. De plus, megavirus présente 3 amino-acyl-ARNt-synthètases supplémentaires (IleRS, TrpRS et AsnRS) à celles de mimivirus. Ces résultats suggèrent que ces deux virus sont issus d’un génome cellulaire ancestral qui a évolué par réduction génomique. Un parasite intracellulaire obligatoire a également été isolé à partir d’échantillons de sédiments marins de la côte chilienne. Des observations au microscope électronique à transmission indiquent une forme ressemblant à une endospore, de taille très variable (de 400 nm jusqu’à 1 μm), avec une paroi multicouche épaisse (~60 nm) et un pore apical. Cependant, aucune évidence de division n’a encore été observée, laissant penser que cette entité capable de multiplication pourrait être un virus, sans ressembler aux morphologies connues à ce jour. / In order to isolate new Mimiviridae from the marine environment, we used amoeba -ubiquitous phagotrophic protozoa - as potential host for these viruses. Different sampling protocols were tested and validated before carrying out co-cultures with amoeba and environmentals samples. A new Mimiviridae giant virus was isolated from Chilean coastal seawater completed with rice media (enriched incubation). Produced in Acanthamoeba griffini, its genome sequence has 1,260 Mbp and encodes for 1120 putative proteins, making it the largest known viral genome and thus named Megavirus chiliensis. Its icosaedral capsid is covered with fibrils and its size is bigger than that of Acanthamoeba polyphaga mimivirus (520 nm vs 450 nm). Although both virions are very similar and most of the mimivirus idiosyncrasies are conserved in megavirus (stargate), 23 % of megavirus putative proteins have no mimivirus homologs. Both viruses share 594 orthologous proteins exhibiting an average identity of 50 %. Moreover, megavirus contains 3 additional amino-acyl tRNA synthetases (IleRS, TrpRS and AsnRS) compare to mimivirus. These results suggest that these viruses have evolved from an ancestral cellular genome by reductive evolution. In addition, an amoeba obligatory intracellular parasite was isolated from marine sediments from Chilean coast. Transmission electron microscopic images show a particule like endospore with variable size (from 400 nm to 1 µm), a multilayered outer wall (~60 nm) and an apical pore. No evidence of division was observed, suggesting that the multiplication of this endoparasite occurs without division, suggesting that it could be a virus without any similarity to those described today.

O aumento da demanda por espécies brasileiras tem sido expressivo nos últimos anos, em função do interesse em recuperação de áreas degradadas e recomposição da paisagem. No entanto, para otimizar a utilização do insumo básico para a produção de mudas, a semente, ainda restam lacunas a serem preenchidas no tocante à qualidade de algumas espécies, dentre elas Solanum granulosoleprosum e Senna alata. Este estudo foi dividido em quatro capítulos. O primeiro teve a finalidade de pesquisar condições de temperatura aliadas ao período de incubação que fossem mais adequadas à detecção de fungos associados às sementes das duas espécies estudadas. O segundo objetivou avaliar a interferência da luz, da temperatura, da posição das sementes no substrato papel e do nitrato de potássio na germinação de sementes de S. granulosoleprosum, visando à recomendação de um método a ser utilizado na avaliação da germinação desta espécie. No terceiro foi verificada a interferência dos fungos Alternaria alternata (Aa), Fusarium do complexo de espécies incarnatum-equiseti (FIESC) e Fusarium pseudocircinatum (FPC) na qualidade das sementes de S. alata, bem como a transmissão e sobrevivência destes, quando inoculados nas sementes através da técnica de restrição hídrica e no quarto verificou-se a interferência do fungo Fusarium do complexo de espécies incarnatum-equiseti (FIESC) na qualidade das sementes de S. granulosoleprosum, bem como sua transmissão e sobrevivência, quando inoculado em sementes, através da técnica de restrição hídrica. Os resultados demonstram que o método do papel de filtro, incubado sob temperaturas de 25°C, 7 ou 10 dias e 25°C, 10 dias é eficiente para a detecção de fungos associados às sementes de S. granulosoleprosum e S. alata, respectivamente. Foram identificados dois gêneros de fungos