Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2017-01-10T16:36:36Z No. of bitstreams: 2 Tese - Carlos de Melo e Silva Neto - 2016.pdf: 1946853 bytes, checksum: efe032887d4f598ce1710e9dff1b46d1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-01-11T09:50:40Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Carlos de Melo e Silva Neto - 2016.pdf: 1946853 bytes, checksum: efe032887d4f598ce1710e9dff1b46d1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-11T09:50:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Carlos de Melo e Silva Neto - 2016.pdf: 1946853 bytes, checksum: efe032887d4f598ce1710e9dff1b46d1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-12-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Improper use of pesticides is negative visiting bees of agricultural crops, reducing the gains in production resulting from pollination. There are no studies on the effect of fungicides on the bees that pollinate crops, and not only insecticides can cause negative effects bees. The tomato production, is that culture is widely carried out in greenhouses, a condition that reduces the use of pesticides, but generates the pollination deficit, reducing the production of fruit. Thus, the objectives of this study are to verify the pesticides used in tomato crop and the list of products with bees the influence of fungicides in the pollination of culture and bee management in protected environment. In this study there were three activities, first a case study with a survey of pesticides used in tomato plantation in Goianápolis, followed by experiment conducted in a greenhouse to check the pollination of tomato by stingless bee Melipona quadrifasciata and last group experiments to verify effect repellency pollinators of tomato by different combinations of fungicides in the field and their respective fruit production, followed by the death of M. quadrifasciata bees in the laboratory with the use of fungicides. The use of 35 pesticides was found, and 40.5% only of the insecticide class, 32.4% are fungicides, 13.5% are miticides and insecticides and only two products used belong to class of fungicides and bactericides and herbicides. Regarding the toxicological classification of the products, 51.4% are classified as moderately toxic, however 17.14% are classified as extremely toxic and highly toxic, amounting to 34.38% for both groups and only 14.2% are classified as low toxicity. Thus, about 97% of the products used have some degree of danger in relation to the environment. 22 (62.85%) of the chemicals used in growing tomato show the dose lethal to A. mellifera, mostly represented by insecticides. As for pollination in the greenhouse, the fruits of tomatoes produced in greenhouses with the presence of bees showed a superiority of 15% in fresh weight and 41.1% in the number of seeds in relation to the fruits produced in an open environment. For tomato indeterminate growth, seed yield is 33% greater when the flower is pollinated and mass production of tomatoes reaches a 16% gain. The results show the relevance of the use of M. quadrifasciata directed pollination in the greenhouse. The mortality rate for M. quadrifasciata in 24 hours valuation was higher for copper hydroxide and Trifloxistrobin and Tebuconazole, being approximately 75% and 50%, respectively. Already Mancozeb, Bacillus subtilis and the witness did not differ among themselves. Thus, the more pesticide applications made on tomato flowers, fewer visits from bees flowers and consequentenente lower the amount of pollen grains deposited on stigmas, reflecting in fruit production. / O uso inadequado dos agrotóxicos é negativo às abelhas visitantes das culturas agrícolas, reduzindo os ganhos em produção resultantes da polinização. Ainda não existem estudos acerca do efeito dos fungicidas sobre as abelhas que polinizam culturas agrícolas, sendo que não somente inseticidas podem causar efeitos negativos às abelhas. A produção do tomateiro também é realizada em casas de vegetação, condição que poderia reduzir o uso de agrotóxicos, porém gera o deficit de polinização, reduzindo a produção de frutos. Assim, os objetivos desta pesquisa são verificar os agrotóxicos utilizados na cultura do tomateiro e a relação desses produtos com as abelhas, a influência de fungicidas na polinização da cultura e o manejo de abelha em ambiente protegido. Neste estudo foram realizadas três atividades, primeiro, um estudo de caso com o levantamento de agrotóxicos utilizado no cultivo do tomateiro em Goianápolis, GO, seguido de experimento conduzido em casa de vegetação para verificar a polinização do tomateiro pela abelha sem ferrão Melipona quadrifasciata e, por último, foram conduzidos dois experimentos para verificar o efeito de repelência de visitantes florais de tomateiro por diferentes combinações de fungicidas em campo e sua respectiva produção de frutos, seguido da mortalidade de abelhas M. quadrifasciata em laboratório com uso dos fungicidas. Foi verificada a utilização de 35 agrotóxicos, sendo 40,5% deles exclusivamente da classe dos inseticidas, 32,4% fungicidas, 13,5% acaricidas e inseticidas e apenas dois produtos utilizados pertenciam à classe dos fungicidas e bactericidas, e um herbicida. Em relação à classificação toxicológica dos produtos, 51,4% classificados como medianamente tóxicos, porém 17,14% classificados como extremamente tóxicos e altamente