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Infecção experimental em carcarás (Caracara plancus, Miller, J. F., 1777) com Toxoplasma gondii (amostra ME49)Vitaliano, Sérgio Netto [UNESP] 20 July 2007 (has links) (PDF)
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vitaliano_sn_me_jabo.pdf: 2132952 bytes, checksum: f71337d8a4f675ed29371324f60f293f (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente trabalho objetivou estudar a susceptibilidade do carcará (Caracara plancus) frente à infecção experimental pela amostra ME49 de Toxoplasma gondii pela observação da sintomatologia clínica, análise dos parâmetros hematológicos, estudo da cinética de anticorpos IgG anti-T. gondii, e constatação da presença do parasito nos diversos tecidos utilizando a imunoistoquímica, imunofluorescência direta em tecidos, bioensaio em camundongos e PCR. Sete carcarás soronegativos para anticorpos anti-T. gondii foram separados em dois grupos: G1 (grupo infectado - 5 aves) e G2 (grupo controle - 2 aves). As aves do grupo G1 foram alimentadas durante três dias consecutivos com roedores Calomys callosus previamente infectados com T. gondii e as aves do grupo G2 foram alimentadas com roedores não infectados. As aves infectadas não apresentaram sintomas clínicos de toxoplasmose, tampouco alterações nos parâmetros hematológicos. Todas as aves infectadas soroconverteram. A soroconversão das aves experimentalmente infectadas ocorreu a partir do sétimo dia pós-infecção, os picos iniciais na produção de anticorpos IgG anti-T. gondii ocorreram entre 15 e 30 dias pós-infecção sendo que em seguida houve uma tendência de queda dos títulos de anticorpos. No momento da necropsia não foram encontradas lesões sugestivas da infecção por T. gondii. Não foi observado no exame histopatológico a presença do parasito nos diversos tecidos amostrados das aves infectadas, entretanto em uma das aves do grupo não infectado e sorologicamente negativa para anticorpos anti-T. gondii, foi encontrado um cisto tecidual na musculatura. Pelas técnicas de imunoistoquímica e imunofluorescência direta em tecidos o parasito foi encontrado em pequeno número em diversos tecidos, porém tanto nas aves do grupo infectado quanto nas aves do grupo controle. Utilizando o bioensaio em camundongos... / The present study aimed to evaluate the susceptibility of crested caracara (Caracara plancus) to experimental infection with ME49 strain of Toxoplasma gondii, through clinical symptoms, hematological parameter analysis, kinetics of specific IgG antibodies to T. gondii, and parasite detection by immunohistochemistry, direct immunofluorescence, bioassay, and PCR. Seven crested caracara, seronegative to T. gondii antibodies, were separated into two groups: G1 (infected group - 5 birds), and G2 (control group - 2 birds). G1 birds were fed during three successive days with Calomys callosus previously infected with T. gondii, and G2 birds were fed with non-infected rodents. The infected birds did not present clinical symptoms, nor significant changes in hematological parameters. All infected birds had antibody titers to T. gondii. IgG antibodies to T. gondii were first detected at 7 dpi, with production peaks between 15 and 30 dpi, which were followed by a sharp decrease in detectable antibodies. No gross lesions sugestive of T. gondii infection were observed. By histopatological examination, it was not possible to observe the presence of the parasite in the infected birds' organs, however, in one bird of the control group, a T. gondii tissue cyst was visualized in muscle. By immunohistochemistry and direct immunofluorescence, the parasite was found in small number in different organs, although in animals from both groups. The presence of T. gondii was confirmed in heart samples of two bioassayed birds, both from the infected group. In this study, the experimentally infected crested caracaras did not show clinical symptoms, alteration on hematological parameters and the parasite was found in small numbers in the organs of the birds, for these reasons the crested caracara were resistant to T. gondii infection.
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Expressão de receptor de andrógeno em carcinoma mamário triplo negativo e sua correlação com fatores prognósticosKneubil, Maximiliano Cassilha 07 December 2015 (has links)
Introdução: O câncer de mama é uma doença heterogênea e complexa. Carcinomas mamários triplo negativos (CMTN) são tumores com uma agressividade biológica intrínseca, resultando em um prognóstico desfavorável. O receptor de andrógeno (RA) é um dos marcadores mais estudados na atualidade em CMTN, estando associado com a gênese e desenvolvimento do câncer de mama. Objetivo: Correlacionar a expressão do RA em pacientes com CMTN com características clínicas e patológicas referentes à idade do paciente, Ki-67, grau histológico e infiltração intratumoral de linfócitos (IIL). Métodos: O estudo foi de delineamento transversal e retrospectivo, de todos os casos de CMTN registrados em uma instituição, entre janeiro de 2012 e maio de 2014. Os materiais histológicos dos tumores mamários foram submetidos ao estudo imunoistoquimico para RA, e foram correlacionados com as variáveis idade, grau histológico, IIL e Ki-67. A positividade para RA foi determinada com o anticorpo monoclonal RA 441. Quando o RA foi positivo, a expressão foi considerada fraca quando Escore-H≤150 e forte quando Escore-H>150. A análise da porcentagem de IIL foi realizada através de um corte do tumor emblocado em parafina e corado por hematoxilina e eosina (HE) e foi definida como a porcentagem de linfócitos em contato direto com células tumorais. Resultados: 34 CMTN foram analisados. A média da idade foi de 51,9 anos (variação 30-82 anos). Das 34 amostras, 23 casos (67,7%) foram RA-negativo e 11 casos (32,3%) foram RA-positivo. Dos casos positivos, a expressão foi considerada fraca em 6 casos e forte em 5 casos. A maioria dos pacientes (n=28, 82%) apresentaram tumores pouco diferenciados. A expressão média do Ki-67 foi 65% no grupo RA-negativo e 43,6% no grupo RA-positivo (p<0,05). Observou-se uma associação estatísticamente significante entre a variável idade e a expressão do RA (p<0,005), sendo a idade média de 70,8 anos no grupo RA fortemente positivo e 42,3 anos no grupo RA fracamente positivo. Não se observou associação estatística entre a expressão do RA e as variáveis grau histológico e IIL. A porcentagem média de IIL foi 38,6% no grupo RA-positivo e 39,1% no grupo RA-negativo (p=0,3). Conclusão: A expressão do RA em CMTN esteve associada a pacientes mais idosas e a tumores com menor expressão de Ki-67. A expressão do RA em pacientes com CMTN delinou 2 subgrupos com fenótipos distintos. No entanto, não houve associação entre expressão do RA com grau histológico e IIL. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2016-05-18T12:33:38Z