potencialmente patogênicos: Alternaria sp em S. alata e Fusarium sp, para as duas espécies estudadas. A alternância de temperatura 20-30°C, com semeadura entre papel e sobre papel, assim como a alternância a 15-35°C com semeadura sobre papel, aliados ao fotoperíodo de 8 horas e à utilização de solução de KNO3 a 0,2% para umedecimento do substrato são condições propícias para o teste de germinação das sementes de fumo bravo. A técnica de restrição hídrica possibilita a inoculação de fungos nas sementes de S. granulosoleprosum e S. alata. Os fungos A. alternata, Fusarium do complexo de espécies incarnatum-equiseti (FIESC) e Fusarium pseudocircinatum (FPC) interferem na germinação e emergência da plântula, permanecem em associação com as sementes de S. alata durante o armazenamento e são transmitidos pelas sementes causando morte de sementes, necrose da raiz, estrangulamento do colo das plântulas e tombamento. Fusarium do complexo de espécies incarnatum-equiseti (FIESC) não causa interferência na germinação das sementes de S. granulosoleprosum inoculadas, tem a incidência reduzida ao longo do armazenamento, porém é transmitido para as plântulas causando morte de sementes, plântulas com cotilédone preso pelo tegumento, estrangulamento do hipocótilo, má formação de raiz, hipocótilo com encharcamento e necrose nos cotilédones. / The increased demand for Brazilian species has been expressive in the last years, due to the interest in recovery of degraded areas and recomposition of the landscape. However, to optimize the use of the basic input for seedling production, there are still gaps to be filled concerning seed quality of some species, such as Solanum granulosoleprosum and Senna alata. This research was divided into four chapters. The first one had the purpose of investigating temperature conditions allied to the incubation period that were more suitable for detection of fungi associated to the seeds of both species studied. The second focused on evaluating the influence of light, temperature, seed position on paper substrates and potassium nitrate on the germination of S. granulosoleprosum seeds, in order to recommend a method for testing germination of this species. On the third chapter the interference of the fungi Alternaria alternata (Aa), Fusarium belonging to the complex of species Fusarium incarnatum-equiseti (FIESC) and Fusarium pseudocircinatum (FPC), on the quality of S. alata seeds was checked, as well as their transmission and survival on the seeds when inoculated by means of water restcriction technique. On the fourth one the interference of (FIESC) on the quality of S. granulosoleprosum seeds, was tested, as well as its transmission and survival, when inoculated in seeds, through the water restriction technique. The results showed that the blotter test method, incubated at 25°C, 7 or 10 days and 25°C, 10 dias, were more favorable for the detection of fungi associated with S. granulosoleprosum and S. alata seeds, respectively. Two genera of potentially pathogenic fungi were identified: Alternaria sp in S. alata and Fusarium sp, for both species studied. The temperature alternation between 20-30°C, with sowing between paper and on top of paper, as well as the alternation at 15-35°C with sowing on top of paper, under photoperiod of 8 hours and the use of 0.2 % KNO3 solution for substrate wetting are suitable conditions for testing the germination of S. granulosoleprosum seeds. The water restriction technique provided inoculated seeds of S. granulosoleprosum and S. alata. The fungi A. alternata, Fusarium of the incarnatum-equiseti species complex (FIESC) and Fusarium pseudocircinatum (FPC) interfere on the germination and emergence of the seedlings, remain in association with Senna alata seeds during storage period and were transmitted by seeds causing seed death, root necrosis, hypocothil constriction followed by damping off. On the other hand, Fusarium of the incarnatum-equiseti species complex (FIESC) does not interfere on germination of the inoculated S. granulosoleprosum seeds, has the incidence decreased during storage, however, is transmitted from seeds to seedlings causing seed death, seedlings with cotyledons trapped by the seed coat, hypocotyl strangulation, root malformation, hypocotyl with watersoaking and necrosis on cotyledons.

