Este trabalho avaliou o efeito da dieta hiperlipídica em camundongos para o estudo da inflamação cardiovascular. Camundongos C57Bl/6 machos com 8 semanas de vida foram utilizados nos ensaios, sendo divididos nos grupos dieta controle e dieta hiperlipídica. Após 8 semanas foram avaliados: o ganho de peso, a porcentagem de tecido adiposo, pressão arterial sistólica, frequência cardíaca, perfil lipídico e glicêmico séricos. A partir de cortes histológicos de aortas e corações corados com picrossirius foram feitas análises morfométricas. Em cortes histológicos de aorta foram realizadas a análise fibras elásticas e colágenas usando a coloração de Weigert-Van Gieson. Também foram realizadas a quantificação de fibras colágenas em aortas, usando a coloração de picrossirius. Nos tecidos aórticos e cardíacos foram feitos: 1) Ensaios de atividade enzimática para ECA e MPO. 2) Ensaios de Immunoblotting para a detecção proteíca para ECA e TGF-b. Também foram feitos ensaios de imuno-histoquímica para marcação e localização de ECA e TGF-b no tecido aórtico. / This work evaluated the effect of high-fat diet in mice for the study of cardiovascular inflammation. C57BL / 6 mice at 8 weeks of age were used in the tests were divided in groups control diet and high fat diet. After 8 weeks were evaluated: weight gain, percentage of fat, systolic blood pressure, heart rate, serum lipids and glucose levels. From histological aortas and hearts stained with picrosirius morphometric analyzes. Histological sections of the aorta were performed to analyze elastic and collagen fibers using Weigert-Van Gieson staining. Also the quantification of collagen fibers in aortas using picrosirius staining. In aortic and cardiac tissues were made: 1) Enzymatic activity assays for ACE and MPO. 2) Immunoblotting assays to detect proteinous for ACE and TGF-b. Also were peformed Immunohistochemistry assays for marking and localization of ACE and TGF- b in the aortic tissue.

Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-06-19T16:07:50Z No. of bitstreams: 1 saramalagutiandradesoares.pdf: 1936313 bytes, checksum: bac06dfaa717be34b6dd2753dd6bf232 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-06-29T12:30:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 saramalagutiandradesoares.pdf: 1936313 bytes, checksum: bac06dfaa717be34b6dd2753dd6bf232 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-29T12:30:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 saramalagutiandradesoares.pdf: 1936313 bytes, checksum: bac06dfaa717be34b6dd2753dd6bf232 (MD5) Previous issue date: 2016-03-01 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A obesidade é motivo de preocupação para a saúde pública em todo o mundo. Apesar de existirem muitos estudos sobre seu impacto no sistema imunológico, a influência nas doenças infecciosas é pouco relatado. A incidência da obesidade vem aumentando em países em desenvolvimento, assim é de grande importãncia o estudo do papel da obesidade na resposta imunológica a patógenos, principalmente em doenças infecciosas de grande relevãncia como a malaria. A obesidade é caracterizada por uma inflamação sistêmica de baixo grau crõnica, e acredita-se que as manifestações complicadas da malária, como a malaria cerebral, injuria respiratória, denominada malária grave, podem ser resultado da resposta inflamatória exagerada causada pelo sequestro de hemácias infectadas nos vasos endoteliais de orgãos vitais como cérebro e pulmão. Portanto a inflamação na obesidade pode alterar o curso da infecção do Plasmodium berguei ANKA, parasitas causadores da malária cerebral em modelo murino. Neste trabalho, investigamos a influência da obesidade na resposta imune frente à infecção por Plasmodium berguei ANKA. Para isso foram utilizados camundongos C57BL/6 machos, com idade de 4 a 6 semanas, alimentados durante 12 semanas por uma dieta hiperlipídica com 60% das quilocalorias advindas de lipídeos. Após esse período os animais foram infectados com a cepa ANKA de Plasmodium berguei. Nos animais alimentados com a dieta hiperlipídica, observou-se aumento do peso corporal, assim como da gordura perigonadal dos animais alimentados pela dieta hiperlipídica, sem aumento do consumo de ração. A resistência ao desenvolvimento da malária grave foi observada nos animais obesos; além de conseguir controlar a parasitemia, . Somente esses animais sobreviveram à infecção, por 25 dias após o desafio, sem apresentar sintomas clínicos da doença, ao contrário, os não obesos infectados, vieram a óbito após oito dias de infecção. Foram observadas diferenças no perfil celular dos animais obesos infectados quando comparados aos controles infectados, sugerindo que a inflamação prévia dos animais obesos pode ter influenciado o curso da infecção. Assim, os resultados indicam que alterações na resposta imunológica do camundongo obeso conseguem protege-lo contra o desenvolvimento da malaria grave. / Obesity is a public heaith concern currentiy affecting worldwide, aithough there are many studies on the impact of obesity on the immune system, the various aspects of the association between obesity and infection is seidom reported. The incidence of obesity is increasing in the developing countries, and it is very important to study the role of obesity in the immune response to pathogens, especially infectious diseases such as maiaria. Obesity is characterized by a iow-grade, systemic, chronic infiammation and it is believed that the complicated manifestations of maiaria, as severe maiaria, can be the result of an exaggerated inflammatory response caused by sequestration of infected erythrocytes to endothelial vesseis of vital organs such as brain and lung. So infiammation in obesity may alter the course of infection of Plasmodium berguei ANKA, parasites that cause cerebral maiaria in mice. In this work, we investigated the influence of obesity on the immune response to infection by Plasmodium berguei ANKA. For this, mate C57BL/6 mice aged 4 to 6 weeks were used, fed by a high fat diet with 60% of kilocalories from lipid, for 12 weeks. After this period the animais were infected with the strain ANKA of Plasmodium berguei. There was an increase in body weight as well as the perigonadal fat in animais fed with the high fat diet, without increasing the food intake, from the second week of dieting. The resistance to the deveiopment of severe maiaria was observed in the obese animais, beside of control the parasitemia, oniy those animais survived the infection for 25 days post challenge, without any clinicai symptoms of the disease, unlike infected non obese, who died after eight days of infection. Differences were observed in the cell profile of infected obese animais compared to infected controls, suggesting that prior infiammation in obese animais may have infiuenced the course of infection. Thus, the resuits indicate that changes in the immune response of obese mice can protect against the deveiopment of severe maiaria.

Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-07-07T13:03:39Z No. of bitstreams: 1 pollyanaamaralsalvador.pdf: 2083263 bytes, checksum: 64e723f24e6ecdfbfb30df3267182be9 (MD5) / Rejected by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br), reason: on 2017-07-07T13:37:37Z (GMT) / Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-08-11T13:28:09Z No. of bitstreams: 1 pollyanaamaralsalvador.pdf: 2083263 bytes, checksum: 64e723f24e6ecdfbfb30df3267182be9 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-08-14T17:07:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 pollyanaamaralsalvador.pdf: 2083263 bytes, checksum: 64e723f24e6ecdfbfb30df3267182be9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-14T17:07:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pollyanaamaralsalvador.pdf: 2083263 bytes, checksum: 64e723f24e6ecdfbfb30df3267182be9 (MD5) Previous issue date: 2014-12-24 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A obesidade tornou-se um problema de saúde pública em todo o mundo. Um grande número de doenças, entre elas doenças cardiovasculares, diabetes tipo 2 e diversos tipos de cânceres, incluindo câncer de mama na pós menopausa, estão associadas a obesidade. O câncer de mama é a principal causa de mortalidade associada ao câncer em mulheres nos países desenvolvidos e sua incidência tem aumentado nos países em desenvolvimento. A maioria das mortes associadas ao câncer de mama resulta de uma doença metastática não controlada. Assim, torna-se importante investigar alterações do estilo de vida, incluindo os hábitos alimentares, capazes de diminuir o risco de desenvolvimento de câncer de mama e metástases. Neste trabalho, investigamos o potencial de desenvolvimento do carcinoma mamário 4T1 e metástases em camundongos submetidos a uma dieta rica em lipídeos. Camundongos BALB/c, fêmeas, com idade de 4 a 6 semanas foram alimentados com dieta padrão, onde 10% das kcal eram advindas de lipídeos, ou dieta rica em lipídeos, onde 60% das kcal eram advindas de lipídeos; durante 6 ou 16 semanas. O peso corporal, o consumo de ração e o perfil bioquímico foram registrados. Ao final deste período, receberam células tumorais da linhagem 4T1. O peso e o volume do tumor, bem como o desenvolvimento de metástases ósseas foram analisados. O perfil das citocinas pró-inflamatórias TNF-α e IL-6, assim como o de leptina, foram avaliados. Observou-se um aumento do peso corporal dos animais alimentados pela HFD, sem aumento do consumo de ração, a partir da segunda semana de dieta. Após 16 semanas de dieta, os animais obesos apresentaram aumento de gordura perigonadal e retroperitoneal. Além disso, demonstraram menor tolerância à glicose, aumento dos níveis séricos de leptina e colesterol. Após receberem as células tumorais, a sobrevida dos animais obesos, alimentados durante 16 semanas, embora não significativa, foi menor. Estes animais também apresentaram tumores mais volumosos e mais pesados, além de aumento de metástases ósseas. O perfil de citocinas destes mesmos animais, depois de receberem o tumor, já num estágio avançado da doença, com desenvolvimento de tumores secundários, também foi alterado. Observou-se diminuição da expressão de leptina, acompanhada de diminuição de IL-6 e TNF-α. Nossos resultados, em conjunto, demonstram que a ingestão de uma dieta rica em lipídeos é capaz de induzir a obesidade em camundongos BALB/c fêmeas e pode favorecer a progressão do câncer de mama. / Obesity has become a public health problem. A large number of diseases, including cardiovascular disease, type 2 diabetes and various cancers, including breast cancer in post-menopausal women, are associated with obesity. Breast cancer is the mainly cause of cancer- related deaths in women in developed countries and its incidence has increased throughout the developing countries. Most deaths associated with breast cancer results from uncontrolled metastatic disease. Thus, is important to investigate changes in lifestyle, including dietary habits that are able to decrease the risk of developing breast cancer and metastasis. In this work, we investigate the potential development of 4T1 mammary carcinoma and metastases in mice subjected to a high fat diet. BALB/c, females, aged 4-6 weeks were fed with standard diet where 10% of kcal from fat or high-fat diet where 60% of kcal from fat; for 6 or 16 weeks. Body weight, feed intake and biochemical profile were analyzed. At the end of this period, mice of both groups received the 4T1 lineage tumor cells. The weight and volume of tumor and the development of bone metastases were examined. The profile of proinflammatory cytokines TNF-α and IL-6 as well as leptin was also evaluated. It has been observed a body weight gain of the animals fed the HFD, without increasing the feed intake from the second weeks of diet. After 16 weeks of diet, the obese animals showed increased perigonadal and retroperitoneal fat. Moreover, they demonstrated reduced glucose tolerance, increased leptin and cholesterol serum levels. After receiving the tumor cells, the survival of obese animals fed for 16 weeks, although not significant, was lower. These animals also showed tumors bulkier and heavier, and increase bone metastases. The cytokine profile of obese animals that received tumor, already at an advanced stage of the disease, with the development of secondary tumors, has also changed. We observed decreased expression of leptin, accompanied by decreased IL-6 and TNF-α. Our results, taken together, show that eating a high-fat diet can induce obesity in BALB/c mice and may promote the progression of breast cancer.

