FIALHO, Andre Melo Nunes. Estudo da transmissão intrafamiliar do Helicobacter pylori em uma comunidade de baixa renda em Fortaleza, Ceará. 2012.77 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-17T15:44:50Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_amnfialho.pdf: 948370 bytes, checksum: 1644176f9b0b1b09c6c6022899251cee (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-02-17T15:45:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_amnfialho.pdf: 948370 bytes, checksum: 1644176f9b0b1b09c6c6022899251cee (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-17T15:45:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_amnfialho.pdf: 948370 bytes, checksum: 1644176f9b0b1b09c6c6022899251cee (MD5) Previous issue date: 2012 / To further evaluate interfamilial transmission of H. pylori infection during childhood, we investigated the prevalence of H. pylori infection in family members from a poor H. pylori high prevalence urban community in the Northeast of Brazil. H pylori infection was investigated in 570 members of 128 households, by 13C-urea breath test in children and by ELISA in mothers and other adult relatives. The overall prevalence of H. pylori infection 65.9% (376/570) increased with age (p < 0.001) and ranged from 28.9%, in children aged 6 months to 5 years to 82% in adults over 40 years. An H. pylori positive mother and the number of infected siblings are independent risk factors for childhood H. pylori infection (OR = 2.2, 95% CI = 1.0-4.6 and OR = 4.3, 95% CI = 2.3-8.1, respectively). The number of siblings, number of younger siblings, and number of infected younger siblings were also associated with the infection in the univariate analysis. The number of infected younger siblings remained independently associated with the infection (p=0.000), even after controlling for all the above cited variables, in addition to the H. pylori status of siblings and mothers, age, number of people per room, and number of children in the household. The transmission of H. pylori occurs from infected mothers to their offspring and among siblings, notably from younger siblings to the older ones. / Para melhor avaliar a transmissão interfamiliar da infecção por H. pylori durante a infância, foi investigada a prevalência de infecção por H. pylori em famílias de uma comunidade urbana pobre de Fortaleza no Ceará com alta prevalência de H. pylori . A infecção por H. pylori foi investigada em 570 membros de 128 famílias dessa comunidade, através do teste respiratório marcado com 13C-uréia em crianças e através do teste ELISA em mães e outros parentes adultos. A prevalência geral da infecção por H. pylori em todos os indivíduos analisados foi 65.9% (376/570) a qual aumentou com a idade (p <0,001) variando de 28,9%, em crianças de 6 meses a 5 anos, para 82% em adultos com mais de 40 anos. A existência de infecção materna e o número de irmãos infectados foram fatores de risco independentes para a infecção por H. pylori na infância (OR = 2,2, IC95% = 1,0-4,6 e OR = 4.3, IC95% = 2,3-8,1, respectivamente). O número de irmãos, número de irmãos mais novos, e o número de irmãos mais novos infectados também foram associados à infecção na infância através da análise univariada. O número de irmãos mais novos infectados permaneceu independentemente associado com a infecção (p = 0,000), mesmo após o controle de todas as variáveis acima citadas, além do status H. pylori de irmãos e mães, idade, número de pessoas por quarto, e número de crianças no mesmo domicílio

OLIVEIRA, Maria Aparecida Alves de. Sítios de fosforilação de tirosina da proteína caga e genótipos cage do H. pylori em pacientes com gastrite e úlcera péptica. 2014. 77 f. Tese (Doutorado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-06-24T12:08:16Z No. of bitstreams: 1 2014_tese_maaoliveira.pdf: 1958951 bytes, checksum: d8dc97da5e093a4373277c54ae890f93 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-06-24T12:08:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_tese_maaoliveira.pdf: 1958951 bytes, checksum: d8dc97da5e093a4373277c54ae890f93 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-24T12:08:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_tese_maaoliveira.pdf: 1958951 bytes, checksum: d8dc97da5e093a4373277c54ae890f93 (MD5) Previous issue date: 2014 / The H. Pylori strains demonstrate a high level of phenotypic and genotypic diversity, the expression of various genes, which confer greater pathogenicity to the bacteria. Most studies have found that the cagE gene is strongly associated with peptic ulcer disease and sites of tyrosine phosphorylation of CagA protei - EPIYA, has not been fully elucidated existing geographical differences. This study aimed to characterize the strains of H. pylori for the sites of tyrosine phosphorylation of CagA protein EPIYA and presence of genes cagE in patients with gastritis and peptic ulcer disease, and to correlate the presence of these genotypes with gastric disorder. Genotyping of H. pylori strains was performed by PCR and sequencing of phosphorylation sites EPIYA. 137 dyspeptic patients from H. pylori-positive, 72 with peptic ulcer and 65 with gastritis were evaluated. Of the 137 strains genotyped 68.6 % were cagA positive, strains cagA studied , 96.8 % had at least 1 C phosphorylation site EPIYA , while 53.2 % of these had only one site , 43.6 % had two or more sites C and 3.2 % had no place C. the mixed strains with two EPIYA patterns were present in 23.4 % of the studied samples . The group of patients with gastritis showed higher prevalence of genotype EPIYA ABCCC , the same was not observed in patients with peptic ulcer disease and this association with gastrics disorders studied significant ( p = 0.001 ). Of the 137 patients studied, 65 were positive for CAGE (47.4%). There was a significant inverse association between genotype and cage group of patients with gastritis (OR = 0.345, p = 0.002). There was a significant association between genotype cagE with peptic ulcer disease (OR = 2.898, p = 0.002) and the subgroup of patients with duodenal ulcer (OR = 3.839, p = 0.001). This study suggests that the population sample studied the presence of genotype Epiya three sites C was associated with gastritis and absent in patients with peptic ulcer. We found association of the cagE gene duodenal ulcer. / As cepas de H. pylori demonstram um alto nível de diversidade fenotípica e genotípica, pela expressão de vários genes, que conferem maior patogenicidade à bactéria. A maioria dos estudos