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Dissertacao Maximiliano Cassilha Kneubil.pdf: 1763051 bytes, checksum: 88341a89a73f5a6646d6652ecc0d5853 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-18T12:33:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Dissertacao Maximiliano Cassilha Kneubil.pdf: 1763051 bytes, checksum: 88341a89a73f5a6646d6652ecc0d5853 (MD5)
Previous issue date: 2016-05-18 / Background: Breast cancer is a heterogeneous and complex disease. Triple Negative Breast Cancer (TNBC) are characterized by intrinsic aggressive tumour biology resulting in poor prognosis. Androgen Receptor (AR) is one of newly emerging biomarker in TNBC and has been demonstrated to play an important role in the genesis and in the development of breast cancer. Objective: In the present study, we explored the correlation of AR expression with age, Ki-67, histological subtype, histological grade and value of Tumor-Infiltrating Lymphocytes (TIL) in TNBC. Methods: We identified consecutive invasive TNBC from a cancer registry in a single institution between January 2012 and May 2014. The biopsies were analyzed by immunohistochemistry for AR and were correlated with age, histological grade, TIL and Ki-67. AR positivity was determined with clone AR 441 antibody. When AR was positive, the expression was considered weak when H-score≤150 and strong when Hscore> 150. The analysis of percentage of TIL was performed on a single full-face HEstained tumor section and TIL were defined as the percentage of lymphocytes in direct contact with the tumor cells. Results: 34 TNBC have been analyzed to date. The mean age was 51.9 years (range 30- 82). Of the 34 TNBC samples, 23 cases (67.7%) were AR-negative and 11 cases (32.3%) were AR-positive. Of the positive cases, the expression was weak in 6 cases and strong in 5 cases. Most patients (n=28, 82%) presented poorly differentiated tumors and all patients presented invasive ductal carcinoma. The mean expression of Ki67 was 65% in AR-negative group and 43.6% in AR-positive group, respectively (p<0.05). Older age was associated with AR expression, the mean age in AR strong expression was 70.8 years (p<0.005) compared to 42.3 years in group with AR weak expression. The AR expressions was not associated with histological grade and TIL. The mean of TIL was 38.6% in the AR-positive group and 39.1% in the AR-negative group (p=0.3). Conclusion: The present analysis showed that AR expressiveness in TNBC was associated with older patients and tumors with lower expression of Ki67. The expressiveness of AR in patients with TNBC through IHC outlined 2 subgroups with distinctive phenotypes. However, the expression of RA in patients with TNBC was not associated with the percentage of TIL and histological grade.
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Influência da ovariectomia associada à dieta deficiente em cálcio na periodontite experimental /Forte, Lilibeth Ferraz de Brito Penna. January 2011 (has links)
Resumo: A deficiência de estrógeno e de cálcio na dieta são condições que potencialmente causam alterações no osso alveolar e como consequência podem agravar a doença periodontal. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência da deficiência estrogênica, associada ou não à dieta deficiente em cálcio, sobre a perda óssea, a atividade de osteoclastos e os marcadores teciduais de remodelação óssea, na doença periodontal induzida em ratas. Foram utilizadas 96 ratas, aos 90 dias de idade, das quais 64 foram submetidas à ovariectomia e 32 à falsa-ovariectomia (Sham). Das 64 ratas ovariectomizadas, 32 receberam dieta comercial padrão (OVZ) e as outras receberam dieta deficiente em cálcio (OVZ'). Em todas as ratas, 60 dias após a cirurgia, foi induzida doença periodontal por meio da colocação de ligadura ao redor do primeiro molar inferior esquerdo. Com 3, 7, 14 e 30 dias após a inserção das ligaduras, efetuou-se a eutanásia. As hemi-mandíbulas esquerdas foram desmineralizadas e processadas para a obtenção de cortes microscópicos. Os cortes corados por H.E. foram analisados qualitativamente e quantitativamente por histomorfometria, utilizando-se planimetria por contagem de pontos, com o auxilio do programa Image J. Foi realizada reação enzimoistoquímica para marcação da fosfatase ácida tartarato resistente (TRAP) e reação imunoistoquímica para marcação do receptor ativador de NF-kappa B (RANK), de seu ligante (RANKL) e de osteoprotegerina (OPG). Os dados obtidos foram analisados estatisticamente por meio do teste de Mann-Whitney. Os resultados mostraram que o grupo Sham apresentou maior quantidade de matriz óssea e menor quantidade de marcação de células TRAP+ comparado com o grupo OVZ. Entretanto, o grupo OVZ apresentou menor quantidade de matriz óssea e marcação similar de células TRAP+ comparado ao grupo OVZ'. Em relação aos marcadores... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Estrogen and dietary calcium deficiencies are conditions that potentially lead to alveolar bone alterations and might consequently worsen periodontal disease. The aims of the present study were to evaluate estrogen deficiency associated or not to dietary calcium deficiency over bone loss and to evaluate the activity of osteoclasts and bone remodeling tissue markers on induced periodontal disease in rats. Ninety six rats aging 90 days were used in the present study, being 64 submitted to ovariectomy and 32 to sham-ovariectomy (Sham). Thirty-two rats from the ovariectomized group received standard diet (OVZ), while the rest received calcium deficient diet (OVZ'). Periodontal disease was induced 60 days after the surgery in all rats by placing a ligature surrounding the first mandibular left molar. Euthanasia was performed 3, 7, 14 and 30 days after ligature placement. Left hemi-mandibles were demineralized and processed for obtaining the microscopic slices. HE stained slices were qualitatively and quantitatively analyzed by histomorphometry using a point-counting planimetry, and the Image J software. Tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) was marked by enzyme histochemistry, while factor NF-Kappa B receptor activator (RANK), its ligand (RANKL) and osteoprotegerin (OPG) were marked by immunohistochemistry. Obtained data were submitted to statistical analysis by Mann-Whitney test. The results revealed that Sham group presented greater bone matrix quantity and lower TRAP+ cell in comparison to OVZ group. However, OVZ group presented lower bone matrix quantity and similar TRAP+ cells as OVZ' group. Regarding bone remodeling markers, Sham group presented the greatest marking index for OPG and RANKL, being the RANK quantity similar to OVZ group. The OVZ' group presented higher marking indices for RANK and similar levels of OPG and RANKL in comparison to OVZ. It was concluded that... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Yasmin Rodarte Carvalho / Coorientador: Luana Marotta Reis de Vasconcellos / Banca: Jean Nunes dos Santos / Banca: Renata Falchete do Prado / Banca: Luiz Eduardo Blumer Rosa / Banca: Maria Aparecida Neves Jardini / Doutor
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Identificação dos genes diferencialmente expressos na cirrose secundária à esteatohepatite não alcoólica / Identification of differentially expressed genes in NASH-related cirrhosisMarcia Saldanha Kubrusly 16 February 2009 (has links)
A doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) compreende um amplo espectro morfológico de doenças com potencial de progressão em pacientes sem história de etilismo. Pode evoluir para esteatohepatite não alcoólica (EHNA), fibrose, cirrose e carcinoma hepatocelular. Com intuito de investigar as diferenças genéticas entre tecido hepático normal e cirrose secundária a EHNA, utilizamos microarranjos de oligonucleotídeos (CodeLink Uniset Human Whole Genome Bioarray System GE Healthcare - Bio-Sciences, Chalfont St. Giles, UK) para caracterizar os perfis de expressão nas duas condições. Analisamos 3 amostras de cirrose secundária a EHNA e 3 amostras de fígado normal provenientes de doadores durante o transplante hepático. Para a análise dos dados utilizamos o programa GenesifterTM analysis (VizX Labs LLC, Seattle, WA, USA; http://www.genesifter.net) para identificar os genes diferencialmente expressos e também as vias biológicas moduladas de acordo com a ontologia gênica. Posteriormente, para avaliarmos a expressão imunohistoquímica utilizamos a técnica de microarranjo tecidual em amostras de fígado normal (n=12), cirrose secundária a EHNA (n=10) e cirroses de outras etiologias (n=37). Identificamos 244 genes significativamente alterados em pelo menos 2 vezes. Destes, 138 genes apresentavam-se com expressão aumentada e 106 genes com expressão diminuída na cirrose secundária a EHNA comparados ao fígado normal. Foram selecionadas 9 vias metabólicas significativamente desreguladas. Dentre estas vias identificadas na cirrose secundária a EHNA, selecionamos a via de sinalização do mTOR e seu efetor 4EBP-1 para a análise da expressão protéica. Houve aumento significativo na expressão de 4EBP-1 no fígado normal comparado às outras cirroses, assim como na cirrose secundária a EHNA versus outras cirroses. Quanto à forma fosforilada houve apenas diferença na expressão entre fígado normal e cirroses de outras etiologias. A expressão de mTOR mostrou aumento significativo entre cirroses de outras etiologias quando comparadas ao fígado normal e cirrose secundária a EHNA. A expressão de mTOR fosforilado foi maior na cirrose secundária a EHNA quando comparada às cirroses de outras etiologias e fígado normal. Estudos recentes têm sugerido o papel do mTOR na DHGNA e o presente estudo corrobora a participação desta via também na cirrose secundária a EHNA. A avaliação imunohistoquímica de 4EBP-1 e mTOR fosforilado pode ser útil clinicamente para o diagnóstico diferencial entre cirrose secundária a EHNA versus cirroses de outras etiologias, quando a etiologia é desconhecida / Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) encompasses the whole spectrum of steatosis, non-alcoholic steatohepatitis (NASH), and NASH-related cirrhosis (NASH/Cir). NASH/Cir can progress to hepatocellular carcinoma and reoccur post transplantation. Although molecular advances have been made in this field, the patogenesis of NAFLD is not completely understood. In an effort to investigate genetic differences between normal liver and NASH/Cir, first we used cDNA microarray (CodeLink Uniset Human Whole Genome Bioarray System GE Healthcare - Bio-Sciences, Chalfont St. Giles, UK) in normal liver from donor liver wedge biopsies taken at transplantation (n=3) and confirmed NASH/Cir tissues (n=3) and GenesifterTM analysis (VizX Labs LLC, Seattle, WA, USA; http://www.genesifter.net) to identify differentially expressed genes and biological pathways according to gene ontology (GO). Second, tissue microarray was used to determine immunohistochemical expression in normal liver samples (n=12), NASH/Cir (n=10) and in cirrhosis of other etiologies (n=37). Analysis of microarray data resulted in 244 genes changed in at least 2-fold with statistically significant ratio: 138 and 106 genes were, respectively, up and downregulated in NASH/Cir in comparison to normal liver. GO analysis by GeneSifterTM software identified nine statistically significant pathways containing differentially expressed genes. Among the 9 pathways identified as significantly modulated in NASH/Cir, we selected mTOR pathway and its downstream effector for immunohistochemical analysis. There was a significant increase in the expression of 4EBP-1 in normal liver compared to the other cirrhosis, as well as to NASH/Cir versus other cirrhosis. The phosphorylated 4EBP-1 showed only difference in expression between normal liver and cirrhosis of other etiologies. The expression of mTOR showed a significant increase in other cirrhosis when compared with normal liver and NASH/Cir. The expression of phosphorylated mTOR was higher in NASH/Cir when compared to other cirrhosis and normal liver. Recent findings have suggested a role for the cellular nutrient sensor mTOR in NAFLD and the present study corroborates the participation of this pathway in NASH/Cir. 4EBP-1 and phospho-mTOR evaluation might be of clinical utility as differential diagnostic of NASH/Cir from other cirrhosis, without knowing etiology