A discussão sobre a efetividade da fortificação dos alimentos com ferro como estratégia para o controle e a redução do risco da anemia vem ganhando novo enfoque, a partir da associação, em estudos epidemiológicos, entre excesso de peso e deficiência de ferro. O conhecimento dos mecanismos de regulação da homeostase de Fe pode contribuir para o entendimento das alterações no status de ferro e sua relação com a adiposidade em indivíduos obesos e com sobrepeso. Neste trabalho, o status de ferro de ratos Wistar, machos e recém-desmamados, alimentados com rações hiperlipídicas foi estudado ao longo de 60 dias. Os animais receberam, ad libitum, rações normo e hiperlipídicas. Um grupo pair-feeding foi usado, que consumiu a mesma quantidade de ferro que o grupo hiperlipídico. Foi observada maior excreção de Iipídeos nas fezes dos animais do grupo HL, em todos os períodos avaliados. Observou-se associação positiva da adiposidade com o conteúdo de Fe no baço, após 15 dias, e com o conteúdo de Fe no fígado após 30 dias, demonstrando que esses tecidos são afetados de maneira diferente pelo consumo da ração hiperlipídica, ao longo do tempo. Após 60 dias, o consumo da ração hiperlipídica resultou em diminuição da sensibilidade à insulina e em aumento da gordura corporal. Nesse período, esses animais apresentaram maior excreção de ferro nas fezes do que os controles. Além disso, houve associação negativa e significativa do ferro sérico com a adiposidade, apesar de não terem sido observadas diferenças na concentração de hemoglobina entre os grupos. Como conclusão, o consumo das rações hiperlipídicas resultou em alterações na digestibilidade do Fe na ração e em redistribuição compartimental do mineral, o que sugere interações entre o ferro e os lipídeos no lúmen intestinal ou, ainda, um processo adaptativo à condição de estresse gerada pelo excesso de lipídeos da dieta. / The discussion on the effectiveness of food fortification with iron as a strategy to control and reduce the risk of anemia is gaining new focus, from the association in epidemiological studies between overweight and iron deficiency. Knowledge on mechanisms of regulation of Fe homeostasis may contribute to the understanding of changes in iron status and its relationship with adiposity in obesity and overweight. In this study, the iron status of weanling male Wistar rats fed with high-fat diets was studied during 60 days. The animals received ad libitum normo-and high-fat diets. A pair-feeding group was used, which consumed the same amount of iron as the HF group. Lipid excretion was higher in feces of the HF group, in ali periods. A positive association between fat and spleen Fe content after 15 days, and the liver Fe content only after 30 days, demonstrate that these tissues are affected differently by the high-fat diet consumption over time. After 60 days, the consumption of high-fat diet resulted in decreased insulin sensitivity and increased fat mass. During this period, these animals had higher iron excretion in feces than controls. In addition, there was a significant negative association between serum iron and adiposity, although no differences were observed in hemoglobin concentration between groups. In conclusion, consumption of high-fat diets resulted in changes in the Fe digestibility and compartmental mineral redistribution, suggesting interactions between iron and lipids in the intestinal lumen, or even an adaptive process to the condition of stress generated by excess of dietary Iipids.