evidenciou forte associação do gene cagE com doença ulcerosa péptica e do aumento dos sítios de fosforilação EPIYA C com doenças gástricas mais graves. No entanto, a associação clínica e a função dos sítios de fosforilação de tirosina da proteína CagA – EPIYA e do gene cagE, ainda não foi completamente elucidada, existindo diferenças geográficas. O objetivo do presente estudo foi caracterizar as cepas de H. pylori quanto à presença dos sítios de fosforilação de tirosina da proteína CagA – EPIYA e do gene cagE em pacientes com gastrite e úlcera péptica, e correlacionar a presença desses genótipos com as afecções gástricas. A genotipagem das cepas de H. pylori foi realizada através da técnica de PCR e do sequenciamento dos sítios de fosforilação EPIYA. Foram avaliados 137 pacientes dispépticos H. pylori positivo, 72 com úlcera péptica e 65 com gastrite. Das 137 cepas genotipadas 68,6% foram cagA positivas. Das cepas cagA estudadas, 96,8% apresentaram pelo menos 1 sítio C de fosforilação EPIYA, sendo que 53,2% destas apresentaram somente um sitio, 43,6% tinham dois ou mais sítios C e 3,2% não apresentaram sitio C. As cepas mistas com dois padrões EPIYA estavam presentes em 23,4% das amostras estudadas. O grupo de pacientes com gastrite apresentou maior prevalência do genótipo EPIYA ABCCC; o mesmo não foi observado no grupo de pacientes com úlcera péptica, sendo essa associação com as afecções gástricas estudadas significante (p= 0,001). Dos 137 pacientes estudados, 65 foram positivos para cagE (47,4%). Houve associação inversa significativa entre o genótipo cagE e o grupo de pacientes com gastrite (O.R=0,345; p=0,002). Houve associação significativa entre o genótipo cagE com doença ulcerosa péptica (O.R=2,898; p=0,002) e com o subgrupo de pacientes com úlcera duodenal (O.R=3,839; p=0,001). Esse estudo sugere que na amostra populacional estudada a presença do genótipo EPIYA com três sítios C estava associada à gastrite e ausente nos pacientes com ulcera péptica. Encontrou-se associação do gene cagE a úlcera duodenal.

SILVA, Cícero Igor Simões Moura. Estudo de marcadores de virulência do Helicobacter pylori e sua associação com gastrite, úlcera péptica e câncer gástrico no nordeste do Brasil. 2013. 90 f. Tese (Doutorado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-02-13T13:13:48Z No. of bitstreams: 1 2013_tese_cismsilva.pdf: 1742706 bytes, checksum: 2bba694b44e67567d03b3f06c3268abd (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-02-13T13:18:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_tese_cismsilva.pdf: 1742706 bytes, checksum: 2bba694b44e67567d03b3f06c3268abd (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-13T13:18:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_tese_cismsilva.pdf: 1742706 bytes, checksum: 2bba694b44e67567d03b3f06c3268abd (MD5) Previous issue date: 2013 / The main gastric diseases are associated with H. pylori infection, a bacterium that demonstrates a high level of genotypic diversity , the expression of various genes that confer greater virulence strains. The objective was to evaluate genetic markers of virulence of H. pylori strains of in patients with gastritis, ulcers and gastric cancer. Genotyping of the strains was performed by PCR. We evaluated 183 patients, attended at Walter Cantídio University Hospital, 88 men , 95 women , ranging in age from 18-88 + 52.8 years , diagnosed positive for infection by H. pylori, 48 with gastric cancer, 71 with peptic ulcer and 64 with gastritis. The prevalence of genotypes was: 75/183 (40.9 %) vacA i1, 29/183 (15.8 %) vacA i2, 146/183 (79.8 %) babA2, 81/183 (44.3 %) oipA, 107/183 (58.5%) iceA1 and 56/183 (30.6%) iceA2. In the group of patients with gastric cancer was observed that the most frequent genotype was babA2 35/48 (72.9 %), followed by the gene iceA1; 31/48 (64.6 % ) and oipA 18/48 (37 , 5%). In the group of patients with peptic ulcer the most frequent genotype was babA2 63/71 (88.7 %), followed by the gene iceA1; 40/71 (56.3 %) and oipA 31/71 (43.7 %). In the group of patients with gastritis the most frequent genotype was babA2 48/64 (75.0%), followed by the gene iceA1 vacA i1 and 36/64 (56.2%) and oipA 32/64 (50.0 %). The i2 vacA allele was associated with gastric cancer. In peptic ulcer the prevalence of all genotypes and was associated with babA2. Gastritis was associated with vacA i1 allele. There were no association between the diseases and the other genotypes. The genetic strains of H. pylori and its association with gastric disorder is important to clearly establish their pathogenic role for the various clinical outcomes related to this infection / As principais afecções gástricas são associadas á infecção crônica pelo H. pylori, uma bactéria que demonstra um alto nível de diversidade genotípica, pela expressão de vários genes, que conferem maior virulência às cepas bacterianas. O objetivo foi avaliar marcadores genéticos de virulência das cepas de H. pylori em pacientes portadores de gastrite, úlcera e câncer gástrico. A genotipagem das cepas foi realizada por meio da técnica de PCR. Foram avaliados 183 pacientes, atendidos no Hospital Universitário Walter Cantídio, sendo 88 homens, 95 mulheres, com idade variando de 18-88 + 52,8 anos, com diagnóstico positivo para a infecção por H. pylori, sendo 48 com câncer gástrico, 71 com úlcera péptica e 64 com gastrite. A prevalência dos genótipos estudados foi: 75/183 (40,9%) vacA i1, 29/183 (15,8%) vacA i2, 146/183 (79,8%) babA2, 81/183 (44,3%) oipA, 107/183 (58,5%) iceA1 e 56/183 (30,6%) iceA2. No grupo dos pacientes com câncer gástrico observou-se que o genótipo mais frequente foi o babA2 35/48 (72,9%), seguido do gene iceA1; 31/48 (64,6%) e oipA 18/48 (37,5%). No grupo dos pacientes com úlcera péptica o genótipo mais frequente foi o babA2 63/71 (88,7%), seguido do gene iceA1; 40/71 (56,3%) e oipA 31/71 (43,7%). No grupo dos pacientes com Gastrite o genótipo mais frequente foi o babA2 48/64 (75,0%), seguido do gene iceA1 e vacA i1 36/64 (56,2%) e oipA 32/64 (50,0%). O alelo vacA i2 foi associado com câncer gástrico. Na úlcera péptica houve grande prevalência de todos os genótipos e houve associação com babA2. A gastrite mostrou-se associada com o alelo vacA i1. Não houve associação entre as afecções e os demais genótipos estudados. O estudo genético das cepas de H. pylori e sua associação com as afecções gástricas é importante para se estabelecer com clareza o seu papel patogênico para os diversos desfechos clínicos relacionados à essa infecção.

