The objective of this study was to determine the onset of puberty by using progesterone profiles and anterior pituitary gonadotropin releasing hormone (GnRH) challenges in purebred and crossbred Holstein and Jersey heifers. In experiment 1, fifty prepubertal heifers by four sire - dam classifications (18 HH, 11 JJ, 10 JH, and 11 HJ) were used. The HH heifers attained puberty at an older age than the HJ, JH or JJ heifers, and these three classifications were not different from each other. There were significant differences in weight and wither height at puberty and average daily weight gain (ADWG) between all four sire - dam classifications. Season of birth had a significant effect on age and weight at puberty. In experiment 2, four prepubertal heifers from each sire - dam classification in experiment 1 were used at 3, 6, 9 and 12 mo of age to determine the effects of administering 200 μg GnRH on LH secretion. The effects of breed, age at challenge, and their interaction were only significant for time to LH peak. In conclusion, age at puberty in crossbred Holstein X Jersey heifers is regulated by breed and season of birth, and further research with larger sample sizes is needed to establish the relationship of pituitary maturation and the capacity to secrete LH in response to GnRH stimulation as related to onset of puberty in purebred and crossbred dairy heifers. / Master of Science

The objective of this experiment was to examine the effects of varying the interval from follicular wave emergence to progestin removal on follicular dynamics and the synchrony of estrus. The experimental design was a 2x2x2 factorial with GnRH or estradiol-17 beta (E2) + progesterone (P4), controlled internal drug-releasing device (CIDR) treatment duration, and PG or saline treatment as main effects. Cycling, Angus cows (n=49), on d 6 to 8 of the estrous cycle, were randomly assigned to receive a CIDR treatment for 7 or 9 d. Approximately half of the cows from each CIDR group received either GnRH (100 mcg) or E2+P4 (1 mg E2 + 100 mg P4) at CIDR insertion. Cows in GnRH or E2+P4 groups were further divided into those that received PG (37.5 mg) or saline at CIDR insertion. All cows received PG (25 mg) 1 d prior to CIDR removal. The interval from follicular wave emergence to CIDR removal was longer for cows treated with GnRH (6.6 d) or a CIDR for 9 d (6.5 d) compared to those treated with E2+P4 (4.7 d) or a 7-d CIDR (4.8 d) (P < 0.05). Cows treated with PG or GnRH at CIDR insertion or a 9-d CIDR had a larger dominant follicle (DF) at CIDR removal than those treated with saline, E2+P4, or a 7-d CIDR. (P < 0.07). Altering the interval from wave emergence to progestin removal created differences in size of the DF at CIDR removal but did not affect the synchrony of estrus. / Master of Science

To improve the knowledge on progesterone (P4)-based hormonal protocols for synchronization of ovulation in Bos indicus, three studies were performed. The first study, consisting of three experiments (two in non-lactating cows, and one in Nelore heifers), were based on daily ultrasound evaluation and blood sampling for circulating P4 at specific times [onset of the protocol (D0) and first prostaglandin F2&#945; (PGF) administration] of P4-based protocols differing in: inducer of the follicle wave emergence; protocol lengths; and ovulation inducer at the end of the protocol. Administration of 16.8 &#181;g of buserelin acetate (GnRH) at the beginning of the protocol was associated with better ovulation rate after D0 (~55%), and higher number of corpus luteum (CL) at PGF. In addition, sometimes GnRH-based protocols were associated to early emergence of the follicle wave (~1.9 d after D0) and/or bigger ovulatory follicle, as well as greater circulating P4 at the time of PGF, especially in females that ovulated after GnRH administration. Nevertheless, protocols based on estradiol benzoate (EB) promoted delayed follicular wave emergence (~2.4 d after D0), but both (GnRH and EB) were associated to satisfactory synchronization rate of follicular wave