Made available in DSpace on 2016-08-12T18:48:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-13. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-12T18:50:52Z : No. of bitstreams: 1 000865096.pdf: 2377110 bytes, checksum: 95208d256035a87a59c076a999bbf491 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introdução: Durante o envelhecimento, a perda de massa muscular (sarcopenia) é inevitável e contribui para a elevada morbidade e mortalidade; assim, evitar a sarcopenia é importante para manutenção da saúde e qualidade de vida a longo prazo. Além disso, o treinamento físico tem sido demonstrado ser importante para o controle de massa muscular durante o envelhecimento através da ativação de várias vias incluindo, IGF1-AKT e PGC-1α. Além disso, foi demonstrado que LRP130, um componente do complexo do PGC-1α é importante para a transcrição dependente de vários genes mitocondriais in vivo. Portanto, nós hipotetizamos que o treinamento físico pode melhorar a recuperação muscular, possivelmente através do complexo PGC-1α/LRP130 por inibição do sistema ubiquitina-proteassoma após atrofia induzida por desuso em ratos idosos. Portanto, foi investigado os efeitos do processo de regeneração muscular após curto período de imobilização seguido de 3 ou 7 dias de recuperação utilizando treinamento aeróbio (AT) ou treinamento resistido (TR). Métodos: Após 7 dias de imobilização, os animais foram submetidos ao processo de recuperação muscular com exercício (AT ou RT) ou sem exercício (R) durante 3 ou 7 dias. No final do experimento, os animais foram sacrificados, e o músculo plantar (PL) foi removido para análises morfológicas (avaliação da atividade mATPase, para avaliar a área de secção transversal das fibras musculares (CSA), bem como a frequência dos tipos de fibras específicas), análises bioquímicas (isoformas da cadeia pesada de miosina, MyHC), expressão gênica de 44 marcadores moleculares de massa muscular (RT-qPCR). Para entender melhor a relevância biológica das interações de mRNA, foi realizada uma análise de rede que estão relacionados com o nosso conjunto de genes diferencialmente expressos (plugin GeneMANIA Cytoscape). Os genes diferencialmente expressos foram submetidos à análise... / Background: During aging, loss of muscle mass (sarcopenia) is inevitable and contributes to increased morbidity and mortality; thus, the maintenance of skeletal muscle mass is critical for long-term health and quality of life. In addition, physical training has been shown to be important to the control of muscle mass during aging through the activation of several pathways including, IGF1-AKT and PGC-1α. Also, it was demonstrated that LRP130, a component of the PGC-1α complex is important for the PGC-1α- dependent transcription of several mitochondrial genes in vivo. Therefore, we hypothesized that the physical training could improve the muscle recovery possibly through of the LRP130/PGC-1α complex by inhibiting the ubiquitin-proteasome system after disuse-induced atrophy in aged rats. We therefore investigated the effects on muscle recovery after short-term immobilization followed by 3 or 7 days of retraining with aerobic training (AT) or resistance training (RT). Methods: After 7 days of immobilization, the animals underwent the re-growth process with exercise (AT or RT) or without exercise (R) for 3 or 7 days. At the end of the experiment, the animals were sacrificed, and the plantaris (PL) muscle was removed for morphological analyses (assessment of mATPase activity, to assess the total muscle fiber cross sectional area (CSA), and the frequency of specific fiber types), biochemical analyses (Myosin Heavy Chain, MyHC), gene expression of 44 molecular markers of muscle mass (RT-qPCR). To further understand the biological relevance of the mRNA interactions, we performed a search for additional genes that are related to our differentially expressed gene set (GeneMANIA Cytoscape plugin). Differentially expressed genes were submitted to Western blotting analysis. Results: At 7 days after an atrophic stimulus, only PL muscles from animals subjected to AT had recovered their normal CSA patterns. The frequency of fiber types and ... / FAPESP: 11/14484-4