The identification of energy scales in the region of Isoscalar Giant Quadrupole Resonance (ISGQR) is motivated by their potential use in understanding how an ordered collective motion transforms into a disordered motion of intrinsic single-particle degrees-of-freedom in many-body quantum systems. High energy-resolution measurements of the ISGQR were obtained by proton inelastic scattering at Ep= 200 MeV using the K600 magnetic Spectrometer at iThemba LABS. The nuclei 58Ni, 90Zr, 120Sn and 208Pb, associated with closed shells, were investigated. Both the Fourier transform and Wavelet analysis were used to extract characteristic energy scales and were later compared with the results from the theoretical microscopic Quasi-particle Phonon Model (QPM), including contributions from collective and non-collective states. The scales found in the experimental data were in good agreement with the QPM. This provides a strong argument that the observed energy scales result from the decay of the collective modes into 2p-2h states. The different scale regions were tested directly by reconstruction of measured energy spectra using the Inverse Fourier Transform and the Continuous Wavelet Transform (CWT), together with a comparison to a previously available reconstruction using the Discrete Wavelet Transform (DWT).

Nosso objetivo e estudar os principais mecanismos de foto absorção no ANTPOT.232 TH entre 7 e 60 Mev, ressonâncias gigantes e mecanismo do quase-deuteron, associados ao decaimento por fissão. Para isso, fizemos medidas da seção de choque de eletrofissão no ANTPOT.232 TH, entre as energias de 7 a 60 Mev, no laboratório do acelerador linear do IFUSP. Utilizamos, na analise, o formalismo dos fótons virtuais, que relaciona a seção de choque de fotofissão a seção de choque de eletrofissão. Foi utilizada a seção de choque de fotofissão medida em livermore e calculamos a seção de choque de fotoabsorção e2 (t=0 e t=1), além da seção de choque de fotoabsorção obtida via quase-deuteron. Verificamos que a contribuição predominante para a seção de choque de eletrofissão e a da componente de dipolo elétrico, sendo as demais contribuições (quadrupolo elétrico e modelo modificado do quase-deuteron) uma ordem de grandeza inferior a esta. / Our objective is to study the main photoabsorption mechanisms in 232T]n between 7 and 60 Mev, namely, Giant Resonances and Quasi-Deuteron, associated to fission decay. We performed electrofission measurements at the linear accelerator of IFUSP. In the analysis, the Virtual Photon Formalism, that relates the photofission cross section to the electrofission cross section, was used. In the calculations, the photofission cross section measured at Livermore Laboratory was used. The E2 photoabsorption and quasi-deuteron photoabsorption cross sections were calculated. We concluded that the most important contribution to the electrofission cross section comes from the El- giant resonance component, the other ones (E2 giant resonance component and quasi-deuteron mechanisms) being 1 or 2% of total electrofission cross section.

A lesão central de células gigantes (LCCG) é uma afecção benigna dos maxilares, de comportamento biológico incerto, variando de discreta tumefação assintomática e de crescimento lento à uma forma agressiva, associada a dor, reabsorção radicular e óssea, com destruição cortical. Sua etiologia permanece desconhecida, havendo controvérsias entre processo reacional, neoplásico ou genético. Mutações no gene SH3BP2 foram identificadas em pacientes com querubismo, condição que compartilha várias características clínicas, radiográficas e histopatológicas com a LCCG. Para testar a hipótese de que tais mutações seriam responsáveis por, ou estariam associadas a LCCG e na tentativa de melhor entender a diferenciação microscópica/morfométrica das lesões agressivas e não agressivas, vinte e cinco pacientes portadores de LCCG foram selecionados para o estudo. O DNA foi obtido através do sangue e de espécimes em blocos de parafina, oriundos de biópsias e tratamento cirúrgico. Um estudo microscópico morfométrico foi paralelamente realizado, para avaliar o número de células gigantes e densidade de volume das mesmas nas lesões agressivas e não agressivas. O sequenciamento genético dos treze exons do gene SH3BP2 nos vinte e cinco pacientes estudados evidenciou uma alteração no códon do exon 4 em 10 pacientes. A densidade de volume de células gigantes foi maior nas lesões agressivas quando comparadas às não agressivas (p=0,013). Não houve diferença significante quanto ao número de células gigantes/mm2 em lesões agressivas e não agressivas (p =0,245). / Central giant cell lesion (CGCL) is a benign disease of the jaws, with uncertain behavior, ranging from mild asymptomatic slow-growing swelling to an aggressive form, with pain, radicular and bone resorption and cortical destruction. Its aetiology is still unknown and there is discussion whether it is a reactive, neoplastic or genetic disease. Mutations on gene SH3BP3 were identified in patients with cherubism, which shares several clinical, radiographic and histopathological features with CGCL. In order to test the hypothesis that such mutations would be responsible for or would be related to CGCL and also in order to better understand microscopic morphometric differentiation of the aggressive and non-aggressive lesions, 25 patients with CGCL were selected to this study. DNA was extracted from blood samples and from tissue samples, obtained by biopsy or surgical treatment. Microscopic morphometric assessment was also performed, in order to evaluate the number and the volume density of the giant cells in aggressive and in non-aggressive lesions. Gene sequencing of all 13 exons in gene SH3BP3, performed on each of the 25 patients, showed an alteration in one codon from exon 4, in ten patients. Volume density of giant cells was greater in aggressive lesions than in non-aggressive ones (p=0,013). There was no significant difference on the number of giant cells per mm2 when comparing aggressive and non-aggressive lesions.