emergence between D0 and D5 (~92%). In contrast, short protocols (5 d of P4 implant) only with insertion of a P4 implant on D0 were associated to low follicle wave emergence between D0 and D5 (~30%). However, the three strategies mentioned above promoted high ovulation rate at the end of the protocol (~85%), and did not differ in relation to the time of ovulation. The second study, consisting of two experiments (one in Nelore heifers, and the second in Nelore cows), evaluated fertility and some physiological variables of P4-based 7 d protocols beginning with EB (conventional protocol) or GnRH (16.8 &#181;g of buserelin acetate) with adaptations (eCG and PGF on D6, and an additional PGF on D7), and with or without GnRH (8.4 &#181;g) administration at the time of AI. As expected, higher ovulation rate after D0 (~67%) and more CL at PGF were observed in protocols starting with GnRH. Administration of EB at the beginning of the protocol was associated to greater luteolysis rate between D0 and PGF (~33%). At the time of implant withdrawal (D7), GnRH-based protocols induced bigger dominant follicles, and more estrus expression by the time of AI. However, only in heifers it was observed a bigger dominant follicle at the time of AI for GnRH group. Both (GnRH and EB) obtained satisfactory ovulation rate after AI (~92%). In heifers, no treatment effect was observed (EB vs. GnRH on D0, with vs. without GnRH at the time of AI) or interactions on pregnancy/AI (P/AI). However, in cows EB-based protocols obtained great P/AI when GnRH was administered at the time of AI (60.2% vs. 69.5%). In addition, this administration also increased P/AI of cows that did not express estrus during the protocol (no estrus: no GnRH = 48.2% vs. GnRH = 59.1%), although this effect was not observed in heifers. The third study evaluated ovarian dynamics and fertility of Nelore cows submitted to a P4-based 7 d FTAI protocol using 0.5 or 1.0 mg of estradiol cypionate (EC) at the time of implant removal (D7). Although 1.0 mg EC induced a smaller preovulatory follicle and lower ovulation rate after AI in multiparous, the P/AI was similar for both doses in this parity (multiparous: 0.5 mg = 58.4% vs. 1.0 mg = 59.0%). However, primiparous had lower P/AI when receiving 0.5 mg EC (primiparous: 0.5 mg = 30.2% vs. 1.0 mg = 53.6%). Therefore, both studies allowed a more refined knowledge regarding P4-based protocols in Bos indicus, especially on the efficiency of 7 d protocols and the inclusion of GnRH at the start or in the end of this type of synchronization protocol. / Com o intuito de aprofundar o conhecimento sobre protocolos hormonais de sincronização da ovulação à base de progesterona (P4) em Bos indicus, três estudos foram realizados. O primeiro estudo, composto por três experimentos (dois em vacas Nelore não-lactantes, e um em novilhas Nelore), baseou-se em avaliações ultrassonográficas diárias e colheitas de sangue para P4 circulante em momentos pontuais [início do protocolo (D0) e administração da primeira prostaglandina F2&#945; (PGF)] de protocolos à base de P4 diferindo em: indutor de emergência de onda folicular; duração do protocolo; e indutor da ovulação ao final do protocolo. A administração de 16,8 &#181;g de acetato de buserelina (GnRH) ao início do protocolo promoveu maiores taxas de ovulação após o D0 (~55%) e também maior número de corpos lúteos (CL) no momento da PGF. Em alguns momentos, protocolos à base de GnRH estiveram associados a antecipação da emergência de onda folicular (~1,9 d após D0) e/ou maior folículo ovulatório, bem como maior P4 circulante no momento da PGF, e pontualmente em fêmeas que ovularam após a administração deste fármaco. Não obstante, protocolos à base de benzoato de estradiol (BE) promoveram atraso na emergência da onda folicular (~2,4 d após D0), porém ambos (GnRH e BE) estiveram associados a alta taxa de sincronização da emergência de onda folicular entre D0 e D5 do protocolo (~92%). Em contrapartida, protocolos curtos (5 d de implante de P4), apenas com a inserção de implante de P4 no D0, estiveram associados