Submitted by EDUARDO GUIMARÃES VIEIRA null (eduardo_vieira5007@yahoo.com.br) on 2017-01-04T15:49:08Z No. of bitstreams: 1 Tese de Doutorado.pdf: 7273757 bytes, checksum: 1d9bc093a91b9165b47ab712a9003b1f (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2017-01-06T13:42:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 vieira_eg_dr_ilha.pdf: 7273757 bytes, checksum: 1d9bc093a91b9165b47ab712a9003b1f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-06T13:42:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 vieira_eg_dr_ilha.pdf: 7273757 bytes, checksum: 1d9bc093a91b9165b47ab712a9003b1f (MD5) Previous issue date: 2016-11-30 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente trabalho descreve a síntese e caracterização de dois novos materiais nanoestruturados a base oligômeros poliédricos de silsesquioxanos (POSS). O primeiro tipo de material precursor foi sintetizado a partir da reação do Octakis(3-cloropropil)octasilsesquioxano (POSS-Cl) com o ligante 3-amino-1,2,4-triazol-5-ácido carboxílico (ATZAc), resultando no POSS-ATZAc. O segundo tipo envolveu a preparação de um dendrímero de segunda geração por meio da organofuncionalização do núcleo POSS com grupos orgânicos de terminação amino. Esse segundo tipo de material foi denominado de POSS-DG2.0. Ambos os materiais precursores foram utilizados na imobilização dos complexos organometálicos [W(CO)3Br2(NCCH3)2] (W), [Mo(CO)3Br2(NCCH3)2] (Mo-I) e [Mo(η3-C3H5)Br(CO)2(NCCH3)2] (Mo-II) nas respectivas esferas de coordenação de suas superfícies, dando origem a seis novos catalisadores heterogêneos. As etapas de preparação dos catalisadores heterogêneos foram caracterizados por Análise Elementar (C, N, H e Mo ou W), Espectroscopia na Região do Infravermelho (FTIR), Ressonância Magnética Nuclear de 29Si e 13C no Estado Sólido (RMN), Difração de Raios-X (DRX), Análise Termogravimétrica (TGA), Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e Espectroscopia de Energia Dispersiva de Raios-X (EDX). Nos estudos de imobilização foi observado que o sorção de cada complexo foi dependente do tempo, concentração e temperatura. De modo geral, os modelos de Langmuir e pseudo-segunda ordem foram os mais adequados para descrever os dados de concentração e cinética. Os parâmetros termodinâmicos ΔG, ΔH e ΔS foram avaliados e os resultados mostraram que a imobilização dos complexos sobre cada suporte foi um processo espontâneo, endotérmico e favorável, respectivamente. Após os estudos de imobilização e com o propósito de aplicação em catálise, os novos catalisadores POSS-ATZAc-W, POSS-ATZAc-Mo-I, POSS-ATZAc-Mo-II, POSS-DG2.0-W, POSS-DG2.0-Mo-I e POSS-DG2.0-Mo-II foram testados na epoxidação catalítica das olefinas 1-octeno, cicloocteno, (S)-limoneno, cis-3-hexen-1-ol, trans-3-hexen-1-ol e estireno, usando terc-butil hidroperóxido (TBHP) como oxidante e comparados com seus respectivos catalisadores homogêneos e gerações anteriores. Os catalisadores dendríticos foram os que apresentaram melhores atividades catalíticas. Os catalisadores heterogêneos foram submetidos a testes de lixiviação e todos permanecem com alta atividade catalítica mesmo após cinco ciclos. / This work describes the synthesis and characterization of two new nanostructured materials based on polyhedral oligomeric silsesquioxane (POSS). The first type of precursor material was synthesized from the reaction of Octakis(3-Chloropropyl) octasilsesquioxane (POSS-Cl) with 3-amino-1,2,4-triazole-5-carboxylic acid ligand (ATZAc), resulting in the POSS-ATZAc. The second type involves the preparation of a dendrimer of the second generation through organofunctionalization of the POSS core with organic groups of amino termination. This second