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Expressão imunohistoquímica do Chk2 e associação com características clínico-patológicas e desfecho em pacientes com câncer de cólon metastático / Immunohistochemistry expression of Chk2 and its relation with clinical-pathological features and patients outcome in metastatic colon cancerFabianna Pansani 30 January 2015 (has links)
INTRODUÇAO: O câncer de cólon é a terceira neoplasia mais prevalente no país, com aumento progressivo da incidência associada ao envelhecimento populacional. Os avanços nos tratamentos local e sistêmico do câncer de cólon metastático tem aumentado significativamente o tempo de sobrevida global. Entretanto, ainda não existem biomarcadores consolidados na literatura, capazes de predizer resposta a estes tratamentos ou o prognóstico. No processo da carcinogênese, uma das importantes vias que se encontra alterada é a via de reparo do DNA. A Chk2 é uma proteína quinase com atividade no reparo celular atuando de forma supressora no processo da carcinogênese, sendo que alterações em sua expressão e/ou função têm sido associadas à progressão tumoral em outras neoplasias como no câncer de mama, pulmão, vulva, bexiga, cólon, ovário, osteossarcoma e linfomas. OBJETIVO: Avaliar a expressão imunohistoquímica do Chk2 no câncer de cólon metastático e correlacionar sua expressão com características clínico-patológicas e sobrevida. PACIENTES E MÉTODOS: Foram incluídos 58 pacientes com diagnóstico confirmado de câncer de cólon metastático, tratados em primeira linha com quimioterapia baseada em fluorouracila e oxaliplatina. O tempo mínimo de seguimento foram de 2 anos pós-diagnóstico. Para análise da expressão do Chk2 foram utilizadas as técnicas de tissue microarray e imunohistoquímica. Estes resultados foram correlacionados com características clínicas, patológicas e de sobrevida. Para análise estatística, foi utilizado o programa SPSS17 e o valor de p<0,05 foi considerado estatisticamente significativo. RESULTADOS: A expressão de Chk2 foi positiva em 69% dos pacientes. Houve associação entre a expressão de Chk2 e o status linfonodal (p = 0,012) e entre a sobrevivência (p=0,034). A expressão negativa de Chk2 aumentaram as chances de envolvimento linfonodal (OR:10,2, p=0,03). O tempo de sobrevida global de pacientes Chk2 negativo foi maior (72 versus 59 meses, p=0,155), o mesmo foi observado com o tempo sobrevida livre de progressão (19 versus 13 meses, p=0,293). As curvas de sobrevida foram diferentes de acordo com a expressão do Chk2 em pacientes com ou sem envolvimento linfonodal, sendo menor nos pacientes com Chk2 positivo, p=0,028. Houveram mais óbitos em pacientes com Chk2 positivo. Análise multivariada identificou o performance status segundo a escala de ECOG (p=0,001 ); metástase sincrônica (p=0,037); diferenciação das células tumorais (p=0,029) e expressão de Chk2 (p=0,020) como fatores independentes para sobrevida global. CONCLUSÃO: A expressão positiva do Chk2 no adenocarcinoma de cólon metastático foi indicativa de maior agressividade e disseminação tumoral, impactando de forma negativa na sobrevida e desfecho dos pacientes. / INTRODUCTION: The DNA damage checkpoint pathway has been of interest to the field of cancer biology, since checkpoint defects result in the accumulation of altered genetic information, a central feature of carcinogenesis. Little is known about the role of Chk2 in colorectal cancer tumorigenesis. OBJECTIVE: The purpose of this study was to evaluate Chk2 expression in metastatic colon cancer and correlate this with clinicopathological features and patient survival. PATIENTS AND METHODS: Tissues were obtained from 58 patients with confirmed metastatic colon cancer diagnosis, treated with capecitabine and oxaliplatin chemotherapy as standard doses. Patients included had, at least, 2 years post diagnosis of clinical following. The tissue microarray immunohistochemistry was the technic to evaluate Chk2 expression. Statistics analysis used SPSS 17. A p-value <0,050 was considered to be statistically significant. Immunohistochemical expression of Chk2 and its relationship with clinical and pathological characteristics and survival data was reported. RESULTS: The expression of Chk2 was positive in 69%. There was association between expression of Chk2 and Iymph node status (p=0.012) and between survival (p=0.034). The negative expression of Chk2 enhanced the chances of linfonodal involvement (OR:10,2, p=0.03). The global survival time of Chk2 negative patients was higher (72 versus 59 months, p= 0.155); the same was observed with progression-free survival time (19 versus 13 months, p=0.293). The survival curves were different according to Chk2 expression in patients with or without Iymph node involvement, being lower in patients with Chk2 positive, p=0.028. There were more deaths in patients with Chk2 positive. Multivariate regression analysis identified performance status ECOG (p=0.001), synchronous metastasis (p=0.037), tumor cell differentiation (p=0.029) and expression of Chk2 (p=0.020) as independent factors to overall survival. CONCLUSION: This study demonstrated that the Chk2 positive expression in colon cancer indicates increased tumor spread and tumoral aggressiveness, impacting negatively on survival and outcome of patients.