à baixa taxa de emergência de onda folicular (~30%). Entretanto, as três estratégias citadas acima promoveram alta taxa de ovulação ao final do protocolo (~85%), e não diferiram em relação ao horário da ovulação. O segundo estudo, composto por dois experimentos (um em novilhas Nelore e o segundo em vacas Nelore), testou a fertilidade e variáveis fisiológicas de protocolos à base de P4 com duração de 7 d iniciando com BE (convencional) ou com GnRH (16,8 &#181;g de acetato de buserelina) com adaptações (eCG e PGF no D6, e uma PGF adicional no D7), e com ou sem a administração de GnRH (8,4 &#181;g) no momento da IATF. Ambos também receberam cipionato de estradiol (CE) no D7. Como esperado, observou-se maior taxa de ovulação (~67%) após o D0 e maior número de CL na PGF em protocolos iniciando com GnRH. A administração de BE ao início do protocolo esteve associada a maior luteólise entre D0 e PGF (~33%). No momento da retirada do implante (D7), protocolos à base de GnRH promoveram maior folículo dominante, e além disso, mais expressão de estro até a IATF. Contudo, apenas em novilhas observou-se maior folículo dominante no momento da IATF para o grupo GnRH. Ambos protocolos (iniciados com GnRH ou BE) obtiveram altas taxas de ovulação após a IATF (~92%). Em novilhas, não se observou efeito de tratamento (BE vs. GnRH no D0, com vs. sem GnRH na IATF) ou interações sobre a prenhez/IA (P/IA). Entretanto, em vacas, protocolos à base de BE obtiveram maior P/IA quando houve a administração de GnRH no momento da IATF (60,2% vs. 69,5%). Além disso, GnRH na IATF também favoreceu a P/IA de vacas que não expressaram estro durante o protocolo (Sem cio: sem GnRH 48,2% vs. com GnRH 59,1%), apesar de não ter sido observado este efeito em novilhas. O terceiro estudo avaliou a fertilidade e dinâmica ovariana de vacas Nelore submetidas a protocolo à base de P4 com duração de 7 d utilizando 0,5 ou 1,0 mg de CE no momento da retirada do implante (D7). Apesar de 1,0 mg CE produzir menor folículo preovulatório e menor taxa de ovulação após a IA em multíparas, a P/IA foi semelhante para ambas as doses nesta categoria (multíparas: 0,5 mg = 58,4% vs. 1,0 mg = 59,0%). Contudo, primíparas tiveram menor P/IA ao receber 0,5 mg CE (primíparas: 0,5 mg = 30,2% vs. 1,0 mg = 53,6%). Portanto, os estudos permitiram um conhecimento mais refinado em relação a protocolos à base de P4 em Bos indicus, especialmente quanto à eficiência de protocolos de 7 d e inclusão de GnRH tanto ao início quanto ao final.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:44:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Roberta Martins Rosa.pdf: 1375205 bytes, checksum: a8d1eed4f0dc08a9f12cad32c1a7c305 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / The objective of this study was to analyze the histological aspects of tuvira testes (Gymnotus spp.) subjected to reproduction by different hormonal inducers. Sixty tuviras were captured, approximately 40g ± 10g and transported to fish sector of PUC -Goiás. The fish were placed during the period from December 2013 to February 2014, in a period of adaptation to 90 days. Using a randomized design, has defined four treatments with ten repetitions or ten animals per box, each animal being a repeat. For induction of tuvira, three hormones were tested. The control group, used saline at 2%, the others group used: the extract of carp pituitary (EBHC), equine chorionic gonadotropin (ECG) and synthetic analogue of gonadotropin-releasing hormone (GnRH-a). The three hormones were applied in two doses, the first one (preparatory) in order to promote full maturation of gametes and the second for the purpose of releasing the gametes. For histological analysis, were killed five males per treatment, the testicles were removed and evaluated by the ventral section of the coelomic cavity and quickly stored in Bouin s fixative solution for twenty-four hours. After fixation of the testicles, slides were prepared and photographed at the Molecular Systematics Laboratory of the Federal University of Viçosa. Were photographed 15 