CAVALCANTE, Meyssa Quezado de Figueiredo. Genótipos cagA, vacA e alelos de H. pylori em pacientes portadores de gastrite, úlcera péptica e câncer gástrico. 2010. 87 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará, Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-02-19T11:57:02Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_mqfcavalcante.pdf: 2039790 bytes, checksum: 22b9b8ce8cedcbdd53a754d52a85c7ec (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-02-19T11:58:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_mqfcavalcante.pdf: 2039790 bytes, checksum: 22b9b8ce8cedcbdd53a754d52a85c7ec (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-19T11:58:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_mqfcavalcante.pdf: 2039790 bytes, checksum: 22b9b8ce8cedcbdd53a754d52a85c7ec (MD5) Previous issue date: 2010 / The bacterial species H. pylori is closely correlated with the development of major diseases and gastric cancer of the stomach. The strains that have more pathogenic genotype are more involved in bacterial virulence. The objective was to genotype strains of H. pylori from patients with gastritis, gastroduodenal ulcer and gastric cancer as the cagA and vacA genes and alleles by PCR technique. The genotyping of strains of H. pylori was performed by PCR technique. We evaluated 134 strains, 76 of patients with gastritis, 28 peptic ulcer and 30 gastric cancer. As a result of this research it was found that all strains subtyped were vacA positive, and 48.5% with the allele s1m1 vacA, vacA s1m2 20.9% and 6.7% s2m1 vacA, vacA s2m2 8.2%; 7 5% were hybrid strains and 8.2% had only the allele of the sequence signal (s). Gastritis in the distribution of vacA alleles were: 46.1% s1m1, s1m2 22.4%, 5.3% s2m1, s2m2 11.8%, 3.9% and 10.5% hybrid strains only with allele s. In cases of ulcer was found: 50% s1m1, s1m2 21.4%, 17.8% s2m1, s2m2 3.6%, 7.2% hybrid strains. In patients with cancer met: s1m1 53.3%, 16.7% s1m2, s2m2 3.3%, 16.7% and 10.0% hybrid strains with allele only s. The cagA gene was observed in 82.8% of strains, where 73.7% had gastritis and cagA positive, 96.4% had peptic ulcer and gastric cancer harbored 96.7% were positive for this gene. Allele vacAs1m1 was the most prevalent observed in the three groups. We have also found strains with multiple alleles of this gene, suggesting a genetic polymorphism arising from infection by more than one type of strain in the same individual. The cagA gene was also highly prevalent in both groups. The presence of cagA was statistically significant in the group of pangastritis and gastric cancer. The relationship of the cagA gene with allele vacAs1m1 was also significant in the groups of pangastritis and gastric cancer, which supports the higher pathogenicity of strains of the studied individuals. / A espécie bacteriana Helicobacter pylori está intimamente correlacionado com o desenvolvimento das principais afecções gástricas e do câncer de estômago. As cepas que apresentam genótipo mais patogênico são as mais implicadas na virulência da bactéria. O objetivo deste trabalho foi caracterizar as cepas de H. pylori provenientes de pacientes portadores de gastrite, úlcera gastroduodenal e câncer gástrico quanto aos genes cagA e vacA e alelos através da técnica de PCR. A genotipagem das cepas de H. pylori foi realizada através da técnica de PCR. Foram avaliadas 134 cepas, sendo 76 de portadores de gastrite, 28 de úlcera péptica e 30 de câncer gástrico. Como resultado desta pesquisa obteve-se que, todas as cepas genotipadas foram vacA positivas, sendo 48,5% com o alelo vacA s1m1; 20,9% vacA s1m2; 6,7% vacA s2m1; 8,2% vacA s2m2; 7,5% eram cepas híbridas e 8,2% apresentaram somente o alelo da sequência sinal(s). Nos portadores de gastrite a distribuição dos alelos vacA foi: 46,1% s1m1, 22,4% s1m2, 5,3% s2m1, 11,8% s2m2, 3,9% cepas híbridas e 10,5% somente com alelo s. Nos casos de úlcera achou-se: 50% s1m1, 21,4% s1m2, 17,8% s2m1, 3,6% s2m2, 7,2% cepas híbridas. Nos portadores de câncer encontrou-se: 53,3% s1m1, 16,7% s1m2, 3,3% s2m2, 16,7% cepas híbridas e 10,0% somente com alelo s. O gene cagA foi observado em 82,8% das cepas, onde 73,7% tinham gastrite e cagA positivo, 96,4% tinham úlcera péptica e 96,7% portavam câncer gástrico com positividade para este gene. O alelo vacAs1m1 foi o mais prevalente observado nos três grupos estudados. Também foram encontradas cepas com alelos múltiplos desse gene, o que sugere um polimorfismo genético advindo de infecção por mais de um tipo de cepa em um mesmo indivíduo. O gene cagA também foi altamente prevalente nos grupos estudados. A presença do cagA foi estatisticamente significante no grupo de pangastrite e câncer gástrico. A relação do gene cagA com o alelo vacAs1m1 também foi significante nos grupos de pangastrite e câncer gástrico, o que corrobora a maior patogenicidade das cepas presentes nos indivíduos estudados.