tóxicos, totalizando 34,38% para os dois grupos, e somente 14,2% classificados como pouco tóxicos. Assim, cerca de 97% dos produtos utilizados apresentam algum grau de periculosidade em relação ao meio ambiente. Do total, 22 (62,85%) dos produtos químicos utilizados no cultivo de tomateiro apresentam a dose letal para A. mellifera, sendo a maioria representada por inseticidas. Quanto à polinização em casa de vegetação, os frutos de tomate produzidos em estufas com presença de abelhas apresentaram uma superioridade de 15% em massa fresca e 41,1% no número de sementes em relação aos frutos produzidos em ambiente aberto. Para o tomateiro de crescimento indeterminado, a produção de semente é 33% maior quando a flor é polinizada e a produção de massa de tomate apresenta ganhos de 16%. Os resultados evidenciam a relevância do uso de M. quadrifasciata direcionado à polinização de plantas do tomateiro em casa de vegetação. A taxa de mortalidade para M. quadrifasciata em 24 horas de avaliação foi maior quando aplicados o Hidróxido de cobre (75%) e a Trifloxistrobina + Tebuconazol (50%). No entanto, nos tratamentos com Mancozeb, Bacillus subtilis e no tratamento testemunha não houve diferenças entre si. Assim, quanto mais aplicações de agrotóxicos realizadas sobre as flores de tomateiros, ocorre menos visitas de abelhas às flores e, consequentenente, menor a quantidade de grãos de pólen depositados nos estigmas, refletindo na produção de frutos.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-01-19T14:43:03Z No. of bitstreams: 2 Tese - Míriam de Almeida Marques - 2015.pdf: 2581091 bytes, checksum: fc6fddbab5faac3a1db80e1bbb9a905d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-01-19T14:43:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Míriam de Almeida Marques - 2015.pdf: 2581091 bytes, checksum: fc6fddbab5faac3a1db80e1bbb9a905d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-19T14:43:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Míriam de Almeida Marques - 2015.pdf: 2581091 bytes, checksum: fc6fddbab5faac3a1db80e1bbb9a905d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-08-07 / Vegetable oils and the fungus Beauveria bassiana has been tested on Bemisia tabaci, resulting in median controls of nymphs at field level. Several studies have shown that the efficiency of B. bassiana for control of Bemisia tabaci nymphs can be increased by combination with other control agents. Thus, this study was conducted to evaluate: the effect of the combination of B. bassiana with sublethal doses of castor oil in the mortality of B. tabaci nymphs; the compatibility of castor oil with B. bassiana and Trichogramma pretiosum, parasitoid of caterpillar eggs most used in the world. The effect of the castor oil at 100% (v/v) on conidia germination, vegetative growth and sporulation of B. bassiana after 24 h and seven, 15, 60, 90, 120 days of storage at 4°C and 26°C was evaluated in two experiments at laboratory. The effect of castor oil (Rícino®) at 1%, 2%, 3%, 4%, 5% and 6% (v/v) and neutral detergent at 2% (v/v) (emulsifier for the oil) on immature stages of T. pretiosum (egg, larva, pre-pupae and pupae) of parasitoid was also tested at laboratory. the chlorpyrifos insecticide 0.5 L a.i./ha and distilled water In the first stage of the study several experiments were conducted at screenhouse to determine the sublethal dose of commercial castor oil Azevedo® and Rícino® at 0.25%, 0.5%, 1.0%, 1.5 %, 2.0%, 3.0%, 4.0%, 5.0% and 6.0% (v/v) on mortality of different instars of B. tabaci. The castor oil was emulsified with Silwet® L-77 (0.01%, v/v), Zupp® neutral detergent (1%, 2%, 3% and 4%, v/v) and Solub'oil® (0.005%, 0.015%, 0.045%, 0.09%, 0.20% and 0.27%, v/v). The insecticide thiamethoxam 250 WG, was included as the chemical standard tested at label rate recommended by the manufacturer of 0.17 g a.i./L. Distilled water was used as the untreated control. In the second stage, B. bassiana CG1229 at 1×106 and 1x107 conidia/mL was tested alone or in combination with castor oil at 1% (v/v) emulsified in Silwet® L-77 0.01% (v/v) or Solub'oil® at 0.05% and 0.1% (v/v) on second instar nymphs of B. tabaci at screenhouse. Mortality of first instar to the fourth nymphs increased with an increase in concentration of castor oil and emulsifiers. Nymphs of the first and second instar were more susceptible to castor oil and 0.01% Silwet (v/v) than the third and fourth instars.The neutral detergent at 1%, 2%, 3% and 4% (v/v) killed 28.6%, 52.7%, 64.4% and 69.3% of second instar nymphs, respectively. When neutral detergent at 2% (v/v) was combined with castor oil 1% (v/v), killed 88.03% and 79.34% nymphs of first-second and third-fourth instar, respectively. The Solub'oil at 0.005%, 0.015%, 0.045%, 0.09% and 0.27% (v/v) killed 34.9%, 26.1%, 30.9%, 38.1% and 70.1% of second instar nymphs, respectively. When the Solub'oil at 0.2% (v/v) was combined with castor oil Azevedo at 1% (v/v), mortality of second instar nymphs was 84.71%. Reductions in the vegetative growth of B. bassiana by castor oil and Solub'oil were observed after 120 days of storage at 26°C when compared to pure conidia of the fungus. Conidia viability and conidiogenesis of B. bassiana was not affected by Castor oil at 26 ° C in all dates. Mortality of B. tabaci nymphs was significantly lower when castor oil + Silwet® L-77 was combined with B. bassiana (16.93%) compared to the