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Immunoexpression lymphocyte markers natural killer (NK ) , CD16 + and CD56 + , biopsies in patients with skin hansenÃase / ImunoexpressÃo de marcadores de linfÃcitos natural killer (NK), CD16+ E CD56+, em biÃpsias cutÃneas de pacientes com hansenÃaseKelvia Miranda SÃ 22 September 2015 (has links)
Immune response to M leprae is determinant to leprosy evolution and NK cells are important constituents of the innate immune response and can contribute to the adaptive response activation. The aim of this study was to evaluate the immunoexpression of NK cells markers CD16+ and CD56+ in skin lesions of patients with leprosy, before any treatment. A total of 54 skin biopsies of patients with leprosy were evaluated by immunohistochemistry using rabbit anti-human CD16a (clone SP189) from Spring Bioscience and mouse anti-human CD56 (clone 123C3) from DakoÂ, together with Envision Flex kit from DakoÂ. Nineteen cases were from tuberculoid (TT) clinical form, 14 were borderline (BT, BB, BL) and 20 were lepromatous (LL), while one case was from indeterminate form (I). Among them 31 (57,4%) were from male gender and 30 (55,5%) presented positive baciloscopy. The samples were collected at the âCentro de Dermatologia Dona LibÃniaâ in Fortaleza, CearÃ, Brazil, and were analysed at the âLaboratÃrio de TÃcnicas Cito-histopatolÃgicas Especiais do Departamento de Patologia e Medicina Legal da Universidade Federal do CearÃâ. Positive controls for the CD16 and CD56 expression were lung tissue and carcinoid tumor, respectively. Fisher, Chi-square, Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests were used to statistical analysis and a p value of <0.05 was considered significant. Differences were observed when expression of CD16+ cells was compared between tuberculoid and borderlines forms (p=0.0329), as also among gender comparisons (p=0.0129). The CD16+ cells in the three different clinical forms groups were also statistically different achieving a p value of 0.0085, and showing a higher median of expression of CD16+ in the TT group. These data suggests that a protective immune response against M. leprae in leprosy requires a balance between NK cells subgroups (CD16+ and CD56+) and that the tuberculoid form presents higher levels of CD16+ cells expression when compared to borderlines and LL forms. In addition, the study suggests that there are possible hormonal or genetic influences on the distribution of NK cell function markers. / A resposta imunolÃgica ao Mycobacterium leprae à componente determinante na evoluÃÃo da doenÃa. As cÃlulas Natural Killer (NK) sÃo constituintes importantes da resposta imune inata, podendo participar da ativaÃÃo da resposta adaptativa. Este estudo objetivou avaliar a imunoexpressÃo de marcadores de cÃlulas NK, CD16+ e CD56+, em lesÃes cutÃneas de pacientes com hansenÃase antes do tratamento, por imunoistoquÃmica. Foram analisadas 54 biÃpsias cutÃneas de lesÃes de paciente com hansenÃase. Sendo 19 casos da forma clÃnica tuberculÃide (TT), 14 da forma borderline (BT, BB e BL) e 20 da forma lepromatosa (LL) e 1 caso da forma clÃnica indeterminada (I). Destes pacientes 31 (57,4%) eram do gÃnero masculino, 30 (55,5%) eram baciloscopia positiva. As amostras foram provenientes do Centro de Dermatologia Dona LibÃnia e analisadas no LaboratÃrio de TÃcnicas Cito-histopatolÃgicas Especiais do Departamento de Patologia e Medicina Legal da Universidade Federal do CearÃ. Para a imunistoquÃmica foram utilizados os anticorpos monoclonais primÃrios: rabbit anti-human CD16a (clone SP189) da Spring Bioscience e o mouse anti-human CD56 (clone 123C3) da DakoÂ, juntamente com o kit Envision Flex da DakoÂ. Os controles positivos para CD16 e CD56 foram obtidos a partir de secÃÃes de tecidos de pulmÃes e tumor carcinÃide, respectivamente. Os testes de Fisher, Qui-quadrado, Kruskal-Wallis e Mann-Whitney foram utilizados para anÃlise estatÃstica, sendo considerado significante quando p<0,05. A comparaÃÃo entre a imunoexpressÃo de CD16+ em linfÃcitos teciduais da forma tuberculÃide em relaÃÃo Ãs formas borderlines apresentou diferenÃas estatÃsticas significantes (p=0,0329), como tambÃm em relaÃÃo ao gÃnero (p=0,0129). AtravÃs do teste Kruskal-Wallis, comparando os trÃs grupos das formas clinicas da doenÃa em relaÃÃo ao nÃmero de cÃlulas imunomarcadas com CD16+, foi observado que a mediana do grupo tuberculÃide foi maior, conferindo p=0,0085. Pode-se concluir que o estudo sugere que uma resposta imunolÃgica protetora na hansenÃase requer um equilÃbrio entre subgrupos de cÃlulas NK CD16+ e CD56+, e que a forma tuberculoide cursa com predomÃnio dessas cÃlulas NK citotÃxicas quando comparadas Ãs formas borderline e lepromatosas. Em adiÃÃo, o estudo sugere que hà possÃveis influÃncias hormonais ou genÃticas na distribuiÃÃo destes marcadores de funÃÃo de cÃlulas NK.