frames per fish in light microscope, where these ten images were analyzed using the software Image- Pro Plus ®. The volume ratio occupied by the components of testicular parenchyma (seminiferous tubules and intertubular tissue) was determined by counting 2660 points projected on ten images obtained at random, with 266 points in each image. Populations were quantified spermatogonia type A, type B, primary spermatocytes, secondary spermatocytes, spermatids and Sertoli cells (S) and the proportion of the lumen. Data were analyzed by comparison of means by Tukey test, performed by the Statistical Analysis System software - SAS. The results indicate that the GnRHhormone showed a greater ability to promote final maturation in the testes, followed by ECG hormone. The EBHC hormone failed to promote the final maturation induced tuviras, suggesting a longer duration than other hormones used. One possible explanation for the greater induction of the GnRH-hormone would be the ability to produce endogenous gonadotropins. Other hormones have justified their answers in the specificity of membrane receptors on Sertoli cells and Leydig. Researching the tuviras response to hormonal inductors, are required. / O objetivo deste trabalho foi analisar os aspectos histológicos de testículos de tuvira (Gymnotus spp.) submetida a reprodução por diferentes indutores hormonais. Foram capturadas sessenta tuviras, de aproximadamente 40g±10g e transportadas para o setor de piscicultura da PUC - Goiás. Os peixes foram acondicionados durante o período de dezembro de 2013 a fevereiro de 2014, passando por um período de adaptação ao cativeiro de 90 dias. Utilizando delineamento inteiramente casualizado, foram definidos quatro tratamentos com dez repetições ou seja, dez animais por caixa, sendo cada animal uma repetição. Para indução a reprodução da tuvira, foram testados três hormônios e para o grupo controle, solução salina a 2%. Os utilizados foram: o extrato bruto de hipófise de carpa (EBHC), a gonadotropina coriônica equina (ECG) e análogo sintético do hormônio liberador de gonadotrofina (GnRH-a). Os três hormônios foram aplicados em duas dosagens, sendo a primeira (preparatória) com a finalidade de promover a maturação total dos gametas e a segunda com a finalidade de liberação dos gametas. Para as análises histológicas, foram eutanasiados cinco machos de cada tratamento, os testículos foram avaliados e retirados através de secção ventral da cavidade celomática e armazenados rapidamente em solução fixadora de Bouin por vinte e quatro horas. Após a fixação dos testículos, lâminas foram confeccionadas e fotografadas no Laboratório de Sistemática Molecular da Universidade Federal de Viçosa. Foram fotografadas 15 imagens por peixe em fotomicroscópio, onde destas, dez imagens foram analisadas utilizando o software Image-Pro Plus ®. A proporção volumétrica ocupada pelos componentes do parênquima testicular (túbulos seminíferos e tecido intertubular) foi determinada a partir da contagem de 2660 pontos projetados sobre dez imagens obtidas ao acaso, sendo 266 pontos em cada imagem. Foram quantificadas as populações de espermatogônias do tipo A, do tipo B, espermatócitos primários, espermatócitos secundários, espermátides e células de Sertoli (S) e proporção de Lúmen. Os dados obtidos foram analisados pela comparação de médias através do teste de TUKEY, executado pelo software Statistical Analysis Sistem - SAS. Os resultados indicaram que o hormônio GnRH-a apresentou uma maior capacidade para promover a maturação final nos testículos, seguido pelo hormônio eCG. O hormônio EBHC não conseguiu promover a maturação final nas tuviras induzidas, sugerindo um maior tempo de ação que os demais hormônios utilizados. Uma possível explicação para a maior indução do hormônio GnRH-a seria na capacidade de produzir gonadotrofinas endógenas. Os demais hormônios teriam suas respostas justificadas na especificidade dos receptores de membrana das células de Sertoli e Leydig. Maiores estudos sobre a resposta de tuviras a indutores hormonais, se fazem necessárias.