A expressão da conexina 32 e 43 nas células gigantes trofoblásticas foi analisada em condições de cultura celular com e sem influência de hormônios sexuais. Placentônios bovinos foram coletados de vacas prenhes em abatedouro nos diferentes períodos gestacionais e divididos em três grupos, primeiro terço (I), segundo terço (II), terceiro terço (III) e transportados ao laboratório em condições assépticas à temperatura de 4ºC em solução de PBS com antibiótico. No laboratório as células foram isoladas e cultivadas em meio D-MEM com 10% SFB por cinco dias. As detecções das conexinas 32 e 43 foram realizadas através de munofluorescencia, pelo método de amplificação da tiramida-fluoresceina, utilizando anticorpo primário policlonal a imunoglobulina de coelho, anti-conexina 32 e 43 de camundongo. Os resultados mostraram que as células gigantes trofoblásticas expressam conexinas 32 e 43 nos três períodos gestacionais com exceção da Cx32 no primeiro terço gestacional sem adição de hormônios, a qual passou a expressar fluorescência após a adição de hormônios. A distribuição da Cx43 evoluiu com a progressão da gestação, permanecendo limitada ao interior das células gigantes trofoblásticas, sem formar junções comunicantes. O terceiro terço gestacional mostra a Cx43 na CGTT localizada no interior do núcleo. A adição de hormônios ao meio de cultura vem confirmar que a progesterona e o estrógeno podem ter um papel no controle da Cx32. Para Cx43 onde se adicionou progesterona os níveis de expressão foram baixos no início aumentando no decorrer da gestação, o mesmo foi encontrado para o conjugado de progesterona/ estrógeno. Para o estrógeno no grupo I os níveis de expressão foram menores se comparados aos três grupos diminuindo no grupo II e voltando a aumentar no grupo III. / The trophoblast cells expression of connexins 32 and 43 was studied in cell culture conditions with or without influence of sexual hormones. Bovine placentomes were collected from pregnant cows in slaughterhouses in different gestational periods and so divided into three groups, first term (I), second term (II), and third term (III), and transported to the laboratory in aseptic conditions at a temperature of 40C in PBS solution with antibiotics. At the laboratory the cells were isolated and cultivated in D-MEM environment with 10% SFB for five days. The detections of connexins 32 and 43 were achieved through immunofluorescence, by the tyramide-fluorescein amplification method, using a rabbit polyclonal primary antibody anti-connexin 32 and 43 of mice. The results showed that the trophoblast cells expressed connexins 32 and 43 in the three gestational periods with an exception of the Cx32 at the first gestational period. However, after the addition of sexual hormones, they began to express the connexins in the cytoplasm in the first stage. The distribution of the Cx43 evolved with the progression of the gestation, remaining limited to the trophoblast`s cells interior, without formation of gap junctions. The third gestational term shows the Cx43 located inside the nuclei of the CGTT. Addition of hormones in the culture environment confirmed that estrogen and progesterone may have an important action controlling Cx32. For Cx43, the expression was low after prosterone was added to the culture medium, but increased as the gestation evolved, the same was found for a combined compost of estrogen\\ progesterone. For estrogen, in group I the expression levels were inferior when compared to the three groups decreasing in group II and increasing again in group III. We may conclude that the sexual hormes, specially estrogen, affect the expression of connexins in trophoblastic cells.