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Avaliação do fenótipo e da proliferação celular das estruturas ductiformes no processo de envelhecimento de glândulas sublinguais humanas / Evaluation of the phenotype and the proliferation capacity of duct-like structures in the aging process of human sublingual glandsElen de Souza Tolentino 21 June 2013 (has links)
São várias as alterações microscópicas decorrentes do processo de envelhecimento das glândulas salivares, dentre elas o aumento no número de estruturas ductiformes. O objetivo deste trabalho é estudar o fenótipo e o índice de proliferação celular das mesmas. Sessenta glândulas sublinguais de cadáveres humanos foram divididas em dois grupos segundo a aixa etária dos indivíduos (0-30 anos e 61-90 anos). O fenótipo foi estimado pela imunomarcação da citoqueratina 19 (CK 19), da proteína S-100 e pela evidenciação dos polissacarídeos mucina e glicogênio. A avaliação do índice de proliferação de células epiteliais das estruturas ductiformes se deu por meio da imunomarcação do Ki-67. As técnicas histoquímicas consistiram no ácido periódico de Schiff (PAS) e Azul de Alcian pH 2,5. Em cada campo microscópico capturado foram contadas as estruturas ductiformes para estabelecer o perfil de marcação em percentual. A análise estatística foi realizada por meio dos testes t de Student, Mann-Whitney e correlação de Pearson (p < 0,05). Comparando os dois grupos, apenas a imunomarcação para CK 19 mostrou diferença estatisticamente significante (p = 0,033), sendo sua expressão mais forte no grupo de idosos. Não houve diferença significante entre os marcadores PAS e Azul de Alcian (p = 0,270). Nos dois grupos a imunomarcação para CK 19 foi mais forte do que para S-100 (p = 0,004; p < 0,001), sendo a correlação entre os dois imunomarcadores ausente (ρ = -0,163; p = 0,315). Não houve imunomarcação para o Ki-67 em nenhuma estrutura ductiforme. Concluiu-se que as estruturas ductiformes demonstram um perfil fenotípico ductal e não apresentam atividade proliferativa celular. Elas podem representar um processo regressivo com origem nos ácinos ou resultarem de metaplasia. / There are several age-related microscopic changes in the salivary glands, including the increase in the number of duct-like structures. The aim of this study is to evaluate the phenotype and the cell proliferation index of these structures. Sixty sublingual glands obtained from human cadavers were divided into two groups according to the individuals age (0-30 and 61-90 years old). The phenotype was estimated by the immunostaining for cytokeratin 19 (CK 19), S-100 protein and by the disclosure of the polysaccharides mucin and glycogen. The cell proliferation index was determined by Ki-67 immunostaining. The histochemical techniques consisted of periodic acid-Schiff (PAS) and Alcian Blue pH 2.5. Ineach captured microscopic field, the duct-like structures were counted to establish the staining profile in percentage. Statistical analysis was done by Students t-test, Mann-Whitney test and Pearsons correlation coefficient (p < 0.05). Comparing the two groups, only the immunostaining for CK 19 showed significant statistical difference (p = 0.033), with strongest expression in the elderly group. There was no significant difference between the markers PAS and Alcian Blue (p = 0.270). In both groups the immunostaining for CK 19 was stronger than for S-100 (p = 0.004; p < 0.001), but there was no correlation between the two immunomarkers (ρ = -0.163; p = 0.315). There was no immunostaining for Ki-67 in any ductlike structure. We concluded that the duct-like structures demonstrate a ductal phenotypic profile and do not present cell proliferation activity. They may represent a regressive process arising from acini or a result of a metaplasia.
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Contribuição da analise de textura do nucleo celular para o diagnostico diferencial de lesões foliculares da tireoide : comparação com marcadores imunoistoquimicos / Contribution of the cellular nucleus texture analyses for the differential diagnosis of follicular thyroid lesions: comparison with imunohistochemicalFerreira, Rita de Cassia 02 September 2007 (has links)
Orientadores: Patricia Sabino de Matos, Konradin Metze / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-10T07:31:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2007 / Resumo: O diagnóstico diferencial entre algumas lesões da tireóide é, muitas vezes, difícil de ser determinado, mesmo diante de diversas amostras de tecido. O propósito deste estudo foi o de investigar até que ponto a análise de textura da cromatina em cortes histológicos de rotina contribui para o diagnóstico diferencial entre lesões foliculares da glândula tireóide. Entraram no estudo cortes histológicos corados com hematoxilina-eosina de 12 nódulos adenomatosos hiperplásicos (NA), 18 adenomas foliculares (AF), 24 carcinomas foliculares mínimamente invasores (CFMI) e 22 variantes foliculares do carcinoma papilífero (VFCP). As amostras de tecido utilizadas foram analisadas morfologicamente por meio de estudo histológico e estudo imunoistoquímico pela expressão de diferentes proteínas ou marcadores. Os marcadores utilizados foram HBME-1, CK-19 e galectina-3. Em cada caso 100 núcleos foram aleatoriamente escolhidos, digitalizados e segmentados. A estrutura dos núcleos foi descrita por morfometria, densitometria e por variáveis derivadas da matriz de co-ocorrência. Sexo, idade do paciente e metástases foram informações pesquisadas. Os resultados da análise de imagem computadorizada foram comparados com aqueles obtidos por meio de estudo imunoistoquímico, na distinção das lesões foliculares benignas e malignas da tireóide. Os dados foram comparados por análise de variância (nível de significância p<0,05). As amostras sugerem que o HBME-1 foi um marcador mais sensível quanto à malignidade. Entretanto, o uso dos três marcadores, num painel, pode ser útil em casos específicos, como por exemplo, na diferenciação de lesões foliculares, com referência especial à variante folicular do carcinoma papilífero. Dados descritos como fatores prognósticos, nas lesões foliculares malignas, não se mostraram significantes para discriminar o carcinoma folicular da variante folicular do carcinoma papilífero. As variáveis de morfometria não apresentaram grande valor discriminante, exceto, pelo P5FF4 (quinto percentil do fator de forma) que estabeleceu diferenças significantes entre AF e VFCP e entre CFMI e VFCP. Variáveis densitométricas demonstraram diferenças significantes entre NA e AF, NA e CFMI, AF e VFCP, AF e CFMI e entre CFMI e VFCP. Variáveis derivadas