CARMO, Ana Paula Santos do. Estudo da distribuição da frequência de genótipos de Helicobacter pylori em lesões gástricas. 2011. 109 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2011. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-03-18T11:41:02Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_apscarmo.pdf: 7904119 bytes, checksum: d7d882cfd8def50c57aaca2bc72bac5f (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-03-18T11:42:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_apscarmo.pdf: 7904119 bytes, checksum: d7d882cfd8def50c57aaca2bc72bac5f (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-18T11:42:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_apscarmo.pdf: 7904119 bytes, checksum: d7d882cfd8def50c57aaca2bc72bac5f (MD5) Previous issue date: 2011 / A bactéria Helicobacter pylori é um agente etiológico bem estabelecido para o desenvolvimento de lesões gástricas como gastrite, úlcera péptica, metaplasia e doenças malignas, com alta incidência de infecção todo mundo, porém cerca de 80% dos indivíduos infectados permanecem assintomáticos e apenas uma minoria desenvolve doenças a ela relacionadas. Estudos tem sido realizados na tentativa de identificar a relação de genes determinantes da patogenicidade de H. pylori, entretanto, até o momento apenas os genes cagA e o alelo de vacA s1m1 são considerados marcadores de virulência para o desenvolvimento de lesões gástricas mais graves. A bactéria H. pylori possui uma alta variabilidade genética sendo que um dos mecanismos propostos para o desenvolvimento de lesão seria através da inflamação. Diferenças na intensidade de respostas inflamatórias poderiam ser decorrentes do perfil genotípico da cepa infectante. Recentes estudos apontam a importância dos genes cagE, virB11 de H. pylori, em câncer gástrico. Entretanto, estudos em lesões gástricas são restritos. Assim, o objetivo deste trabalho foi determinar o perfil genotípico das cepas de H. pylori quanto a presença dos genes de virulência cagA, cagE, virB11, vacA e flaA, circulantes no estado do Ceará em 201 casos de lesões gástricas de diferentes gravidades, coletadas de pacientes dispépticos atendidos em três hospitais de Fortaleza-CE. A detecção de H. pylori foi feita através da amplificação do gene ureC, e os genes estudados por amplificação de fragmentos específicos, usando a técnica de PCR, e foram observados em gel de agarose 1% e poliacrilamida a 6% e 8%. Nesse estudo houve um predomínio do sexo feminino 59% (119/201), principalmente na faixa etária (15-44) 30% (61/201), e alta taxa de infecção por H. pylori 97,5% (196/201). A gastrite crônica ativa (GCA), foi a lesão gástrica mais frequente (55,7%;112/201), associada a pacientes na faixa etária de 15-44 (36,6% : 41/112) opondo-se à metaplasia intestinal onde a frequência dos casos aumentou com a idade sendo maior em pacientes mais velhos 46% (16/35), o que concorda com a literatura. O único caso de displasia ocorreu numa paciente > 65 anos. As lesões gástricas foram predominantemente localizadas no antro. O gene cagA foi mais frequente na gastrite crônica ativa (GCA), estando também em alta frequência na gastrite atrófica (GA) e metaplasia intestinal (MI). Na GCA foi observado também alta freqüências dos genes cagE, virB11, vacAm1 e flaA com diferença estatística quando comparada com a gastrite crônica inativa (GCI) (cagA - p=0,007 cagE- p=0,000, virB11 - p=0,005, vacAm1- p=0,047 e flaA - p=0,001), sendo que os genes virB11 e flaA foram mais frequentes na GCA que na úlcera. Os alelos s1 e m1 de vacA , bem como a combinação s1m1 foram os mais frequentes nas lesões gástricas. Os casos H. pylori positivos foram agrupados de acordo com a presença dos genes estudados, levando em consideração a presença do alelo s1 e os genes da ilha. Nestas análises foi observada maior frequência de cepas contendo os genes vacA s1 e [Ia (cagA+, cagE+ e virB11+ ) + Ib (cagA+ e virB11+; cagE+ e virB11+) ; 47,7% ] na gastrite crônica ativa em relação a gastrite crônica inativa (GCI), esta última com maior frequência de cepas dos grupos [Ic (cagA+ ou cagE+ ou virB11+ ou cagA+ e cagE+) +Id (ureC+); 62%]. Adicionalmente, maior frequência de cepas pertencentes aos grupos Ia e Ib foi observada na metaplasia intestinal incompleta, (59%), enquanto que na metaplasia intestinal completa uma maior frequencia de cepas pertencentes aos grupos Ic + Id, (78%) (p=0,027). Todos os casos de gastrite atrófica e úlcera eram do grupo I, e o único caso de displasia pertencia ao grupo Ia. Esses dados evidenciam uma associação de cepas com genótipos mais virulentos em lesões com potencialidade de malignização. / The bacterium Helicobacter pylori is a well-established etiological factor in the development of gastric lesions such as gastritis, peptic ulcers, metaplasia and malignancy. The incidence of infection by this pathogen is high worldwide, but about 80% of infected individuals remain asymptomatic, and only a minority develops related diseases. Many studies have been conducted in an attempt to identify the involvement of genes in determining the pathogenicity of H. pylori, but so far, only the genes cagA and vacA allele s1m1 are considered virulence markers for the development of the more severe gastric lesions. H. pylori bacteria have a high genetic variability and one of the proposed mechanisms for lesion development is through inflammation. Differences in the intensity of inflammatory responses could be due to the genotypic profile of the infecting strain. Recent studies indicate the importance of the genes cagE and virB11, but mostly involving gastric cancer, while their role in gastric lesions is limited. The objective of this study was to determine the genetic subtypes of H. pylori strains and the presence of the virulence genes cagA, cagE, virB11 and flaA genes and vacA alleles, circulating in Ceara