A falta de conhecimento sobre a reprodução do avestruz dificulta o desenvolvimento da sua criação comercial devido a uma baixa eficiência reprodutiva. O objetivo deste estudo foi avaliar a ação da aplicação de um análogo de GnRH (lecirelina - Gestran Plus®) na indução da ovulação em fêmeas adultas de avestruz. Primeiramente, um grupo de 10 fêmeas foi avaliado para determinação de seu status reprodutivo, por meio da mensuração das concentrações séricas de estradiol e progesterona (coletas de sangue 3x/semana); da observação do comportamento reprodutivo; da determinação do desenvolvimento ovariano por exame ultrassonográfico (a cada 21 dias); e pela postura de ovos. Após o término desta primeira fase, as fêmeas foram separadas em grupo controle (n = 3) e grupo tratado (n = 6). A cada semana, 2 fêmeas do grupo tratado eram selecionadas para a aplicação intramuscular de 1ml (25&#956;l) de lecirelina, e os seus efeitos avaliados pela análise das concentrações séricas de estradiol, progesterona e corticosterona (0h, 6h, 24h, 48h e 96h pós-aplicação); pela verificação do desenvolvimento ovariano e ocorrência de ovulação através de exames ultrassonográficos (24h, 48h e 96h); pela observação de comportamento reprodutivo (0h, 48h e 96h) e pela postura de ovos. O tratamento foi repetido no mesmo animal a cada 21 dias e em cada tratamento realizado, 2 fêmeas do grupo controle eram submetidas às mesmas análises. Os resultados indicam que a aplicação de lecirelina foi capaz de induzir a ovulação em 77% dos tratamentos realizados, com postura de ovos normais em 50% das induções. Assim, o tratamento proposto foi considerado eficiente na indução da ovulação em fêmeas de avestruz desde que seja aplicado em fêmeas que apresentem ovário bem desenvolvido. / The lack of knowledge about the ostrich reproduction delays the development of the ostrich commercial breeding due to a low reproductive performance. The aim of this study was to evaluate the effect of the application of an analog of GnRH (Lecirelin - Gestran Plus®) for induction of ovulation in adult female ostriches. Initially, a group of 10 adult female ostriches were evaluated in order to determine their reproductive status, by measuring serum levels of estradiol and progesterone (blood sampling - 3 times a week), by the observation of reproductive behavior, by the evaluation of the ovarian development through ultrasound examination (repeated every 21 days) and by the egg laying data. After the end of the first phase, female ostriches were separated into a control group (n = 3) and a treated group (n = 6). Every week, two females from the treated group were selected to receive the treatment: an intramuscular application of 1 ml (25&#956;l) of Lecirelin. The effect of the application was evaluated by the analysis of serum concentrations of estradiol, progesterone and corticosterone (0h, 6h, 24h, 48h and 96h post-application), by the verification of the ovarian development and the occurrence of ovulation through ultrasound examinations (24h, 48h and 96h), by the observation of reproductive behavior (0h, 48h and 96h) and by the egg laying data. The intramuscular application was repeated in the same animal every 21 days and two females from the control group were subjected to the same analysis during each treatment. The results indicate that the application of Lecirelin was able to induce ovulation in 77% of the treatments with normal egg laying in 50% of inductions. Thus, the treatment was found effective in inducing ovulation in female ostrich provided that it is applied in females who exhibit well developed ovary.