Orientador: Adriana Souza Torsoni / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Aplicadas / Made available in DSpace on 2018-08-24T18:35:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_RafaelaBenatti_M.pdf: 1191668 bytes, checksum: 30188f35804e6016d9ee2cffa54ee9d5 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O consumo materno de uma dieta rica em gordura (HFD) durante a gestação e lactação está intimamente relacionada ao acúmulo de lipídios no fígado, a resistência à insulina e ao aumento de citocinas no soro, na prole jovem e na idade adulta. MicroRNAs (miRNAs) têm sido relacionados com a biossíntese do colesterol e no metabolismo dos ácidos graxos. Nós avaliamos a modulação da síntese hepática de ácidos graxos (de novo), as vias da beta-oxidação e a expressão dos microRNAs miR-122 e miR -370 em prole recém desmamados (d28) de mães alimentadas com HFD (grupo HFD-O) ou ração padrão (grupo SC-O) durante a gestação e lactação. Comparado com os camundongos SC-O, os camundongos HFD-O apresentaram um maior peso corpóreo, maior massa de tecido adiposo e eram intolerantes à glicose e insulina. HFD-O camundongos também apresentaram níveis séricos elevados de colesterol, triglicérides, ácidos graxos não esterificados e maior fosforilação hepática de IKK e JNK em comparação com camundongos SC-O. Os níveis das proteínas FAS, ACC e HMGCR foram semelhantes entre os camundongos HFD-O e SC-O, enquanto os níveis de RNAm e proteína da SCD1 foram mais abundantes nos camundongos HFD-O comparados com camundongos SC-O. Curiosamente, a expressão de RNAm de genes relacionados com a ?-oxidação, como a ACADVL CPT1 estavam diminuídos em camundongos HFD-O. Embora não observamos uma diferença nos níveis de HNF4? hepáticas, a expressão de miR -122 estava diminuída, e a expressão de miR-370 estava aumentada em HFD-O em comparação com camundongos SC-O. Alterações no metabolismo lipídico hepático foram acompanhados pelo aumento da deposição de triglicerídes em camundongos HFD-O. Em conjunto, os nossos resultados sugerem fortemente que o consumo materno de HFD afeta precocemente o metabolismo lipídico da prole de camundongos através da modulação da expressão de genes e miRNAs relacionados com a ?-oxidação hepática e que podem contribuir para as alterações metabólicas na vida adulta / Abstract: Maternal consumption of high-fat diet (HFD) during pregnancy and lactation is closely related to liver lipid accumulation, insulin resistance, and increased serum cytokines in offspring and into adulthood. MicroRNAs (miRNAs) have been implicated in cholesterol biosynthesis and fatty acid metabolism. We evaluated the modulation of hepatic fatty acid synthesis (de novo), beta-oxidation pathways and miR-122 and miR-370 expression in recently weaned offspring (d28) of mice dams fed HFD (group HFD-O) or standard chow (group SC-O) during pregnancy and lactation. Compared with SC-O mice, HFD-O mice weighed more, had a larger adipose tissue mass and were more intolerant to glucose and insulin. HFD-O mice also presented more serum cholesterol, triglycerides, non-esterified fatty acids and hepatic IKK and JNK phosphorylation compared with SC-O mice. Protein levels of FAS, ACC and HMGCR were similar in HFD-O and SC-O mice, whereas SCD1 mRNA and protein were more abundant in HFD-O mice compared with SC-O mice. Interestingly, mRNA expression of ?-oxidation-related genes ACADVL and CPT1 was decreased in HFD-O mice. Although we did not observe a difference in hepatic HNF4? levels, the expression of miR-122 was reduced but that of miR-370 was increased in HFD-O mice compared with that in SC-O mice. Changes in hepatic lipid metabolism were accompanied by increased triglyceride deposition in HFD-O mice. Taken together, our results strongly suggest that maternal consumption of HFD affects the early lipid metabolism of offspring by modulating the expression of hepatic ?-oxidation-related genes and miRNAs that can contribute to metabolic disturbances in adult life / Mestrado / Metabolismo e Biologia Molecular / Mestra em Ciências da Nutrição e do Esporte e Metabolismo

Orientador: Dora Maria Grassi Kassisse / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-20T10:02:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Crege_DaniloRobertoXavierdeOliveira_D.pdf: 1062657 bytes, checksum: 6d99ee0443e8bca419a135928e80df63 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A mudança no estilo de vida, principalmente por conta do sedentarismo e da ingestão de dietas com grandes quantidades calóricas, tem aumentado significativamente a prevalência de doenças crônico-degenerativas na população. Diversas pesquisas mostram que a obesidade é responsável por predispor uma grande variedade de distúrbios metabólicos que muitas vezes aparecem combinados levando a chamada síndrome metabólica. A síndrome metabólica é caracterizada pela presença de um grupo de fatores de risco como obesidade central, resistência à insulina, aumento da pressão arterial e esteatose hepática. Nosso laboratório realiza desde 1996, estudos envolvendo a utilização de dietas hiperlipídicas e as implicações nestes tecidos, a fim de contribuir para o esclarecimento de como cardiopatias e alterações metabólicas são instaladas nestes modelos. O objetivo deste trabalho foi avaliar as alterações metabólicas e cardiovasculares em ratos submetidos ao tratamento com dieta hiperlipídica por quatro semanas e comparar com outros modelos estudados no laboratório. Para análise das alterações metabólicas nos ratos que fizeram ingesta da dieta hiperlipídica foram utilizadas técnicas de: clamp euglicêmicohiperinsulinêmico, isolamento