state, Brazil. Samples were collected from 201 cases of gastric lesions of varying severity, in dyspeptic patients treated at three hospitals in Fortaleza, Ceara State. The detection of H. pylori was performed using ureC gene amplification by PCR, and the detection of the genes studied was carried out by amplification of gene-specific fragments separated in 1% agarose gels. The sample was predominantly female (59%, 119/201) and mainly in the age group 15-44 years old (30%, 61/201), and had a high rate of H. pylori infection (97.5%, 196/201). Active chronic gastritis (ACG) was the most common gastric lesion (55.7%, 112/201), associated with patients aged 15-44 (36.6%, 41/112), unlike intestinal metaplasia, in which the frequency of cases increased with age, being higher in older patients (46%, 16/35), which agrees with the literature. A single case of dysplasia occurred in a patient > 65 years. The lesions were predominantly located in the gastric antrum and 30% of the cases had lesions located in the body and antrum simultaneously. The cagA gene was more frequent in ACG, showing a statistically significant correlation (r = 0.220, p = 0.007); it also showed a high frequency in atrophic gastritis and in intestinal metaplasia. In ACG, a high frequency of the genes cagE, virB11, flaA and vacAm1 was also statistically associated when compared to chronic inactive gastritis (ICG) (cagA - p = 0.007, cagE - p = 0.000, virB11 - p = 0.005, vacAm1 p = 0.047 and flaA - p = 0.001), and the genes virB11 and flaA were more frequent in ACG than in ulcer. The vacA alleles s1 and m1, and the combination s1m1, were the most frequent ones in gastric lesions. Considering the genotypes of H. pylori grouped by the presence of the genes studied, we observed a higher frequency of the most virulent strains in the ACG group (Ia + Ib, 47.7%) when compared to ICG, the latter showing a higher frequency of less virulent strains (Ic + Id, 62%). Additionally, a higher frequency of more virulent strains, belonging to groups Ia and Ib, was observed in incomplete intestinal metaplasia (59%), while in complete intestinal metaplasia an increased frequency of less virulent strains, belonging to the groups Ic + Id (78%) (p = 0.027), was found. All cases of atrophic gastritis and ulcer were in group I, and the single case of dysplasia belonged to group Ia (high virulence). These data indicate the important role of more virulent strains in potential malignant lesions.

BARBOSA, Francivandi Coêlho. Associação dos polimorfismos em genes de interleucinas (IL1B -511, IL1RN, IL6 -174G e IL8 -251) com lesões gástricas relacionadas ao Helicobacter pylori. 2012. 72 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-10-26T14:10:44Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_fcbarbosa.pdf: 2039223 bytes, checksum: 21783f2c9101f5765736fd5e23312b27 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-10-26T14:22:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_fcbarbosa.pdf: 2039223 bytes, checksum: 21783f2c9101f5765736fd5e23312b27 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-26T14:22:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_fcbarbosa.pdf: 2039223 bytes, checksum: 21783f2c9101f5765736fd5e23312b27 (MD5) Previous issue date: 2012 / The gastric le sions ( G L ) develop from normal mucosa infected by Hel icobacter pylori ( H.pylori ) and can progress to gastric cancer ( GC ) through a multi - step process. The ability of H. pylori on cause G L is associated with some of their virulence factors that, when expressed , come in to c ontact with the gastric cells and pro moting activation of the innate immune response. This, in turn, activates the transcription of inflammatory cytokines such as interleukins (ILs) IL1B ( - 511), IL1RN (VTNR), IL6 ( - 174) and IL8 ( - 251). Such ILs have polymorphic genes that change expression an d , consequently , the intensity of the host inflammatory response. Therefore , this study aims to investigate the association between polymorphisms of ILs with the GC and G L in the progression to the G C . In this study DNA was obtained from 324 patients, 118 with CG and 206 with pre - malignant G L (LGPM), collected in four hospitals in Fortaleza - CE. The identification of polymorphisms was done by PCR - RFLP and PCR a nalysis and the detection of H. pylori by PCR. Genotypic analysis of the comparison between the G C a nd LGPM demonstrated an association of CG with IL8 TT genotypes (p = 0.0065), IL6 GG (p = 0.0012) and IL1RN LL (p = 0.0052 ) . The association of ILs 3x3 observed that the most inflammatory haplotypes were associated with GC , while in the analysis the 4x4 T - T - G - *2 (IL1BxIL8xIL6xIL1RN) haplotype was more related to GC (p = 2.89 × 10 5), which is a good marker for this type of cancer. In comparison with the CG and GCI it was observed the association between IL6 G allele with the G C (p = 0.0389). Comparison between GCA and GC showed that IL8 AT genotypes (p = 0.0016), IL1RN L * 2 (p = 0.0049) and IL6 GG (p = 0.0004) are associated with the GC , the analysis of the ILs association o n 4x4 showed that the T - T - G - * 2 haplotype (IL1BxIL8xIL6xIL1RN) was associated with G C (p = 5. 