type of material was called POSS-DG2.0. Both precursor materials were used in the immobilization of the organometallic complexes [W(CO)3Br2(NCCH3)2] (W), [Mo(CO)3Br2(NCCH3)2] (Mo-I) and [Mo(η3-C3H5)Br(CO)2(NCCH3)2] (Mo-II) in their respective coordination spheres of its surfaces, resulting in six new heterogeneous catalysts. The steps of preparation of the heterogeneous catalysts were characterized by Elemental Analysis (C, N, H and Mo or W), Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR), 13C and 29Si Nuclear Magnetic Resonance in the Solid State (NMR), X-ray diffraction (XRD), Thermogravimetric Analysis (TGA), Scanning electron microscopy (SEM), and Energy Dispersive X-ray spectroscopy (EDX). In the immobilization studies we observed that the immobilization of each complex was dependent of the time, concentration and temperature. The Langmuir and pseudo-second order were most appropriate to describe the concentration and kinetics data. The thermodynamic parameters ΔG, ΔH and ΔS were evaluated and the results showed that the immobilization of the complexes on each support was a spontaneous, favorable and endothermic process, respectively. After the studies of immobilization and with the purpose of application in catalysis, the new catalysts POSS-ATZAc-W, POSS-ATZAc-Mo-I, POSS-ATZAc-Mo-II, the POSS-DG2.0-W, POSS-DG2.0-Mo-I and POSS-DG2.0-Mo-II were tested in the catalytic epoxidation of the olefins 1-octene, cyclooctene, (S)-limonene, cis-3-hexen-1-ol, trans-3-hexen-1-ol and styrene, using tert-butyl hydroperoxide (TBHP) as oxidant and compared with their respective homogeneous catalysts and previous generations. The dendritic catalysts showed the best catalytic activity. Heterogeneous catalysts were subjected to leaching tests and all remain with a high catalytic activity even after being used for at least five cycles. / FAPESP: 2014/05566-5

Submitted by MICHEL DE CAMPOS VETTORATO null (m_vettorato@hotmail.com) on 2017-01-18T14:21:09Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO DE MESTRADO - MICHEL 26-10-2016.pdf: 6250109 bytes, checksum: a008eb6016c76d9869444d552c652156 (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-01-20T17:41:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 vettorato_mc_me_bot.pdf: 6250109 bytes, checksum: a008eb6016c76d9869444d552c652156 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-20T17:41:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 vettorato_mc_me_bot.pdf: 6250109 bytes, checksum: a008eb6016c76d9869444d552c652156 (MD5) Previous issue date: 2016-12-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / No Brasil, o uso da radioterapia na medicina veterinária ainda é incipiente, com apenas estudos em nível de pesquisa científica e poucos grupos de especialistas dedicados a esse tipo de trabalho. Centros de radioterapia veterinária já existem em outros países como Estados Unidos, França, Canadá, Inglaterra, e até mesmo na Argentina. Os resultados apresentados nestas clínicas são bastante incentivadores e promissores. Muitos dos estudos desenvolvidos na radioterapia veterinária são derivados e facilitadores da implementação na medicina humana. A Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ) da UNESP de Botucatu foi contemplada com um novo equipamento do tipo acelerador linear, o qual será instalado no setor de radiologia veterinária. Este trabalho apresenta os protocolos clínicos específicos para a radioterapia veterinária usados em alguns dos centros atualmente em funcionamento. Foram desenvolvidos acessórios para imobilização de pequenos animais, visando o posicionamento durante o planejamento tomográfico e a reprodutibilidade dos procedimentos de radioterapia. Para a produção foi utilizado acrílico liso, madeira do tipo Medium Density Fiberboard (MDF), silicone de condensação (Speedex putty) e um catalizador universal (Speedex). Os acessórios produzidos foram a rampa de MDF, as cunhas de posicionamento e o suporte