fungus alone (57.94%). It was observed that Silwet® L- 77 at 0.01% did not emulsify efficiently the castor oil, not allowing conidia to germinate (9.82%). The combination of conidia of B. bassiana + castor oil + solub'oil and B. bassiana + Solub'oil significantly increased mortality of nymphs of B. tabaci (91.66% and 85.46%, respectively) compared to B. bassiana, castor oil or Solub'oil tested alone (75.57%, 59.12% and 53.92%, respectively). The Solub'oil at 0.5% or 1.0% did not affect the germination of conidia of B. bassiana (96.5%). Egg-larval stage of development of T. pretiosum was the least affected by different concentrations of castor oil + neutral detergent at 2% (v/v), with 81.9% of adult emergence of than the stages of pre-pupae and pupae, with 24.88% and 18.30% of emergency, respectively. Castor oil at 1% and 2% (v/v) was selective and innocuous to the egg-larval stage. All oil concentrations were considered mildly or moderately harmful to prepupae and pupae stages of T.pretiosum and caused significant reductions in adults emergency of parasitoid. The neutral detergent at 2% (v/v) did not affect immature stages of T. pretiosum, with emergency of adults ≤ 95.8% and it was classified as harmless to this parasitoid. Castor oil and emulsifiers have the potential to control B. tabaci biotype B. Castor oil when combined with conidia of B. bassiana + Solub'oil or only with Solub'oil increases mortality of nymphs of B. tabaci. Castor oil is selective to all T. pretiosum stages of development at concentrations ≤ 2%. / Os óleos vegetais e o fungo Beauveria bassiana tem sido testados sobre Bemisia tabaci, resultando em controles medianos de ninfas em nível de campo. Vários estudos tem demonstrado que a eficiência de B. bassiana no controle de ninfas de B. tabaci pode ser aumentada pela combinação com outros agentes de controle. Desta forma, este trabalho foi conduzido para avaliar: o efeito da combinação de B. bassiana com doses subletais do óleo de mamona na mortalidade de ninfas de B. tabaci; a compatibilidade do óleo de mamona com o B. bassiana e com o Trichogramma pretiosum, parasitoide de ovos de lagartas mais utilizado no mundo. Na primeira etapa dos estudos, foram instalados em casa telada vários experimentos para determinar a dose subletal do óleo comercial de mamona Azevedo® e o Óleo de Rícino® a 0,25%, 0,5%, 1,0%, 1,5%, 2,0%, 3,0%, 4,0%, 5,0% e 6,0% (v/v) na mortalidade de diferentes ínstares de B. tabaci. Como emulsionantes para o óleo de mamona foram testados o Silwet® L-77 (0,01%, v/v), o detergente neutro Zupp® (1%, 2%, 3% e 4%, v/v) e o Solub’oil® (0,005%, 0,015%, 0,045%, 0,09%, 0,20% e 0,27%, v/v). Como padrão de comparação com inseticida químico foi utilizado o thiamethoxam (Actara® 250 WG) a 0,17 g i.a./L. Na testemunha foi utilizada água destilada. Na segunda etapa dos estudos, em condições de em casa telada, o B. bassiana CG1229 a 1x106 e 1x107 (conídios/mL) foi testado sozinho ou em combinação com o óleo de mamona a 1% (v/v) emulsionado em Silwet® L-77 a 0,01% (v/v) ou em Solub’oil® a 0,05% e 0,1% (v/v) na mortalidade de ninfas de segundo ínstar da B. tabaci. Em laboratório, foram realizados dois experimentos que testaram a compatibilidade do óleo de mamona a 100% (v/v) na germinação, crescimento vegetativo e esporulação de B. bassiana as 24 h e 7, 15, 60, 90, 120 dias de armazenamento a 4º C e 26º C. No estudo de compatibilidade com T. pretiosum, foi avaliado o efeito do Óleo de Rícino® a 1%, 2%, 3%, 4%, 5% e 6% (v/v), do detergente neutro a 2% (v/v) (emulsificante para o óleo), do inseticida clorpirifós a 0,5 L i.a./ha e da água destilada sobre estágios imaturos (ovo-larva, pré-pupa e pupa) do parasitoide. A mortalidade de ninfas de primeiro ao quarto ínstares aumentou significativamente com o aumento da concentração do óleo de mamona e dos emulsionantes. Ninfas de primeiro e segundo ínstares foram mais suscetíveis ao óleo de mamona e ao Silwet a 0,01% (v/v) do que as de terceiro e quarto ínstares, com mortalidades de 71,32% e 55,01%, em comparação a 26,38% e 48,15%, respectivamente. O detergente neutro a 1%, 2%, 3% e 4% (v/v) causaram mortalidades de ninfas de segundo íntar de 28,6%, 52,7%, 64,4% e 69,3%, respectivamente. Quando este produto a 2% v/v foi aplicado com o óleo de mamona a 1% (v/v), causaram mortalidade de 88,03% e 79,34% em ninfas de primeiro-segundo e terceiro-quarto ínstares, respectivamente. O Solub’oil a 0,005%, 0,015%, 0,045%, 0,09% e 0,27% (v/v) causou mortalidade de ninfas do segundo íntar de 34,94%, 26,14%, 30,91%, 38,14% e 70,15%, respectivamente. Quando o Solub’oil a 0,2% (v/v) foi combinado com o óleo de mamona a 1% (v/v), causaram mortalidade de ninfas do segundo ínstar de 84,71%. Reduções significativas do crescimento vegetativo de B. bassiana foram observadas aos 07 e 120 dias de armazenamento a 4ºC e 26°C, respectivamente, pela presença do óleo de mamona e Solub’oil em relação a conídios puros do fungo. O óleo de mamona não afetou a viabilidade dos conídios de B. bassiana e nem a conidiogênese na temperatura de 26°C em todas as datas avaliadas. A mortalidade de ninfas de B. tabaci foi significativamente menor na combinação óleo de mamona + B. bassiana + Silwet® L-77 (16,93%) em relação ao fungo sozinho (57,94%), pois o Silwet® L-77 a 0,01% não emulsificou eficientemente o óleo de mamona, não permitindo a germinação dos conídios (9,82%). A combinação de conídios de