72 x10 - 5 ), confirming the importance of this haplotype as a good marker for the GC. In comparison with the MI CG observed a significant association with IL8 AT CG (p = 0.0426) and IL6 GG (p = 0.0475. So, it can be conclude that the genotypes of all inflammat ory IL s were associated with the CG and that, according to the h aplotype analysis , the mo st inflammatory haplotype (G - T - T - * 2 ) is a good marker for the G C . / As Lesões gástricas (LG) se desenvolvem a partir da mucosa normal infectada por Helicobacter pylori (H pylori) e podem progredir para o câncer gástrico (CG) através de um processo com múltiplas etapas A capacidade de H pylori provocar LG está associada com alguns fatores de sua virulência que quando expressa entra em contato com as células gástricas promovendo a ativação da resposta imune inata. Esta, por sua vez, ativa a transcrição de citocinas inflamatórias como as interleucinas (ILs) IL1B (-511) IL1RN (VTNR) IL6 (-174) e IL8 (-251) Tais ILs possuem genes polimórficos que alteram sua expressão e, consequentemente, a intensidade da resposta inflamatória do hospedeiro Assim este estudo objetiva verificar a associação entre os polimorfismos de ILs com as LG e o CG na progressão para o CG Neste estudo foi obtido DNA de 324 pacientes sendo 118 com CG e 206 com LG pré-malígnas (LGPM) coletadas em quatro hospitais de Fortaleza-CE A identificação dos polimorfismos foi feita por PCR-RFLP e PCR e a detecção de H pylori por PCR A análise genotípica da comparação entre as LGPM e CG demonstrou uma associação do CG com os genótipos IL8TT (p=0,0065) IL6GG (p=0,0012) e IL1RNLL (p=0,0052) Na associação das ILs 3x3 observou-se que os haplotipos mais inflamatórios estavam associados ao CG já na análise 4x4 o haplotipo T-T-G-*2 (IL1BxIL8xIL6xIL1RN) foi o mais associado ao CG (p=2,89x10-5) sendo este um bom marcador para este tipo de câncer Na comparação da GCI com o CG observou-se a associação do alelo IL6G com o CG (p=0,0389) A comparação entre GCA e CG demonstrou que os genótipos IL8AT (p=0,0016) IL1RNL*2 (p=0,0049) e IL6GG (p=0,0004) estão associados ao CG e a análise da associação das ILs 4x4 demonstrou que o haplotipo T-T-G-*2 (IL1BxIL8xIL6xIL1RN) foi associado ao CG (p=5,72x10-5) confirmando a importância deste haplotipo como bom marcador para o CG Na comparação da MI com CG observou-se associação significativa do CG com IL8AT (p=0,0426) e IL6GG (p=0,0475) Deste modo, pode-se concluir que os genótipos mais inflamatórios de todas as ILs estavam associados ao CG e que, de acordo com a análise haplotipica, o haplotipo mais inflamatório (T-T-G-*2) é um bom marcador para o CG

A bactéria Gram negativa Helicobacter pylori, além de estar associada ao câncer gástrico e duodenal, está relacionada a patologias extra gástricas. Entre essas estão as doenças cardiovasculares. Os mecanismos pelos quais o H. pylori pode causar, ou agravar essas doenças, ainda não são claros. A urease de H. pylori (HPU) é considerada um fator de virulência, visto que sua atividade catalítica cria um microambiente de pH mais elevado, possibilitando a sobrevivência do patógeno no estômago. A HPU é capaz de ativar plaquetas de coelho através da indução da secreção de seus grânulos densos com liberação de ADP, culminando na agregação plaquetária. Esse fenômeno ocorre via 12- lipoxigenase, rota de sinalização também utilizada pelo colágeno, um importante agonista intrínseco desse sistema. Demonstramos previamente que também as duas subunidades da HPU, HpUreB e HpUreA, interagem com membranas de plaquetas de coelho, sendo que a HpUreB contém o domínio da holoenzima responsável pela agregação plaquetária. Essa interação entre HPU e plaquetas pode ser mediada por GPVI, o principal receptor de colágeno dessas células No presente trabalho, estudamos a interação da HPU e suas subunidades com plaquetas humanas, através de citometria de fluxo. Demostramos que HPU ativa plaquetas humanas sem exposição significativa de P-selectina. O bloqueio com anticorpos específicos para o receptor de membrana GPIIbIIIa, mas não para GPVI, interfere na ativação plaquetária induzida por HPU. Em plaquetas ativadas por HPU ocorrem modificações do processamento pré-mRNA de proteínas pró-inflamatórias, aumentando os níveis de mRNAs que codificam IL-1 e CD14, indicando que plaquetas passam a apresentar um fenótipo pró-inflamatório após exposição à urease. No conjunto, nossos dados sugerem que a HPU, além de permitir a sobrevivência bacteriana na mucosa gástrica, pode ter um papel importante, e até agora negligenciado, nos estados inflamatórios associados com a infecção por H. pylori. / The Gram negative bacterium Helicobacter pylori, besides its association with gastric and duodenal cancer, correlates positively to several extragastric diseases suchas cardiovascular pathologies. However, the mechanisms by which H. pylori can cause or aggravate these diseases are still unclear. H. pylori urease (HPU) is considered a virulence factor, since its catalytic activity creates a microenvironment, of higher pH, that allows survival of the pathogen in the stomach. HPU is able to activate rabbit platelets by inducing the secretion of their dense granules with release of ADP, culminating in platelet aggregation. This phenomenon occurs with activation of the 12-lipoxygenase pathway, which is also used by collagen, an important intrinsic agonist of this system. We have previously demonstrated that both subunits of HPU, HpUreB and HpUreA, interact with rabbit platelet membranes, and that HpUreB contains the domain responsible for platelet aggregation This interaction of HPU and platelets could be mediated by GPVI, the main collagen receptor in these cells. In this work, by using flow cytometry assay, we have studied the interaction of HPU and of its subunits with human platelets. HPU was shown to activate human platelets without significant P-selectin exposure. Blockage with antibodies against the membrane receptor GPIIbIIIa, but not against GPVI, interfered on platelet activation induced by HPU. The processing of pre-mRNA of proinflammatory proteins was evaluated in HPU-activated platelets and increased levels of mRNAs encoding IL-1 and CD14 were found, indicating that platelets acquire a proinflammatory phenotype when exposed to the urease. Altogether, our data suggest that H. pylori urease, besides allowing bacterial survival within the gastric mucosa, may have an important, and so far overlooked role in the inflammation associated to the infection by H. pylori.