para o molde dentário, os quais, após testados em um animal durante a simulação, demostrou ser eficaz na utilização em pequenos animais e nos procedimentos radioterápicos. / Radiation therapy is a medical modality that uses sources of ionizing radiation for the treatment of diseases, and is already a medical procedure well established in human medicine, however, in Brazil, the use of this technique in veterinary medicine is still in its incipient, with only studies in scientific research level and few groups of specialists dedicated to this type of work. Veterinary radiotherapy centers already exist in other countries like USA, France, Canada, England, and even in Argentina. The results presented in these clinics are very incentive and promising. Many of the studies developed in veterinary radiation and enhancers are derived implementation in human medicine. The Scholl of Veterinary Medicine and Animal Science (FMVZ) of UNESP in Botucatu is funding a new linear accelerator will be installed in the veterinary radiology sector. However, it is necessary to establish specific clinical protocols, in addition to produce a routine guide procedures and techniques that are appropriate to the reality of the veterinary clinic. The success of radiation therapy depends on several factors, among which, the daily reliability of the planned treatment field, which requires immobilization of the target volume irradiation. In this respect, due to the peculiarities of handling routine veterinary patients, most procedures should be monitored anesthesia of the animal. To minimize this fact, methods and immobilization accessories were developed in this work for the application in different types of animals undergoing radiotherapy. / CAPES: 90400003

Orientador: / Coorientador: / Banca: / Resumo: Introdução: Durante o envelhecimento, a perda de massa muscular (sarcopenia) é inevitável e contribui para a elevada morbidade e mortalidade; assim, evitar a sarcopenia é importante para manutenção da saúde e qualidade de vida a longo prazo. Além disso, o treinamento físico tem sido demonstrado ser importante para o controle de massa muscular durante o envelhecimento através da ativação de várias vias incluindo, IGF1-AKT e PGC-1α. Além disso, foi demonstrado que LRP130, um componente do complexo do PGC-1α é importante para a transcrição dependente de vários genes mitocondriais in vivo. Portanto, nós hipotetizamos que o treinamento físico pode melhorar a recuperação muscular, possivelmente através do complexo PGC-1α/LRP130 por inibição do sistema ubiquitina-proteassoma após atrofia induzida por desuso em ratos idosos. Portanto, foi investigado os efeitos do processo de regeneração muscular após curto período de imobilização seguido de 3 ou 7 dias de recuperação utilizando treinamento aeróbio (AT) ou treinamento resistido (TR). Métodos: Após 7 dias de imobilização, os animais foram submetidos ao processo de recuperação muscular com exercício (AT ou RT) ou sem exercício (R) durante 3 ou 7 dias. No final do experimento, os animais foram sacrificados, e o músculo plantar (PL) foi removido para análises morfológicas (avaliação da atividade mATPase, para avaliar a área de secção transversal das fibras musculares (CSA), bem como a frequência dos tipos de fibras específicas), análises bioquímicas (isoformas da cadeia pesada de miosina, MyHC), expressão gênica de 44 marcadores moleculares de massa muscular (RT-qPCR). Para entender melhor a relevância biológica das interações de mRNA, foi realizada uma análise de rede que estão relacionados com o nosso conjunto de genes diferencialmente expressos (plugin GeneMANIA Cytoscape). Os genes diferencialmente expressos foram submetidos à análise... / Abstract: Background: During aging, loss of muscle mass (sarcopenia) is inevitable and contributes to increased morbidity and mortality; thus, the maintenance of skeletal muscle mass is critical for long-term health and quality of life. In