de adipócitos do panículo epididimal para verificação da captação de glicose e produção de lactato e glicerol, além da análise morfométrica destes adipócitos. A análise das alterações cardiovasculares foi realizada utilizando parâmetros eletrocardiográficos e procedimentos de histologia cardíaca. Nossos resultados mostraram que ratos, que fizeram ingesta da dieta hiperlipídica por quatro semanas, apresentaram resistência à insulina verificada pela redução na taxa de infusão de glicose durante o clamp euglicêmico-hiperinsulinêmico. Além disso, a captação de glicose pelos adipócitos isolados da região epididimal também foi significativamente menor. A redução na captação de glicose, provavelmente, foi responsável pela diminuição na produção de lactato por estes adipócitos isolados dos ratos hiperlipidêmicos. A lipólise basal não foi alterada, entretanto, a estimulada por agonistas adrenérgicos apresentou-se diminuída, sendo que estas alterações não comprometeram a morfometria dos adipócitos epididimais. Os ratos dislipidêmicos também apresentaram alterações cardíacas, como a hipertrofia, avaliada pela análise histológica do coração. Estes resultados demonstram que a ingesta de dieta hiperlipídica por quatro semanas é capaz de promover alterações metabólicas, sugerindo instalação do quadro de resistência à insulina, sem causar alterações na glicemia, além de levar a hipertrofia cardíaca, sendo, portanto, um modelo útil para o estudo de complicações iniciais decorrentes da ingestão de dieta hiperlipídica / Abstract: Changes in lifestyle, especially due to sedentarism and intake of high caloric diets have significantly increased the prevalence of chronic diseases in the population. Many researches show that obesity is responsible to a huge variety of metabolic disorders that usually appears combined leading to a disease known as the metabolic syndrome. Metabolic syndrome is characterized by the presence of a group of risk factors such as central obesity, insulin resistance, increase in blood pressure and hepatic steatosis. Our laboratory conducts, since 1996, studies involving the use of high-fat diet and the implications in these tissues in order to contribute to the comprehension of how cardiopathies and metabolic disorders are installed in these models. The aim of this study was to evaluate the metabolic and cardiovascular disorders in rats fed with highfat diet during four weeks and to compare this information with other models used in our laboratory. To analyze the metabolic changes in rats that were fed with high-fat diet, we used the following techniques: euglycemic-hyperinsulinemic clamp, adipocytes isolation from epididymal panniculus, for the verification of glucose uptake, lactate and glycerol production, besides morphometric analysis of these adipocytes. The analyses of cardiovascular disorders were performed using electrocardiographic parameters and cardiac histology procedures. Our results demonstrated that, rats, fed with high-fat diet during four weeks showed insulin resistance, verified by reduction in the rate of glucose infusion, during euglycemic-hyperinsulinemic clamp. In addition, glucose uptake by isolated adipocytes from epididymal tissue was significantly lower. The reduction in glucose uptake probably was the responsible for diminish lactate production by these isolated adipocytes of hyperlipidemic rats. Basal lipolysis was not altered, however, the one stimulated by adrenergic agonists was reduced, and these changes did not affect the morphometry of epididymal adipocytes. The dislipidemic rats also showed cardiac alterations, such as hypertrophy, observed in a hystologic analyses of the heart. These results demonstrate that the intake of high-fat diet during for weeks is able to promote metabolic disorders, suggesting insulin resistance development, however, without promotes glycemic alterations, besides leads to cardiac hypertrophy, and is therefore, a useful model to study these initial complications resulting from the ingestion of high-fat diet / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Dora Maria Grassi Kassisse / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-20T14:23:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bellenzani_MarcelaPalomoPieroni_M.pdf: 6472856 bytes, checksum: e473a96a17b23ee1d9a456d9ac7a4602 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A pandemia da obesidade é evidente no início do século XXI. O fator desencadeante mais relevante é a alimentação hipercalórica associada ao sedentarismo. Modelos de estudo em ratos para investigar as etapas que precedem o desenvolvimento desta doença são fundamentais para propor terapias de prevenção. No modelo de indução da dislipidemia pela dieta por quatro semanas, os ratos apresentam hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia e hiperinsulinemia e com seis semanas de administração da dieta observa-se um aumento no peso dos panículos adiposos da região epididimal e peri-renal e sem alteração no depósito da região mesentérica. Assim sendo, objetivamos, nesta tese, analisar as vias metabólicas envolvidas no processo de metabolização da glicose e triacilgliceróis nos tecidos adiposo branco e hepático em ratos hiperlipidêmicos e para tal estudamos as vias lipogênica, lipolítica e neoglicogênica, pela quantificação da expressão gênica das enzimas chaves envolvidas nestes processos. A dislipidemia foi induzida pelo oferecimento de dieta hiperlipídica (grupo dieta, D) ao longo de quatro semanas a ratos jovens e a instalação do quadro foi verificada pelas análises plasmáticas ao final do tratamento