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:38:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_8485_DAMASCENO JPL- 2016 - Dissertação de mestrado - Estudo de solubilidade e das atividades antioxida.pdf: 2214333 bytes, checksum: cee189be1a37b594fdc4f8ef753ccb16 (MD5) Previous issue date: 2016-03-24 / Helicobacter pylori é uma bactéria Gram-negativa que infecta a mucosa do estômago levando ao surgimento de patologias, tais como gastrite, úlceras pépticas e câncer de estômago, sendo de difícil erradicação. O tratamento padrão nem sempre é bem sucedido em função de efeitos colaterais, altos custos e baixa adesão por parte do paciente, levando a necessidade da busca por novas moléculas mais efetivas contra este microrganismo. Neste contexto, a isocumarina paepalantina, 9,10-diidroxi-5,7-dimetoxi-1H-nafto(2,3c)-piran-1-ona, isolada dos capítulos de Paepalanthus bromelioides, Eriocaulaceae, tem demonstrado em estudos anteriores uma ampla variedade de atividades biológicas como antibacteriana, antioxidante, anti-inflamatória e citotóxica, dos quais se destacam a capacidade antimicrobiana e antioxidante, abrindo portas para a avaliação de seus efeitos sobre a infecção causada por H. pylori e modulação das espécies reativas de oxigênio (EROs) e espécies reativas de nitrogênio (ERNs) geradas neste processo. Como é uma molécula pouco estudada, ainda carece de dados sobre sua solubilidade a fim de se encontrar uma alternativa viável ao uso do DMSO considerando a toxicidade do mesmo em cultura celular e sua interferência em testes de atividade antioxidante. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar solventes como alternativas ao uso do DMSO, com validação de metodologia analítica espectrofotométrica própria, a fim de escolher um veículo adequado para ensaios de atividade antioxidante frente a radicais sintéticos (DPPH e ABTS) e espécies reativas de oxigênio (HOCl, OH&#9679;, O2-&#9679;, H2O2) e nitrogênio (NO&#9679;) e de atividade anti-H. pylori. Entre os solventes avaliados, propilenoglicol em pH 7,5 foi o solvente de escolha, sendo que os resultados sugerem uma menor interferência nos ensaios se comparado ao DMSO, tornando uma alternativa viável do ponto de vista tecnológico. Os resultados apontam uma forte atividade antioxidante da paepalantina, comparável ao Trolox®. Também foi observado um importante efeito sobre a cultura de H. pylori com CIM de 128 &#956;g/ml e CBM de 256 &#956;g/ml e sinergismo de sua sub-MIC com os antibióticos amoxicilina e metronidazol demonstrando possivelmente atuar sobre a permeabilidade da membrana bacteriana e por inibição das Penicillin-Bindind Proteins (PBPs), devido as alterações morfológicas observadas em H. pylori por microscopia eletrônica de varredura, tornando a paepalantina promissora para o desenvolvimento futuro de medicamento para o combate de H. pylori e seus males associados.