B. bassiana + óleo de manona + Solub’oil e B. bassiana + Solub’oil aumentou significativamente a mortalidade de ninfas de B. tabaci (91,66% e 85,46%, respectivamente), em relação ao B. bassiana, óleo de mamona ou Solub’oil testados sozinhos (75,57%, 59,12% e 53,92%, respectivamente). O Solub'oil a 0,5% ou 1,0% não interferiu na germinação dos conídios de B. bassiana (96,5%). O estágio de desenvolvimento de ovo-larva de T. pretiosum foi o menos afetado pelas diferentes concentrações do óleo de mamona + detergente neutro a 2% (v/v), com 81,94% de emergência de adultos, do que os estágios de pré-pupa e pupa, com 24,88% e 18,30% de emergência, respectivamente. O óleo de mamona a 1% e 2% (v/v) foi seletivo e inócuo a fase de ovo-larva. Todas as concentrações do óleo foram consideradas levemente ou moderadamente nocivas aos estágios de pré-pupa e pupa de T. pretiosum e causaram significativas reduções na emergência de adultos do parasitoide. O detergente neutro a 2% (v/v) não afetou as fases imaturas de T. pretiosum, com percentagens de emergência de adultos ≤ 95,77% e foi classificado como inócuo a este parasitoide. O óleo de mamona e emulsionantes apresentam potencial no controle de B. tabaci biótipo B. O óleo de mamona quando combinado com conídios de B. bassiana + Solub’oil ou somente com Solub’oil aumenta a mortalidade de ninfas de B. tabaci. O óleo de mamona é seletivo a todas as fases de desenvolvimento do T. pretiosum em concentrações ≤ 2%.

O objetivo do presente trabalho foi o de coletar informações básicas para a implementação de um programa de manejo da resistência de Aphis gossypii Glover, 1877 a inseticidas na cultura do algodão. Para tanto, foram caracterizadas as linhas-básicas de suscetibilidade de A. gossypii aos inseticidas carbosulfam, tiametoxam e endosulfam por meio de um bioensaio de contato residual. Posteriormente, foi realizado um monitoramento da suscetibilidade a esses inseticidas em populações de A. gossypii que foram coletadas nas regiões de Acreúna-GO, Ituverava-SP, Rondonópolis-MT e Unai-MG nas safras de algodão de 2001/2002 a 2003/2004. Em cada safra, as coletas de pulgões foram realizadas no início, meio e final do ciclo da cultura. Não foram observadas diferenças significativas na suscetibilidade de populações de A. gossypii para tiametoxam e endosulfam. Por outro lado, houve redução significativa na suscetibilidade ao carbosulfam ao longo do ciclo da cultura. No entanto, foi observado um restabelecimento parcial da suscetibilidade ao carbosulfam no início da safra subseqüente, sugerindo assim a instabilidade da resistência. A razão de resistência de A. gossypii ao carbosulfam foi de 5,7 vezes. Não foi verificada a presença de resistência cruzada entre carbosulfam e os inseticidas tiametoxam e endosulfam. Estudos de dinâmica da resistência de A. gossypii ao carbosulfam realizados em condições de laboratório mostraram que a resistência é instável, ou seja, a freqüência de resistência diminui significativamente na ausência de pressão de seleção. Comparações de parâmetros biológicos entre as linhagens suscetível e resistente ao carbosulfam mostraram que há custo adaptativo associado à resistência. A linhagem resistente apresentou uma menor fecundidade, menor período reprodutivo e menor longevidade do que a linhagem suscetível. Por fim, trabalhos de avaliação da estratégia de mistura de inseticidas evidenciaram que a mistura de carbosulfam com tiametoxam ou endosulfam não é vantajoso no manejo da resistência de A. gossypii ao carbosulfam. / The objective of this research was to collect basic information for building an insecticide resistance management program of Aphis gossypii Glover, 1877 in cotton crop. Baseline susceptibility data of A. gossypii to carbosulfan, thiamethoxam and endosulfan were characterized by the use of direct contact bioassay. Then, a susceptibility monitoring to these insecticides was conducted in populations of A. gossypii collected from Acreúna-GO, Ituverava-SP, Rondonópolis-MT and Unai-MG during 2001/2002 to 2003/2004 cotton growing seasons. The aphid collection was performed at the beginning, middle and end of cotton growing season. No significant differences in susceptibility to thiamethoxam and endosulfan were observed among A. gossypii populations. On the other hand, there was a significant decrease in the susceptibility to carbosulfan throughout the cotton growing season. However, a partial reset to the susceptibility to carbosulfan was observed at the beginning of the following cotton season. The resistance ratio of A. gossypii to carbosulfan was 5.7-fold. No cross-resistance between carbosulfan and the insecticides thiametoxam was observed. Studies on dynamics of A. gossypii resistance to carbosulfan conducted under laboratory conditions revealed that the resistance is unstable; that is, the frequency of resistance declines significantly in the absence of selection pressure. Life-history comparisons between carbosulfan-susceptible and resistant strains showed that there is some fitness cost associated to resistance. The resistant strain showed a lower fecundity, lower reproductive period and lower longevity than the susceptible strain. And finally, studies on evaluation of the strategy by mixing insecticides showed that the mixture of carbosulfan with thiamethoxam or endosulfan was not advantageous in the management of carbosulfan resistance in A. gossypii.