da matriz de co-ocorrência demonstraram diferenças entre os subgrupos, mas somente o P5Energy (quinto percentil da variável ?energia?), demonstrou diferença entre AF e CFMI. Ainda a variável r2Mink (grau de aproximação da dimensão fractal de Minkowski) diferenciou lesões benignas de malignas (NA e CFMI, NA e VFCP, AF e CFMI, AF e VFCP). A análise de textura pôde auxiliar na discriminação entre lesões benignas e malignas da tireóide principalmente quando se tratava da discriminação entre NA ou AF e VFCP, na qual a análise histológica, baseada em características nucleares pode trazer grandes dificuldades. Por outro lado, o diagnóstico entre AF e CFMI é difícil e não se baseia em características nucleares, mas no achado de invasão capsular ou vascular. Entretanto, nestes casos, as variáveis 'energia' e r2Mink, contribuíram para o diagnóstico diferencial. Portanto, a análise de imagem computadorizada pode ser considerada como uma ferramenta que auxilia no diagnóstico diferencial de lesões foliculares da tireóide, somando-se à interpretação morfológica e imunoistoquímica / Abstract: The differential diagnosis between some thyroid lesions is often difficult to determine, even with permanent sections. The purpose of this study was to find out if chromatin texture analysis contributes to the differential diagnosis of thyroid follicular lesions. We selected slides stained with H-E (hematoxilin-eosin) of 12 hyperplastic adenomatous nodules (AN), 18 follicular adenomas (FA), 24 minimally invasive follicular carcinomas (MIFC) and 22 follicular variants of papillary carcinomas (FVPC). A total of 100 nuclei of each case were digitalized and segmented. The utility of a combination of immunostaining including galectin-3, HBME-1 and CK-19 in the routine differentiation of the histologies of thyroid malignancies was evaluated. The nuclei structure was described by morfometry, densitometry and by variables derived by co-occurrence matrix. Sex, age of the patient and metastasis were clinical and morphologic parameters searched in this study. These data, described as prognostic factors for follicular malignant tumors, were compared by variance analysis (significance value p<0,05) and did not differentiate significantly among the groups. The best marker, in terms of sensitivity and specificity, was HBME-1. The combination CK-19, HBME-1 and galectin-3, in a panel, may be useful in specific cases, for example, for differentiate folicullar lesions, with special reference for folicullar variant of papillary carcinoma. Morphometric variables did not show significant discriminant value, except, the P5FF4 (5th percentile of the form factor) which demonstrated significant differences between FA and FVPC and between MIFC and FVPC. Densitometric variables demonstrated significant differences between AN and FA, AN and MIFC, FA and FVPC, FA and MIFC and even between MIFC and FVPC. The variables derived from co-occurrence matrix demonstrated differences among the sub- groups, but only P5 Energy (fifth percent of energy variable) showed significant differences between FA and MIFC. Also, the variable r2Mink (Goodnesss of fit of the Minkowski - fractal dimension) was able to differentiate benign and malignant lesions such as: AN and MIFC, AN and FVPC, FA and MIFC, FA and FVPC. Texture analysis may help to differentiate benign and malignant follicular lesions of the thyroid, specially when one is trying to differentiate AN or FA and FVPC. In this situation the histological analysis based on nuclear characteristics may not be definitive; owing to the fact that all the nuclear criteria may not be always present in most cases. On the other hand, the differential diagnosis of FA and MIFC is difficult and it is not based on nuclear characteristics, but on the finding of capsular or vascular invasion. However, in these cases, the variables energy and r2Mink contributed to the differential diagnosis. Therefore, the computerized image analysis may be considered as a tool that helps the differential diagnosis of follicular thyroid lesions, added to the morphological and immunohistochemical analysis / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas
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Caracteristicas clinicopatologicas e imunohistoquimicas do carcinoma de celulas fusiformes de cabeça e pescoço / Clinicopathological and immunohistochemical features of spindle cell carcinoma of the head and neckRomañach, Mário José, 1983- 29 February 2008 (has links)
Orientador: Fabio Ramoa Pires / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-10T12:35:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2008 / Resumo: O carcinoma espinocelular (CEC) é a neoplasia maligna mais comum da boca, possuindo diversas variantes clinicopatológicas incomuns, incluindo o carcinoma de células fusiformes (CCF), que diferem quanto ao comportamento clínico, critérios diagnósticos e prognóstico. Os objetivos deste estudo foram analisar a expressão imunohistoquímica de marcadores epiteliais no CCF de cabeça e pescoço, avaliando sua importância diagnóstica, comparar os achados histopatológicos e imunohistoquímicos do CCF de cabeça e pescoço com os CECs convencionais da cavidade oral e definir um perfil sócio-demográfico e clinicopatológico do CCF oral. Para isso, foram analisados ao todo 20 casos de CECs: 10 casos de CCF, e 10 casos de CECs orais convencionais como controle, sendo 5 casos de CECs bem diferenciados e 5 casos de CECs pouco diferenciados. A metodologia incluiu avaliação de todos os casos em microscopia óptica em cortes corados em hematoxilina e eosina e reações imunohistoquímicas para anticorpos contra citoqueratinas, vimentina, desmina, actina músculoespecífica, actina de músculo liso, proteína S100, EMA, p53 e ki-67, usando a técnica da peroxidase. Os achados morfológicos dos CCFs estudados mostraram maior proximidade entre estes tumores e os CECs pouco diferenciados e a expressão imunohistoquímica das citoqueratinas AE1/AE3, 6, 8 e 14 e de EMA nos componentes carcinomatoso e fusocelular do CCF mostrou-se útil como auxiliar em seu diagnóstico final. Ainda, os CCFs apresentaram índices de expressão de p53 e de Ki-67 superiores àqueles encontrados nos CECs bem diferenciados. O CCF oral apresentou predileção por homens na 6ª década de vida, manifestando-se através de úlceras infiltrativas ou lesões polipóides ulceradas, usualmente dolorosas, localizadas preferencialmente no rebordo alveolar e lábios / Abstract: Squamous cell carcinoma (SCC) is the most common malignant oral tumor and several uncommon clinicopathological variants, including spindle cell carcinoma (SpCC), which differ on clinical