addition, physical training has been shown to be important to the control of muscle mass during aging through the activation of several pathways including, IGF1-AKT and PGC-1α. Also, it was demonstrated that LRP130, a component of the PGC-1α complex is important for the PGC-1α- dependent transcription of several mitochondrial genes in vivo. Therefore, we hypothesized that the physical training could improve the muscle recovery possibly through of the LRP130/PGC-1α complex by inhibiting the ubiquitin-proteasome system after disuse-induced atrophy in aged rats. We therefore investigated the effects on muscle recovery after short-term immobilization followed by 3 or 7 days of retraining with aerobic training (AT) or resistance training (RT). Methods: After 7 days of immobilization, the animals underwent the re-growth process with exercise (AT or RT) or without exercise (R) for 3 or 7 days. At the end of the experiment, the animals were sacrificed, and the plantaris (PL) muscle was removed for morphological analyses (assessment of mATPase activity, to assess the total muscle fiber cross sectional area (CSA), and the frequency of specific fiber types), biochemical analyses (Myosin Heavy Chain, MyHC), gene expression of 44 molecular markers of muscle mass (RT-qPCR). To further understand the biological relevance of the mRNA interactions, we performed a search for additional genes that are related to our differentially expressed gene set (GeneMANIA Cytoscape plugin). Differentially expressed genes were submitted to Western blotting analysis. Results: At 7 days after an atrophic stimulus, only PL muscles from animals subjected to AT had recovered their normal CSA patterns. The frequency of fiber types and ... / Doutor

Submitted by Milena Dias (milena.dias@ufpe.br) on 2015-03-12T18:12:58Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO RENATA VIEIRA1.pdf: 999593 bytes, checksum: 7a8f3c528bbbb2faff8a133b10f0e1a7 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-12T18:12:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO RENATA VIEIRA1.pdf: 999593 bytes, checksum: 7a8f3c528bbbb2faff8a133b10f0e1a7 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013 / CAPES / Antitrombina (AT) é uma serpina que está envolvida na regulação da coagulação sanguínea através da inibição de enzimas pró-coagulativas. A heparina é um ativador alostérico da AT que se liga a ela e causa uma mudança conformacional no sítio reativo, o que faz aumentar sua ação anticoagulante. Sendo assim, a fim de obter AT purificada através de separação por afinidade, este trabalho propôs imobilizar heparina utilizando a sua propriedade de se ligar à AT. O suporte para imobilização foram as membranas nanoporosas de óxido de alumínio anódico (AAO), adquiridas da Whatman®. Estas foram tratadas com solução de permanganato de potássio a 0,1 M, 50 ºC por 12 horas e revestidas com polianilina (PANI) a 0,5 M por 2 horas. Posteriormente, uma solução de heparina de 3 mg/mL foi imobilizada ao suporte por 12 horas a 25 ºC e então foi determinada a quantidade de heparina fixada à membrana. O suporte foi incubado com plasma humano por 1 hora à 4 ºC. A remoção das proteínas ligadas ao suporte foi realizada mediante aumento da força iônica, utilizando soluções de NaCl 0,5 M, 1,0 M, 1,5 M e 2,0 M tipo stepwise. Em seguida, os eluatos foram submetidos à eletroforese (SDS-PAGE), segundo metodologia de Laemmli (1970). O percentual da quantidade de heparina imobilizada foi 53,04 % do total ofertado. O tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPa) e a dosagem da atividade da antitrombina constataram a presença de antitrombina nos eluatos, a qual começa a dissociar da membrana após concentração de sal de 1,5 M. A presença de AT complexada à membrana foi confirmado pela eletroforese. Os resultados obtidos neste estudo sugerem que este novo modelo de imobilização de heparina pode ser aplicado nas áreas de purificação de proteínas e biomateriais.

Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-04-17T15:27:34Z No. of bitstreams: 2 TESE Mariana Cabrera.pdf: 5580819 bytes, checksum: 0dc4140c6f92f1a1ba8fa8392c66b340 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-17T15:27:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE Mariana Cabrera.pdf: 5580819 bytes, checksum: 0dc4140c6f92f1a1ba8fa8392c66b340 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-02-15 / CAPES; CNPq / O uso de enzimas imobilizadas em aplicações industriais permite o desenvolvimento de processos de produção com alta produtividade, fácil separação do produto e reutilização do biocatalisador. Alguns grupos de enzimas apresentam muitas vantagens quando imobilizadas em suportes insolúveis em água, devido à melhoria de suas propriedades catalíticas e estabilidade ou pela síntese de baixo custo. Tendo em vista tais vantagens, enzimas de aplicabilidade industrial como α-Lramnosidase e invertase foram imobilizadas em diferentes suportes magnéticos. A α-L-ramnosidase de Aspergillus terreus foi imobilizada covalentemente nos seguintes suportes ferromagnéticos: polietileno tereftalato (Dacron-hidrazida), polisiloxano/álcool polivinílico (POS/PVA) e quitosana. A atividade da enzima imobilizada em Dacron-hidrazida (0,53 nkat/g de proteína) e POS/PVA (0,59 nkat/g de proteína) foi significativamente maior do que a encontrada para o derivado de quitosana (0,06 nkat/mg de proteína). Os perfis de pH e temperatura para todas as enzimas imobilizadas não mostraram diferença em relação à enzima livre, exceto o derivado de quitosana que apresentou maior temperatura máxima. O derivado enzimático Dacron-hidrazida mostrou melhor desempenho que a enzima livre para hidrolisar a naringina 0,3% (91% e 73% após 1 h, respectivamente) e na síntese de ramnósidos (0,116 e 0,014 mg narirutina após 1 h, respectivamente). Além disso, minerais como argilas e terra de diatomáceas foram utilizados para produzir compósitos com partículas de magnetita. Esses compósitos foram caracterizados por meio de diferentes técnicas físico-químicas a fim de elucidar suas propriedades estruturais, morfológicas e magnéticas. Três tipos de materiais foram sintetizados: argila montmorilonita magnética (mMMT), terra de diatomáceas magnética (mTD) e terra de diatomáceas magnética revestida com polianilina (mTD-PANI). Os compósitos magnéticos foram tratados com 3- aminopropiltrietoxisilano ou polianilina, disponibilizando grupamentos químicos para ocorrência de ligação covalente entre a matriz e a biomolécula. Após funcionalização dos suportes e ativação com glutaraldeído, os materiais foram utilizados como matriz para imobilização covalente de invertase. A invertase imobilizada em mMMT apresentou igual pH ótimo, maior temperatura máxima e estabilidade térmica quando comparada com a enzima livre, e manteve 91% da sua atividade inicial após 7 ciclos consecutivos de reutilização. No estudo da hidrólise de sacarose pela mTD-invertase, foi realizado um planejamento fatorial completo 24, sendo observadas como melhores condições experimentais para este processo: pH 4,5; temperatura de 45°C; concentração de sacarose 0,25 M e concentração de invertase 0,05 mg mL-1. A mTD-invertase mostrou bom desempenho quanto à termoestabilidade, estabilidade de armazenamento, tempo de prateleira e reuso quando comparada à enzima livre. A mTD-PANI-invertase apresentou igual pH ótimo e temperatura máxima e maior termoestabilidade que a enzima livre, e manteve 55% da sua atividade inicial após 10 ciclos consecutivos de reutilização. Portanto, os resultados mostraram que os compósitos magnéticos produzidos a partir de materiais orgânicos e inorgânicos (minerais de baixo custo e altamente disponíveis na natureza) são matrizes promissoras para a imobilização covalente de α-L-ramnosidase e invertase, bem como para a imobilização de outras biomoléculas.