O fipronil, um inseticida e acaricida de amplo espectro de ação, atua como bloqueador dos canais de cloreto acoplados aos receptores GABA (GABA-Cls) e aos receptores glutamatérgicos (GluCls), estes últimos são alvo inseto-específico não presente nos vertebrados. O fipronil é utilizado na agricultura, medicina veterinária e saúde publica no combate a vetores de doenças. Comercialmente conhecido pelas marcas Frontline® (uso veterinário) e Regent 800 WG® (uso agrícola), esse inseticida, além de atuar sobre sistema nervoso central, atua, ainda, em organismos não-alvo como desregulador endócrino, podendo causar prejuízos nos sistemas reprodutor, nervoso e imunológico, por gerações. Assim, o presente estudo buscou investigar os efeitos da exposição pré-natal ao fipronil na geração F1 de ratas Wistar. Quarenta ratas virgens, Wistar, adultas (a partir de 90 dias de vida), foram acasaladas e separadas em quatro grupos: três experimentais, que receberam: 0,1, 1,0 e 10,0 mg/Kg de peso de fipronil; e o grupo controle, que recebeu água (1 mL/Kg de peso), via gavagem, do 6º ao 20º dia de gestação (n = 10 animais por grupo). O estudo foi então dividido em três partes: 1) estudos sobre a toxicidade materna e o comportamento maternal dessas ratas no 5º dia pós-nascimento (DPN5); 2) avaliação do desenvolvimento físico e reflexológico da geração F1, desde o dia de seu nascimento (DPN0) até o DPN35; e 3) avaliações comportamentais e de necropsia dos filhotes na idade adulta. O tratamento pré-natal com fipronil causou leve toxicidade materna na maior dose, apenas na segunda semana de gestação, caracterizada pela redução do consumo de ração (p<0,01), porém, essa redução não causou prejuízos no desempenho reprodutivo dessas ratas quando comparadas ao grupo controle. Além disso, o tratamento do fipronil mostrou leve melhoria do comportamento maternal, onde as ratas que receberam as doses de 1,0 e 10,0 mg/Kg apresentaram aumento do tempo de lambedura em seus filhotes (p<0,05), enquanto a maior dose agrupou toda a ninhada mais rapidamente (p<0,05) quando comparadas ao grupo controle. Na infância, não foram observadas alterações significantes nos parâmetros do desenvolvimento físicos da prole, porém os filhotes que estiveram expostos à menor dose durante o período gestacional, apresentaram retardo para o desenvolvimento do reflexo de geotaxia negativa, tanto machos (p<0,01), quanto fêmeas (p<0,05). A análise do desenvolvimento motor desses filhotes, constatou alterações nos perfis da atividade geral em campo aberto, observados por sete dias consecutivos, nos grupos de 0,1 e 1,0 mg/Kg, tanto na prole feminina, quanto na prole masculina. Na idade adulta, as proles de ratas tratadas com fipronil, tanto masculina, quanto feminina, apresentaram alterações comportamentais, indicando aumento de ansiedade e alterações no tempo de interação social. A prole masculina apresentou ainda, alteração na motivação sexual sem prejudicar a eficiência copulatória e a prole feminina apresentou alterações no ciclo estral, sem prejudicar o desempenho copulatório, ambos na menor dose de exposição pré-natal. Apesar das alterações comportamentais, a necropsia não mostrou alterações anatômicas nos órgãos desses animais. Assim, esses resultados sugerem que a exposição ao fipronil na gestação causou alterações na geração F1, sendo proposto o envolvimento do sistema endócrino regulado pelo sistema GABAérgico. / Fipronil, a broad spectrum action insecticide and acaricide, acts blocking GABA-regulated chloride channels and Glutamate-gated chloride channels, which is a specific insect target not present on vertebrates. It is used in crops, veterinarian medicine and public health against disease vectors. Commercially known as Frontline® (vet) and Regent 800 WG® (crops), it acts on the central nervous system and on non-target organisms as an endocrine disruptor causing impairment on reproductive, nervous and immunological system, through generations. Thus, this study investigated effects of prenatal exposition to fipronil in Wistar rats offspring. Forty adult Wistar rats (90 days old) were matted and separated into four groups: three experimental, that received 0.1, 1.0, and 10.0 mg/Kg (bw) of fipronil; and the control group, that received water (1 mL/Kg bw), through gavage from the 6th to 20th pregnancy day (n=10 animals per group). The study was divided into three sections: 1) maternal toxicity and maternal behavior evaluations; 2) physical end reflexological development of F1 generation, since day of birth until the 35th day of life; and 3) behavior and necropsy evaluation of the adult offspring. The fipronil prenatal treatment caused slight maternal toxicity in the highest dose on the second pregnancy week, by the reduction of food intake (p<0,01), although, these reduction did not caused reproductive performance impairment, compared to the control group. Furthermore, the fipronil treatment showed slight increase of maternal behavior in rats treated with 1.0 and 10.0 mg/Kg. Both groups showed increased pup-grooming time (p<0,05), and the highest dose, grouped theirs pups earlier than the control group (p<0,05). No alterations were observed in the offspring physical development, however, the lowest dose exposed offspring showed delay on geotaxis reflex development, in both male (p<0,01) and female offspring (p<0,05). The motor development assessment, of the 0.1 and 1.0 mg/Kg dose offspring, showed variation on motor activity profile on the open field arena, observed for seven consecutive days. In the adulthood, the treated offspring, male and female, showed behavior changes denoting anxiety increase and social behavior alterations. Furthermore, in the lower dose, male offspring showed decrease on sexual motivation without interfering on copulatory efficiency and the female offspring showed estrus cycle deregulation without interfering on lordosis performance. Despite behavior alterations, there were no anatomic alterations in these animals\' organs. Therefore, these results suggest that the prenatal exposition to fipronil caused alterations on F1 generation, being proposed involvement of the endocrine system controlled by GABAeregciystem.