O presente trabalho estudou a expressão da conexina 43 nas células trofoblásticas gigantes bovinas, em especial nas células trofoblásticas gigantes binucleadas. Foram utilizadas 12 amostras de placenta bovina, divididas em três grupos segundo a fase gestacional, primeiro terço, segundo terço e terceiro terço da gestação. O tecido placentário foi fixado em solução metacarn e, posteriormente, submetido ao método tradicional de inclusão em parafina. A detecção da conexina 43 foi realizada através de imuno-histoquímica, pelo método de amplificação da tyramida, utilizando como anticorpo primário policlonal a imunoglobulina de coelho anti-conexina 43 de camundongo. Os resultados deste trabalho indicaram que as células trofoblásticas gigantes bovinas são capazes de expressar a conexina 43 nas três fases da gestação. A distribuição da conexina 43 evoluiu com a progressão da gestação, mas ficou limitada ao interior das células trofoblásticas gigantes bovinas, sem formar marcações pontuais na membrana citoplasmática que pudessem indicar a formação de junções comunicantes. A avaliação de diferentes protocolos histológicos e imuno-histoquímicos permitiu estabelecer a melhor metodologia para a preservação do arranjo tecidual da placenta bovina e a identificação da conexina 43 nas células trofoblásticas gigantes bovinas / The present study has researched the expression of Connexin-43 in bovine trophoblast giant cells, especially in binucleate trophoblast giant cells. Twelve samples of bovine placenta were used, divided into three groups according to the gestational phase, first part, second part and third part of gestation. The placental tissue was fixed in Methacarn solution and later submitted to the traditional method, that is, embedded in paraffin. The detection of Connexin-43 was done through immunohistochemistry by the tyramide amplification method, using as polyclonal primary antibody, rabbit immunoglobuline anti-mouse Connexin-43. The results of this study have revealed that the bovine trophoblast giant cells are capable of the expression of Connexin-43 in the three phases of gestation. The distribution of Connexin-43 evolved as gestation progressed, but was limited to the interior of the bovine trophoblast giant cells without punctate markings in the cytoplasmic membrane which could indicate the formation of communicating junctions. The assessment of different histological and immunohistochemical protocols allowed us to establish the best methodology for the preservation of the tissue arrangement of bovine placenta and the identification of Connexin-43 in the bovine trophoblast giant cells

Este trabalho teve como finalidade determinar e otimizar as condições para a preparação e a caracterização de monocristais de alguns óxidos que apresentam considerável dependência de suas propriedades físico-químicas finais e magnitude da pressão da atmosfera de crescimento. Experimentos que envolvem diversas adaptações de um sistema de fusão a laser de pedestais foram projetados para investigar o melhor crescimento de monocristais de molibdatos alcalinos isolados e mistos (CaMoO4, cristal gradiente de CaMoO4-SrMoO4, Ca2</subFeMo06) e de um óxido titanato alcalino (Ba0,77Ca0,23TiO3). Também, os aspectos teóricos das condições experimentais foram estudados nos termos de um modelo termodinâmico existente. Adicionalmente, é mostrado que técnicas de caracterização estruturais (curvas de rocking com raios-X, topografia de raios X, método de Rietveld), térmicas (análise térmica diferencial) e ópticas (absorção ótica) foram aplicadas com sucesso além de outros métodos de caracterização bem estabelecidos (fotografia de retro-reflexão de raios-X, análise por raios-X de elétrons retro-espalhados, microscopia eletrônica de varredura). Os experimentos e os dados das caracterizações revelam que CaMoO4, SrMoO4 e Ba0,77Ca0,23 podem ser crescidos ao ar sem alterações de suas propriedades quando tratamento térmico cuidadoso é realizado nos reagentes de partida e aos produtos, enquanto que o Ca2FeMoO6 somente pode ser crescido em atmosfera isostática de N2 e em uma faixa pequena de