Ureases (3.5.1.5), enzimas níquel dependentes que catalisam a reação de hidrólise da uréia em amônia e dióxido de carbono, apresentam ampla distribuição em plantas, fungos e bactérias. A espiroqueta Helicobacter pylori causa úlceras pépticas e câncer gástrico por mecanismos ainda não totalmente conhecidos. H. pylori produz grande quantidade de urease, que neutraliza o meio ácido e permite sua sobrevivência no estômago. Nosso grupo demonstrou que as ureases de Canavalia ensiformis, soja e Bacillus pasteurii induzem agregação plaquetária independentemente de sua atividade ureolítica, por uma rota que requer ativação de canais de cálcio. ativação da rota do ácido araquidônico e secreção plaquetária. Estudos prévios mostraram ainda que a canatoxina, uma isoforma da urease de C.ensiformis, possui atividade pró-inflamatória, induzindo edema de pata em ratos. Neste trabalho, caracterizamos as propriedades ativadora de plaquetas e pró-inflamatória da urease recombinante de H. pylori (HPU). Em plaquetas, estudamos as vias recrutadas pela proteína na agregação plaquetária e comparamos com dados prévios para a canatoxina e a urease de Bacillus pasteurii. Em neutrófilos, demonstramos que a HPU, em doses nanomolares, induz quimiotaxia e produção de espécie reativas de oxigênio. A taxa de apoptose de neutrófilos ativados por HPU foi inibida, acompanhando alterações dos níveis de proteínas pró- e antiapoptóticas. Por último, mostramos que a resposta dos neutrófilos a HPU envolve aumento dos níveis de lipoxigenase(s), sem, contudo, haver alterações das ciclooxigenase( s). Concluímos que as propriedades não enzimáticas aqui descritas para a HPU podem potencialmente contribuir para o processo inflamatório promovido por H. pylori. / Ureases (EC 3.5.1.5), nickel-dependent enzymes that hydrolyze urea into ammonia and carbon dioxide, are widespread among plants, bacteria and fungi. The spirochete Helicobacter pylori is the etiological agent of gastric ulcers and gastric adenocarcinoma by mechanisms not yet fully understood. H. pylori produces high amounts of urease, which enables the bacterium to survive in the acidic medium of the stomach. We have previously reported that ureases from jackbean, soybean or Bacillus pasteurii induce blood platelet aggregation independently of their enzyme activity by a pathway requiring activation of calcium channels, lipoxigenase-derived eicosanoids and platelet secretion. We also showed that canatoxin, an isoform of C. ensiformis urease, presents pro-inflammatory property demonstrated by rat paw oedema. In this work we characterized the platelet aggregating and pro-inflammatory properties of the recombinant H. pylori urease (HPU). In platelets we studied the pathways recruited by the protein to induce platelet aggregation and compared the data to those previously reported for the plant urease canatoxin and for Bacillus pasteurii urease. Using neutrophils we demonstrated that nanomolar doses of HPU induce chemotaxis and production of oxygen reactive species in human neutrophils. The rate of apoptosis was decreased in HPU-treated neutrophils, accompanied by alterations in the levels of proand anti-apoptotic proteins. Moreover, we showed that the response of neutrophils to HPU requires increased levels of lipoxygenase(s) with no alterations of cyclooxygenase( s). We concluded that the non-enzymatic properties of HPU here described potentially contribute to the inflammatory process that underlies H. pylori infection.

A bactéria Gram negativa Helicobacter pylori, além de estar associada ao câncer gástrico e duodenal, está relacionada a patologias extra gástricas. Entre essas estão as doenças cardiovasculares. Os mecanismos pelos quais o H. pylori pode causar, ou agravar essas doenças, ainda não são claros. A urease de H. pylori (HPU) é considerada um fator de virulência, visto que sua atividade catalítica cria um microambiente de pH mais elevado, possibilitando a sobrevivência do patógeno no estômago. A HPU é capaz de ativar plaquetas de coelho através da indução da secreção de seus grânulos densos com liberação de ADP, culminando na agregação plaquetária. Esse fenômeno ocorre via 12- lipoxigenase, rota de sinalização também utilizada pelo colágeno, um importante agonista intrínseco desse sistema. Demonstramos previamente que também as duas subunidades da HPU, HpUreB e HpUreA, interagem com membranas de plaquetas de coelho, sendo que a HpUreB contém o domínio da holoenzima responsável pela agregação plaquetária. Essa interação entre HPU e plaquetas pode ser mediada por GPVI, o principal receptor de colágeno dessas células No presente trabalho, estudamos a interação da HPU e suas subunidades com plaquetas humanas, através de citometria de fluxo. Demostramos que HPU ativa plaquetas humanas sem exposição significativa de P-selectina. O bloqueio com anticorpos específicos para o receptor de membrana GPIIbIIIa, mas não para GPVI, interfere na ativação plaquetária induzida por HPU. Em plaquetas ativadas por HPU ocorrem modificações do processamento pré-mRNA de proteínas pró-inflamatórias, aumentando os níveis de mRNAs que codificam IL-1 e CD14, indicando que plaquetas passam a apresentar um fenótipo pró-inflamatório após exposição à urease. No conjunto, nossos dados sugerem que a HPU, além de permitir a sobrevivência bacteriana na mucosa gástrica, pode ter um papel importante, e até agora negligenciado, nos estados inflamatórios associados com a infecção por H. pylori. / The Gram negative bacterium Helicobacter pylori, besides its association with gastric and duodenal cancer, correlates positively to several extragastric diseases suchas cardiovascular pathologies. However, the mechanisms by which H. pylori can cause or aggravate these diseases are still unclear. H. pylori urease (HPU) is considered a virulence factor, since its catalytic activity creates a microenvironment, of higher pH, that allows survival of the pathogen in the stomach. HPU is able to activate rabbit platelets by inducing the secretion of their dense granules with release of ADP, culminating in platelet aggregation. This phenomenon occurs with activation of the 12-lipoxygenase pathway, which is also used by collagen, an important intrinsic agonist of this system. We have previously demonstrated that both subunits of HPU, HpUreB and HpUreA, interact with rabbit platelet membranes, and that HpUreB contains the domain responsible for platelet aggregation This interaction of HPU and platelets could be mediated by GPVI, the main collagen receptor in these cells. In this work, by using flow cytometry assay, we have studied the interaction of HPU and of its subunits with human platelets. HPU was shown to activate human platelets without significant P-selectin exposure. Blockage with antibodies against the membrane receptor GPIIbIIIa, but not against GPVI, interfered on platelet activation induced by HPU. The processing of pre-mRNA of proinflammatory proteins was evaluated in HPU-activated platelets and increased levels of mRNAs encoding IL-1 and CD14 were found, indicating that platelets acquire a proinflammatory phenotype when exposed to the urease. Altogether, our data suggest that H. pylori urease, besides allowing bacterial survival within the gastric mucosa, may have an important, and so far overlooked role in the inflammation associated to the infection by H. pylori.