O objetivo do presente trabalho foi o de coletar informações básicas para a implementação de um programa de manejo da resistência de Aphis gossypii Glover, 1877 a inseticidas na cultura do algodão. Para tanto, foram caracterizadas as linhas-básicas de suscetibilidade de A. gossypii aos inseticidas carbosulfam, tiametoxam e endosulfam por meio de um bioensaio de contato residual. Posteriormente, foi realizado um monitoramento da suscetibilidade a esses inseticidas em populações de A. gossypii que foram coletadas nas regiões de Acreúna-GO, Ituverava-SP, Rondonópolis-MT e Unai-MG nas safras de algodão de 2001/2002 a 2003/2004. Em cada safra, as coletas de pulgões foram realizadas no início, meio e final do ciclo da cultura. Não foram observadas diferenças significativas na suscetibilidade de populações de A. gossypii para tiametoxam e endosulfam. Por outro lado, houve redução significativa na suscetibilidade ao carbosulfam ao longo do ciclo da cultura. No entanto, foi observado um restabelecimento parcial da suscetibilidade ao carbosulfam no início da safra subseqüente, sugerindo assim a instabilidade da resistência. A razão de resistência de A. gossypii ao carbosulfam foi de 5,7 vezes. Não foi verificada a presença de resistência cruzada entre carbosulfam e os inseticidas tiametoxam e endosulfam. Estudos de dinâmica da resistência de A. gossypii ao carbosulfam realizados em condições de laboratório mostraram que a resistência é instável, ou seja, a freqüência de resistência diminui significativamente na ausência de pressão de seleção. Comparações de parâmetros biológicos entre as linhagens suscetível e resistente ao carbosulfam mostraram que há custo adaptativo associado à resistência. A linhagem resistente apresentou uma menor fecundidade, menor período reprodutivo e menor longevidade do que a linhagem suscetível. Por fim, trabalhos de avaliação da estratégia de mistura de inseticidas evidenciaram que a mistura de carbosulfam com tiametoxam ou endosulfam não é vantajoso no manejo da resistência de A. gossypii ao carbosulfam. / The objective of this research was to collect basic information for building an insecticide resistance management program of Aphis gossypii Glover, 1877 in cotton crop. Baseline susceptibility data of A. gossypii to carbosulfan, thiamethoxam and endosulfan were characterized by the use of direct contact bioassay. Then, a susceptibility monitoring to these insecticides was conducted in populations of A. gossypii collected from Acreúna-GO, Ituverava-SP, Rondonópolis-MT and Unai-MG during 2001/2002 to 2003/2004 cotton growing seasons. The aphid collection was performed at the beginning, middle and end of cotton growing season. No significant differences in susceptibility to thiamethoxam and endosulfan were observed among A. gossypii populations. On the other hand, there was a significant decrease in the susceptibility to carbosulfan throughout the cotton growing season. However, a partial reset to the susceptibility to carbosulfan was observed at the beginning of the following cotton season. The resistance ratio of A. gossypii to carbosulfan was 5.7-fold. No cross-resistance between carbosulfan and the insecticides thiametoxam was observed. Studies on dynamics of A. gossypii resistance to carbosulfan conducted under laboratory conditions revealed that the resistance is unstable; that is, the frequency of resistance declines significantly in the absence of selection pressure. Life-history comparisons between carbosulfan-susceptible and resistant strains showed that there is some fitness cost associated to resistance. The resistant strain showed a lower fecundity, lower reproductive period and lower longevity than the susceptible strain. And finally, studies on evaluation of the strategy by mixing insecticides showed that the mixture of carbosulfan with thiamethoxam or endosulfan was not advantageous in the management of carbosulfan resistance in A. gossypii.