Neurônios GnRH e kisspeptina representam as populações neuronais de maior importância no controle da reprodução. Estradiol liga-se ao seu receptor expresso pelos neurônios kisspeptina para regular a libertação de GnRH. No modelo animal OVX+E a atividade do neurônio GnRH e pico de LH é depende do estradiol e hora do dia. Nesse estudo, embora a taxa de disparo dos neurônios GnRH seja similar entre os grupos, o padrão dos potenciais revelou uma mudança para maior duração do estouro em camundongos no proestrous, além do fato de uma maior resposta da hipófise. A prolactina tem grande impacto na modulação do eixo HPG e kisspeptina são mediadores dos efeitos da prolactina sobre a reprodução. Uma pequena porcentagem de neurônios de kisspeptina do AVPV foi indiretamente despolarizada pela prolactina. Este efeito requeria a via de sinalização PI3K. Camundongos portadores de inativação de Stat5a/b em células kisspeptina exibiram um início precoce de ciclicidade estro, indicando que os fatores de transcrição STAT5 exercem um efeito inibitório sobre o momento da puberdade. / GnRH and kisspeptina neurons represent the most important neuronal populations in the control of reproduction. Estradiol binds to its receptor expressed by the kisspeptina neurons to regulate the release of GnRH. In the animal model OVX+E the activity of the GnRH neuron and LH surge is dependent of estradiol and time of day. In this study, although the firing rate of GnRH neurons was similar between groups, the pattern of potentials revealed a change to longer burst duration in mice in proestrous, and the pituitary response was greater in this group. Prolactin has impact on HPG axis modulation and kisspeptin is a mediator of the effects of prolactin on reproduction. A small percentage of AVPV kisspeptin neurons were indirectly depolarized by prolactin. This effect required the PI3K signaling pathway. Mice bearing Stat5a/b inactivation on kisspeptin cells exhibited an early onset of estrus cyclicity, indicating that STAT5 transcription factors exert an inhibitory effect on the time of puberty.

La hormona gonadotropina coriónica humana (hCG) se emplea de forma rutinaria para inducir la maduración final ovocitaria en ciclos de fecundación in vitro (FIV). Sin embargo, su utilización está relacionada con la aparición del Síndrome de Hiperestimulación Ovárica (SHO), especialmente cuando ciertos factores de riesgo están presentes, principalmente la presencia de un número elevado de folículos. Este riesgo puede ser drásticamente disminuido sustituyendo la hCG por un agonista GnRH como inductor de la maduración final en ciclos FIV con antagonistas GnRH. Aunque, este uso se asocia a una alta tasa de aborto temprano ocasionada por una fase lútea deficiente. La función del cuerpo lúteo se ve seriamente comprometida con el empleo del agonista GnRH (luteólisis), sin embargo, la potente acción luteotrópica de la hCG puede ser beneficiosa empleando dosis pequeñas como suplemento en la fase lútea y sin incrementar el riesgo de SHO. En un esfuerzo por reducir la tasa de abortos clínicos asociada al empleo de agonista GnRH, la presente tesis estudia la utilización de pequeñas dosis de hCG como suplemento de la fase lútea con el objetivo de rescatar el cuerpo lúteo, normalizar las tasas de embarazo y gestación evolutiva; además de reducir la presentación del SHO en la paciente con alta respuesta a la estimulación ovárica en ciclos FIV. / Human gonadotropin chorionic hormone (hCG) is widely used to induce final follicular maturation in in vitro fertilization cycles (IVF). However, its use is closely related to Ovarian Hyperstimulation Syndrome (OHSS) genesis, especially when certain risk factors are present, mainly a high number of recruited follicles. This risk may be drastically reduced, substituting hCG by a GnRH agonist for triggering in GnRH antagonist cycles. Nonetheless, this protocol is linked to high rates of early pregnancy loss due to a deficient luteal phase. Corpus luteum function is seriously compromised when a GnRH agonist is used for triggering (luteolysis), however, the potent luteotrophic action of hCG may be of benefit if low doses are employed for supplementing luteal phase, without increasing OHSS risk. In an effort to reduce early pregnancy losses associated to the use of GnRH agonist for triggering, this PhD. Thesis focuses on the use of low doses of hCG as luteal phase support with the aim of rescue corpus luteum function, normalizing pregnancy and on-going pregnancy rates; and at the same time reducing the frequency of OHSS in high responders to ovarian stimulation in IVF cycles.