pressões (0,25-0,75 bar). Em qualquer caso, a estabilidade do processo de crescimento é alcançada quando gradientes térmicos específicos e relações geométricas na zona fundida são estabelecidos após a imposição de uma atmosfera adequada de crescimento. As medidas estruturais, térmicas, ópticas e de composição convencionais confirmam a formação de fases e estequiometrias desejadas. Os dados estruturais refinados e de alta resolução demonstram o controle da composição e conseqüentemente do espaçamento interplanar de rede no cristal gradiente CaMoO4-SrMoO4, um primeiro exemplo de cristal gradiente de um óxido crescido por uma técnica de zona flutuante, e abrindo um panorama largo de possibilidades para a preparação de outros cristais gradientes de óxidos. / This thesis examines the conditions for the optimized single crystal preparation and characterization of some oxides compounds that present high dependency of the nature and pressure magnitude of the growth atmosphere on their final physico-chemical properties. Experiments involving several adaptations to a laser-heated pedestal growth system were designed to investigate the best crystal growth of a mixed alkaline titanate oxide (Ba0,77Ca0,23TiO3) and single and mixed alkaline molybdates oxides (CaMoO4, cristal gradiente de CaMoO4-SrMoO4, Ca2</subFeMo06). AIso, theoretical aspects of the experimental conditions were studied in terms of an existent thermodynamical model. In addition, it is shown that non-standard to techniques to characterize crystal\' s structural features (X-ray rocking, X-ray topography, Rietveld\'s method), thermo-physical (Differential Thermal Analysis) and optical properties (Optical Absorption) were succesfully applied besides others well established characterization methods. (X-ray Laue backreflection photography, Electron Dispersive X-Ray Analysis, Scanning Electron Microscopy). Experiments and characterizations data reveal that CaMoO4, SrMoO4 e Ba0,77Ca0,23succesfully grow in air at room conditions when careful thermal treatment of the starting materiaIs and products, while Ca2FeMo06 only can be grown in isostatic atmosphere of N2/H2 (95&#8240 vol./5&#8240 voI.) and at a short pressure range (0.25-0.75 bar). In any case, the stability of the growth process is reached when specific thermal gradients and geometric relations in the meU are established after the imposition of an adequate growth atmosphere. Conventional structure, thermal, optical and composition measurements confirm the formation of desired phases and stoichiometries with excellent results for both single and mixed compounds. Refined and high resolution structural data demonstrate large control of composition and therefore interplanar lattice spacing in the gradient crystal CaMoO4-SrMoO4, a first example of an oxide gradient crystal grown by a floating zone technique, and open a wide panorama of possibilities for the preparation of novel gradient oxides crystals.

O objetivo do presente estudo é descrever as características físicas, químicas, morfológicas e funcionais do sêmen do tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) em cativeiro. Estes resultados representam um dos primeiros requisitos para o conhecimento das características seminais da espécie, visando, em médio prazo, a aplicação de técnicas de reprodução assistida e a formação de bancos de germoplasma. Treze animais foram submetidos à colheita de sêmen em zoológicos no estado de São Paulo Brasil. O método para colheita de sêmen foi a eletroejaculação, semelhante ao realizado em várias espécies silvestres e domésticas, resultando em onze amostras colhidas de nove indivíduos (69,23%). Os testes convencionais indicaram um volume médio de 1,30 ± 0,58 ml, a motilidade média de 33,18 ± 20,14%, o vigor médio de 2,30 ± 0,65, a concentração média de 129,41 ±114,3 x 106 / cm3, o pH médio de 7,44 ± 0,60. A avaliação morfológica apresentou média de defeitos totais de 64,53 ± 19,97%, defeitos maiores 53,77 ± 33,22% e defeitos menores 10,75 ± 6,23%. Nos testes funcionais, a avaliação da integridade da membrana acrossomal mostrou uma média de 16,3 ± 9,3% de