e após jejum de 16h. Amostras de tecidos hepático e adiposo foram coletadas para análise histológica e quantificação da expressão gênica sendo estas analisadas por qRT-PCR. Observou-se que ratos que ingerem dieta hiperlipídica (+129+10,13 g) ganham peso de forma semelhante aos ratos controle (C: +148+8,8 g) mesmo ingerindo quantidade significativamente menor de dieta (C: 20,8+0,62 g vs D: 14,87+0,66 g). As análises histológicas ilustram aumento no teor de depósitos de lipídeos no tecido hepático. A expressão gênica no tecido hepático de ratos dieta foi aumentada significativamente para as enzimas lipoproteína lipase, piruvato desidrogenase quinase 4 e fosfofrutoquinase 1 e diminuição significativa na expressão de glicose 6-fosfatase sem alteração na quantificação da expressão de acetil-CoA carboxilase alpha, gliceroquinase, piruvato desidrogenase fosfatase 2. Em relação ao tecido adiposo observamos que a expressão das enzimas acetil-CoA carboxilase e piruvato desidrogenase fosfatase 2 não foi significativamente alterada em nenhum dos depósitos adiposos. A lipase hormônio-sensível não apresentou alterações no tecido adiposo epididimal, porém teve sua expressão significativamente aumentada nos tecidos mesentérico e peri-renal. A expressão da lipoproteína lipase por sua vez, não se alterou no panículo adiposo epididimal nem no panículo adiposo mesentérico estando diminuída no panículo adiposo peri-renal. E por fim, a piruvato desidrogenase quinase 4 também não apresentou alterações nos depósitos epididimal e mesentérico porém no peri-renal sua expressão encontrou-se aumentada. Estes resultados, em conjunto, indicam que a dieta administrada por 4 semanas, mesmo não apresentando todas as alterações observadas com 6 semanas, pode ser útil para os estudos iniciais do quadro de dislipidemia que antecedem as disfunções metabólicas / Abstract: The pandemic of obesity is evident in the twenty-first century. The most important and triggering factor is the high-calorie diet associated with physical inactivity. Study models in rats to investigate the steps that precede the development of this disease are essential to propose preventive therapies. In the model of induction of dyslipidemia by diet for four weeks, the mice exhibit hypercholesterolemia, hypertriglyceridemia, and hyperinsulinemia and there is an increase in weight of the panniculus region of epididymal and peri-renal depot and no change in the mesenteric region. Therefore, we aimed to analyze the metabolic pathways involved in the metabolism of glucose and triglycerides in white adipose tissue, and liver in hyperlipidemic rats and to study the ways that lipogenic, lipolytic and glyconeogenic for the quantification of gene expression of key enzymes involved in these processes. Dyslipidemia was induced by offering high-fat diet (diet group, D) over four weeks to young rats and onset of condition was verified by analysis at the end of the plasma treatment and after fasting for 16 hours. Samples of liver and adipose tissue were collected for histological analysis and quantification of gene expression and these were analyzed by qRT-PCR. It was observed that mice eat high-fat diet (+129 +10.13 g) gain weight similarly to control rats (C: +8.8 +148 g) even eating significantly less diet (C: 20.8 +0.62 g vs D: 14.87 +0.66 g). Histological analysis illustrate the content of lipid deposits in liver tissue. Gene expression in liver tissue of rats diet was significantly increased for the enzymes lipoprotein lipase, pyruvate dehydrogenase kinase 4 and 1 and Phosphofructokinase significant decrease in the expression of glucose 6-phosphatase no change in the quantification of the expression of acetyl-CoA carboxylase alpha, Gliceroquinase, pyruvate dehydrogenase phosphatase 2. In relation to the adipose tissue we observed that the expression of the enzyme acetyl-CoA carboxylase and pyruvate dehydrogenase phosphatase 2 was not significantly altered in any of the fatty deposits. The hormone-sensitive lipase showed no changes in epididymal adipose tissue but its expression was significantly increased in mesenteric tissue and peri-renal. Lipoprotein lipase, in turn, did not change in the mesenteric or epididymal being reduced in the peri-renal. And finally, the pyruvate dehydrogenase kinase 4 also showed no changes in epididymal and mesenteric but the peri-renal expression is increased. These results, together, indicate that the diet for 4 weeks, even not showing all changes observed within 6 weeks, can be useful for the initial studies of hyperlipidemia that precede the metabolic dysfunctions / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Submitted by Biblioteca da Faculdade de Farmácia (bff@ndc.uff.br) on 2017-03-28T17:01:20Z No. of bitstreams: 1 Bedê, Teresa Palmisciano [Dissertação, 2015].pdf: 1365884 bytes, checksum: 2fb9e05630c2ebc5ce56e4099bbd7366 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-28T17:01:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bedê, Teresa Palmisciano [Dissertação, 2015].pdf: 1365884 bytes, checksum: 2fb9e05630c2ebc5ce56e4099bbd7366 (MD5) / Introdução: A busca da população por melhor qualidade de vida contribui para os estudos acerca de alimentos com propriedades funcionais e de prevenção de doenças. Destacam-se o suco de uva tinto integral (SUTI) e o vinho tinto (VT) que, ricos em polifenóis, vem demonstrando potente ação antioxidante e antinflamatória. Objetivo: Avaliar os efeitos do consumo de SUTI, de VT e de solução de resveratrol (SR) sobre a função e integridade hepática de ratos alimentados com dieta hiperlipídica. Materiais e Métodos: Foi realizado ensaio biológico com 50 Rattus Novergicus Wistar Albino, fêmeas adultas, divididas em 5 grupos: controle (GC)- ração caseína + água; hiperlipídico (GH)- ração hiperlipídica + água; vinho tinto (GV)- ração hiperlipídica + 10mL/dia de VT; suco de uva (GS)- ração hiperlipídica + 15mL/dia de SUTI e, resveratrol (GR)- ração hiperlipidica + 15mL/dia de SR. Durante 60 dias, ração e água foram ofertados em livre demanda e o peso corporal, o consumo alimentar e a pressão arterial foram verificados e registrados. Ao final do estudo, os animais foram sacrificados, amostras de sangue foram coletadas para análises bioquímicas e o fígado foi retirado para avaliações histológicas. Para comparação das médias entre grupos foi utilizado Anova one-way e Tukey como pós-teste, considerando um nível de significância de 5%. Resultados: A concentração de polifenóis totais (mg EAG -1) e de trans-resveratrol (mg/L) foi menor (p<0,05) no SUTI do que nas demais bebidas, mas a capacidade antioxidante não diferiu entre elas. Não houve diferença no peso corporal e no consumo alimentar dos grupos. A pressão arterial sistólica (mmHg) foi menor (p<0,05) no GS e GC. O GH apresentou maior (p<0,05) variação de glicemia (mg/dL) e o GR foi o único que apresentou diminuição de glicemia ao longo do estudo. A concentração (mg/dL) de colesterol total foi menor (p<0,05) no GS do que no GC, mas não houve diferença na concentração (mg/dL) de lipoproteína de alta densidade – HDL e, a concentração (mg/dL) de triglicerídeos foi maior (p<0,05) no GC. Não houve diferença na concentração (U/L) de aspartatotransaminase, mas o GS foi o único que apresentou-se dentro do intervalo de normalidade. Todos tiveram concentração (U/L) de alaninatransaminase acima do recomendado, mas o GS apresentou concentração numericamente menor e, a concentração de fosfatase alcalina (U/L) do GR foi menor (p<0,05) do que o GH e GV. A concentração de interleucina 6 (pg/mL) foi menor (p<0,05) no GS do que no GV. O peso do fígado (g/100gPC) foi semelhante entre os grupos, mas a concentração de gordura hepática (g%) foi menor (p<0,05) no GS e GC, e o teor de proteínas no fígado (g%) do GS foi menor (p<0,05) do que no GV e GR. A área dos núcleos dos hepatócitos (μm²) foi menor (p<0,05) no GC do que no GH, GV e GS, mas o IOD mostrou-se menor (p<0,05) no grupo GC, seguido pelo GS e maior no GH e GV. Conclusões: O consumo de SUTI parece ser capaz de minimizar os efeitos da dieta hiperlipídica sobre o tecido hepático. Mesmo diante do menor teor de polifenóis, o SUTI pode ter conferido proteção sobre certos parâmetros bioquímicos avaliados, assim como sobre o desenvolvimento de hipertensão arterial e da doença hepática gordurosa não alcoólica, o que não foi observado com o VT e a SR / Introduction: The search for people for better quality of life contributes to the studies of food with properties functional and disease prevention. Stand out from the full red grape juice (JG) and red wine (RW) that are rich in polyphenols, has demonstrated potent antioxidant action and antinflammatory. Objective: To evaluate the effects of consumption of JG, RW and resveratrol solution (SR) on liver function and integrity of mice fed high-fat diet. Materials and Methods: This was a biological assay with 50 Rattus Novergicus Wistar Albino adult females divided into 5 groups: control (GC) - casein diet + water; hyperlipidic (GH) - fat diet + water; red wine (GW) - fat diet + 10 mL of RW / day; juice (GJ) - fat diet + 15mL of JG / day and resveratrol (GR) - fat diet + 15 mL of SR / day. During 60 days, feed and water were offered on free demand and, body weight, food intake and blood pressure were checked and recorded. At the end of the study, the animals were sacrificed, blood samples were collected for biochemical analysis and the liver was removed for histological evaluation. To compare the means between groups we used one-way ANOVA and Tukey as post-test, considering a 5% significance level. Results: The concentration of total polyphenols (mg EAG -1) and trans-resveratrol (mg/ L) was lower (p<0.05) in JG than the other drinks, but the antioxidant capacity did not differ between them. There was no difference in body weight and food consumption groups. Systolic blood pressure (mmHg) was lower (p<0.05) in the GJ and GC. GH had higher (p<0.05) blood glucose change (mg/ dL), and GR is the only one that decreases in blood glucose throughout the study. Concentration (mg / dL) of total cholesterol was lower (p<0.05) in GJ than in the GC, but there was no difference in the concentration (mg/ dL) of high-density lipoprotein - HDL and the concentration (mg/ dL) triglyceride was higher (p<0.05) in GC. There was no difference in the concentration (U/L) aspartatotransaminase, but the GJ was the one who introduced himself within normal range. All had concentration (U/L) alaninatransaminase above recommended, but the GJ presented numerically lowest concentration, and the concentration of alkaline phosphatase (U/L) of GR was smaller (p<0.05) than GH and GW. The concentration of interleukin-6 (pg/mL) was lower (p<0.05) in GJ than in the GW. Liver weight (g /100g body weight) was similar between the groups, but the concentration of liver fat (g%) was lower (p<0.05) in the GJ and GC, and the protein content in the liver (g%) GJ was lower (p <0.05) than the GW and GR. The area of the nuclei of hepatocytes (μm²) was lower (p<0.05) in the GC than in the GH, GW and GJ, but the IOD was lower (p <0.05) in the GC, followed by GJ and higher in GH and GW. Conclusions: Consumption of JG seems to be able to minimize the effects of high fat diet on liver tissue. Even with the lower polyphenol content, the JG may have conferred protection on certain biochemical parameters, as well as on the development of hypertension and non-alcoholic fatty liver disease, which was not observed with RW and SR