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:50:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1542_1.pdf: 2141227 bytes, checksum: 88cfe6fc5518f1ac8f94e30f84348dd6 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Lectinas são proteínas ou glicoproteínas de origem não imune cuja ligação reversível e específica a carboidratos resulta em aglutinação celular. Estas proteínas, presentes em bactérias, invertebrados, vertebrados e plantas são detectadas por ensaio de hemaglutinação. Crataeva tapia L. pertence à família das Capparaceae. Uma lectina de entrecasca de C. tapia, CrataBL, foi purificada à homogeneidade através de fracionamento com sulfato de amônio (Fração 30-60%), seguida por cromatografia de troca iônica (CMCelulose). CrataBL aglutinou eritrócitos de humanos, galinha e coelho (atividade hemaglutinante específica, AHE, 102) e principalmente inibida por glicoproteínas. CrataBL foi termoestável e tratamento com EDTA não afetou a atividade hemaglutinante (AH); atividade não foi alterada após adição de Ca2+, Mn2+, Mg2+ e após tratamento com as enzimas proteolíticas tripsina e quimiotripsina sua AH manteve-se estável. CrataBL migrou como uma única banda após eletroforese para proteínas nativas básicas e duas bandas polipeptídicas de massas moleculares 21.000 e 40.000 Da após SDS-PAGE com ou sem agente redutor; os polipeptídeos foram também detectados usando reagente para glicoproteína e sua porção carboidrato foi estimada em 12,8%. A natureza glicoprotéica de CrataBL foi também revelada por sua interação com lectina glicose/manose em gel de agarose. A massa molecular da lectina por cromatografia de filtração em gel foi de 40.000 Da. CrataBL imobilizada em Sepharose CL-4B adsorveu bioseletivamente caseína, fetuína, ovoalbumina e isolou glicoproteínas de plasma sanguíneo humano. O efeito da lectina na coagulação sanguínea foi avaliado através do tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA), tempo de protrombina (TP) e tempo de trombina (TT). CrataBL apresentou atividade anticoagulante somente na via intrínseca, onde o TTPA apresentou-se prolongado (dose-dependente) a partir de uma concentração de 1,25 μg da lectina. CrataBL apresentou toxicidade para Artemia salina com LC50 de 71,7 μg/mL. A atividade antitumoral de CrataBL (20 mg/kg) foi avaliada utilizando Sarcoma 180 implantado em camundongos albinos Swiss (Mus muscullus) e foi detectada por redução do peso do tumor de 50,7%. A atividade antiinflamatória de CrataBL foi avaliada pelo modelo de edema de pata induzido por carragenina e a lectina apresentou efeito antiinflamatório significativo evidenciado pela redução (35,4%) do número de neutrófilos no exsudato inflamatório. CrataBL também apresentou atividade analgésica reduzindo em 34,8% o número de contorções induzidas por ácido acético

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4512_1.pdf: 781065 bytes, checksum: 07bb5117ff57e9a922275cc7a36fa617 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Este estudo teve como objetivo produzir metabólitos de Canoparmelia texana (Tuck.) Elix & Hale a partir da imobilização de células e fragmentos do talo in natura, através do uso de biorreatores com sistema fixo (tradicional), em movimento, e sob fluxo contínuo. Células extraídas de C. texana, ou fragmentos do talo foram imobilizados, separadamente, em biorreatores utilizando a caulinita como matriz de enclausuramento e acetato de sódio a 0,1, 1,0 e 10,0 mM, como precursor biossintético das substâncias típicas da espécie. Alíquotas retiradas, a diferentes intervalos de tempo, foram extraídas com éter/acetato de etila (65:35,v/v) e clorofórmio/acetonitrila (60:40, v/v), e mensuradas em espectrofotômetro a 254 e 366 nm. Os extratos, após evaporados, foram avaliados por cromatografia em camada delgada (CCD). As leituras espectrofotométricas dos extratos orgânicos revelaram a síntese de substâncias, pelas células e fragmentos do talo imobilizados, em todos os sistemas de imobilização e, em todas as concentrações do precursor. Houve predominância quantitativa das substâncias bioproduzidas pela imobilização dos fragmentos do talo no sistema em movimento. Estes e as células de C. texana, imobilizados nos diferentes sistemas, bioproduziram as mesmas substâncias contidas no talo in natura, indicando, além da adaptação da espécie em estudo ao processo de imobilização celular, uma promissora estratégia biotecnológica de produção de atranorina e ácido divaricático, duas substâncias com inúmeras aplicações biológicas