danificadas. A avaliação da integridade da membrana plasmática mostrou uma média de 18,9 ± 12,2% de danificadas. A avaliação da atividade mitocondrial revelou as seguintes médias: Classe I = 66,4 ± 19,0%; Classe II = 18,7 ± 9,1%; Classe III = 8,0 ± 6,3%; Classe IV = 3,9 ± 3,1% e Classe V = 3,0 ± 2,9%. A avaliação da fragmentação de cromatina resultou em uma média de 13,21 ± 9,13%. Conclusão: foi demonstrada a aplicabilidade da eletroejaculação na colheita de sêmen de tamanduás-bandeira. Os testes possibilitaram uma análise detalhada das características seminais da espécie, aspectos estes ainda inéditos na literatura mundial. Houve grande variação nos resultados obtidos, refletindo diferenças das condições de manejo e de idade entre os indivíduos e, possivelmente um baixo número amostral estudado. Novos estudos devem ser realizados em animais de vida livre. / The purpose of the present study was to describe the physical, chemical, morphological, and functional features of semen collected from Giant Anteaters (Myrmecophaga tridactyla) raised in captivitya first step toward the feasibility of assisted reproduction techniques and germplasm banks for this species in the mid-term future. Electroejaculation, a method currently applied to a number of wild and domestic species, was performed in 13 animals housed in zoos located in the state of São Paulo, Brazil, yielding 11 samples from 9 animals (69.23%). The following mean values were obtained: volume, 1.30 ± 0.58 mL; motility, 33.18 ± 20.14%; vigor, 2.30 ± 0.65; concentration, 129.41 ± 114.3 x 106 cm-3; pH, 7.44 ± 0.60. Major and minor defects accounted for 53.77 ± 33.22% and 10.75 ± 6.23% of the total, respectively (mean total defect rate, 64.53 ± 19.97%). Damage was found in 16.3 ± 9.3% of acrosomal membranes and 18.9 ± 12.2% of plasma membranes. Mitochondrial activity, categorized as Classes I through V, was 66.4 ± 19.0%, 18.7 ± 9.1%, 8.0 ± 6.3%, 3.9 ± 3.1%, and 3.0 ± 2.9%, respectively. Chromatin fragmentation rate was 13.21 ± 9.13%. Conclusion: The study demonstrated the feasibility of applying electroejaculation to Giant Anteaters for semen collection, allowing for a detailed description of semen features previously unreported for this species. The large variation found in the results reflects differences in management conditions, age range, and possibly the small number of sampled animals, thus warranting further studies with free-ranging specimens.

PURPOSE: To determine, under flow conditions, whether reduced connections between Schlemm’s canal (SC) inner wall (IW) and juxtacanalicular tissue (JCT) cells play a role in giant vacuole (GV) formation; and whether decreased amount of cell margin overlap between adjacent IW cells promotes paracellular pore formation using serial block-face scanning electron microscopy (SBF-SEM). METHODS: Normal human eyes were immersion-fixed (0 mmHg, N=2) or perfusion-fixed (15 mmHg, N=1). Frontal and radial sections of SC were processed for SBF-SEM. IW and JCT cells, GVs, and pores were 3D-reconstructed. In each IW cell, total number of connections with underlying JCT cells/matrix was determined. Total cell margin length (TCML) and zero-overlap length (ZL) of each IW cell were measured to calculate percent zero-overlap length (PZL=ZL/TCML). All data were compared between the eyes fixed at 0 and 15 mmHg. RESULTS: Total number of IW/JCT connections in individual IWs significantly decreased in the eye fixed at 15 mmHg (33±5, N=5 cells) compared to those fixed at 0 mmHg (189±12, N=4 cells, p<0.001). The summed GV volume in individual cells significantly increased in the eye fixed at 15mmHg (218.03±19.65 μm3) compared to those fixed at 0 mmHg (82.33±27.22 μm3, p=0.0043). PZL increased 26.68% (p=0.001) in the eye fixed at 15mmHg vs. those fixed at 0mmHg, and all paracellular pores were found only in regions where the overlap length was 0 μm. CONCLUSIONS: Cellular connections between IW/JCT and IW/IW cells play a role in GV and pore formation in normal human eyes under flow conditions. Our results provide a baseline for future comparison with primary open angle glaucoma eyes.