Alzheimer's disease (AD) is a progressive neurodegenerative disorder, characterised by deficits in language, behaviour and memory. Increasing evidence suggests that mid-life obesity and a diet high in fat are risk factors for AD. In contrast, life-threatening weight loss occurs and worsens as the disease progresses, despite adequate or increased food intake. A greater understanding of energy balance in AD may therefore uncover novel targets for therapy. The aim of this thesis was to test the hypothesis that 3xTgAD mice display altered energy balance and that experimental changes to this balance will alter cognition. To address this hypothesis, three key objectives were set up; to characterise the energy balance profile, characterise behaviour and memory, and evaluate the response to an high fat (HF) diet in a triple transgenic (3xTgAD) model, an experimental mouse model of AD. Energy balance was characterised in non-transgenic (Non-Tg) control and 3xTgAD mice, demonstrating altered body weight, food intake and metabolic rate in the 3xTgAD mouse model of AD. At 2-month of age male 3xTgAD mice displayed greater food intake and body weight, but no difference in metabolic rate, whereas from 12 months of age 3xTgAD mice weighed less, despite eating more, and had a higher metabolic rate than Non-Tg control mice. This provides evidence that there is a shift towards a hypermetabolic state from 12 months of age in 3xTgAD mice, which may represent a key stage in advancement of the disease process. Behaviour and memory were characterised in Non-Tg control and 3xTgAD mice in a battery of tests at different ages. 3xTgAD mice showed changes in open-field activity/anxiety from 3 months of age. Memory impairments were first detected in 3xTgAD mice at 3 months of age as deficits in odour recognition memory, mirroring early impairments seen in AD patients. Deficits in spatial memory were then observed in both the Y-maze spontaneous alternation and Morris water maze tests from 5 months of age. Finally, deficits in non-spatial visual object memory were observed in 3xTgAD mice in the novel object recognition test at 8 months of age. Energy balance, behaviour and memory were assessed in Non-Tg control and 3xTgAD mice in response to an HF diet. Non-Tg control and 3xTgAD mice displayed similar energy balance profiles in response to an HF diet. The HF diet was found to worsen memory in Non-Tg mice in odour recognition at 3-4 and 7-8 months of age, in the Morris water maze at 7-8 months of age and in novel object recognition and spontaneous alternation at 11-12 and 15-16 months of age. Similarly, the HF diet worsened memory in 3xTgAD mice in odour discrimination at 3-4 and 7-8 months of age, the Morris water maze at 7-8 and 11-12 months of age, and in spontaneous alternation at 15-16 months of age. As an HF diet induced memory impairments, in both Non-Tg control and 3xTgAD mice, it suggests that diet-induced deficits may therefore, not be specific to AD, but rather to cognition in general. Overall, these data demonstrate that 3xTgAD mice show AD-like age-dependent changes in energy balance, behaviour and memory. Furthermore, an HF diet produced impairments in memory in 3xTgAD mice, but these effects were not specific to AD, as an HF diet also led to deficits in control animals. These data support a role for energy balance in the progression of AD, although the underlying mechanisms remain poorly understood. 3xTgAD mice may therefore represent a good model to examine energy balance during AD and to evaluate targets for future therapies.

The prevalence of obesity is growing worldwide partly due to an increase in consumption of diets high in fat. Obesity is known as a risk factor for developing Alzheimer’s disease (AD) later in life. Both obesity and AD are associated with cognitive deficits and experimental high-fat diets can impair memory in cognitively normal rodents but also worsen memory deficits in AD mouse models. What is still unclear is the molecular mechanisms behind the detrimental effects of a high-fat diet on memory and if sex can influence its effect. Data in this thesis demonstrated that compared to females, male control non-transgenic (Non-Tg) mice had earlier deficits in memory after a high-fat diet that were associated with hyperinsulinemia. However, female Non-Tg mice were more vulnerable to ultrastructural changes in mitochondria morphology and loss of synapses after 6 months of a high-fat diet, changes that were similar to those observed in control-fed female triple-transgenic mice (3xTgAD). Finally, the memory deficits observed after a high-fat diet in cognitively normal mice were not associated with obesity and adiposity, as treatment with resveratrol (RSV) an anti-obesogenic compound, attenuated body weight gain and adipose tissue but failed to reverse memory impairment. In control fed 3xTgAD mice, RSV rescued memory deficits. In all experiments a high-fat diet had no detectable effect on cognitive impairment in 3xTgAD mice. In conclusion, the present thesis demonstrates that the sex-dependent differences in the effect a high-fat diet on memory are likely due to hyperinsulinemia and mitochondrial impairment and do not depend on obesity phenotype. These results demonstrate the importance of gender when studying both obesity and AD and are relevant for future clinical trials.