Les micro-organismes entomopathogènes sont les ennemis naturels des insectes. Ils infectent leurs hôtes en pénétrant dans leurs corps et/ou en excrétant des composés insecticides. En parallèle, il a été démontré que la plupart des insectes hébergent de multiples micro-organismes symbiotiques qui jouent un rôle dans la nutrition et la défense de leurs hôtes. En conséquence, au cours du processus de colonisation, les micro-organismes entomopathogènes interfèrent avec ces micro-organismes bénéfiques. Ainsi, les interactions entre les insectes et les micro-organismes pathogènes peuvent induire la production d'insecticides et/ou de métabolites antimicrobiens. A partir d'insectes vivants infectés par des champignons entomopathogènes nous avons isolé 57 micro-organismes. Les extraits à l'acétate d'éthyle de ces micro-organismes ont été évalués pour leurs activités antimicrobiennes et insecticides sur quatre micro-organismes pathogènes pour l'Homme et sur les larves du moustique Aedes aegypti. Le criblage biologique a mis en évidence l'activité de plusieurs souches dont 6 ont été sélectionnées pour une étude chimique plus approfondie : deux champignons du genre Mucor, Isaria farinosa, Pestalotiopsis theae et les bactéries des genres Pantoea et Asaia. L'étude de ces extraits a permis l'isolement de 41 composés dont 10 sont nouveaux, parmis lesquels on retrouve des dérivés tétrahydrofuraniques, des dérivés d'acides tétramiques ou encore une macrolactone au squelette original. Des activités insecticides mais aussi antimicrobiennes ont été trouvées pour ces composés. La capacité métabolique de deux souches a également été explorée par une approche OSMAC couplée à des analyses métabolomiques par UHPLC-HRMS2. Si la recherche de composés insecticides et antimicrobiens représente un défi mondial pour la santé publique face au phénomène croissant de résistance aux antibiotiques et de toxicité des insecticides, ce travail montre que l'étude des interactions spécifiques entre les micro-organismes entomopathogènes et leurs insectes cibles peut conduire à la découverte de nouveaux composés prometteurs, d'intérêt pharmaceutique. / Entomopathogenic microorganisms are natural enemies of insects. They infect their hosts by penetrating the body and producing insecticidal compounds. However, it has also been shown that most insects host multiple symbiotic microbes which perform many important functions like nutrition and defense. During the process of colonization, entomopathogenic microorganisms interact with these beneficial microbial species. Thus, we expect that interactions between insects and insect pathogenic microorganisms should trigger the production of insecticides and/or antimicrobial metabolites.In this project, 57 microorganisms were isolated from the cuticles of live, entomopathogen infected insects . Ethyl acetate extracts of each strain were evaluated for their antimicrobial and insecticidal activities on four human pathogenic microorganisms and Aedes agypti mosquito larvae. The screening highlighted several bioactive strains, and 6 were selected for further chemical investigations. Among the selected ones were two fungal strains of the Mucor genus, Pestalotiopsis theae and Isaria farinosa and bacterial strains of the Pantoea sp. and an Asaia sp genera. The chemical study allowed us to isolate 41 compounds, of which 10 were new: tetrahydrofuran and tetramic acids derivatives, or a macrolactone with an original skeleton among others. Some of those presented insecticidal and antimicrobial activities. The biosynthetic potential of two strains was also investigated by an OSMAC approach coupled to metabolomics analyses by UHPLC-HRMS2. The search for insecticidal and antimicrobial molecules represents a global challenge for public health, to face the increasing phenomenon of antibiotic resistance but also insecticide toxicity. This work demonstrated that studying specific interactions between entomopathogenic microorganisms and their target insects may lead to the discovery of new promising compounds of pharmaceutical interest.

Bibliography: leaves 120-145. Reports Bt crystal protein toxicity to a phthirapteran species. Although Bt strain WB3516 may produce other unidentified toxins effective against B. ovis, the results provide strong evidence that the [delta]-endotoxin crystal proteins of strain WB3516 significantly contribute to the lousicidal toxicity of this strain.

Les principaux enjeux de la gestion des moustiques en France sont la prévention des risques vectoriels et le contrôle de la nuisance. A travers une étude historique sur la transmission du paludisme dans les vallées alpines, nous avons démontré que les aménagements hydrauliques devaient être considérés comme des facteurs à risque pour le développement de maladies vectorielles. L'estimation de la nuisance perçue permettrait d'adapter le contrôle des moustiques aux attentes de la population. L'expérience de deux enquêtes sociologiques a conduit à poser les bases d'un observatoire de la nuisance, qui emploierait conjointement et régulièrement les outils sociologiques et les échantillonnages sur le terrain, pour une démoustication raisonnée. Les moustiques du genre Coquillettidia représentent une nuisance mais sont inefficacement contrôlés, les larves vivant fixées aux racines des végétaux en profondeur, à l'abris des traitements. A l'issue d'une vaste étude de terrain, une liste d'indicateurs écologiques caractéristiques des gîtes larvaires à Coquillettidia a été dressée pour faciliter leur localisation. La nature des plantes aquatiques et la présence de kairomones (p-crésol, acides laurique et heptadécanoïque), le courant, la salinité, la turbidité, la pérennité de la pièce d'eau et son entretien, sont très probablement impliqués dans le choix des gîtes colonisés par ces moustiques. Des tests comportementaux couplés à des analyses chimiques en laboratoire ont permis de déterminer les mécanismes gouvernant la fixation des larves aux racines, dont dépend leur survie. Nous avons mis en évidence l'implication de substances allélochimiques généralistes (glycérol, uracile, thymine, uridine et thymidine) dans la reconnaissance des plantes hôtes par les larves. L'influence de l'intensité lumineuse, de la teneur en oxygène de l'eau, et de la morphologie des racines sur le comportement de fixation a été démontrée. Enfin une stratégie larvicide adaptée à l'écologie particulière de Coquillettidia a été mise au point. Nous avons prouvé que des plantes aquatiques pouvaient acheminer un insecticide systémique, le diméthoate, par voie phloémienne jusqu'aux racines, et libérer des composés toxiques au contact des larves. La fixation est fortement perturbée (- 85%), ce qui amplifie l'efficacité de cette stratégie.

Thesis (M.S.)--University of Montana, 2006. / Mode of access: Internet. Title from title screen. Description based on contents viewed Feb. 8, 2007. Includes bibliographical references (p. 63-72).