behaviour, diagnostic criteria and prognosis, have been described. The aims of this study were to analyze the immunohistochemical expression of epithelial markers on head and neck SpCC, evaluating their diagnostic relevance, to compare the histopathological and immunohistochemical features of head and neck SpCC and conventional oral SCC, and to define a socio-demographic and clinicopathological profile of oral SpCC. Material included a total of 20 cases, including 10 cases of head and neck SpCC, and 10 cases of oral SCC used as controls (5 well-differentiated SCC and 5 poorly-differentiated SCC). Methods included evaluation of hematoxilin and eosinstained histological slides from all cases through optic microscopy and immunohistochemical reactions for antibodies against cytokeratins, vimentin, desmin, smooth-muscle actin, muscle-specific actin, S-100 protein, EMA, p53 and ki-67, using the peroxidase technique. Morphological features of SpCC showed similarities to the features from poorly differentiated SSC and immunohistochemical expression of the cytokeratins AE1/AE3, 6, 8 and 14, and EMA on both carcinomatous and spindle cell components of the tumor, proved to be useful as an auxiliary tool on final diagnosis. In addition, SpCC presented higher p53 and ki-67 expression indexes when compared to well-differentiated SCC. Oral SpCC showed predilection for males on their 6th decade of life, presenting clinically either as painful infiltrative ulcers or ulcerated exophytic polypoid masses, preferally located on the alveolar mucosa and lips / Mestrado / Estomatologia / Mestre em Estomatopatologia
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Correlação das caracteristicas clinicas, histopatologicas e expressão de acido graxo sintase e ErbB2, em carcinomas espinocelulares bucais de pacientes com recidiva local precoce / Correlation among clinical and pathological characterisitics and expressions of FAS and ErbB2 in early recurrent oral squamous cell carcinomaPinto, Lucielma Salmito Soares 20 February 2008 (has links)
Orientador: Marcio Ajudarte Lopes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-10T15:19:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2008 / Resumo: O carcinoma espinocelular (CEC) bucal recorre em cerca de 30% dos casos. O reconhecimento de fatores prognósticos confiáveis pode resultar na predição do comportamento tumoral e prevenção de falhas no tratamento. O objetivo deste estudo foi analisar a correlação entre as características clínicas, histopatológicas e imunohistoquímicas em casos de CEC bucal com recidiva local precoce. Desta forma, 69 casos de carcinoma bucal sem tratamento prévio para tumores de cabeça e pescoço foram selecionados, sendo que 23 apresentaram recidiva precoce e 46 sem recidiva. Informações clínicas foram obtidas dos prontuários e as características histopatológicas foram avaliadas de acordo com os sistemas de gradação de Anneroth et al. (1987) e Bryne et al. (1992). Reações imunohistoquímicas foram feitas para FAS e ErbB2. Nossos resultados mostraram uma predileção pelo gênero masculino (89,85%) com idade média de 55,5 anos. Apesar de não ser estatisticamente significante, observou-se um risco relativo de 2,62 e 2,89 para que usuários de fumo e o álcool desenvolvam recidiva local, respectivamente. Notou-se relação estatisticamente significante entre o tratamento apenas cirúrgico e o desenvolvimento de recidivas (p = 0,03). A soma dos escores de Anneroth et al. (1987) maior que 15 foi estatisticamente associada à recidiva (p = 0,03). Menor expressão de FAS e maior expressão de ErbB2 citoplasmático foram estatisticamente associadas à recidiva tumoral (p = 0,01). Estiveram associados à pior sobrevida: o uso de álcool (p = 0,0028), e piores escores obtidos nos parâmetros queratinização (p < 0,0001), padrão de invasão (p < 0,0001) e inflamação (p < 0,0001) segundo Anneroth et al. (1987). A maior expressão de FAS esteve também significativamente associada à maior sobrevida global dos pacientes (p = 0,0002). Apesar de não estatisticamente significante, FAS foi correlacionada com a queratinização (p = 0,08) e de forma significante estatisticamente, a queratinização relacionou-se com ErbB2 expresso em membrana (p = 0,0006). De acordo com os nossos resultados, sugerimos a utilização do sistema de Anneroth et al. (1987), bem como o estudo imunohistoquímico com os marcadores FAS e ErbB2 para melhor compreensão do comportamento dos CECs bucais / Abstract: Oral squamous cell carcinoma (SCC) recurs locally in about 30% of cases. The recognition of reliable factors may result in the tumor behavior prediction and prevent treatment failures. The purpose of this study was to evaluate the correlation among clinical, histopathological and immunohistochemical features in oral SCC with early local recurrence. Sixty-nine cases of oral SCC without previous treatment for head and neck tumors were selected, being: 23 cases with early local recurrence and 46 cases without recurrence. Clinical data were obtained from the medical records and the histopathological features were assessed according Anneroth¿s and Bryne¿s histological grading of malignancy. Immunohistochemical reactions for FAS and ErbB2 were performed. Our results showed a male predilection (89.85%), with a mean age of 55.5 years. Although there were no statistical differences, relative risks of 2.62 and 2.89 were observed for smokers and alcohol drinkers have local recurrence, respectively. Significant differences were observed between surgical treatment and local recurrence (p = 0.03). The sum of the Anneroth¿s histological grading degrees exceeding 15 was statistically associated to local recurrence (p = 0.03). Lower FAS and more cytoplasmic ErbB2 expression were statistically correlated to local recurrence (p = 0.01). An association between overall survival and alcohol use was observed (p = 0.0028). The parameters keratinization (p < 0.0001), mode of invasion (p < 0.0001) and lymphoplasmocytic infiltration (p < 0.0001) according Anneroth¿s histological grading were related to overall survival. More FAS expression was also associated with better overall patients survival (p = 0.0002). Although there was no statistical difference, FAS was related to keratinization (p = 0.08), similar but statistically, keratinization was associated with membrane ErbB2 expression (p = 0.0006). According our results, we suggest the use of Anneroth¿s histological grading system as well as the immunohistochemical markers FAS and ErbB2, for best comprehension of OSCC¿s behavior / Doutorado / Estomatologia / Doutor em Estomatopatologia
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