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Untersuchungen zu Schlachtkörperqualität und Ebergeruchsstoffen bei mit einem GnRH-Analogon geimpften, chirurgisch kastrierten und intakten männlichen Mastschweinen Franziska Sauer Universität Leipzig, Medizinische Tierklinik, Leipzig, Deutschland Zielstellung Ziel der vorliegenden Studie war, Auswirkungen der Impfung gegen Ebergeruch bei männlichen Mastschweinen in konventioneller Haltung zu untersuchen und mit intakten Mastebern und Kastraten zu vergleichen. Tiere und Methode Insgesamt 348 männliche Mastschweine wurden in vier Gruppen wie folgt unterteilt: Zwei Gruppen enthielten mit Improvac® geimpfte Schweine (1. Impfung 11. Lebenswoche (LW)): Gruppe 1: n=84, 2. Impfung 18. LW, Gruppe 2: n=83, 2. Impfung 21. LW. Gruppe 3 bestand aus 90 Kastraten und Gruppe 4 aus 91 unkastrierten männlichen Mastschweinen. Die Schweine wurden im Alter von 26 bzw. 27 Wochen geschlachtet. Mast- und Schlachtleistung, das Fettsäuremuster im Rückenfett sowie Hodengewicht, Hodenhistologie und Ebergeruchsstoffe im Rückenfett wurden untersucht. Ergebnisse GnRH-geimpfte Schweine wiesen eine bessere Futterverwertung als chirurgisch kastrierte auf. Die Schlachtkörper der Geimpften hatten einen signifikant höheren Magerfleischanteil und weniger Rückenfett als die der Kastraten und erzielten dadurch einen höheren Schlachterlös. Das Fettsäuremuster der geimpften Schweine gleicht im Hinblick auf die Menge an PUFA eher den intakten als den chirurgisch kastrierten. In früherem Alter geimpfte Schweine zeigen histologisch eher eine Hodenhypoplasie, später geimpfte eher eine Hodenatrophie. Ebergeruchsstoffe im Rückenfett waren in beiden Impfgruppen und bei den Kastraten signifikant niedriger als bei intakten Mastebern. Schlussfolgerung Die Impfung männlicher Schweine mit Improvac® ist eine tierschutzgerechte, praktikable und wirtschaftliche Alternative zur Vermeidung von Ebergeruch. Literatur Sattler et al: BMTW 2014; 127:10-16 Sauer et al: WTM 2014;101:103-109 franziska.sauer@vetmed.uni-leipzig.de

In der vorliegenden Arbeit werden Beiträge zur Entwicklung neuer qualitativer und quantitativer analytischer Methoden für die Untersuchung von Cetrorelix und anderen GnRH-Antagonisten während des Aggregationsprozesses vorgestellt. Für die qualitative Untersuchung von GnRH-Antagonisten wurden am Modellpeptid Cetrorelix massenspektrometrische Methoden entwickelt und auf weitere GnRH-Antagonisten übertragen. Eingesetzt wurde sowohl die ESI-TOF-MS als auch die MALDI-TOF-MS. Beide massenspektrometrische Verfahren zeigten für die untersuchten GnRH-Antagonisten polydisperse Verteilungen oberhalb der fluoreszenzspektroskopisch bestimmten kritischen Aggregatbildungskonzentration (cac). Bei den ESI-TOF-MS-Messungen konnte ein stark von Cetrorelix abweichendes Aggregationsverhalten für Ozarelix beobachtet werden. Für die Quantifizierung des Aggregatanteils in Cetrorelix- bzw. Ozarelixproben wurde eine Methode mit der MALDI-TOF-MS etabliert, die Untersuchungen an pharmazeutisch relevanten Peptidhormon-Formulierungen ermöglicht. Systematische Untersuchungen zum Einfluss verschiedener An- und Kationen sowie deren Konzentrationen auf die Cetrorelixaggregation erfolgten mit der Fluoreszenzspektroskopie. Die erhaltenen Ergebnisse ermöglichen eine bessere Charakterisierung der Aggregation und lassen Abschätzungen über das Aggregationsverhalten von Cetrorelix in verschiedenen Medien mit unterschiedlichen Elektrolyten zu. Mit dem Einsatz der Transmissionselektronenmikroskopie war es erstmals möglich, Aggregate von GnRH-Antagonisten visuell darzustellen.