Le chlorpyrifos (CPF) est un insecticide organophosphoré qui est capable de produire des effets développementaux chez les rongeurs, tels que des perturbations de la mémoire spatiale, des altérations du niveau de lactivité, des modifications du niveau danxiété et de la dépression. Cependant, ces troubles comportementaux persistants ont été décrits à partir de différentes périodes dexposition courtes (4 jours), et à des doses juste sous le seuil de toxicité de ce produit, et ne peuvent donc pas renseigner directement sur le type de perturbations comportementales que pourrait produire une exposition à des doses plus basses de CPF administrées durant une plus grande partie du développement du cerveau. Pour répondre à cette question, nous avons exposé des souris CD1 au CPF (in utero et via le lait ; par lintermédiaire du gavage de la mère ; 5 mg/kg) durant la fin de la gestation et pendant les deux semaines postnatales. Ensuite, des tests comportementaux ont été réalisés avec les animaux adultes. Nous avons également étudié dans les mêmes conditions la phosalone (PHO), un insecticide organophosphoré dont la toxicité est similaire à celle du CPF, mais qui, contrairement à celui-ci, na pas encore donné lieu à des études de toxicité développementale. Nous avons déterminé que le CPF et la PHO sont capables de produire une altération de la mémoire spatiale à long terme (dans un labyrinthe de Lashley), avec un effet plus marqué chez les souris femelles que chez les mâles et pour la PHO. Par contre, seul le CPF altère la mémoire spatiale à court terme des souris mâles (test dalternance spontanée dans un labyrinthe en T). Le CPF et la PHO produisent également une augmentation du niveau danxiété (« elevated plus maze » et « light and dark box ») et donnent des signes de dépression (« forced swimming test ») chez les souris femelles uniquement. Par contre, le CPF et la PHO diminuent lactivité locomotrice spontanée (test dactométrie et vidéotracking) des souris mâles et non des souris femelles. Nous avons ensuite approfondi létude de lanxiété développementale produite dans les mêmes conditions expérimentales mais par différentes doses subtoxiques. Cela nous a permis de préciser quune dose de CPF plus faible, soit 1 mg/kg, produisait une augmentation du niveau danxiété plus importante que 5 mg/kg chez la souris femelle. Nous nous sommes intéressés ensuite à une exposition au CPF directement chez le jeune, afin de déterminer les troubles de lanxiété conséquents à quatre périodes néonatales différentes de 4 jours. Dans ce contexte, 1 mg/kg de CPF durant 4 jours dexposition par voie sous-cutanée suffirait à produire une augmentation du niveau danxiété chez les souris femelles, sauf pour une période dexposition située en fin de la seconde semaine après la naissance. La dose et la période dexposition jouent donc un rôle sur le type deffet produit. Ces expériences confirment également que plusieurs mécanismes daltération du développement sont mis en route par le CPF. Toujours dans le cadre de lanxiété développée chez les souris femelles adultes et liée à une exposition périnatale au CPF en doses subtoxiques (1 mg/kg, via gavage de la mère), lutilisation danxiolytiques spécifiques a révélé que les troubles de lanxiété seraient en relation avec une modification du fonctionnement des récepteurs sérotoninergique 5HT1A. Une des implications de ces résultats est que lexposition au CPF durant le développement du cerveau serait susceptible de produire des troubles comportementaux persistants apparaissant chez ladulte, à partir de doses bien inférieures à celles décrites jusquici dans la littérature. Il en va de même pour la PHO qui pourtant nétait pas encore renseignée comme représentant un danger pour le développement du cerveau des mammifères./Perinatal exposure to apparently subtoxic doses of the organophosphorus insecticide chlorpyrifos (CPF) elicits some form of developmental effects in adult rodents, like alteration of spatial memory, locomotor activity, anxiety and depression disorders. However, these persistent neurobehavioral effects are described in adults exposed during 4 days of perinatal treatment with doses close to the toxicity threshold, and do not indicate the consequences of a prolonged perinatal exposure to lower doses of CPF. Therefore, we orally treated CD1 pregnant and lactating mice with subtoxic doses of CPF (5 mg/kg, daily) during the 4 last days of gestation and the following 2 weeks after delivery and assessed the behaviour of adult offspring. We also studied the phosalone (PHO), another organophosphorus insecticide, which has the same toxicity as CPF but whose developmental toxicity in mammals has not been examined yet. We have found that CPF and PHO produced an alteration of long-term spatial memory (in the Lashley maze). This effect was more pronounced in female mice and in PHO-treated mice. On the other hand, only CPF (and not PHO) produced a decrease in short-term spatial memory of male mice (spontaneous alternation in a transparent T-maze). Both insecticides increased the anxiety level (in the elevated plus maze and in the light and dark box) and induced signs of depression disorder (forced swimming test) in female mice. We showed that CPF and PHO also decreased the level of locomotor activity only in male mice. Then we further studied the anxiety disorder developed by CPF using several different subtoxic doses of CPF. 1 mg/kg CPF daily treated female mice showed greater increase of anxiety level compared to 5 mg/kg. To determine the developmental effects of short exposure to low subtoxic CPF doses on anxiety levels, we directly (subcutaneously) administrated 1 mg/kg (daily) during 4 different postnatal periods of 4 days to CD1 offspring and evaluated their anxiety level once adults. Exposed female mice presented a general increase of anxiety level except when administration occurred during the end of the second postnatal week. The level and the time of the subtoxic exposure to CPF would influence anxiety. We concluded that CPF induced several mechanisms of developmental toxicity. We used specific anxiolytic drugs to show that 5HT1A serotoninergic receptors are one of the mechanisms altered by a long perinatal period of subtoxic CPF exposure that produces an increase of anxiety level in adult female mice. These results imply that exposure to CPF during brain development may represent a risk to produce persistent behavioural troubles, even at doses lower than previously described in the literature. Exposure to PHO for which no developmental effect has been described in mammals, may produce similar behavioural troubles.