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5020_1.pdf: 1527733 bytes, checksum: c4a27a4c47abc632b72b7a59590fff40 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2003 / Os mixomicetos produzem substâncias com o potencial de inibir microrganismos patógenos ao homem, como evidenciado por estudos in vitro. Estes estudos são, porém, limitados pela dificuldade em se obter material suficiente para experimentos laboratoriais. Visando contribuir para um maior conhecimento sobre o potencial biotecnológico dos mixomicetos, principalmente no que se refere à produção e identificação de substâncias bioativas, desenvolveu-se uma técnica de imobilização plasmodial, com o objetivo de produzir substâncias em quantidade que permita a realização de testes químicos e biológicos. Physarella oblonga foi selecionada para este trabalho por ser uma espécie pouco estudada do ponto de vista químico e biológico, e freqüentemente encontrada em áreas de Floresta Atlântica de Pernambuco, Brasil. Fragmentos plasmodiais, dispersos em meio de cultura líquido, foram mantidos em um biorreator, utilizando-se caulinita como matriz de enclausuramento e acetato de sódio como precursor metabólico. Eluatos plasmodiais foram coletados periodicamente e extraídos com éter/acetato de etila (65:35 v/v) e clorofórmio/acetonitrila (60:40 v/v). Os extratos orgânicos foram submetidos à leitura espectrofotométrica em 266 nm e 310 nm e à cromatografia em camada delgada, para avaliar a produção de substâncias. Testes de difusão em meio sólido foram utilizados para detectar a atividade antimicrobiana dos extratos contra bactérias Gram positivas, Gram negativas, álcool-ácido resistentes e leveduras. As substâncias bioproduzidas foram isoladas por cromatografia em sephadex LH-20 e avaliadas através de cromatografia líquida de alta eficiência e de reações de coloração com reagentes específicos, em cromatografia de camada delgada. A técnica introduzida permite que o plasmódio de P. oblonga se mantenha metabolicamente ativo quando imobilizado em caulinita, uma vezque a produção final de substâncias foi superior ao peso inicial do plasmódio imobilizado. P. oblonga tem a capacidade de produzir substâncias com atividade antimicrobiana e o processo de imobilização não altera esta capacidade; as substâncias bioproduzidas atuaram inibindo o desenvolvimento de colônias de Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa e Mycobacterium smegmatis. Notável inibição foi observada também frente às leveduras Candida albicans e Candida tropicalis. Após um ano de cultivo em câmara-úmida, o plasmódio de P. oblonga perdeu a capacidade de inibir estes mesmos microrganismos, provavelmente em conseqüência da diminuição na competição com outros organismos de seu ambiente natural. Duas frações com atividade antimicrobiana foram isoladas a partir do extrato plasmodial de P. oblonga, no qual foram detectadas substâncias pertencentes aos grupos de compostos fenólicos e esteróides

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5049_1.pdf: 474256 bytes, checksum: 37317599cafeb878be1bf92f59e6079d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2003 / Lipase comercial de Mucor miehei foi imobilizada em diferentes suportes, nylon, nylon-álcool polivinílico (nylon-PVA) e partículas de polisiloxano-álcool polivinílico magnetizadas (POS-PVA) e testados em relação à atividade hidrolítica. O sistema imobilizado que apresentou maior estabilidade operacional, no caso, lipase-POS-PVA foi caracterizado em relação aos parâmetros Km e Vmax aparentes, temperatura ótima e pH ótimo, usando ρ- nitrofenil palmitato como substrato. A lipase imobilizada em POS-PVA apresentou um Km aparente de 228,3μM e Vmax aparente de 36,06μmol.min-1 por miligrama de proteína, a 30oC e pH 8,0. A temperatura ótima e o pH ótimo foram respectivamente 45oC e pH = 8,0. Houve uma retenção de 69,1% de atividade após a imobilização, que permitiu o uso da enzima por um total de sete ensaios. Lipase-POS-PVA também foi empregada na síntese de ésteres. Os efeitos da razão molar ácido/álcool, da concentração de enzima imobilizada, do tamanho da cadeia carbônica dos reagentes e da estrutura do álcool sobre a formação de produto foram determinados. A síntese de butirato de butila foi maximizada para substratos contendo ácido orgânico em excesso e uma concentração de biocatalisador de 25mg/mL. A seletividade do biocatalisador em relação ao tamanho da cadeia carbônica foi diferente considerando ácidos orgânicos e álcoois. A maior concentração de produto foi obtida com ácidos orgânicos com oito e dez carbonos, enquanto que o aumento no tamanho da cadeia carbônica do álcool, de quatro para oito carbonos, provocou uma redução na síntese. O maior rendimento foi determinado para a síntese de caprilato de butila (12 carbonos). A síntese também foi influenciada pela estrutura do álcool, com a atividade máxima ocorrendo para álcool primário